一種南天竹甙的提取方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及的是天然產物提取的技術領域，尤其涉及的是一種南天竹甙的提取方法。
【背景技術】
[0002]甙是由糖或糖衍生物的端基碳原子與另一類非糖物質連接形成的化合物。根據結構不同，可分很多類型，不同的甙類物質由于物理性質差異大，其提取方式有的醇提，有的酸提或堿提，但提取的純度很低，且需要另外純化。
[0003]南天竹，別名:南天竺，蘭竹；屬毛茛目、小檗科下植物，是我國各地常見的木本花卉種類。其植株優美，果實鮮艷，對環境適應性強，可以大面積種植，常常出現在園林應用中。
[0004]南天竹除了含有南天竹堿外，還含有南天竹甙。根據南天竹甙結構又分為南天竹甙A、南天竹甙B。南天竹甙對福氏痢疾桿菌、傷寒桿菌、綠膿桿菌、大腸桿菌等有很強的抑制作用，是很好的天然抗炎藥物。
【發明內容】
[0005]本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供了一種南天竹甙的提取方法，以提供一種提取效率高、純度高的新的南天竹甙提取方法。
[0006]本發明是通過以下技術方案實現的:
[0007]—種南天竹甙的提取方法，包括以下步驟:
[0008](1)取新鮮南天竹葉，陰干后粉碎，獲得南天竹葉粉末；
[0009](2)在步驟⑴的粉末中加入體積比為30%的乙醇溶液進行提取，獲得提取液，將提取液置于低溫中冷藏；
[0010](3)在步驟⑵的提取液中加入氯仿進行萃取，然后去除氯仿層，將水層溶液置于0°C冷藏24h后，去除上層4/5體積的液體，剩余液體在0°C下，2000r/min離心，獲得白色沉淀；
[0011](4)將步驟(3)的白色沉淀干燥，即為所述南天竹甙成品。
[0012]所述步驟(1)中，南天竹葉的粉碎粒度為5-10目。
[0013]所述步驟⑵中，每lg粉末中依次加入15ml、10ml、5ml的乙醇溶液進行攪拌提取3次，每次提取后獲得的提取液立即置于低溫環境中冷藏，最后將3次的提取液合并；以保證提取盡量完全并減少提取液體積。
[0014]所述步驟(2)中，攪拌的轉速為120r/min。
[0015]所述步驟⑵中，低溫冷藏的溫度為4°C。
[0016]所述步驟⑶中，提取液:氯仿=2:1(體積比)。
[0017]所述步驟(3)中，用氯仿萃取至少2次。
[0018]所述步驟(4)中，干燥的方法為真空干燥。
[0019]所述步驟(2) - (4)中，操作溫度為15-30°C，每次提取和萃取的時間均控制在lh以內。
[0020]本發明相比現有技術具有以下優點:本發明提供了一種南天竹甙的提取方法，該方法能夠提取獲得南天竹甙，得率高、純度可達90%以上，提取過程簡單、時間短、成本低廉。
【附圖說明】
[0021]圖1為不同濃度的乙醇溶液提取結果圖；
[0022]圖2為不同操作溫度下的提取結果圖。
【具體實施方式】
[0023]下面對本發明的實施例作詳細說明，本實施例在以本發明技術方案為前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和具體的操作過程，但本發明的保護范圍不限于下述的實施例。
[0024]實施例1
[0025]本實施例提供的一種南天竹甙的提取方法，包括以下步驟:
[0026](1)取新鮮南天竹葉，室溫陰干后粉碎至5-10目，獲得南天竹葉粉末；南天竹甙對溶劑的極性很敏感，為了尋找最佳極性濃度，本實施例中，將南天竹葉粉末分成6組，進行下述提取步驟:
[0027](2)室溫下，分別用體積比為20 %、25 %、30 %、35 %、40 %、45 %的乙醇溶液進行攪拌提取，攪拌轉速為120r/min，重復提取3次；3次提取中，每lg粉末中加入的乙醇溶液的量依次為15ml、10ml、5ml，以保證提取盡量完全并減少提取液體積；每次提取時間不超過lh，每次提取后，將獲得的提取液立即置于4°C環境中冷藏，最后分別將每組的3次的提取液合并；
[0028](3)將步驟⑵的6組合并的提取液按照提取液:氯仿=2:1(體積比)分別加入氯仿，室溫萃取2次，每次萃取時間不超過lh ;然后去除氯仿層，將水層溶液置于0°C冷藏24h后，虹吸法去除上層4/5體積的液體，剩余液體在0°C下，2000r/min離心，獲得白色沉淀；氯仿可萃取脂類和乙醇，使溶液的極性發生變化，再放入0°C中，即有沉淀析出，而且純度較高；
[0029](4)將步驟(3)的白色沉淀進行真空干燥，獲得成品。
[0030]對上述獲得的6組成品進行定性檢測，具體為:
[0031]將成品與鎂離子反應，反應液呈橙色；
[0032]將成品與新鮮的三氯化鐵反應，反應液呈棕綠色；
[0033]將成品與新鮮溴水反應，反應液出現沉淀；
[0034]測定成品的水溶液的吸收光譜，結果發現，成品在247nm處具有最大吸收峰；
