一種用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法。包括如下步驟：取鯊魚軟骨，粉碎成細粉，加入水中，攪拌均勻，再置于蒸餾釜中進行蒸餾，除去蒸發(fā)的蒸汽之后，放冷，得到浸提液；使浸提液的pH在4.0以下，用超濾膜過濾之后，再將超濾濾液送入填充有氧化鋁顆粒的床層中進行吸附，得到透過液；調(diào)節(jié)透過液的pH至10.0以上，再送入大孔吸附樹脂進行吸附除雜，得到除雜液；將除雜液的pH調(diào)節(jié)在6.0～7.0，減壓濃縮、結(jié)晶、離心、干燥后，得到鯊魚軟骨素。本發(fā)明通過蒸餾的方式去除軟骨中的小分子雜質(zhì)，并可以同時對軟骨的纖維結(jié)構(gòu)起到一定的破壞作用，可以使軟骨素盡可能多的析出，最終可以獲得高收率、高純度的軟骨素。
【專利說明】一種用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法
[0001]
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002] 本發(fā)明涉及一種用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法，屬于天然藥物化學(xué)技術(shù)領(lǐng) 域。
[0003]
【背景技術(shù)】
[0004] 鯊魚軟骨含有4種復(fù)雜的活性蛋白和硫酸軟骨素及多糖等有效成分，即"防止腫 瘤新生血管生長因子"和"促進人體軟骨再生"。鯊魚軟骨中含有可以促進人體關(guān)節(jié)軟骨再 生的物質(zhì)，如氨基葡萄糖、硫酸軟骨素、膠原蛋白等等。這些物質(zhì)以均衡的比例組成，可以促 進人體軟骨再生。而腫瘤生長和轉(zhuǎn)移，依賴于新生血管的增生，以提供養(yǎng)分，若腫瘤的血管 網(wǎng)被抑制破壞，那么腫瘤的生長和發(fā)展就會受阻。而"因子"恰好能阻止腫瘤新生血管網(wǎng)絡(luò) 的增生，繼而切斷癌細胞的養(yǎng)分及新陳代謝。蛋白質(zhì)是人體所必需的重要的營養(yǎng)成分，而軟 骨素硫酸鹽是目前醫(yī)學(xué)證明的富含粘性物質(zhì)的主要代表。粘性物質(zhì)(粘性多倍體)是人體結(jié) 構(gòu)組織的重要成分。但研究表明鯊魚軟骨并無抑制腫瘤癌癥的作用，鯊魚也并非不得癌癥， 人們已在至少23種鯊魚身上發(fā)現(xiàn)腫瘤。
[0005] 硫酸軟骨素是從鯊魚軟骨提取、純化制備的酸性黏多糖類物質(zhì)，是構(gòu)成細胞間質(zhì) 的主要成份，對維持細胞環(huán)境的相對穩(wěn)定性和正常功能具有重要作用?？杉铀賯谟?，減 少瘢痕組織的產(chǎn)生。通過促進基質(zhì)的生成，為細胞的遷移提供構(gòu)架，有利于角膜上皮細胞的 遷移，從而促進角膜創(chuàng)傷的愈合。硫酸軟骨素可以改善血液循環(huán)，加速新陳代謝，促進滲出 液的吸收及炎癥的消除。
[0006] 現(xiàn)有的硫酸軟骨素一般是通常沉淀法從鯊魚軟骨中提取得到的，存在著提取工藝 收率低、產(chǎn)物純度低的不足。
[0007]
【發(fā)明內(nèi)容】
[0008] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是：現(xiàn)有的硫酸軟骨素提取工藝收率低、產(chǎn)物純度低 的不足。提出一種用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法。
[0009] 技術(shù)方案： 一種用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法，包括如下步驟： 第1步、按重量份計，取鯊魚軟骨10?20份，粉碎成細粉，加入20?40份的水中，攪 拌均勻，再置于蒸餾釜中進行蒸餾，除去蒸發(fā)的蒸汽之后，放冷，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4. 0以下，用超濾膜過濾之后，再將超濾濾液送 入填充有氧化鋁顆粒的床層中進行吸附，得到透過液； 第3步、用NaOH溶液調(diào)節(jié)透過液的pH至10. 0以上，再送入大孔吸附樹脂進行吸附除 雜，得到除雜液； 第4步、用稀硫酸將除雜液的pH調(diào)節(jié)在6. O?7.0,減壓濃縮、結(jié)晶、離心、干燥后，得到 鯊魚軟骨素。
