專利名稱：一種苯巴比妥分子印跡聚合物及其作為固相萃取劑的應用的制作方法
技術領域：
本發明涉及一種苯巴比妥分子印跡聚合物及其作為固相萃取劑的應用，屬于分析化學與材料科學技術領域。
背景技術：
苯巴比妥屬于巴比妥類安眠鎮靜藥物，在刑事毒物分析中經常遇到的毒物，但由于其在儀器分析中檢測靈敏度低，檢材復雜多樣，雜質干擾等，在生物樣本(如血液、頭發或臟器組織)中的高效分離、提取仍然是目前法醫毒物分析工作者們研究的熱點和難點。
近年來開發的分子印跡術，為法醫毒物分析中巴比妥類藥物的提取、分離提供了新思路和新途徑。分子印跡聚合物(MIPs)具有預定性、識別性、實用性三大特點，對目標分子的空間結構具有“記憶”效應，能夠高選擇性識別復雜樣品中的印跡分子；而且MPs可重復使用，并有良好的化學和物理穩定性，在150°C下暴露對小時也不會失去對模板分子的親和力，對強酸性溶液，有機溶劑和高溫高壓等環境顯示出了較高的耐受力，這些特點使得 MIPs能夠成為非常有吸引力的特異性吸附材料，已在分離領域有廣泛的應用研究。分子印跡固相萃取(MISPE)技術是將分子印跡聚合物作為固相萃取劑，取代傳統固相萃取填充劑 (C8、C18、離子交換樹脂等)，集分子印跡技術與固相萃取技術于一體，為樣品的采集、富集和分析提供了極大的方便，克服了生物或環境樣品體系復雜、預處理手續繁雜等不利因素， 適用于生物樣本中目標物的提取分離、凈化。
雖然分子印跡技術在分離領域已有廣泛的應用研究，但有關苯巴比妥分子印跡聚合物的制備及其在樣本前處理中的應有還未見相關報道。發明內容
本發明的目的是為了解決已有技術中復雜樣本中巴比妥類藥物難提取分離的問題，提出一種苯巴比妥分子印跡聚合物及其作為固相萃取劑的應用。
本發明的目的是通過以下技術方案實現的。
本發明的一種苯巴比妥分子印跡聚合物，該分子印跡聚合物的制備方法為
1)采用苯巴比妥作為模版分子，同功能單體在溶劑中混勻，混勻后在4°C以下保存24h形成預聚體；然后在常溫下加入交聯劑和引發劑，在4°C以下、用波長為260nm的紫外光引發聚合Mh，得到球形顆粒聚合物；功能單體為丙烯酰胺，溶劑為乙腈；交聯劑為三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯TRIM，引發劑為偶氮二異丁腈；功能單體、苯巴比妥和溶劑的摩爾比為8 1 20;交聯劑的體積用量為溶劑的5%，引發劑的摩爾用量為模版分子的 8% ；
2)用有機溶劑甲醇/乙酸浸泡步驟1)得到的球形顆粒聚合物并攪拌池，球形顆粒聚合物中的模板分子溶解在有機溶劑甲醇/乙酸中，然后離心分離去除有機溶劑甲醇和乙酸；甲醇與乙酸的體積比為9 1 ；
3)重復步驟2) 2次以上；
4)經步驟幻清洗后的球形顆粒聚合物中加入乙醇，洗滌除去乙酸；
5)重復步驟4) 2次以上；
6)經步驟5)清洗后的球形顆粒聚合物中加入丙酮，以除去細小顆粒，然后真空干燥，得到苯巴比妥分子印跡聚合物。
本發明的一種苯巴比妥分子印跡聚合物作為固相萃取劑的應用，具體步驟為
1)苯巴比妥分子印跡固相萃取柱的制備
將制備的苯巴比妥分子印跡聚合物溶于甲醇中，攪拌均勻后緩慢注入帶有20 μ m 篩板的聚乙烯空固相萃取柱中，真空抽吸使苯巴比妥分子印跡聚合物在空固相萃取柱中分布均勻，然后在苯巴比妥分子印跡聚合物上方裝入20 μ m篩板，苯巴比妥分子印跡聚合物與甲醇的比50mg 5mL ；
2)制備樣品
取血液lmL，用2mL乙腈離心分離，提取清液，然后將清液用SmL去離子水稀釋；
3)苯巴比妥分子印跡固相萃取方法
依次用ImL甲醇、ImL甲醇/水混合溶劑活化苯巴比妥分子印跡固相萃取柱，然后將步驟2)制備的樣品上固相萃取柱，然后再用2mL甲醇/水混合溶劑洗滌，最后用2mL甲醇/乙酸混合溶劑洗脫，收集洗脫液，在空氣流下揮干，然后用200 μ L的甲醇溶解殘渣，最后用GC/NPD分析；
甲醇/水的體積比為3 7，甲醇/醋酸的體積比為9 1。
有益效果
本發明的制備方法簡便、快速，對結構相似物苯巴比妥、巴比妥、異戊巴比妥有很好的吸附性能，具有高度專一性和吸附選擇性，為復雜基質中巴比妥類藥物的快速篩查、提取分離提供新手段，具有廣闊的應用前景，有望實現工業化生產并投入實際應用；建立的分子印跡固相萃取方法，操作簡單，對目標物選擇性的吸附，對復雜基質中目標物的提取分離起到凈化作用，有效去除基體雜質，提高了分離精度，降低了檢測限，適用于法庭科學領域生物樣本中巴比妥類藥物的提取分離。
具體實施方式
以下的實施案例在于詳細說明本發明，而非限制本發明。
實施例
苯巴比妥分子印跡聚合物，其具體制備步驟為
