(S)?6?((1?乙酰基哌啶?4?基)氨基)?N?(3?(3,4?二氫異喹啉?2(1H)?基)?2?羥丙基)嘧啶?4?甲酰胺的結晶鹽的制作方法

在固體形式、口服給予的藥物化合物的研發追求中，尋求很多特異性的特征。雖然可以開發無定形形式的藥物化合物，但通常優選具有高結晶性的化合物。此類高度結晶的化合物通常是鹽類。國際專利申請號PCT/US2013/77235描述了一系列化合物，其指示為蛋白精氨酸甲基轉移酶5(PRMT5)的抑制劑，且其指示為可用于治療PRMT5-介導的疾病。該申請具體公開的為化合物(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺(以下稱為"化合物A")。非常需要鑒定具有適于口服給藥性質的所述化合物的穩定晶型以用于治療PRMT5-介導的疾病。技術實現要素：本發明涉及新的(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺的結晶鹽，特別是琥珀酸鹽(以下稱為"化合物B")和苯甲酸鹽(以下稱為"化合物C")。本發明的化合物由式(I)表示:其中X為琥珀酸或苯甲酸。本發明的化合物可用于抑制蛋白精氨酸甲基轉移酶5(PRMT5)，且用于治療增殖性疾病如癌癥，特別是造血系統癌癥、肺癌、前列腺癌、黑素瘤和胰腺癌。附圖簡述圖1顯示化合物B-形式1的X-射線粉末衍射圖。圖2顯示化合物C-形式1的X-射線粉末衍射圖。圖3顯示化合物B-形式1的差示掃描量熱法跡線。圖4顯示化合物C-形式1的差示掃描量熱法跡線。圖5顯示化合物B-形式1的熱重量分析跡線。圖6顯示化合物C-形式1的熱重量分析跡線。發明詳述本發明涉及(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺的鹽，特別是琥珀酸鹽(以下稱為"化合物B")和苯甲酸鹽(以下稱為"化合物C")。在一些實施方案中，(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺的琥珀酸鹽的晶型(化合物B-形式1)的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少九個選自以下的衍射角：約4.5、8.2、9.0、10.4、13.5、15.8、16.4、17.3、17.7、18.1、18.8、19.6、20.8、21.9、22.7、23.3、24.0、24.7、26.4、28.2和29.6°2θ。在另一實施方案中，化合物B-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少8個衍射角或至少7個衍射角或至少6個衍射角或至少5個衍射角或至少4個衍射角，所述衍射角選自約4.5、8.2、9.0、10.4、13.5、15.8、16.4、17.3、17.7、18.1、18.8、19.6、20.8、21.9、22.7、23.3、24.0、24.7、26.4、28.2和29.6°2θ。在另一實施方案中，化合物B-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少三個選自以下的衍射角：約4.5、8.2、9.0、10.4、13.5、15.8、16.4、17.3、17.7、18.1、18.8、19.6、20.8、21.9、22.7、23.3、24.0、24.7、26.4、28.2和29.6°2θ。在另一實施方案中，化合物B-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少九個選自以下的衍射角：約4.5、8.2、10.4、13.5、15.8、16.4、17.3、17.7、18.1、18.8、19.6、20.8、21.9、23.3和24.0°2θ。在另一實施方案中，化合物B-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少8個衍射角或至少7個衍射角或至少6個衍射角或至少5個衍射角或至少4個衍射角，所述衍射角選自約4.5、8.2、10.4、13.5、15.8、16.4、17.3、17.7、18.1、18.8、19.6、20.8、21.9、23.3和24.0°2θ。在另一實施方案中，化合物B-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少三個選自以下的衍射角：約4.5、8.2、10.4、13.5、15.8、16.4、17.3、17.7、18.1、18.8、19.6、20.8、21.9、23.3和24.0°2θ。在另一實施方案中，化合物B-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少九個選自以下的衍射角：約4.5、8.2、10.4、13.5、15.8、16.4、17.7、18.1、18.8、20.8、21.9、23.3和24.0°2θ。在另一實施方案中，化合物B-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少8個衍射角或至少7個衍射角或至少6個衍射角或至少5個衍射角或至少4個衍射角，所述衍射角選自約4.5、8.2、10.4、13.5、15.8、16.4、17.7、18.1、18.8、20.8、21.9、23.3和24.0°2θ。在另一實施方案中，化合物B-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少三個選自以下的衍射角：約4.5、8.2、10.4、13.5、15.8、16.4、17.7、18.1、18.8、20.8、21.9、23.3和24.0°2θ。在另一實施方案中，化合物B-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含的衍射角為約4.5、10.4、17.7、18.1、20.8和24.0°2θ。在另一實施方案中，化合物B-形式1的特征為X-射線粉末衍射(XRPD)圖與圖1基本上一致。在一些實施方案中，(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺的苯甲酸鹽的晶型(化合物C-形式1)的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少九個選自以下的衍射角：約4.3、7.7、9.2、10.9、12.8、14.2、15.6、16.6、16.9、18.1、18.6、21.5、22.1、23.4、24.0、24.2、25.1、25.9、27.1、28.8和30.7°2θ。在另一實施方案中，化合物C-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少8個衍射角或至少7個衍射角或至少6個衍射角或至少5個衍射角或至少4個衍射角，所述衍射角選自約4.3、7.7、9.2、10.9、12.8、14.2、15.6、16.6、16.9、18.1、18.6、21.5、22.1、23.4、24.0、24.2、25.1、25.9、27.1、28.8和30.7°2θ。