[1,2,3]噻二唑衍生物及其合成方法和用途的制作方法

專利名稱：:[1,2,3]噻二唑衍生物及其合成方法和用途的制作方法
技術領域：
：本發明的技術方案涉及與含1，2-二唑的雜環化合物，具體涉及[1，2，3]噻二唑衍生物。
背景技術：
：噻二唑衍生物是重要的醫藥和農藥中間體，噻二唑有[1，2，3]噻二唑、[1，2，4]噻二唑、[1，2，5]噻二唑、[1，3，4]噻二唑4種異構體，每一異構體在農藥中均有商品化的品種，應用最廣的是[1，3，4]噻二唑的衍生物，[1，2，3]噻二唑衍生物生物活性的報道相對較少，但[1，2，3]噻二唑衍生物在農業、工業和醫藥領域都得到了重要應用，由于[1，2，3]噻二唑環是幾個異構體中唯一能夠通過熱解和光解很容易產生^的異構體，因此，在環境保護日益備受關注的時代有關[1，2，3]噻二唑正在成為研究的熱點。[1，2，3]-噻二唑具有廣泛的生物活性，有些化合物已經商品化，如棉花脫葉劑一一脫葉靈(N-苯基-N-l，2，3-噻二唑-5-脲，TDZ)、植物激活劑一一活化酯(苯并[1，2，3]-噻二唑-7-硫代羧酸甲酯，BTH)、稻田殺菌劑一一噻酰菌胺(3'-氯-4，4'-二甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰苯胺，TDL)等。由于已經商品化的[1，2，3]-噻二唑衍生物中有2個具有植物誘導抗病的活性，我們在國家自然科學基金(30270883)的資助下已經建立了從離體到活體的直接抗病活性篩選和活體的誘導抗病活性篩選以及相關誘導酶系的篩選和PR蛋白的篩選等一系列的篩選體系，先期合成了部分苯并噻二唑的衍生物，發現部分4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰胺衍生物具有誘導煙草抗煙草花葉病毒的活性，現已申請中華人民共和國國家發明專利3項(范志金等，苯并噻二唑衍生物及其合成方法和誘導抗病活性的篩選，中華人民共和國國家發明專利，申請號200510013111.7，公開號CN1680342A;范志金等，新型苯并噻二唑衍生物及其合成方法和誘導煙草抗煙草花葉病毒的活性，中華人民共和國國家發明專利，申請號200510014378.8;范志金等，苯并[1，2，3]噻二唑衍生物及其合成方法和用途，申請號200510122338.5);2004年日本科學家發現[1，2，3]-噻二唑的衍生物TDL具有誘導活性(MichikoYasuda;HideoNakashita;ShigeoYoshida;Tiadinil，anovelclassofactivatorofsystemicacquiredresistance,inducesdefensegeneexpressionanddiseaseresistanceintobacco.JapanesePesticideScience,2004，29:46-49);為了尋找具有更高誘導活性的[1，2，3]-噻二唑的衍生物，我們合成了部分[1，2，3]-噻二唑的衍生物。1，2，3-噻二唑衍生物除了具有誘導抗病活性外，這類化合物還具有除草活性、殺蟲活性和殺菌活性以及植物生長調節活性，有關的專利報道總結見表l。另外，具有增效劑活性的1，2，3-噻二唑衍生物也有專利報道，EP0062773報道了1，2，3_噻二唑衍生物能增強硫代氨基甲酸酯在土壤中的穿透性，降低土壤對硫代氨基甲酸酯類除草劑的降解，從而延長除草劑的藥效期從而提高此類除草劑的活性，增效活性較好的衍生物見表2。具有安全劑活性的1，2，3-噻二唑衍生物也有報道，除草劑安全劑又稱為解毒劑或保護劑，是指用來保護作物免受除草劑的藥害，增加作物的安全性和改進雜草防除效果的化合物，美國專利US4253864報道了1，2，3-噻二唑衍生物可作為安全劑降低除草劑對作物的藥害(表l)，特別是降低乙酰替苯胺類除草劑對作物的藥害，這類除草劑包括2-氯-2'，6'-二乙基-N-(甲氧甲基)乙酰替苯胺，2-氯-2'，6'-二乙基-N-(丁氧甲基)乙酰替苯胺，2-氯-N-(2-甲氧基-1-甲基乙基)-6'-乙基-0-乙酰甲苯胺，1，2，3-噻二唑類衍生物與乙酰苯胺類除草劑的比例取決于施藥的時間和氣候條件，安全劑與除草劑的重量比在l:8到8:l之間。可能的機理是，l，2，3-噻二唑衍生物增強了乙酰苯胺類除草劑在作物體內的代謝，或降低了作物對除草劑的吸收。