專利名稱：一種竹蓀水提殘?jiān)锌寡趸瘎┒嗵堑闹苽浞椒?br>
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及多糖領(lǐng)域，確切地說是一種竹蓀水提殘?jiān)懈呋钚远嗵堑闹苽浞椒ā?br>
背景技術(shù)：
竹蘇Dietyophora indusiata俗名有竹參、竹筌、面紗菌、網(wǎng)紗菌、竹姑娘，隸屬于腹菌綱、鬼筆目、鬼筆科、竹蓀屬，是名貴的食用菌，歷史上列為“宮廷貢品”，近代做為國宴名菜，為食療佳品。據(jù)報(bào)道竹蓀能補(bǔ)氣養(yǎng)陰、潤肺止咳、清熱利濕，具有滋補(bǔ)強(qiáng)壯、益氣補(bǔ)腦、寧神健體的功效；另外，竹蓀能夠保護(hù)肝臟，減少腹壁脂肪的積存，有俗稱“刮油”的作用?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明其對高血壓、神經(jīng)衰弱、腸胃疾病等具有一定的保健作用。雖然竹蓀很珍貴，但對竹蓀的研究與開發(fā)利用并不充分，目前主要集中在竹蓀的種植、化學(xué)成分的測定與藥理活性檢測等方面，而對竹蓀的主要活性化學(xué)成分多糖的研究不多，也未見對竹蓀水提殘?jiān)懈呋钚远嗵欠蛛x純化的報(bào)道。而本發(fā)明即是提供了一種竹蓀水提殘?jiān)懈呋钚钥寡趸瘎┒嗵堑闹苽浞椒ā?br>
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種竹蓀水提殘?jiān)锌寡趸瘎┒嗵堑闹苽浞椒?。本發(fā)明通過以下方案實(shí)現(xiàn)
一種竹蓀水提殘?jiān)锌寡趸瘎┒嗵堑闹苽浞椒?，包括以下步驟
(1)竹蓀水提殘?jiān)闹苽鋵⒏稍锏闹裆p磨碎，過80-100目篩得竹蓀粉末。稱取一定質(zhì)量的竹蓀粉末并加入40-50倍蒸餾水，攪拌均勻后用普通高壓鍋提取1-2小時(shí)，過濾。濾渣重復(fù)上述提取步驟1-2次。過濾獲得竹蓀水提殘?jiān)?br>
(2)多糖提取液的配置配制5%Na0H/0.05% NaBH4的混合堿溶液；
(3)竹蓀水提殘?jiān)卸嗵堑奶醏取取一定量的竹蓀水提殘?jiān)尤牖旌蠅A提液進(jìn)行提取，用雙層濾布過濾，濾液濃縮到原來體積的1/3-1/5后即得竹蓀水提殘?jiān)亩嗵翘崛∫海?br>
(4)多糖提取液中水不溶性α-(1— 3)-d-葡聚糖的去除攪拌過程中加入冰乙酸，調(diào)節(jié)提取液的PH至6-7，離心去除α-(1 —3)_d型不溶的沉淀，上清液即為所需的β _D_葡聚糖；
(5)脫色上清液用25-30%H202進(jìn)行脫色；
(6)小分子雜質(zhì)的去除將脫色后的糖液濃縮到原來體積的1/3-1/4，徹底透析，透析液濃縮到原來體積的1/5-1/7后離心去除去沉淀，獲得純凈的多糖濃縮液；
(7)多糖的純化把多糖濃縮液稀釋到濃度為1_2%，按等體積往溶液中緩慢加入預(yù)冷分析純丙酮，攪拌下將該混合液緩慢升溫至45-50°C，保持2-3 h后，立即離心分出沉淀物；
(8)透析與冷凍干燥把沉淀溶于蒸餾水中，用截留分子量3500Da的透析袋先對自來水透析3-4天，后用重蒸水透析2-3天。透析液濃縮后冷凍干燥即得干燥的竹蓀多糖。(9)抗氧化活性檢測取凍干的竹蓀多糖進(jìn)行體外清除· OH、O2-\ H2O2及DPPH的抗氧化試驗(yàn)。