在另一實施方案中，化合物C-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少三個選自以下的衍射角：約4.3、7.7、9.2、10.9、12.8、14.2、15.6、16.6、16.9、18.1、18.6、21.5、22.1、23.4、24.0、24.2、25.1、25.9、27.1、28.8和30.7°2θ。在另一實施方案中，化合物C-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少九個選自以下的衍射角：約4.3、7.7、9.2、10.9、12.8、14.2、15.6、16.6、16.9、18.1、18.6、22.1、24.0、24.2、25.9、27.1和28.8°2θ。在另一實施方案中，化合物C-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少8個衍射角或至少7個衍射角或至少6個衍射角或至少5個衍射角或至少4個衍射角，所述衍射角選自約4.3、7.7、9.2、10.9、12.8、14.2、15.6、16.6、16.9、18.1、18.6、22.1、24.0、24.2、25.9、27.1和28.8°2θ。在另一實施方案中，化合物C-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少三個選自以下的衍射角：約4.3、7.7、9.2、10.9、12.8、14.2、15.6、16.6、16.9、18.1、18.6、22.1、24.0、24.2、25.9、27.1和28.8°2θ。在另一實施方案中，化合物C-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少九個選自以下的衍射角：約4.3、7.7、15.6、16.6、16.9、18.1、18.6、22.1、24.0、27.1和28.8°2θ。在另一實施方案中，化合物C-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少8個衍射角或至少7個衍射角或至少6個衍射角或至少5個衍射角或至少4個衍射角，所述衍射角選自約4.3、7.7、15.6、16.6、16.9、18.1、18.6、22.1、24.0、27.1和28.8°2θ。在另一實施方案中，化合物C-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含至少三個選自以下的衍射角：約4.3、7.7、15.6、16.6、16.9、18.1、18.6、22.1、24.0、27.1和28.8°2θ。在另一實施方案中，化合物C-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含的衍射角為約4.3、7.7、18.1、18.6、22.1和24.0°2θ。在另一實施方案中，化合物C-形式1的特征為X-射線粉末衍射(XRPD)圖與圖2基本上一致。在其它實施方案中，化合物B-形式1的特征為差示掃描量熱法跡線與圖3基本上一致和/或熱重量分析跡線與圖5基本上一致。在其它實施方案中，化合物C-形式1的特征為差示掃描量熱法跡線與圖4基本上一致和/或熱重量分析跡線與圖6基本上一致。在其它實施方案中，如本領域技術人員理解，化合物B-形式1的特征為具有上述實施方案的特征的分析數據的任意組合。例如，在一個實施方案中，化合物B-形式1的特征為X-射線粉末衍射(XRPD)圖與圖1基本上一致且差示掃描量熱法跡線與圖3基本上一致且熱重量分析跡線與圖5基本上一致。在另一實施方案中，化合物B-形式1的特征為X-射線粉末衍射(XRPD)圖與圖1基本上一致且差示掃描量熱法跡線與圖3基本上一致。在另一實施方案中，化合物B-形式1的特征為X-射線粉末衍射(XRPD)圖與圖1基本上一致且熱重量分析跡線與圖5基本上一致。在另一實施方案中，化合物B-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含的衍射角為約4.5、10.4、17.7、18.1、20.8和24.0°2θ，且差示掃描量熱法跡線與圖3基本上一致。在另一實施方案中，化合物B-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含的衍射角為約4.5、10.4、17.7、18.1、20.8和24.0°2θ，且熱重量分析跡線與圖5基本上一致。在其它實施方案中，如本領域技術人員理解，化合物C-形式1的特征為具有上述實施方案的特征的分析數據的任意組合。例如，在一個實施方案中，化合物C-形式1的特征為X-射線粉末衍射(XRPD)圖與圖2基本上一致且差示掃描量熱法跡線與圖4基本上一致且熱重量分析跡線與圖6基本上一致。在另一實施方案中，化合物C-形式1的特征為X-射線粉末衍射(XRPD)圖與圖2基本上一致且差示掃描量熱法跡線與圖4基本上一致。在另一實施方案中，化合物C-形式1的特征為X-射線粉末衍射(XRPD)圖與圖2基本上一致且熱重量分析跡線與圖6基本上一致。在另一實施方案中，化合物C-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含的衍射角為約4.3、7.7、18.1、18.6、22.1和24.0°2θ，且差示掃描量熱法跡線與圖4基本上一致。在另一實施方案中，化合物C-形式1的特征為當用CuKα輻射測量時，X-射線粉末衍射(XRPD)圖包含的衍射角為約4.3、7.7、18.1、18.6、22.1和24.0°2θ，且熱重量分析跡線與圖6基本上一致。應理解，XRPD圖包括“約”本文規定的值的衍射角(以°2θ表示)，其中該XRPD圖包括在該規定值±0.3°2θ之內的衍射角。而且，本領域技術人員人員熟知并理解，所用裝置、濕度、溫度、晶體粉末定向和涉及獲得X-射線粉末衍射(XRPD)圖的其他參數可引起衍射圖中線的外觀、強度和位置的一些變化。與本文提供的圖1或2的X-射線粉末衍射圖“基本上一致”的X-射線粉末衍射圖是本領域技術人員認為代表與提供圖1或2的XRPD圖的化合物具有相同晶體形式的化合物的XRPD圖。也就是說，XRPD圖可以與圖1或2的XRPD圖相同，或更可能其可以略微不同。這種XRPD圖不一定顯示本文呈現的每個衍射圖的每條線，和/或可以顯示所述線的外觀、強度或位移的輕微變化，其由涉及獲得數據的條件差異引起。本領域技術人員能夠通過對比它們的XRPD圖確定結晶化合物樣品是否具有與本文公開的形式相同的形式或不同的形式。例如，本領域技術人員可以將(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺的琥珀酸鹽樣品的XRPD圖與圖1重疊(overlay)，并使用本領域的專業知識(expertise)和常識(knowledge)容易地確定樣品的XRPD圖是否與化合物B-形式1的XRPD圖基本上一致。