本發明屬于生物技術領域,涉及一種糖苷水解酶抑制劑,具體涉及一種牡蠣蛋白定向制備糖苷水解酶抑制劑的方法。
背景技術:
牡蠣是一種珍貴海洋貝類,具有很高的營養價值,牡蠣中含有豐富的蛋白質,必需氨基酸、糖原、牛磺酸、維生素、礦物質以及鋅硒等具有特殊生理作用的微量元素,是天然的活性物質寶庫,有“海洋牛奶”之稱。其中,牡蠣蛋白質的含量高,活性優良,已有研究表明牡蠣蛋白具有促進免疫、調節激素、降血壓、降血脂等功能。
近年來,美國、歐洲、日本等國家采用現代生物技術、食品加工高新技術、新型化學化工等技術手段,對牡蠣中功能活性成分進行研究開發,成功研制了以牡蠣為主要成分的保健食品或第三代功能性食品,已經生產出了膠囊型、液體型、片劑型等各種類型的產品。有研究表明在發酵的牡蠣調味料中分離出血管緊張素轉化酶抑制劑,該物質可以有效降低小鼠的高血壓,具有較好的降壓作用。
技術實現要素:
為克服現有技術的不足,本發明的目的在于提供一種牡蠣蛋白定向制備糖苷水解酶抑制劑的方法,可以減少酶使用劑量,無環境污染,制取產物純度高、活性好,可成為一種制備降糖藥的有效方法。
本發明的目的是通過如下技術方案實現的:牡蠣蛋白定向制備糖苷水解酶抑制劑的方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)以新鮮牡蠣為原料,去殼后將牡蠣肉洗凈,采用低溫物理超微破碎技術對牡蠣肉進行預處理,并利用亞臨界萃取技術脫除其中脂類、肝糖等物質,得到預處理液a;
(2)所述預處理液a經過生物酶技術進行酶解得到酶解液b;
(3)所述酶解液b采用bp網絡模型經過滅酶、離心、超濾得到粗分級液c;
(4)所述粗分級液c進行納濾純化、濃縮凍干得到糖苷水解酶抑制劑。
對上述技術方案進一步的改進:所述生物酶技術所用酶為胰蛋白酶。
對上述技術方案進一步的改進:所述bp網絡模型以連接權數2-10倍設定訓練樣本數。
對上述技術方案進一步的改進:所述酶解液離心1-3次。
對上述技術方案進一步的改進:所述粗分級液納濾純化,截留分子量采用150dalton-300dalton。
本發明的有益效果:以新鮮牡蠣為原料,去殼后將牡蠣肉洗凈,采用低溫物理超微破碎技術對牡蠣肉進行預處理,并利用亞臨界萃取技術脫除其中脂類、肝糖等物質;經過生物酶技術進行酶解;經過滅酶、離心、超濾、納濾純化、濃縮凍干得到糖苷水解酶抑制劑。可以減少酶使用劑量,無環境污染,制取產物純度高、活性好,可成為一種制備降糖藥的有效方法。
具體實施方式
本發明牡蠣蛋白定向制備糖苷水解酶抑制劑的方法的具體實施方式,具體包括以下步驟:
(1)以新鮮牡蠣為原料,去殼后將牡蠣肉洗凈,采用低溫物理超微破碎技術對牡蠣肉進行預處理,并利用亞臨界萃取技術脫除其中脂類、肝糖等物質,得到預處理液a;
(2)所述預處理液a經過生物酶技術進行酶解得到酶解液b;
(3)所述酶解液b采用bp網絡模型經過滅酶、離心、超濾得到粗分級液c;
(4)所述粗分級液c進行納濾純化、濃縮凍干得到糖苷水解酶抑制劑。
下面結合具體實施例對本發明做進一步說明。
實施例1:
牡蠣蛋白定向制備糖苷水解酶抑制劑的方法,通過以下步驟制備:
(1)以新鮮牡蠣為原料,去殼后將牡蠣肉洗凈,采用低溫物理超微破碎技術對牡蠣肉進行預處理,并利用亞臨界萃取技術脫除其中脂類、肝糖等物質,得到預處理液;
(2)預處理液經過生物酶技術進行酶解,選用胰蛋白酶,水解溫度45℃,加酶量2000u/g,水解時間1h,料液比1:1,得到酶解液;
(3)酶解液以bp網絡模型連接權數6倍設定訓練樣本數,經過滅酶、離心(10000rpm,10min,兩次)、超濾(截留分子量為10000超濾柱)得到粗分級液;
(4)粗分級液進行納濾純化(脫鹽,截留分子量300dalton)、濃縮凍干得到糖苷水解酶抑制劑。
實施例2:
牡蠣蛋白定向制備糖苷水解酶抑制劑的方法,通過以下步驟制備:
(1)以新鮮牡蠣為原料,去殼后將牡蠣肉洗凈,采用低溫物理超微破碎技術對牡蠣肉進行預處理,并利用亞臨界萃取技術脫除其中脂類、肝糖等物質,得到預處理液;
(2)預處理液經過生物酶技術進行酶解,選用胰蛋白酶,水解溫度50℃,加酶量3000u/g,水解時間2h,料液比1:1,得到酶解液;
(3)酶解液以bp網絡模型連接權數8倍設定訓練樣本數,經過滅酶、離心(10000rpm,10min,三次)、超濾(截留分子量為10000超濾柱)得到粗分級液;
(4)粗分級液進行納濾純化(脫鹽,截留分子量150dalton)、濃縮凍干得到糖苷水解酶抑制劑。