一種利用甘油生產(chǎn)氨基酸的方法

專利名稱:一種利用甘油生產(chǎn)氨基酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及能夠同時利用甘油作為碳源生產(chǎn)氨基酸的微生物及該微生物的制備方法，以及利用該微生物生產(chǎn)氨基酸的方法。
技術(shù)背景
近來，為了解決由于包括石油在內(nèi)的自然資源消耗増加引起的高油價和自然資源利用引起的環(huán)境污染的問題，利用自然界的可再生材料開發(fā)替代能源倍受矚目。其中，通過發(fā)酵獲得こ醇(生物こ醇)和從來自植物的油料獲得生物柴油，被認為是一種替代能源。
生物柴油指的是脂肪酸甲酯或脂肪酸こ酷，它是在催化劑存在下，以來自植物的 油料為底物，與こ醇進行酯化作用合成的。在這個過程中，不可避免的會產(chǎn)生總重量10%的甘油副產(chǎn)物。
甘油(C3H8O3)比葡萄糖(C6H12O6)在化學性質(zhì)上更具還原性，因此在微生物代謝中可以提供更高的還原力。通常，由于在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的很多物質(zhì)在其代謝過程中都需要還原力，因此用甘油作為底物可以顯著提高產(chǎn)量和活性。盡管甘油具有這個性質(zhì)，但是，用甘油生產(chǎn)伊氏素(Reut erin) (Talarico 等，AntimicroAgentsChemother.，32 :1854-1858(1988))，2，3_ 丁 ニ 醇(Biebl 等，Appl Microbiol. Biotechnol. 50 24-29(1998))，1，3-丙 ニ 醇(Menzel 等，Enzyme Microb. Technol. , 20 :82-86 (1997)),玻拍酸(Korean Patent No. 0313134),衣康酸(US Patent No. 5，457，040), 3-輕基丙醒(Doleyres 等，Appl. Micribiol. Biotechnol. 68 (4) :467-474(2005))和丙酸(Himmi 等，Appl. Microbiol. Biotechnol. ,53 :435-440(2000))的研究仍然有限。其中原因之ー便是與傳統(tǒng)發(fā)酵エ業(yè)實際應(yīng)用的其他碳源相比，甘油比較昂貴。與此相反，通過發(fā)酵生產(chǎn)甘油的方法已經(jīng)有人進行研究(Wang等，Biotechnol. Adv.，19 (3) :201-223 (2001))。但是，隨著生物柴油產(chǎn)量的巨大增長，甘油產(chǎn)品也増加了，從而使甘油價格下降?；谝陨鲜聦?，有報道利用包括甘油在內(nèi)的生物柴油副產(chǎn)物生產(chǎn)1，3_丙ニ醇(Gonzalez-Pajuelo等，J. Ind.Microbiol. Biotechnol. 31 :442-446, (2004))和氫，以及こ醇(Ito 等，J. Biosci. Bioeng.，100(3) :260-265(2005))。但是利用包括甘油在內(nèi)的生物柴油產(chǎn)品的副產(chǎn)物來生產(chǎn)氨基酸和代表性發(fā)酵產(chǎn)品為主要代謝產(chǎn)物的方法還未見報道。
直到現(xiàn)在，甘油主要從肥皂，脂肪酸，蠟，表面活性劑或其類似物的生產(chǎn)過程取得。但是，如上所述，隨著生物柴油產(chǎn)品的增長，甘油產(chǎn)品作為其副產(chǎn)物也隨之增長，因此如何有效處理包括甘油在內(nèi)的副產(chǎn)物的問題就會出現(xiàn)。另外，精煉甘油的價格預(yù)期會急劇下降。因此，利用甘油通過發(fā)酵生產(chǎn)有用化學材料將會帶來許多附加效應(yīng)。