1)在50mL試管中放入苯巴比妥74. 5mg(0. 5mmol)和344mg丙烯酰胺(4mmol)， 然后用25. 5ml乙腈溶解混勻、密封后放入冰箱內自行聚合Mh，冰箱溫度在4°C以下；然后在常溫下加入1280yL(4mmol)三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯和6. 56mg偶氮二異丁腈 (0. (Mmmol)，充分混勻并通氮氣IOmin后放入到紫外燈箱內，在4°C以下、用波長為^Onm的紫外光引發聚合Mh，得到球形顆粒聚合物；
2)用有機溶劑甲醇/乙酸浸泡步驟1)得到的球形顆粒聚合物并攪拌池，球形顆粒聚合物中的模板分子溶解在有機溶劑甲醇/乙酸中，然后離心分離去除有機溶劑甲醇和乙酸；甲醇與乙酸的體積比為9 1 ；
3)重復步驟2) 2次；
4)經步驟幻清洗后的球形顆粒聚合物中加入乙醇，洗滌除去乙酸；
5)重復步驟4)4次；
6)經步驟5)清洗后的球形顆粒聚合物中加入丙酮，以除去細小顆粒，然后真空干燥，得到苯巴比妥分子印跡聚合物。
非印跡聚合物的制備除不加模板分子外，其余條件與上述一致。
苯巴比妥分子印跡聚合物的吸附效率的測定
分別稱量50mg已制備好的苯巴比妥分子印跡聚合物與非印跡聚合物，分別置于 IOmL含IOmg苯巴比妥水溶液中，浸泡Mh，離心取上清液，采用GC/NPD測定吸附后溶液濃度分別為0.07mg/mL、0.61mg/mL;根據公式(1)計算苯巴比妥分子印跡聚合物和非印跡聚合物對苯巴比妥的吸附效率。
權利要求
1.一種苯巴比妥分子印跡聚合物，其特征在于其制備方法為1)采用苯巴比妥作為模版分子，同功能單體在溶劑中混勻，混勻后在4°c以下保存24h 形成預聚體；然后在常溫下加入交聯劑和引發劑，在4°C以下、用波長為260nm的紫外光引發聚合Mh，得到球形顆粒聚合物；功能單體為丙烯酰胺，溶劑為乙腈；交聯劑為三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯TRIM，引發劑為偶氮二異丁腈；功能單體、苯巴比妥和溶劑的摩爾比為8 1 20;交聯劑的體積用量為溶劑的5%，引發劑的摩爾用量為模版分子的8% ；2)用有機溶劑甲醇/乙酸浸泡步驟1)得到的球形顆粒聚合物并攪拌池，球形顆粒聚合物中的模板分子溶解在有機溶劑甲醇/乙酸中，然后離心分離去除有機溶劑甲醇和乙酸；甲醇與乙酸的體積比為9 1 ；3)重復步驟2)2次以上；4)經步驟幻清洗后的球形顆粒聚合物中加入乙醇，洗滌除去乙酸；5)重復步驟4)2次以上；6)經步驟幻清洗后的球形顆粒聚合物中加入丙酮，以除去細小顆粒，然后真空干燥， 得到苯巴比妥分子印跡聚合物。
2.—種苯巴比妥分子印跡聚合物作為固相萃取劑的應用，其特征在于具體步驟為1)苯巴比妥分子印跡固相萃取柱的制備將制備的苯巴比妥分子印跡聚合物溶于甲醇中，攪拌均勻后緩慢注入帶有20 μ m篩板的聚乙烯空固相萃取柱中，真空抽吸使苯巴比妥分子印跡聚合物在空固相萃取柱中分布均勻，然后在苯巴比妥分子印跡聚合物上方裝入20 μ m篩板，苯巴比妥分子印跡聚合物與甲醇的比50mg 5mL ；2)制備樣品取血液lmL，用2mL乙腈離心分離，提取清液，然后將清液用SmL去離子水稀釋；3)苯巴比妥分子印跡固相萃取方法依次用ImL甲醇、ImL甲醇/水混合溶劑活化苯巴比妥分子印跡固相萃取柱，然后將步驟2)制備的樣品上固相萃取柱，然后再用2mL甲醇/水混合溶劑洗滌，最后用2mL甲醇/ 乙酸混合溶劑洗脫，收集洗脫液，在空氣流下揮干，然后用200 μ L的甲醇溶解殘渣，最后用 GC/NPD 分析；甲醇/水的體積比為3 7，甲醇/醋酸的體積比為9 1。
全文摘要
本發明涉及一種苯巴比妥分子印跡聚合物及其作為固相萃取劑的應用，屬于分析化學與材料科學技術領域。采用苯巴比妥作為模版分子，同功能單體在溶劑中混勻，混勻后在4℃以下保存24h形成預聚體；然后在常溫下加入交聯劑和引發劑，用波長為260nm的紫外光引發聚合24h，得到球形顆粒聚合物；用有機溶劑甲醇/乙酸浸泡，清洗除雜質，真空干燥，得到苯巴比妥分子印跡聚合物。本發明的制備方法簡便、快速，對結構相似物苯巴比妥、巴比妥、異戊巴比妥有很好的吸附性能；建立的固相萃取方法，操作簡單，對目標物選擇性吸附，有效去除基體雜質，提高了分離精度，降低了檢測限，適用于法庭科學領域生物樣本中巴比妥類藥物的提取分離。
文檔編號C08J9/26GK102477137SQ201010560038
公開日2012年5月30日 申請日期2010年11月26日 優先權日2010年11月26日
發明者于忠山, 何毅, 何瑞瓊, 孟子暉, 常靖, 張蕾萍, 朱軍, 欒玉靜 申請人:公安部物證鑒定中心