用于阻斷血小板和細胞粘附、細胞遷移和炎癥的方法和組合物的制作方法

專利名稱：：用于阻斷血小板和細胞粘附、細胞遷移和炎癥的方法和組合物的制作方法用于阻斷血小板和細胞粘附、細胞遷移和炎癥的方法和組合物交叉引用本申請涉及并要求享有2005年9月28日提交的美國臨時申請60/721,754的優先權，在此完整引入作為參考。發明背景損傷應答是一種用于恢復組織完整性的固有的宿主免疫應答。傷口愈合，不管是由外傷、手術、微生物或者外源材料啟動，都是通過事件的交疊模式進行，包括凝結、炎癥、上皮形成、肉芽組織的形成、基質和組織重塑。修復過程在很大程度上受相互作用的分子信號調節，包括激發和協調多種細胞活性的細胞因子，所述細胞活性重點涉及炎癥和愈合。初始損傷引發凝結作用和急性局部炎性應答，繼之以間質細胞募集、增殖和基質合成。無法解決炎癥可能導致慢性不愈合創口，而基質不受控制的積聚經常涉及異常細胞因子途徑，導致過量的疤痕和纖維化結果。大多數類型的損傷損害血管，而凝結是起動止血作用和防止宿主過度失血的應答。血管壁損傷將膠原暴露于流動血液中的成分。膠原是凝血酶原表面組分，其已經被證明是血小板粘附、聚集及其顆粒釋放的刺激劑，導致其他血小板被募集到該區域形成凝聚物或者血栓(Ruggeri,Z.M.等人；SeminarsinHematology,1994,31，229-39)。血小板與血管表面的初次接觸受膠原結合的vonWillebrand因子(vWF)和血小板上特異性vWF受體--糖蛋白Ib-V-IX復合物的介導。這種可逆的粘附使得血小板翻轉到受損區域，然后繼之以膠原受體(a(2)(3(1)，GPVI)介導的堅固粘附，進一步導致血小板活化。這導致血小板a(IIb)(33受體的構象活化、纖維蛋白原結合和最終的血小板凝集。此外ADP、腎上腺素和循環凝結因子驅動血小板的其它激活過程，而同時凝血酶活性的增加有助于交聯的纖維蛋白凝塊的形成。血小板-血小板凝集支持該過程，并被作為調節物的纖維蛋白原驅動，所述纖維蛋白原通過糖蛋白1Ib/IIIa受體橋接細胞。這種正常的生理反應在病理過程中起作用，所述病理過程中血小板與鞏膜損傷所暴露的膠原粘附(VanderRestM.等人；FASEBJournal,1991,5,2814-23)并啟始建立阻塞。根據阻塞的位置和程度，并發癥例如心肌梗死、中風、炎癥或者肺栓塞可能是該過程的結果。作為一個直接作用的抗血栓劑，肝素阻斷凝血酶活性從而阻止富含纖維蛋白的血栓形成，在當前被用于抗血栓介入。肝素在下列適應癥中使用，例如不穩定心絞痛和急性心肌梗塞。但是，肝素的若干缺點仍未得到解決，例如靜脈應用，需要抗凝血酶-m作為輔因子，對于凝塊結合的凝血酶的親合力降低，被若干種血槳蛋白滅活，間或誘導血小板減少和它的生物學異質性。近來開發的低分子量肝素提供了皮下應用的形式；但是相對于標準肝素，治療效益一般。令人遺憾的是，相同情況也適用于直接作用的其它抗凝血酶，例如水蛭素，水蛭肽和華法林。問題之一似乎涉及抗血栓治療中凝血酶產生的增加(Rao,A.K等人，Circulation,1996,94,389-2395)。因此近來其他策略集中于因子Xa驅動的凝血酶原活化過程。挑戰是設計合適的針對該因子的抑制劑。另一類治療表示為溶栓療法，集中在葡激酶、鏈激酶、尿激酶型纖溶酶原激活劑、組織型纖溶酶原激活劑和茴香酰化-纖溶酶原-鏈激酶激活劑復合物。誘導再灌注所需的時間差異對于這些溶血劑中的每一種是不同的，但是從降低總死亡率來說，所有產品的貢獻是相同的。此外，再阻塞和/或延長出血是并發癥中的一部分。這可能是由于對纖維蛋白的特異性相對較低以及這些化合物的血漿半衰期短。當人造表面接觸血液時，并發癥發生了。當屬于這種情況時，通過活化血小板和/或誘導凝結，增加誘導血栓事件的傾向。這些作用可能造成血管移植、心臟瓣膜、支架、導管或者任何其他血液接觸裝置或者材料的失效。此處公開的蛋白具有產生不致血栓的表面，因此還可以通過將該蛋白固定到如上所述的材料和裝置上進一步利用。這種處理使得這類材料或裝置生物相容和抗血栓。當前用于嘗試控制血小板粘附、活化和后續血栓形成和內膜增生的兩條治療路線是抗血小板劑和抗血栓給藥。雖然藥物例如阿司匹林通過抑制環加氧酶途徑有效地阻斷凝血垸A2的合成，但它們沒有阻止膠原誘導的血小板粘附和活化，這刺激內膜增生的發展。肝素作為抗血栓劑的使用伴隨著并發癥和限制，包括不可預測的劑量反應、需要密切的實驗室監控、對凝塊結合的凝血酶的活性有限、多個抑制部位、抗凝血酶m依賴性、出血的風險，以及需要連續輸液。