一種亞硒酸鹽胱氨酸增菌液及其應用
【專利說明】
[0001]
技術領域 本發明為微生物領域,特別涉及一種亞硒酸鹽胱氨酸增菌液及其應用。
[0002]
【背景技術】 沙門氏菌病的病原體。屬腸桿菌科,革蘭氏陰性腸道桿菌。已發現的近一千種(或菌 株)。按其抗原成分,可沙門氏菌分為甲、乙、丙、丁、戊等基本菌組。其中與人體疾病有關的 主要有甲組的副傷寒甲桿菌,乙組的副傷寒乙桿菌和鼠傷寒桿菌,丙組的副傷寒丙桿菌和 豬霍亂桿菌,丁組的傷寒桿菌和腸炎桿菌等。除傷寒桿菌、副傷寒甲桿菌和副傷寒乙桿菌引 起人類的疾病外,大多數僅能目引起家畜、鼠類和禽類等動物的疾病,但有時也可污染人類 的食物而引起食物中毒。沙門氏菌在水中不易繁殖,但可生存2-3周,冰箱中可生存3-4個 月,在自然環境的糞便中可存活1-2個月。沙門氏菌最適繁殖溫度為37°C,在20°C以上即 能大量繁殖,因此,低溫儲存食品是一項重要預防措施。
[0003] 志賀氏菌屬是一類革蘭氏陰性桿菌,是人類細菌性痢疾最為常見的病原菌,通稱 痢疾桿菌。大小為0.5~0.7X2~3 iim,無芽孢,無莢膜,無鞭毛。多數有菌毛。革蘭氏陰 性桿菌。為兼性厭氧菌,能在普通培養基上生長,形成中等大小,半透明的光滑型菌落。在 腸道桿菌選擇性培養基上形成無色菌落。生化反應分解葡萄糖,產酸不產氣。VP試驗陰性, 不分解尿素,不形成硫化氫,不能利用枸櫞酸鹽作為碳源。宋內氏志賀氏菌能遲緩發酵乳糖 (37。。3~4天)。
[0004] 培養基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料, 一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。有的培養 基還含有抗菌素和色素,用于單種微生物培養和鑒定。培養基由于配制的原料不同,使用要 求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變 質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養 基),較長時間的貯存,必須放在:T6°C的冰箱內。由于液體培養基不易長期保管,現在均改 制成粉末。
[0005] 培養基根據化學分類為天然培養基、組合培養基和半組合培養基;根據物理分類 為液體培養基、固定培養基和脫水培養基;根據微生物分類為選擇性培養基、鑒別培養基。
【發明內容】
[0006] 本發明克服現有技術中的不足,提供一種亞硒酸鹽胱氨酸增菌液及其應用。
[0007] 本發明運用生物化學,微生物學及無機、有機、分析化學和熒光技術的原理,對不 同的碳源、氮源、無機鹽類、維生素、生長促進劑等諸類營養組分的組合進行篩選,對培養基 的pH值、離子強度、氧化-還原電勢、表面張力、氣體環境等物化因子進行了比較,研究出了 本發明的培養基。
[0008] 本發明所采用的技術方案為: 一種亞硒酸鹽胱氨酸增菌液,所述培養基的組分包括21g/L GN增菌液、4. Og/L乳糖、5. Og/L亞硒酸氫鈉、7. 55g/L磷酸氫二鈉、4. 5g/L L-胱氨酸、4. 5g/L丙二酸鈉、2. 9g/L磷 酸二氫鈉,pH值為7. 0-7. 2。
[0009] 在以上方案的基礎上,所述GN增菌液為每升GN增菌液中含有胰蛋白胨20. 0g、葡 萄糖2. 0g、磷酸氫二鉀1. 5g、甘露醇3g、枸櫞酸鈉5. 8g、去氧膽酸鈉0. 33g、氯化鈉5. 0g、 磷酸氫二鉀2. 0g。
