專利名稱：一種低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝的制作方法
技術領域：
本發明屬于那曲肝素鈣的生產領域，尤其涉及一種低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝。
背景技術：
肝素是從哺乳動物組織(如小腸粘膜、肺、肝臟)中提取的一種硫酸化的糖胺聚糖類化合物。1916年，Mclean在研究凝血問題時在狗的肝臟中首先發現了這種物質，并命名為“heparin”。肝素是一種粘多糖硫酸酯的混合物，分子量從3kd 30kd不等，分子結構極其復雜，較長時間內無法人工合成。目前只有來源于豬小腸粘膜的肝素能用于臨床治療。肝素系列藥物主要用于急性冠狀動脈綜合征的預防與治療、缺血性腦血栓的預防與治療，也用于手術后抗凝、抗栓的預防及治療，其他深部靜脈血栓的預防與治療和透析抗凝治療等，還能廣泛用于婦產科、兒科、呼吸科、腫瘤、燒傷科等等。二十世紀八十年代中期，歐洲首先開發出低分子肝素(LMWH)，其主要由普通肝素經過物理分離、化學裂解、生物酶裂解得到，平均分子量一般為3kd 6.5kd。目前最主要的生產方法是化學裂解法，包括亞硝酸裂解法、過氧化物裂解法、卞酯裂解法等。低分子肝素(LMWH)比普通肝素具有更高的抗FXa/抗F II a效價比，因而能大大減少抗血栓過程中造成的出血傾向，目前臨床上正在逐步取代普通肝素。2008年全球肝素類產品銷量接近60億美元，2012年，全球肝素類藥物的銷售額約為97億美元，其中80%以上是低分子產品。那曲肝素鈣屬于低分子肝素的一種，以鈣鹽形式存在，由葛蘭素史克制藥有限公司開發，2009年全球銷售額達2.29億英鎊。其是由肝素鈉經亞硝酸裂解法制得的，平均分子量3.6kd 5kd,分子量小于2kd的部分占不到總量的15%,分子量2kd 4kd的部分占總量的35% 55%，分子量2kd 8kd的部分占總量的75% 95%。在那曲肝素鈣的生產過程中，往往涉及到以醇沉的方式來得到那曲肝素鈣的濕品，這樣在最終得到的那曲肝素鈣中往往會有乙醇的殘留，普通真空干燥技術很難使乙醇殘留含量< 0.5%。目前企業處理有機溶劑殘留的方法一般是采用冷凍干燥設備，但這種設備價格昂貴、運行成本高、能耗大、占地面積大和維護不方便。
發明內容
針對那曲肝素鈣生產過程中的乙醇殘留問題，本發明的目的在于提供一種低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，以使那曲肝素鈣中乙醇含量< 0.5%，從而使那曲肝素鈣的質量符合歐洲藥典EP7.0的要求。為了達到上述目的，本發明采用了如下技術方案:
一種低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，以肝素鈉為原料，經裂解、還原、超濾、濃縮后得到那曲肝素鈣的溶液，還包括如下5個步驟:S1、通過加水或濃縮調節那曲肝素鈣的溶液質量為肝素鈉質量的3.5 8.2倍；
S2、向醇沉罐中加入無水乙醇，加入無水乙醇的體積與經SI步驟處理后的那曲肝素鈣溶液的體積的比值范圍為3 7，而后將那曲肝素鈣溶液全部滴入醇沉罐，之后攪拌0.5 5小時，靜置I 60小時，形成沉淀靜置液；S3、從沉淀靜置液中吸出上清液，然后向剩余料液中加入無水乙醇并進行打漿，且加入的無水乙醇的體積是剩余料液體積的0.1 3倍，打漿時間為0.2 10小時；S4、對經S3步驟處理后的料液進行離心處理，并以70 99%的乙醇淋洗，然后再離心甩干得到那曲肝素鈣濕品，所用乙醇的體積占肝素鈉質量的I 10L/Kg ；S5、將那曲肝素鈣濕品置于真空干燥箱干燥，真空度不低于-0.09MPa，先常溫干燥I 15小時，再依次在30° C、45° C、60° C下各干燥0.5 10小時，最后在80° C下干燥I 20小時。