專利名稱：一種人參多糖提取物的制備方法
技術領域：
本發明涉及一種從人參藥材中提取人參多糖的新的提取精制方法，并涉及人 參多糖注射液、粉針劑和其它藥物制劑的制備方法，用于減輕腫瘤放、化療引 起的副作用，可作為免疫調節和腫瘤治療的輔助用藥。
背景技術：
人參作為名貴傳統滋補中藥材，有著大補元氣，固脫生津，安神的作用。 早在遠古時期就被應用于臨床，經過現代的技術對人參進行的有效成分分析， 證明人參多糖是人參中主要的藥理活性成分之一。人參含有多種糖類(其總糖含 量為4% 6%)，包括單糖、低聚糖和多糖。人參多糖由人參淀粉和人參果膠類 似物兩部分組成，藥理活性部分主要是人參果膠類似物。從人參根中提取的人 參多糖，80%是人參淀粉，經淀粉酶脫去淀粉后的人參果膠主要由半乳糖醛酸 (GalA)、半乳糖(Gal)、阿拉伯糖(Ara)殘基組成，還有少量鼠李糖(Rha)殘基。
80年代以來，人們對人參多糖進行了深入的研究。至目前為止，國內外學者 已從人參中分離得到了30多種人參多糖。實驗表明，這些多糖能增強網狀內皮 系統的吞噬功能，剌激血液中補體和抗體的生成，增加血液中免疫球蛋白的含 量并能抑制S咖、EAC和U"等實驗腫瘤的生長，增強環磷酰胺抗腫瘤作用。 因此，人參多糖制劑可增強機體免疫調節功能，用于減輕腫瘤放、化療引起的 副作用、可作為免疫調節和腫瘤治療的輔助用藥。
但由于人參多糖的提取和分離難度較大，按傳統工藝提取的多糖顏色深， 其有效成分主要活性多糖(主含半乳糖醛酸)含量較低，雜質含量多，在臨床 應用上經常出現過敏和疼痛等不良反應，因此，對人參多糖的提取工藝和制劑 工藝進行了研究，解決了以上不足或缺陷。
發明內容
本發明需要解決的技術問題就在于克服現有技術的缺陷，提供一種新的人 參多糖提取和純化的方法。
本發明所述的制備方法包括將醇提后的人參藥渣酸水煮提取，提取液過 濾后濃縮，脫色，醇沉，經過濾或離心后得沉淀，即為人參多糖粗品，人參多 糖粗品經過脫鹽處理后，得到人參多糖提取物。
得到的人參多糖提取物可制成注射液、粉針劑或其它劑型。
采用的技術方案是
一種人參多糖提取物的制備方法，其特征在于包括下述工藝步驟
取人參粗粉，力卩8—10倍量60% 80%乙醇回流提取2—3次，過濾，藥渣 除凈乙醇，藥渣加入10 15倍純化水，再加入鹽酸，調節pH值為l 3，煎煮 0.5 2小時，過濾，藥渣重復煎煮1次，合并提取液，濾過，減壓濃縮，得提 取濃縮液，濃縮液加鹽酸調節pH值為1 3，加4 6倍鹽酸量的過氧化氫，攪 拌，在85 95"C下保溫1 3小時，冷卻至室溫，過濾，得脫色后濃縮液；脫 色后濃縮液用NaOH調節pH至3 5，力Q 2 5倍乙醇，攪拌均勻，靜置，濾取 沉淀，沉淀用含0.2 2.0%11(31的60 80%乙醇洗滌一次，沉淀物用水溶解，重 復醇沉和酸醇洗滌l次，獲得白色人參多糖提取物。
上述人參多糖提取物的制備方法制備的白色多糖提取物，加注射用水4 10 倍量使溶解，過濾，濾液105-130'C加熱0.1 1.0小時，過濾，濾液加入0.1 0.5%的活性炭煮沸15分鐘，過濾，加入0.1 1.0%oEDTA—2Na，用0.1pm 0.45pm的微孔濾膜過濾，灌封，即得人參多糖注射液，每毫升含人參多糖以半 乳糖醛酸計，不得少于3.0mg。
