專利名稱：從黑大蒜提取物廢液中提取大蒜多糖技術的制作方法
技術領域：
本發明是屬于食品、醫藥領域，具體涉及一種從黑大蒜中提取蒜氨酸后的廢液(以下簡稱蒜氨酸廢液)中利用固定化酶技術提取大蒜多糖技術。
背景技術：
大蒜為百合科蔥屬植物蒜(Allium sativum L.)的地下鱗莖,為多年生草本植物，是歷史悠久的藥食兩用植物。大蒜具有獨特的藥理活性，其可以降低心血管病和癌癥的風險。蒜氨酸是大蒜中的原始功效成分，高蒜氨酸大蒜制品和高純藥用蒜氨酸具有極高的商業價值；大蒜多糖具有增強免疫系統活力的生理功能，在腫瘤的防治中起著至關重要的作用。目前，人們對于蒜氨酸的提取研究做了大量的工作。CN02152304.5描述了一種從大蒜中提取蒜氨酸的方法，在經過制蒜汁、發酵、離子交換樹脂分離等一系列工藝后，提取了蒜氨酸。但是，大多數研究都只是單獨提取蒜氨酸，而提取蒜氨酸后的廢液往往被人們棄之不用，這樣不僅造成了極大的浪費，而且還給環境帶來了極大的污染。此外，在廢液中含有大量的大蒜多糖，大蒜多糖具有增強免疫系統活力的生理功能，在腫瘤的防治中起著至關重要的作用。黑大蒜是用新鮮的生蒜，帶皮放在高溫高濕的發酵箱里保存6(Γ90天，讓其自然發酵制成的食品。我們知道大蒜本身就是非常好的保健食品，而黑蒜的作用更是驚人。黑大蒜的發酵大體經歷兩個過程，一個是厭氧發酵過程，就是在缺氧的條件下，對陳蒜(經過一段時間的儲存，以降低水分，積聚酶含量)進行15天左右高溫高濕處理，在經過該階段之后，進入下一階段，有氧發酵階段，該階段需要用時20-25天左右，該階段不需要特出的缺氧和高溫高濕，在正常的加工間就能加工。經過兩個階段的發酵后，大蒜的品質發生了明顯變化， 主要表現在三個方面外觀變化蒜皮和蒜肉部分分離；蒜肉變成墨黑色；硬度變低，變得比較柔軟。內在品質變化水分散失大半，質量變輕；組成成分變化口味變化沒有了蒜的辛辣味，有酸甜味。經過發酵和熟成后的黑蒜具備了遠遠凌駕于普通大蒜之上的保健效果。特別是其強大的調整血液流通的效果及抗氧化力。雖然這些效果普通的大蒜也可以達到，但是黑蒜在進行發酵成熟的過程中，在強化了原來所固有的成分力量的基礎上又產生了全新的成分，它的保健效果變得更加強大。本發明就是以黑大蒜為原料，從提取蒜氨酸后的廢液(以下簡稱蒜氨酸廢液)中利用固定化酶技術提取大蒜多糖一種技術。
發明內容
本發明的目的是為了克服蒜氨酸廢液利用效率低的缺點而發明的一項新技術。本技術是通過在蒜氨酸廢液中添加特定的用大孔樹脂固定化的蛋白酶，蛋白酶可以切斷與多糖共價結合的蛋白鏈，使得蛋白沉淀下來，脫除蛋白。經過過濾得到大蒜多糖的溶液。在本技術中，將酶用大孔樹脂固定化，加大了酶與蛋白的接觸面積，增加了酶解效率。此外，酶固定化以后，在分離大蒜多糖的時候，就無需再進行滅酶工藝，而且固定化的酶還可以重復利用，降低了生產成本。本技術的具體方法如下收集IL蒜氨酸廢液，調節PH至3. 5、. 5，升溫至15 9(TC，往廢液中加入用大孔樹脂固定化后的酶，控溫在15 9(TC，反應f 12h，過濾除去大孔樹脂固定化的酶和沉淀下來的蛋白，濾液經過真空濃縮、冷凍干燥即得到大蒜多糖粉末。在本技術中固定化酶的具體方法如下采用電子天平準確稱取1. OOOOg左右的濕樹脂，然后轉移到IOOml錐形瓶中；采用刻度吸管準確吸取10. Oml配置好的5mg/ml的脂肪酶溶液并使轉移到錐形瓶中，然后再用移液管吸取40. Oml pH=7. O的磷酸緩沖溶液，輕微搖動使體系混合均勻。用保鮮膜將錐形瓶蓋好，然后放入恒溫振蕩器中，在37°C、200rpm的條件下攪拌12h，過濾即得到用大孔樹脂固定化的酶。本技術中所用的大孔樹脂為GMA-EGDMA大孔樹脂，GMA-MBAA大孔樹脂，GMA-DVB大孔樹脂。本技術中所用的酶為木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶。
具體實施例方式為了更好地理解本發明的技術方案，以下通過具體的實施例進一步作詳細描述。實施例1 :