通過研究發現，醇沉前那曲肝素鈣的濃度、醇沉時無水乙醇的用量、打漿時無水乙醇的用量和干燥時的溫度四個因素必須綜合考慮，缺一不可，而且每個參數并不是固定不變的，當一個因素出現較大變動時，另三個因素也可能要隨之改變，否則很可能造成乙醇殘留超標。相應原因推測有以下幾點:(I)、控制醇沉前那曲肝素鈣的 濃度，能使醇沉時產品顆粒形態更佳，若濃度過低，則顆粒過細，離心后產品較粘，濕重大，攜帶的乙醇和水分大大增多，不利于干燥。若濃度過高，則沉淀顆粒較大，干燥過程中不利于乙醇向外擴散。(2)、控制醇沉時無水乙醇的用量，同樣是使產品沉淀時具備較好的顆粒形態。(3)、控制打漿時無水乙醇的用量，則是為了調節產品中攜帶的乙醇和水的比例。應用普通真空干燥設備，干燥到后期，產品的干燥失重在4 6%左右趨于恒定(可能這部分水和乙醇以氫鍵形式和那曲肝素鈣分子結合，很難干燥)。打漿時調節合適的乙醇和水的比例，能使干燥后期剩余的4 6%主要是水分，乙醇則彡0.5%。若乙醇比例過高，則干燥后期恰恰相反，剩余的4 6%主要是乙醇，肯定超標；若乙醇比例過低，則干燥過程中容易出現大量結塊甚至融化，產品中包埋乙醇，難以擴散，也會使乙醇殘留超標。(4)、控制干燥溫度。初期常溫干燥，可以盡量除去產品表面的乙醇，并使顆粒內部的乙醇向外擴散，此時乙醇的揮發速度遠遠大于水分；逐漸升溫時，乙醇、水分的揮發速度同時加快，乙醇的揮發仍快于水分，但二者漸漸接近；后期80°C干燥時，隨著乙醇含量的降低，水分揮發速度最后超過乙醇揮發速度，干燥箱后期會有較多冷凝水。干燥后期剩余的4 6%主要是水分，乙醇則彡0.5%。S卩，通過控制醇沉前那曲肝素鈣的濃度、醇沉時無水乙醇的用量、打漿時無水乙醇的用量和干燥時的溫度四個因素，降低那曲肝素鈣中的乙醇殘留，使乙醇殘留量符合歐洲藥典EP7.0的要求。優選地，經SI步驟處理后的那曲肝素鈣溶液的質量百分含量為8.5 20%。優選地，經SI步驟處理后的那曲肝素鈣的溶液質量為肝素鈉質量的3.9 7.0倍，該那曲肝素鈣溶液的質量百分含量為10 18%。優選地，S2步驟中加入無水乙醇的體積與經SI步驟處理后的那曲肝素鈣溶液的體積的比值范圍為3.5 6.5。優選地，S2步驟中那曲肝素鈣溶液滴入醇沉罐后，攪拌時間為I 3小時，靜置時間為3 20小時。
優選地，S3步驟中加入的無水乙醇的體積是剩余料液體積的0.3 I倍，S3步驟中打漿時間為0.5 5小時。優選地，S4步驟中所用乙醇的體積占肝素鈉質量的2 5L/Kg。優選地，S4步驟中所用的乙醇為80 95%乙醇。優選地，S5步驟中先常溫干燥2 10小時，再依次在30° C、45° C、60° C下各干燥I 6小時,最后在80° C下干燥5 15小時。本發明公開了一種低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，該工藝通過控制醇沉前那曲肝素鈣溶液的濃度、醇沉時無水乙醇的用量、打漿時無水乙醇的用量和干燥時的溫度四個因素，通過簡單的真空干燥解決了那曲肝素鈣生產過程中乙醇殘留的問題，使得乙醇殘留< 0.5%，符合歐洲藥典EP7.0的要求，避開了冷凍干燥設備的使用，具有設備價格低廉、運行能耗低、維護方便、占地面積小、易于生產放大、生產成本低和工藝穩定等優點。
具體實施例方式下面將結合具體實施例對本發明的技術方案作進一步清楚、完整地說明。實施例一實施例一公開了一種低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，具體工藝如下:稱取Ikg肝素鈉用亞硝酸裂解后，還原、超濾濃縮，其中含有那曲肝素鈣約0.7kg ；上述濃縮液質量約3kg，加入純化水至溶液質量達4.2kg (肝素鈉投料量的4.2倍)，此時那曲肝素鈣溶液的濃度約為16.6%，體積約為4L ；