顯然，理想的治療劑是一種產生位置特異和局部的效果，而且沒有全身分布或者廣泛凝血病的治療劑。由于現有抗血栓劑相關的局限性，存在對新的替代策略和治療劑的實際需要。因此，顯而易見需要新的和改進的治療劑和方法，用于抑制血小板粘附的病理生理學事件，預計在該領域的貢獻可以降低與血管成形術或者手術程序相關的發病率和死亡率。引用的參考本說明書中提及的全部出版物和專利申請在此以相同程度引入作為參考，就像各個個體出版物或者專利申請是具體和單獨指出被引入作為參考。發明概述本發明的第一個方面涉及治療血白細胞介導的炎性病癥的方法，通過向需要其的患者施用有效量的沙拉丁素(saratin)。在一個實施方式中，沙拉丁素抑制血白細胞的粘附或者細胞遷移，所述血白細胞例如淋巴細胞，單核細胞，巨噬細胞或者多形核白細胞。在另一個實施方式中，沙拉丁素用于治療血小板介導的炎癥。本發明的另一個方面涉及抑制細胞遷移和/或細胞粘附到細胞外基質蛋白的方法。在一個實施方式中，沙拉丁素預防細胞粘附到炎性細胞的細胞外基質蛋白。在另一個實施方式中，細胞外基質蛋白是膠原，白蛋白，彈性蛋白或者纖維連接蛋白。此外，本發明涉及用沙拉丁素治療手術誘導的并發癥的方法。手術誘導的并發癥通常與手術誘導的炎癥有關。在一個實施方式中，為了治療手術誘導的炎癥，向患者施用有效量的沙拉丁素。手術誘導的并發癥也可能是手術誘導的粘附。在另一個實施方式中，為了治療手術誘導的粘附，向患者施用有效量的沙拉丁素。在一個實施方式中，沙拉丁素預防手術誘導的血小板和/或血白細胞粘附。在一個實施方式中，沙拉丁素預防手術誘導的淋巴細胞、單核細胞、巨噬細胞或者多形核白細胞粘附。在一個實施方式中，沙拉丁素用于手術引起的并發癥的治療，所述并發癥由矯形或者整形外手術引起。在一個實施方式中，沙拉丁素用于抑制細胞遷移到損傷部位，例如手術引起的損傷。有效量的沙拉丁素可以作為局部劑或者植入物的涂層給藥。植入物可以是天然或者人工植入物。人工植入物可以是醫療裝置，例如整形植入物，心血管植入物或者矯形植入物。在一個實施方式中，醫療裝置是心臟瓣膜，移植物，支架，導管，椎間盤，桿，螺釘，板，軟骨，或者粘附屏障。天然植入物可以是器官，組織，組織移植物，或者細胞植入物。在一個實施方式中，天然植入物是血管移植物。優選的，沙拉丁素在手術部位被用作局部藥劑。在一個實施方式中，沙拉丁素用于在植入前包被移植物(graft)，移植體(transplant)，或者裝置。在另一個實施方式中，沙拉丁素在植入后用于移植物，移植體，或者裝置。在另一個實施方式中，沙拉丁素用于手術損傷部位。在又一個實施方式中，沙拉丁素用于損傷組織以防止愈合過程中結疤。組織的損傷可能是由手術、燒傷或者炎性病癥所致。在本發明的另一個方面，沙拉丁素用于預防和/或治療疤痕和瘢痕疙瘩的形成。疤痕和/或瘢痕疙瘩可能是手術引起的或者由燒傷或者炎性皮膚病所致。在一個實施方式中，疤痕和/或瘢痕疙瘩是整形手術引起的。在一個實施方式中，施用沙拉丁素來抑制手術程序，例如膝、肩膀或者臀部關節切開術或者植入矯形裝置，尤其是由手術植入物例如膝、臀部或者肩膀置換或者其他植入的物品產生的疤痕組織。在本發明的另一個實施方式中，直接將沙拉丁素注入已進行美容改造皺紋的患者的皺紋中，以預防疤痕組織形成。通過參考下列闡述說明性實施方式的詳細說明和其中的附圖，能夠更好的理解此處描述的方法和組合物的特點和優勢圖1描繪了在10pig/mLIV型膠原和BSA包被的濾紙(filter)上，沙拉丁素對MCP-1-誘導的人單核細胞遷移的影響。圖2描繪了在lmg/mLBSA,lmg/mL膠原或者lmg/mL纖維連接蛋白包被的濾紙上，沙拉丁素對MCP-l-誘導的人單核細胞遷移的影響。圖3描繪了在lOpg/mLIV型膠原和BSA包被的濾紙上，沙拉丁素對MIP-la-誘導的人T淋巴細胞遷移的影響。圖4描繪了在lmg/mLBSA,lmg/mLIV型膠原或者lmg/mL纖維連接蛋白包被的濾紙上，沙拉丁素對MCP-la-誘導的人T淋巴細胞遷移的影響。圖5描繪了在小鼠氣囊模型中，與注射鹽水對照的動物相比，沙拉丁素對MCP-l(JE)-誘導的細胞遷移的影響。標記為沙拉丁素給藥的組也用MCP-1(JE)誘導。圖6描繪了在小鼠氣囊模型中，與注射鹽水對照的動物相比，沙拉丁素對MCP-l(JE)-誘導的細胞因子產生的影響。在每種情況下，標記為沙拉丁素給藥的組也用MCP-1(JE)誘導。圖7描繪了序列表。