大腸桿菌(Escherichiacoli)和肺炎克雷伯氏桿菌(Klebsiella pneumoniae)的甘油代謝已經(jīng)比較清楚。在大腸桿菌中，水甘油通道蛋白GlpF不需要消耗能量，從環(huán)境中攝入甘油(Heller 等，J. Bacteriol. 144 =274-278, (1980))。甘油被甘油激酶(GlpK)轉(zhuǎn)變成3-磷酸甘油，再被3-磷酸甘油脫氫酶轉(zhuǎn)變成磷酸ニ輕丙酮(dihydroxyacetonephosphate,DHAP)，接著再被丙糖磷酸異構(gòu)酶(TpiA)轉(zhuǎn)變?yōu)?-磷酸甘油醛(G-3-P)，從而通過糖酵解代謝(Lin EC，Annu. Rev. Microbiol. 30 :535-578, (1976))。在甘油激酶沒有活性的情況下，甘油被甘油脫氫酶(Gdh)轉(zhuǎn)變?yōu)楗肆u丙酮(DHA)，然后被甘油激酶或ニ羥丙酮激酶轉(zhuǎn)變成磷酸ニ輕丙酮，再接著轉(zhuǎn)變成3-磷酸甘油,從而被代謝掉(Paulsen等,Microbiology, 146 2343-2344, (2000)) 0甘油代謝可以通過不同的途徑進行調(diào)節(jié)。特別是，在甘油和葡萄糖同時存在的情況下，已知野生型大腸桿菌具有ニ階段生長，葡萄糖優(yōu)選先于甘油被利用(Lin，Annu. Rev. Microbiol. 30 :535-578, (1976))。
如上所述，當來自生物柴油產(chǎn)品的副產(chǎn)物ー甘油，被有效用作碳源時，可以產(chǎn)生大量附加值。另外，同時用甘油和葡萄糖作為碳源，野生型大腸桿菌具有ニ階段生長，葡萄糖優(yōu)先于甘油被利用。因此，當提供含有甘油的復(fù)合碳源吋，發(fā)酵效率降低?；诖?，本發(fā)明人進行了甘油微生物利用的延伸研究，從而完成了本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

技術(shù)問題
本發(fā)明的目的是，提供一個高效低成本生產(chǎn)氨基酸的方法，其中氨基酸生產(chǎn)菌株在含有甘油的培養(yǎng)基中培養(yǎng)時，可以同時利用甘油作為碳源。
本發(fā)明的另ー個目的是，提供ー個能夠同時利用甘油作為碳源生產(chǎn)氨基酸的微生物，及制備該微生物的方法。
優(yōu)選實施方式
在一個實施例中，本發(fā)明提供了ー個利用甘油生產(chǎn)氨基酸的方法，包括在含有甘油的培養(yǎng)基中接種和培養(yǎng)同時利用甘油作為碳源的產(chǎn)氨基酸微生物，以及從培養(yǎng)基中回收上述步驟所產(chǎn)生的氨基酸。
本文所用的短語“同時利用甘油作為碳源生產(chǎn)氨基酸的微生物”指的是具有除了甘油以外還可以利用其他碳源來生產(chǎn)氨基酸能力的微生物，并且同時利用甘油作為碳源生產(chǎn)氨基酸。除甘油之外的其他碳源指的是相關(guān)技術(shù)中已知的碳源，如象蔗糖、果糖、乳糖、葡萄糖、麥芽糖、淀粉和纖維素這樣的碳水化合物，象豆油，葵花籽油、蓖麻油和椰子油的脂肪，象棕櫚酸、硬脂酸、亞油酸這樣的脂肪酸，優(yōu)選葡萄糖、果糖和乳糖，最好是葡萄糖。與微生物優(yōu)先利用上述碳源再利用甘油相比，本發(fā)明的微生物同時利用上述碳源和甘油作為碳源生產(chǎn)氨基酸，因此，具有較高的效率來生產(chǎn)最終的氨基酸。特別是，在同時提供葡萄糖和甘油作為碳源的情況下，會出現(xiàn)ニ階段生長，其中野生型大腸桿菌專門利用葡萄糖，并將其耗盡才利用甘油。因此在提供含有甘油的復(fù)合碳源的情況下，發(fā)酵效率降低。相反，同時利用甘油作為碳源生產(chǎn)氨基酸的微生物與野生型不同，在同時有葡萄糖和甘油存在的情況下，而不是在葡萄糖和甘油分別存在下，能同時利用葡萄糖和甘油，從而提高發(fā)酵效率，生產(chǎn)大量氨基酸。