[0035]從定性結果可以看出，本實施例提取獲得的6組白色沉淀與南天竹甙的化學性質一致，說明本發明可成功獲得南天竹甙產品。
[0036]計算南天竹甙的得率:得率=成品質量/南天竹葉粉末質量X 100% ;結果如圖1所示，圖1中可以看出，30%為最佳溶解極性。
[0037]實施例2
[0038]本實施例提供的一種南天竹甙的提取方法，包括以下步驟:
[0039](1)取新鮮南天竹葉，室溫陰干后粉碎至5-10目，獲得南天竹葉粉末；南天竹甙對溫度很敏感，為尋找最佳提取溫度，本實施例將南天竹葉粉末分成9組，分別在0°C、5°C、10°C、15°C、20°C、25°C、30°C、35°C、40°C溫度下進行下述操作；
[0040](2)每lg南天竹葉粉末中依次加入15ml、10ml、5ml的體積比為30%的乙醇溶液，在120r/min轉速下進行攪拌提取3次，每次提取時間不超過lh，每次提取后，將獲得的提取液立即置于4°C環境中冷藏(0°C和5°C組中，直接取出即可)；最后合并3次的提取液；
[0041](3)將步驟(2)的合并的提取液按照提取液:氯仿=2:1(體積比)加入氯仿，萃取2次，每次萃取時間不超過lh ;然后去除氯仿層，將水層溶液置于0°C冷藏24h后，虹吸法去除上層4/5體積的液體，剩余液體在0°C下，2000r/min離心，獲得白色沉淀；
[0042](4)將步驟(3)的白色沉淀進行真空干燥，獲得成品。
[0043]計算南天竹甙得率，結果如圖2所示，圖中可看出，溫度越高，得率越高，當提取溫度在15°C以上時，得率增長趨于平穩。但是，由于南天竹甙在水溶液中易分解不穩定，30°C以上雖然對提取得率的影響不大，但分解速度加快(45°C后，分解明顯加快，為最高提取溫度)，因此，南天竹堿提取的最佳溫度范圍為15-30°C。
[0044]對上述25°C下獲得的成品進行定量檢測，具體為:
[0045]利用高效液相色譜法進行檢測:高效液相色譜法的檢測條件為:配置樣品溶液濃度為0.05mg/ml，紫外波長247nm，柱溫35°C，進樣量10 μ 1，固定相為C18柱，柱徑4.6mm，長度150mm，流動相為水-甲醇(1:1，v/v)，流速1.0ml/min，進樣前過濾。
[0046]檢測結果為:成品中南天竹甙的純度為91%，說明本發明的南天竹甙的提取方法的提取純度高。
【主權項】
1.一種南天竹甙的提取方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)取新鮮南天竹葉，陰干后粉碎，獲得南天竹葉粉末； (2)在步驟(1)的粉末中加入體積比為30%的乙醇溶液進行提取，獲得提取液，將提取液置于低溫中冷藏； (3)在步驟(2)的提取液中加入氯仿進行萃取，然后去除氯仿層，將水層溶液置于0°C冷藏24h后，去除上層4/5體積的液體，剩余液體在0°C下，2000r/min離心，獲得白色沉淀； (4)將步驟(3)的白色沉淀干燥，即為所述南天竹甙成品。2.根據權利要求1所述的一種南天竹甙的提取方法，其特征在于，所述步驟(1)中，南天竹葉的粉碎粒度為5-10目。3.根據權利要求1所述的一種南天竹甙的提取方法，其特征在于，所述步驟(2)中，每lg粉末中依次加入15ml、10ml、5ml的乙醇溶液進行攪拌提取3次，每次提取后獲得的提取液立即置于低溫環境中冷藏，最后將3次的提取液合并。4.根據權利要求3所述的一種南天竹甙的提取方法，其特征在于，所述步驟(2)中，攪拌的轉速為120r/min。5.根據權利要求1所述的一種南天竹甙的提取方法，其特征在于，所述步驟(2)中，低溫冷藏的溫度為4°C。6.根據權利要求1所述的一種南天竹甙的提取方法，其特征在于，所述步驟(3)中，提取液:氯仿=2:1(體積比)。7.根據權利要求1所述的一種南天竹甙的提取方法，其特征在于，所述步驟(3)中，用氯仿萃取至少2次。8.根據權利要求1所述的一種南天竹甙的提取方法，其特征在于，所述步驟(4)中，干燥的方法為真空干燥。9.根據權利要求1所述的一種南天竹甙的提取方法，其特征在于，所述步驟(2)-(4)中，操作溫度為15-30°C，每次提取和萃取的時間均控制在lh以內。
【專利摘要】本發明公開了一種南天竹甙的提取方法，步驟包括：(1)取新鮮南天竹葉進行粉碎；(2)用體積比為30％的乙醇溶液進行提取，獲得提取液；(3)加入氯仿進行萃取，去除氯仿層，將水層溶液置于0℃冷藏24h后，去除上層4/5體積的液體，剩余液體在0℃下，2000r/min離心，獲得白色沉淀；(4)將白色沉淀干燥，獲得所述南天竹甙；本發明提供的南天竹甙的提取方法提取的南天竹甙得率高、純度可達90％以上，提取過程簡單、時間短、成本低廉。
【IPC分類】C07H1/08, B01D11/02, C07H15/203
【公開號】CN105399785
【申請號】CN201510768265
【發明人】孫鋒, 何孔泉, 阮飛
【申請人】安徽農業大學
【公開日】2016年3月16日
【申請日】2015年11月5日