采用上述一種人參多糖提取物的制備方法制備的白色多糖提取物，將所述 的白色人參多糖提取物5 50份，加凍干賦形劑50 95份，制成人參多糖凍干 粉針劑，其中，所述的凍干賦形劑為中性氮基酸或中性氨基酸與甘露醇的混合 物；中性氨基酸50 100份、甘露醇0 50份；所述的中性氨基酸為甘氨酸、 丙氨酸、絲氨酸或脯氨酸。
采用上述一種人參多糖提取物的制備方法制備的白色人參多糖提取物，通 過藥劑學上的常規方法，可制成其它各種固體制劑。
采用上述一種人參多糖提取物的制備方法制備的人參多糖注射液或粉針 劑，能用作肌肉注射或靜脈給藥；具有增強機體免疫調節功能，用于減輕腫瘤 放、化療引起的副作用、可作為免疫調節和腫瘤治療的輔助用藥。
人參多糖提取研究資料
1、乙醇提取
采用正交設計法，以溶媒用量、乙醇濃度、回流時間、回流次數為因素， 每個因素3個水平，人參渣中皂苷含量為評價指標。結果不同條件，人參渣中皂 苷含量不一樣。結論取人參粗粉，加10倍量60 80%乙醇，回流提取2 3次， 每次90min。
2、酸水提取其原理是利用稀酸將人參藥材細胞中的非水溶性原人參多糖 轉化成水溶性人參多糖，然后在提取液中加入乙醇或多價金屬鹽類，使人參多 糖沉淀析出。
① 酸的種類；分別以鹽酸、硫酸、乙酸、亞硫酸進行了對比試驗，結果以 鹽酸和亞硫酸效果為最好。但亞硫酸揮發出對人體有害的S02氣體，同時污染 環境，因此采用鹽酸。
② 溶液pH:為了獲得高產率人參多糖，分別以鹽酸調整溶液的pH,分別為 1.0、 1.5、 2.0、 3.0做對照試驗，結果表明，水提取液的pH控制在1.5 2.5之間 產率最高。
③ 溫度試驗表明，提取溫度在8(TC以下，需要提取時間長，同時導 致人參多糖過度脫酯。若用10(TC以上水蒸汽加熱，雖提取時間短，但人參多 糖含量降低。因此提取的溫度最好控制在90 95'C為宜。酸液與原料比為了 確保提取出的可溶性人參多糖全部轉移到液相中，同時便于過濾操作，酸液用
量應大些。試驗表明，酸液與原料之比一般為15: l為最好。過濾提取液的過
濾是人參多糖生產中較為困難的過程。為了便于過濾，不僅要趁熱進行，同 時以硅藻土作助濾劑，這樣得到的人參多糖提取液清亮透明。
④料液比按人參藥材與質量分數0.5X的HC1的質量比1: IO投料，煎煮1.0 1.5 h,重復提取1次，人參多糖提取轉移率大于75%。
3、 脫色
由于酸水提取物顏色較深，含有許多非多糖類化合物，為了除去或破壞這類
化合物，采用HC1-H202脫色法。經過對比試驗證明，濃縮液加鹽酸調節pH值 為1 3，再加4 6倍鹽酸量的過氧化氫，攪拌下保溫(85 95°C) 1 3小時， 冷卻至室溫，過濾，得脫色后淺黃色澄清濃縮液。
4、 醇沉和脫鹽
由于人參多糖分子量幾萬至幾百萬，在乙醇中溶解度很低，加上醇沉法便于 工業化生產。同時由于醇沉后沉淀物含有部分金屬鹽類，尤其是含轉鹽，嚴重 影響下游工藝操作，且制成品穩定性差，易析出沉淀。故將脫色后濃縮液先用 NaOH調節pH至3 5，力Q 2 5倍乙醇，攪拌均勻，靜置，濾取沉淀，沉淀用 含0.2 2.0。/。HCl的60 80。/。乙醇洗滌一次，沉淀物用水溶解，重復醇沉和酸醇 洗滌1次，獲得白色多糖提取物。
5、 人參多糖注射液制備工藝
由于人參多糖提取物具有膠體性質，在高溫加熱時，易破壞膠體的穩定性，
