用于刺吸式口器類昆蟲生物測定的高分子多糖膜的制作方法
【專利摘要】本發明提供一種用于刺吸式口器類昆蟲生物測定的高分子多糖膜，其制備方法為：將高分子多糖和蔗糖混合后與水按1:50的重量比溶于水中，加熱溶解得到200mL溶液；然后傾倒至水平放置的120cm×60cm玻璃板上，上面用相同尺寸的玻璃板輕壓，兩層板中間留有0.2-0.3mm的縫隙，使200mL溶液充斥在兩層玻璃板之間；迅速將上層玻璃板揭起，使溶液在下層玻璃板上冷凝，待溶液完全凝固后，將玻璃板上的膜揭起，即得。該膜的主要原料是一種高分子多糖，它本身不會對昆蟲造成毒性損傷，另外此膜還具有吸水、透氣、柔軟、易刺破等特點。使刺吸式口器類昆蟲的口器可以輕松地刺破此膜，順利取食膜內的農藥、dsRNA或人工飼料，可成功地應用于刺吸式口器類昆蟲的生物測定或RNA干擾實驗，或人工飼養。
【專利說明】
【技術領域】
[0001] 本發明涉及高分子材料工程領域，具體地說，涉及一種用于刺吸式口器類昆蟲生 物測定的高分子多糖膜。 用于刺吸式口器類昆蟲生物測定的高分子多糖膜
【背景技術】
[0002] 目前，刺吸式口器類昆蟲對于胃毒類藥劑的生物測定、RNA干擾實驗或是人 工飼養主要參照Mittler和Dadd所采用的膜取食系統（Mittler T.E.，Dadd R.H.An improved method for feeding aphids on ar tificial diets.Ann Entomol Soc Am, 1964, 57:139-140)。即將需要進行生物測定的農藥、待飼物或人工飼料置于拉薄的兩 層parafilm膜之間，封在玻璃管的一端，讓刺吸式口器類昆蟲取食。然而研究發現，無論 parafilm膜拉的多薄，昆蟲的口器始終很難刺破parafilm膜。即使偶爾可以刺破，但也會因 為parafilm膜粘性大導致昆蟲口器無法拔出，導致昆蟲無法正常移動或取食，最終使得生 物測定或RNA干擾實驗失敗或昆蟲不能用人工飼料飼養，
【發明內容】
[0003] 本發明的目的是提供一種用于刺吸式口器類昆蟲生物測定的新型高分子多糖膜。
[0004] 為了實現本發明目的，本發明的一種用于刺吸式口器類昆蟲生物測定的高分子多 糖膜，所述高分子多糖膜的制備方法為：將高分子多糖和蔗糖按20:1的重量比混合，所得 混合物與水按1:50的重量比溶于水中，于100°C加熱溶解10分鐘得到200mL溶液；然后均 勻地傾倒至水平放置的120cmX60cm的玻璃板上，上面用相同尺寸的玻璃板輕壓，兩層板 中間留有0. 2-0. 3mm的縫隙，使200mL溶液完全充斥在兩層玻璃板之間；迅速將上層玻璃板 揭起，使溶液在下層玻璃板上冷凝，待溶液完全凝固后，將玻璃板上的膜揭起，即得。冷凝后 的高分子多糖膜的單層厚度約為10-20微米（圖1-3)。使用時微微用水浸濕，高分子膜即 可變得十分柔軟，使用非常方便。
[0005] 本發明中涉及的1?分子多糖的分子式為（C12H180 9)n，η為10-30，分子量 3000-9000KD。
[0006] 優選地，所述高分子多糖為瓊脂粉或瓊脂條。
[0007] 本發明還提供所述高分子多糖膜在刺吸式口器類昆蟲生物測定、RNA干擾實驗或 人工飼養中的應用，將農藥、待飼物（dsRNA)或飼料包裹于所述高分子多糖膜中，昆蟲利用 其刺吸式口器刺破所述高分子多糖膜，通過取食膜內的農藥、待飼物或人工飼料，從而完成 對刺吸式口器類昆蟲的生物測定或RNA干擾實驗，或用于人工飼養。
[0008] 本發明中涉及的刺吸式口器類昆蟲包括但不限于蚜蟲，例如大豆蚜蟲等。
[0009] 本發明提供的高分子多糖膜（瓊脂膜）的主要原料是一種高分子多糖，它本身不 會對昆蟲造成毒性損傷，另外此膜還具有吸水、透氣、柔軟、易刺破等特點。使得刺吸式口器 類昆蟲（例如蚜蟲）的口器可以輕松地刺破此膜，順利取食膜內的農藥、待飼物或人工飼 料。因此可以成功地完成刺吸式口器昆蟲的生物測定實驗及RNA干擾實驗；另外，在合適的 人工飼料條件下，還可利用此膜對刺吸式口器昆蟲進行短期的人工飼養。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0010] 圖1-圖3顯示出本發明實施例1中制備的高分子多糖膜的厚度。