所述步驟(3)中混合堿提液的加入量為竹蓀水提殘?jiān)?0-25倍，提取溫度為25-30°C，提取時(shí)間為1-2 h，提取次數(shù)為2-3次。所述步驟(4)中乙酸的濃度為1-1. 5 mol/L,離心機(jī)轉(zhuǎn)速5000-8000 rpm,離心時(shí)間為 15-30 Hiin0所述步驟(5)中加入H2O2的量為總體積的1/7-1/10，然后加熱到40_50°C，保持2-3 ho所述步驟(6)中透析袋規(guī)格為3500 Da,自來水水透析5-6天,蒸懼水透析3-4天，離心機(jī)轉(zhuǎn)速為8000-10000 rpm,離心時(shí)間為10-15 min。本發(fā)明的有益效果
(O提供一種簡單、成本低、高效、無污染的竹蓀水提殘?jiān)锌寡趸瘎┒嗵堑闹苽浞?br>
法;
(2)可實(shí)現(xiàn)竹蓀水提殘?jiān)某浞掷?，提高工業(yè)生產(chǎn)過程中的附加值；
(3)拓展了竹蓀的深加工領(lǐng)域，為竹蓀的進(jìn)一步開發(fā)利用提供參考。
具體實(shí)施例方式竹蓀水提殘?jiān)锌寡趸瘎┒嗵堑闹苽浞椒?br>
(1)竹蓀水提殘?jiān)闹苽鋵⒏稍锏闹裆p磨碎，過80目篩獲得竹蓀粉末。稱取一定質(zhì)量的竹蓀粉末并加入40倍蒸餾水， 攪拌均勻后用普通高壓鍋提取1. 5小時(shí)，過濾。濾渣重復(fù)上述提取步驟1-2次，過濾獲得竹蓀水提殘?jiān)?br>
(2)多糖提取液的配置配制5%Na0H/0.05% NaBH4的混合堿溶液；
(3)竹蓀水提殘?jiān)卸嗵堑奶崛∪∫欢康闹裆p水提殘?jiān)尤?0倍質(zhì)量比的混合堿提液于25°C下提取2 h，用雙層濾布過濾，濾渣重復(fù)提取I次，濾液濃縮到原來體積的1/4后即得竹蓀水提殘?jiān)亩嗵翘崛∫海?br>
(4)、多糖提取液中水不溶性α-(1— 3)-d-葡聚糖的去除攪拌過程中加入I mol/L冰乙酸，調(diào)節(jié)提取液的pH到為7，然后于5000-8000 rpm轉(zhuǎn)速下離心時(shí)間為15-30 min，離心去除α-(1 —3)-d型不溶的沉淀，上清液即為所需的β-D-葡聚糖；
(5)脫色上清液加入總體積1/7-1/10的30%Η202，然后加熱到50°C，保持2h，進(jìn)行脫
色
(6)小分子雜質(zhì)的去除將脫色后的糖液濃縮為原來的1/3-1/4，用規(guī)格為3500Da透析袋對自來水水透析5天，蒸餾水透析3天，透析液濃縮到原來體積的1/10后于8000-10000 rpm轉(zhuǎn)速下離心10 - 15 min去除去沉淀,獲得純凈的多糖濃縮液；
(7)多糖的純化把多糖濃縮液稀釋到1%，按等體積往溶液中緩慢加入預(yù)冷分析純丙酮，攪拌下將該混合液緩慢升溫至50°C，保持2 h后，立即離心分出沉淀物；
(8)透析與冷凍干燥把沉淀溶于蒸餾水中，用截留分子量3500Da的透析袋先對自來水透析，后用重蒸水透析。透析液濃縮后冷凍干燥即得干燥的竹蓀多糖。(9)、抗氧化活性檢測取凍干的竹蓀多糖進(jìn)行體外清除· OH、O2-\ H2O2及DPPH的抗氧化試驗(yàn)。結(jié)果表明，竹蓀多糖在濃度為2 mg/mL時(shí)對0H、02__、H2O2及DPPH的體外清除率達(dá)到86%、83%、74%和91%。說明竹蓀多糖具有較強(qiáng)的清除氧自由基的能力，是一種天然高效的抗氧化 劑。
權(quán)利要求
