一種從薏苡仁油中分離提取微量組份甘油一酯的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種制備色譜方法，特別是涉及一種從薏苡仁油中分離得到甘油一酯 的方法。
【背景技術】
[0002] 薏苡仁油中甘油三酯的含量高達87%~95%，甘油二酯的含量其次，而甘油一酯 的含量屬微量，且為多組分的混合物，分離難度大，
[0003] 薏苡仁油中甘油一酯的獲得為研宄薏苡仁油的組成及藥理毒理測試具有非常大 的意義。但目前尚未有薏苡仁油中甘油一酯提取的報道。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的是提供一種重現性好從薏苡仁油中分離提取微量組份甘油一酯的 方法。
[0005] 本發明的技術方案概述如下：
[0006] -種從薏苡仁油中分離提取微量組份甘油一酯的方法，包括如下步驟：
[0007] (1)取5_25mL薏苡仁油用1-5體積倍的石油醚稀釋，經過中壓制備系統，在色譜柱 Silica flash柱，流動相：A是色譜純的石油醚，B是色譜純的無水乙醇，等度洗脫；流分經 分流后用蒸發光散射檢測器檢測；
[0008] (2)將制備得到的目標峰接收液于旋轉蒸發儀中在34°C，-0· 9~-0· 95Mpa下濃 縮至無溶劑流出，得油狀物；
[0009] (3)油狀物用TLC硅膠板，展開劑為體積比為85:14:1的石油醚：丙酮：甲酸進行 檢測；目標物的Rf為〇. 1 ;
[0010] ⑷將油狀物用高壓制備系統，在Innoval C18色譜柱，填料粒徑為6 μ m，孔徑為 100 A;流動相：C是色譜純的乙腈，D是色譜純的二氯甲烷，梯度洗脫；流分經分流后用蒸發 光散射檢測器檢測，收集保留時間分別Ilmin和Hmin的目標峰的接收液；
[0011] (5)將得到的各目標峰的接收液分別于旋轉蒸發儀在32°C，-0. 9~-0. 95Mpa下 濃縮至無溶劑流出；
[0012] (6)濃縮液經反相液相色譜檢測，檢測條件為：Innoval C18色譜柱，蒸發光散射 檢測器，流動相：A是色譜純的石油醚，B是色譜純的無水乙醇，等度洗脫，得2種純度為 95%以上甘油一酯單體組分。
[0013] Silica flash柱的填料規格優選為20~35 μ m、60 A的球形硅膠。
[0014] 步驟（1)所述等度洗脫為：流動相B的體積含量為28%，保持60min。
[0015] 步驟⑷所述梯度洗脫為：0~16min，流動相D保持25%;16~16. lmin，流動相 D從25 %到60 % ; 16. 1~23min，流動相D保持60 % ;23· 1~30min，流動相D從60 %到 25%〇
[0016] 步驟（6)所述等度洗脫為：流動相B的體積含量為28 %，保持60min。
[0017] 本發明的優點：
[0018] 1.利用了正相富集，反相分離的特點，從復雜基質中得到微量組分；
[0019] 2. -次分離的周期為3~4小時，省時易操作；
[0020] 3.本發明從薏苡仁油中分離提取微量組份甘油一酯為研宄薏苡仁油的組成及藥 理毒理測試具有非常大的意義。
【附圖說明】
[0021] 圖1用本發明的方法一次制備富集甘油一酯色譜圖。（其中50~54min色譜峰為 一酯產物）
[0022] 圖2用本發明的方法將一酯組分再次分離得到10~12min，13. 2~14. 4min兩個 甘油一酯單體。其余峰為甘油二酯。
[0023] 圖3再次分離后10~12min餾分純度檢測。
[0024] 圖4再次分離后13. 2~14. 4min餾分純度檢測。
【具體實施方式】
[0025] 下面結合具體實施例對本發明作進一步的說明。
[0026] 實施例1
[0027] -種從薏苡仁油中分離提取微量組份甘油一酯的方法，包括如下步驟：
[0028] (1)取IOmL薏苡仁油用3體積倍的石油醚稀釋，經過中壓制備系統，在色譜柱 Silica flash柱，流動相：A是色譜純的石油醚，B是色譜純的無水乙醇，等度洗脫；流分經 分流后用蒸發光散射檢測器檢測；Silica flash柱的填料規格為20~35 μ m、60 A的球形 硅膠；等度洗脫為：流動相B的體積含量為28%，保持60min，見圖1 ;
[0029] (2)將制備得到的目標峰接收液于旋轉蒸發儀中在34°C，-0· 9~-0· 95Mpa下濃 縮至無溶劑流出，得油狀物；
[0030] (3)油狀物用TLC硅膠板，展開劑為體積比為85:14:1的石油醚：丙酮：甲酸進行 檢測；目標物的Rf為〇. 1 ;
[0031] (4)將油狀物用高壓制備系統，在Innoval C18色譜柱，填料粒徑為6 μ m，孔徑為 100 A;流動相：C是色譜純的乙腈，D是色譜純的二氯甲烷，梯度洗脫；流分經分流后用蒸發 光散射檢測器檢測，收集保留時間分別Ilmin和Hmin目標峰的接收液；梯度洗脫為：0~ 1611^11，流動相0保持25% ;16~16.11^11，流動相0從25%到60%;16.1~231^11，流動相 D保持60% ;23· 1~30min，流動相D從60%到25% ;見圖2 ;