如果XRPD圖與圖1基本上一致，所述樣品形式可容易并準確地被鑒定為具有與化合物B-形式1相同的形式。類似的，如果樣品(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺的苯甲酸鹽的XRPD圖與圖2基本上一致，該樣品形式可容易且精確地鑒定為具有與化合物C-形式1相同的形式。“本發明的化合物”是指(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺的琥珀酸鹽和苯甲酸鹽，且在一些實施方案中，具體為本文定義的化合物B-形式1的晶型，或在一些實施方案中，具體為本文定義的化合物C-形式1的晶型。本發明包括在需要的人中治療或改善PRMT5-介導的疾病的治療方法，其包括向需要的人給藥有效量的本發明的化合物或包含有效量的本發明的化合物和任選的藥學上可接受的載體的組合物。在某些實施方案中，該PRMT5-介導的疾病為增殖性疾病、代謝疾病或血液疾病。在某些實施方案中，本文所述的化合物可用于治療癌癥。在某些實施方案中，本發明的化合物對PRMT5的抑制可用于治療以下所列的非限制性的癌癥：乳腺癌、食管癌、膀胱癌、肺癌、造血系統癌癥、淋巴瘤、髓母細胞瘤、直腸腺癌、結腸腺癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、腺樣囊性癌、肺腺癌、頭頸部鱗狀細胞癌、腦腫瘤、肝細胞癌、腎細胞癌、黑素瘤、少突神經膠質瘤、卵巢透明細胞癌和卵巢漿液性囊腺癌。在某些實施方案中，本文所述的化合物可用于治療造血系統癌癥、肺癌、前列腺癌、黑素瘤、或胰腺癌。在某些實施方案中，本文所述的化合物可用于治療血紅蛋白病。在某些實施方案中，本文所述的化合物可用于治療鐮狀細胞貧血。在某些實施方案中，本文所述的化合物可用于治療糖尿病或肥胖癥。如本文所述，術語“PRMT5-介導的疾病”是指其中已知PRMT5起作用的任何疾病、障礙或其它病理狀況。因此，在一些實施方案中，本發明涉及治療或減輕其中已知PRMT5起作用的一種或多種疾病的嚴重性。在一些實施方案中，本文所述的化合物可用于治療癌癥，包括，但不限于，聽神經瘤；腺癌；腎上腺癌；肛門癌；血管肉瘤(例如，淋巴管肉瘤、淋巴管內皮肉瘤、血管肉瘤)；盲腸癌；良性單克隆丙種球蛋白病；膽管癌(例如，膽管上皮癌)；膀胱癌；乳癌(例如，乳房的腺癌、乳房的乳頭癌、乳腺癌、乳房的髓樣癌)；腦癌(例如，腦膜瘤、神經膠質瘤(例如，星形細胞瘤、少突神經膠質瘤)、髓母細胞瘤)；支氣管癌；類癌瘤；宮頸癌(例如，宮頸腺癌)；絨毛膜癌；脊索瘤；顱咽管瘤；結直腸癌(例如，結腸癌、直腸癌、結腸直腸腺癌)；上皮癌；室管膜瘤；內皮肉瘤(例如，卡波西氏肉瘤、多發性特發性出血性肉瘤)；子宮內膜癌(例如，子宮癌、子宮肉瘤)；食管癌(例如，食管的腺癌、巴雷特腺癌)；尤因肉瘤；眼癌(例如，眼內黑素瘤、視網膜母細胞瘤)；家族性嗜伊紅細胞增多癥；膽囊癌；胃癌(例如，胃腺癌)；胃腸間質瘤(GIST)；頭頸癌(例如，頭頸部鱗狀細胞癌、口癌(例如，口腔鱗狀細胞癌(OSCC))、喉部癌癥(throatcancer)(例如，喉頭癌(laryngealcancer)、咽癌、鼻咽癌、口咽癌))；造血系統癌(例如，白血病諸如急性淋巴細胞白血病(ALL)(例如，B-細胞ALL、T-細胞ALL)、急性粒細胞性白血病(AML)(例如，B-細胞AML、T-細胞AML)、慢性粒細胞性白血病(CML)(例如，B-細胞CML、T-細胞CML)和慢性淋巴細胞白血病(CLL)(例如，B-細胞CLL、T-細胞CLL))；淋巴瘤諸如霍奇金淋巴瘤(HL)(例如，B-細胞HL、T-細胞HL)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)(例如，B-細胞NHL諸如彌漫性大細胞淋巴瘤(DLCL)(例如，彌漫性大B細胞性淋巴瘤(DLBCL))、濾泡淋巴瘤、慢性淋巴細胞白血病/小淋巴細胞性淋巴瘤(CLL/SLL)、套細胞淋巴瘤(MCL)、邊緣區B細胞淋巴瘤(例如，粘膜相關淋巴組織(MALT)淋巴瘤、結節性邊緣區B-細胞淋巴瘤、脾邊緣區B-細胞淋巴瘤)、原發性縱隔B細胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、淋巴漿細胞性淋巴瘤(即，沃爾登斯特倫巨球蛋白血癥)、多毛細胞白血病(HCL)、成免疫細胞性大細胞淋巴瘤、前體B-成淋巴細胞性淋巴瘤和原發性中樞神經系統(CNS)淋巴瘤；和T-細胞NHL諸如前體T-成淋巴細胞性淋巴瘤/白血病、周圍T-細胞淋巴瘤(PTCL)(例如，皮膚T-細胞淋巴瘤(CTCL)(例如，蕈樣肉芽腫、塞扎里綜合征)、血管免疫母細胞性T-細胞淋巴瘤、結節外的天然殺傷T-細胞淋巴瘤、腸病變型T-細胞淋巴瘤、皮下脂膜炎樣T-細胞淋巴瘤和間變性大細胞淋巴瘤)；一種或多種如上所述的白血病/淋巴瘤的混合形式；和多發性骨髓瘤(MM))、重鏈病(例如，α鏈病、γ鏈病、μ鏈病)；血管母細胞瘤；炎性肌纖維母細胞瘤；免疫細胞淀粉樣變性；腎癌(例如，腎母細胞瘤又名維爾姆斯腫瘤、腎細胞癌)；肝癌(例如，肝細胞癌(HCC)、惡性肝細胞瘤)；肺癌(例如，支氣管原癌、小細胞肺癌(SCLC)、非小細胞肺癌(NSCLC)、肺腺癌)；平滑肌肉瘤(LMS)；肥大細胞增多癥(例如，全身性肥大細胞增多癥)；骨髓增生異常綜合征(MDS)；間皮瘤；骨髓增生性障礙(MPD)例如，真性紅細胞增多癥(PV)、原發性血小板增多癥(ET)、原因不明的髓樣化生(AMM)又名骨髓纖維化(MF)、慢性特發性骨髓纖維化、慢性粒細胞性白血病(CML)、慢性嗜中性粒細胞性白血病(CNL)、嗜酸細胞增多綜合征(HES))；神經母細胞瘤；神經纖維瘤(例如，1型或2型神經纖維瘤病(NF)、神經鞘瘤)；神經內分泌癌(例如，胃腸胰的神經內分泌腫瘤(GEP-NET)、類癌瘤)；骨肉瘤；卵巢癌(例如，囊腺癌、卵巢胚胎性癌、卵巢腺癌)；乳頭狀腺癌；胰腺癌(例如，胰腺腺癌、管內乳頭狀粘液腫瘤(IPMN)、胰島細胞腫瘤)；陰莖癌(例如，陰莖和陰囊的佩吉特病)；松果體瘤；原始性神經外胚層腫瘤(PNT)；前列腺癌(例如，前列腺腺癌)；直腸癌；橫紋肌肉瘤；唾液腺癌；皮膚癌[例如，鱗狀細胞癌(SCC)、角化棘皮瘤(KA)、黑素瘤、基底細胞癌(BCC)]；小腸癌(例如，盲腸癌)；軟組織肉瘤(例如，惡性纖維組織細胞瘤(MFH)、脂肪肉瘤、惡性周邊神經鞘腫瘤(MPNST)、軟骨肉瘤、纖維肉瘤、粘液肉瘤)；皮脂腺癌；汗腺癌；滑膜瘤；睪丸癌(例如，精原細胞瘤、睪丸胚胎性癌)；甲狀腺癌(例如，甲狀腺的乳頭狀癌、乳頭狀甲狀腺癌(PTC)、甲狀腺髓樣癌)；尿道癌；陰道癌；和外陰癌(例如，外陰的佩吉特病)。在一些實施方案中，本發明的化合物可用于治療代謝疾病，如糖尿病或肥胖癥。在一些實施方案中，本發明的化合物用于延遲糖尿病發作，減緩其進展，或改善其癥狀。在一些實施方案中，該糖尿病為1型糖尿病。在一些實施方案中，該糖尿病為2型糖尿病。在一些實施方案中，本發明的化合物用于延遲肥胖癥發作，減緩其進展，或改善其癥狀。在一些實施方案中，本發明的化合物用于使受試者體重減輕。