專利名稱:一種制備真菌多糖的方法
技術領域:
本發明涉及一種制備真菌多糖的方法。
背景技術:
在國際上,食、藥用真菌多糖被稱為"生物反應調節劑"(Biological Response Modifier,簡稱BRM),它是一類能夠增強人體免疫功能的生物活性物質,具有 廣泛的生理和藥理功能。近年來,隨著生物化學、生物工程、生物高分子研究 新技術、新方法的不斷出現,使得國內外對食、藥用真菌多糖的研究迅速發展 起來。目前,食、藥用真菌多糖已成為生物化學、分子生物學、醫學、藥學、 食品科學等領域的研究熱點之一。雖然人們已對真菌多糖的結構、生物活性、 藥理功能等方面進行了較為廣泛和深入的研究,但如何高效制備真菌多糖還并 未引起人們的高度重視。目前,天然真菌多糖類藥物的制備方法主要有熱水、 酸、堿浸提取等方法,這些方法,無論是熱水蒸煮提取法,還是酸、堿浸提法, 所使用的設備基本上都是無法密閉的蒸煮鍋或罐,而且都是分批間歇操作。在 生產過程中,會造成極大的能源和資金浪費,例如,當使用熱水浸提時,熱水 在加熱的過程中不斷的從罐內蒸出,這就要求我們要不停的補水和加熱,以致 浪費了大量的溶劑和能源;再如當使用有機溶劑(如酒精、丙酮)提取時,隨 著有機溶劑的不斷揮發,會造成更加巨大的資源浪費和環境污染。總之,這些 方法普遍存在著不能實現浸煮和濃縮的連續化操作,能源利用率低,溶劑用量 大、損耗多,生產周期長和生產效率低等缺點,且在某些情況下還可能造成環 境污染;難以滿足國家GMP標準要求。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種提取周期縮短,生產效率高,溶劑 用量少,節能降耗,容易達到國家GMP要求的一種制備真菌多糖的新方法。本發明采用的技術方案是-
該制備真菌多糖的方法,包括以下工藝步驟-
(1) 原料粉碎與提取劑混合
將提取制備真菌多糖的原料洗凈、低溫干燥后,粉碎成60-7000 u m的顆 粒,將其與提取劑按質量比1 : 2.5 1 : 12進行混合均勻;
(2) 提取
將上述原料與提取劑混合液在多功能提取器中進行多級溶媒循環動態熱 回流提取,提取溫度35-100'C, pH=4-8,溶劑回流率5-30%的條件下回流提取 40-90分鐘;
(3) 過濾與濃縮
將上述提取一定時間的提取液通過二級絲網過濾器或離心過濾后直接真 空輸送到外循環加熱式雙效真空濃縮器中,在真空度0.01-0.08MPa,溫度35-80 "C條件下濃縮1-3小時,使濃縮液的密度達l.l-1.40g/cm3;
(4) 醇沉
將上述濃縮液泵入醇沉罐,按體積比加入2-5倍95%酒精攪拌均勻后靜置 30-120分鐘,所用的酒精為食用級以上;
(5) 干燥
將上述醇沉物按質量比加入3-15倍的蒸餾水或其它溶劑攪拌使其溶解, 然后,在進口溫度為160-220°C,出口溫度為80-95。C條件下噴霧干燥或冷凍真 空干燥或真空干燥后,即可得到得率達8. 92-19. 85%,含糖量達12. 90-25. 68% 的多糖產品。
本發明提取制備真菌多糖的原料系指香菇、猴頭菇、靈芝、黑木耳、灰樹 花、銀耳、金針菇等含有多糖化合物的食、藥用真菌中的任何一種或幾種。
本發明所采用的提取劑是指水、乙醇、丙酮、乙醚、堿、酸、鹽等凡能用 于提取制備真菌多糖的任何物質。所述(2)步驟中多級溶媒循環動態熱回流提取為根據需要1-3級任意可調, 既可在提取時單獨進行1級溶媒循環動態熱回流,又可在單效濃縮時進行2級 溶媒循環動態熱回流,還可在雙效濃縮時進行3級溶媒循環動態熱回流。
所述(3)的步驟過濾與濃縮中的過濾是采用目數為60-200目的二級不銹鋼 絲網過濾或管式或三足式離心機過濾。