[0011] 圖4為本發明實施例2中雙通玻璃管一端封閉的狀態。
[0012] 圖5為本發明實施例2中將無翅大豆蚜置于一端封閉的雙通玻璃管中的狀態。
[0013] 圖6-8分別顯示本發明實施例2中對大豆蚜進行生物測定的實驗流程。
【具體實施方式】
[0014] 以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。若未特別指明，實施例 中所用的技術手段為本領域技術人員所熟知的常規手段，所用原料均為市售商品。
[0015] 實施例1高分子多糖膜的制備方法
[0016] 將市售瓊脂粉或瓊脂條與蔗糖按20:1的重量比混合，所得混合物與水按1:50的 重量比溶于水中，于100°c加熱溶解10分鐘得到200mL溶液；然后均勻地傾倒至水平放置 的120cmX6〇 Cm的玻璃板上，上面用相同尺寸的玻璃板輕壓，兩層板中間留有0. 2-0. 3mm的 縫隙，使200mL溶液完全均勻地充斥在兩層玻璃板之間；迅速將上層玻璃板揭起，使溶液在 下層玻璃板上冷凝，待溶液完全凝固后，將玻璃板上的膜揭起，即得。
[0017] 冷凝后的高分子多糖膜的單層厚度約為10-20微米（圖1-3)。
[0018] 實施例2高分子多糖膜在刺吸式口器類昆蟲生物測定、RNA干擾實驗或人工飼養 中的應用
[0019] 實施例1中制備的高分子多糖膜可以用于各種刺吸式口器昆蟲的生物測定，RNA 干擾、或短期飼養。本實施例中以大豆蚜的生物測定為例具體描述該過程。
[0020] 1、取雙通玻璃管（直徑2. 5cm，高3cm)，用宣紙封住其一端（圖4)。
[0021] 2、取齡期一致合適的大豆蚜（無翅蚜）置于玻璃管中（圖5)。
[0022] 3、將農藥封于高分子多糖膜和parafilm膜之間，然后一起封在玻璃管的另一端 (高分子多糖膜置于內層，即靠近蚜蟲的一側）（圖6-8)。隨后將有高分子多糖膜一端朝上 (蚜蟲具有趨光性，此端朝上可以刺激蚜蟲在膜上取食），置于光照培養箱中（溫度25°C，相 對濕度75% )。24h后檢查大豆蚜蟲的死亡數和存活數。
[0023] 用毒死蜱農藥對比兩種膜對大豆蚜蟲的生物測定效果，結果如表1所示。
[0024] 表1用毒死蜱農藥對比兩種膜對大豆蚜蟲的生物測定效果
[0025]
【權利要求】
1. 用于刺吸式口器類昆蟲生物測定的高分子多糖膜，其特征在于，所述高分子多糖膜 的制備方法為：將高分子多糖和蔗糖混合，所得混合物與水按1:50的重量比溶于水中，于 100°C加熱溶解10分鐘得到200mL溶液；然后均勻地傾倒至水平放置的120cmX60cm的玻 璃板上，上面用相同尺寸的玻璃板輕壓，兩層板中間留有0. 2-0. 3mm的縫隙，使200mL溶液 完全充斥在兩層玻璃板之間；迅速將上層玻璃板揭起，使溶液在下層玻璃板上冷凝，待溶液 完全凝固后，將玻璃板上的膜揭起，即得； 其中，所述高分子多糖的分子式為（C12H1809)n，n為10-30,分子量3000-9000KD ;高分子 多糖與蔗糖按20:1的重量比混合。
2. 根據權利要求1所述的高分子多糖膜，其特征在于，所述高分子多糖為瓊脂粉或瓊 脂條。
3. 根據權利要求1所述的高分子多糖膜，其特征在于，所述高分子多糖膜的厚度為 10-20微米。
4. 權利要求1-3任一項所述高分子多糖膜在刺吸式口器類昆蟲生物測定，或RNA干擾 實驗，或人工飼養中的應用。
5. 根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述刺吸式口器類昆蟲包括但不限于大 豆蚜蟲。
6. 根據權利要求4所述的應用，其特征在于，將農藥或待飼物包裹于所述高分子多糖 膜中，昆蟲利用其刺吸式口器刺破所述高分子多糖膜，通過取食膜內的農藥或待飼物，從而 完成對刺吸式口器類昆蟲的生物測定或RNA干擾實驗，或用于人工飼養。
【文檔編號】C08K5/1545GK104119550SQ201410302670
【公開日】2014年10月29日 申請日期:2014年6月27日 優先權日:2014年6月27日
【發明者】宋敦倫, 曲焱焱, 宋越, 宋麗芳, 高希武 申請人:中國農業大學