本方面的微生物在其基因組中優(yōu)選具有g(shù)alR基因和/或glpR基因，且其中任意一個或兩者都不被激活。已知galR基因表達的蛋白GalR可以抑制編碼GalP蛋白的基因表達。GalP是ー個滲透酶，可以轉(zhuǎn)運包括半乳糖和葡萄糖這樣的一系列糖進入細胞(MARKGEANAC0P0UL0S AND SANKAR ADHYA, Journal of Bacteriology, Jan. 1997，p. 228-234，Vol. 179, No. I)。已知GlpR基因表達的GlpR蛋白是3-磷酸甘油代謝的調(diào)節(jié)因子，可以與甘油代謝相關(guān)的glpD, glpFK, glpTQ,和glpABC操縱子的操作基因結(jié)合,從而使這些基因的轉(zhuǎn)錄失活(Larson 等，J. Bio. Chem. 262(33) :15869-15874 ；Larson 等，J. Biol.Chem. 267(9) :6114-6121(1992) ;Zeng 等，J. Bacteriol. 178 (24) :7080_7089，(1996))。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)可以通過提高GalP蛋白表達或抑制甘油代謝代表性的調(diào)節(jié)因子glpR來抑制相關(guān)的基因，從而提高甘油利用的效率。滅活方法的實例包括以下步驟用紫外線這樣的輻射或化學藥物誘導突變，從突變子中篩選具有g(shù)lpR和galR基因失活的菌株，這些現(xiàn)有技術(shù)的已知方法都可以使用。另外,滅活方法包括DNA重組技術(shù)方法。DNA重組技術(shù)可以通過在微生物中引入具有g(shù)lpR基因和/或galR基因同源序列的核酸序列或含有該序列的載體，從而產(chǎn)生同源重組來進行。另外，引入的核酸序列或載體可以含有顯性的選擇標記。glpR和/或galR基因已經(jīng)公開，可以從數(shù)據(jù)庫中得到，如國家生物信息中心(NCBI)和日本DNA數(shù)據(jù)庫。再者，大腸桿菌中的glpR和/或galR基因也已經(jīng)公開，可以從Blattner等公開的大腸桿菌基因組序列得到(Science277 :1453-1462(1997)。還有，glpR和/或galR基因包括退化或某個密碼子沉默突變所產(chǎn)生的等位基因。本案中，術(shù)語“滅活”指的是不表達有活性的glpR和/或galR基因，或甘油代謝相關(guān)的基因的表達不被抑制，或不表達 有活性的GalP0因此，如果glpR基因失活，甘油代謝相關(guān)基因的表達或其重組增加，且如果galR基因失活，則GalP表達增加。
本發(fā)明中，微生物指的是能夠產(chǎn)生氨基酸的微生物，且該微生物可以同時利用甘油，最好在其基因組中含有g(shù)lpR和/或galR基因，同時這兩個基因中的任意一個或兩者都被失活的微生物不局限于原核生物或真核生物。微生物的實例包括屬于以下屬的微生物埃希氏菌屬，腸桿菌屬，短桿菌屬，棒桿菌屬，克雷伯氏菌屬，朽1檬酸桿菌屬，鏈霉菌屬，芽孢桿菌屬，乳桿菌屬，假單胞菌屬，酵母菌屬和曲霉屬，優(yōu)選屬于腸桿菌科的微生物，更優(yōu)好是屬于埃希氏菌屬的微生物，更更優(yōu)選大腸桿菌，最優(yōu)選選大腸桿菌FTR2537和FTR2533(KCCM-10540和KCCM-10541)(Korean Patent Publication No.2005-0079344)，大腸桿菌CJM002 (KCCM-10568)，大腸桿菌CJIT6007 (KCCM-10755P)和從中衍生的大腸桿菌。該微生物可以同時利用甘油作為碳源。因此，其在提供甘油而不是在不提供甘油作為碳源的情況下，具有良好的生產(chǎn)氨基酸的能力。