[0010] 所述的第1步中，蒸餾塔的溫度是120?140°C，壓力是0? 3?0? 5 MPa。
[0011] 所述的第1步中，蒸餾時間是〇. 5?2小時。
[0012] 所述的第2步中，超濾膜的截留分子量是200000Da。
[0013] 所述的第3步中，所述的大孔吸附樹脂是D101。
[0014] 每I Kg的軟骨中可以制得軟骨素0? 04 Kg，純度為93%。
[0015] 有益效果 本發(fā)明通過蒸餾的方式去除軟骨中的小分子雜質(zhì)，并可以同時對軟骨的纖維結(jié)構(gòu)起到 一定的破壞作用，可以使軟骨素盡可能多的析出，通過氧化鋁床層的目的是用于吸附掉一 些大分子的蛋白、多肽等雜質(zhì)。將料液的PH調(diào)節(jié)為10以上后，可以利用大孔吸附樹脂進一 步地除去雜質(zhì)，而保留有效的軟骨素的成分，最終可以獲得高收率、高純度的軟骨素。
[0016]
【具體實施方式】
[0017] 實施例1 一種用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法，包括如下步驟： 第1步、取鯊魚軟骨l〇Kg，粉碎成細粉，加入20 Kg的水中，攪拌均勻，再置于蒸餾釜中 進行蒸餾，蒸餾塔的溫度是120°C，壓力是0. 3 MPa，蒸餾時間是0. 5小時，除去蒸發(fā)的蒸汽 之后，放冷，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4.0,用超濾膜過濾，超濾膜的截留分子量是 200000Da，再將超濾濾液送入填充有氧化鋁顆粒的床層中進行吸附，得到透過液； 第3步、用NaOH溶液調(diào)節(jié)透過液的pH至10. 0,再送入大孔吸附樹脂DlOl進行吸附除 雜，得到除雜液； 第4步、用稀硫酸將除雜液的pH調(diào)節(jié)在6.0,減壓濃縮、結(jié)晶、離心、干燥后，得到鯊魚軟 骨素。
[0018] 實施例2 一種用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法，包括如下步驟： 第1步、取鯊魚軟骨20Kg，粉碎成細粉，加入40 Kg的水中，攪拌均勻，再置于蒸餾釜中 進行蒸餾，蒸餾塔的溫度是140°C，壓力是0. 5 MPa，蒸餾時間是2小時，除去蒸發(fā)的蒸汽之 后，放冷，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4. 0,用超濾膜過濾，超濾膜的截留分子量是 200000Da，再將超濾濾液送入填充有氧化鋁顆粒的床層中進行吸附，得到透過液； 第3步、用NaOH溶液調(diào)節(jié)透過液的pH至10. 0,再送入大孔吸附樹脂DlOl進行吸附除 雜，得到除雜液； 第4步、用稀硫酸將除雜液的pH調(diào)節(jié)在7.0,減壓濃縮、結(jié)晶、離心、干燥后，得到鯊魚軟 骨素。
[0019] 實施例3 一種用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法，包括如下步驟： 第1步、取鯊魚軟骨15Kg，粉碎成細粉，加入30 Kg的水中，攪拌均勻，再置于蒸餾釜中 進行蒸餾，蒸餾塔的溫度是130°C，壓力是0. 4 MPa，蒸餾時間是1小時，除去蒸發(fā)的蒸汽之 后，放冷，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4. 0,用超濾膜過濾，超濾膜的截留分子量是 200000Da，再將超濾濾液送入填充有氧化鋁顆粒的床層中進行吸附，得到透過液； 第3步、用NaOH溶液調(diào)節(jié)透過液的pH至10. 0,再送入大孔吸附樹脂DlOl進行吸附除 雜，得到除雜液； 第4步、用稀硫酸將除雜液的pH調(diào)節(jié)在6. 5,減壓濃縮、結(jié)晶、離心、干燥后，得到鯊魚軟 骨素。
[0020] 對照例1 與實施例3的區(qū)別在于：對鯊魚軟骨采用的是水浸提的方法進行提取，而不是采用蒸 餾法。
[0021] 一種用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法，包括如下步驟： 第1步、取鯊魚軟骨15Kg，粉碎成細粉，加入150 Kg的水中，加熱浸提，水溫在90? KKTC，提取時間1小時，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4.0,用超濾膜過濾，超濾膜的截留分子量是 200000Da，再將超濾濾液送入填充有氧化鋁顆粒的床層中進行吸附，得到透過液； 第3步、用NaOH溶液調(diào)節(jié)透過液的pH至10. 0,再送入大孔吸附樹脂DlOl進行吸附除 雜，得到除雜液； 第4步、用稀硫酸將除雜液的pH調(diào)節(jié)在6. 5,減壓濃縮、結(jié)晶、離心、干燥后，得到鯊魚軟 骨素。
