一種細胞分離管的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及生物醫學領域的細胞分離技術,特別是涉及一種細胞分離管。
【背景技術】
[0002] 在臨床醫學檢驗中,針對特定細胞功能和生物學特性的檢查常常涉及到細胞的分 離技術,從外周血液和各種體液(胸水、腹水、心包積液等)中分離單個核細胞是體外進行 淋巴細胞免疫學研宄和細胞學實驗的重要前處理步驟,分離的目的細胞的質和量是保證后 續實驗可靠性的重要環節。
[0003] 外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)是參與機體 免疫應答反應的一類重要免疫細胞群。PBMCs主要包含淋巴細胞和單核細胞,PBMCs中大部 分(80%~90% )為淋巴細胞,對不同淋巴細胞的分離、鑒別以及功能的研宄對疾病的診斷 乃至治療都有十分重要的臨床意義。
[0004] 目前,普遍采用的是淋巴細胞分離液通過密度梯度法實現細胞分離,但是分離過 程中,特別是大批量樣本處理時,血液樣品加入淋巴細胞分離液時,二者界面很容易發生混 合,造成分離效果差,效率低。
【發明內容】
[0005] 本發明提出一種細胞分離管,其結構簡單便于制造,安全無毒且成本低廉。
[0006] 本發明的技術問題通過以下的技術方案予以解決:
[0007] -種細胞分離管,包括管體和篩板,所述篩板固定在所述管體內,所述篩板與所述 管體底部之間形成一空腔,所述篩板由顆粒材料制成,顆粒與顆粒之間的間隙為貫通孔,所 述貫通孔的孔徑分布在0. 1mm~0. 5mm之間。
[0008] 優選地:
[0009] 所述篩板具有伸縮性,所述篩板依靠所述伸縮性固定在所述管體內,所述篩板的 直徑與所述管體的內直徑的比值在1. 015~1. 03之間。
[0010] 所述顆粒材料的顆粒直徑在0. 4mm~1mm之間,制成的所述篩板具有連續的所述 貫通孔,所述篩板的壓縮彈性模量在60kPa~lOOkPa之間,表觀密度在0. 45g/cm3~0. 65g/ cm3之間,孔隙率在35%~65%之間。
[0011] 所述篩板的厚度為2mm~8mm。
[0012] 所述篩板的中部還開設一個安裝孔,所述安裝孔的直徑為1mm~2_。
[0013] 所述顆粒材料為聚乙烯(PE)、聚四氟乙烯(PTFE)、聚碳酸酯(PC)和聚丙烯(PP) 中的至少一種。
[0014] 所述管體在固定所述篩板的位置還設有卡槽,所述篩板還通過所述卡槽固定在所 述管體內。
[0015] 本發明的有益效果是:本發明中的篩板由顆粒材料制成,形成篩板后,顆粒與顆粒 之間的間隙為具有特定孔徑分布的貫通孔,篩板與分離液的接觸面少,減少了材料有毒物 質釋放的風險,篩板的結構簡單,便于制造,分離效果很好。
【附圖說明】
[0016] 圖1是采用本發明的細胞分離管分離PBMCs細胞的過程示意圖。
【具體實施方式】
[0017] 下面對照附圖并結合優選的實施方式對本發明作進一步說明。
[0018] 如圖1所示,本發明提供一種細胞分離管,在一個優選實施例中,該細胞分離管包 括管體1和篩板2,篩板2固定在管體1內,將篩板2固定在管體1的中下部位置較適宜,在 篩板2與管體1的底部之間形成一空腔,篩板2是由顆粒材料燒結而成,形成的篩板2的顆 粒與顆粒之間的間隙為連續的貫通孔,這些貫通孔的孔徑分布在0. 1_~0. 5_之間。篩 板具有伸縮性,篩板2依靠自身的伸縮性固定在管體1內,篩板的直徑與管體的內直徑的比 值在1. 015~1. 03之間。
[0019] 本發明所用的管體,可以根據需要采用常見的各種容量規格的離心管,制備篩板 的顆粒材料的顆粒直徑在〇. 4mm~1mm之間,制成后的篩板的壓縮彈性模量在60kPa~ lOOkPa之間,表觀密度在0. 45g/cm3~0. 65g/cm 3之間,孔隙率在35 %~65 %之間,厚度在 2mm~8mm之間。顆粒材料可以為聚乙稀、聚四氟乙稀、聚碳酸醋和聚丙稀中的至少一種,所 選用的材料可以是疏水性的,也可以是親水性的,也可以是篩板的一面為親水性,一面為疏 水性的。所選用的材料需要滿足安全無毒、達到生物相容性要求、對細胞影響最小的條件。