在微生物中，高產(chǎn)L-蘇氨酸的菌株大腸桿菌FTR2533通過失活galR基因由大腸桿菌 FTR7624 (Korean Patent Publication No. 2005-0079344)得到，大腸桿菌 FTR7624 由KCCM-10236衍生得到。通過失活大腸桿菌KCCM-10236基因組中的tyrR基因，菌株大腸桿菌FTR7624的L-蘇氨酸產(chǎn)量增加。菌株大腸桿菌KCCM-10236是能夠高產(chǎn)L-蘇氨酸的菌株，它具有抗L-蘇氨類似物，異亮氨酸泄露代謝缺陷型，耐L-賴氨酸類似物，和耐a -氨基丁酸的性質(zhì)，且引入了磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(PPC)和與蘇氨酸合成途徑相關(guān)的基因(thrA :天冬氨酸激酶I-同型絲氨酸脫氫酶，thrB :同型絲氨酸激酶，thrC :蘇氨酸合成酶)(Korean Patent Publication No. 2005-0079344)。另外，高產(chǎn) L-甲硫氨酸菌株大腸桿菌CJM002 (KCCM-10568)衍生自專利菌株大腸桿菌FTR2533，通過NTG突變?nèi)コ藢＠曛械腖-甲硫氨酸營養(yǎng)缺陷。大腸桿菌CJIT6007是ー個具有g(shù)lpR和galR基因雙失活的菌株，通過PCR技術(shù)制備了含有與glpR基因同源的核酸序列的缺失突變基因盒，并將其引入菌株大腸桿菌FTR2533。
本發(fā)明的利用微生物生產(chǎn)氨基酸的方法中，微生物的培養(yǎng)方法可以根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)已知的合適培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件來進行?，F(xiàn)有技術(shù)的技術(shù)人員很容易根據(jù)所選擇的菌株來修改培養(yǎng)方法。培養(yǎng)方法可以是批次培養(yǎng)法，連續(xù)培養(yǎng)法和批次補料培養(yǎng)法，但不限于此。例如，在 James M. Lee 的《生物化學工程》(Prentice-Hall International Editions, pp138-176)中不同的培養(yǎng)方法已經(jīng)被公開。
培養(yǎng)方法中使用的培養(yǎng)基應(yīng)該優(yōu)選滿足特殊菌株的需要。本發(fā)明中所用的培養(yǎng)基部分或全部含有甘油作為碳源，而且可以含有一定量的其他碳源?，F(xiàn)有技術(shù)人員熟知的碳源，比如象蔗糖、果糖、乳糖、葡萄糖、麥芽糖、淀粉和纖維素這樣的碳水化合物，象豆油，葵花籽油、蓖麻油和椰子油的脂肪，已經(jīng)象棕櫚酸、硬脂酸、亞油酸這樣的脂肪酸。每升培養(yǎng)基中優(yōu)選含有l(wèi)_300g甘油。培養(yǎng)基中，甘油含量為總碳源質(zhì)量的10%到100%，且如果含量超過這個范圍，氨基酸的產(chǎn)量就會減少。除碳源之外，能被利用的氮源包括有機氮源如蛋白胨、酵母提取物、肉汁、麥芽提取物、玉米浸泡液和大豆粉，或無機氮源如尿素、硫酸銨、氯化銨、磷酸銨、碳酸銨和硝酸銨，而且他們可以単獨使用或以任意組合使用。培養(yǎng)基中可以含有磷酸ニ氫鉀，磷酸氫ニ鉀和相應(yīng)的鈉鹽作為磷源。另外培養(yǎng)也含有金屬鹽如硫酸鎂和硫酸鉄。另外，培養(yǎng)基中也含有氨基酸、維生素和適當?shù)那绑w物。培養(yǎng)基或前體物可以在批次培養(yǎng)或連續(xù)培養(yǎng)中加入?；衔锶鐨溲趸@、氫氧化鉀、氨、磷酸和硫酸可以在培養(yǎng)過程中加入來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH值。還有，在培養(yǎng)過程中，消泡劑如脂肪酸聚こニ醇酯用于抑制泡沫形成。再者，為了維持培養(yǎng)基的好氧條件，可以在培養(yǎng)基中通入氧氣或含有氧氣的氣體。 為了維持厭氧或微厭氧條件，可以通入氮氣、氫氣或ニ氧化碳，不通入空氣。培養(yǎng)基的溫度通常在20-45°C，最好在25-40°C。培養(yǎng)周期是連續(xù)產(chǎn)生氨基酸的時期，最好是10-160個小時。