發明內容定義和一般的參數當在本說明書中使用時，下列單詞和詞組通常被認為具有下面闡明的含義，除了在使用它們的內容中另有指示。術語"有效量"或者"治療有效量"是指當向需要這類治療的動物對象給藥時足以實現如下面所定義的治療的沙拉丁素量。治療有效量是不同的，取決于接受治療的對象和病情、對象的體重和年齡、病情的嚴重程度、給藥方式等等，這可以由本領域的普通技術人員很容易地確定。該術語還適用于在靶細胞中誘導特定應答的劑量，所述特異應答例如降低血小板粘附和/或細胞遷移。具體劑量是不同的，取決于選擇的特定沙拉丁素化合物、依照的給藥方案、它是否與其他化合物聯合給藥、給藥的時間、給藥的組織和載有它的物理遞藥系統。此處使用的術語"治療"和其語法同等物包括實現治療效果和/或預防效果。治療效果表示根治或者改善接受治療的根本病癥。并且，根除或者改善與根本病癥相關的一種或者多種生理癥狀以致在患者中觀察到好轉，即實現了治療效果，盡管患者仍可能罹患著根本病癥。至于預防效果，可以將組合物向處于發展特定疾病風險的患者、或者向報告疾病的一種或者多種生理學癥狀的患者給藥，即便可能還沒有做出該疾病的診斷。此處使用的術語"治療效果"，包括如上所述的治療效果和/或預防效果。預防效果包括延緩或者消除疾病或者病癥的出現，延緩或者消除疾病或者病癥的癥狀發作，減緩、中止或者逆轉疾病或者病癥的進展，或者其任意組合。術語"治療上可接受的鹽"是指來自本領域公知的各種有機和無機反離子的鹽，包括，僅作為舉例，鈉，鉀，鈣，鎂，銨，四烷基銨，等等；和當分子包含堿官能團時的有機或者無機酸的鹽，例如鹽酸，氫溴酸鹽，酒石酸鹽，甲磺酸鹽，乙酸鹽，馬來酸鹽，草酸鹽等等。沙拉丁素沙拉丁素是一種天然存在的蛋白，從醫用水蛭歐洲醫蛭(///n^owe^W朋/")的唾液中分離，描述于美國專利6,774,107和6,881,722。已經顯示沙拉丁素結合膠原，因此作為天然血小板粘附膠原的抑制劑。具體地，己經表明沙拉丁素阻斷vWF結合膠原，并且有效地預防高剪切力下血小板與膠原的粘附。此外，如此處的研究所描述，沙拉丁素抑制趨化因子誘導的遷移。對沙拉丁素進行測序，從歐洲醫蛭cDNA文庫中克隆基因。沙拉丁素表征為SEQ.ID.N0.2序列所描述的氨基酸序列，由103個氨基酸組成，構成大約12068道爾頓士lkda的理論相對分子量。該蛋白顯示出與其他先前描述的序列沒有相似性的獨特一級結構。沙拉丁素富含天冬氨酸和谷氨酸，使得通過IEF-PAGE測量，分子的酸性等電點為pH3.7+-.0.5。SDS-PAGE分析證明，在電泳前蛋白還原的情況下，運動偏移，提示了翻譯后修飾。多肽測序顯示6個半胱氨酸分子，這可能構成蛋白的翻譯后修飾。沙拉丁素的電噴射質譜顯示實際分子量為12061道爾頓，提示最多3個二硫鍵參與蛋白天然形式的二級結構的形成。沙拉丁素可以通過例如重組技術的程序產生。用于本發明的合適的重組沙拉丁素在多形漢遜酵母(//a"se""/a/o/_ymorp/m)中表達和分離。該重組和天然存在的蛋白是膠原依賴性血小板粘附的有效抑制劑，并且如此處所示是細胞遷移所需的基質蛋白的非特異性抑制劑，因此可以用于與心臟病、循環系統疾病和炎性病癥有關的不同病癥的治療。此外，沙拉丁素可用于包被天然或者人工的膠原表面，以便使它們對細胞沒有粘附性，并預防細胞的活化。通常，本發明涉及在一定條件下將沙拉丁素引導到組織腔內或者腔上所選位置之內或者之上，所述組織例如，脈管系統或者器官，使沙拉丁素可以作為局部藥劑或者作為表面上的粘附涂層局部使用，以預防和抑制對組織損傷的不良血栓應答或者不良的細胞遷移，包括與手術、燒傷、組織移植或者自身免疫疾病相關的損傷。沙拉丁素可以與各種治療劑聯合用于現場給藥。較早己經指出不同的治療介入誘導局部損傷，所述損傷理論上理想的是被立即和局部治療。殘留的未處理的受損細胞啟動一系列過程，所述過程涉及凝結、補體激活、和對細胞因子釋放的細胞應答、誘導增殖、以及其他生物活性過程。在本發明的一些實施方式中，因此這是沙拉丁素直接置于被處理的組織的一個方面。局部應用的另一個方面是將與用于介入的藥劑全身效應有關的潛在問題最小化。本發明包括從水蛭歐洲醫蛭分離的活性多肽沙拉丁素的制劑和使用方法。利用加壓透析和至少一種層析步驟如疏水性相互作用層析(HIC)和/或至少一種陰離子交換層析和任選的至少一種反向高效液相(RP-HPLC)步驟的組合，可以從唾液中分離蛋白。本發明還涉及分離的DNA，所述DNA包括編碼水蛭來源的血小板粘附抑制劑的多核苷酸，所述抑制劑具有蛋白所示的氨基酸序列。