一種從黑茶金花中提取茶多糖的方法
【專利摘要】本發明公開的一種從黑茶金花中提取茶多糖的方法，涉及生物醫藥【技術領域】，包括原料粉碎、第一次震蕩提取、第二次震蕩提取、一次濃縮、沉淀、上柱、二次濃縮、干燥等步驟；具有操作簡單、流程短、提取純度高等特點，既可用于從黑茶金花中提取茶多糖，也可用于從黑茶或其它茶葉或油茶粕中提取茶多糖。
【專利說明】一種從黑茶金花中提取茶多糖的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及生物醫藥【技術領域】，特別是一種從黑茶金花中提取茶多糖的方法。
【背景技術】
[0002]茶多糖是一類與蛋白質結合在一起的酸性糖蛋白，其多糖部分是由阿拉伯糖、核糖、木糖、葡萄糖與半乳糖組成。茶多糖具有防輻射、抗凝血及抗血栓、抗腫瘤、抗病毒、降血糖、增強機體免疫力、降血壓、降血脂、耐缺氧及增加冠狀動脈血流量等多種生物學功能。黑茶經發酵工序后，由于糖苷酶、蛋白酶、水解酶的作用，形成了相對長度較短的糖鏈，因而，更易被吸收，且生物活性更強。
[0003]黑茶屬全發酵茶，其茶多糖(Tea Polysaccharide)含量較高。黑茶在加工過程中產生一種獨特的金黃色顆粒，科研發現是一種對人體非常有益的益生菌體，專家命名為“冠突散囊菌”，俗稱“黑茶金花”，其含有較多的茶多糖，故有較強的降脂降壓、調節糖類代謝等功效。
[0004]目前，茶多糖的提 取主要是通過將茶葉粉碎，在一定的溫度下，先用酸性、中性或者弱堿性水浸提，再通過沉淀分離或柱層析分離，制備出粗品。其具體方法包括:一是有機溶劑沉淀法:茶多糖在有機溶劑中的溶解度較小通過有機溶劑沉淀的方法可將茶多糖與其他成分初步分離，用到的有機溶劑主要有乙醇、丙酮、乙酸乙酯等；二是委銨鹽沉淀法:在酸性、中性或弱堿性條件下，一些季銨鹽如溴代十六烷基三甲銨(CTAB)、十六烷基鹽酸吡啶(CPC)能與茶多糖形成不溶于水的鹽，以此把茶多糖與其他成分分離，再利用透析法得到較純品；三是樹脂法:茶多糖是一種酸性多糖，而酸性多糖一般都能被相關樹脂吸附，如DEAE-纖維樹脂，然后通過不同的洗脫液可將茶多糖與其他成分分開。
【發明內容】
[0005]本發明所要解決的技術問題是提供一種操作簡單、流程短、排放少、能耗低、用于從黑茶金花中制備茶多糖的方法。
[0006]本發明所采取的技術方案是發明一種從黑茶金花中提取茶多糖的方法，其工藝流程如下:
[0007]㈠、原料粉碎:將黑茶金花粉碎成粒徑為1-5 μ m的黑茶金花粉，備用；
[0008]㈡、第一次震蕩提取:將備用的黑茶金花粉投入耐高溫的震蕩器中，同時加入
1.5-3.0倍重量、體積濃度為70-95%的乙醇溶液，攪勻，在震蕩頻率為30-50HZ、室溫條件下，震蕩提取5-10min ;接著按3_5°C /min的升溫速度加熱至45_65°C，在頻率為60_100Ηζ的條件下，提取2-5min，過濾留渣，得第一次震蕩提取黑茶金花粉，備用；
[0009]㈢、第二次震蕩提取:將備用的第一次震蕩提取黑茶金花粉投入耐高溫的震蕩器中，加入2-4倍重量、溫度為40-50°C的溫水，將震蕩頻率調至80-120Hz，進行恒溫震蕩提取；當每100ml水提液中含固形物1.5-3.0mg時，將震蕩頻率調至140_160Hz，并按2-30C /min的升溫速度，將溫度升至60_70°C，進行恒溫震蕩提取；當每100ml水提液中含7.5-10.5mg固形物時，停止提取，過濾，得水提液，備用；
[0010]㈣、一次濃縮:將備用的水提液用弱堿調節其Ph值為7.5-8.0，攪勻；接著將其投入真空濃縮器中，在溫度為65-75 °C、真空度為0.4-0.8Mpa壓力下，濃縮至原體積的1/5-1/2，得濃縮液，備用；
