一種用于提取低次煙葉精油的復合酶及其制備的煙葉精油與應用
【技術領域】
[0001] 本發明設及一種復合酶，更具體地，設及一種用于提取低次煙葉精油的復合酶及 其制備的煙葉精油與應用。
【背景技術】
[0002] 我國是煙草生產大國，其中廢次煙末W及劣質煙葉等占煙葉比重的大部分。廢次 煙末W及劣質煙葉中的纖維素含量高，糖堿等成分較低，含有的蛋白質等大分子物質使低 次煙葉的雜氣多而重，香氣吃味又不足，由于缺乏適當的調制方法，每年都有大量的低次煙 葉被廢棄。因此，在目前卷煙原輔材料價格大幅度上漲的情況下，對廢次煙末W及劣質煙葉 進行處理，提取有效致香成分應用于煙草W及卷煙紙中，不僅能降低生產成本，還可W降低 焦油含量，有利于健康。而且在卷煙紙中添加劣質煙葉提取到的有效致香成分還可W增加 卷煙香氣，為提升煙草品質做出貢獻，因此低次煙葉的合理加工非常重要。
【發明內容】
[0003] 本發明為解決上述現有技術中的問題，提供了一種特別適用于低次煙葉精油提取 的復合酶。利用該復合酶獲得的精油能顯著提升卷煙的感官評價。
[0004] 為解決上述技術問題，本發明采用的技術方案是： 一種用于提取低次煙葉精油的復合酶，由W下重量份數計算的組分組成；糖化酶 20~30份，復合植物水解酶350~450份，水解蛋白酶150~200份。
[0005] 本發明所述復合酶制劑，通過利用復合酶制劑中糖化酶、復合植物水解酶溶液和 水解蛋白酶對低次煙葉進行酶解，能夠降低低次煙葉中的纖維素、淀粉和蛋白質等物質的 含量，將大分子物質水解為寡糖、單糖、多膚、氨基酸等小分子物質，并促使具有香氣特征的 小分子化合物得W合成、轉化和積累，從而改善了低次煙葉的香氣和吃味。另外，通過優化 =種酶之間的濃度和配比，進一步增加低次煙葉的香氣量，減輕青雜氣，改善余味。
[0006] 優選地所述復合酶由W下重量份數計算的組分組成；糖化酶25份，復合植物水解 酶400份，水解蛋白酶175份。
[0007] 本發明的另一個目的在于提供一種利用所述復合酶制備低次煙葉精油的方法。該 方法包括如下步驟： 51. 配制權利要求1所述復合酶； 52. 按低次煙葉質量的3~5%將S1.配制的復合酶與低次煙葉進行混合，在25~30°C下 進行酶處理10~14小時； 53. 酶處理結束后，進行滅酶，在95~100°C下保持0. 5~2h，得到提取液； 54. 對所述提取液進行離屯、，取上層清液，然后濃縮，真空干燥除去水分，即得到低次煙 葉精油。
[0008] 本發明所述制備低次煙葉精油的方法，通過組合糖化酶、復合植物水解酶和水解 蛋白酶該=種酶，能夠有效提取低次煙葉中的致香物質，獲得煙葉提取物，并通過優化=種 酶之間配比，有效提高煙葉提取物的內在質量，將所述煙葉提取物添加至卷煙紙中，能夠明 顯改善卷煙的香氣和吃氣。
[0009] 為了更好地使酶處理進行，通常將酶制備成酶制劑進行。可W是把復合酶與低次 煙葉混合后，再加入水，再進行勻漿。或者是先把復合酶分別配制成酶溶液，再把酶溶液混 合成酶制劑，再與低次煙葉混合。優選地，S2.中，將復合酶配制為酶溶液再與低次煙葉進 行混合。
[0010] 更優選地，所述酶溶液與低次煙葉的料液比為1:2。
[0011] 優選地，S2中，酶處理的時間為12小時。
[0012] 優選地，S4中，離屯、的轉速為3000~5000r/min。
[0013] 優選地，S4中，所述濃縮為將所述上層清液濃縮至體積的0. 1~0. 2倍。
[0014] 優選地，S4中，所述真空干燥的真空度為0. 08~0. 09Mpa。
[0015] 優選地，在步驟S1之前，將低次煙葉進行烘干、粉碎、過篩處理。
[0016] 所述方法制備的低次煙葉精油在作為卷煙感官改善劑中的應用。
