一種雙核銅(ii)–唑來膦酸配合物及應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及唑來膦酸配合物，具體涉及一種雙核銅（II)-唑來膦酸配合物及應 用。
【背景技術】
[0002] 唑來膦酸（Zoledronic Acid)為新一代的雙膦酸類藥物，是破骨細胞前體的高強 度骨吸收抑制劑，唑來膦酸及其衍生物表現出良好的骨靶向性，因為唑來膦酸藥物含有膦 酸根上的氧原子及氨基端上的氮原子，均能與金屬離子等配位作用，即唑來膦酸藥物含有 多個配位點；如唑來膦酸可與順鉑、來曲唑、多西紫杉醇等抗腫瘤靶向藥物協同發揮抗腫瘤 作用，降低未發生骨轉移的肺癌患者的復發率與骨轉移的發生率。如公開號為CN102603812 的發明專利申請，就公開了雙核鉑（II)-唑來膦酸配合物，該唑來膦酸配合物以2個乙二 胺分子為螯合劑，使唑來膦酸與抗腫瘤作用的2個順鉑配位，形成雙核鉑-唑來膦酸配合 物，其具有優異的骨靶向性，提高了順鉑的抗腫瘤性，降低了順鉑的毒副作用和耐藥性。
【發明內容】
[0003] 本發明所要解決的技術問題是提供一種雙核銅（II)-唑來膦酸配合物及應用， 其為一種新的唑來膦酸金屬配合物，其具有優異的骨靶向功能和抗癌活性。
[0004] 本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：一種雙核銅（II)-唑來膦酸 配合物，其化學式為Cu2(Cl) (H2O) (H2Zdn) (bipy)2 · 4H20,式中H2Zdn為唑來膦酸，bipy為 2, 2' -聯吡啶，其結構式如下所示：
[0005]
[0006] 該雙核銅（II)-挫來膦酸配合物的晶胞參數如下：?? = 1〇.201(2)Α，ft= 11.235(2)A，c =18.435(4) A, α = 105.76(3)。，β = 96.63(3)。，γ = 105.69(3)。，為三斜晶系，ρ? 空間群。
[0007] 該雙核銅（II)-唑來膦酸配合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。
[0008] 與現有技術相比，本發明的優點在于一種雙核銅（II)-唑來膦酸配合物，其化學 式為 Cu2(Cl) (H2O) (H2zdn) (bipy)2 ·4Η20,式中 H2Zdn 為唑來膦酸根離子，bipy 為 2, 2' -聯 吡啶，此配合物具有特定的晶體結構，不僅以唑來膦酸較高的骨親和力，能被快速傳遞至骨 代謝活躍部位，具有性能優異的骨靶向功能和治療效果，又具有良好的抗癌活性，該銅配合 物晶體能夠與靶分子DNA結合，產生鏈內或鏈間交聯，進而干擾DNA正常復制，導致癌細胞 死亡，相比于順鉑有較低的毒副作用和耐藥性。
【附圖說明】
[0009] 圖1為本發明雙核銅（II)-唑來膦酸配合物的單晶型晶體結構圖。
【具體實施方式】
[0010] 以下結合附圖、實施例對本發明作進一步詳細描述。
[0011] 實施例1
[0012] 稱取0. 145g(0. 5mmol) -水合挫來膦酸粉末，0. 171g(lmmol)二水合氯化銅， 0. 126g(Immol) 2, 2' -聯吡啶，不斷攪拌下，依次溶于9mL水與9mL乙醇的混合溶劑中，制 備得淺藍色懸濁液。隨后滴加 ImL (lmol/L)氫氧化鈉溶液調節混合液的pH為2. 5,懸濁液 大部分溶解，且顏色加深。攪拌30min后全部轉移到25mL帶有聚四氟乙烯內襯的不銹鋼 水熱反應釜內，于160°C恒溫反應72h。然后取出冷卻至室溫，經過濾得藍色濾液，在室溫 下靜置培養，一周后析出大量深藍色塊狀晶體和少量綠色條狀晶體。過濾，干燥，手工挑選 出適合X射線分析的深藍色塊狀晶體即為本發明的雙核銅（II)-唑來膦酸配合物，其分 子式為 Cu2(Cl) (H2O) (H2zdn) (bipy)2 · 4H20,式中 H2Zdn 為唑來膦酸，bipy 為 2, 2' -聯P比 啶，其單晶型晶體結構如圖1所示，產率：64%。該雙核銅（II)-唑來膦酸配合物的晶胞 參數如下：《 = 10.201(2) A，6 = 11.235(2) A, c = 18.435(4) A, α = 105. 76(3)。，β = 96.63(3)°，γ = 105.69(3)°，為三斜晶系，Ρ?空間群。
