一種從發酵液中提取純化高分子聚γ-谷氨酸的方法
【專利摘要】本發明公開了一種從發酵液中提取純化高分子聚γ-谷氨酸的方法，屬于化學【技術領域】，步驟1.發酵液中菌體的去除；步驟2.活性炭脫色；步驟3.發酵液中陰陽離子的去除順序；步驟4.發酵液濃縮；步驟5.干燥。本發明建立了一套經濟可行的預處理工藝，可有效實現γ-PGA高黏發酵液的菌液分離、色素等雜質的去除，并進行超濾凍干，最終精制得到高純度的γ-PGA成品，為γ-PGA的最終商品化提供了可行的工藝路線。
【專利說明】一種從發酵液中提取純化高分子聚Y-谷氨酸的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于化學【技術領域】，具體為一種從發酵液中提取純化高分子聚Y-谷氨酸的方法。
【背景技術】
[0002]y -PGA是自然界中微生物發酵產生的陰離子型多聚氨基酸，由D型谷氨酸和L型谷氨酸通過α-氨基和Y-羧基形成的高分子聚合物。在每一個重復單元的α碳原子，還有一個游離的羧基，因此Y-PGA的分子鏈上具有大量的活性較高的游離側鏈羧基，可在分子內部或分子之間形成氫鍵。Y-PGA通常由5000個左右的谷氨酸單體組成，相對分子質量一般在100~100kDa,沒有典型的肽鏈結構，也不是一種環狀多肽，基本骨架呈直鏈纖維狀。
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【權利要求】
1.一種從發酵液中提取純化高分子聚Y-谷氨酸的方法，其特征在于，包括以下步驟: 步驟1.發酵液中菌體的去除 (1)發酵液預處理 發酵結束后，將發酵液在40~100°C條件下處理10~60min，用蒸餾水稀釋I~10倍； (2)硅藻土過濾除菌體將濾紙浸濕后，鋪于抽濾漏斗的底部，使濾紙與漏斗底部緊緊相貼；將硅藻土與水的均勻混合液倒入鋪好濾紙的漏斗內，待硅藻土沉淀后，開啟真空泵進行真空抽濾，抽濾壓力為0.1MPa ;硅藻土形成I~2.5cm厚涂層且其表面水抽盡后，倒入預處理后的發酵液，慮液有黏性后收集，在不換硅藻土濾層的情況下，連續過濾4次，Ig硅藻土可以去除3.4mL原發酵液中的菌體； 步驟2.活性炭脫色 (1)發酵液中有色雜質吸光度的確定 對用活性炭處理前后的Y-PGA發酵液及購買的標準^^^^分別在波長〗。。?~500nm下進行紫外光譜全波長掃描，確定Y -PGA發酵液中色素雜質最大吸收波長，作為脫色處理的評價指標，結果是圖1活性炭脫色處理液紫外掃描圖譜；經紫外掃描后，Y-PGA發酵液中有色雜質的最大吸收波長為260nm ； (2)發酵液中有色雜質的去除 硅藻土除菌體后的發酵液，添加顆粒狀活性炭0.1~2.0% (質量體積比)，以20~10rpm的速度攬祥5~60min ； 步驟3.發酵液中陰陽離子的去除順序 脫色后的發酵液先過陽離子交換樹脂，后過陰離子交換樹脂； 步驟4.發酵液濃縮 用0.1 μ m-0.6ym孔徑的中空纖維膜進行濃縮，濃縮液稀釋至濃縮前液體體積的0.5~2倍，再進行濃縮，此濃縮-稀釋-濃縮的過程重復I~4次，發酵液中的小分子物質，如谷氨酸和葡萄糖殘余量可減少至O ; 步驟5.干燥 將濃縮后的Y -PGA發酵液分裝于樣品盤中，置于-80°C冰箱內預凍6h后，在-60°C下真空冷凍干燥，獲得純品Y-PGA。
【文檔編號】C08G69/10GK104163916SQ201410357519
【公開日】2014年11月26日 申請日期:2014年7月20日 優先權日:2014年7月20日
【發明者】梁金鐘, 段旭煌, 王風青 申請人:黑龍江康普生物科技有限公司, 哈爾濱商業大學