[0017] 優選地，將所述低次煙葉精油添加至卷煙紙上。
[0018] 與現有技術相比，本發明的有益效果是： 本發明所述復合酶制劑，通過利用糖化酶、復合植物水解酶和水解蛋白酶該=種酶的 組合，能夠有效提取低次煙葉中的致香物質，獲得煙葉精油，并通過優化=種酶之間的濃度 和配比，有效提高煙葉精油的內在質量，將所述煙葉精油添加至卷煙紙中，能夠明顯改善卷 煙的香氣和吃氣。
【具體實施方式】
[0019] 通過W下具體實施例進一步詳細說明本發明，應當理解，此處所描述的具體實施 例僅用于解釋本發明，并不用于限定本發明，可W在本發明權利限定的范圍內進行各種改 變。
[0020] 本發明實施例中所采用的糖化酶、復合植物水解酶和水解水解蛋白酶均來自生 產廠家-諾維信，糖化酶（AmylaseAG300L)，密度；1.0~1.2g/ml，酶活力；200~300AG/ ml;復合植物水解酶（ViscozymeL)，包括阿拉伯聚糖酶、復合植物水解酶、0-葡聚糖酶、 半復合植物水解酶、木聚糖酶，密度；1.〇~1.2g/ml，酶活力；80~100FBG/g;水解蛋白酶 (Alcalase)，酶活力；1.2~2. 4AU/g。
[0021] 實施例1 SO.將200g低次煙葉置于恒溫烘箱中干燥30min,用粉碎機粉碎，過60目篩。
[0022] S1.取0.Olg糖化酶，加lOOOg水，配制成糖化酶的質量分數為0. 001%的酶溶液 A; 取0. 16g復合植物水解酶，加1600g水，配制成復合植物水解酶的質量分數為0. 01%酶 溶液B; 取0. 07g水解蛋白酶，加1400g水，配制成水解蛋白酶的質量分數為0. 005%酶溶液C; 取lOOg酶溶液A，160g酶溶液B，及140g酶溶液C，混合成400g復合酶制劑； S2.將低次煙葉與復合酶制混合、勻漿，在25°C下，反應12h，然后升溫至95 °C進行 滅酶，并在95 °C下保持2h，得到提取液。
[0023] S3.對提取液進行離屯、，轉速為4000r/min，離屯、30min,取上層清液，然后對上層 清液進行真空濃縮，濃縮至上層清液初體積的0. 1倍，在60 °C下，真空干燥90min,除去水 分，真空度為0. 08Mpa，得到淺黃色透明、具有煙草特殊香味的油脂，即為煙葉精油。
[0024] 實施例2 SO~S2同實施例1 ; S3.對提取液進行離屯、，轉速為5000r/min，離屯、15min,取上層清液，然后對上層清液 進行真空濃縮，濃縮至上層清液初體積的0.1倍，在60 °C下，真空干燥60min,除去水分， 真空度為0. 09Mpa，得到淺黃色透明、具有煙草特殊香味的油脂，即為煙葉精油。
[00幼 實施例3 SO~S2同實施例1 ; S3.對提取液進行離屯、，轉速為3000r/min，離屯、30min,取上層清液，然后對上層清液 進行真空濃縮，濃縮至上層清液初體積的0. 2倍，在60 °C下，真空干燥80min,除去水分， 真空度為0. 08Mpa，得到淺黃色透明、具有煙草特殊香味的油脂，即為煙葉精油。
[0026] 實施例4~9 SO、S2、S3步驟與實施例1相同，區別在于，S1中最后一步的復合酶制劑組成如表1所 示： 表1
低次煙葉精油應用在卷煙紙中的感官評吸 將本發明實施例中所制備得到的低次煙葉精油，按照煙葉精油占卷煙紙質量0.5%的 比例添加至卷煙紙中并卷制成卷煙，進行感官評價，另外，使用不添加所述低次煙葉精油的 卷煙作為對比例1，W添加水蒸氣蒸饋方法獲得的低次煙葉精油的卷煙作為對比例2,參考 實施例1的技術方案，采用葡聚糖酶代替糖化酶獲得的低次煙葉精油的卷煙作為對比例3。