收集IL蒜氨酸廢液，調節PH至6. 0，升溫至30°C，往廢液中加入用GMA-EGDMA大孔樹脂固定化的木瓜蛋白酶，控 溫在30°C，反應4h，過濾除去大孔樹脂固定化的酶和沉淀下來的蛋白，濾液經過真空濃縮、冷凍干燥即得到大蒜多糖粉末。實施例2:
收集IL蒜氨酸廢液，調節PH至6. 5，升溫至30°C，往廢液中加入用GMA-MBAA大孔樹脂固定化后的菠蘿蛋白酶，控溫在40°C，反應4h，過濾除去大孔樹脂固定化的酶和沉淀下來的蛋白，濾液經過真空濃縮、冷凍干燥即得到大蒜多糖粉末。實施例3:
收集IL蒜氨酸廢液，調節PH至7. 0，升溫至30°C，往廢液中加入用GMA-MBAA大孔樹脂固定化后的木瓜蛋白酶，控溫在50°C，反應6h，過濾除去大孔樹脂固定化的酶和沉淀下來的蛋白，濾液經過真空濃縮、冷凍干燥即得到大蒜多糖粉末。實施例4:
收集IL蒜氨酸廢液，調節PH至7. 5，升溫至35°C，往廢液中加入用GMA-DVB大孔樹脂固定化后的菠蘿蛋白酶，控溫在55°C，反應7h，過濾除去大孔樹脂固定化的酶和沉淀下來的蛋白，濾液經過真空濃縮、冷凍干燥即得到大蒜多糖粉末。實施例5:
收集IL蒜氨酸廢液，利用氨水調節PH至7. 3，升溫至35°C，往廢液中加入用GMA-DVB大孔樹脂固定化的木瓜蛋白酶，控溫在60°C反應10h，過濾除去大孔樹脂固定化的酶，濾液經過真空濃縮、冷凍干燥即得到大蒜多糖粉末。實施例6 收集IL蒜氨酸廢液，利用氨水調節PH至7. 5，升溫至35°C，往廢液中加入用GMA-MBAA大孔樹脂固定化的菠蘿蛋白酶，控溫在55°C反應10h，過濾除去大孔樹脂固定化的酶，濾液經過真空濃縮、冷凍干燥即得到大蒜多糖粉末。測試實施例
以各實施例所得的大蒜多糖粉末量為指標評價該技術從蒜氨酸廢液中提取大蒜多糖數量。
權利要求
1.一種應用于從黑大蒜中提取蒜氨酸后的廢液(以下簡稱蒜氨酸廢液)中提取大蒜多糖的的技術，其特征在于收集IL蒜氨酸廢液，調節PH至3. 5^9. 5，升至一定溫度，往廢液中加入用大孔樹脂固定化后的酶，控制在一定的溫度，反應一段時間，過濾除去大孔樹脂固定化酶和蛋白，濾液經過真空濃縮、冷凍升華干燥即得到大蒜多糖粉末。
2.如權I所述的應用于從蒜氨酸廢液中提取大蒜多糖的技術，其特征在于廢液的pH值控制在3. 5 9. 5。
3.如權I所述的應用于從蒜氨酸廢液中提取大蒜多糖的技術，其特征在于本技術中調節廢液的PH值至3. 5^9. 5后，升溫至15 90°C。
4.如權I所述的應用于從蒜氨酸廢液中提取大蒜多糖的技術，其特征在于本技術中所用的大孔樹脂為GMA-EGDMA大孔樹脂，GMA-MBAA大孔樹脂，GMA-DVB大孔樹脂。
5.如權I所述的應用于從蒜氨酸廢液中提取大蒜多糖的技術，其特征在于本技術中所用的酶為木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶。
6.如權I所述的應用于從蒜氨酸廢液中提取大蒜多糖的技術，其特征在于本技術中加入大孔樹脂固定化的酶后，控溫在15 90°C，反應f 12h。
全文摘要
本發明為從黑大提取物廢液中提取大蒜多糖技術，涉及食品、醫藥領域，是一種從黑大蒜中提取蒜氨酸后的廢液中利用固定化酶技術提取大蒜多糖技術，本技術是通過在蒜氨酸廢液中添加特定的用大孔樹脂固定化的蛋白酶，脫除蛋白。經過過濾得到大蒜多糖的溶液。在本技術中，將酶用大孔樹脂固定化，加大了酶與蛋白的接觸面積，增加了酶解效率。此外，酶固定化以后，在分離大蒜多糖的時候，就無需再進行滅酶工藝，而且固定化的酶還可以重復利用，降低了生產成本。
文檔編號C08B37/00GK103059153SQ201210452030
公開日2013年4月24日 申請日期2012年11月13日 優先權日2012年11月13日
發明者秦大偉, 薛乃峰, 趙保翠, 于功明, 劉先華 申請人:山東省巨野晨農天然產物有限公司, 山東輕工業學院