從廣金錢草中提取分離夏佛塔苷的方法和系統的制作方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于植物化學技術領域，涉及一種植物中單體化合物的提取分離方法和系統，具體的，本發明涉及從廣金錢草中提取分離夏佛塔苷的方法和系統。
【背景技術】
[0002]廣金錢草為豆科山螞幢屬植物Desmodium styracifolium(Osbeck)Merr.，其藥用部位為干燥地上部分，主要化學成分為黃酮、皂苷、多糖、生物堿等化合物。具有清熱除濕，利尿通淋之功效。用于熱淋、沙淋、石淋、小便澀痛、水腫尿少、黃疸尿赤、尿路結石。
[0003]夏佛塔苷(Schaftoside)也稱為6_C_葡萄糖-8_C_阿拉伯糖洋序素，為黃色粉末；分子式:C26H28O14;分子量:564 ;圖1顯不其化學結構式。
[0004]作為廣金錢草及其相關藥品質量控制用的夏佛塔苷(Schaftoside)對照品，系供中國藥典2010版一部廣金錢草項下鑒別和含量測定用，含量以92.5%計，而且本品有引濕性，打開包裝后需要一次使用完畢。因此由于夏佛塔苷為藥典標準檢測所需對照品，市場需求量較大。因此，現有提取分離夏佛塔苷的方法、以及提高夏佛塔苷的含量和純度的純化技術和系統亟待改進。
【發明內容】
[0005]本發明旨在至少在一定程度上解決現有技術中的技術問題至少之一或者提出一種商業選擇。為此，本發明的一個目的在于提出一種從廣金錢草中提取分離夏佛塔苷的方法和系統，利用該提取分離方法和系統得到的夏佛塔苷，含量高、純度高，有利于作為廣金錢草及其相關藥品的質量控制。
[0006]依據本發明的一方面，本發明提供一種提取分離夏佛塔苷的方法，該方法包括以下步驟:利用乙醇對廣金錢草進行回流提取，獲得廣金錢草提取物；利用醇體系對所述提取物進行多級色譜分離，其中包括，利用第一醇體系對所述提取物進行第一色譜分離，獲得第一分離部分，利用第二醇體系對所述第一分離部分進行第二色譜分離，以獲得所述夏佛塔苷。
[0007]本發明的該方法，利用多級色譜分離，包括組合利用大孔樹脂純化技術和中壓制備，采用醇-水體系，從廣金錢草提取物中分離提取夏佛塔苷，該工藝操作簡單，生產時間短，產品收率高，純度高，能夠獲得HPLC純度達到98%以上的夏佛塔苷，獲得的夏佛塔苷可作為廣金錢草鑒別和含量測定用的化學對照品。該工藝步驟以及各個步驟的參數條件，是發明人綜合考慮、多次調整試驗大孔樹脂色譜和反相中壓色譜的組合及其各自的洗脫條件對廣金錢草中的夏佛塔苷的分離純化效果的影響而確定下來的，該提取純化過程不涉及毒性相對強的有機溶劑，提取分離操作過程及提取物都安全可靠。
[0008]圖2顯示本發明的一個實施例中的提取分離圖1所示化合物的方法的步驟流程圖。根據本發明的實施例，上述本發明一方面的夏佛塔苷提取分離方法，還可以具有以下技術特征至少之一:
[0009]根據本發明的一個實施例，所述利用乙醇對廣金錢草進行回流提取，獲得廣金錢草提取物，包括:利用濃度50-95%的乙醇對所述廣金錢草進行兩次回流提取，合并兩次回流提取所得的提取液，獲得合并提取液，除去所述合并提取液中的乙醇，和/或除去所述合并提取液中的乙醇和離子，以及任選的，進行干燥，以獲得所述提取物。兩次濃度為50-95%乙醇回流提取獲得提取物，是發明人經過多次試驗摸索確定的，既能充分利用原料也能節省時間，利于規模化生產制備；去除提取液中的乙醇和/或離子，利于排除它們對后續分離純化的干擾。
[0010]根據本發明的一個實施例，所述兩次回流提取，其中一次的乙醇和廣金錢草的重量比為12:1，回流提取的時間為1.5h_3h，任選的為2h，另一次的乙醇和廣金錢草的重量比為10:1，回流提取的時間為lh-2h，任選的為1.5h。回流時，濃度為50-95%乙醇和廣金錢草的比例以及回流時間，是發明人經過多次試驗檢測確定的，能夠使原料得到高效提取。