具有醫藥活性的1，2，3-噻二唑衍生物也有報道，已商品化的醫藥產品Cefuzonam和其他幾個典型的具有生物活性的1，2，3_噻二唑衍生物化學結構見表2，專利報道的具有醫藥生物活性的1，2，3-噻二唑的衍生物及其結構修飾見表l。表1部分專利文獻報道的[1，2，3]噻二唑衍生物的結構修飾及其生物活性s一n/<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>結構式取代基生物活性R卜烷基R2二羥基；烷基；鹵原子R3-輕基；烷基；g原于R4,R5，R6-氬原子；曱基殺真菌劑蘋果中的疫霉病菌；馬鈐薯晚疫病S;草莓疫霉病菌；黃瓜霜實病菌。"US435947O—R2IN—R,US4515619Rl-芳香基團；被C1-C6烷基、鹵原子、Cl-C6烷氧基、氮原子、三氟甲基取代的芳香基團R2=氫原子;Cl-C6烷基；C3-C6烯基、炔基；-C(0)R3;R3-氬原子；Cl-C10烷基；C2-C6烯基；C3-C8芳香基；-N(R4)(R5);R4,R5-氫原子；Cl-C6烷基；芳基植物生長調節劑，脫葉劑.DE3205639RH烷基；R2-氮，烷基，烯烴基，烷氧曱基，卣素，坑氡基；R3=fL，氯，溴，甲基；R4=lu烷基，烷氧叛基；R5-氬，烷基，卣素，'羰基，烷氧羰基，或114和115都是烯烴官能團其&具有選梓性的除草活性。R4。R2=H,Cl-C8烷基，Cl-C4鹵代烷基，未取代和取代苯基，舍1/乂其衍生物及鹽為病害控制劑的活性成分。WO9814438c——xUS4253864Z1:氫，含短鏈烷基的官能團，三氟甲基，萘，吡啶，噻吩，苯基，含I到3個取代基的苯(馭代基為短鏈烷基或坑|1*,卣素，硝基，三氟甲基)，醚，硫醚，卣素取代的烷基；X:-Y-Z2，Zz為氬，取代烷基，芳基，芳基-C,-(22-烷基；Y為氧，硫；或一NZ3^;z3，Z4:氫，取代C,-C,8坑基，C2-C8烯烴或炔基官能團，取代CVCs環脂肪族官能團，取代芳基，嗎啉，p比硌，哌-定除草劑安全劑。S02R1US5677318Ri:含有下列結構的官能團:S(0)2CH3-S(0)2NHR4、S(O)2NHCOCF3、S(0)2NHCH3、SOMHNH2、SONHNHCOCF3、POCH3OH,PGCH3NH2;R2和R':含有下列結構的官能團H、鹵素、Cw烷氧基、Cw烷減基、CN、氟代烷基、"6烷基，N;;、-C02H、-C02C,.4烷基、-CR5R6-〇H、減輕疼痛和發燒，關節炎，燒傷及外科手術中的疼痛；抑制細胞腫瘤的轉移和轉移痛的生長.治療出現在如糖尿性視網膜病中的環氧合酶調節增生性紊亂。US6420400R1、R2、R3、R4:氬、R5、R6、R7;R5:烷基、雜原烷基、芳基.雜原芳基；R6:(R5)n-亞烴基、(R5)n-雜原亞烴基、(R5)n-芳亞烴基、(R5)n-雜原子芳亞烴基；R7:(R6)n-亞烴基、R6)n-雜原子亞烴基、(R"n-芳亞烴基、(R6)n-雜原子芳亞烴基；n:0,1,2,3,4,5;R'、R"聯起來形成舍氮的雜環結構，或R3、W聯起來形成形成含氮的雜環結構；L1、L2:抑制細胞增生型紊亂的活性，如可抑制腫瘤的生長、血管生成，減輕由淋已組織增殖引起的發炎、移植排斥、組織修復引起的神經損傷等。N=NCN1136684R1:氫、卣素、烷基.取代芳基、烷氧基、取代芳氧基、烷硫基，取代芳疏基、氨基、烷胺基、芳胺基、含N、S元素的五元或六元雜環；R2:氫，烷基、取代芳基、烷氣基、馭代芳氣基、氨基，烷胺基、取代芳胺基、含N、S元素的五元或六元爭環；R3:氫、烷基、取代芳基，烷氣基、取代芳氧基、氨基、烷胺基、取代芳胺基、取代芐基'取代芳乙基、含N、S元素的五元或六元雜環或其雜環甲基、乙基；X:0、S、CH2、CHR'、NH、NR;R'是氫'烷基、芳基；Y:O、S、SO、S02.、NH、NR;Y也是含N、S元素的五元或六元雜壞；治療和/或預防乙型肝炎的活性，并可用于農業植物病毒的防治。表2具有生物活性的1，2，3-噻二唑衍生物的典型化學結構5<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>[0011]在國內外專利文獻公開的[1，2，3]噻二唑衍生物中，酰胺類的衍生物已有報道，但有關這類化合物誘導抗病活性的篩選報道很少，為了進一步尋找具有更高誘導活性的TDL衍生物，我們擬合成不同類型的文獻和專利尚未報道的[1，2，3]噻二唑衍生物，并進行誘導抗病活性以及其他生物活性的篩選。