1.一種竹蓀水提殘?jiān)锌寡趸瘎┒嗵堑闹苽浞椒?，其特征在于包括以下步驟 (1)竹蓀水提殘?jiān)闹苽鋵⒏稍锏闹裆p磨碎，過80-100目篩得竹蓀粉末； 稱取一定質(zhì)量的竹蓀粉末并加入40-50倍蒸餾水，攪拌均勻后用普通高壓鍋提取1-2小時(shí)，過濾，濾渣重復(fù)上述提取步驟1-2次，過濾獲得竹蓀水提殘?jiān)? (2)多糖提取液的配置配制5%Na0H/0.05% NaBH4的混合堿溶液； (3)竹蓀水提殘?jiān)卸嗵堑奶崛∪∫欢康闹裆p水提殘?jiān)尤牖旌蠅A提液進(jìn)行提取，用雙層濾布過濾，濾液濃縮到原來體積的1/3-1/5后即得竹蓀水提殘?jiān)亩嗵翘崛∫海? (4)多糖提取液中水不溶性a- (I — 3)-d-葡聚糖的去除攪拌過程中加入冰乙酸，調(diào)節(jié)提取液的PH至6-7，離心去除a-(l —3)_d型不溶的沉淀，上清液即為所需的P-D-葡聚糖； (5)脫色上清液用25-30%H202進(jìn)行脫色； (6)小分子雜質(zhì)的去除將脫色后的糖液濃縮到原來體積的1/3-1/4，徹底透析，透析液濃縮到原來體積的1/5-1/7后離心去除去沉淀，獲得純凈的多糖濃縮液； (7)多糖的純化把多糖濃縮液稀釋到濃度為1_2%，按等體積往溶液中緩慢加入預(yù)冷分析純丙酮，攪拌下將該混合液緩慢升溫至45-50°C，保持2-3 h后，立即離心分出沉淀物； (8)透析與冷凍干燥把沉淀溶于蒸餾水中，用截留分子量3500Da的透析袋先對自來水透析3-4天，后用重蒸水透析2-3天；透析液濃縮后冷凍干燥即得干燥的竹蓀多糖； (9)抗氧化活性檢測取凍干的竹蓀多糖進(jìn)行體外清除 OH、O2-\ H2O2及DPPH的抗氧化試驗(yàn)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種竹蓀水提殘?jiān)锌寡趸瘎┒嗵堑闹苽浞椒?，其特征在于，所述步驟(3)中混合堿提液的加入量為竹蓀水提殘?jiān)?0-25倍，提取溫度為25-30°C，提取時(shí)間為1-2 h，提取次數(shù)為2-3次。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種竹蓀水提殘?jiān)锌寡趸瘎┒嗵堑闹苽浞椒?，其特征在于，所述步驟(4)中乙酸的濃度為1-1.5 mol/L，離心機(jī)轉(zhuǎn)速5000-8000 rpm，離心時(shí)間為15-30 min0
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種竹蓀水提殘?jiān)锌寡趸瘎┒嗵堑闹苽浞椒?，其特征在于，所述步驟(5)中加入H2O2的量為總體積的1/7-1/10，然后加熱到40-50°C，保持2_3 h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種竹蓀水提殘?jiān)锌寡趸瘎┒嗵堑闹苽浞椒ǎ涮卣髟谟?，所述步驟(6)中透析袋規(guī)格為3500 Da,自來水水透析5_6天,蒸懼水透析3_4天,離心機(jī)轉(zhuǎn)速為8000-10000rpm，離心時(shí)間為10-15 min。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種竹蓀水提殘?jiān)锌寡趸瘎┒嗵堑闹苽浞椒ǎ摲椒òㄒ韵虏僮鞑襟E竹蓀水提殘?jiān)闹苽?，多糖提取液的配置，竹蓀水提殘?jiān)卸嗵堑奶崛?，多糖提取液中水不溶性?(1→3)-d-葡聚糖的去除，脫色，小分子雜質(zhì)的去除，多糖的純化，透析與冷凍干燥，抗氧化活性檢測等。本發(fā)明不僅提供了一種成本低、高效、無污染的竹蓀中抗氧化劑多糖的制備方法，而且提供了竹蓀水提殘?jiān)C合加工利用的方法，拓展了竹蓀的深加工領(lǐng)域。
文檔編號C08B37/00GK103044566SQ20131000108
公開日2013年4月17日 申請日期2013年1月4日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月4日
發(fā)明者王軍輝, 孫漢巨, 劉詠, 李軍紅, 姚玉飛, 單亮, 孫克范 申請人:合肥工業(yè)大學(xué)