于醇沉罐加入14L無水乙醇(3.5倍體積于上述那曲肝素鈣溶液)，攪拌下滴加上述料液，加畢攪拌3小時，靜置10小時；吸出上清液9.5L，剩余料液體積約8.5L，攪拌下加入剩余料液0.8倍體積的無水乙醇6.8L，打漿0.5小時；將打漿后的料液離心，用5L、95%乙醇淋洗，甩干，得那曲肝素鈣濕品1.15kg ；真空干燥，真空度不低于-0.09MPa,先常溫干燥3小時，再依次30°C干燥I小時、45°C干燥2小時、60°C干燥3小時，最后80°C干燥10小時；得到那曲肝素鈣成品706g，經檢測乙醇殘留0.21%，符合歐洲藥典EP7.0的要求。實施例二實施例二公開了一種低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，具體工藝如下:稱取Ikg肝素鈉用亞硝酸裂解后，還原、超濾濃縮，其中含有那曲肝素鈣約0.7kg ；上述濃縮液質量約3kg，加入純化水至溶液質量達6.6kg (肝素鈉投料量的6.6倍)，此時那曲肝素鈣溶液的濃度約為10.6%，體積約為6.2L ；于醇沉罐加入24.8L無水乙醇(4倍體積于上述那曲肝素鈣溶液)，攪拌下滴加上述料液，加畢攪拌2小時，靜置15小時；吸出上清液12.7L，剩余料液體積約18.3L，攪拌下加入剩余料液0.4倍體積的無水乙醇7.3L，打漿I小時；將打漿后的料液離心，用3L、85%乙醇淋洗、甩干，得到那曲肝素鈣濕品1.68kg ；真空干燥，真空度不低于-0.09MPa,先常溫干燥5小時，再依次30°C干燥3小時、45°C干燥2小時、60°C干燥2小時，最后80°C干燥12小時；
得到那曲肝素鈣成品692g，經檢測乙醇殘留0.38%，符合歐洲藥典EP7.0的要求。在其它實施例中，醇沉前調節那曲肝素鈣溶液質量與肝素鈉質量的比值范圍為3.5 8.2，優選為3.9 7 ;醇沉過程中無水乙醇與那曲肝素鈣溶液體積的比值范圍為3 7，優選為3.5 6.5 ;醇沉過程中攪拌時間為0.5 5小時,優選為I 3小時,靜置時間為I 60小時，優選為3 20小時；打漿過程中無水乙醇的體積為剩余料液體積的0.1 3倍，優選為0.3 I倍；打漿過程中打漿時間為0.2 10小時，優選為0.5 5小時；淋洗過程中所用乙醇為70 99%乙醇，優選為80 95%乙醇，所用乙醇體積占肝素鈉質量的I 10L/Kg，優選為2 5L/Kg ;真空干燥過程中，真空度不低于-0.09MPa，先常溫干燥I 15小時，再依次30°C、45°C、60°C分別干燥0.5 10小時，最后80°C干燥I 20小時，優選為先常溫干燥2 10小時，再依次30°C、45°C、60°C分別干燥I 6小時，最后80°C干燥5 15小時。下面通過與實施例一的對比實驗1、對比實驗2來說明醇沉時無水乙醇的用量和打漿時無水乙醇的用量這兩個因素在降低乙醇殘留工藝中所發揮的重要作用，通過與實施例二的對比實驗1、對比實驗2來說明醇沉前那曲肝素鈣溶液的濃度和真空干燥時的溫度這兩個因素在降低乙醇殘留工藝中所發揮的重要作用。實施例一的對比實驗1:醇沉時無水乙醇的用量改變稱取Ikg肝素鈉用亞硝酸裂解后，還原、超濾濃縮，其中含有那曲肝素鈣約0.7kg ；上述濃縮液質量約3kg，加入純化水至溶液質量達4.2kg (肝素鈉投料量的4.2倍)，此時那曲肝素鈣溶液的濃度約為16.6%，體積約為4L ；于醇沉罐加入30L無水乙醇(7.5倍體積于上述那曲肝素鈣溶液)，攪拌下滴加上述料液，加畢攪拌3小時，靜置10小時；
吸出上清液19.8L，剩余料液體積約14.2L，攪拌下加入剩余料液0.8倍體積的無水乙醇11.4L，打漿0.5小時；將打漿后的料液離心，用5L、95%乙醇淋洗，甩干，得那曲肝素鈣濕品1.32kg ；真空干燥，真空度不低于-0.09MPa,先常溫干燥3小時，再依次30°C干燥I小時、45°C干燥2小時、60°C干燥3小時，最后80°C干燥10小時；得到那曲肝素鈣成品710g，經檢測乙醇殘留3.24%，不符合歐洲藥典EP7.0的要求。實施例一的對比實驗2:打漿時無水乙醇的用量改變稱取Ikg肝素鈉用亞硝酸裂解后，還原、超濾濃縮，其中含有那曲肝素鈣約0.7kg ；上述濃縮液質量約3kg，加入純化水至溶液質量達4.2kg (肝素鈉投料量的4.2倍)，此時那曲肝素鈣溶液的濃度約為16.6%，體積約為4L ；于醇沉罐加入14L無水乙醇(3.5倍體積于上述那曲肝素鈣溶液)，攪拌下滴加上述料液，加畢攪拌3小時，靜置10小時；吸出上清液9.6L，剩余料液體積約8.4L，攪拌下加入無水乙醇29.4L(3.5倍于剩余料液)，打漿0.5小時；將打漿后的料液離心，用5L、95%乙醇淋洗、甩干，得那曲肝素鈣濕品1.29kg ；真空干燥，真空度不低于-0.09MPa,先常溫干燥3小時，再依次30°C干燥I小時、45°C干燥2小時、60°C干燥3小時，最后80°C干燥10小時；