描述cDNA克隆的核苷酸序列顯示于SEQ.ID.NO.1。核苷酸序列的1-63位代表推定的21氨基酸前導序列，64-372位包含編碼103個氨基酸殘基多肽和如SEQ.ID.NO.2中成熟蛋白所示氨基酸序列的開放閱讀框。圖7A描述SEQ.ID.NO.1禾P2。圖7B和7C描述SEQ.ID.NO.3-12。SEQ.ID.NO.3-12是引物序列，用于沙拉丁素基因通過PCR的擴增和分離，大腸桿菌(&co")表達載體的構建和表達，桿狀病毒供體質粒(baculodonorplasmid)的構建和表達，和酵母表達載體和表達，如美國專利6,774,107中所描述，在此完整引入作為參考。本發明還涉及重組載體和包含重組載體的宿主細胞，所述重組載體包括編碼本發明水蛭來源的血小板粘附抑制劑的合成基因。回收和分離表達蛋白的方法基于標簽技術或者從為天然存在沙拉丁素而建立的純化方案改變而來。根據用于轉化了合適載體的酵母細胞、昆蟲細胞、幼倉鼠腎細胞和大腸桿菌(E.coli)細胞中胞外或者胞內表達的個體方案，從上清或者沉淀回收重組蛋白的步驟可以適當采用本領域技術人員已知的技術。在作為宿主的大腸桿菌中發現合適的表達，其中通過pelb前導序列的插入促成胞周質表達。在滲透和離心后實現從大腸桿菌(&c/zen'c/n'aco/z'，co/O的產物回收(大約5mg/L)。含有變性酵母改造載體(alterativeyeastadoptedvector)的釀酒酵母(/SVzccAi3row;vcescerevz'sz'a。6".ce廠m&.fle)OlOmg/L肉湯培養基)用作平行試驗。通過離心分離分泌的物質。通過交叉流過濾和離子交換層析實現純化。在其他利用COS細胞或者CHO細胞的表達途徑中，產物表達大約為750ng/mL。純化的重組物質經電泳和層析分析證明是純的和均質的，通過氨基酸測序和分子質量測定證明與唾液來源的沙拉丁素相同。用于產生沙拉丁素的技術公幵于美國專利6,774,107。例如轉基因小鼠，或者其他生物體，包括其他哺乳動物，也可以用于表達沙拉丁素。本發明的蛋白，沙拉丁素，包括保持了公開序列活性的變異體，包括片段或者亞基，天然存在的變異體，等位基因變異體，隨機產生的人工突變體和人為序列變化例如添加保持活性的氨基酸、反向肽(inversepeptide)和包含D-氨基酸的肽。片段或者亞基是指含有的氨基酸比完整蛋白少的序列的任意部分，例如除去完整蛋白N-和/或C-末端部分的部分序列。例如，本發明的蛋白包括沙拉丁素蛋白水解片段，在分離過程中通過SDS-PAGE分析觀察到分子量為10kDa。該蛋白還包括具有一種或者多種非天然氨基酸或者其他修飾的修飾形式，例如PEG化或者糖基化。例如，該蛋白包括來自酵母的糖基化產物。本發明還涵蓋雜合蛋白，例如由表達載體內多個基因的表達產生的融合蛋白或者蛋白，并可能包括具有公開蛋白的特異活性的多肽，所述多肽通過肽鍵與第二種多肽連接。值得注意地，本發明蛋白的其他變異體也被包括，尤其是與分離的蛋白僅僅是保守氨基酸取代有差異的任意變異體。這類保守氨基酸取代在例如Taylor等人，J.Mol.Biol，1986，188,233中定義。血小板的vWF依賴性結合本發明涉及稱為沙拉丁素的多肽的作用，所述多肽在損傷后減少血小板粘附和積聚。本發明還涉及抑制血小板與膠原vWF依賴性的結合，還有沙拉丁素作為血栓抑制劑的醫學用途，其中所述多肽作為局部藥劑或者作為植入物和醫療裝置的涂層局部使用，所述植入物例如生物植入物(器官，細胞或者組織)。血細胞尤其是血小板與受損組織包括血管的粘附，是手術程序中一種已知的現象。這類損傷可能在不同的手術和經皮療法期間發生，所述療法已經開展用于阻塞的通道、管道和其他腔的復通，以去除有病的組織，和植入替代的組織、醫療裝置或者其組成部分。組織對機械誘導的外傷、外科介入、支架安置、移植物的放置的細胞和分子應答是炎癥、平滑肌細胞遷移、增殖和肌成纖維細胞轉化的相互作用，一旦外傷發生就發生(Futura;1997.p.289-317)。介入也可能造成一定程度的其他損傷，所述損傷具有局部脫內皮化和底層的細胞外基質組分例如膠原和彈性蛋白的暴露。在一些患者中，血小板和纖維蛋白原的募集可能接著導致急性血栓性阻塞。血小板與受損血管壁的粘附首先通過vonWillebrand因子(vWF)介導，這是一種釋放自內皮細胞并在血漿中循環的多聚體糖蛋白，其中它的功能是作為因子VIII的載體蛋白(Amm.Rev.Biochem.1998;67:395-424)。