一種適于香菇工廠化栽培菌種滬f2及其指紋圖譜以及栽培方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于香菇食用菌領(lǐng)域，特別涉及一種適于香菇工廠化栽培菌種滬F2及其 指紋圖譜以及栽培方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 我國(guó)食用菌產(chǎn)值過(guò)千億，名列種植業(yè)第五位，其中香菇產(chǎn)量最多。我國(guó)的食用菌種 植主要有兩種模式：以手工操作為主的傳統(tǒng)模式和以自動(dòng)化設(shè)備操作為主的工廠化模式。 隨著人口老齡化進(jìn)程的加劇和勞動(dòng)力成本的提高，我國(guó)食用菌栽培由傳統(tǒng)模式向工廠化模 式的轉(zhuǎn)型升級(jí)已經(jīng)成為一種必然趨勢(shì)。工廠化栽培，即在食用菌的各個(gè)栽培環(huán)節(jié)上，最大限 度地以機(jī)器代替人工勞動(dòng)，同時(shí)在人造菇房?jī)?nèi)，人為調(diào)控光、溫、水、氣，模擬食用菌的生長(zhǎng) 環(huán)境，以實(shí)現(xiàn)食用菌大批量的周年生產(chǎn)。但是，由于不同食用菌生物學(xué)特性及對(duì)出菇的技術(shù) 要求不同，目前并不是所有的品種都能進(jìn)行自動(dòng)化的工廠化生產(chǎn)。一般而言，無(wú)論哪種模 式，食用菌生產(chǎn)通常包括拌料，裝袋（瓶），高壓、常壓滅菌，冷卻后接種，培養(yǎng)，出菇管理，采 收到包裝等環(huán)節(jié)。其中工廠化模式下，培養(yǎng)料的攪拌、裝瓶、殺菌、接種等環(huán)節(jié)全部由機(jī)械完 成，各環(huán)節(jié)之間靠機(jī)械傳送帶輸送，最大限度地減輕了工人勞動(dòng)強(qiáng)度，并且生產(chǎn)效率很高。 以高速裝瓶機(jī)為例，一臺(tái)自動(dòng)裝瓶機(jī)每小時(shí)可裝約4500瓶（每瓶約900毫升），以每日工作 8小時(shí)計(jì)，則每日裝瓶量近4萬(wàn)瓶，且程序由電腦控制，每瓶裝瓶誤差僅為15克。在我國(guó)大 規(guī)模栽培的10余種食用菌中，適于瓶式栽培的品種可采用機(jī)械化操作的工廠化栽培模式， 如金針菇、真姬菇、杏鮑菇等。有一些食用菌種類由于不能在現(xiàn)有的瓶式栽培技術(shù)條件下生 產(chǎn)出具有市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的產(chǎn)品，因此只能采用傳統(tǒng)的袋式栽培，如香菇、木耳等，這些食用菌 種類在裝袋、接種等環(huán)節(jié)無(wú)法實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，極大地消耗了勞動(dòng)力，在勞動(dòng)力成本日益上漲的 形勢(shì)下，阻礙了產(chǎn)業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展。
[0003] 香菇等食用菌不能完全實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)的另一重要原因在于其出菇特性。首先， 香菇不能象金針菇那樣單潮集中出菇采收，一個(gè)生產(chǎn)周期通常出4-5潮菇，且出菇不集中。 其次，傳統(tǒng)香菇品種的出菇需要溫差、濕差、光照及機(jī)械震動(dòng)等多方面的刺激才能實(shí)現(xiàn)，這 些措施往往是個(gè)性化的，很多情況下是靠經(jīng)驗(yàn)，很難有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)化、精準(zhǔn)化的管理措施。
[0004] 因此，要想實(shí)現(xiàn)香菇工廠化生產(chǎn)，必須采用具有特殊生物學(xué)特性的香菇品種。本發(fā) 明提供一種可以實(shí)現(xiàn)香菇工廠化生產(chǎn)的香菇菌種及制備工藝。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種適于香菇工廠化栽培菌種滬F2及其指紋 圖譜以及栽培方法，在二次壓塊培養(yǎng)的香菇生產(chǎn)模式下，可以解決香菇菌絲恢復(fù)緩慢、轉(zhuǎn)色 延遲、抗雜菌能力弱、原基發(fā)生需要較大溫差刺激的技術(shù)難題，使香菇工廠化生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)可 行，長(zhǎng)期運(yùn)行可降低成本，提高香菇生產(chǎn)效益。
[0006] 本發(fā)明的一種適于香葫工廠化栽培菌種滬F2 (Lentinula edodes滬F2)，保藏在 中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心（CCTCC)，單位地址：中國(guó)武漢市武昌珞珈山（武漢大學(xué)），保藏編 號(hào)為 CCTCC M 2014355,保藏日期 2014. 7. 23。