[0011]㈤、沉淀:向備用的濃縮液中加入中性無機鹽，至中性無機鹽的濃度為5-9g/100ml時，將其轉移至冷庫中溫度為O~4°C，待濃縮液的溫度與冷庫溫度一致時，快速加入乙醇，使乙醇濃度達到40-55%，靜置25-50min ;待無沉淀析出時，將上層液在0.35-0.55MPa壓力、冷庫溫度下過孔徑為0.02-0.1mm的濾膜，收集濾液，備用；
[0012]㈥、上柱:向備用的濾液中加入溫度為40_55°C的溫水，邊加邊攪，至乙醇濃度為25-35% ;接著，將其上弱極性大孔樹脂(可采用AB-8或DlOl或S300等弱極性樹脂)，控制上柱流速為1-2.5L/min,收集上柱后的濾液；再將上柱后的濾液在0.5-0.85MPa的外壓力下，過中性氧化鋁柱，控制裝填的中性氧化鋁的重量為上柱后的濾液重量的1/4-1/2，接著快速收集上柱濾液，備用；
[0013]㈦、二次濃縮:將備用的上柱濾液投入真空濃縮器中，在溫度為50_65°C、真空度為0.4-0.8Mpa壓力下，濃縮至原體積的1/5-1/2，得濃縮上柱液，備用；
[0014]㈧、干燥:將備用的濃縮上柱液進行噴霧干燥，即得茶多糖成品。
[0015]步驟(E)中所述的弱堿是碳酸氫鈉或磷酸鈉或磷酸氫鈉。
[0016]步驟⑶中所述的中性無機鹽是硫酸鈉或硫酸銨或氯化鈉或硫酸鋅或氯化鋅。
[0017]本發明的從黑茶金花中提取茶多糖的方法，是采用黑磚茶在發酵過程中產生的黑茶金花(即:冠突散囊菌)作為原料，并采用原料粉碎、第一次震蕩提取、第二次震蕩提取、一次濃縮、沉淀、上柱、二次濃縮、干燥等步驟，去除了大部分雜質，因而，其成品中的茶多糖^ 90%。同時，由于采用震蕩提取，避免大量燃料使用`，既減少廢氣廢水等的排放，利于環境保護；加之在除去蛋白質時，采用中性鹽變性和低溫冷藏等方式，使得該操作簡單，能耗低，同時也易于生產人員操作；因此，在整個提取過程中，采用的都是易于操作、省時省能的技術，具有操作簡單、流程短、效率高等特點。
[0018]下面的表1是按照本發明方法從黑茶金花中提取的茶多糖的主要成份含量檢測數據。
[0019]表1茶多糖的主要成份含量的檢測對照表
[0020]
^含量(％ )
成份_
阿拉伯糖__62^4_
_巖藻糖__10.56_
___5^2_
_葡萄糖__12.35_
_^rf;__90.63_【具體實施方式】
[0021]以下結合實施例，對本發明做進一步的說明。下面的說明是以例舉的方式，但本發明的保護范圍并不局限于此。
[0022]本實施例的從黑茶金花中提取茶多糖的方法，其工藝流程如下:
[0023]㈠、原料粉碎:將黑茶金花投入轉速為3000-6000轉/min的超微粉碎機中，粉碎成粒徑為1-5 μ m的黑茶金花粉，備用；
[0024]㈡、第一次震蕩提取:將備用的黑茶金花粉投入耐高溫的震蕩器中，同時加入2倍重量、體積濃度為85%的乙醇溶液，攪勻，在震蕩頻率為40Hz、室溫條件下，震蕩提取8min ；接著按4°C /min的升溫速度加熱至55°C,在頻率為80Hz的條件下,提取4min,過濾留洛，得第一次震蕩提取黑茶金花粉，備用；
[0025]㈢、第二次震蕩提取:將備用的第一次震蕩提取黑茶金花粉投入耐高溫的震蕩器中，加入3倍重量、溫度為45°C的溫水，將震蕩頻率調至100Hz，進行恒溫震蕩提取；當每100ml水提液中含固形物2.5mg時，將震蕩頻率調至150Hz，并按3°C /min的升溫速度，將溫度升至65°C，進行恒溫震蕩提取；當每100ml水提液中含9mg固形物時，停止提取，過濾，得水提液，備用；
[0026]_、一次濃縮:將備用的水提液用濃度為35-45%的碳酸氫鈉水溶液調節其Ph值為
8.0，攪勻；接著將其投入真空濃縮器中，在溫度為70°C、真空度為0.6Mpa壓力下，濃縮至原體積的2/5，得濃縮液，備用；
[0027]㈤、沉淀:向備用的濃縮液中加入濃度為45-60%硫酸鈉水溶液，至硫酸鈉的濃度為7g/100ml時，將其轉移至·2°C的冷庫中，待濃縮液的溫度與冷庫溫度一致時，快速加入乙醇，使乙醇濃度達到50%，靜置40min ;待無沉淀析出時，將上層液在0.45MPa壓力、冷庫溫度下過孔徑為0.05mm的濾膜，收集濾液，備用；