[0032] (5)將得到的各目標峰的接收液分別于旋轉蒸發儀在32°C，-0. 9~-0. 95Mpa下 濃縮至無溶劑流出；
[0033] (6)濃縮液經反相液相色譜檢測，檢測條件為：Innoval C18色譜柱，蒸發光散射 檢測器，流動相：A是色譜純的石油醚，B是色譜純的無水乙醇，等度洗脫，等度洗脫為：流 動相B的體積含量為28 %，保持60min，得2種純度為95 %以上甘油一酯單體組分。10~ 12min甘油一酯單體0. 094克，13. 2~14. 4min甘油一酯單體0. 099克。
[0034] 實施例2
[0035] -種從薏苡仁油中分離提取微量組份甘油一酯的方法，包括如下步驟：
[0036] (1)取5mL薏苡仁油用5體積倍的石油醚稀釋，經過中壓制備系統，在色譜柱 Silica flash柱，流動相：A是色譜純的石油醚，B是色譜純的無水乙醇，等度洗脫；流分經 分流后用蒸發光散射檢測器檢測；Silica flash柱的填料規格為20~35 μ m、60 A的球形 硅膠；等度洗脫為：流動相B的體積含量為28 %，保持60min 1 ;
[0037] (2) - (6)同實施例 1 (2) - (6);
[0038] 10~12min甘油一酯單體0· 045克，13. 2~14. 4min甘油一酯單體0· 047克。
[0039] 實施例3
[0040] 一種從薏苡仁油中分離提取微量組份甘油一酯的方法，包括如下步驟：
[0041] (1)取25mL薏苡仁油用1體積倍的石油醚稀釋，經過中壓制備系統，在色譜柱 Silica flash柱，流動相：A是色譜純的石油醚，B是色譜純的無水乙醇，等度洗脫；流分經 分流后用蒸發光散射檢測器檢測；Silica flash柱的填料規格為20~35 μ m、60 A.的球形 硅膠；等度洗脫為：流動相B的體積含量為28 %，保持60min 1 ;
[0042] (2) - (6)同實施例 1 (2) - (6);
[0043] 10~12min甘油一酯單體0· 221克，13. 2~14. 4min甘油一酯單體0· 223克。
【主權項】
1. 一種從薏苡仁油中分離提取微量組份甘油一酯的方法，其特征是包括如下步驟： (1) 取5-25mL薏苡仁油用1-5體積倍的石油醚稀釋，經過中壓制備系統，在色譜柱 Silica flash柱，流動相：A是色譜純的石油醚，B是色譜純的無水乙醇，等度洗脫；流分經 分流后用蒸發光散射檢測器檢測； (2) 將制備得到的目標峰接收液于旋轉蒸發儀中在34°C，-0. 9~-0. 95Mpa下濃縮至 無溶劑流出，得油狀物； (3) 油狀物用TLC硅膠板，展開劑為體積比為85:14:1的石油醚：丙酮：甲酸進行檢測； 目標物的Rf為〇. 1 ; (4) 將油狀物用高壓制備系統，在Innoval C18色譜柱，填料粒徑為6 μπι，孔徑為 100 Α;流動相：C是色譜純的乙腈，D是色譜純的二氯甲烷，梯度洗脫；流分經分流后用蒸發 光散射檢測器檢測，收集保留時間分別Ilmin和Hmin的目標峰的接收液； (5) 將得到的各目標峰的接收液分別于旋轉蒸發儀在32°C，-0. 9~-0. 95Mpa下濃縮 至無溶劑流出。 (6) 濃縮液經反相液相色譜檢測，檢測條件為：Innoval C18色譜柱，蒸發光散射檢測 器，流動相：A是色譜純的石油醚，B是色譜純的無水乙醇，等度洗脫，得2種純度為95%以 上甘油一酯單體組分。2. 根據權利要求1所述的一種方法，其特征在于所述Silica flash柱的填料規格為 20~35 μ m、60 A的球形硅膠。3. 根據權利要求1所述的一種方法，其特征在于所述步驟（1)所述等度洗脫為：流動 相B的體積含量為28%，保持60min。4. 根據權利要求1所述的一種方法，其特征在于所述步驟（4)所述梯度洗脫為：0~ 1611^11，流動相0保持25%;16~16.11^11，流動相0從25%到60%;16.1~231^11，流動相 D保持60 % ; 23. 1~30min，流動相D從60 %到25 %。5. 根據權利要求1所述的一種方法，其特征在于所述步驟（6)所述等度洗脫為：流動 相B的體積含量為28%，保持60min。
【專利摘要】本發明公開了一種從薏苡仁油中分離提取微量組份甘油一酯的方法，包括如下步驟：(1)取薏苡仁油用石油醚稀釋，經過中壓制備系統，在色譜柱Silica flash柱，等度洗脫；流分經分流后用蒸發光散射檢測器檢測；(2)將制備得到的目標峰接收液濃縮，得油狀物；(3)油狀物用TLC硅膠板檢測；(4)將油狀物用高壓制備系統，在Innoval C18色譜柱，梯度洗脫；流分經分流后用蒸發光散射檢測器檢測，收集目標峰的接收液；(5)將各目標峰的接收液分別濃縮至無溶劑流出；(6)濃縮液經反相液相色譜檢測，得2種純度為95％以上甘油一酯單體組分。本發明從復雜基質中得到微量組分；一次分離的周期為3～4小時，省時易操作。
【IPC分類】C07C67/56, B01D15/08, C07C69/003, C07C67/48
【公開號】CN104892411
【申請號】CN201510332491
【發明人】倪世清, 吳麗穎, 王洪宇, 劉向新
【申請人】華北電力大學（保定）
【公開日】2015年9月9日
【申請日】2015年6月16日