在一些實施方案中，本發明的化合物可用于與其它化合物、藥物或療法(如二甲雙胍和胰島素)組合，以治療糖尿病和/或肥胖癥。在一些實施方案中，本發明的化合物可用于治療血液疾病，例如，血紅蛋白病，如鐮狀細胞疾病或β-地中海貧血。在一些實施方案中，本發明的化合物用于延遲鐮狀細胞疾病的發作，減緩其進展，或改善其癥狀。在一些實施方案中，本發明的化合物用于延遲β-地中海貧血的發作，減緩其進展，或改善其癥狀。在一些實施方案中，本發明的化合物可用于與其它化合物、藥物或療法組合，以治療血紅蛋白病如鐮狀細胞疾病或β-地中海貧血。如本文所述，關于疾病的"治療"是指：(1)改善所治療的疾病或所治療疾病的一種或多種生物表現，(2)干涉(a)導致或引起所治療疾病的生物級聯中的一個或多個點或(b)所治療疾病的一種或多種生物表現，或(3)緩解與所治療疾病相關的一種或多種癥狀或作用。“有效量”是指引起受試者所需生物響應的藥物物質(即本發明的化合物)的量。該響應包括緩解所治療疾病或障礙的癥狀。該治療方法中本發明的化合物的有效量為每天約0.001至100mg/kg患者體重，其可以單劑量或多劑量給予。在一些實施方案中，該劑量水平為約0.01至約25mg/kg/天。在一些實施方案中，該劑量水平為約0.05至約10mg/kg/天。合適的劑量水平可為約0.01至25mg/kg/天，約0.05至10mg/kg/天，或約0.1至5mg/kg/天。在該范圍內該劑量可為0.005至0.05，0.05至0.5，0.5至5.0，或5.0至50mg/kg/天。對于口服給藥，該組合物優選以含有1.0至1000毫克活性成分，尤其是1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、50.0、75.0、100.0、150.0、200.0、250.0、300.0、400.0、500.0、600.0、750.0、800.0、900.0和1000.0毫克活性成分的片劑形式提供，用于被治療患者的劑量的癥狀調節。化合物可以1至4次/天，優選1次或2次/天的方案進行給藥。在一些實施方案中，本發明所述的化合物每天給藥一次或多次，持續多天。在一些實施方案中，該給藥方案持續幾天、幾周、幾個月或幾年。然而，應理解，對于任何具體患者的特定劑量水平和給藥頻率可以變化并將取決于多種因素，包括年齡、體重、遺傳特性、一般健康狀況、性別、飲食、給藥方式和時間、排泄速率、藥物組合以及待治療的特定疾病狀態的性質和嚴重性。給藥方法包括在治療過程中的不同時間或以組合形式同時給予有效量的本發明化合物或組合物。本發明的方法包括所有已知的治療性處置方案(therapeutictreatmentregimens)。本發明化合物和組合物可與具有預防和治療相關病癥或疾病相關效用的其他化合物和組合物組合，相關病癥或疾病例如增殖性疾病，代謝疾病，或血液疾病。本領域普通技術人員可對用于聯合治療的合適藥劑作出選擇。治療藥劑的聯用可協同作用以達到治療或預防各種病癥的效果。使用該方法，能夠使較低劑量的各種藥劑達到治療功效，從而降低不良副作用的可能性。在某些實施方案中，本文提供的化合物或組合物與一種或多種其它治療活性劑組合給藥，所述其它治療活性劑改善其生物利用度，減少和/或改變其代謝，抑制其排泄，和/或改變其體內分布。還應理解所使用的治療可對相同疾病實現所需效果，和/或其可實現不同效果。聯合治療包括共同給予本發明化合物和所述其他藥劑、相繼給予本發明化合物和其他藥劑、給予含有本發明化合物和其他藥劑的組合物或同時給予含有本發明化合物和其他藥劑的單獨的組合物。示例性的其它治療活性劑包括，但不限于，有機小分子如藥物化合物(例如，美國聯邦法規(CFR)中規定的美國食品與藥品管理局批準的化合物)，肽、蛋白質、碳水化合物、單糖、寡糖、多糖、核蛋白、粘蛋白、脂蛋白、合成多肽或蛋白質、連接至蛋白質的小分子、糖蛋白、類固醇、核酸、DNA、RNA、核苷酸、核苷、寡核苷酸、反義寡核苷酸、脂質、激素、維生素和細胞。本發明進一步包括本發明化合物作為活性治療物質，尤其是在治療PRMT5-介導的病癥中的用途。特別是，本發明包括本發明的化合物治療增殖性疾病、代謝疾病或血液疾病的用途。另一方面，本發明包括本發明化合物在制備用于治療上述病癥的藥物中的用途。本發明還涉及包含本發明的化合物和藥學上可接受的載體的藥物組合物。本發明還涉及制備藥物組合物的方法，包括混合本發明的化合物和藥學上可接受的載體。“藥學上可接受的載體”意指具有足夠純度和質量的用于本發明化合物的制劑中的任何一種或多種化合物和/或組合物，當適當給予人類時，不產生副反應，并且作為媒介物用于藥物(即本發明化合物)。載體可包括賦形劑、稀釋劑、制粒劑和/或分散劑、表面活性劑和/或乳化劑、粘合劑、防腐劑、緩沖劑、潤滑劑和天然油。本發明進一步包括用于制造組合物的方法，其包括將本發明化合物與任選的藥學上可接受的載體混合；并且包括由這種方法生成的那些組合物，該方法包括常規的藥物技術。例如，本發明化合物可以在配制之前進行納米研磨(nanomilled)。本發明化合物還可以通過研磨、微粉化或本領域已知的其他減小粒徑的方法進行制備。此類方法包括但不限于在以下專利中所描述的那些：美國專利號4,826,689、5,145,684、5,298,262、5,302,401、5,336,507、5,340,564、5,346,702、5,352,459、5,354,560、5,384,124、5,429,824、5,503,723、5,510,118、5,518,187、5,518,738、5,534,270、5,536,508、5,552,160、5,560,931、5,560,932、5,565,188、5,569,448、5,571,536、5,573,783、5,580,579、5,585,108、5,587,143、5,591,456、5,622,938、5,662,883、5,665,331、5,718,919、5,747,001、PCT申請WO93/25190、WO96/24336和WO98/35666，其各自以引用的方式并入本文中。本發明的藥物組合物可以使用本領域技術人員已知的技術和方法進行制備。本領域常用的一些方法描述于Remington'sPharmaceuticalSciences(MackPublishingCompany)中，其全部教導以引用的方式并入本文中。本發明組合物包括眼用、口服、經鼻、經皮、局部(封閉或未封閉)、靜脈內(推注和輸注)和注射(腹膜內、皮下、肌內、瘤內或腸胃外)形式。組合物可以在劑量單位中，例如片劑、丸劑、膠囊劑、粉末劑、顆粒劑、脂質體、離子交換樹脂、無菌眼用溶液劑或眼用遞送裝置(例如促進立即釋放、定時釋放或持續釋放的接觸鏡等)、腸胃外溶液劑或懸浮劑、計量氣霧劑或液體噴霧劑、滴劑、安瓿、自動注射器裝置或栓劑；用于眼部、口服、鼻內、舌下、腸胃外或直腸給藥或通過吸入法或吹入法給藥。適于口服給藥的本發明組合物包括固體形式，例如丸劑、片劑、囊片劑、膠囊劑(每種均包括立即釋放、定時釋放和持續釋放制劑)、顆粒劑和粉末劑。