得到那曲肝素鈣成品701g，經檢測乙醇殘留4.20%,不符合歐洲藥典EP7.0的要求。
實施例二的對比實驗1:醇沉前那曲肝素鈣溶液的濃度改變稱取Ikg肝素鈉用亞硝酸裂解后，還原、超濾濃縮，其中含有那曲肝素鈣約0.7kg ；上述濃縮液質量約3kg，加入純化水至溶液質量達8.5kg (肝素鈉投料量的8.5倍)，此時那曲肝素鈣溶液的濃度約為8.23%，體積約為8.2L ；于醇沉罐加入32.8L無水乙醇(4倍體積于上述那曲肝素鈣溶液)，攪拌下滴加上述料液，加畢攪拌2小時，靜置15小時；吸出上清液19.1L，剩余料液體積約21.9L，攪拌下加入剩余料液0.4倍體積的無水乙醇8.8L，打漿I小時；將打漿后的料液離心，用3L、85%乙醇淋洗，甩干，得那曲肝素鈣濕品1.81kg ；真空干燥，真空度不低于-0.09MPa,先常溫干燥5小時，再依次30°C干燥3小時、45°C干燥2小時、60°C干燥2小時，最后80°C干燥12小時；得到那曲肝素鈣成品703g，經檢測乙醇殘留2.88%，不符合歐洲藥典EP7.0的要求。實施例二的對比實驗2:真空干燥時溫度控制改變稱取Ikg肝素鈉用亞硝酸裂解后，還原、超濾濃縮，其中含有那曲肝素鈣約0.7kg ；上述濃縮液質量約3kg，加入純化水至溶液質量達6.6kg (肝素鈉投料量的6.6倍)，此時那曲肝素鈣溶液的濃度約為10.6%，體積約為6.2L ；于醇沉罐加入24.8L無水乙醇(4倍體積于上述那曲肝素鈣溶液)，攪拌下滴加上述料液，加畢攪拌2小時，靜置15小時；吸出上清液12.5L，剩余料液體積約18.5L，攪拌下加入剩余料液0.4倍體積的無水乙醇7.4L，打漿I小時；將打漿后的料液離心，用3L、85%乙醇淋洗，甩干，得到那曲肝素鈣濕品1.70kg ；真空干燥，真空度不低于-0.09MPa，直接80°C，干燥中期產品結塊十分嚴重，粉碎后繼續干燥，總計干燥20小時，得到那曲肝素鈣成品696g，經檢測乙醇殘留2.70%，不符合歐洲藥典EP7.0的要求。由上述實施例及對比實驗可知，本發明公開了一種低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，通過控制醇沉前那曲肝素鈣溶液的濃度、醇沉時無水乙醇的用量、打漿時無水乙醇的用量和干燥時的溫度四個因素，通過簡單的真空干燥解決了那曲肝素鈣生產過程中乙醇殘留的問題，通過對比實施例說明了這四個因素在降低乙醇殘留工藝中發揮著重要作用；該工藝使得那曲肝素鈣中的乙醇殘留符合歐洲藥典EP7.0的要求，避開了冷凍干燥設備的使用，具有設備價格低廉、運行能耗低、維護方便、占地面積小、易于生產放大、生產成本低和工藝穩定等優點。值得注意的是，上述實施例僅是對本發明的技術方案的具體說明，并不用于限定本發明，凡是對本發明作同一構思的等同替換或變換，均屬于本發明的保護范圍。
權利要求