[0011 ] 根據本發明的一些實施例，所述第一醇體系為乙醇-水體系，該乙醇-水體系中的乙醇的濃度為20-60%，較佳的，所述乙醇-水體系中的乙醇的濃度為30%，所述第一色譜為大孔樹脂。該乙醇-水洗脫體系中乙醇的濃度是發明人結合后續色譜分離條件、多次試驗檢測洗脫下來的峰中的夏佛塔苷比例，經過多次調整優化確定的。
[0012]根據本發明的一些實施例，所述第二醇體系為乙醇-水體系，該乙醇-水體系中的乙醇的濃度為8-30%，較佳的，為10-30%。所述第二色譜為反向色譜，較佳的，選擇的反向色譜為反向中壓色譜，更佳的，選擇C18柱，其柱壓為l-10bar，洗脫流速為5?30ml/min。該乙醇-水洗脫體系中的乙醇濃度是發明人結合第一分離部分中目標成分的比例，以及第一色譜分離中的乙醇-水洗脫體系，多次試驗優化確定的，利于在簡單操作和短時間內，獲得收率高、純度高的夏佛塔苷。
[0013]根據本發明的一個實施例，所述利用第二醇體系對第一分離部分進行第二色譜分離，獲得第二分離部分，包括:利用乙醇濃度為a的乙醇-水體系對所述第一分離部分進行等度洗脫25-40min，接著換用乙醇濃度為[a，b]的乙醇-水體系對所述第一分離部分進行梯度洗脫180-250min，收集以獲得所述第二分離部分，其中，a的取值范圍為8_18 %，b的取值范圍為25-30%。先利用一個濃度的乙醇-水體系等度洗脫，再進行梯度洗脫，能夠提高分離提取效率；等度洗脫和梯度洗脫的乙醇濃度或濃度范圍，以及洗脫時間，是發明人考慮收率、時間、回收的分離部分的復雜度、分離部分中目標成分的比例等，多次試驗確定的。
[0014]如圖3所示，根據本發明的另一個實施例，所述利用第二醇體系對第一分離部分進行第二色譜分離，獲得第二分離部分，包括:利用乙醇濃度為c的乙醇-水體系對所述第一分離部分進行等度洗脫30min，接著換用乙醇濃度為[c，d]的乙醇_水體系對所述第一分離部分進行梯度洗脫200min，收集獲得初級第二分離部分；利用乙醇濃度為e的乙醇-水體系對所述初級第二分離部分進行等度洗脫30min，接著換用乙醇濃度為[e，f]的乙醇-水體系對所述初級第二分離部分進行梯度洗脫200min，收集獲得所述第二分離部分，其中，c和e的取值范圍為8-18%，d和f的取值范圍為25-30%，e>c，d彡f。前后兩次，都先利用一個濃度的乙醇-水體系等度洗脫，再進行梯度洗脫，能夠提高分離提取夏佛塔苷的效率；前后兩次的等度洗脫和梯度洗脫的乙醇濃度或濃度范圍、各自的洗脫時間、速度，是發明人結合考慮兩次等度-梯度洗脫的條件、收率、時間、回收的分離部分的復雜度、分離部分中目標成分的比例等，多次試驗優化確定的，利于在簡單操作和短時間內，獲得收率高、純度高的夏佛塔苷。在本發明的一個較佳實施例中，C = 10%, e = 15%, d = 30%, f = 25%,能夠使最終獲得的產品HPLC純度達到98%以上。
[0015]依據本發明的另一方面，本發明提供一種提取分離夏佛塔苷的系統，該系統能夠用以實施上述本發明一方面或者任一實施例中的夏佛塔苷提取分離方法，該系統包括:回流提取裝置，用以利用乙醇對廣金錢草進行回流提取，獲得廣金錢草提取物；色譜分離裝置，用于利用醇體系對所述提取物進行多級色譜分離，其包括，第一色譜分離單元，與所述回流提取裝置相連，用于利用第一醇體系對所述提取物進行第一色譜分離，獲得第一分離部分，第二色譜分離單元，與所述第一色譜分離單元相連，用于利用第二醇體系對所述第一分離部分進行第二色譜分離，以獲得所述夏佛塔苷。圖4顯示本發明的一個實施例中的提取分離系統1000的結構，包括回流提取裝置100和色譜分離裝置200，色譜分離裝置包括第一色譜分離單元202和第二色譜分離單元204。上述對本發明一方面的夏佛塔苷提取分離方法的技術特征和優點的描述，同樣適用本發明這一方面的系統，在此不再贅述。本領域技術人員可以理解，該系統還能包括其它的裝置、子裝置或者功能單元來實施上述的