制備高純度伊諾肝素方法
【專利摘要】本發明公開了一種伊諾肝素的提純制備方法，屬于生物工程領域。主要包括陰離子交換樹脂，疏水層析樹脂。此工藝操作簡單，安全可控，成本低。
【專利說明】制備高純度伊諾肝素方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種生物藥用原料的制備方法，屬于生物工程領域，具體是一種生產依諾肝素鈉的工藝。
技術背景
[0002]依諾肝素鈉(enoxaparin sodium, I)屬于低分子肝素,本品抗血栓作用強、出血危險性小，是目前抗凝血、抗血栓形成的主要治療藥物之一，2006年的全球銷售額達24、3ML歐元。曾經法國Aventis公司研發,并于1993年申請過制備工藝的專利。但該專利未涉及生產過程中酯化率、成環率及產物純化等關鍵工藝。采用該專利方法生產的樣品無法達到歐洲藥典4、0版規定的標準。本工藝究通過控制上述反應條件，得到適于工業生產的工藝，所得依諾肝素鈉成品均符合歐洲藥典。
【發明內容】
[0003]本發明在于解決上述問題，提供一種純度高，安全性好的依諾肝素鈉的制備方法。
[0004]本發明的技術方案為:
[0005]1、將粗品一諾肝素鈉溶于質量百分濃度1.2-1.8%氯化鈉溶液中，得到伊諾肝素的溶液，向濾液中加堿液直至產生沉淀，靜置，過濾去除不溶物，得濾液；
[0006]2、將步驟I中濾液用2_6mol/L鹽酸調批pH到7.0-7.5，上疏水層析柱，收集洗脫液；
[0007]3、將步驟2中收集`的洗脫液用純化水稀釋，將稀釋的洗脫液上樣到陰離子交換柱，上樣結束后，分別用0.005mol/L-0.02mol/L的和0.2mol/L-0.5mol/L的氯化鈉溶液洗滌柱體直至鋇鹽檢測無白色渾濁，最后以lm0l/L-3m0l/L的氯化鈉溶液洗滌，收集洗脫液；
[0008]4、將步驟3中的洗脫液用納濾膜孔徑< 1000的納濾脫鹽濃縮，直至濃縮液中肝素鈉的濃度為IOwt % -25wt% ；
[0009]5、將步驟4中得到的濃縮液沉淀，干燥即得到依諾肝素鈉成品。
【具體實施方式】
[0010]實施例1
[0011](I)將50g —諾肝素鈉溶于質量百分濃度1.6%氯化鈉溶液中，得到伊諾肝素的溶液，向濾液中加堿液直至產生沉淀，靜置，過濾去除不溶物，得濾液；
[0012](2)將濾液用2_6mol/L鹽酸調批pH到7.3，上疏水層析柱，收集洗脫液；
[0013](3)將收集的洗脫液用純化水稀釋，將稀釋的洗脫液上樣到陰離子交換柱，上樣結束后，分別用0.01mol/L的和0.3mol/L的氯化鈉溶液洗滌柱體直至鋇鹽檢測無白色渾濁，最后以2mol/L的氯化鈉溶液洗漆,收集洗脫液；
[0014](4)洗脫液用納濾膜孔徑< 1000的納濾脫鹽濃縮，直至濃縮液中肝素鈉的濃度為IOwt % -25wt % ；[0015](5)將得到的濃縮液沉淀，干燥即得到依諾肝素鈉成品。最終得到的一諾肝素鈉各項指標符合《歐洲藥典7.0》。`
【權利要求】
1.一種高純度伊諾肝素的制備方法，其特征在于其工藝步驟如下: (1)將粗品一諾肝素鈉溶于氯化鈉溶液中，得到伊諾肝素的溶液，向濾液中加堿液直至產生沉淀，，靜置，過濾去除不溶物，得濾液； (2)將步驟(1)中濾液用鹽酸調批pH到7.0-7.5，上疏水層析柱，收集洗脫液； (3)將步驟(2)中收集的洗脫液用純化水稀釋，將稀釋的洗脫液上樣到陰離子交換柱，上樣結束后，分別用0.005mol/L-0.02mol/L的和0.2mol/L-0.5mol/L的氯化鈉溶液洗滌柱體直至鋇鹽檢測無白色渾濁，最后以lm0l/L-3m0l/L的氯化鈉溶液洗滌，收集洗脫液； (4)將步驟(3)中的洗脫液進行納濾脫鹽濃縮，直至濃縮液中肝素鈉的濃度為IOwt % -25wt % ； (5)將步驟(4)中得到的濃縮液沉淀，干燥即得到依諾肝素鈉成品。
2.根據權利要求1所述的伊諾肝素鈉的制備方法，其特征在于:步驟(1)中的氯化鈉溶液的質量百分濃度為1.2-1.8%。
3.根據權利要求1所述的伊諾肝素鈉的制備方法，其特征在于:步驟(2)中鹽酸的濃度為 2_6mol/L。
4.根據權利要求1所述的伊諾肝素鈉的制備方法，其特征在于:步驟(4)中所述的納濾采用的納濾膜孔徑截留 分子量< 1000。
【文檔編號】C08B37/10GK103804523SQ201310625608
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2013年11月24日 優先權日:2013年11月24日
【發明者】劉乃山, 周曉娜, 遲培升, 夏襯來 申請人:青島九龍生物醫藥有限公司