產生大量絮狀沉淀，實驗證明該沉淀非多糖類化合物，屬于雜質。為此考察了 加熱溫度和加熱時間對析出物的影響，確定最佳工藝為取白色沉淀物，加注
射用水4 10倍量使溶解，過濾，濾液105 13(TC加熱0.1 1.0小時，過濾， 濾液加入0.1 0.5%的活性炭煮沸15分鐘，過濾，加入0.1 1.096。EDTA—2Na, 用0.1^im-0.45pm的微孔濾膜過濾，灌封，即得人參多糖注射液，每毫升含人參 多糖以半乳糖醛酸計，不得少于3.0mg。 6、人參多糖粉針劑制備工藝
取白色沉淀物，加注射用水4 8倍量使溶解，過濾，濾液105 13(TC加熱 0.1 1.0小時，過濾，濾液用氫氧化鈉溶液調節pH至6.0 7.0，攪拌均勻，加 少量注射用水稀釋，攪勻，加絲氨酸120g，攪拌均勻，過濾，濾液用鹽酸中和 至pH6.0 7.0，再加注射用水至處方量，過濾，測含量，分裝，2 5ml/瓶，進 行冷凍干燥，出箱，封口，壓蓋，檢漏，軋蓋，貼標簽。
用本發明的方法提取精制人參多糖方法簡單，容易操作，提取純化效果好， 提取物顏色為白色至淺黃色，經含量測定，有效成分半乳糖醛酸含量更高，雜 質含量更少。所制得的人參多糖注射液更能充分發揮其增強機體免疫調節功能 及抗腫瘤藥物的放化療作用，從而提高病人的生活質量。適合長期肌注或靜脈 注射給藥。
具體實施例方式
實施例一-
人參多糖注射液的制法
取人參藥材，先用65%乙醇回流提取2次，藥渣除凈乙醇，藥渣用12倍純 化水，再加入鹽酸，調節pH值為2 3，煎煮1.0小時，過濾，藥渣重復煎煮l 次，合并煎煮液，減壓濃縮，濃縮液加鹽酸調節pH值為2.0，再加5倍鹽酸量 的過氧化氫，攪拌下保溫(90 95°C) 1.5小時，冷卻至室溫，過濾，濾液用 NaOH調節pH至3 4，加3 4倍乙醇，攪拌均勻，靜置，濾取沉淀，沉淀用 含1.0%HC1的70%乙醇洗滌一次，沉淀物用水溶解，重復醇沉和酸醇洗滌1次， 獲得白色多糖提取物。稱重，加注射用水8倍量使溶解，濾過，濾液12rc加熱 0.5小時，過濾，濾液加入0.1 0.5%的活性炭煮沸15分鐘，過濾，加入0.2%。 EDTA 一2Na，用0.1pm 0.45^im的微孔濾膜過濾，灌封，即得人參多糖注射液，每毫 升含人參多糖以半乳糖醛酸計，不得少于3.0mg。
實施例二
人參多糖凍干粉針劑的制法
取人參藥材，先用65%乙醇回流提取2次，藥渣除凈乙醇，藥渣用12倍純 化水，再加入鹽酸，調節pH值為2 3，煎煮1.0小時，過濾，藥渣重復煎煮l 次，合并煎煮液，減壓濃縮，濃縮液加鹽酸調節pH值為2.0，再加5倍鹽酸量 的過氧化氫，攪拌下保溫(90 95°C) 1.5小時，冷卻至室溫，過濾，濾液用 NaOH調節pH至3 4，加3 4倍乙醇，攪拌均勻，靜置，濾取沉淀，沉淀用 含1.0%HC1的70%乙醇洗滌一次，沉淀物用水溶解，重復醇沉和酸醇洗滌1次， 獲得白色多糖提取物。稱重，加注射用水8倍量使溶解，濾過，濾液i2rc加熱 0.5小時，過濾，濾液用氫氧化鈉溶液調節pH至6.0 7.0，攪拌均勻，加少量 注射用水稀釋，攪勻，加絲氨酸120g，攪拌均勻，過濾，濾液用鹽酸中和至pH6.0 7.0,再加注射用水至處方量，過濾，測含量，分裝，3.0ml/瓶，進行冷凍干燥， 出箱，封口，壓蓋，貼標簽。
權利要求