[0020] 由于篩板本身具有伸縮性,且篩板的直徑與管體的內直徑之間有一定的比值關 系,將篩板放入管體內后,可以依靠其自身的伸縮性而固定,不需要任何的膠水來粘合,也 可以不需要對管體做任何特殊的結構,在分離的時候,篩板不會移動,這樣的篩板生產工藝 簡單,能節省成本。
[0021] 當然,為了便于安裝,也可以在制成篩板后,在篩板的中部開設一個安裝孔,安裝 孔的直徑為1mm~2mm,安裝孔的直徑雖然在1mm~2mm,但僅有的這一個安裝孔并不影響 細胞的分離。
[0022] 當然,為了能使篩板更好的固定在管體內,在另一個優選實施例中,還可以在管體 在固定篩板的位置設卡槽,篩板通過自身的伸縮性和卡槽固定在管體內。
[0023] 以分離淋巴細胞為例,本發明的細胞分離管工作時的具體操作過程如圖1所示, 其中3表示血液樣品,4表示細胞分離液,5表示紅細胞,6表示PBMCs細胞,7表示血衆。 圖1中,左圖:將細胞分離液倒入細胞分離管內,細胞分離液緊貼篩板,不能有氣泡,且也不 能高于篩板的上表面,也即,細胞分離液的液面高度介于篩板的下表面和上表面之間為宜; 圖1中的中圖:然后將血液樣品倒入細胞分離管,血液樣品與細胞分離液不會混合,旋緊蓋 子,放入離心機,設置常規的離心力和離心時間進行離心;圖1中的右圖:在離心力場的作 用下,細胞分離管內的液體分成清晰的四層,篩板2以上依次是少部分細胞分離液、PBMCs 細胞層和血漿層,紅細胞離心后沉積在篩板以下的管體底部。然后取出細胞分離管,吸去最 上層的血漿層,倒出PBMCs細胞層,清洗,離心,染色,計數。
[0024] 采用本發明的細胞分離管經過多次實驗,發現分離血液淋巴細胞的效果非常理 想,與傳統的直接使用細胞分離液進行淋巴細胞分離作了對比,具體的實驗數據見下方的 表一,其中,所用的篩板是用PE顆粒燒結而成的,顆粒之間的貫通孔的孔徑分布在0. 1mm~ 0. 5mm之間。
[0025] 表一:本發明的細胞分離管、傳統的細胞分離液分離全血得到的淋巴細胞得率
【主權項】
1. 一種細胞分離管,包括管體,其特征在于:還包括篩板,所述篩板固定在所述管體 內,所述篩板與所述管體底部之間形成一空腔,所述篩板由顆粒材料制成,顆粒與顆粒之間 的間隙為貫通孔,所述貫通孔的孔徑分布在0.Imm~0. 5_之間。
2. 如權利要求1所述的細胞分離管,其特征在于:所述篩板具有伸縮性,所述篩板依 靠所述伸縮性固定在所述管體內,所述篩板的直徑與所述管體的內直徑的比值在1. 015~ 1. 03之間。
3. 如權利要求1所述的細胞分離管,其特征在于:所述顆粒材料的顆粒直徑在 0. 4mm~Imm之間,制成的所述篩板具有連續的所述貫通孔,所述篩板的壓縮彈性模量在 60kPa~IOOkPa之間,表觀密度在0. 45g/cm3~0. 65g/cm3之間,孔隙率在35 %~65 %之 間。
4. 如權利要求1所述的細胞分離管,其特征在于:所述篩板的厚度為2mm~8_。
5. 如權利要求1所述的細胞分離管,其特征在于:所述篩板的中部還開設一個安裝孔, 所述安裝孔的直徑為Imm~2mm〇
6. 如權利要求1所述的細胞分離管,其特征在于:所述顆粒材料為聚乙烯、聚四氟乙 烯、聚碳酸酯和聚丙烯中的至少一種。
7. 如權利要求2所述的細胞分離管,其特征在于:所述管體在固定所述篩板的位置還 設有卡槽,所述篩板還通過所述卡槽固定在所述管體內。
8. 如權利要求1所述的細胞分離管,其特征在于:所述篩板由顆粒材料燒結成型。
【專利摘要】本發明公開了一種細胞分離管,包括管體和篩板,所述篩板固定在所述管體內,所述篩板與所述管體底部之間形成一空腔,所述篩板由顆粒材料制成,顆粒與顆粒之間的間隙為貫通孔,所述貫通孔的孔徑分布在0.1mm~0.5mm之間。本發明結構簡單便于制造,安全無毒且成本低廉。
【IPC分類】C12M1-24
【公開號】CN104762196
【申請號】CN201510175709
【發明人】周翔, 夏亭, 吳慶軍
【申請人】深圳市達科為生物工程有限公司
【公開日】2015年7月8日
【申請日】2015年4月14日