一種以鮮天麻為原料的天麻多糖制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種以鮮天麻為原料的天麻多糖制備方法。本發(fā)明的技術(shù)方案是將采集的鮮天麻洗凈后用微波法殺青、加水磨漿、漿液采用單一或復(fù)合酶酶解，酶解液過濾后，超濾膜超濾，收集分子切割量20KDa以上,150KDa以下的組分，冷凍干燥，得到天麻多糖。采用酶法輔助超濾膜超濾提取天麻多糖，對(duì)多糖結(jié)構(gòu)破壞小，既提高了多糖的得率，又提高了多糖的純度，還保持多糖的活性。通過本方法制備的天麻多糖是除去蛋白后的純多糖，具有生產(chǎn)工藝合理、簡(jiǎn)單，易于工業(yè)化生產(chǎn)的特點(diǎn)，生產(chǎn)的天麻多糖可以廣泛的應(yīng)用于各種保健食品及藥品中。
【專利說明】一種以鮮天麻為原料的天麻多糖制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種以鮮天麻為原料的天麻多糖制備方法，屬于植物活性成份提取加工領(lǐng)域。【背景技術(shù)】
[0002]天麻(Gastrodiaelata BI)屬蘭科(Orehidaceae)、天麻屬(Gastrodieae)多年生異養(yǎng)草本植物。又名定風(fēng)草、離合草、仙人腳、鬼督郵、赤箭等，天麻是古今醫(yī)家常用的名貴中藥，也是綠色保健珍品，至今已有二千多年的應(yīng)用歷史。天麻以治療眩暈頭痛、驚厥抽搐、四肢麻木、風(fēng)濕、體痛、語言不遂、血脈不通、痰癰氣阻等癥見長(zhǎng)，故有“三鎮(zhèn)”、“三抗”、“一補(bǔ)”之說，即抗癲癇、抗驚厥、抗風(fēng)濕，鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痙、鎮(zhèn)痛，補(bǔ)虛，現(xiàn)代藥理研究表明，天麻主要有四大治療作用:對(duì)神經(jīng)中樞系統(tǒng)的鎮(zhèn)靜、抗驚厥和鎮(zhèn)痛作用；對(duì)心血管系統(tǒng)的強(qiáng)心作用；有耐缺氧作用和增強(qiáng)免疫功能的作用；同時(shí)，天麻還具有很好的保健作用。天麻的主要有效成分是天麻素等酚性化合物和天麻多糖，其中天麻多糖有免疫調(diào)節(jié)、降血糖、清除體內(nèi)自由基、延緩衰老等作用，另有多種礦質(zhì)元素及蛋白質(zhì)、氨基酸。但現(xiàn)代科學(xué)對(duì)天麻的研究主要集中在天麻素上，而對(duì)于天麻中所含的其它成分，特別是天麻多糖研究較少，既不夠系統(tǒng)也不夠深入。在現(xiàn)有的專利文獻(xiàn)中，僅有CN101357192B以鮮天麻為原料的天麻粗多糖及天麻醇溶物的分離制備方法，鮮天麻殺青、破碎、加水磨漿、漿液過濾，清液醇沉，得天麻粗多糖，天麻濾渣用醇滲濾提取，提取液經(jīng)過濃縮、干燥、得天麻醇溶物。其天麻粗多糖包含了蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)結(jié)合糖，低聚糖等。在非專利文獻(xiàn):[明建等.天麻水溶性多糖分離純化及理化性質(zhì)研究.食品科學(xué)，2008，29 (9):344-348 ;趙鵬.天麻多糖的研究概況.甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，25(4):49-52 ;朱曉霞等.天麻多糖提取工藝優(yōu)化.時(shí)珍國(guó)藥醫(yī)藥，2007，18(4):906-907;劉明慶等.天麻多糖提取工藝及純化研究中國(guó)藥師.2011，14(11): 1593-1596]均以干天麻為原料，水提、Seaveg法除蛋白、醇沉等制備天麻多糖；未見鮮天麻為原料,酶解后，膜分離制備天麻多糖的報(bào)道。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明提供了一種以鮮天麻為原料的天麻多糖制備方法，其目的是通過簡(jiǎn)易可行、可操作行強(qiáng)的工藝技術(shù)，解決天麻多糖的制備工藝步驟復(fù)雜、操作耗時(shí)、生產(chǎn)成本較高問題。