高度多聚體化的vWF還循環包含在血小板的ct-顆粒內，在此它在血小板活化后釋放(Annu.Rev.Biochem.1998;67:395-424)。在升高的剪切力情況下，例如那些在動脈中粥樣斑塊或者機械介入部位遇到的情況，vWF可能通過其A3結構域結合表面暴露的膠原纖維(Biochemistry1986;25(26):8357國8361，Blood1987;70(5):1577-1583，J.Biol.Chem.1987;262(28):13835-13841)。然后膠原結合的vWF又通過vWF-Al結構域中表位的剪切依賴性暴露"栓系"血小板，與血小板GPIb/IX/V相互作用(Blood1985;65(l):85-90,Blood1985;65(4):823-831，Br.J.Haematol1986;63(4):681-691)。因此vWF作為膠原和血小板的橋梁，并且是流動條件下血小板粘附到膠原的先決條件(J.Lab.Clin.Med.1974;83(2):296-300)。血小板滾過vWF導致微弱的粘附，但是，此外，為了促進持久的血小板粘附、活化和聚集，需要膠原和血小板表面上其他受體的直接相互作用(Thromb.Haemost1997;78(l):434-438,Thromb.Haemost1997;78(1):439-444)。血小板上的直接膠原受體包括GPVI(Blood1987;69(6):1712-1720,Thromb.Haemost1999;81(5):782-792，J.Clin.Invest1989;84(5):1440-1445)，GPIa/IIa(aV^)(J.Clin.Invest.1989;84(5):1440-1445,Nature1985;318(6045):470-472)，和程度更低的GPIV(CD36)(J.Biol.Chem.1989;264(13):7576-7583)，甚至可能有p65(J.Clin.Invest.1997;100(3):514-521)。在沒有vWF輔助的血小板結合時，已證明這些受體在流動條件下無力介導血小板募集到膠原(Br.J.Haematol1986;63(4):681-691)。最后，vWF與纖維蛋白原聯用，通過結合血小板GPIlb/IIIa促進血小板的交聯和進一步活化(J.Clin.Invest.2000;105(6):783-791)，為發展血栓提供穩定性和力量。隨著血小板GPIlb/IIIa和ADP受體拮抗劑的出現，大步推進了近年來建立的抗聚集療法(CoronaryArtDis1999;10(8):553-560,J.Am.Coll.Surg.2000;191(l):76-92)。但是，這些策略不是設計用于抑制血小板與暴露的膠原纖維的初始粘附，并且不論GPIlb/IIIa拮抗劑在減弱血小板-血小板相互作用中的效果，血小板仍然粘附到受損的血管壁(Blood1993;81(5):1263陽1276，Circulation1995;91(5):1354曙1362)。此夕卜，血小板活化幾乎肯定造成了聚集和急性血栓，亞急性和慢性內膜增生的進展至少部分受促有絲分裂調節物例如血小板衍生生長因子(PDGF)的影響，PDGF由血小板的活化釋放。實際上，已經證明抑制PDGF在不同動物種類中減少內膜增生(Science1991;253(5024):1129-1132,Circulation1999;99(25):3292-3299)。已經報道若干種水蛭來源的物質抑制膠原-血小板相互作用(Blood1995;85(3):705-711,Platelets2000;ll(2):83-86，J.Biol.Chem.1992;267(10):6893-6898,J.Biol.Chem.1992;267(10):6899-6904，BloodCoagulFibrinolysis1991,2(1):179-184)。失穩酶(Destabilase)，一種從歐洲醫蛭分離的具有纖維蛋白解聚活性的異肽酶，已被報道抑制不同激動劑包括膠原誘導的血小板凝集，但被認為是直接結合血小板膜(Platelets2000;11(2):83-86)。