1.一種低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，以肝素鈉為原料，經裂解、還原、超濾、濃縮后得到那曲肝素鈣的溶液，其特征在于:還包括如下5個步驟: 51、通過加水或濃縮調節所述那曲肝素鈣的溶液質量為所述肝素鈉質量的3.5 8.2倍; 52、向醇沉罐中加入無水乙醇，加入所述無水乙醇的體積與經所述SI步驟處理后的那曲肝素鈣溶液的體積的比值范圍為3 7，而后將那曲肝素鈣溶液全部滴入醇沉罐，之后攪拌0.5 5小時，靜置I 60小時，形成沉淀靜置液； 53、從沉淀靜置液中吸出上清液，然后向剩余料液中加入無水乙醇并進行打漿，且加入的所述無水乙醇的體積是剩余料液體積的0.1 3倍，打漿時間為0.2 10小時； 54、對經S3步驟處理后的料液進行離心處理，并以70 99%的乙醇淋洗，然后再離心甩干得到那曲肝素鈣濕品，所用乙醇的體積占所述肝素鈉質量的I 10L/Kg ； 55、將所述那曲肝素鈣濕品置于真空干燥箱干燥，真空度不低于-0.09MPa，先常溫干燥I 15小時，再依次 在30° C、45° C、60° C下各干燥0.5 10小時，最后在80° C下干燥I 20小時。
2.根據權利要求1所述的低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，其特征在于:經所述SI步驟處理后的那曲肝素鈣溶液的質量百分含量為8.5 20%。
3.根據權利要求1所述的低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，其特征在于:經所述SI步驟處理后的那曲肝素鈣的溶液質量為所述肝素鈉質量的3.9 7.0倍，該那曲肝素鈣溶液的質量百分含量為10 18%。
4.根據權利要求1所述的低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，其特征在于:所述S2步驟中加入無水乙醇的體積與經所述SI步驟處理后的那曲肝素鈣溶液的體積的比值范圍為3.5 ~ 6.50
5.根據權利要求1所述的低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，其特征在于:所述S2步驟中那曲肝素鈣溶液滴入醇沉罐后，攪拌時間為I 3小時，靜置時間為3 20小時。
6.根據權利要求1所述的低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，其特征在于:所述S3步驟中加入的無水乙醇的體積是剩余料液體積的0.3 I倍，所述S3步驟中打漿時間為0.5 5小時。
7.根據權利要求1所述的低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，其特征在于:所述S4步驟中所用乙醇的體積占所述肝素鈉質量的2 5L/Kg。
8.根據權利要求1所述的低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，其特征在于:所述S4步驟中所用乙醇為80 95%乙醇。
9.根據權利要求1所述的低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝，其特征在于:所述S5步驟中先常溫干燥2 10小時，再依次在30° C、45° C、60° C下各干燥I 6小時，最后在80° C下干燥5 15小時。
全文摘要
本發明公開了一種低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝。該工藝以肝素鈉為原料經裂解、還原、超濾、濃縮后得到那曲肝素鈣的溶液，而后調節那曲肝素鈣溶液的濃度、醇沉過程中無水乙醇的用量、打漿過程中無水乙醇的用量和真空干燥時的溫度，最終得到那曲肝素鈣成品。本發明公開的低乙醇殘留的那曲肝素鈣生產工藝解決了那曲肝素鈣生產過程中乙醇殘留的問題，使那曲肝素鈣中的乙醇殘留≤0.5%，符合歐洲藥典EP7.0的要求，避開了冷凍干燥設備的使用，具有設備價格低廉、運行能耗低、維護方便、占地面積小、易于生產放大、生產成本低和工藝穩定等優點。
文檔編號C08B37/10GK103204958SQ201310145040
公開日2013年7月17日 申請日期2013年4月24日 優先權日2013年4月24日
發明者鄭華淦, 吳園園, 張滌平, 曲和之, 盛光陽, 王康 申請人:深圳賽保爾生物藥業有限公司