一種純化原花青素的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及一種原花青素的純化方法。
技術背景
[0002]原花青素是廣泛存在于植物界中的一種多酚類物質，它是不同數量的黃烷-3-醇聚合而成的聚合物的總稱。大量研究結果表明，低聚原花青素具有較強的抗氧化、抗輻射、抗過敏、抗菌抑菌以及預防心血管疾病、抑制腫瘤的能力，目前研究最多最廣的是葡萄籽原花青素。由于原花青素的諸多生理活性，現已被廣泛用于醫藥、保健品、食品及化妝品等領域。通常可以采用傳統吸附樹脂的方法純化得到原花青素產品，但是工藝技術耗時長，同時純度不高。
【發明內容】
[0003]本發明的目的在于針對目前在純化原花青素的過程中所存在的時間長以及純度不高的問題，提供一種采用制備液相色譜系統純化高純度原花青素的新方法，該方法包括以下步驟:
a.將原花青素提取粗品溶于水后進行過濾，一般將原花青素粗品配制成飽和溶液，具體實施時，可根據實際溶解效果進行調整；
b.取配制好的原花青素溶液，用填充好固定相填料的動態軸向壓縮柱進行分離，收集原花青素對應譜帶的餾分；
c.將步驟b中收集的對應譜帶洗脫液中的溶劑蒸干，即可得到色譜純為98.5%的原花青素單體。
[0004]本發明的有益效果是可直接采用提取后的原花青素粗品來制備，不需要大量的前處理過程，簡單、易控制，工藝技術簡化，適用于大規模制備。高效液相色譜測定中，純度高于98.5%，完全可用于藥物的開發。
【具體實施方式】
[0005]實施例1
1.取Ig原花青素粗品溶于水,配制成飽和溶液,置于過濾裝置中，過濾除去固體顆粒；
2.將原花青素溶液泵入動態軸向壓縮柱制備色譜系統，柱填充尺寸為Φ50Χ250πιπι，填料為十八烷基硅膠，粒徑為l(T30um，上樣量lg。流動相的體積比為30:70，當原花青素洗脫完畢后，流動相切換成高比例乙腈，將后端雜質沖出，一個分離周期結束。采用的紫外可見光度檢測器的檢測波長為280nm，收集保留時間在45?47min的餾分，經HPLC分析純度彡 98.8%。
[0006]實施例2
1.取2g原花青素粗品溶于水,配制成飽和溶液,置于過濾裝置中，過濾除去固體顆粒；
2.將原花青素溶液注入動態軸向壓縮柱制備色譜系統，柱填充尺寸為Φ50X250mm，填料為十八烷基硅膠，粒徑為2(T45um，上樣量2g。流動相的體積比為25:75，當原花青素洗脫完畢后，流動相切換成高比例乙腈，將后端雜質沖出，一個分離周期結束。采用的紫外可見光度檢測器的檢測波長為280nm，收集保留時間在55飛8min的餾分，經HPLC分析純度彡 98.3%。
[0007] 實施例3
1.取12g原花青素粗品溶于水,配制成飽和溶液,置于過濾裝置中，過濾除去固體顆粒;
2.將原花青素溶液注入動態軸向壓縮柱制備色譜系統，柱填充尺寸為Φ200 X 250mm，填料為十八烷基硅膠，粒徑為l(Tl5um，上樣量12g。流動相的體積比為27:73，當原花青素洗脫完畢后，流動相切換成高比例乙腈，將后端雜質沖出，一個分離周期結束。采用的紫外可見光度檢測器的檢測波長為280nm，收集保留時間在6(T75min的餾分，經HPLC分析純度彡 98.1%。
【主權項】
1.一種原花青素的純化方法，其特征在于包括以下步驟: (1)將原花青素提取粗品溶于水后進行過濾，除去微小的固體不溶物，得到濾液作為分離粗品； (2)將過濾產物通過進樣泵或者進樣閥注入制備色譜系統； (3)采用乙腈/水做流動相，洗脫得到原花青素單體。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征是:所述的原花青素提取粗品為水提取或有機溶劑沉淀后所得。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征是:所述色譜系統采用動態軸向壓縮柱，且所填充固定相為十八烷基硅膠填料。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征是:流動相中乙腈與水的體積比(V/V)范圍為20:80?40:60，且水中加入乙酸。
【專利摘要】本發明公開一種原花青素的純化方法，采用原花青素提取粗品為原料，優化條件得到合適的柱分離條件，進一步放大到動態軸向壓縮工業制備色譜系統上分離，得到高純度的原花青素。本發明的優點是，提取后粗品直接使用動態軸向壓縮工業制備色譜分離即可達到較好的分離提純效果，操作簡單，周期短，效率高，純度可達98.5%以上。
【IPC分類】C07D311-62
【公開號】CN104788418
【申請號】CN201410027927
【發明人】張宇, 祁威, 沈健增
【申請人】江蘇漢邦科技有限公司
【公開日】2015年7月22日
【申請日】2014年1月22日