水蛭抗血小板蛋白(LAPP),—種來自藥用南美水蛭(WaemeWen'ac^"'"a/k)唾液的13kda蛋白，在靜態(J.Biol.Chem.1992;267(10):6柳-6卯4,Thromb.Haemost1999，82(3):1160-1163)和流動提高(ArteriosclerThromb.Vase.Biol.1995，15(9):1424-1431)的條件下抑制血小板粘附到膠原，對vWF-和血小板GPIa/IIa-介導的與膠原的結合均有影響(Thromb.Haemost1999,82(3):1160-1163)。Calin是一種來自歐洲醫蛭的約65kDa蛋白，其出現了相似的模式。Calin也在靜態和流動條件下都抑制膠原-血小板的相互作用(Blood1995;85(3):705-711,BloodCoagulFibrinolysis1991,2(1):179-184，Thromb.Haemost1999，82(3):1160-1163)。此外，LAPP和Calin都是膠原誘導的血小板凝集的抑制劑，在類似于阻斷vWF結合膠原的濃度抑制聚集(J.Biol.Chem.1992;267(10):6893-6898，BloodCoagulFibrinolysis1991,2(1):179-184,Blood1995，85(3):712陽719)。炎癥本發明還涉及沙拉丁素對炎癥的效果。本發明還涉及抑制細胞遷移，以及沙拉丁素作為炎癥抑制劑的醫療用途，其中所述多肽作為局部藥劑或者作為生物學植入物和醫療裝置的涂層局部使用，所述生物學植入物例如器官，細胞或者組織。炎癥是免疫系統對感染或者刺激的最先應答，可以被稱為先天性級聯。炎癥具有兩種組分(i)細胞的和(ii)滲出性的。滲出性組分參與液體的運動，通常包含許多重要的蛋白例如纖維蛋白和免疫球蛋白。血管在感染的上游擴張，在下游收縮，同時毛細血管對感染組織的滲透性增加，導致血槳進入組織的凈損失一引起水腫或者腫脹。細胞組分參與血白細胞從血管進入發炎組織的運動。血白細胞或者白細胞在炎癥中起作用；它們從毛細血管滲出進入組織，并作為吞噬細胞吞噬細菌和細胞碎屑。例如，不限于任何理論，淋巴細胞和單核細胞募集到發炎的組織，以及還有巨噬細胞釋放趨化因子進一步募集多形核白細胞。血白細胞還可以通過阻斷感染和預防其傳播來起輔助作用。當細胞通過L-選擇蛋白結合在內皮表面開始栓系時，發生細胞遷移。然后借助于細胞表面呈遞的粘附分子例如LFA-1與內皮細胞上呈遞的其配體分子(例如VCAM和ICAM)的相互作用，發生牢固的粘附。該過程被趨化因子增強，所述趨化因子調節該相互作用的親合力。在該變移發生后，一個步驟需要細胞的內陷和它們與細胞外基質蛋白(ECM)的結合。最終細胞開始沿著趨化因子的濃度梯度進行遷移。因此細胞與ECM的結合在它們向炎性部位的遷移中起作用。在此處描述的研究中，檢驗單核細胞和T淋巴細胞沿趨化因子濃度梯度遷移的能力。但是，在遷移前，細胞必須首先結合ECM。優選的，將沙拉丁素設計為在手術期間應用于血管內表面，在此它包被暴露的膠原并抑制血小板與動脈壁膠原的vWF-依賴性結合和a2/^整合蛋白結合。在預防血小板與損傷的血管粘附中，沙拉丁素阻斷參與血小板凝集和活化的事件序列的第一步，從而可以預防在血管手術和血管內程序范圍中發生的后續血栓形成和內膜增生。沙拉丁素對于膠原的特異性是此處所述研究中的一個調查主題。此外，檢驗了炎癥期間沙拉丁素對體內細胞積聚以及促炎性和炎性細胞因子分泌的影響。為這個目的，用于趨化性的濾紙用lmg/mL的ECMs，即IV型膠原、牛血清白蛋白(BSA)和纖維連接蛋白包被。結果表明，通過體外Boyden小室法檢測(參見圖1到4)，沙拉丁素抑制人單核細胞向MCP-1或者T淋巴細胞向MIP-la的趨化性。體外趨化性是檢測體內細胞遷移的先決條件。當濾紙用0.01或者lmg/mLECMs包被時，證明了沙拉丁素對單核細胞和T淋巴細胞向MCP-1和MIP-la體外趨化性的這種抑制(參見圖1到4)。盡管當細胞遷移通過IV型膠原-包被的濾紙時，抑制最為顯著，但當濾紙用BSA或者另一種細胞外基質蛋白例如纖維連接蛋白包被時，也可以觀察到抑制。表1概述了圖1到4中進行的實驗的IC5。結果。當置于lmg/mL底物上時，抑制任一種細胞類型的效能等級是膠原〉纖維連接蛋白〉BSA。細胞傾向于差異利用ECM蛋白進行移動和遷移，因此不限于任何理論，觀察到的沙拉丁素抑制濃度(IC5C)的差異可能表明沙拉丁素在基質上的相互作用，這樣的話沙拉丁素預防炎性細胞與基質的相互作用，并且沙拉丁素與炎性細胞本身沒有相互作用。這些結果表明沙拉丁素不僅在使用膠原時而且在使用其他ECM蛋白時發揮其抑制效果。