1、一種人參多糖提取物的制備方法，其特征在于包括下述工藝步驟取人參粗粉，加8-10倍量60％～80％乙醇回流提取2-3次，過濾，藥渣除凈乙醇，藥渣加入10～15倍純化水，再加入鹽酸，調節pH值為1～3，煎煮0.5～2小時，過濾，藥渣重復煎煮1次，合并提取液，濾過，減壓濃縮，得提取濃縮液，濃縮液加鹽酸調節pH值為1～3，加4～6倍鹽酸量的過氧化氫，攪拌，在85～95℃下保溫1～3小時，冷卻至室溫，過濾，得脫色后濃縮液；脫色后濃縮液用NaOH調節pH至3～5，加2～5倍乙醇，攪拌均勻，靜置，濾取沉淀，沉淀用含0.2～2.0％HCl的60～80％乙醇洗滌一次，沉淀物用水溶解，重復醇沉和酸醇洗滌1次，獲得白色人參多糖提取物。
2、 采用如權利要求1所述一種人參多糖提取物的制備方法制備的白色多糖 提取物，其特征在于將白色人參多糖提取物，加注射用水4 10倍量使溶解， 過濾，濾液105-13(TC加熱0.1 1.0小時，過濾，濾液加入0.1 0.5%的活性炭 煮沸15分鐘，過濾，加入0.1 1.0。/加EDTA—2Na，用0.1(xm 0.45pm的微孔濾 膜過濾，灌封，即得人參多糖注射液，每毫升含人參多糖以半乳糖醛酸計，不 得少于3.0mg。
3、 采用如權利要求1所述一種人參多糖提取物的制備方法制備的白色多糖 提取物，其特征在于將所述的白色人參多糖提取物5 50份，加凍千賦形劑50 95份，制成人參多糖凍干粉針劑，其中，所述的凍干賦形劑為中性氮基酸或中 性氨基酸與甘露醇的混合物；中性氨基酸50 100份、甘露醇0 50份；所述 的中性氨基酸為甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸或脯氨酸。
4、 采用如權利要求4所述一種人參多糖提取物的制備方法制備的白色人參 多糖提取物，其特征在于通過藥劑學上的常規方法，可制成其它各種固體制劑。
5、 采用如權利要求2、 3或4所述一種人參多糖提取物的制備方法制備的 人參多糖注射液或粉針劑的應用，其特征在于能用作肌肉注射或靜脈給藥；具 有增強機體免疫調節功能，用于減輕腫瘤放、化療引起的副作用、可作為免疫 調節和腫瘤治療的輔助用藥。
全文摘要
一種人參多糖提取物的制備方法，是取人參粗粉，加8-10倍量60％～80％乙醇回流提取2-3次，過濾，藥渣除凈乙醇，藥渣加入10～15倍純化水，再加入鹽酸，調節pH值為1～3，煎煮0.5～2小時，過濾，藥渣重復煎煮1次，合并提取液，濾過，減壓濃縮，得提取濃縮液，濃縮液加鹽酸調節pH值為1～3，加4～6倍鹽酸量的過氧化氫，攪拌，在85～95℃下保溫1～3小時，冷卻至室溫，過濾，得脫色后濃縮液；脫色后濃縮液用NaOH調節pH至3～5，加2～5倍乙醇，攪拌均勻，靜置，濾取沉淀，沉淀用含0.2～2.0％HCl的60～80％乙醇洗滌一次，沉淀物用水溶解，重復醇沉和酸醇洗滌1次，獲得白色人參多糖提取物。用本發明所制得的注射液更能充分發揮其增強機體免疫調節功能及抗腫瘤藥物的放化療作用，從而提高病人的生活質量。
文檔編號C08B37/00GK101343330SQ200810012648
公開日2009年1月14日 申請日期2008年8月6日 優先權日2008年8月6日
發明者呂志會, 李志強, 王學東, 王淞林, 馬占芝 申請人:沈陽雙鼎制藥有限公司