專利名稱:光合細菌制劑的制備方法
技術領域：
本發明提供一種光合細菌制劑的制備方法。
技術背景公開號為CN1104250A的中國發明專利申請公開說明書披露了一種高活性的渾球紅假單胞菌(Rhodopseudomonas Sphaeroides)P4株和沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas Palustris)1號株混合制劑的制備方法，該方法為在菌種培養液中接種30％以上的兩株菌株的混合菌群，接種后的培養液在溫度為26～32℃、光照強度為3000～5000LX、PH為6～8的厭氧條件下培養48～72小時，然后將培養出的菌液在敞開體系中、自然光照下，根據菌液中的碳源殘存量適時添加一次以上的碳源，在溫度為20～35℃、好氧充氣條件下培養72～120小時后，收集菌液分裝，制成液體微生物混合制劑。可見，對于經過厭氧培養的菌液來說，在后續的制備過程中需根據該菌液中的碳源殘存量適時添加一次以上的碳源，并在好氧充氣條件下進行培養，這樣，一則需添置碳源檢測設備和充氧設備，以至設備投資大，生產成本增加，二則需憑操作工的實踐經驗適時進行多次檢測及添加碳源，以至操作繁瑣、使用起來很不方便，產品質量難以保證。
發明內容
本發明的目的在于提供一種生產成本低、使用方便的光合細菌制劑的制備方法。
本發明所提供的光合細菌制劑的制備方法依次包括以下工藝步驟光合細菌與菌種培養液按容積比為(0.8～1)∶(1～1.2)的比例混合得混合液，混合液在溫度為20～38℃、光照強度為2000～6000LX、PH為6～7的厭氧條件下培養100～140小時，然后將厭氧條件下培養出的菌液在溫度為20～38℃的條件下按以下方式培養24～72小時，所述方式為每日凌晨4時至當日下午5時在自然光照的厭氧條件下培養、每日下午5時至次日凌晨4時在敞開體系中培養，當菌液的活菌濃度達到5×109個/ml以上時，制成光合細菌制劑。
所述光合細菌至少為紅假單胞菌屬(Rhodopseudomonas)、著色菌屬(Chroiatium)中任意一屬或兩屬的菌株。
所述菌種培養液的組成為乙酸鈉250～350g，氯化銨13～17g，磷酸氫二鉀21～29g，硫酸鎂9～11g，氯化鈉4.5～5.5g，鉬酸銨45～55g，酵母浸膏7.4～8.6g，氯化鈣2.7～3.3g，三氯化鐵1.2g，水30000～50000g。
以上所說的光合細菌均可外購。
以上所說的敞開體系是指敞口的培養容器。
以上所說的菌種培養液，其組成成分之一的水采用凈清河水、井水、自來水中任意一種均可，但凈清河水、井水中諸如懸浮物含量、BOD值、大腸桿菌數等各項指標，均需符合出廠自來水的標準。
采用以上的方法后，對于厭氧條件下培養出的菌液來說，在其后續的制備工藝步驟中無需添加碳源，也無需在好氧充氣條件下進行培養，這樣，一則不需添置碳源檢測設備和充氧設備，以至設備投資小，生產成本低，二則降低了操作工的操作難度，以至操作簡單、使用起來相當方便。
具體實施方式
下面通過實施例更好地說明本發明，但它們不是對本發明的限定。
實施例一從惠州市惠山水生生物制品有限公司分別購得紅假單胞菌(Rhodopseudomonas sp.)的DL·1-3菌株及著色菌(Chroiatium sp.)的HQ菌株，將這兩個菌株按容積比1∶1的比例混合得混合菌群。需要說明是惠州市惠山水生生物制品有限公司從中國科學院水生生物研究所處引進了公開號為CN1162016A的中國發明專利申請技術，并進行了工業化轉化生產及銷售。在公開號為CN1162016A的中國發明專利申請公開說明書中披露了紅假單胞菌(Rhodopseudomonas sp.)的DL·1-3菌株及著色菌(Chroiatiumsp.)的HQ菌株的菌種保存編號分別為CCTCCM 96018和CCTCCM96017。惠州市惠山水生生物制品有限公司地址為廣東省惠州市環城西一路二十號A座四樓；配制菌種培養液，其組成為乙酸鈉350g，氯化銨17g，磷酸氫二鉀29g，硫酸鎂11g，氯化鈉5.5g，鉬酸銨55g，酵母浸膏8.6g，氯化鈣3.3g，三氯化鐵1.2g，凈清河水50000g；用購得并經混合的混合菌群與菌種培養液按容積比為0.8∶1.2的比例混合得混合液并置于潔凈的帶蓋塑料桶中，混合液在溫度為38℃、光照強度為6000LX、PH為7的厭氧條件(即蓋上所述塑料桶的桶蓋，以下實施例同此)下培養100小時；將厭氧條件下培養出的菌液在溫度為30～38℃的條件下按以下方式培養24小時，所述方式為當日凌晨4時至當日下午5時在自然光照的厭氧條件下培養、當日下午5時至次日凌晨4時在敞開體系(即掀去所述塑料桶的桶蓋，以下實施例同此)中培養，當菌液的活菌濃度達到5×109個/ml以上時，制成光合細菌制劑。