[0004]本發(fā)明采用技術(shù)方案如下:
[0005](I)將鮮天麻洗凈，在微波功率600~800W進(jìn)行微波殺酶處理，至天麻無白心。
[0006](2)加3-5倍水磨衆(zhòng),至顆粒度2~10 μ m。
[0007](3)向天麻漿液中加入鮮天麻質(zhì)量0.2~2.0%的酶活45萬u/g的纖維素酶、酶活100萬u/g的木瓜蛋白酶，酶活120萬U/g中性蛋白酶中的一種或數(shù)種，進(jìn)行酶解，酶解時(shí)間0.5~4小時(shí)，酶解溫度30~65°C，酶解液pH5~7。
[0008](4)酶解液過濾是先經(jīng)過吊帶式離心機(jī)粗濾，再經(jīng)澄清型管式離心機(jī)精濾，濾得料液1，濾渣加5~8倍水，加入0.2~2.0 %濾渣重量的單一酶或復(fù)合酶再進(jìn)行酶解提取，酶解液經(jīng)相同方法過濾得料液2，合并料液I和料液2。
[0009](5)合并的料液先采用分子切割量150~120KDa超濾膜進(jìn)行超濾處理，超濾壓力為0.08~0.25MPa，溫度為20~40°C，濾過液繼續(xù)采用分子切割量20KDa的超濾膜在壓力為0.08~0.20MPa，溫度為20~40°C，進(jìn)行超濾處理，收集截留液。
[0010](6)截留液真空濃縮后，冷凍干燥，粉碎后得到天麻多糖。
[0011]本方法天麻多糖的得率比傳統(tǒng)的水提醇沉法有較大的提高，獲得的多糖的含量也遠(yuǎn)高于水提醇沉法的產(chǎn)品；本產(chǎn)品為白色粉末狀，易溶于水，不溶于乙醇、乙醚、丙酮等有機(jī)溶劑；進(jìn)行Molisch反應(yīng)、蒽醌-硫酸反應(yīng)呈陽性，表明產(chǎn)品為糖類化合物；茚三酮反應(yīng)呈陰性，表明多糖中不含蛋白質(zhì)；與碘反應(yīng)呈陰性，表明多糖中不含有淀粉；費(fèi)林試劑反應(yīng)呈陰性，表明多糖中不含游離的還原性小分子糖。通過苯酚-硫酸法定量測(cè)定，本方法制備的多糖含量為72~78%。
[0012]本方法的優(yōu)點(diǎn):
[0013](I)本方法天麻多糖的得率比傳統(tǒng)的水提醇沉法有較大的提高，多糖的含量也遠(yuǎn)高于水提醇沉法的產(chǎn)品，同時(shí)還保持多糖的結(jié)構(gòu)與活性。
[0014](2)采用酶法輔助超濾膜超濾提取天麻多糖，具有生產(chǎn)工藝合理、簡(jiǎn)單，易于工業(yè)化生產(chǎn)的特點(diǎn)。
[0015](3)本方法天麻多糖產(chǎn)品純度高，可用來制成醫(yī)藥或功能食品上可以接受的制劑，與適當(dāng)輔料可制備成膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、散劑或其它藥學(xué)上可能的劑型。
【具體實(shí)施方式】
[0016]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但實(shí)施例并不是對(duì)本發(fā)明的限定。
[0017]實(shí)施例一
[0018]將鮮天麻50kg洗凈后用微波法進(jìn)行殺青，微波功率600W，至天麻透心；將殺青后天麻破碎、加3倍水磨楽至顆粒度2~10 μ m,向天麻衆(zhòng)液中加入100g酶活45萬u/g的纖維素酶、100g酶活100萬u/g的木瓜蛋白酶，100g酶活120萬U/g中性蛋白酶進(jìn)行酶解，酶解時(shí)間4小時(shí)，酶解溫度60°C，酶解液pH6~7 ;酶解液先經(jīng)過吊帶式離心機(jī)粗濾，再經(jīng)澄清型管式離心機(jī)精濾，濾得料液I ;濾渣再加5倍水，加入120g酶活100萬u/g的木瓜蛋白酶，100g酶活120萬U/g中性蛋白酶進(jìn)行酶解提取，酶解液過濾得料液2，合并料液I和料液2 ;合并的料液采用分子切割量150KDa超濾膜進(jìn)行超濾處理，超濾壓力為0.lOMPa，溫度為35°C，濾過液繼續(xù)采用分子切割量20KDa的超濾膜在壓力為0.09MPa，溫度為30°C進(jìn)行超濾處理，收集截留液，截留液真空濃縮后，冷凍干燥，粉碎后得到天麻多糖。