發明內容本發明所要解決的技術問題是提供4_甲基-[1，2，3]-噻二唑-5_甲酰胺類化合物及其合成方法和誘導煙草抗TMV活性的篩選以及這類化合物抑制病原真菌的活性和殺蟲的活性及其篩選方法。本發明解決該技術問題所采用的技術方案是4-甲基-[1，2，3]-噻二唑-5_甲酰胺衍生物的化學結構通式見下圖，其具體的化學結構式表示見表3:嚴3，N、//表3本發明合成的4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰胺類化合物編<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>本發明的4-甲基-1，2，3_噻二唑-5-甲酰胺類化合物的合成方法如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>具體分為以下步驟A.4-甲基[1，2，3]噻二唑-5-甲酰氯的制備:I.肼基甲酸甲酯的制備將9g(0.l摩爾)碳酸二甲酯與5.4毫升(0.095摩爾)的85%水合肼，加入到裝有冷凝回流管的100毫升圓底燒瓶中，50攝氏度下回流20分鐘，然后25攝氏度下攪拌20小時，水泵減壓蒸除甲醇、水和少量未反應完的碳酸二甲酯，干燥得白色晶體8.lg，收率為95%，該化合物的用量按相應比例擴大或縮小；[0022]II.3-(甲氧基羰基腙)_丁酸乙酯的制備將7.28g(0.06摩爾)乙酰乙酸乙酯與3.7毫升的乙醇溶液加入到100毫升三口燒瓶中，常溫下緩慢滴加5.02g(0.06摩爾)肼基甲酸甲酯與16.7毫升乙醇的溶液，加料完畢，常溫攪拌6小時，減壓蒸除乙醇，得白色固體11.26g，收率100%，該化合物的用量按相應比例擴大或縮小；III.4-甲基-1，2，3-噻二唑-5_甲酸乙酯的制備將44毫升二氯亞砜加入到裝有干燥管、尾氣吸收裝置的250毫升三口燒瓶中，冰鹽浴冷卻下，緩慢滴加40.57g(0.20摩爾)3-(甲氧基羰基腙)-丁酸乙酯與45毫升二氯甲烷溶液，控制溫度在20攝氏度以下，加料完畢，室溫攪拌20小時，常壓下蒸去過量的二氯亞砜，減壓蒸餾得到400Pa，76至78攝氏度淡黃色餾分25.94g，收率75.4%，該化合物的用量按相應比例擴大或縮小；[0024]IV.4-甲基-1，2，3-噻二唑-5_甲酸的制備將33.40g(0.19摩爾)4-甲基_1，2，3-噻二唑-5-甲酸乙酯和80毫升的3摩爾/升氫氧化鈉甲醇溶液加入到250毫升圓底燒瓶中，室溫攪拌16小時，減壓蒸除甲醇，所得鈉鹽用乙醚洗滌，然后溶解于200毫升水中，稀鹽酸酸化，抽濾，正己烷洗滌，干燥得白色粉末狀固體25.90g，收率96X，該化合物的用量按相應比例擴大或縮小；V.4-甲基-1，2，3-噻二唑-5_甲酰氯的制備將9.66g(0.067摩爾)4-甲基_1，2，3-噻二唑-5-甲酸和29毫升二氯亞砜加入到100毫升三口圓底燒瓶中，80攝氏度下加熱回流6小時，減壓蒸除過量的二氯亞砜，減壓蒸餾得2000Pa，94至96攝氏度淡黃色餾分9.25g，收率85%，4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰氯非常活潑，應密封保存在干燥器中，該化合物的用量按相應比例擴大或縮小；B.4-甲基-1，2，3-噻二唑_5_甲酰胺衍生物的制備在100毫升三口燒瓶中加入5毫摩爾的胺類化合物和一定量絕對無水四氫呋喃或無水二氯甲烷，冰浴下緩慢滴加5毫摩爾4-甲基-1，2，3_噻二唑-5-甲酰氯的15毫升絕對無水四氫呋喃或無水二氯甲烷溶液，然后滴加1.5毫升三乙胺作縛酸劑，常溫攪拌4小時，反應結束后，向反應體系中加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產物萃取出來，然后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，無水硫酸鈉干燥，過濾、減壓脫去溶劑得粗產品，然后用200目至30Q目硅膠柱層析得純品，洗脫劑為60至90攝氏度的石油醚和乙酸乙酯，根據產物的不同，其體積比為6:l至3:2之間選擇一定的比例，該化合物的用量按相應比例擴大或縮小；本發明的4-甲基-1，2，3_噻二唑-5-甲酰胺衍生物誘導煙草抗煙草花葉病毒活性的篩選方法如下I.標準植物誘導抗病激活劑的選擇選擇噻酰菌胺(TDL)為標準的植物誘導抗病激活劑，離體篩選采用500微克/毫升；II.