胃蛋白酶切除免疫原性端肽的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于肽處理技術領域。
【背景技術】
[0002]牛皮被經常用于制作膠原蛋白，一般牛皮在制作膠原蛋白前，需經初期處理成均勻成懸浮液，現有常規制作膠原蛋白會直接進行下一步制作，但由于牛皮經過處理后的懸浮液成自然三螺旋形態，其末端的氨基和羧基的存在具有免疫原性，所以在進行牛膠原蛋白制作過程中影響了膠原蛋白的質量。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是提供一種以牛皮為原料制作的懸浮液，通過胃蛋白酶切除末端氨基和羧基的胃蛋白酶切除免疫原性端肽的方法。
[0004]本發明將胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的胃蛋白酶溶液，然后轉入到組織勻漿液至0.lmg/ml，即每10ml勻漿液中加入Iml的胃蛋白酶溶液，混勻，室溫消化7_10天。
[0005]本發明工藝簡單，操作容易，通過本發明的過程，能有效的切除了牛皮組織懸浮液中牛膠原蛋白分子氨基和羧基末端(末端肽)的球狀區域，并保持了膠原蛋白天然的空間螺旋區段結構和生物活性，從而去除了牛膠原蛋白的潛在免疫源性。
【具體實施方式】
[0006]
本發明將胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的醋酸胃蛋白酶溶液，然后轉入到組織勻漿液至0.lmg/ml,即每10ml勻漿中加入Iml的胃蛋白酶溶液，混勻，室溫消化7_10天。
[0007]本發明通過胃蛋白酶的加入將自然三螺旋結構形態的膠原纖維消化成分子量30萬左右的膠原蛋白分子，同時切除膠原蛋白分子的氨基和羧基末端(末端肽)的球狀區域，并保持了膠原蛋白天然的空間螺旋區段結構和生物活性，從而去除了膠原蛋白的潛在免疫源性。
[0008]確保膠原蛋白產品沒有過敏反應等副作用的關鍵點。工藝中讓胃蛋白酶在較低溫度下，長時間(7-10天)對膠原蛋白進行消化，達到了徹底去除膠原分子的氨基和羧基末端端肽。
【主權項】
1.一種胃蛋白酶切除免疫原性端肽的方法，其特征在于:將胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的胃蛋白酶溶液，然后轉入到組織勾楽液至0.lmg/ml,即每10ml勾楽中加入Iml的胃蛋白酶溶液，混勻，室溫消化7-10天。
【專利摘要】一種胃蛋白酶切除免疫原性端肽的方法，屬于肽處理技術領域。本發明的目的是提供一種以牛皮為原料制作的懸浮液，通過胃蛋白酶切除末端氨基和羧基的胃蛋白酶切除免疫原性端肽的方法。本發明將胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的胃蛋白酶溶液，然后轉入到組織勻漿液至0.1mg/ml，即每100ml勻漿液中加入1ml的胃蛋白酶溶液，混勻，室溫消化7-10天<b>。</b>本發明工藝簡單，操作容易，通過本發明的過程，能有效的切除了牛皮組織懸浮液中牛膠原蛋白分子氨基和羧基末端（末端肽）的球狀區域，并保持了膠原蛋白天然的空間螺旋區段結構和生物活性，從而去除了牛膠原蛋白的潛在免疫源性。
【IPC分類】C12P21/06
【公開號】CN105063146
【申請號】CN201510533687
【發明人】楊中萬, 彭天驥, 張鷹, 黃海軍, 田會全, 劉建軍, 孫淑娟, 陳云聲
【申請人】長春博泰醫藥生物技術有限責任公司
【公開日】2015年11月18日
【申請日】2015年8月27日