本發(fā)明涉及玻片染色液領(lǐng)域，尤其是一種乳酸酚棉藍(lán)染色液及其制備方法。
背景技術(shù)：
真菌屬于真核生物，沒有質(zhì)體，營養(yǎng)方式為吸收，無吞噬作用，通常其細(xì)胞壁含有甲殼質(zhì)和β-葡聚糖?？梢鹑祟悺?dòng)物的疾病，稱為真菌病，還可引起植物的疾病、人類過敏性疾病和真菌毒素中毒癥。
在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，為了了解真菌的結(jié)構(gòu)，通常需要對(duì)載有真菌的玻片進(jìn)行染色?，F(xiàn)有的而普通封片膠（中性樹脂）的方法只適用于干片的封片，無法對(duì)染色后的濕片進(jìn)行封片，適用范圍受到了限制，且染色后的保持時(shí)間較短。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供一種乳酸酚棉藍(lán)染色液及其制備方法，能很好地永久保存真菌濕片或玻片培養(yǎng)，適用范圍更廣、保存時(shí)間更久。
根據(jù)本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提供一種乳酸酚棉藍(lán)染色液，包括10-15份pva、20-40份乳酸、20-40份苯酚和0.05-0.1份苯胺藍(lán)。
優(yōu)選的，pva、乳酸、苯酚和苯胺藍(lán)的最佳質(zhì)量比是12:30:30:0.075。
根據(jù)本發(fā)明的第二方面，本發(fā)明提供一種乳酸酚棉藍(lán)染色液的制備方法，包括如下步驟：將10-15份pva粉末加入盛有水的容器中，對(duì)容器進(jìn)行加熱，同時(shí)，使用磁棒來攪拌；再依次加入20-40份乳酸、20-40份苯酚結(jié)晶、0.05-0.1份苯胺藍(lán)；持續(xù)對(duì)溶液進(jìn)行加熱并使用磁棒攪拌混勻溶液，直至溫度達(dá)70-90℃，停止加熱，制得乳酸酚棉藍(lán)染色液。
優(yōu)選的，pva、乳酸、苯酚和苯胺藍(lán)的最佳質(zhì)量比是12:30:30:0.075。
優(yōu)選的，容器中盛放的為去離子水。
優(yōu)選的，加熱至80℃時(shí)，停止加熱。
優(yōu)選的，還包括如下步驟：將制備的乳酸酚棉藍(lán)染色液分裝到滴瓶中，蓋緊瓶蓋，室溫保存。
本發(fā)明的有益效果是：
1.可以對(duì)染色后的濕片和干片進(jìn)行封片，適用范圍更廣。
2.能很好地永久保存真菌濕片或玻片培養(yǎng)，在平坦的表面晾干至少24小時(shí)，這些封片劑永久存在，不會(huì)溶解于乙醚、二甲苯或乙醇。經(jīng)固定的真菌結(jié)構(gòu)可以清晰的維持?jǐn)?shù)年，保存效果更好。
3.可以在顯微鏡的低倍、高倍以及油鏡下觀察真菌菌絲及孢子結(jié)構(gòu)，而原有的染色方法只能低倍和高倍下觀察。
4.集染色的功能和可保存?zhèn)錂z功能于一體,普通染液只有染色功能。
具體實(shí)施方式
下面通過具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。
本發(fā)明提供一種乳酸酚棉藍(lán)染色液，包括10-15份pva、20-40份乳酸、20-40份苯酚和0.05-0.1份苯胺藍(lán)。其中，pva試劑用作加強(qiáng)染色層與玻理之間的粘附力，密封阻隔染色層與空氣接觸氧化。苯酚試劑用作固定增強(qiáng)菌絲、孢子與染色劑的親和力，提高染色效果，另有消毒作用。乳酸試劑用作調(diào)節(jié)ph，增加溶解性。苯胺藍(lán)試劑作為著色劑，起到染色的作用。