不限于任何理論，看起來似乎沙拉丁素可以混雜地結合若干種蛋白。由于沙拉丁素阻斷暴露膠原的血小板的整合蛋白結合位點，可以推斷其他基質蛋白上的其他整合蛋白識別部位都可能受到類似影響。表1:圖1到4的ICso結果的概述<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>除了沙拉丁素體外抑制單核細胞和T淋巴細胞趨化性的能力以外，還檢測該化合物是否可以在體內影響細胞的遷移。因此，通過在注射炎性細胞因子MCP-1的小鼠中產生氣囊來模擬炎性應答。已知該細胞因子募集單核細胞，因為這些細胞表達MCP-1的受體CCR2(ExpertOpin.Ther.Targets7:35(2003))。結果顯示在這種氣囊模型中，MCP-1誘導細胞遷移進入小鼠的氣囊，而沙拉丁素抑制細胞向MCP-1的體內遷移(圖5)。盡管沒有研究募集進入氣囊的細胞類型，我們推測大部分細胞是單核細胞系的，因為在計數浸潤細胞的數目前，單核細胞特異性趨化因子MCP-1只使用了2小時。單核細胞的募集通常伴隨不同的促炎性和炎性細胞因子和趨化因子的釋放。此處描述的研究結果顯示，與基準值相比，MCP-1給藥到氣囊中增加了IL-8、TNF-a和IL-lf3的積聚，但是，這些增加沒有達到統計顯著性(圖6)。盡管沙拉丁素的給藥減少了MCP-1誘導的相同細胞因子的積聚，但這些減少沒有達到統計顯著性，很可能是因為該研究中使用的動物數量。觀察到MCP-1對氣囊中FGF的分泌沒有影響。類似地，也可以證明沙拉丁素對從未用于實驗的小鼠或注射MCP-1的小鼠中發現的FGF水平沒有影響。這可能是模型定時的結果，其中抽吸囊泡前只有2.5小時。沙拉丁素能夠降低MCP-1刺激動物中發現的TGF-Z3水平。該細胞因子是多效性的，先前已經顯示在其他細胞類型中，誘導下述細胞的募集肥大細胞(J.Immunol.1994，152:5860)，小鼠Langerhans細胞(J.Immunol.174:2778(2005)),白細胞(Gastroenterology.122:1122(2002)):破骨細胞(J.BoneMiner.Res.2001，16:1237)，人單核細胞核樹突狀細胞(J.Immunol.2000，164:2285)，骨髓間充質細胞(Exp.CellRes.1999,250:485),中性粒細胞(J.Investig.Allergol.Clin.Immunol.1998,8:346)和NK細胞(Int.Immunol.1993,5:825)。因為對照組不同(刺激的，無沙拉丁素)，我們不能確定TGF-Z3的降低是否是由于MCP-1、沙拉丁素或者兩者。目前還不清楚，沙拉丁素抑制細胞原位遷移的能力是否是由于TGF-/S的水平降低。如所述，沙拉丁素還降低其他細胞因子和趨化因子的水平，所述細胞因子和趨化因子在不同細胞類型的募集中起作用。這些包括IL-8，TNF-a和IL-lp。在一個實施方式中，沙拉丁素制劑防止細胞遷移到組織，包括炎癥部位例如受損組織。在另一個實施方式中，沙拉丁素制劑防止T淋巴細胞遷移到組織，包括炎癥部位例如受損組織。在另一個實施方式中，沙拉丁素制劑防止單核細胞遷移到組織，包括炎癥部位例如受損組織。在另一個實施方式中，沙拉丁素制劑防止參與炎癥的細胞因子的產生。不限于任何理論，此處描述的結果表明，沙拉丁素可能具有減少細胞遷移到炎癥部位的能力，從而影響針對組織損傷的免疫應答。例如，沙拉丁素在炎癥部位減少細胞因子產生的能力表明沙拉丁素可能通過降低該部位的免疫應答來減輕炎癥。腱損傷本發明的一個方面是沙拉丁素治療腱損傷的用途。優選的，在治療受損腱的手術期間或者之后使用沙拉丁素。腱將肌肉與它們的骨性起端和附著物連接。可以利用局部麻醉(手術緊鄰區域是無痛的)、區域麻醉(鄰近手術區域的局部范圍和周圍區域是無痛的)、或者全身麻醉(患者無意識和無痛)，進行腱修復。在受損腱上產生一個切口。腱的受損或者撕裂末端被縫合在一起。如果腱己經嚴重受損，可能需要腱移植物(經常使用來自腳或者腳趾或者身體另一部分的一塊腱)。必要時，腱被再附著到周圍的結締組織。檢查該區域神經和血管的損傷，閉合切口。腱修復的目標是恢復腱撕裂后關節或者周圍組織正常功能。腱修復手術的風險包括疤痕組織的形成，這阻止了順暢的運動，例如，充分的腱滑動。在一個實施方式中，沙拉丁素將用于阻止滑動的減少，滑動減少可能造成使用時功能降低或者疼痛增加。用于撕裂或者切斷的腱和韌帶("連接索"或者"索")的修復技術根據損傷性質和受影響的具體索差異很大。