[0013] 實施例2
[0014] 人肺癌細胞株Α549(購自中國科學院上海細胞生物學研宄所）用含10%新生胎牛 血清，lOOU/mL青霉素，lOOU/mL鏈霉素的RPMI1640培養基于37°C、5% CO2，飽和濕度條件 下培養。采用一種常用的檢測細胞存活和生長的方法，即MTT法，檢測細胞生長抑制。將培 養至對數生長期的肺癌細胞以10 X IO3Ail密度接種于96孔無菌培養板（每孔加200uL)， 置于37°C、5% CO2培養箱中培養。為防止邊緣細菌污染，周邊孔加200uL的滅菌水。過夜， 肺癌細胞完全貼壁后，設置五組測試組，分別加入IOOuL不同終濃度（10ug/mL為測試組1、 20ug/mL為測試組2、40ug/mL為測試組3、80ug/mL為測試組4、100ug/mL為測試組5)的實 施例1的雙核銅（II)-唑來膦酸配合物的溶液，對照組只加 IOOuL培養液不加藥物，每組 設置5個復孔。48h或72h后加入2ug/mL的MTT液（50uL/孔），放置5% CO2培養箱中繼 續培養3h。終止培養，選用檢測波長為492nm，震蕩IOs的測試條件，用酶標儀檢測各孔OD 值（被檢測物吸收掉的光密度值）。記錄結果（該試驗重復3次），綜合平均，得到不同濃 度的雙核銅（II)-唑來膦酸配合物對人肺癌細胞平均存活表；測試結果如下表1所示：
[0015] 表1 :不同濃度的雙核銅（II)-唑來膦酸配合物對人肺A549細胞存活表
[0016]
[0017] 測試結果處理與分析：采用Excel和Graphpad Prism5軟件計算雙核銅（II)-挫 來膦酸配合物的細胞存活率與半數抑制濃度（IC50)值，其對A549細胞作用48h和72h的 IC50值分別為21. 14±0. 68uM和12. 18±0. 20uM。從劑量依賴性看，該藥物在10 - IOOuM 系列濃度下對A549細胞抑制率隨濃度的增加而增大；從時間依賴性看，72h后產生的抑制 作用比48h產生的抑制作用強。說明該配合物對人肺癌細胞具有明顯的抑制作用，在很小 的給藥劑量時就可達到不錯的作用效果，是具有較好應用前景的抗腫瘤藥物，也可以在制 備治療乳腺癌、腎癌、人骨肉瘤及其他原因導致骨性轉移藥物中有潛在的應用，在此不一一 列舉。
【主權項】
1. 一種雙核銅（II)-唑來膦酸配合物，其特征在于化學式為 Cu2(Cl) (H2O) (H2zdn) (bipy)2 ? 4H20,式中H2Zdn為唑來膦酸，bipy為 2, 2' -聯吡啶， 其結構式如下所示：2. 如權利要求1所述的一種雙核銅（II) _唑來膦酸配合物，其特征在于該雙核銅 (II)-唑來膦酸配合物的晶胞參數如下：〇=10.20丨(2)A,kll.235(2)A,c= 18.435(4)A，a= 105.76(3)。，0 = 96.63(3)。，y= 105.69(3)。，為三斜晶系，Pl空間群。3. 權利要求1所述的一種雙核銅（II) _唑來膦酸配合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。
【專利摘要】本發明公開了一種雙核銅(II)–唑來膦酸配合物，其化學式為Cu2(Cl)(H2O)(H2zdn)(bipy)2·4H2O，式中H2zdn為唑來膦酸根離子，bipy為2,2’–聯吡啶，此配合物具有特定的晶體結構，不僅以唑來膦酸較高的骨親和力，能被快速傳遞至骨代謝活躍部位，具有性能優異的骨靶向功能和治療效果，又具有良好的抗癌活性，該銅配合物晶體能夠與靶分子DNA結合，產生鏈內或鏈間交聯，進而干擾DNA正常復制，導致癌細胞死亡，相比于順鉑有較低的毒副作用和耐藥性。
【IPC分類】C07F9/6506, A61P35/00, C07F1/08, C07F9/6558
【公開號】CN104961752
【申請號】CN201510346405
【發明人】牛青君, 鄭岳青, 周細武, 朱紅林, 許偉
【申請人】寧波大學
【公開日】2015年10月7日
【申請日】2015年6月19日