新化合物誘導煙草抗TMV活性的篩選方法離體直接抗病毒活性的測定采用半頁法進行；活體誘導是將苗齡一致的普通煙，3盆為一組，分別于接種前7天前處理過的煙苗，處理方式包括噴施供試化合物溶液2到3次，每次20毫升，第7天于新長出的煙葉上摩擦接種TMV，將煙苗置于其生長適宜溫度及光照下培養3天后，檢查發病情況，綜合病斑數目按下式計算出供試化合物對TMV的誘導抗病毒效果，每一處理設3次重復，對照分空白對照和標準藥劑處理對照2種；測試化合物的相對效果分為4級A、B、C、D，具體數據為A級誘導效果>70%，為優；B級誘導效果7050%，為良；C級誘導效果3050%，為差；D級誘導效果<30%視為無誘導效果，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>[0032]其中，R為新化合物對煙草抗TMV的誘導效果，單位％[0033]CK為清水對照葉片的平均枯斑數，單位個I為經化合物誘導處理后葉片的平均枯斑數，單位個；111.殺菌活性的篩選方法采用菌體生長率測定法(Myce1iumgrowthratetest)，具體過程是，取5毫克樣品溶解在適量二甲基甲酰胺內，然后用含有一定量吐溫20乳化劑水溶液稀釋至500微克/毫升的藥劑，將供試藥劑在無菌條件下各吸取1毫升或0.5毫升注入培養皿內，再分別加入9毫升或9.5毫升培養基，搖勻后制成50微克/毫升或25微克/毫升含藥平板，以添加1毫升滅菌水的平板做空白對照，用直徑4毫米的打孔器沿菌絲外緣切取菌盤，移至含藥平板上，呈等邊三角形擺放，每處理重復3次，將培養皿放在24±1攝氏度恒溫培養箱內培養，待對照菌落直徑擴展到2至3厘米后調查各處理菌盤擴展直徑，求平均值，與空白對照比較計算相對抑菌率，供試菌種包括22種常見植物病原菌；[0036]IV.殺蟲活性的篩選方法采用浸漬法，具體操作步驟是將帶有至少60頭大小一致的健康蠶豆蚜(AphislaburniKaltenbach)的供試蠶豆植株從盆中剪下，在50微克/毫升的各待測藥液200毫升中浸漬5秒鐘，取出輕輕甩掉多余的藥液，插在已經被水飽和的海綿上保濕，待藥液自然風干后用玻璃罩罩上，玻璃罩上端的開口用紗布封口以防蚜蟲逃逸，飼養放置24小時后檢查蚜蟲死亡狀況，標準為以試蟲能爬行或能站立或其中一條腿能劇烈運動的均為活蟲，以清水為對照，以平均值計算校正死亡率，各藥劑各濃度分別重復3次，同時進行以清水為對照的空白試驗。本發明的有益效果是噻酰菌胺是一種標準的植物誘導抗病激活劑，利用申請者前期發明專利建立篩選體系，在成功誘導了煙草植株對TMV產生很好的抗病毒活性的基礎上，本發明進一步成功的運用了該體系進行誘導抗病活性的篩選，并進一步進行抑菌活性的篩選，部分化合物具有抑制病原真菌生長的活性。本發明將通過特定制備和生物活性測定實施例更加具體地說明4-甲基_1，2，3-噻二唑類衍生物的合成和生物活性，但所述實施例僅用于具體的說明本發明而非限制本發明，具體的實施方式如下實施例1肼基甲酸甲酯的制備將9g(0.1摩爾)碳酸二甲酯與5.4毫升(0.095摩爾)的85%水合肼，加入到裝有冷凝回流管的50毫升圓底燒瓶中，50攝氏度回流20分鐘，然后在25攝氏度下攪拌20小時，水泵減壓蒸除甲醇、水和少量未反應完的碳酸二甲酯，殘留物干燥得白色晶體8.lg，收率為95%。[0042]實施例23_(甲氧基羰基腙)_丁酸乙酯的制備將7.28g(0.06摩爾)乙酰乙酸乙酯與3.7毫升的乙醇溶液加入到50毫升三口燒瓶中，常溫下緩慢滴加5.02g(0.06摩爾)肼基甲酸甲酯與16.7毫升乙醇的溶液。加料完畢，常溫下攪拌6小時，減壓蒸除乙醇，得白色固體11.26g，收率100%。[0045]實施例34-甲基-1，2，3-噻二唑-5_甲酸乙酯的制備將44毫升二氯亞砜加入到裝有干燥管、尾氣吸收裝置的250毫升三口燒瓶中，冰鹽浴冷卻下，緩慢滴加40.57g(0.20摩爾)3-(甲氧基羰基腙)_丁酸乙酯與45毫升二氯甲烷溶液，控制溫度在20攝氏度以下。加料完畢，室溫攪拌20小時。常壓下先蒸去過量的二氯亞砜，再減壓蒸餾得到400Pa，76至78攝氏度淡黃色餾分25.94g，收率75%。[0048]實施例44-甲基-1，2，3-噻二唑-5_甲酸的制備將33.40(0.19摩爾)4-甲基_1，2，3_噻二唑_5_甲酸乙酯和80毫升3摩爾/升NaOH甲醇溶液加入到250毫升圓底燒瓶中，室溫攪拌16小時。減壓蒸除甲醇，所得鈉鹽用乙醚洗滌后溶解于200毫升水中，稀鹽酸酸化，抽濾，正己烷洗滌后干燥得白色固體25.90g，收率96%。