技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食用菌菌種培育技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種菌種培養(yǎng)基，特別是一種雙孢菇菌種檢測(cè)專用培育基。
背景技術(shù)：
：
雙孢菇菌種按繁育代數(shù)分為三種：母種、原種和栽培種。母種為實(shí)驗(yàn)室培育出來(lái)的第一代菌種；原種由母種接種培育而來(lái)，屬于第二代菌種；栽培種由原種接種培育而來(lái)，屬于第三代菌種，栽培種就是雙孢菇大規(guī)模生產(chǎn)所使用的菌種。這種三級(jí)繁育的方式，可以滿足由少量實(shí)驗(yàn)室菌種向大規(guī)模生產(chǎn)的普及。在此過(guò)程中，需要定期對(duì)母種、原種和栽培種進(jìn)行檢測(cè)，原種、栽培種的性狀和母種相同，防止菌種變異或雜菌污染，檢測(cè)方式就是對(duì)母種、原種和栽培種進(jìn)行抽樣，接種到裝在培養(yǎng)皿里培養(yǎng)基上，放入恒溫箱中培養(yǎng)。定期觀察生長(zhǎng)狀況和菌絲形態(tài)。目前大多采用普通的土豆-瓊脂培養(yǎng)基，其營(yíng)養(yǎng)成分貧瘠，不利于雙孢菇菌種生長(zhǎng)，培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分不足可能會(huì)對(duì)雙孢菇菌種檢測(cè)造成干擾。雙孢菇大規(guī)模生產(chǎn)普遍使用雙孢菇二次發(fā)酵培養(yǎng)料，不同種類的雙孢菇二次發(fā)酵培養(yǎng)料成分大同小異，制備方法都是將原材料經(jīng)過(guò)兩次發(fā)酵得到。雙孢菇補(bǔ)硒作用僅次于靈芝的菌類，硒被稱為微量元素中的“抗癌之王”，雙孢菇的生長(zhǎng)需要硒，然而通用的普通培養(yǎng)基幾乎不含硒，無(wú)法滿足雙孢菇菌種的生長(zhǎng)需要。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
：
本發(fā)明目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)存在的缺點(diǎn)，尋求提供一種雙孢菇菌種檢測(cè)專用培育基，提供滿足雙孢菇菌種生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)成分。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明涉及的雙孢菇菌種檢測(cè)專用培育基由以下工藝制備而成，具體步驟包括：
步驟1：取一升淘米水，煮沸；
步驟2：向步驟1所述的淘米水中加入黑麥粉50克和雙孢菇二次發(fā)酵培養(yǎng)料50克，得到固液混合物；
步驟3：加熱固液混合物，保持沸騰狀態(tài)20分鐘；
步驟4：停止加熱，用三層60目的紗布對(duì)固液混合物進(jìn)行過(guò)濾，得到濾液；
步驟5：向?yàn)V液中加蒸餾水，使濾液的體積補(bǔ)足至1升；
步驟6：向?yàn)V液中加入瓊脂20克、蛋白胨5克、淀粉5克、磷酸二氫鉀3克、硫酸鎂1.5克、硫酸亞鐵1克、硝酸鈣1克、葡萄糖20克，得到液態(tài)的培養(yǎng)基；
步驟7：將培養(yǎng)基放入高壓蒸汽滅菌器內(nèi)，設(shè)置壓力為105～135kpa，溫度為121～126℃，進(jìn)行15～30分鐘的高壓蒸汽滅菌；
步驟8：將液態(tài)的培養(yǎng)基倒進(jìn)無(wú)菌培養(yǎng)皿，在室溫下冷卻，培養(yǎng)基凝固為固態(tài)，得到雙孢菇菌種檢測(cè)專用的培養(yǎng)基。
優(yōu)選的，淘米水是指普通大米第一次淘洗產(chǎn)生的水。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，營(yíng)養(yǎng)成分豐富，淘米水含有維生素、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分，黑麥粉提供了雙孢菇生長(zhǎng)所需要的硒元素，其他無(wú)機(jī)鹽的添加滿足了雙孢菇菌種生長(zhǎng)對(duì)氮磷鉀鈣鐵鎂的需求，適合實(shí)驗(yàn)室條件下對(duì)雙孢菇菌種檢測(cè)的培養(yǎng)需要。
具體實(shí)施方式：
下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步描述。
實(shí)施例：本發(fā)明涉及的雙孢菇菌種檢測(cè)專用培育基由以下工藝制備而成，具體步驟包括：
步驟1：取一升淘米水，煮沸；
步驟2：向步驟1所述的淘米水中加入黑麥粉50克和雙孢菇二次發(fā)酵培養(yǎng)料50克，得到固液混合物；