[0019]實(shí)施例二
[0020]將鮮天麻50kg洗凈后用微波法進(jìn)行殺青，微波功率800W，至天麻透心；將殺青后天麻破碎、加5倍水磨楽至顆粒度2~10 μ m,向天麻衆(zhòng)液中加入250g酶活45萬u/g的纖維素酶、300g酶活100萬u/g的木瓜蛋白酶，酶解時(shí)間2小時(shí)，酶解溫度50°C，酶解液pH6 ；酶解液先經(jīng)過吊帶式離心機(jī)粗濾，再經(jīng)澄清型管式離心機(jī)精濾，濾得料液I ;濾渣再加5倍水，100g酶活120萬U/g中性蛋白酶進(jìn)行酶解提取，酶解液過濾得料液2，合并料液I和料液2 ;合并的料液采用分子切割量150KDa超濾膜進(jìn)行超濾處理，超濾壓力為0.15MPa，溫度為30°C，濾過液繼續(xù)采用分子切割量20KDa的超濾膜進(jìn)行超濾處理，超濾壓力為0.12MPa，溫度為30°C，收集截留液，截留液真空濃縮后，冷凍干燥，粉碎后得到天麻多糖。
[0021]實(shí)施例三
[0022]將鮮天麻50kg洗凈后用微波法進(jìn)行殺青，微波功率600W，至天麻透心；將殺青后天麻破碎、加3倍水磨楽至顆粒度2~10 μ m,向天麻衆(zhòng)液中加入400g酶活100萬u/g的木瓜蛋白酶，酶解時(shí)間2小時(shí)，酶解溫度50°C，酶解液pH7 ;酶解液先經(jīng)吊帶式離心機(jī)粗濾，再經(jīng)澄清型管式離心機(jī)精濾，濾得料液I ;濾渣再加5倍水，加入100g酶活45萬u/g的纖維素酶、120g酶活120萬U/g中性蛋白酶進(jìn)行酶解提取，酶解液過濾得料液2，合并料液I和料液2 ;合并的料液采用分子切割量120KDa超濾膜進(jìn)行超濾處理，超濾壓力為0.20MPa，溫度為40°C，濾過液繼續(xù)采用分子切割量20KDa的超濾膜進(jìn)行超濾處理，超濾壓力為0.1OMPa,溫度為40°C，收集截留液，截留液真空濃縮后，冷凍干燥，粉碎后得到天麻多糖。
[0023]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種以鮮天麻為原料的天麻多糖制備方法，所述方法包括: (1)將鮮天麻洗凈進(jìn)行微波殺酶處理，微波功率600~800W，至天麻無白心。 (2)加3-5倍水磨漿，至顆粒度2~10μ m。 (3)向天麻漿液中加入鮮天麻質(zhì)量0.2~2.0%的單一酶或復(fù)合酶進(jìn)行酶解，酶解時(shí)間0.5~4小時(shí)，酶解溫度30~65°C，酶解液pH5~7。 (4)酶解液經(jīng)過濾得料液1，濾渣加5~8倍水量，加入濾渣質(zhì)量0.2~2.0%的單一酶或復(fù)合酶再進(jìn)行酶解提取，酶解液過濾得料液2，合并料液I和料液2。 (5)合并的料液采用超濾膜超濾，超濾壓力為0.08~0.25MPa，溫度為20~40°C，先采用分子切割量150~120KDa超濾膜進(jìn)行超濾處理，濾過液繼續(xù)采用分子切割量20KDa的超濾膜進(jìn)行超濾處理，收集截留液。 (6)截留液真空濃縮后，冷凍干燥，粉碎后得到天麻多糖。
2.如權(quán)利要求1所述的一種以鮮天麻為原料的天麻多糖制備方法，其特征在于:步驟3的酶解是在30~65°C，pH為5~7的條件下，向天麻漿液加入單一或復(fù)合酶混合酶，所述酶與鮮天麻的重量百分比為0.2~2.0% ;所述酶按重量百分比包括:酶活45萬u/g的纖維素酶O~2.0 %、酶活100萬u/g的木瓜蛋白酶O~2.0%，酶活120萬U/g中性蛋白酶O~2.0%，酶解時(shí)間0.5~4小時(shí)。
3.如權(quán)利要求1所述的一種天麻多糖的提取方法，其特征在于:步驟4的過濾是先經(jīng)吊帶式離心機(jī)粗濾，再經(jīng)澄清型管`式離心機(jī)精濾。
【文檔編號(hào)】C08B37/00GK103613679SQ201310586161
【公開日】2014年3月5日 申請(qǐng)日期:2013年11月19日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月19日
【發(fā)明者】劉祥義, 李雪梅, 畢榮璐, 劉鐳, 馬仲軍 申請(qǐng)人:劉祥義