[0051]實施例54-甲基-1，2，3_噻二唑-5-甲酰氯的制備將9.66g(0.067摩爾)4-甲基_1，2，3_噻二唑_5_甲酸和29毫升二氯亞砜加入到100毫升三口圓底燒瓶中，80攝氏度下加熱回流6小時，先減壓蒸除過量的二氯亞砜，再減壓蒸餾得2000Pa，94至96攝氏度淡黃色餾分9.25g，收率85%，由于4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰氯非常活潑，本發明將其密封保存在干燥器中備下一步的直接使用。[0054]實施例6化合物SZG-1的合成及結構鑒定將1.30g(5.5毫摩爾)4-甲基_2_胺基嘧啶和40毫升無水四氫呋喃加入到100毫升三口燒瓶中，冰浴下緩慢滴加O.90g4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰氯，然后滴加1.5毫升三乙胺作縛酸劑，常溫攪拌4小時，反應結束后，向反應體系中加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產物萃取出來，然后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，無水硫酸鈉干燥，過濾、減壓脫去溶劑得粗產物0.79g，收率65X;然后用200目至30Q目硅膠柱層析得純品，洗脫劑為60至90攝氏度的石油醚和乙酸乙酯，其體積9比為1:1。測定熔點？HNMR、元素分析和IR，其化學結構式和理化參數見表4和表5，由表4和表5可見，元素分析結果在允許的誤差范圍內，該化合物^NMR顯示與其結構相應的化學位移，H的數目與其結構吻合，IR出現相應的骨架吸收峰。實施例7化合物SZG-2的合成及結構鑒定將2.17g(0.01摩爾)2，4，5-三氯苯胺和10毫升無水四氫呋喃加入到50毫升三口燒瓶中，冰浴下緩慢滴加1.81g4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰氯，然后滴加1.5毫升三乙胺作縛酸劑，常溫攪拌4小時，反應結束后，向反應體系中加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產物萃取出來，然后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，無水硫酸鈉干燥，過濾、減壓脫去溶劑得粗產物1.42g，收率40X。然后用200目至300目硅膠柱層析得純品，洗脫劑為60至90攝氏度的石油醚和乙酸乙酯，其體積比為4:1。測定熔點？HNMR、元素分析和IR，其化學結構式和理化參數見表4和表5，由表4和表5可見，元素分析結果在允許的誤差范圍內，該化合物111NMR顯示與其結構相應的化學位移，H的數目與其結構吻合，IR出現相應的骨架吸收峰。實施例8化合物SZG-3的合成及結構鑒定將0.78g(5毫摩爾)2-胺基_4，6_二甲氧基嘧啶和5毫升無水四氫呋喃加入到50毫升三口燒瓶中，冰浴下緩慢滴加0.81g(5毫摩爾)4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰氯，然后滴加1.4毫升三乙胺作縛酸劑，常溫攪拌4小時，反應結束后，向反應體系中加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產物萃取出來，然后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，無水硫酸鈉干燥，過濾、減壓脫去溶劑得粗產物0.70g，收率50%。然后用200目至300目硅膠柱層析得純品，洗脫劑為60至90攝氏度的石油醚和乙酸乙酯，其體積比為6:1。測定熔點？HNMR和IR，其化學結構式和理化參數見表4和表5，由表4和表5可見，該化合物力NMR顯示與其結構相應的化學位移，H的數目與其結構吻合，IR出現相應的骨架吸收峰。實施例9化合物SZG-6的合成及結構鑒定將0.47g(5毫摩爾)2-胺基嘧啶和8毫升無水四氫呋喃加入到50毫升三口燒瓶中，然后加入1.4毫升三乙胺作縛酸劑，冰浴下緩慢滴加0.81g(5毫摩爾)4-甲基_1，2，3-噻二唑-5-甲酰氯，常溫攪拌4小時，反應結束后，向反應體系中加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產物萃取出來，然后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，無水硫酸鈉干燥，過濾、減壓脫去溶劑得粗產物0.50g，收率45.5%。