所述(5)干燥步驟中冷凍真空干燥是在真空度25-100Pa,溫度20-40'C條件 下冷凍真空干燥;或真空干燥是在真空度0.01-0.085MPa,溫度45-75。C條件下 的真空干燥。
本發明所公開的一種制備真菌多糖新方法的有益效果是 該制備真菌多糖的方法,即多級溶媒循環動態熱回流提取濃縮法,是集提 取、濃縮和溶劑回收等為一體,整個過程是在一密閉系統內進行,不會產生跑、 冒、滴、漏等不良現象;生產實踐表明,該方法可縮短提取周期50:85%,提 高生產效率;料液比能降至l: 3-8 (而傳統法的料液比多在1: 20以上),并 可節約提取溶劑量25-80%; —次/二次蒸汽既得到充分利用,又節省了冷卻用 水,節能效果十分顯著,二者相比可節省30-70%的蒸汽用量;不需要將藥材 粉碎的很小,靠不斷回流溶劑增加濃度差,就保證了提取率,這樣更有利于后 續的離心和分離等操作;易達到國家GMP的要求。
具體實施例方式
以下介紹本發明的實施例。在這些實施例中所有原料比例均按質量比計。 實施例1:
一種制備真菌多糖的方法,包括以下工藝步驟 (l)原料粉碎與提取劑混合
將提取制備真菌多糖的原料(蓮花菌,香菇,猴頭菌)洗凈、低溫(30 °C)干燥后,粉碎成60 -lOOum的顆粒,將其與提取劑水按質量比l :3.5進 行混合均勻;(2) 提取
將上述原料與提取劑混合液在多功能提取器中進行溶媒多級循環動態熱 回流提取,提取溫度35"C, pH=4.5,溶劑回流率5%的條件下回流(采用l級 溶媒循環動態熱回流)提取40分鐘;
(3) 過濾與濃縮
將上述提取一定時間的提取液通過二級絲網過濾器或管式離心過濾后直 接真空輸送到外循環加熱式雙效真空濃縮器中,在真空度O.OlMPa,溫度40 'C條件下濃縮1.5小時;
(4) 醇沉
將上述濃縮液泵入醇沉罐,按體積比加入2倍95%食用級以上酒精攪拌均 勻后靜置30分鐘;
(5) 干燥
將上述醇沉物按質量比加入3倍的蒸餾水或其它溶劑攪拌使其溶解,然 后,在真空度0.01-0.085MPa,溫度55'C條件下真空干燥后,可得到得率達 8.95%, 8.92%, 8.98%,含糖量達12. 90%, 13.29%, 13.18%的多糖產品。
實施例2:
與實施例1的步驟相同,所不同的是
(1) 將提取制備真菌多糖的原料(蓮花菌,香菇,猴頭菌)置于50'C干燥 后,粉碎成2500-3000 um的顆粒,將其與提取劑水按質量比1 : 8進行混合均
勻;
(2) 提取條件為提取溫度100'C, pH=6.5,溶劑回流率15%的條件下回流 (采用2級溶媒循環動態熱回流)提取70分鐘;
(3) 濃縮在真空度0.05MPa,溫度65"C條件下濃縮3小時;
(4) 醇沉按體積比加入3倍95%食用級以上酒精攪拌均勻后靜置80分鐘;
(5) 干燥將上述醇沉物按質量比加入8倍的蒸餾水或其它溶劑攪拌使其溶解,然后,在進口溫度為160-220°C,出口溫度為80-95'C條件下噴霧干燥,即 可得到得率達18, 85%, 19.68%, 17.15%,含糖量達23. 67%, 24,29%, 25.68%
的多糖產品。 實施例3:
與實施例1的步驟相同,所不同的是
(1) 將提取制備真菌多糖的原料(蓮花菌,香菇,猴頭菌)置于65C干燥 后,粉碎成6500-7000um的顆粒,將其與提取劑水按質量比1 : 12進行混合 均勻;
(2) 提取條件為提取溫度80°C, pH=8. 5,溶劑回流率28%的條件下回流(采 用3級溶媒循環動態熱回流)提取90分鐘;
(3) 濃縮在真空度0.065MPa,溫度8CTC條件下濃縮2小時;
(4) 醇沉:按體積比加入5倍95%食用級以上酒精攪拌均勻后靜置120分鐘;