口服組合物優選配制成均質組合物，其中藥物物質(即本發明化合物)均勻分散在混合物中，該混合物可以容易地再分為包含等量本發明化合物的劑量單位。優選地，組合物通過以下方法進行制備：將本發明化合物與一種或多種任選存在的藥物載體(例如淀粉、糖、稀釋劑、制粒劑、潤滑劑、助流劑、粘合劑和崩解劑)、一種或多種任選存在的惰性藥物賦形劑(例如水、二醇類、油類、醇類、調味劑、防腐劑、著色劑和糖漿)、一種或多種任選存在的常規制片成分(例如玉米淀粉、乳糖、蔗糖、山梨醇、滑石、硬脂酸、硬脂酸鎂、磷酸二鈣和多種膠中的任何一種)以及任選的稀釋劑(例如水)進行混合。示例性稀釋劑包括碳酸鈣、碳酸鈉、磷酸鈣、磷酸二鈣、硫酸鈣、磷酸氫鈣、磷酸鈉、乳糖、蔗糖、纖維素、微晶纖維素、高嶺土、甘露醇、山梨醇、肌醇、氯化鈉、干淀粉、玉米淀粉、糖粉、及其混合物。示例性制粒劑和/或分散劑包括馬鈴薯淀粉、玉米淀粉、木薯淀粉、羥乙酸淀粉鈉、粘土、海藻酸、瓜爾膠、柑桔渣、瓊脂、膨潤土、纖維素和木質產品、天然海綿、陽離子交換樹脂、碳酸鈣、硅酸鹽、碳酸鈉、交聯聚(乙烯基–吡咯烷酮)(交聚維酮)、羧甲基淀粉鈉(羥乙酸淀粉鈉)、羧基甲基纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉(交聯羧甲纖維素)、甲基纖維素、預膠凝淀粉(淀粉1500)、微晶淀粉、水不可溶性淀粉、羧基甲基纖維素鈣、硅酸鎂鋁(Veegum)、月桂基硫酸鈉、季銨化合物、及其混合物。示例性表面活性劑和/或乳化劑包括天然乳化劑(例如，阿拉伯膠、瓊脂、海藻酸、藻酸鈉、黃蓍膠、chondrux、膽固醇、黃原膠、果膠、明膠、蛋黃、酪蛋白、羊毛脂、膽固醇、蠟和卵磷脂)、膠質黏土(例如，膨潤土(硅酸鋁)和Veegum(硅酸鎂鋁))、長鏈氨基酸衍生物、高分子量醇(例如，硬脂醇、鯨蠟醇、油醇、三乙酸甘油酯單硬脂酸酯、乙二醇二硬脂酸酯、甘油基單硬脂酸酯、和丙二醇單硬脂酸酯、聚乙烯醇)、卡波姆(例如，羧基聚亞甲基、聚丙烯酸、丙烯酸聚合物和羧基乙烯基聚合物)、角叉菜膠、纖維素衍生物(例如，羧基甲基纖維素鈉、粉狀纖維素、羥基甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素)、脫水山梨醇脂肪酸酯(例如，聚氧乙烯脫水山梨醇單月桂酸酯(Tween20)、聚氧乙烯脫水山梨醇(Tween60)、聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯(Tween80)、脫水山梨醇單棕櫚酸酯(Span40)、脫水山梨醇單硬脂酸酯(Span60)、脫水山梨醇三硬脂酸酯(Span65)、單油酸甘油酯、脫水山梨醇單油酸酯(Span80))、聚氧乙烯酯(例如，聚氧乙烯單硬脂酸酯(Myrj45)、聚氧乙烯氫化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、聚甲醛硬脂酸酯和Solutol)、蔗糖脂肪酸酯、聚乙二醇脂肪酸酯(例如，克列莫佛TM)、聚氧乙烯醚(例如，聚氧乙烯月桂基醚(Brij30))、聚(乙烯基–吡咯烷酮)、二甘醇單月桂酸酯、三乙醇胺油酸鹽、油酸鈉、油酸鉀、油酸乙酯、油酸、月桂酸乙酯、月桂基硫酸鈉、普郎尼克F68、泊洛沙姆188、西曲溴銨、西吡氯銨、苯扎氯銨、多庫酯鈉、和/或其混合物。示例性的粘合劑包括淀粉(如，玉米淀粉和淀粉糊)、明膠、糖(例如蔗糖、葡萄糖、右旋糖、糊精、糖蜜、乳糖、拉克替醇、甘露糖醇等)、天然以及合成樹膠(例如阿拉伯膠、藻酸鈉、角叉菜提取物、潘瓦爾膠(panwarRum)、茄替膠、車前子殼粘膠(mucilageofisabgolhusk)、羧甲基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、微晶纖維素、醋酸纖維素、聚(乙烯基吡咯烷酮)、硅酸鎂鋁(Veegum)以及落葉松阿拉伯半聚乳糖)、藻酸鹽、聚氧化乙烯、聚乙二醇、無機鈣鹽、硅酸、聚甲基丙烯酸酯、蠟、水、醇等，和/或它們的混合物。示例性防腐劑包括抗氧化劑、螯合劑、抗微生物防腐劑、抗真菌防腐劑、醇防腐劑、酸性防腐劑和其它防腐劑。示例性抗氧化劑包括α生育酚、抗壞血酸、抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基羥基苯甲醚、丁基羥基甲苯、硫代甘油、偏亞硫酸氫鉀、丙酸、沒食子酸丙酯、抗壞血酸鈉、亞硫酸氫鈉、偏亞硫酸氫鈉和亞硫酸鈉。示例性的螯合劑包括乙二胺四乙酸(EDTA)以及它的鹽和水合物(如，依地酸鈉、依地酸二鈉、依地酸三鈉、依地酸鈣鈉、依地酸二鉀等等)、檸檬酸以及它的鹽和水合物(如，檸檬酸一水合物)、富馬酸以及它的鹽和水合物、蘋果酸以及它的鹽和水合物、磷酸以及它的鹽和水合物，以及酒石酸以及它的鹽和水合物。示例性的抗微生物防腐劑包括苯扎氯銨、芐索氯銨、芐醇、溴硝丙二醇、溴化十六烷基三甲銨、西吡氯銨、氯己定、三氯叔丁醇、氯甲酚、氯二甲酚、甲酚、乙醇、甘油、海克替啶、咪脲、苯酚、苯氧乙醇、苯乙醇、硝酸苯汞、丙二醇，以及硫柳汞。示例性抗真菌防腐劑包括對羥苯甲酸丁酯、對羥苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥苯甲酸丙酯、苯甲酸、羥基苯甲酸、苯甲酸鉀、山梨酸鉀、苯甲酸鈉、丙酸鈉和山梨酸。示例性醇防腐劑包括乙醇、聚乙二醇、苯酚、酚化合物、雙酚、三氯叔丁醇、羥基苯甲酸酯和苯基乙醇。示例性酸性防腐劑包括維生素A、維生素C、維生素E、β–胡蘿卜素、檸檬酸、乙酸、脫氫乙酸、抗壞血酸、山梨酸和植酸。其它防腐劑包括生育酚、醋酸生育酚、deteroximemesylate、溴化十六烷基三甲銨、丁基羥基茴香醚(BHA)、丁基羥基甲苯(BHT)、乙二胺、月桂基硫酸鈉(SLS)、月桂基醚硫酸鈉(SLES)、亞硫酸氫鈉、偏亞硫酸氫鈉、亞硫酸鉀、偏亞硫酸氫鉀、GlydantPlus、Phenonip、對羥基苯甲酸甲酯、Germall115、GermabenII、Neolone、Kathon以及Euxyl。在一些實施方案中，防腐劑是抗氧化劑。在其它實施方案中，防腐劑是螯合劑。示例性的緩沖劑包括檸檬酸鹽緩沖溶液、乙酸鹽緩沖液、磷酸鹽緩沖溶液、氯化銨、碳酸鈣、氯化鈣、檸檬酸鈣、葡乳醛酸鈣、葡庚糖酸鈣、葡萄糖酸鈣、D葡糖酸、甘油磷酸鈣、乳酸鈣、丙酸、乙酰丙酸鈣、戊酸、磷酸氫鈣、磷酸、磷酸三鈣、磷酸氫氧化鈣、乙酸鉀、氯化鉀、葡萄糖酸鉀、鉀的混合物、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、磷酸鉀的混合物、乙酸鈉、碳酸氫鈉、氯化鈉、檸檬酸鈉、乳酸鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、磷酸鈉的混合物、氨丁三醇、氫氧化鎂、氫氧化鋁、藻酸、無熱原水、等滲鹽水、林格氏溶液、乙醇等，以及它們的混合物。示例性潤滑劑包括硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸、二氧化硅、滑石、麥芽、山崳酸甘油酯、氫化植物油、聚乙二醇、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉、亮氨酸、月桂基硫酸鎂、月桂基硫酸鈉、及其混合物。