從發酵液中提取并純化尼莫克汀的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及生物農藥技術領域，特別涉及從尼莫克汀的發酵液中提取尼莫克汀， 繼而對產物進行純化，獲得高純度的尼莫克汀的方法。
【背景技術】
[0002] 尼莫克汀（Nemadectin)、莫西克汀（Moxidectin)屬于莫西菌素，是微生物產生的 次級代謝物，是廣譜、高效、新型的生物農藥，莫西克汀是尼莫克汀的結構衍生物。尼莫克汀 是一種十六元大環內酯類抗生素，由藍灰鏈霉菌經發酵過程生產，用于制備抗寄生蟲制劑， 但更廣泛用于合成活性更強的驅蟲藥莫西克汀。尼莫克汀的結構如下式所示：
【主權項】
1. 一種從發酵液中提取并純化尼莫克汀的方法，包括以下步驟： 1) 將生產尼莫克汀的發酵液進行絮凝過濾，得到濕菌絲渣； 2) 用非水溶性的有機溶劑萃取濕菌絲渣，得到提取液； 3) 對提取液進行酸性洗滌純化； 4) 對酸洗后的提取液進行濃縮，用烴類有機溶劑溶解后進行堿性洗滌純化； 5) 對對堿洗后的溶液進行尼莫克汀衍生處理，再通過結晶分離出尼莫克汀衍生物； 6) 對尼莫克汀衍生物進行水解，還原為尼莫克汀； 7) 萃取水解液中的尼莫克汀，經結晶、干燥得尼莫克汀產品。
2. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)首先要將發酵液的pH調節為7. 5~ 9. 0,然后加入絮凝劑進行絮凝，所用絮凝劑為無機高分子絮凝劑。
3. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2)所用非水溶性有機溶劑為為醋酸丁 酯和/或乙酸乙酯；萃取溫度20-30°C。
4. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟3)中酸性洗滌用酸為鹽酸或硫酸；洗 滌溫度15-30°C。
5. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)所述烴類有機溶劑選自下列溶劑中 的一種或多種：甲苯、二甲苯、庚烷和己烷。
6. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟4)堿性洗滌所使用的堿性洗滌液為 Na2C03或K 2C03溶液，洗滌溫度為30-35°C。
7. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟5)衍生處理使用的衍生試劑為含苯環 的酰氯或酸酐，縛酸劑為吡啶、二乙胺和/或三乙胺。
8. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟5)衍生反應終止后，反應液用NaHC03 溶液洗滌，然后真空濃縮，降溫結晶，控制結晶終點溫度5-10°C，分離收集潮晶，真空干燥得 尼莫克汀衍生物。
9. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟6)將尼莫克汀衍生物用水溶性有機溶 劑溶解，然后加堿進行水解反應，水解溫度5-8°C。
10. 如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟7)向步驟3)的水解液中加入烴類有 機溶劑萃取尼莫克汀，收集有機萃取相，真空濃縮，降溫結晶，控制結晶終點溫度為5-KTC， 分離收集潮晶，干燥得尼莫克汀產品。
【專利摘要】本發明公開了一種從發酵液中提取并純化尼莫克汀的方法。首先將發酵液進行絮凝過濾，得到濕菌絲渣，然后用非水溶性的有機溶劑萃取，將得到的提取液進行酸洗滌純化，隨后進行真空濃縮，改用極性較小的有機溶劑溶解并進行堿性洗滌純化，接著對尼莫克汀進行衍生處理，通過結晶分離出尼莫克汀衍生物，再對衍生物進行水解還原為尼莫克汀，萃取水解液中的尼莫克汀，經結晶、干燥得含量高于80%的尼莫克汀產品。本發明方法對生產設備的要求低，條件溫和，操作簡單，避免了使用昂貴的大孔樹脂、層析硅膠及繁瑣的層析操作過程，獲得的尼莫克汀純度高，更適宜進行規模化生產。
【IPC分類】C07H19-01, C07H1-06
【公開號】CN104628802
【申請號】CN201310547873
【發明人】李華德, 張洪蘭, 歐建民
【申請人】北大方正集團有限公司, 北大國際醫院集團重慶大新藥業股份有限公司, 北大醫療產業集團有限公司
【公開日】2015年5月20日
【申請日】2013年11月7日