然后用200目至300目硅膠柱層析得純品，洗脫劑為60至90攝氏度的石油醚和乙酸乙酯，其體積比為2:1。測定熔點和1！1NMR，其化學結構式和理化參數見表4和表5，由表4和表5可見，該化合物^NMR顯示與其結構相應的化學位移，H的數目與其結構吻合。實施例10化合物SZG-8的合成及結構鑒定將O.768(5毫摩爾)^丙基-4_甲基_2-胺基嘧啶和10毫升無水四氫呋喃加入到50毫升三口燒瓶中，然后加入0.14g(6毫摩爾)氫化鈉，加熱回流2小時，制備相應胺的鈉鹽懸浮液，在0至10攝氏度下緩慢滴加0.81g(5毫摩爾)4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰氯，常溫攪拌4小時，反應結束后，向反應體系中加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產物萃取出來，然后，無水硫酸鈉干燥，過濾、減壓脫去溶劑得粗產物0.75g，收率54.3X。用200目至300目硅膠柱層析得純品，洗脫劑為60至90攝氏度的石油醚和乙酸乙酯，其體積比為2:1。測定熔點？HNMR和元素分析，其化學結構式和理化參數見表4和表5，由表4和表5可見，元素分析結果在允許的誤差范圍內，該化合物力NMR顯示與其結構相應的化學位移，H的數目與其結構吻合。實施例11化合物SZG-ll的合成及結構鑒定將0.20g(1.6毫摩爾)2-氨基-2-甲基己腈和5毫升無水二氯甲烷加入到50毫升三口燒瓶中，然后加入0.4毫升三乙胺作縛酸劑，冰浴下緩慢滴加0.26g(l.6毫摩爾)4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰氯，常溫攪拌4小時。反應完后溶液分別用稀鹽酸，飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓脫去溶劑得粗產物0.26g，收率64.5%。然后用200目至300目硅膠柱層析得純品，洗脫劑為60至90攝氏度的石油醚和乙酸乙酯，其體積比為2:1。測定熔點和1！1NMR，其化學結構式和理化參數見表4和表5，由表4和表5可見，該化合物^NMR顯示與其結構相應的化學位移，H的數目與其結構吻合。實施例12化合物SZG-14的合成及結構鑒定將0.648(3毫摩爾)2-氨基-2_甲基_2_[3'，4']苯并二氧雜環戊烷基乙腈和5毫升無水二氯甲烷加入到50毫升三口燒瓶中，然后加入0.9毫升三乙胺作縛酸劑，冰浴下緩慢滴加O.51g(3毫摩爾)4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰氯，常溫攪拌4小時。反應完后溶液分別用稀鹽酸，飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓脫去溶劑得粗產物0.98g，收率99.0X。經200目至300目硅膠柱層析得純品，洗脫劑為60至90攝氏度的石油醚和乙酸乙酯，其體積比為1.2:1。測定熔點和1！1NMR，其化學結構式和理化參數見表4和表5，由表4和表5可見，該化合物'HNMR顯示與其結構相應的化學位移，H的數目與其結構吻合。實施例13化合物SZG-15的合成及結構鑒定將0.42g(5毫摩爾)2-氨基_2_甲基丙腈和5毫升無水二氯甲烷加入到50毫升三口燒瓶中，然后加入1.4毫升三乙胺作縛酸劑，冰浴下緩慢滴加0.81g(5毫摩爾)4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰氯，常溫攪拌4小時。反應完后溶液分別用稀鹽酸，飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓脫去溶劑得粗產物0.90g，收率85.3%。然后用200目至300目硅膠柱層析得純品，洗脫劑為60至90攝氏度的石油醚和乙酸乙酯，其體積比為3:2。測定熔點和1！1NMR，其化學結構式和理化參數見表4和表5，由表4和表5可見，該化合物力NMR顯示與其結構相應的化學位移，H的數目與其結構吻合。