實施例二從惠州市惠山水生生物制品有限公司購得紅假單胞菌(Rhodopseudomonas sp.)的DL·1-3菌株；配制菌種培養液，其組成為乙酸鈉300g，氯化銨15g，磷酸氫二鉀25g，硫酸鎂10g，氯化鈉5g，鉬酸銨50g，酵母浸膏8g，氯化鈣3g，三氯化鐵1.2g，井水40000g；用購得的菌株與菌種培養液按容積比為0.9∶1.1的比例混合得混合液并置于潔凈的帶蓋塑料桶中，混合液在溫度為29℃、光照強度為4000LX、PH為6.5的厭氧條件下培養120小時；將厭氧條件下培養出的菌液在溫度為25～30℃的條件下按以下方式培養48小時，所述方式為每日凌晨4時至當日下午5時在自然光照的厭氧條件下培養、每日下午5時至次日凌晨4時在敞開體系中培養，當菌液的活菌濃度達到5×109個/ml以上時，制成光合細菌制劑。
實施例三從惠州市惠山水生生物制品有限公司購得著色菌(Chroiatium sp.)的HQ菌株；配制菌種培養液，其組成為乙酸鈉250g，氯化銨13g，磷酸氫二鉀21g，硫酸鎂9g，氯化鈉4.5g，鉬酸銨45g，酵母浸膏7.4g，氯化鈣2.7g，三氯化鐵1.2g，自來水30000g；用購得的菌株與菌種培養液按容積比為1∶1的比例混合得混合液并置于潔凈的帶蓋塑料桶中，混合液在溫度為20℃、光照強度為2000LX、PH為6的厭氧條件下培養140小時；將厭氧條件下培養出的菌液在溫度為20～25℃的條件下按以下方式培養72小時，所述方式為每日凌晨4時至當日下午5時在自然光照的厭氧條件下培養、每日下午5時至次日凌晨4時在敞開體系中培養，當菌液的活菌濃度達到5×109個/ml以上時，制成光合細菌制劑。
權利要求
1.光合細菌制劑的制備方法，它依次包括以下工藝步驟(1)光合細菌與菌種培養液按容積比為(0.8～1)∶(1～1.2)的比例混合得混合液；(2)混合液在溫度為20～38℃、光照強度為2000～6000LX、PH為6～7的厭氧條件下培養100～140小時；(3)將(2)中培養出的菌液在溫度為20～38℃的條件下按以下方式培養24～72小時，所述方式為每日凌晨4時至當日下午5時在自然光照的厭氧條件下培養、每日下午5時至次日凌晨4時在敞開體系中培養，當菌液的活菌濃度達到5×109個/ml以上時，制成光合細菌制劑。
2.根據權利要求
1所述的光合細菌制劑的制備方法，其特征在于所述光合細菌至少為紅假單胞菌屬(Rhodopseudomonas)、著色菌屬(Chroiatium)中任意一屬或兩屬的菌株。
3.根據權利要求
1所述的光合細菌制劑的制備方法，其特征在于所述菌種培養液的組成為乙酸鈉250～350g，氯化銨13～17g，磷酸氫二鉀21～29g，硫酸鎂9～11g，氯化鈉4.5～5.5g，鉬酸銨45～55g，酵母浸膏7.4～8.6g，氯化鈣2.7～3.3g，三氯化鐵1.2g，水30000～50000g。
專利摘要
本發明提供一種光合細菌制劑的制備方法,該方法為:光合細菌與菌種培養液按容積比為(0.8～1)∶(1～1.2)的比例混合得混合液,混合液在溫度為20～38℃、光照強度為2000～6000LX、PH為6～7的厭氧條件下培養100～140小時,然后將厭氧條件下培養出的菌液在溫度為20～38℃的條件下按以下方式培養24～72小時,所述方式為:每日凌晨4時至當日下午5時在自然光照的厭氧條件下培養、每日下午5時至次日凌晨4時在敞開體系中培養,當菌液的活菌濃度達到5×10
文檔編號C12N1/20GKCN1384188SQ02110316
公開日2002年12月11日 申請日期2002年4月30日
發明者許繼光 申請人:許繼光導出引文BiBTeX, EndNote, RefMan