一種硫酸軟骨素提取工藝的制作方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及生物醫藥領域，特別涉及一種硫酸軟骨素提取工藝。具體涉及一種采用堿鹽二次浸提法提取硫酸軟骨素的工藝。
【背景技術】
[0002]硫酸軟骨素是自哺乳動物氣管等軟骨提取而得的酸性黏多糖，白色粉末，無臭，無味，易吸濕，易溶于水，不溶于乙醇和丙酮等有機溶劑，遇水即膨脹或成黏漿，對熱較不穩定。硫酸軟骨素是糖胺聚糖的一種，由D-葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖以β -1，4-糖苷鍵連接而成的重復二糖單位組成的多糖，并在Ν-乙酰氨基半乳糖的C-4位或C-6位羥基上發生硫酸酯化。硫酸軟骨素是軟骨素的硫酸酯，構成結締組織的主要成分，它具有澄清脂質，提高機體解毒功能，利尿和鎮痛等作用。對膠原性疾患十分有效，對由鏈霉素引起的聽覺障礙也有效果。酸性黏多糖是生物體內結締組織基質中特有成分之一，硫酸軟骨素Α為酸性黏多糖之一種。醫療上用于冠心病防治。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是提供一種硫酸軟骨素提取工藝，該工藝采用堿鹽二次浸提法提取硫酸軟骨素。
[0004]如上構思，本發明的技術方案是:一種硫酸軟骨素提取工藝，依照下列步驟進行:
[0005]①對軟骨進行預處理，烘干:
[0006]②浸提:稱取軟骨碎末，加入軟骨重量2.5?3倍的15 %?20 %的NaCl溶液進行浸提，調節pH值至12?13，加熱至35?40°C并攪拌，恒溫提取10?12h，此過程中實時校正保持pH為12?13 ；
[0007]③二次浸提:用雙層紗布過濾，濾液待用，濾渣再在相同條件下提取一次，用四層紗布過濾，棄濾渣，合并兩次濾液；
[0008]④鹽解:調節濾液pH為7?8，并且通過升溫、恒溫和降溫的溫度調節過程得鹽解液；
[0009]⑤除雜:將鹽解液經離心后取上清液，上清液再經稀釋、加入乙醇攪拌均勻、靜置后，虹吸除去上清液，沉淀物再過濾除去沉淀，所得上清液再用乙醇沉淀，所得到的沉淀物即為硫酸軟骨素粗品；
[0010]⑥提純:將所得硫酸軟骨素粗品經過脫水、脫脂后，將沉淀物放入烘箱中直接烘干得硫酸軟骨素成品。
[0011]上述步驟①將預處理后的軟骨在50?60°C溫度下烘干。
[0012]上述步驟④濾液用1.5mol/LHCl調節pH。
[0013]上述步驟④溫度調節過程是:將濾液升溫至80?90°C，恒溫15-20min后，3-5min
內降溫至室溫。
[0014]上述步驟⑤的具體過程是:將鹽解液靜置1.5?2h后，以2500?3000r/min離心3?5min,棄沉淀，留取上清液，用1?1.5倍的去離子水稀釋,稀釋液中加入90?95%的乙醇，攪拌均勻，靜置10?12h，虹吸除去上清液，沉淀物再用1?1.5%的NaCl溶液溶解，再離心，過濾除去沉淀，所得上清液再用90?95%的乙醇沉淀，所得到的沉淀物即為硫酸軟骨素粗品；
[0015]上述步驟⑥的具體過程是:將所得硫酸軟骨素粗品用脫水劑浸泡3?5min脫水一次，脫脂劑浸泡8?lOmin脫脂一次，將沉淀物放入55?60°C的烘箱中直接烘干得成品。
[0016]上述脫水劑采用丙酮。
[0017]上述脫脂劑采用乙醚。
[0018]本發明的優點在于:原料簡單、產品得率較高、成本較低，適用于工業化、規模化生產。
【具體實施方式】
[0019]下面結合實施例對本發明做進一步說明:
[0020]實施例1:一種硫酸軟骨素提取工藝，依照下列步驟進行:
[0021]1、預處理:去除軟骨上殘留的肌肉、脂肪和其它結締組織，用自來水沖洗干凈，在電動絞肉機上將其絞碎，然后放入烘箱中，55°C烘干；
[0022]2、浸提:稱取軟骨碎末，加入與軟骨重量2.8倍的18%的NaCl溶液進行浸提，用8% NaOH調節pH值至12。加熱至35°C，用電動攪拌機不斷攪拌，恒溫提取10h，此過程中實時校正保持pH為12 ;
[0023]3、二次浸提:用雙層紗布過濾，濾液待用。濾渣再在相同條件下提取一次，用四層紗布過濾，棄濾渣，合并兩次濾液；
[0024]4、鹽解:濾液用1.5mol/LHCl調節pH為7，然后迅速升溫至85°C，恒溫20min后，3min內降溫至室溫，得鹽解液；
[0025]5、除雜:將鹽解液靜置1.5h后，以2500r/min離心3min，棄沉淀，留取上清液，用1倍的去離子水稀釋。稀釋液中加入90%的乙醇，攪拌均勻，靜置llh，虹吸除去上清液。沉淀物再用1.2%的NaCl溶液溶解，再離心，過濾除去沉淀，所得上清液再用92%的乙醇沉淀，所得到的沉淀物即為硫酸軟骨素粗品；
[0026]6、提純:所得硫酸軟骨素粗品用丙酮浸泡4min脫水一次，乙醚浸泡9min脫脂一次。將沉淀物放入56 V的烘箱中直接烘干得成品。