實施例14本發明的[1，2，3]噻二唑衍生物誘導煙草抗煙草花葉病毒的效果煙草生物測定試驗的結果見表6，表6表明，標準的植物誘導抗病激活劑BTH和噻酰菌胺以及本發明的大部分苯并[1，2，3]噻二唑衍生物在離體條件下均對TMV無抑制作用，但BTH能誘導煙草產生對TMV很好的抗性，噻酰菌胺也能誘導煙草產生對TMV的抗性，但其效果較BTH差；初步的生物測定結果表明，本發明的[1，2，3]噻二唑衍生物沒有直接的TMV抑制作用，也沒有誘導的活性。實施例15本發明的[1，2，3]噻二唑衍生物的抑菌活性本發明測試的常見植物病原真菌的名稱和代號見表7，由表7可見，這些菌種具有很好的代表性。菌體生長率法測定結果見表8，表8表明，在50微克/毫升時，本發明合成的化合物SZG-1、SZG-3、SZG-6和SZG-8中除SZG-6以外，三個化合物對油菜菌核病菌的抑制率均為100%。實施例16本發明的[1，2，3]噻二唑衍生物的殺蟲活性浸葉法測定結果表明，本發明合成的所有化合物和BTH以及TDL對蠶豆岈(AphislaburniKaltenbach)均無殺蟲活性，各處理的死亡試蟲與空白對照基本相當，均在2%左右。表4本發明化合物的理化參數化合物外觀分子式m.p./攝氏度產率％元素分析(實驗值/理論值)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>2.48(3H,s，CH3),2.93(3H,s,CH3),6-97~6.99(m,d,J=6.0,pyrimidine-H),8.48~8.50(lH,cU=6.0,pyritnidine-H),9.36(lH,s,N-H)(CDCl3)3.05(3H,s,CH3),7.57(lH,s,Ar-H),8.04-8.13(1H,s,N-H),8.68(lH，s，Ar-H)(CDC13)2.99(3H,S,CH3),3.82(6H,s,OCH3),5.83(lH，s,pyrimidine-H)(CDCl,)2.84(3H,s,CH;！),7.23—7.26(1H,t,>4.9Hz,pyrimidine"H)，8.61-8.63(2H,d，風9Hz，pyrimidine-H)(CDCl])0.94~0.99(3H,t,./=7.4Hz,CH3)，l.7卜1.79(2H,m,CH2),2.28(3H,s，pyrimidine-CH3),2.57(3H,s:CH3)，4.15~4.20(2H,>=7.5m，CH2)，6.86~6.87(iH,cU=5.0Hz'pyrimidine-H),8.328.33(lH,d,*5.0Hz,pyrimidine-H)(CDCl])0.92-0.98(3H,t,J".0Hz,CH3),1.39~1.46(2H，m,CH2),1.47-1.54(2H,m，CH2),1.76(3H，s,CH3)，1.93-1.98(2H，m,CH2),2.S6(3H，s,CH3),6.72(m,s，N-H)(CDC13)1.77(3H,s,CH3)，2.79(3H,s,CH3),5.90(lH,s,N-H),5.92(2H,s，CH2),6.64~6.67(lH,d,Ar-H),6.74~6.75(iH,d,Ar-H),6.76~6.77(lH,d，Ar-H)(CDC13)1.76(6H,s,CH3),2.87(3H,s,CH3),6.00(lH,s,N-H)(CDCl3)_3416,3080,2994.2930,662,1598,569，1455,1380,1283,1209,828,787'735,6S4，6593247,3127,3060,3011，1645,1566，1521,1458,1362,1243"1212,1075,卯0'885，861,661,6443213,3150,3098,3063,2942,1716,1618,1574,1376,1223,1170,996.813,750未測定未測定未測定未測定未測定表6本發明中的化合物誘導煙草抗煙草花葉病毒的活性[0092]W^i稱濃度微克/毫升離體抗病毒效果％葉面誘導效果。/。|o.i毫摩爾/升葉面W專效果。/。