示例性的天然油包括以下物質的油：扁桃仁(almond)、苦杏仁(apricotkernel)、鱷梨、巴巴蘇、佛手柑、黑加侖籽、琉璃苣、杜松、甘菊、蕓苔、葛縷子、巴西棕櫚、蓖麻、肉桂、可可脂、椰子、鱈魚肝、咖啡、玉米、棉花籽、鴯鹋、桉樹、月見草、魚、亞麻籽、香葉醇、葫蘆、葡萄籽、榛子、牛膝草、肉豆蔻酸異丙酯、荷荷巴油、夏威夷核果、醒目薰衣草、薰衣草、檸檬、山蒼子、澳洲堅果、錦葵、芒果籽、白芒花籽、水貂、肉豆蘧、橄欖、橙、羅非魚、棕櫚、棕櫚仁、桃仁、花生、罌粟籽、南瓜籽、油菜籽、米糠、迷迭香、紅花、檀香、茶梅(sasquana)、香薄荷、沙棘、芝麻、牛油樹脂、聚硅氧烷、大豆、向日葵、茶樹、薊、山茶(tsubaki)、巖蘭草、胡桃，以及小麥胚芽。示例性的合成油包括但不限于硬脂酸丁酯、辛酸甘油三酯、癸酸甘油三酯、環甲硅油、癸二酸二乙酯、二甲硅油360、肉豆蔻酸異丙酯、礦物油、辛基十二烷醇、油醇、硅油，以及它們的混合物。本發明化合物還可以經由延遲釋放組合物而給藥，其中該組合物包括本發明化合物和可生物降解的緩釋載體(例如聚合物載體)或藥學上可接受的不可生物降解的緩釋載體(例如離子交換載體)。可生物降解的和不可生物降解的延遲釋放載體在本領域中是熟知的。可生物降解的載體用于形成顆粒或基質，它們保留一種或多種藥物物質(即，本發明化合物)并且它們緩慢地降解于/溶解于適當的環境(例如，水性、酸性、堿性等)以釋放該藥物物質。此類顆粒降解于/溶解于體液中以釋放在其中的藥物物質(即，本發明化合物)。這些顆粒優選為納米顆粒(例如直徑在約1至500nm的范圍內，優選直徑約50-200nm，且最優選直徑約100nm)。在用于制備緩釋組合物的過程中，首先將緩釋載體和本發明的化合物溶解或分散在有機溶劑中。將得到的混合物加入到含有一種或多種任選的表面活化劑的水溶液中以產生乳液。然后，將有機溶劑從乳液蒸發以提供含有緩釋載體和本發明的化合物的顆粒的膠態懸浮液。片劑和膠囊劑代表有利的口服劑量單位形式。可以使用標準技術將片劑包糖衣或進行薄膜包衣。還可以將片劑包衣或以其他方式混合以提供延長的、控制釋放的治療作用。該劑型可以包含內部劑量和外部劑量組分，其中外部組分為在內部組分上的包封(envelope)形式。這兩種組分可以進一步通過抵抗胃中的崩解并允許該內部組分完整地進入到十二指腸中的層(例如腸衣層)或者延遲或持續釋放的層而分開。可以使用多種腸和非腸的層或包衣材料(例如聚合物酸、蟲膠、乙酰醇以及乙酸纖維素或其組合)。在某些實施方案中，本發明涉及包含化合物B的藥物組合物。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物B的藥物組合物，其中至少10％重量的化合物B以化合物B-形式1存在。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物B的藥物組合物，其中至少20％重量，或至少30％重量，或至少40％重量，或至少50％重量，或至少60％重量，或至少70％重量，或至少80％重量，或至少90％重量的化合物B以化合物B-形式1存在。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物B的藥物組合物，其中至少95％重量，或至少96％重量，或至少97％重量，或至少98％重量，或至少99％重量，或至少99.5％重量，或至少99.8％重量，或至少99.9％重量的化合物B以化合物B-形式1存在。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物B的藥物組合物，其中不超過90％重量的化合物B為無定形的。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物B的藥物組合物，其中不超過80％重量，或不超過70％重量，或不超過60％重量，或不超過50％重量，或不超過40％重量，或不超過30％重量，或不超過20％重量，或不超過10％重量的化合物B為無定形的。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物B的藥物組合物，其中不超過5％重量，或不超過4％重量，或不超過3％重量，或不超過2％重量，或不超過1％重量，或不超過0.5％重量，或不超過0.2％重量，或不超過0.1％重量的化合物B為無定形的。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物B的藥物組合物，其中不超過90％重量的化合物B以除了化合物B-形式1之外的形式存在。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物B的藥物組合物，其中不超過80％重量，或不超過70％重量，或不超過60％重量，或不超過50％重量，或不超過40％重量，或不超過30％重量，或不超過20％重量，或不超過10％重量的化合物B以除了化合物B-形式1之外的形式存在。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物B的藥物組合物，其中不超過5％重量，或不超過4％重量，或不超過3％重量，或不超過2％重量，或不超過1％重量，或不超過0.5％重量，或不超過0.2％重量，或不超過0.1％重量的化合物B以除了化合物B-形式1之外的形式存在。在某些實施方案中，本發明涉及包含化合物C的藥物組合物。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物C的藥物組合物，其中至少10％重量的化合物C以化合物C-形式1存在。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物C的藥物組合物，其中至少20％重量，或至少30％重量，或至少40％重量，或至少50％重量，或至少60％重量，或至少70％重量，或至少80％重量，或至少90％重量的化合物C以化合物C-形式1存在。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物C的藥物組合物，其中至少95％重量，或至少96％重量，或至少97％重量，或至少98％重量，或至少99％重量，或至少99.5％重量，或至少99.8％重量，或至少99.9％重量的化合物C以化合物C-形式1存在。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物C的藥物組合物，其中不超過90％重量的化合物C為無定形的。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物C的藥物組合物，其中不超過80％重量，或不超過70％重量，或不超過60％重量，或不超過50％重量，或不超過40％重量，或不超過30％重量，或不超過20％重量，或不超過10％重量的化合物C為無定形的。