一種從野百合萃取野百合堿的方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于生物技術領域,涉及一種從野百合萃取野百合堿的方法。
【背景技術】
[0002] 野百合堿,CAS號315-22-0,分子式C16H23N06,分子量325. 36,分子結構:
野百合堿對小鼠肉瘤-180、白血病L615、大鼠瓦克癌-256等均有一定的抑制作用(接 種后24小時開始治療),其中以對瓦克癌-256療效最為顯著。另有報告,對S37抑制率為 54~75%。如在野百合堿母核氮原子上引入氧原子,毒性可降低,但對肉瘤-180的抑制率 亦隨之降低。臨床試用于皮膚癌及子宮癌有較好的療效,對白血病亦有一定效果。此生物 堿為雙稠吡咯啶類,其抗癌作用與烷化劑相似。通過文獻檢索,從野百合中制備野百合堿的 方法披露較少,多采用硅膠柱分離,操作復雜,生產成本高。現有野百合堿的制備方法一般 采用常壓提取,再采用硅膠柱或制備液相方法分離,常壓提取法存在提取效率低,后續純化 工序操作復雜等缺點。
【發明內容】
[0003] 本發明的目的是克服現有技術的缺陷和不足,提供一種從野百合萃取野百合堿的 高效方法。
[0004] 本發明的目的是通過以下技術方案來實現的: 一種從野百合萃取野百合堿的方法,其特征在于以下步驟: 1) 野百合原料粉碎20-80目,投入萃取釜,通入液態C02和夾帶劑,在壓力20-30MPa、 溫度40-55°C條件下,萃取30-60min,在壓力5-9MPa、溫度40-60°C條件下解析,得萃取物; 2) 上述萃取物用酸水溶解,用納濾膜過濾,濾液再用反滲透膜濃縮,濃縮液加乙醇溶液 沉淀,濾出得沉淀物用丙酮溶液溶解重結晶2-3次,干燥即得野百合堿。
[0005] 步驟1)中所述的夾帶劑為氯仿溶液,流速為0. 1-0. 5ml/g/min。
[0006] 步驟2)中所述的納濾膜為截留分子量500-1000的中空纖維素納濾膜。
[0007] 本發明的優點是:方法利用超臨界C02萃取,提取效率高,溶出雜質少,而且對環 境友好;方法采用膜分離技術,是一種物理分離過程,操作簡單,而且環保、低能耗。
【具體實施方式】
[0008] 下面將結合【具體實施方式】進一步說明本發明。
[0009]實施例1: 野百合粉碎40目,稱取3kg投入萃取釜,通入液態C02,流速為3ml/g/min調節壓力 20MPa、溫度50°C,達到上述參數,再通入氯仿溶液,流速為0. 2ml/g/min,萃取40min,在壓 力6MPa、溫度50°C條件下解析萃取物。所得萃取物用1%的鹽酸水溶液溶解,用截留分子 量500的中空纖維素膜納濾,濾液再用反滲透膜濃縮,濃縮液加3倍體積乙醇溶液沉淀12 小時,濾出得沉淀物用丙酮溶液溶解重結晶2次,干燥得野百合堿I. 4g,經HPLC檢測,含量 98. 2%〇
[0010] 實施例2 : 野百合粉碎60目,稱取3kg投入萃取釜,通入液態C02,流速為5ml/g/min調節壓力 25MPa、溫度40°C,達到上述參數,再通入氯仿溶液,流速為0. 2ml/g/min,萃取30min,在壓 力9MPa、溫度60°C條件下解析萃取物。所得萃取物用22%的鹽酸水溶液溶解,用截留分子 量800的中空纖維素膜納濾,濾液再用反滲透膜濃縮,濃縮液加4倍體積乙醇溶液沉淀8 小時,濾出得沉淀物用丙酮溶液溶解重結晶3次,干燥得野百合堿I.lg,經HPLC檢測,含量 98. 5%〇
[0011] 實施例3: 野百合粉碎80目,稱取3kg投入萃取釜,通入液態C02,流速為2ml/g/min調節壓力 30MPa、溫度45°C,達到上述參數,再通入氯仿溶液,流速為0. 2ml/g/min,萃取60min,在壓 力5MPa、溫度40°C條件下解析萃取物。所得萃取物用1%的鹽酸水溶液溶解,用截留分子 量1000的中空纖維素膜納濾,濾液再用反滲透膜濃縮,濃縮液加3倍體積乙醇溶液沉淀10 小時,濾出得沉淀物用丙酮溶液溶解重結晶3次,干燥得野百合堿I. 6g,經HPLC檢測,含量 97. 1%〇
【主權項】
1. 一種從野百合萃取野百合堿的方法,其特征在于以下步驟: 1) 野百合原料粉碎20-80目,投入萃取釜,通入液態C02和夾帶劑,在壓力20-30MPa、 溫度40-55°C條件下,萃取30-60min,在壓力5-9MPa、溫度40-60°C條件下解析,得萃取物; 2) 上述萃取物用酸水溶解,用納濾膜過濾,濾液再用反滲透膜濃縮,濃縮液加乙醇溶液 沉淀,濾出得沉淀物用丙酮溶液溶解重結晶2-3次,干燥即得野百合堿。2. 根據權利要求1所述的從野百合萃取野百合堿的方法,其特征在于步驟1)中所述的 夾帶劑為氯仿溶液,流速為〇. 1-0. 5ml/g/min。3. 根據權利要求1所述的從野百合萃取野百合堿的方法,其特征在于步驟2)中所述的 納濾膜為截留分子量500-1000的中空纖維素納濾。
【專利摘要】本發明涉及一種從野百合萃取野百合堿的高效、低污染方法。工藝步驟如下:1)野百合原料粉碎20-80目,投入萃取釜,通入液態CO2和夾帶劑,在壓力20-30MPa、溫度40-55℃條件下,萃取30-60min,在壓力5-9MPa、溫度40-60℃條件下解析,得萃取物;2)上述萃取物用酸水溶解,用納濾膜過濾,濾液再用反滲透膜濃縮,濃縮液加乙醇溶液沉淀,濾出得沉淀物用丙酮溶液溶解重結晶2-3次,干燥即得野百合堿。采用本發明萃取野百合堿,工藝操作簡便,所得產品純度高,易于實現產業化放大。
【IPC分類】C07D491/16
【公開號】CN104926822
【申請號】CN201510281005
【發明人】蘇劉花
【申請人】南京澤朗生物科技有限公司
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2015年5月28日