本發(fā)明還提供一種乳酸酚棉藍(lán)染色液的制備方法，包括如下步驟：將10-15份pva粉末加入盛有水的容器中，容器具體可以是燒杯、試管等。對(duì)容器進(jìn)行加熱，具體可以將燒杯放置到加熱板上。同時(shí)，使用磁棒來攪拌，吸附溶液中的金屬離子。再依次加入20-40份乳酸、20-40份苯酚結(jié)晶、0.05-0.1份苯胺藍(lán)；持續(xù)對(duì)溶液進(jìn)行加熱并使用磁棒攪拌混勻溶液，直至溫度達(dá)70-90℃，停止加熱，制得乳酸酚棉藍(lán)染色液。其中，可以在容器中加入一個(gè)溫度計(jì)來檢測(cè)溫度。容器中盛放的為去離子水，防止水中的金屬離子影響染色液的染色效果。在停止加熱后，可將制備的乳酸酚棉藍(lán)染色液進(jìn)行冷卻，之后分裝到滴瓶中，蓋緊瓶蓋，室溫保存。
實(shí)施例1：
一種乳酸酚棉藍(lán)染色液，包括10份pva、20份乳酸、20份苯酚和0.05份苯胺藍(lán)。
對(duì)應(yīng)的，該實(shí)施例的乳酸酚棉藍(lán)染色液的制備方法如下：
將10份pva粉末加入50m的去離子水的燒杯里，把燒杯放在加熱的可以攪拌的板上，加入一個(gè)磁棒用來混勻；燒杯中放入一個(gè)溫度計(jì)來監(jiān)測(cè)溫度；依次加入20份乳酸、20份苯酚結(jié)晶和0.05份苯胺藍(lán)。加熱并混勻溶液直至溫度達(dá)70、75、80、85或90℃，從加熱板上移除。將制備的乳酸酚棉藍(lán)染色液分裝到小的滴瓶中，蓋緊瓶蓋，室溫保存。
實(shí)施例2：
一種乳酸酚棉藍(lán)染色液，包括12份pva、30份乳酸、30份苯酚和0.075份苯胺藍(lán)。
對(duì)應(yīng)的，該實(shí)施例的乳酸酚棉藍(lán)染色液的制備方法如下：
將12份pva粉末加入50m的去離子水的燒杯里，把燒杯放在加熱的可以攪拌的板上，加入一個(gè)磁棒用來混勻；燒杯中放入一個(gè)溫度計(jì)來監(jiān)測(cè)溫度；依次加入30份乳酸、30份苯酚結(jié)晶和0.075份苯胺藍(lán)。加熱并混勻溶液直至溫度達(dá)70、75、80、85或90℃，從加熱板上移除。將制備的乳酸酚棉藍(lán)染色液分裝到小的滴瓶中，蓋緊瓶蓋，室溫保存。
實(shí)施例3：
一種乳酸酚棉藍(lán)染色液，包括15份pva、40份乳酸、40份苯酚和0.1份苯胺藍(lán)。
對(duì)應(yīng)的，該實(shí)施例的乳酸酚棉藍(lán)染色液的制備方法如下：
將15份pva粉末加入50m的去離子水的燒杯里，把燒杯放在加熱的可以攪拌的板上，加入一個(gè)磁棒用來混勻；燒杯中放入一個(gè)溫度計(jì)來監(jiān)測(cè)溫度；依次加入40份乳酸、40份苯酚結(jié)晶和0.1份苯胺藍(lán)。加熱并混勻溶液直至溫度達(dá)72、76、84、87或90℃，從加熱板上移除。將制備的乳酸酚棉藍(lán)染色液分裝到小的滴瓶中，蓋緊瓶蓋，室溫保存。
以上內(nèi)容是結(jié)合具體的實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所作的進(jìn)一步詳細(xì)說明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說明。對(duì)于本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡單推演或替換。