[0010] 本發明還公開了所述的亞硒酸鹽胱氨酸增菌液的應用,用于增殖標本中的沙門氏 菌。
[0011] 蛋白胨提供碳源和氮源滿足細菌生長的需求;乳糖是可發酵的糖類;亞硒酸氫鈉 抑制革蘭氏陽性菌和非沙門氏菌的大多數革蘭氏陰性腸道菌;磷酸鹽是緩沖劑;L-胱氨酸 為還原劑。 稱取本品28g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,待冷至60 °C,傾入無菌平皿。無需高壓 滅菌。 本發明的有益效果: 1、 培養基組方簡單,制備操作方便,成本低,利于推廣應用; 2、 菌生長迅速,變異率低; 3、 便于觀察,分析。
[0012]
【具體實施方式】 實施例1: 一種亞硒酸鹽胱氨酸增菌液,所述培養基的組分包括21g/LGN增菌液、4.Og/L乳糖、 5. 0g/L亞硒酸氫鈉、7. 55g/L磷酸氫二鈉、4. 5g/LL-胱氨酸、4. 5g/L丙二酸鈉、2. 9g/L磷 酸二氫鈉,pH值為7. 0-7. 2。
[0013] 所述GN增菌液為每升GN增菌液中含有胰蛋白胨20. 0g、葡萄糖2. 0g、磷酸氫二 鉀1. 5g、甘露醇3g、枸櫞酸鈉5. 8g、去氧膽酸鈉0. 33g、氯化鈉5. 0g、磷酸氫二鉀2. 0g。
[0014] 蛋白胨提供碳源和氮源滿足細菌生長的需求;乳糖是可發酵的糖類;亞硒酸氫鈉 抑制革蘭氏陽性菌和非沙門氏菌的大多數革蘭氏陰性腸道菌;磷酸鹽是緩沖劑;L-胱氨酸 為還原劑。 稱取本品28g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,待冷至60 °C,傾入無菌平皿。無需高壓 滅菌。 在36 ±1°C培養18-24小時
【主權項】
1. 一種亞硒酸鹽胱氨酸增菌液,其特征在于所述培養基的組分包括21g/L GN增菌液、 4. Og/L乳糖、5. Og/L亞硒酸氫鈉、7. 55g/L磷酸氫二鈉、4. 5g/L L-胱氨酸、4. 5g/L丙二酸 鈉、2. 9g/L磷酸二氫鈉,pH值為7. 0-7. 2。
2. 根據權利要求1所述的亞硒酸鹽胱氨酸增菌液,其特征在于所述GN增菌液為每 升GN增菌液中含有胰蛋白胨20.0 g、葡萄糖2. 0g、磷酸氫二鉀I. 5g、甘露醇3g、枸櫞酸鈉 5. 8g、去氧膽酸鈉0. 33g、氯化鈉5. 0g、磷酸氫二鉀2. 0g。
3. -種根據權利要求1所述的亞硒酸鹽胱氨酸增菌液的應用,其特征在于用于增殖標 本中的沙門氏菌。
【專利摘要】本發明為微生物領域,特別涉及一種亞硒酸鹽胱氨酸增菌液,所述培養基的組分包括21g/LGN增菌液、4.0g/L乳糖、5.0g/L亞硒酸氫鈉、7.55g/L磷酸氫二鈉、4.5g/LL-胱氨酸、4.5g/L丙二酸鈉、2.9g/L磷酸二氫鈉,pH值為7.0-7.2。所述GN增菌液為每升GN增菌液中含有胰蛋白胨20.0g、葡萄糖2.0g、磷酸氫二鉀1.5g、甘露醇3g、枸櫞酸鈉5.8g、去氧膽酸鈉0.33g、氯化鈉5.0g、磷酸氫二鉀2.0g。本發明培養基組方簡單,制備操作方便,成本低,利于推廣應用;菌生長迅速,變異率低;便于觀察,分析。
【IPC分類】C12R1-42, C12Q1-04
【公開號】CN104651449
【申請號】CN201310599336
【發明人】劉漢斌
【申請人】劉漢斌
【公開日】2015年5月27日
【申請日】2013年11月25日