一種用固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種油脂加工工藝領域，具體涉及一種用固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠的方法。
【背景技術】
[0002]植物油脂中的膠質主要是磷脂混合物，由于植物油種類及其質量的不同，油脂中磷脂的含量差異較大。油脂精煉脫除磷脂等膠質是油脂加工的基本過程，也是必需的過程，因為油脂中磷脂存在會給油脂的精煉過程及最終的產品質量帶來很大影響，尤其對油脂物理精煉的影響更大。脫膠是脫除油脂中含有膠體物質的工藝過程。在脫除的膠質物中，主要是磷脂和與磷脂結合鈣、鎂、鐵微量金屬及其它雜質。其中大豆毛油含有3%左右磷脂，它們對油脂制品風味性和穩定性，及在使用時與油的起泡現象等均有直接關系，此外，脫膠工藝效果對其后脫酸、脫色、脫臭、脫蠟工藝也有一定影響。
[0003]酶法脫膠是油脂精煉的一項高新技術，該技術在提高油脂工業的經濟效益和環保性能方面具有巨大的應用價值，但是游離磷脂酶存在價格昂貴，不易回收，催化水解條件苛刻等問題。為了解決以上問題我們對磷脂酶進行固定化研究，固定化酶是指將酶負載在某適宜的載體上，并保持酶催化活性，與游離酶相比#固定化酶在保持其高效專一及溫和的酶催化反應特性的同時，又呈現操作穩定性高、分離回收容易、可多次重復使用、操作連續可控和工藝簡便等優點。
[0004]油脂脫膠旨在脫除油脂中的磷脂，油脂中的磷脂分為水化磷脂和非水化磷脂，水化磷脂較易脫除，而非水化磷脂需要進行處理，使其轉化成親水性較強的物質后進行脫除。脂質酰基轉移酶為一種磷脂酶A2 (PLA2),磷脂酶^可以將非水化磷脂水解成溶血磷脂，溶血磷脂的親水性顯著增強，從而可以通過加水混合后離心的方法將其從油脂中分離。海藻酸鈣、殼聚糖是最為常見的包埋材料，因此可用其來作為固定化酶的載體。一種用海藻酸鈣-殼聚糖固定脂質酰基轉移酶，應用于大豆毛油脫膠，對脫膠條件進行研究，最終確定出用固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠條件的最佳工藝參數。
【發明內容】
[0005]本發明是為了解決大豆毛油精制過程中非水化磷脂不易脫除，游離磷脂酶存在價格昂貴，不易回收，催化水解條件苛刻、增加了不必要的成本等的問題，而提出的一種用海藻酸鈣-殼聚糖固定脂質酰基轉移酶應用于大豆毛油脫膠的方法。以磷含量為指標，脫膠過程中分別以酶添加量、反應溫度和反應起始PH值為單因素進行試驗，此時得出海藻酸鈣-殼聚糖固定脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠最佳參數。
【具體實施方式】
[0006]【具體實施方式】一:一種用固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠的方法通過以下步驟實現:步驟一、固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠工藝參數的確定:不同工藝參數對脫膠油的磷含量的影響，選取脫膠溫度分別為40~60°C五個水平，選取起始pH分別為4.5-6.5五個水平,選取反應時間分別為2~6h五個水平,選取固定化酶添加量分別為0.05-0.4g/kg五個水平；步驟二、固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠工藝的響應面優化，對四個因素進行回歸分析，每個因素選擇3個水平，以脫膠油的磷含量為考查指標。
[0007]【具體實施方式】二:本實施方式與【具體實施方式】一不同點在于步驟一中選取脫膠溫度分別為45~55°C三個水平，計算脫膠油的磷含量。其它組成和步驟與具體實施方法一相同。
[0008]【具體實施方式】三:本實施方式與【具體實施方式】一不同點在于步驟一中選取起始PH分別為4.5,5.0,6.0三個水平，計算脫膠油的磷含量。其它組成和步驟與具體實施方法一相同。
[0009]【具體實施方式】四:本實施方式與【具體實施方式】一不同點在于步驟一中選取反應時間分別為3、4、5h三個水平，計算脫膠油的磷含量。其它組成和步驟與具體實施方法一相同。