[0027]實施例2:—種硫酸軟骨素提取工藝，依照下列步驟進行:
[0028]1、預處理:去除軟骨上殘留的肌肉、脂肪和其它結締組織，用自來水沖洗干凈，在電動絞肉機上將其絞碎，然后放入烘箱中，60°C烘干；
[0029]2、浸提:稱取軟骨碎末，加入與軟骨重量3倍的20%的NaCl溶液進行浸提，用9%NaOH調節pH值至12.5。加熱至38°C，用電動攪拌機不斷攪拌，恒溫提取11.6h，此過程中實時校正保持pH為12.5 ;
[0030]3、二次浸提:用雙層紗布過濾，濾液待用。濾渣再在相同條件下提取一次，用四層紗布過濾，棄濾渣，合并兩次濾液；
[0031]4、鹽解:濾液用1.7mol/LHCl調節pH為7.8。迅速升溫至88°C，恒溫20min后，3.5min內降溫至室溫，得鹽解液；
[0032]5、除雜:將鹽解液靜置16h后，以2800r/min離心4min，棄沉淀，留取上清液，用1.2倍的去離子水稀釋。稀釋液中加入93%的乙醇，攪拌均勻，靜置10.2h，虹吸除去上清液。沉淀物再用1.2%的NaCl溶液溶解，再離心，過濾除去沉淀，所得上清液再用93%的乙醇沉淀，所得到的沉淀物即為硫酸軟骨素粗品；
[0033]6、提純:所得硫酸軟骨素粗品用丙酮浸泡3.6min脫水一次，乙醚浸泡8.7min脫脂一次。將沉淀物放入56 V的烘箱中直接烘干得成品。
【主權項】
1.一種硫酸軟骨素提取工藝，其特征在于:依照下列步驟進行: ①對軟骨進行預處理，烘干: ②浸提:稱取軟骨碎末，加入軟骨重量2.5?3倍的15%?20%的NaCl溶液進行浸提，調節pH值至12?13，加熱至35?40°C并攪拌，恒溫提取10?12h，此過程中實時校正保持pH為12?13 ; ③二次浸提:用雙層紗布過濾，濾液待用，濾渣再在相同條件下提取一次，用四層紗布過濾，棄濾渣，合并兩次濾液； ④鹽解:調節濾液pH為7?8，并且通過升溫、恒溫和降溫的溫度調節過程得鹽解液； ⑤除雜:將鹽解液經離心后取上清液，上清液再經稀釋、加入乙醇攪拌均勻、靜置后，虹吸除去上清液，沉淀物再過濾除去沉淀，所得上清液再用乙醇沉淀，所得到的沉淀物即為硫酸軟骨素粗品； ⑥提純:將所得硫酸軟骨素粗品經過脫水、脫脂后，將沉淀物放入烘箱中直接烘干得硫酸軟骨素成品。2.根據權利要求1所述的一種硫酸軟骨素提取工藝，其特征在于:上述步驟①將預處理后的軟骨在50?60°C溫度下烘干。3.根據權利要求1所述的一種硫酸軟骨素提取工藝，其特征在于:上述步驟④濾液用1.5mol/LHCl 調節 pH。4.根據權利要求1所述的一種硫酸軟骨素提取工藝，其特征在于:上述步驟④溫度調節過程是:將濾液升溫至80?90°C,恒溫15-20min后,3_5min內降溫至室溫。5.根據權利要求1所述的一種硫酸軟骨素提取工藝，其特征在于:上述步驟⑤的具體過程是:將鹽解液靜置1.5?2h后，以2500?3000r/min離心3?5min，棄沉淀，留取上清液，用1?1.5倍的去離子水稀釋，稀釋液中加入90?95%的乙醇，攪拌均勻，靜置10?12h，虹吸除去上清液，沉淀物再用1?1.5%的NaCl溶液溶解，再離心，過濾除去沉淀，所得上清液再用90?95%的乙醇沉淀，所得到的沉淀物即為硫酸軟骨素粗品。6.根據權利要求1所述的一種硫酸軟骨素提取工藝，其特征在于:上述步驟⑥的具體過程是:將所得硫酸軟骨素粗品用脫水劑浸泡3?5min脫水一次，脫脂劑浸泡8?lOmin脫脂一次，將沉淀物放入55?60°C的烘箱中直接烘干得成品。7.根據權利要求6所述的一種硫酸軟骨素提取工藝，其特征在于:上述脫水劑采用丙酮。8.根據權利要求6所述的一種硫酸軟骨素提取工藝，其特征在于:上述脫脂劑采用乙醚。
【專利摘要】一種硫酸軟骨素提取工藝，依照下列步驟進行：①對軟骨進行預處理，烘干：②浸提：稱取軟骨碎末，加入15％～20％的NaCl溶液進行浸提；③二次浸提：用雙層紗布過濾，濾液待用，濾渣再在相同條件下提取一次，用四層紗布過濾，棄濾渣，合并兩次濾液；④鹽解：調節濾液pH為7～8，并且通過升溫、恒溫和降溫的溫度調節過程得鹽解液；⑤除雜：將鹽解液經離心后取上清液，上清液再經稀釋、加入乙醇攪拌均勻、靜置后，虹吸除去上清液，沉淀物再過濾除去沉淀，所得上清液再用乙醇沉淀，所得到的沉淀物即為硫酸軟骨素粗品；⑥提純：將硫酸軟骨素粗品經過脫水、脫脂后，將沉淀物放入烘箱中直接烘干得成品。本發明原料簡單、產品得率較高、成本較低，適用于規模化生產。
【IPC分類】C08B37/08
【公開號】CN105367686
【申請號】CN201410421850
【發明人】龍崢, 于福滿, 符紹輝, 程榆茗
【申請人】天津寶迪農業科技股份有限公司
【公開日】2016年3月2日
【申請日】2014年8月25日