一種艾爾骨化醇中間體的制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種酶拆分分離外消旋化合物以及副產物的回收方法，特別是涉及用 于制備艾爾骨化醇中間體1A的新方法。
【背景技術】：
[0002] 維生素D(vitaminD)為固醇類衍生物，具抗佝僂病作用，又稱抗佝僂病維生素。目 前認為維生素D也是一種類固醇激素，維生素D家族成員中最重要的成員是VD2 (麥角鈣化 醇）和VD3(膽鈣化醇）。維生素D均為不同的維生素D原經紫外照射后的衍生物。美國科 學家一項為期40年的研宄發現，每天服用一劑維生素D能把罹患乳腺癌、結腸癌和卵巢癌 的風險降低一半。陽光照射在皮膚上，身體就會產生維生素D，這部分維生素D占身體維生 素D供給的90%。
[0003] 近幾年來，越來越多的證據表明，缺乏維生素D可能對身體極其有害。據認為，心 臟病、肺病、癌癥、糖尿病、高血壓、精神分裂癥和多發性硬化等疾病形成都與缺乏維生素D 密切相關。
[0004] 日本厚生省于2011年1月21日批準中外株式會社骨質疏松癥治療藥物--艾 爾骨化醇上市，其有效物質艾爾骨化醇是繼阿法骨化醇后又一新的用于治療骨質疏松癥的 活性維生素D3衍生物。在早期進行的臨床試驗中，40名健康志愿者接受口服艾爾骨化醇 (0. 1-1. 0yg/day)。觀察到劑量依賴性的尿鈣排出增加，但受試者并沒有出現持續性的增 高到大于400mg/day，也沒有出現高血媽癥（大于10. 4mg/dl)，同時也觀察到骨吸收標志物 劑量依賴性的抑制，但骨形成標志物（例如血清骨特異性堿性磷酸酶）并沒有改變。表明艾 爾骨化醇可以抑制骨吸收，而血清osteocalcin并沒有被抑制，表明骨形成得以維持。艾 爾骨化醇耐受性良好，沒有觀察到高鈣血癥或高鈣尿癥。
[0005] 原研廠家中外制藥在科技期刊Heterocycles, 2006,vol70, 295報道路線如下， 該路線為匯聚法合成策略，A環片段化合物3與CD環片段化合物4經Wittig-Honor反應 進行偶聯然后脫保護得到艾爾骨化醇，A環片段以廉價的工業原料（D)-酒石酸二乙酯為起 始原料先經11步反應制得化合物1，化合物1再經11步反應轉化得到該路線的關鍵化合物 3〇
[0006]
【主權項】
1. 一種酶拆分制備化合物IA的方法，其特征是包含以下步驟a-e或步驟a-d: a) 化合物1或9在酶作用下得到化合物IA和化合物7 ; b) 化合物7在有機溶劑中，堿性條件下，選擇性皂化得到化合物1B，所述的皂化的方法 和條件為本領域此類反應的常規方法和條件； c) 化合物IB氧化得到化合物8,所述的氧化的方法和條件為本領域此類反應的常規方 法和條件； d) 化合物8經還原得到化合物1 ;所述的還原的方法和條件為本領域此類反應的常規 方法和條件； e) 化合物1乙酰化為化合物9 ;所述的乙酰化的方法和條件為本領域此類反應的常規 方法和條件；
所得到的化合物1可再次進入步驟a-e或步驟a-d的循環，最終將化合物1都轉化為 化合物IA。
2. 如權利要求1所述方法，其特征是， 當起始原料為化合物1時，所述步驟a中包含以下步驟： a_l)將消旋化合物1和丙烯酸乙酯溶于溶劑中，室溫下加入酶，加熱條件下反應，反應 時間以HPLC取樣檢測異構體含量IB小于3 %為止，通常為8-24小時；本領域常規后處理 后柱層析得化合物IA和化合物7 ; 當起始原料為化合物9時，所述步驟a中包含以下步驟： a_2)將化合物9溶于溶劑中，加入酶，室溫條件反應，反應時間以HPLC取樣檢測化合物 9S構型消失為止，通常為4-12小時，本領域常規后處理后柱層析得化合物IA和化合物7。
3. 如權利要求2所述方法，其特征是，步驟a-1中，所述酶為諾維信脂肪酶Novozyme 435或脂肪酶LIPASEAKAMAN0,其與化合物1的重量百分比為0.01-1 ;所述溶劑選自正己 烷，甲基叔丁基醚，正庚烷，異丙醚。
4. 如權利要求3所述方法，其特征是，所述酶與化合物1的重量百分比為0. 09-0. 1 ;所 述溶劑為正己烷。
5. 如權利要求2所述方法，其特征是，步驟a-2中，所述酶為諾維信脂肪酶Novozyme 435或者脂肪酶LIPASEAKAMAN0,其與化合物1的重量百分比為0.01-1 ;所述溶劑選自乙 腈/水的混合溶劑或二氧六環/水的混合溶劑。
6. 如權利要求5所述方法，其特征是，所述酶與化合物1的重量百分比為0. 09 - 0. 1 ; 所述溶劑為乙腈和水的混合溶劑，其中乙腈和水的體積比為2 :1。
7. 如權利要求1所述方法，其特征是，步驟b中，所述的堿可以是碳酸鈉，碳酸鉀，碳酸 銫，碳酸氫鈉，碳酸氫鉀，氫氧化鈉，氫氧化鉀，氫氧化鋰，氫氧化鋇所述溶劑為乙腈，DMF，二 氧六環，乙酸乙酯，甲基叔丁基醚、四氫呋喃、甲醇，或上述溶劑的任意混合；所述的反應溫 度為OoC至室溫。
8. 如權利要求1所述酶拆分制備化合物IA的方法，其特征是，步驟c中，所述反應氧化 劑選自戴斯馬丁氧化劑、PCC或roc，所述反應溶劑為二氯甲烷或氯仿。
9. 如權利要求1所述酶拆分制備化合物IA的方法，其特征是，步驟d中，所述反應還原 劑選自三仲丁基硼氫化鉀、三仲丁基硼氫化鋰或、者三仲丁基硼氫化鈉，所述反應溶劑選自 四氫呋喃或甲苯，所述反應溫度為_70°C至_45°C，反應時間至檢測反應結束為止。
10. 如權利要求1所述酶拆分制備化合物IA的方法，其特征是步驟e中，乙酰化試劑選 自乙酸酐，乙酰氯。
【專利摘要】本發明涉及一種酶拆分制備化合物1A的方法，更確切地說，這種對映體分離和回收利用方法是先用酶處理化合物1或9后，得到化合物1A和化合物7；化合物7經選擇性皂化、氧化、還原得到化合物1；所得到的化合物1可再次進入步驟a-d或a-e的循環，以達到對映體拆分，并回收利用的目的。
【IPC分類】C12P17-04, C12P41-00
【公開號】CN104711313
【申請號】CN201510117681
【發明人】丁福斗, 楊旭慧, 錢凱敏, 張憲恕, 高強, 鄭保富
【申請人】上海皓元生物醫藥科技有限公司, 上海皓元化學科技有限公司
【公開日】2015年6月17日
【申請日】2015年3月18日