為了回收培養(yǎng)基中的氨基酸，可以使用現(xiàn)有技術(shù)已知的方法，也可以應(yīng)用離子交換色譜或類似方法，但不限于此。
根據(jù)本方法生產(chǎn)的氨基酸實例包括エ業(yè)用的天冬氨酸、蘇氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、谷氨酰胺、脯氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、絲氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、精氨酸和組氨酸，但不限于此，優(yōu)選是天冬氨酸、賴氨酸、蘇氨酸和甲硫氨酸，最好蘇氨酸和甲硫氨酸。
在一個實施例中，本發(fā)明涉及同時利用甘油作為碳源生產(chǎn)氨基酸的微生物。在一個特殊實施例中，本發(fā)明涉及同時利用甘油作為碳源生產(chǎn)氨基酸的微生物，其中該微生物基因組中具有失活的glpR和/或galR基因。
本發(fā)明中的微生物是能夠生產(chǎn)氨基酸，同時利用甘油的微生物；該微生物優(yōu)選是在基因組中具有g(shù)lpR和/或galR基因的微生物，且該微生物中的這兩個基因中的任意一個或兩者都失活。該微生物不限于原核生物或真核微生物。該微生物的例子包括屬于埃希氏菌屬，腸桿菌屬，短桿菌屬，棒桿菌屬，克雷伯氏菌屬，朽1檬酸桿菌屬，鏈霉菌屬，芽孢桿菌屬，乳桿菌屬，假單胞菌屬，酵母菌屬和曲霉屬，優(yōu)選屬于腸桿菌科的微生物，更優(yōu)選屬于埃希氏菌屬的微生物，更更優(yōu)選大腸桿菌，最優(yōu)選大腸桿菌CJIT6007(保藏編號KCCM-10755P)。
在另ー個實施例中，本發(fā)明涉及制備同時利用甘油作為碳源產(chǎn)氨基酸微生物的方法，特別是，同時利用甘油產(chǎn)氨基酸，且具有失活的galR和/或glpR基因的微生物。
在ー個特殊的實施例中，本發(fā)明涉及制備有效利用甘油的微生物的方法，包括以下步驟制備失活的glpR基因或其DNA片段，將該基因或其DNA片段導入能夠生產(chǎn)氨基酸的微生物，將glpR基因在其基因組上進行重組，篩選glpR基因失活的微生物。
在本發(fā)明的方法中，該微生物優(yōu)選屬于腸桿菌科，且該微生物更優(yōu)選大腸桿菌，最優(yōu)選大腸桿菌CJIT6007 (保藏編號KCCM-10577P)。
本發(fā)明的方法中 ，失活的glpR基因或其DNA片段指的是多核苷酸序列，其中該多核苷酸序列含有與宿主glpR基因同源的核苷酸序列，且在該序列中引入如缺失，替換和顛換的突變，以使其不表達具有活性的glpR基因產(chǎn)物。在宿主中引入失活的glpR基因或其片段的方法可以通過轉(zhuǎn)化，結(jié)合，轉(zhuǎn)導或電穿孔等方法實現(xiàn)，但不限于此。
在通過轉(zhuǎn)化向宿主細胞引入失活glpR基因或其片段的情況下，可以通過將多核苷酸序列與該菌株的培養(yǎng)基混合的方法來進行。這時，該菌株自發(fā)接受DNA，從而被轉(zhuǎn)化。但是，最好還是用適當?shù)姆椒▽⒃摼曛瞥筛惺軕B(tài)，以便于DNA進入。失活的glpR基因或其片段在基因組DNA中引入一個外源DNA片段，用失活的形式替代這個序列的野生型。在一個特別的實施例中，失活的多核苷酸序列包含ー個含有靶點DNA5'和3'-末端區(qū)域部分的尾部。為了方便，失活的多核苷酸序列可以含有ー個選擇標記，如抗生素抗性基因。在目標DNA被抗生素抗性基因失活的情況下，轉(zhuǎn)化子的篩選可以在含有合適抗生素的瓊脂平板上進行。通過轉(zhuǎn)化將失活的多核苷酸序列引入宿主細胞，通過將野生型基因組序列與基因組DNA的尾巴序列同源重組，將其失活。
在另ー個特別的實施例中，本發(fā)明涉及制備微生物的方法，其中用相同的方法使該微生物的galR和glpR基因中的任意一個或兩者先后或同時失活，方法如上所述。