步驟3：加熱固液混合物，保持沸騰狀態(tài)20分鐘；
步驟4：停止加熱，用三層60目的紗布對(duì)固液混合物進(jìn)行過(guò)濾，得到濾液；
步驟5：向?yàn)V液中加蒸餾水，使濾液的體積補(bǔ)足至1升；
步驟6：向?yàn)V液中加入瓊脂20克、蛋白胨5克、淀粉5克、磷酸二氫鉀3克、硫酸鎂1.5克、硫酸亞鐵1克、硝酸鈣1克、葡萄糖20克，得到液態(tài)的培養(yǎng)基；
步驟7：將培養(yǎng)基放入高壓蒸汽滅菌器內(nèi)，設(shè)置壓力為105～135kpa，溫度為121～126℃，進(jìn)行15～30分鐘的高壓蒸汽滅菌；
步驟8：將液態(tài)的培養(yǎng)基倒進(jìn)無(wú)菌培養(yǎng)皿，在室溫下冷卻，培養(yǎng)基凝固為固態(tài)，得到雙孢菇菌種檢測(cè)專用的培養(yǎng)基。
本實(shí)施例涉及的雙孢菇二次發(fā)酵培養(yǎng)料的原材料重量份配比為：麥秸為52.3wt％，雞糞為41.1wt％，石膏粉為4.1wt％，豆粕為2.3wt％，尿素為0.2wt％；雙孢菇二次培養(yǎng)料的制備過(guò)程如下：
(1)破捆與預(yù)濕：將麥秸破捆，然后平鋪成50～100cm厚，長(zhǎng)度和寬度根據(jù)場(chǎng)地大小而定，用水噴淋，使麥秸預(yù)濕，預(yù)濕時(shí)間為4～6天，保證麥秸預(yù)濕充分；
(2)預(yù)混料：將雞糞用攪拌機(jī)粉碎成30～50目的顆粒，在長(zhǎng)為30m，寬為20m，高度為1.6m的泡料池內(nèi)加入適量水，用裝載機(jī)將雞糞混入泡料池內(nèi)進(jìn)行稀釋；然后將步驟(1)預(yù)濕好的麥秸用裝載機(jī)加入泡料池內(nèi)，裝載機(jī)反復(fù)碾壓至麥草和水充分融合，撈出建堆，堆寬5～7.5m，高4～4.5m，長(zhǎng)度根據(jù)場(chǎng)所大小來(lái)定，時(shí)間為1天，此時(shí)，準(zhǔn)備啟動(dòng)發(fā)酵過(guò)程；
(3)混料：將粉碎好的豆粕、石膏粉和尿素按計(jì)算好的配料數(shù)量均勻混合后放入拋料機(jī)料斗，用拋料機(jī)將其撒在麥秸和雞糞上，通過(guò)輸送麥草的數(shù)量來(lái)調(diào)整混料小輸送帶的傳送速度，同時(shí)添加水分，混合后用拋料機(jī)再次進(jìn)行拋料混合，如此，經(jīng)過(guò)3～4遍混料即可；
(4)一次發(fā)酵：進(jìn)入一次發(fā)酵倉(cāng)前，先檢測(cè)料堆水分含量控制在75～78％，將拋料機(jī)擺放在隧道的適當(dāng)位置，選擇往復(fù)式拋料方式；將混合料拋入發(fā)酵倉(cāng)內(nèi)，料堆的高度控制在3.5m，長(zhǎng)寬根據(jù)發(fā)酵倉(cāng)的大小而定；拋料的同時(shí)開啟風(fēng)機(jī)，通過(guò)通風(fēng)將一期發(fā)酵料的溫度控制在70～80℃，麥草內(nèi)的纖維素和半纖維素形式的碳在高溫嗜熱的微生物的作用下被分解；3天后進(jìn)行第一次轉(zhuǎn)倉(cāng)，料堆高度控制為3m，長(zhǎng)寬根據(jù)發(fā)酵倉(cāng)的大小而定；3天后進(jìn)行第二次轉(zhuǎn)倉(cāng)，料堆高度控制為2.5m，長(zhǎng)寬根據(jù)發(fā)酵倉(cāng)的大小而定；再3天后觀察料的腐熟情況進(jìn)行第三次轉(zhuǎn)倉(cāng)或隔日進(jìn)入二次隧道；通過(guò)三次轉(zhuǎn)倉(cāng)，縮短一次發(fā)酵的時(shí)間；經(jīng)過(guò)第一次發(fā)酵，實(shí)驗(yàn)室測(cè)試培養(yǎng)料達(dá)到的指標(biāo)為：含水量70～78％；含氮量1.7～1.8％；碳氮比20:1；ph值為8.4～8.5；
(5)二次發(fā)酵：
使用拋料機(jī)完成二次隧道的堆料，通過(guò)巴氏殺菌和有益微生物的培養(yǎng)，使培養(yǎng)料具有非常強(qiáng)的選擇性，用時(shí)5～7天，此時(shí)的過(guò)程需要分階段進(jìn)行；其中平衡階段中，發(fā)酵料溫度范圍48～50℃，空氣溫度47℃，用時(shí)8小時(shí)；升溫階段中，發(fā)酵料溫度從48℃升至56～60℃，空氣溫度46～56℃，用時(shí)8～12小時(shí)；巴氏殺菌階段中，發(fā)酵料溫度范圍56～60℃，空氣溫度為56℃，用時(shí)6小時(shí)；降溫階段中，發(fā)酵料根據(jù)空氣溫度情況自然下降，空氣溫度為48℃，用時(shí)4小時(shí)；培養(yǎng)階段中，發(fā)酵料溫度為48～50℃，空氣溫度為47℃，時(shí)間3～5天，條件成熟打開隧道大門進(jìn)行出倉(cāng)；得到雙孢菇二次發(fā)酵培養(yǎng)料。