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物C的藥物組合物，其中不超過5％重量，或不超過4％重量，或不超過3％重量，或不超過2％重量，或不超過1％重量，或不超過0.5％重量，或不超過0.2％重量，或不超過0.1％重量的化合物C為無定形的。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物C的藥物組合物，其中不超過90％重量的化合物C以除了化合物C-形式1之外的形式存在。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物C的藥物組合物，其中不超過80％重量，或不超過70％重量，或不超過60％重量，或不超過50％重量，或不超過40％重量，或不超過30％重量，或不超過20％重量，或不超過10％重量的化合物C以除了化合物C-形式1之外的形式存在。在另一實施方案中，本發明涉及包含化合物C的藥物組合物，其中不超過5％重量，或不超過4％重量，或不超過3％重量，或不超過2％重量，或不超過1％重量，或不超過0.5％重量，或不超過0.2％重量，或不超過0.1％重量的化合物C以除了化合物C-形式1之外的形式存在。無需進一步詳細描述，相信本領域技術人員可以使用上述說明以其最大程度利用本發明。因此，以下實施例應當僅僅理解為是說明性的，并非以任何方式對本發明的范圍進行限制。實施例1(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺(化合物A)的制備(a)(1-乙酰基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯經1小時向哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯(200g，1mol)和三乙胺(150g，1.5mol)在二氯甲烷(3000mL)中的溶液中滴加乙酸酐(102g，1mol)，同時保持溫度在0℃。添加后，將混合物在0℃再攪拌2小時，此時TLC顯示反應完成。通過添加水(1L)將該溶液淬滅。收集有機相且用飽和碳酸氫鈉水溶液(1L)洗滌，用硫酸鈉干燥且濃縮以得到粗產物。四個批次并行地進行且合并的粗產物的重量為670g。LCMS(m/z)：243.1(M+1)。(b)1-(4-氨基哌啶-1-基)乙酮鹽酸鹽經30分鐘向(1-乙酰基哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(330g，1.36mol)在甲醇(1000mL)中的溶液中添加鹽酸(4M在甲醇中，300mL)以保持溫度在0℃。添加后，混合物在0℃再攪拌2小時，然后濃縮以得到粗產物。兩個批次并行地進行且合并的粗產物的重量為310g。1HNMR(400MHz，D2O)δ4.35(dd，J＝2.0，12.0Hz，1H)，3.98-3.85(m，1H)，3.44-3.30(m，1H)，3.18-3.05(m，1H)，2.75-2.58(m，1H)，2.06-1.92(m，5H)，1.61-1.31(m，2H)；LCMS(m/z)：143.1(M+1)。(c)6-羥基嘧啶-4-羧酸向(Z)-1,4-二乙氧基-1,4-二氧代丁-2-烯-2-醇化鈉(55.0g，262mmol)在水(500mL)中的溶液中添加乙酸甲脒(27.3g，262mmol)和氫氧化鈉(10.5g)。添加后，所得混合物在25℃攪拌16小時然后濃縮，然后通過添加鹽酸水溶液(1N)酸化直到pH＝1。所得固體通過過濾收集，用水和醚洗滌以得到6-羥基嘧啶-4-羧酸(6.0g，產率：16.3％)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.89(s，1H)，8.24(s，1H)，6.83(s，1H).(d)6-氯嘧啶-4-甲酰氯向6-羥基嘧啶-4-羧酸(300g，2.14mol)在乙酸乙酯(3000mL)中的攪拌的混合物中，緩慢滴加草酰氯(1356g，10.68mol)以保持反應溫度低于30℃。添加后，混合物在20℃攪拌30分鐘，然后將2mLN,N-二甲基甲酰胺添加至該混合物。該混合物然后在80℃攪拌16小時且濃縮以得到粗產物，其為黑色固體。三個批次并行地進行且合并的粗產物的重量為787g。(e)(R)-2-(氧雜環丙烷-2-基甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉在0℃向1,2,3,4-四氫異喹啉(10g，0.15mol)在四氫呋喃(100mL)中的溶液中添加氟化鉀(22g，0.3mmol)。1小時后，添加(S)-3-硝基苯磺酸氧雜環丙烷-2-基甲基酯(21.4g，0.17mmol)且所得溶液在22℃攪拌16小時。固體通過過濾去除且用四氫呋喃洗滌。然后濃縮溶液(15g，產率53％)。LCMS(m/z)：190.1(M+1)。(f)(S)-1-氨基-3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙-2-醇在-78℃向(R)-2-(氧雜環丙烷-2-基甲基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(15g，0.08mol)在乙醇(100mL)中的溶液緩慢鼓泡氨氣。然后將反應混合物密封且在80℃加熱3小時。然后將反應混合物濃縮(15g，產率92％)。LCMS(m/z)：207.1(M+1)。(g)(S)-6-氯-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺在-60℃經1小時向(S)-1-氨基-3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)丙-2-醇(247g，1.20mol)和三乙胺(250g，2.5mol)在二氯甲烷(3500mL)中的攪拌混合物中緩慢添加6-氯嘧啶-4-甲酰氯(190g在100mL二氯甲烷中)。添加后，該混合物然后溫熱至10℃。持續攪拌1小時，此時TLC顯示反應完成。該反應通過添加水(1.5L)淬滅。收集有機相，用硫酸鈉干燥且蒸發。殘余物通過快速色譜法純化(乙酸乙酯～二氯甲烷：甲醇＝10:1)以得到所需產物，其為淡黃色固體。四個批次并行地進行且合并的粗產物的重量為800g，49％產率。1HNMR(400MHz，MeOD-d4)δ8.73(d，J＝1.0Hz，1H)，8.07(d，J＝1.0Hz，1H)，7.17-7.06(m，3H)，7.00(d，J＝7.0Hz，1H)，4.12(q，J＝6.0Hz，1H)，3.74(s，2H)，3.64-3.53(m，2H)，2.94(q，J＝5.5Hz，2H)，2.92-2.81(m，2H)，2.78-2.64(m，2H)；LCMS(m/z)：347.2[M+H]+。