(5) 干燥將上述醇沉物按質量比加入15倍的蒸餾水或其它溶劑攪拌使其 溶解,然后,是在真空度25-100Pa,溫度20-4(TC條件下真空冷凍干燥,可得 到得率達18. 35%, 19. 85%, 17. 62%,含糖量達22. 16%, 24. 72%, 23. 96%的 多糖產品。
權利要求
1. 一種制備真菌多糖的方法,包括以下工藝步驟(1)原料粉碎與提取劑混合將提取制備真菌多糖的原料洗凈、低溫干燥后,粉碎成60-7000μm的顆粒,將其與提取劑按質量比1∶2.5~1∶12進行混合均勻;(2)提取將上述原料與提取劑混合液在多功能提取器中進行多級溶媒循環動態熱回流提取,提取溫度35-100℃,pH=4-8,溶劑回流率5-30%的條件下回流提取40-90分鐘;(3)過濾與濃縮將上述提取一定時間的提取液通過二級絲網過濾器或離心過濾后直接真空輸送到外循環加熱式雙效真空濃縮器中,在真空度0.01-0.08MPa,溫度35-80℃條件下濃縮1-3小時,使濃縮液的密度達1.1-1.40g/cm3;(4)醇沉將上述濃縮液泵入醇沉罐,按體積比加入2-5倍95%酒精攪拌均勻后靜置30-120分鐘;(5)干燥將上述醇沉物按質量比加入3-15倍的蒸餾水或其它溶劑攪拌使其溶解,然后,在進口溫度為160-220℃,出口溫度為80-95℃條件下噴霧干燥或冷凍真空干燥或真空干燥后,即可得到得率達8.92-19.85%,含糖量達12.90-25.68%的多糖產品。
2. 根據權利要求1所述的制備真菌多糖的方法,其特征在于所述(l)步驟 中提取制備真菌多糖的原料系指香菇、猴頭菇、靈芝、黑木耳、灰樹花、銀耳、 金針菇等含有多糖化合物的食、藥用真菌中的任何一種。
3. 根據權利要求1或2所述的制備真菌多糖的方法,其特征在于所述(l) 步驟中的提取劑是指水、乙醇、丙酮、乙醚、堿、酸、鹽等凡能用于提取制備 真菌多糖的任何物質。
4. 根據權利要求1、 2或3所述的制備真菌多糖的方法,其特征在于所 述(2)步驟中多級溶媒循環動態熱回流提取為根據需要1-3級任意可調,既可在提取時單獨進行1級溶媒循環動態熱回流,又可在單效濃縮時進行2級溶媒循 環動態熱回流,還可在雙效濃縮時進行3級溶媒循環動態熱回流。
5. 根據權利要求1、 2或3所述的制備真菌多糖的方法,其特征在于所 述(3)的步驟過濾與濃縮中的過濾是采用目數為60-200目的二級不銹鋼絲網過 濾或管式或三足式離心機過濾。
6. 根據權利要求1、 2或3所述的制備真菌多糖的方法,其特征在于所 述(4)醇沉步驟中所用的酒精為食用級以上。
7. 根據權利要求1、 2或3所述的制備真菌多糖的方法,其特征在于所 述(5)干燥步驟中冷凍真空干燥是在真空度25-100Pa,溫度20-40'C條件下冷凍 真空干燥;或真空干燥是在真空度0.01-0.085MPa,溫度45-75卩條件下的真空 干燥。
全文摘要
本發明公開了一種制備真菌多糖的方法,即多級溶媒循環動態熱回流提取濃縮法,本發明的工藝步驟包括原料粉碎與溶劑混合、提取、濃縮、醇沉、過濾、干燥得到成品。該制備真菌多糖的方法,是集提取、濃縮和溶劑回收等為一體,整個過程是在一密閉系統內進行,不會產生跑、冒、滴、漏等不良現象。生產實踐表明,該方法可縮短提取周期50-85%,提高生產效率;料液比能降至1∶3-8(而傳統法的料液比多在1∶20以上),并可節約提取溶劑量25-80%;一次/二次蒸汽既得到充分利用,又節省了冷卻用水,節能效果十分顯著,二者相比可節省30-70%的蒸汽用量;無需將藥材粉碎的很小,這更有利于后續操作。本發明可廣泛用于真菌多糖及其它相關多糖或天然藥物的研發及生產。
文檔編號C08B37/00GK101434662SQ200810231540
公開日2009年5月20日 申請日期2008年12月29日 優先權日2008年12月29日
發明者伊首璞, 何泓良, 若 李, 王衛國, 趙永亮 申請人:河南工業大學