[0027] 所述水蒸氣蒸饋方法為：將含有揮發性成分的藥材與水共蒸饋，使揮發性成分隨 水蒸氣一并饋出，經冷凝分取揮發性成分的浸提方法。
[0028] 按照通過專業人員進行評吸評價，評委共10人，分別根據香氣質、香氣量、煙氣濃 度、雜氣、刺激性、余味、勁頭得分和總評分數進行評分，然后統計平均值，其結果如表2所 示： 表2
從上述分析可w看出，采用本發明所述復合酶提取的煙葉精油，比現有技術方法提取 的煙葉精油，更能有效地提升卷煙的感官質量，感官質量綜合得分均超過80,而對比例的卷 煙感官質量綜合得分均低于70 ;即使采用與本發明所述糖化酶類似的葡聚糖酶，也無法達 到本發明的效果。
[0029] 顯然，本發明的上述實施例僅僅是為清楚地說明本發明所作的舉例，而并非是對 本發明的實施方式的限定。對于所屬領域的普通技術人員來說，在上述說明的基礎上還可 W做出其它不同形式的變化或變動。該里無需也無法對所有的實施方式予W窮舉。凡在本 發明的精神和原則之內所作的任何修改、等同替換和改進等，均應包含在本發明權利要求 的保護范圍之內。
【主權項】
1. 一種用于提取低次煙葉精油的復合酶，其特征在于，由以下重量份數計算的組分組 成：糖化酶20~30份，復合植物水解酶350~450份，水解蛋白酶150~200份。2. 根據權利要求1所述復合酶，其特征在于，由以下重量份數計算的組分組成：糖化酶 25份，復合植物水解酶400份，水解蛋白酶175份。3. -種提取低次煙葉精油的方法，其特征在于，包括以下步驟：51. 配制權利要求1所述復合酶；52. 按低次煙葉質量的3~5%將SI.配制的復合酶與低次煙葉進行混合，在25~30°C下 進行酶處理1〇~14小時；53. 酶處理結束后，進行滅酶，在95~100°C下保持0. 5~2h，得到提取液；54. 對所述提取液進行離心，取上層清液，然后濃縮，真空干燥除去水分，即得到低次煙 葉精油。4. 根據權利要求3所述的方法，其特征在于，S2.中，將復合酶配制為酶溶液再與低次 煙葉進行混合。5. 根據權利要求3所述的方法，其特征在于，S2中，酶處理的時間為12小時。6. 根據權利要求3所述的方法，其特征在于，S4中，離心的轉速為3000~5000r/min。7. 根據權利要求3所述的方法，其特征在于，S4中，所述濃縮為將所述上層清液濃縮 至體積的0. 1~〇. 2倍。8. 根據權利要求3所述的方法，其特征在于，S4中，所述真空干燥的真空度為 0. 08-0. 09 Mpa〇9. 權利要求3所述方法制備的低次煙葉精油在作為卷煙感官改善劑中的應用。10. 根據權利要求9所述的應用，其特征在于，將所述低次煙葉精油添加至卷煙紙上。
【專利摘要】本發明提供了一種用于提取低次煙葉精油的復合酶及其制備的煙葉精油與應用。所述復合酶由以下重量份數計算的組分組成：糖化酶20~30份，復合植物水解酶350~450份，水解蛋白酶150~200份。本發明所述復合酶制劑，通過利用糖化酶、復合植物水解酶和水解蛋白酶這三種酶的組合，能夠有效提取低次煙葉中的致香物質，獲得煙葉提取物，并通過優化三種酶之間的濃度和配比，有效提高煙葉提取物的內在質量，將所述煙葉提取物添加至卷煙紙中，能夠明顯改善卷煙的香氣和吃氣。
【IPC分類】D21H21/14, C11B9/02, C12N9/14, C12N9/50, C12N9/34
【公開號】CN104988128
【申請號】CN201510339578
【發明人】卓浩廉, 張優茂, 何艷明, 李基成, 單婧, 郭瑋, 伍錦鳴, 羅福明, 廖偉杰, 郭文, 黎玉茗, 梁曼娜, 李蒼佑, 云帆, 許小博, 王娜, 劉興祥
【申請人】廣東中煙工業有限責任公司
【公開日】2015年10月21日
【申請日】2015年6月18日