在本發(fā)明方法的ー個例子中，所制備的微生物中，將調(diào)節(jié)甘油代謝相關(guān)基因的glpR基因失活，以使其通過發(fā)酵利用包括甘油在內(nèi)的不同碳源，可以有效的產(chǎn)生氨基酸。制備該微生物的方法包含以下步驟
首先，通過PCR技術(shù)，以質(zhì)粒pKD3為模板制備含有與glpR基因同源核苷酸序列的缺失基因盒。然后，用上述PCR得到的DNA片段轉(zhuǎn)化具有重組酶基因的質(zhì)粒pKD46的大腸桿菌。轉(zhuǎn)化的大腸桿菌在含有抗生素標記的瓊脂平板上鋪板，篩選具有抗生素抗性的菌株，從而分離具有失活glpR基因的菌株。
在本發(fā)明的一個特別實施例中，本發(fā)明人通過PCR技術(shù)制備了含有與glpR基因同源的核苷酸序列的缺失基因盒，接著將其引入高產(chǎn)蘇氨酸菌株大腸桿菌FTR2533。因此，得到ー個新的菌株，為了比父本菌株更高效的利用甘油，將該菌株的野生型glpR基因失活，從而可以高產(chǎn)量的產(chǎn)生L-蘇氨酸。新菌株被命名為大腸桿菌CJIT6007，根據(jù)布達佩斯條約，于2006年6月2日保存在韓國微生物保藏中心(保藏編號KCCM-10755P)。
下文中，將詳細介紹本發(fā)明的實施例。但是這些實施例只是為了證明發(fā)明意圖，且本發(fā)明不限于這些實施例。
具體實施方式
實施例I :產(chǎn)蘇氨酸菌株同時利用甘油的搖瓶測試(葡萄糖和甘油)
大腸桿菌野生型菌株K12和FTR2533分別接種在含有MMYE的平板上，33°C培養(yǎng)12小吋。然后用接種環(huán)將這兩個菌株接種于MMYE液體培養(yǎng)基，33°C，200rpm，培養(yǎng)6小吋。MMYE培養(yǎng)基成份如下表I.所示
表I. MMYE培養(yǎng)基成份[0036]
權(quán)利要求
1.ー種利用甘油和葡萄糖生產(chǎn)氨基酸的方法，包括以下步驟在含有甘油和葡萄糖的培養(yǎng)基中接種并培養(yǎng)能同時利用甘油和葡萄糖作為碳源的產(chǎn)氨基酸微生物；和 從上述步驟的培養(yǎng)基中回收氨基酸， 其中所述的微生物是基因組中具有失活的galR基因和glpR基因的大腸桿菌； 并且所產(chǎn)氨基酸為蘇氨酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求
I所述的方法，其中I升培養(yǎng)基中所含的甘油含量為lg_300g。
3.根據(jù)權(quán)利要求
I所述的方法，其中所述的甘油含量為培養(yǎng)基中碳源總重量的10-100% (重量)。
4.根據(jù)權(quán)利要求
I所述的方法，其中所述大腸桿菌為CJIT6007，其保藏編號為KCCM-10755P。
5.ー種能同時利用甘油和葡萄糖作為碳源產(chǎn)氨基酸微生物，所述的微生物是基因組中具有失活的galR基因和glpR基因的大腸桿菌，并且所產(chǎn)氨基酸為蘇氨酸。
6.根據(jù)權(quán)利要求
5所述的微生物，其中所述大腸桿菌為大腸桿菌是CJIT6007，其保藏編號為 KCCM-10755P。
專利摘要
本發(fā)明涉及能同時利用甘油作為碳源的產(chǎn)氨基酸微生物，制備該微生物的方法，以及用該微生物生產(chǎn)氨基酸的方法。根據(jù)本發(fā)明，利用生物柴油產(chǎn)品的副產(chǎn)物甘油高效生產(chǎn)氨基酸，從而替代傳統(tǒng)發(fā)酵材料如葡萄糖的一種廉價材料。
文檔編號C12N1/20GKCN101501204 B發(fā)布類型授權(quán) 專利申請?zhí)朇N 200780024305
公開日2012年10月17日 申請日期2007年6月26日
發(fā)明者張真淑, 朱哉映, 樸英薰, 申容旭, 裵賢愛, 趙光命 申請人:Cj第一制糖株式會社導出引文BiBTeX, EndNote, RefMan專利引用 (2), 非專利引用 (2),