[0010]【具體實施方式】五:本實施方式與【具體實施方式】一不同點在于步驟一中選取固定化酶添加量分別為0.05g/kg、0.lg/kg、0.2g/kg三個水平，計算脫膠油的磷含量。其它組成和步驟與具體實施方法一相同。
[0011]【具體實施方式】六:本實施方式與【具體實施方式】一不同點在于步驟二中固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠的條件進行進一步優化驗證，驗證試驗為檢驗回歸分析所得結果的可靠性，按照上述整理值進行3組驗證性試驗，得到的脫膠油的磷含量平均值。預測值與試驗值之間的良好擬合性證實了模型的有效性。表明所得出的回歸方程可以很好的反映脫膠溫度、pH、反應時間和固定化酶添加量與磷含量的關系。其它步驟與【具體實施方式】一相同。
【主權項】
1.一種用固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠的方法，其特征步驟如下:步驟一、固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠工藝的單因素試驗:脫膠溫度對脫膠油的磷含量的影響，選取脫膠溫度分別為40~60°c五個水平，其它條件為pH 5.0，反應時間4h，固定化酶添加量0.lg/kg ;起始pH值對脫膠油的磷含量的影響，選取起始pH分別為4.5-6.5五個水平，其它條件為脫膠溫度55°C，反應時間4h，固定化酶添加量0.lg/kg ;反應時間對脫膠油的磷含量的影響，選取反應時間分別為2~6h五個水平，其它條件為脫膠溫度55°C，pH5.0，固定化酶添加量0.lg/kg;固定化酶添加量對脫膠油的磷含量的影響，選取固定化酶添加量分別為 0.05g/kg、0.lg/kg、0.2g/kg、0.3g/kg、0.4g/kg 五個水平,其它條應時間 4h,pH值5.0，脫膠溫度55°C ;步驟二、固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠工藝的響應面優化，對四個因素進行回歸分析，每個因素選擇3個水平，以脫膠油的磷含量為考查指標。
2.根據權利要求1所述的一種用固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠的方法，其特征在于步驟一中選取脫膠溫度分別為50、55、60 1:三個水平，計算脫膠油的磷含量。
3.根據權利要求1所述的一種用固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠的方法，其特征在于步驟一中選取起始PH分別為4.5,5.0,6.0三個水平，計算脫膠油的磷含量。
4.根據權利要求1所述的一種用固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠的方法，其特征在于步驟一中選取反應時間分別為3、4、5 h三個水平，計算脫膠油的磷含量。
5.根據權利要求1所述的一種用固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠的方法，其特征在于步驟一中選取固定化酶添加量分別為0.05g/kg、0.lg/kg、0.2g/kg三個水平,計算脫膠油的磷含量。
【專利摘要】本發明是提供一種用固定化脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠的方法，為了解決大豆毛油精制過程中非水化磷脂不易脫除，游離磷脂酶存在價格昂貴，不易回收，催化水解條件苛刻、增加了不必要的成本等的問題，而提出的一種用海藻酸鈣-殼聚糖固定脂質酰基轉移酶應用于大豆毛油脫膠的方法。以磷含量為指標，脫膠過程中分別以酶添加量、反應溫度和反應起始pH值為單因素進行試驗，結果表明：當酶添加量0.10g/kg油、反應時間4h、反應溫度55℃和起始pH值5.0時磷含量降至最低約為8.63mg/kg，此時海藻酸鈣-殼聚糖固定脂質酰基轉移酶對大豆毛油脫膠效果最佳。
【IPC分類】C11B3-02, C11B3-00
【公開號】CN104629907
【申請號】CN201510028336
【發明人】于殿宇, 潘明喆, 杜華楠, 江連洲, 王立琦, 趙丹丹, 周爽, 梁寶生
【申請人】東北農業大學
【公開日】2015年5月20日
【申請日】2015年1月21日