[0022] 對照例2 與實施例3的區(qū)別在于：未采用氧化鋁吸附雜質(zhì)。
[0023] 一種用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法，包括如下步驟： 第1步、取鯊魚軟骨15Kg，粉碎成細粉，加入30 Kg的水中，攪拌均勻，再置于蒸餾釜中 進行蒸餾，蒸餾塔的溫度是130°C，壓力是0. 4 MPa，蒸餾時間是1小時，除去蒸發(fā)的蒸汽之 后，放冷，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4. 0,用超濾膜過濾，超濾膜的截留分子量是 200000Da，得到超濾透過液； 第3步、用NaOH溶液調(diào)節(jié)超濾透過液的pH至10. 0,再送入大孔吸附樹脂DlOl進行吸 附除雜，得到除雜液； 第4步、用稀硫酸將除雜液的pH調(diào)節(jié)在6. 5,減壓濃縮、結(jié)晶、離心、干燥后，得到鯊魚軟 骨素。
[0024] 對照例3 與實施例3的區(qū)別在于：在第3步未調(diào)節(jié)pH值。
[0025] 一種用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法，包括如下步驟： 第1步、取鯊魚軟骨15Kg，粉碎成細粉，加入30 Kg的水中，攪拌均勻，再置于蒸餾釜中 進行蒸餾，蒸餾塔的溫度是130°C，壓力是0. 4 MPa，蒸餾時間是1小時，除去蒸發(fā)的蒸汽之 后，放冷，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4.0,用超濾膜過濾，超濾膜的截留分子量是 200000Da，再將超濾濾液送入填充有氧化鋁顆粒的床層中進行吸附，得到透過液； 第3步，透過液送入大孔吸附樹脂DlOl進行吸附除雜，得到除雜液； 第4步、除雜液減壓濃縮、結(jié)晶、離心、干燥后，得到鯊魚軟骨素。
[0026] 各個實施例和對照例中獲得的鯊魚軟骨素的得量(按每IKg軟骨所能獲得的軟骨 素折算）以及純度如下表所示：
【權(quán)利要求】
1. 一種用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法，其特征在于，包括如下步驟： 第1步、按重量份計，取鯊魚軟骨10?20份，粉碎成細粉，加入20?40份的水中，攪 拌均勻，再置于蒸餾釜中進行蒸餾，除去蒸發(fā)的蒸汽之后，放冷，得到浸提液； 第2步、加入稀硫酸，使浸提液的pH在4. 0以下，用超濾膜過濾之后，再將超濾濾液送 入填充有氧化鋁顆粒的床層中進行吸附，得到透過液； 第3步、用NaOH溶液調(diào)節(jié)透過液的pH至10. 0以上，再送入大孔吸附樹脂進行吸附除 雜，得到除雜液； 第4步、用稀硫酸將除雜液的pH調(diào)節(jié)在6.0?7.0,減壓濃縮、結(jié)晶、離心、干燥后，得到 鯊魚軟骨素。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法，其特征在于：所述的 第1步中，蒸餾塔的溫度是120?140°C，壓力是0· 3?0· 5 MPa。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法，其特征在于：所述的 第1步中，蒸餾時間是〇. 5?2小時。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法，其特征在于：所述的 第2步中，超濾膜的截留分子量是200000Da。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于眼藥水的鯊魚軟骨素的提取方法，其特征在于：所述的 第3步中，所述的大孔吸附樹脂是D101。
【文檔編號】C08B37/08GK104292363SQ201410516903
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年9月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月30日
【發(fā)明者】吳克 申請人:江蘇奇力康皮膚藥業(yè)有限公司