注表中數據是5次實驗的平均結果表7本發明中的測試的植物病原真菌的代號和名稱代號中文名稱學名代號中文名稱學名A甜菜褐斑病菌Q蘋果腐爛病菌B水稻惡苗病菌R香蔑炭疽病菌C黃似i荽病菌S香蕉褐緣灰斑病菌Cerca;oramw咖D花生褐斑病菌U西瓜炭癥病菌E聲,莖枯病菌V蘋果炭疽病菌F番茄早疫病菌'w黃瓜炭疽病菌G小麥赤實病菌X梨黑斑病菌水稻曲病菌棉枯棉花枯萎病菌黃瓜灰審病菌棉黃棉花黃荽病菌N油菜菌核病茵小小為玉米小班病0芊果輪斑病菌AEA馬鈴薯晚疫病表8本發明中的化合物的抑菌活性13BTH1004±2TDL5008±3SZG-15000SZG-25000SZG-45000SZG-65000SZG-85000SZG-ll5000SZG-145000SZG-1550006淀&院淀淀淀淀淀+1測測測測測測測測l未未未未未未未未<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>權利要求[1，2，3]噻二唑衍生物，其特征在于具有以下的化學結構通式式中R1是H時，R2是4-甲基嘧啶-2-基、嘧啶-2-基或4，6-二甲氧基嘧啶-2-基；R1是正丙基時，R2是4-甲基嘧啶-2-基。F2007101109800C00011.tif2.權利要求l所述的[1，2，3]噻二唑衍生物的合成方法，其特征在于總的合成路線<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>具體分為以下步驟A.4-甲基[1，2，3]噻二唑-5-甲酰氯的制備在室溫下將碳酸二甲酯與水合肼反應20小時得到肼基甲酸甲酯，由肼基甲酸甲酯制備得到3-(甲氧基羰基-腙)-丁酸乙酯，然后由3-(甲氧基羰基-腙)-丁酸乙酯合成得到4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酸乙酉旨，將4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酸乙酯水解制備得到4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酸；將9.66g4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酸和29毫升二氯亞砜加入到100毫升三口圓底燒瓶中，80攝氏度下加熱回流6小時，減壓蒸除過量的二氯亞砜，減壓蒸餾得2000Pa，94至96攝氏度淡黃色餾分即為4-甲基_1，2，3_噻二唑-5-甲酰氯，密封保存在干燥器中備下一步反應直接使用，上述化合物的用量按相應比例擴大或縮小；B.權利要求1所述的[1，2，3]噻二唑衍生物的制備在100毫升三口燒瓶中加入5毫摩爾的胺類化合物R^NH和一定量的絕對無水四氫呋喃或無水二氯甲烷，冰浴下緩慢滴加5毫摩爾4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰氯的15毫升絕對無水四氫呋喃或無水二氯甲烷溶液，然后滴加1.5毫升三乙胺作縛酸劑，常溫攪拌4小時，反應結束后，向反應體系中加入飽和氯化鈉水溶液，用乙酸乙酯將產物萃取出來，然后，分別用稀鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，無水硫酸鈉干燥，過濾、減壓脫去溶劑得粗產品，然后用200目至300目硅膠柱層析得純品，洗脫劑為60至90攝氏度的石油醚和乙酸乙酯，根據產物的不同，其體積比為6:l至3:2之間選擇一定的比例，上述化合物的用量按相應比例擴大或縮小。3.權利要求l所述的[1，2，3]噻二唑衍生物在抑制植物病原真菌生長中的應用。4.權利要求l所述的[1，2，3]噻二唑衍生物在制備抗煙草花葉病毒劑中的用途。5.權利要求l所述的[1，2，3]噻二唑衍生物在誘導煙草抗煙草花葉病毒中的應用。6.權利要求l所述的[1，2，3]噻二唑衍生物在制備殺蟲劑中的用途。專利摘要本發明提供了制備一類4-甲基-1，2，3-噻二唑-5-甲酰胺類化合物及其合成方法和農藥生物活性的篩選，篩選體系包括直接的抗煙草花葉病毒的活性和誘導煙草抗煙草花葉病毒的活性以及殺蟲和抑菌活性的測定，涉及含1，2-二唑的雜環化合物，具體為1，2，3-噻二唑，它們具有如下的化學結構通式其中包括8種含雜環的1，2，3-噻二唑-5-甲酰胺類衍生物。本發明公開了這些化合物的化學結構和合成方法及這些[1，2，3]噻二唑衍生物分別抗TMV病毒的使用方法和用途和分別誘導煙草抗TMV病毒的使用方法和用途，還公開了這些化合物的分別殺蟲和分別抑制植物病原真菌生長的使用方法和用途。文檔編號C07D285/06GKCN101066972B發布類型授權專利申請號CN200710110980公開日2010年6月2日申請日期2006年2月20日發明者劉秀峰,石祖貴,艾應偉,范志金,范志銀申請人:南開大學導出引文BiBTeX,EndNote,RefMan專利引用(2),非專利引用(1),