[0028]㈥、上柱:向備用的濾液中加入溫度為50°C的溫水，邊加邊攪，至乙醇濃度為30% ；接著，將其上S300弱極性大孔樹脂，控制上柱流速為2L/min，收集上柱后的濾液；再將上柱后的濾液在0.7MPa的外壓力下，過中性氧化鋁柱，控制裝填的中性氧化鋁的重量為上柱后的濾液重量的1/2，接著快速收集上柱濾液，備用；
[0029]㈦、二次濃縮:將備用的上柱濾液投入真空濃縮器中，在溫度為60°C、真空度為
0.6Mpa壓力下，濃縮至原體積的2/5，得濃縮上柱液，備用；
[0030](Λ)、干燥:將備用的濃縮上柱液進行噴霧干燥，即得茶多糖成品，其含量為90.63%。
[0031]本發明的從黑茶金花中提取茶多糖的方法，既可用于從黑茶金花中提取茶多糖，也可用于從黑茶或其它茶葉或油茶柏中提取茶多糖。
【權利要求】
1.一種從黑茶金花中提取茶多糖的方法，其特征于工藝流程如下: (-)、原料粉碎:將黑茶金花粉碎成粒徑為1-5 μ m的黑茶金花粉，備用； ㈡、第一次震蕩提取:將備用的黑茶金花粉投入耐高溫的震蕩器中，同時加入1.5-3.0倍重量、體積濃度為70-95%的乙醇溶液，攪勻，在震蕩頻率為30-50HZ、室溫條件下，震蕩提取5-10min ;接著按3_5°C /min的升溫速度加熱至45_65°C，在頻率為60_100Hz的條件下，提取2-5min，過濾留渣，得第一次震蕩提取黑茶金花粉，備用； 曰、第二次震蕩提取:將備用的第一次震蕩提取黑茶金花粉投入耐高溫的震蕩器中，加入2-4倍重量、溫度為40-50°C的溫水，將震蕩頻率調至80-120HZ，進行恒溫震蕩提取；當每100ml水提液中含固形物1.5-3.0mg時，將震蕩頻率調至140_160Hz，并按2_3°C /min的升溫速度，將溫度升至60-70°C，進行恒溫震蕩提取；當每100ml水提液中含7.5-10.5mg固形物時，停止提取，過濾，得水提液，備用； _、一次濃縮:將備用的水提液用弱堿調節其Ph值為7.5-8.0，攪勻；接著將其投入真空濃縮器中，在溫度為65-75°C、真空度為0.4-0.8Mpa壓力下，濃縮至原體積的1/5-1/2，得濃縮液，備用； ㈤、沉淀:向備用的濃縮液中加入中性無機鹽，至中性無機鹽的濃度為5-9g/100ml時，將其轉移至冷庫中溫度為O~4°C，待濃縮液的溫度與冷庫溫度一致時，快速加入乙醇，使乙醇濃度達到40-55%，靜置25-50min ;待無沉淀析出時，將上層液在0.35-0.55MPa壓力、冷庫溫度下過孔徑為0.02-0.1mm的濾膜， 收集濾液，備用； ㈥、上柱:向備用的濾液中加入溫度為40-55 °C的溫水，邊加邊攪，至乙醇濃度為25-35% ;接著，將其上弱極性大孔樹脂，控制上柱流速為1-2.5L/min,收集上柱后的濾液；再將上柱后的濾液在0.5-0.85MPa的外壓力下，過中性氧化鋁柱，控制裝填的中性氧化鋁的重量為上柱后的濾液重量的1/4-1/2，接著快速收集上柱濾液，備用； (七)、二次濃縮:將備用的上柱濾液投入真空濃縮器中，在溫度為50-65°C、真空度為0.4-0.8Mpa壓力下，濃縮至原體積的1/5-1/2，得濃縮上柱液，備用； (八)、干燥:將備用的濃縮上柱液進行噴霧干燥，即得茶多糖成品。
2.根據權利要求1所述從黑茶中提取茶多糖的方法，其特征在于:步驟(E)中所述的弱堿是碳酸氫鈉或磷酸鈉或磷酸氫鈉。
3.根據權利要求1或2所述從黑茶中提取茶多糖的方法，其特征在于:步驟?中所述的中性無機鹽是硫酸鈉或硫酸銨或氯化鈉或硫酸鋅或氯化鋅。
【文檔編號】C08B37/00GK103739735SQ201410031932
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2014年1月23日 優先權日:2014年1月23日
【發明者】李文東, 鄒先明 申請人:李文東