(h)(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺將(S)-6-氯-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺(190g，0.55mmol)、1-(4-氨基哌啶-1-基)乙酮(78g)和三乙胺(100g，1mol)在異丙醇(2000mL)中的溶液在60℃攪拌16小時。將混合物濃縮且殘余物通過快速色譜法純化以得到所需產物。四個批次并行地進行且合并的粗產物的重量為482g。該物質進一步通過制備HPLC純化以得到標題化合物(325g，>98％純度，游離堿形式)。1HNMR(400MHz，MeOD-d4)δ8.26(s，1H)，7.15-7.02(m，5H)，4.46(m，1H)，4.15-4.07(m，2H)，3.88(m，1H)，3.74(s，2H)，3.53(m，2H)，3.33(m，1H)，2.95-2.86(m，5H)，2.68(m，2H)，2.14-2.01(m，5H)，1.48-1.42(m，2H)；LCMS(m/z)：453.3[M+H]+。實施例2(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺的琥珀酸鹽(化合物B)的制備(a)小規模將乙酸乙酯(0.5mL)添加至(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺(無定形游離堿)(19.9mg)。向懸浮液添加琥珀酸(甲醇中的1M溶液，1.0當量)且懸浮液的溫度在40℃至5℃循環48小時。結晶鹽通過離心機過濾分離且固體通過XRPD分析。(b)大規模將異丙醇(5.0mL)添加至(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺(無定形游離堿)(361.3mg)。將懸浮液加熱至40℃且添加琥珀酸(甲醇中的1M溶液，1.0當量)。向懸浮液添加琥珀酸鹽晶種(根據以上操作(a)制備)且懸浮液的溫度在40℃至5℃循環16小時。結晶琥珀酸鹽在真空分離，風干15分鐘且在真空烘箱中在40℃干燥4小時。結晶琥珀酸鹽的產率為68.6％(312.9mg)。琥珀酸鹽的化學計量通過1HNMR測定為約1:1((S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺:琥珀酸)。該物質的X-射線粉末衍射(XRPD)圖(化合物B-形式1)示于圖1且衍射角和d-間距的總結示于下表I。XRPD分析在Si0-背景晶片上通過PANanalyticalX’PertPro衍射計進行。采集條件包括：CuKα輻射，發生器電壓：45kV，發生器電流：40mA，步長：0.02°2θ。表I標題化合物的差示掃描量熱法(DSC)熱分析圖在40mL/minN2吹掃下在裝配自動進樣器和冷凍冷卻系統的TAInstrumentsQ100差示掃描熱量計上記錄，且示于圖3。實驗使用15℃/min的加熱速率在在卷邊的鋁盤中進行。化合物B-形式1的DSC熱分析圖顯示吸熱且起始溫度為約144.1℃。本領域技術人員將認識到吸熱的起始溫度可根據實驗條件而改變。標題化合物的熱重量分析(TGA)熱分析圖在TAInstrumentsQ5000熱重分析儀上記錄且示于圖5。該實驗以60mL/minN2流速和15℃/min的加熱速率進行。化合物B-形式1的TGA熱分析圖顯示在低于75℃有約0.53％失水。化合物B顯示以下性質:在敞開容器中在25℃/60％RH、在敞開容器中在40℃/75％RH、和在封閉容器中50℃/環境條件下，4周后有≤0.4％降解。在敞開容器中在25℃/60％RH、在敞開容器中在40℃/75％RH、和在封閉容器中50℃/環境條件下，在6周后通過XRPD分析沒有物理變化。在1xICH固態下有因光分解導致的約1.4％降解，且XRPD觀察沒有形式變化。在生物相關介質和Britton-Robinson緩沖(BRB)溶液中的溶解度1模擬的胃液2模擬禁食狀態的腸液3模擬進食狀態的腸液4不飽和實施例3(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺的苯甲酸鹽(化合物C)的制備(a)小規模將甲基叔丁基醚(0.5mL)添加至(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺(無定形游離堿)(21.5mg)。向懸浮液添加苯甲酸(四氫呋喃中的3M溶液，1.0當量)且懸浮液的溫度在40℃至5℃循環48小時。結晶鹽通過離心機過濾分離且固體通過XRPD分析。(b)大規模將異丙醇(3.5mL)添加至(S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺(無定形游離堿)(349.9mg)。將懸浮液加熱至40℃且添加苯甲酸(四氫呋喃中的3M溶液，1.0當量)。向懸浮液添加苯甲酸鹽晶種(根據以上操作(a)制備)且懸浮液的溫度在40℃至5℃循環16小時。結晶苯甲酸鹽在真空分離，風干15分鐘且在真空烘箱中在40℃干燥4小時。結晶苯甲酸鹽的產率為68.6％(305.3mg)。苯甲酸鹽的化學計量通過1HNMR測定為約1:1((S)-6-((1-乙酰基哌啶-4-基)氨基)-N-(3-(3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2-羥丙基)嘧啶-4-甲酰胺:苯甲酸)。該物質的X-射線粉末衍射(XRPD)圖(化合物C-形式1)示于圖2且衍射角和d-間距的總結示于下表II。XRPD分析在Si0-背景晶片上通過PANanalyticalX’PertPro衍射計進行。采集條件包括：CuKα輻射，發生器電壓：45kV，發生器電流：40mA，步長：0.02°2θ。表II標題化合物的差示掃描量熱法(DSC)熱分析圖在40mL/minN2吹掃下在裝配自動進樣器和冷凍冷卻系統的TAInstrumentsQ100差示掃描熱量計上記錄，且示于圖4。實驗使用15℃/min的加熱速率在在卷邊的鋁盤中進行。化合物C-形式1的DSC熱分析圖顯示吸熱且起始溫度為約141.7℃。本領域技術人員將認識到吸熱的起始溫度可根據實驗條件而改變。標題化合物的熱重量分析(TGA)熱分析圖在TAInstrumentsQ5000熱重分析儀上記錄且示于圖6。該實驗以60mL/minN2流速和15℃/min的加熱速率進行。化合物C-形式1的TGA熱分析圖顯示在低于75℃有約1.25％失水。化合物C顯示以下性質:在敞開容器中在25℃/60％RH、在敞開容器中在40℃/75％RH、和在封閉容器中50℃/環境條件下，2周后通過XRPD分析檢測沒有物理變化。在1xICH固態下有因光分解導致的約1.6％降解，且XRPD觀察沒有形式變化。在生物相關介質和Britton-Robinson緩沖(BRB)溶液中的溶解度介質24hpH24h溶解度(mg/mL)4水6.7>1.8SGF1pH1.61.8>1.7FaSSIF2pH6.56.5>1.8FeSSIF3pH6.56.5>1.7BRBpH44.3>1.6BRBpH77>1.9BRBpH109.6>1.41模擬的胃液2模擬禁食狀態的腸液3模擬進食狀態的腸液4不飽和當前第1頁1 2 3