本發明涉及拮抗耐萬古霉素糞腸球菌的噬菌體篩選,更具體地說是涉及一種噬菌體a149及其在拮抗耐萬古霉素糞腸球菌中的應用。
背景技術:
1、糞腸球菌( enterococcus?faecalis,?efs)是一種革蘭氏陽性兼性厭氧細菌,在人和各種動物的腸道中廣泛定植,被認為是一種常見的腸道共生菌。但efs也可作為機會致病菌,引起菌血癥、心內膜炎、尿道和傷口感染等疾病。隨著抗生素的廣泛使用,efs的耐藥性日趨嚴重,尤其是耐萬古霉素腸球菌(vancomycin-resistant?enterococcus,vre)的出現,給臨床vre感染的治療帶來了困難。研究表明腸道內的vre定植可能不引起癥狀,但可持續存在較長的時間,成為vre的儲存庫,具有引起患者和他人感染的巨大風險。因此,開發針對vre感染的抗生素替代方案迫在眉睫。
2、噬菌體是一種能夠感染并裂解細菌的病毒,可以在不損害其它微生物物種的情況下,靶向消滅特定細菌,在治療耐藥菌感染方面具有獨特的優勢。此外,噬菌體容易獲得,殺菌速度快,對真核細胞無害安全,具有與其他抗菌藥物如抗生素、抗菌肽等的協同抑菌效應,是一種十分有前景的抗生素替代療法。
3、如何提供一種能夠裂解耐萬古霉素的糞腸球菌的烈性噬菌體是本領域技術人員亟需解決的技術問題。
技術實現思路
1、有鑒于此,本發明篩選出一株針對耐萬古霉素的efs?v583的烈性噬菌體,對其進行生物學特性及全基因組測序分析,并評價其在體外和體內的抗菌能力,以期為開發efs感染的噬菌體療法奠定基礎。
2、為了實現上述目的,本發明采用如下技術方案:
3、本發明實施例第一方面提供了一種拮抗耐萬古霉素糞腸球菌的噬菌體a149,所述噬菌體 (enterococcus?phage)a149保藏編號為cctcc?no:?m?20241804?,于2024年8月16日保藏于中國典型培養物保藏中心,保藏地址為中國.武漢.武漢大學。
4、本發明實施例第二方面提供了所述的噬菌體a149在制備治療和/或預防耐萬古霉素糞腸球菌感染的制劑中的應用。
5、本發明實施例第三方面提供了治療和/或預防耐萬古霉素糞腸球菌感染的制劑,包括所述的噬菌體a149。
6、經由上述的技術方案可知,與現有技術相比,本發明以耐萬古霉素的糞腸球菌v583為宿主菌,篩選到一株可以特異性裂解糞腸球菌的噬菌體,對噬菌體a149進行多種細菌的裂解譜測定,結果顯示對糞腸球菌具有廣譜的裂解活性,對所測試的糞腸球菌有86.4%的覆蓋率,對所測試的屎腸球菌、金黃色葡萄球菌、單增李斯特菌和大腸桿菌均無裂解活性;而且小鼠腸道實驗顯示,在噬菌體a149治療之后,治療組與對照組在治療后的兩天(day3,4)均有顯著差異,在第二天可降低v583載量達1.3個數量級。該結果證實a149可有效降低v583在小鼠腸道中的定植。
1.一種拮抗耐萬古霉素糞腸球菌的噬菌體a149,其特征在于,所述噬菌體(enterococcus?phage)a149保藏編號為cctcc?no:?m?20241804?,于2024年8月16日保藏于中國典型培養物保藏中心,保藏地址為中國.武漢.武漢大學。
2.權利要求1所述的噬菌體a149在制備治療和/或預防耐萬古霉素糞腸球菌感染的制劑中的應用。
3.治療和/或預防耐萬古霉素糞腸球菌感染的制劑,其特征在于,包括權利要求1所述的噬菌體a149。