[0007] 本發(fā)明的一種適于香菇工廠化栽培菌種滬F2的指紋圖譜，該指紋圖譜由4對(duì)SSR 標(biāo)記的特異等位片段組合而成。源于香菇的SSR引物（擴(kuò)增信息見(jiàn)表1和圖1)對(duì)其基因 組進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)，分別產(chǎn)生0條、1條、2條和1條的DNA擴(kuò)增條帶，這樣的DNA擴(kuò)增條帶組合 使其區(qū)別于其他香菇菌種。圖1中M是50bp DNA ladder;l:引物L(fēng)e_fp0004擴(kuò)增帶型，菌 株"滬F2"沒(méi)有條帶；2 :引物L(fēng)e_fp0008擴(kuò)增帶型，菌株"滬F2"具有該引物編號(hào)為1的條 帶；3 :引物L(fēng)e_fp0009擴(kuò)增帶型，菌株"滬F2"具有該引物編號(hào)為3和4的條帶；4 :引物L(fēng)e_ fp0007擴(kuò)增帶型，菌株"滬F2"具有該引物編號(hào)為1的條帶；N :空白對(duì)照。
[0008] 表1SSR標(biāo)記擴(kuò)增信息表
[0009]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種適于香菇工廠化栽培菌種滬F2,其特征在于：保藏編號(hào)為CCTCCM2014355。
2. -種如權(quán)利要求1所述的適于香菇工廠化栽培菌種滬F2的指紋圖譜，其特征在于： 該指紋圖譜由4對(duì)SSR標(biāo)記的特異等位片段組合而成，4對(duì)SSR標(biāo)記在滬F2菌種上擴(kuò)增的 等位片段信息具體為： Le_fp0004的等位片段的數(shù)量為0 ; Le_fp0008的等位片段的數(shù)量為1，等位片段1相對(duì)于50bpDNAladder的分子量為 1200bp； Le_fp0009的等位片段的數(shù)量為2,等位片段3相對(duì)于50bpDNAladder的分子量為 730bp，等位片段4相對(duì)于50bpDNAladder的分子量為670bp; Le_fp0007的等位片段的數(shù)量為1，等位片段1相對(duì)于50bpDNAladder的分子量為 800bp〇
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種適于香菇工廠化栽培菌種滬F2的指紋圖譜，其特征在 于：所述4對(duì)SSR標(biāo)記具體為： Le_fp0004 正向引物：CCCAAAAAGGATTTCAGCAA; 反向引物：AACCGGAGTGGTGTAAGTGC; Le_fp0007 正向引物：CATTGCTCGGATCCTTCATT; 反向引物：TACCTCGTGCGGACITTGAT; Le_fp0008 正向引物：CTCTTTGCACCCTCAACCTC; 反向引物：CAGCAGTCTCCTCTTGGCTC; Le_fp0009 正向引物：AAGCAGGTCAGAGCAGGTTC; 反向引物：ACCGAGAGCAGAGTCGAGAG〇
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種適于香菇工廠化栽培菌種滬F2的指紋圖譜，其特征在 于：所述4對(duì)SSR標(biāo)記等位片段的特異編號(hào)組合為：01 (3+4) 1。
5. -種適于香葫工廠化栽培菌種滬F2的栽培方法，包括： (1) 初次培養(yǎng)：栽培瓶培養(yǎng)，培養(yǎng)30天以上，溫度為23-26°C，相對(duì)濕度為60-70 %，光 照強(qiáng)度小于IOOlux; (2) 二次培養(yǎng)恢復(fù)期：壓塊成型培養(yǎng)，培養(yǎng)7-8天，溫度為14-16 °C，相對(duì)濕度大于 90%，光照強(qiáng)度小于20011?; (3) 二次培養(yǎng)轉(zhuǎn)色期：溫度逐漸提高到21 °C，相對(duì)濕度大于85%，光照強(qiáng)度大于 5001ux，培養(yǎng) 15-20 天； (4) 二次培養(yǎng)催蕾期：溫度逐漸降至17°C，濕度大于90%，光照強(qiáng)度大于5001UX，培養(yǎng) 5天。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種適于香菇工廠化栽培菌種滬F2的栽培方法，其特征在 于：所述步驟（4)中每天用清水噴淋使菌塊表面保持濕潤(rùn)。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種適于香菇工廠化栽培菌種滬F2及其指紋圖譜以及栽培方法，該指紋圖譜由4對(duì)SSR標(biāo)記的特異等位片段組合而成。栽培方法包括：(1)初次培養(yǎng)；(2)二次培養(yǎng)恢復(fù)期；(3)二次培養(yǎng)轉(zhuǎn)色期；(4)二次培養(yǎng)催蕾期。本發(fā)明可以解決香菇菌絲恢復(fù)緩慢、轉(zhuǎn)色延遲、抗雜菌能力弱、原基發(fā)生需要較大溫差刺激的技術(shù)難題，使香菇工廠化生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)可行，長(zhǎng)期運(yùn)行可降低成本，提高香菇生產(chǎn)效益。CCTCC M 201435520140723
【IPC分類】C12N1-14, A01G1-04, C12Q1-68
【公開號(hào)】CN104726344
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410421601
【發(fā)明人】尚曉冬, 章爐軍, 張美彥, 于海龍, 宋春艷, 譚琦
【申請(qǐng)人】上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院, 上海炎地農(nóng)業(yè)科技有限公司
【公開日】2015年6月24日
【申請(qǐng)日】2014年8月25日