經常受損的索的實例包括手的屈肌腱和膝的前十字韌帶(ACL)。己經切斷的長屈肌腱的修復通常通過面對面縫合切斷腱的末端來實現。在一個實施方式中，施用沙拉丁素來預防手術后固定期間沿著腱的長度方向形成疤痕和/或粘連。在受損的屈肌腱不經過手術治療的情況下，沙拉丁素用于在愈合過程中預防結疤。在一個實施方式中，沙拉丁素用于完整長度的暴露腱。在另一個實施方式中，在縫合所處的界面使用沙拉丁素。就前十字韌帶(連接股骨的底部和脛骨的頂部)來說，用力產生的應力更大得多，與周圍組織和骨之間相互作用更低，索的偏移更少，愈合趨勢也大不相同。當使用骨-腱-骨移植物時，沙拉丁素用于促進ACL的重建。沙拉丁素可用于如上所述的任意程序。關節鏡手術和其他手術關節鏡檢查是一種手術程序，其中與遠程光源和視頻監視器相連的相機通過上皮和關節囊中的一個小切入口插入解剖關節(例如，膝，肩膀，等等)。通過相似的切入口，手術器械可以被放入關節，它們的使用通過關節鏡顯像來引導。這類的程序包括，例如，膝的部分半月板切除術和韌帶重建，肩膀的肩峰成形術和肩袖清創術和肘滑膜切除術。作為擴展手術適應癥和小口徑關節鏡發展的結果，腕和踝關節鏡檢査也已經成為常規。在一個實施方式中，在關節鏡手術期間的圍手術期使用沙拉丁素制劑。所述應用包括不間斷應用、以頻度間隔反復應用(例如，過程內以頻度間隔的重復血管內推注)，并且除短暫停止外不間斷應用，以便導入產物或者藥劑或者程序裝置，這樣的話在受傷或者手術部位局部保持基本上恒定的預定濃度。在另一個實施方式中，在所有手術受損組織的程序結束時，閉合之前，沙拉丁素被用作浸浴涂層。在一些實施方式中，沙拉丁素通過手術期間反復灌洗或者在閉合結束時一次灌洗給藥。除關節鏡檢査外，沙拉丁素制劑還可以局部用于任意的人體腔或者通道、手術創傷、外傷(例如，燒傷)或者任何手術/介入程序中。這些程序包括，但不限于，泌尿學程序，婦產科學程序，心血管和常規血管診斷和治療程序，內窺鏡程序以及口腔、牙齒和牙周程序。在一個優選的實施方式中，沙拉丁素與準備植入的移植物和裝置一起使用。例如，在植入前，沙拉丁素用于包被組織移植物或者不含血的裝置。沙拉丁素還可用于植入后的移植物或者裝置和/或還用在手術損傷部位。疤痕/瘢痕疙瘩形成在本發明的另一個方面，沙拉丁素用于預防和/或治療疤痕和瘢痕疙瘩的形成。在一個實施方式中，施用沙拉丁素來抑制手術步驟產生的疤痕組織，所述手術步驟例如膝、臀部或者肩膀關節切開術或者矯形裝置的植入，尤其是通過手術植入例如膝、臀部或者肩膀替換或者其他植入物。在本發明的另一個實施方式中，直接將沙拉丁素注入已經進行鈹紋美容整形的患者的皺紋或者外用以預防疤痕組織形成。在另一個實施方式中，施用沙拉丁素來抑制燒傷產生的疤痕組織。在另一個實施方式中，在整形手術、重建手術后使用沙拉丁素預防和/或治療傷疤和瘢痕疙瘩的形成。例如，在擇期手術例如頭和頸提升術、為了更好美容效果的乳房增大術或者縮乳術之后，可以使用沙拉丁素。此處使用的術語"疤痕組織"和"疤痕組織形成"包括纖維化產生的任意病理病癥，包括瘢痕瘤病、纖維囊性病和關節僵直。該術語還包括術后粘連或者皺縮，創傷、燒傷后形成的瘢痕疙瘩、增生性或者肥厚腫塊，源自炎性應答的凹陷疤痕包括痤瘡、皺紋、濕疹、蜂窩織炎形成、增生性纖維變性，和參與體內局部區域成纖維細胞增殖和代謝的其他纖維化病癥。此處這類局部區域還可以指一個部位、位置或者生物學組織。因此，本發明的方法還預期了涉及這些病理的病癥的治療，所述方法涉及沙拉丁素在預防和減少疤痕組織形成中的用途。在另一個實施方式中，利用沙拉丁素治療術后粘連，例如在腹部或者盆腔手術后。腹膜腔內的損傷或者炎癥產生纖維性滲出液。因而，漿膜表面粘著在一起。纖維性滲出液可以被成纖維細胞吸收或者侵入，形成永久的纖維性粘連。此外，沙拉丁素適于在產科-婦科程序后治療和/或預防炎癥和/或粘連。并且，沙拉丁素適于治療和/或預防胃或者腸手術造成的一般手術炎性粘連，和整形手術中炎性介導的瘢痕形成。在瘢痕疙瘩患者和皮膚具有較高水平色素的患者中，沙拉丁素可用于疤痕修補。這為整形手術拓展了一組全新的患者，所述患者先前由于顧忌疤痕是禁忌的。利用沙拉丁素預防炎癥還可以預防血管發生以及預防受影響區域殘留的"潛伏"癌組織的可能剌激。在心-血管程序中，沙拉丁素作為涂層用于裝置例如心瓣膜，例如，豬心瓣膜。此外，沙拉丁素可以用在合成或者機械心瓣膜上，通過包被支架或者藥劑-洗脫支架直接應用。沙拉丁素還可以用于留置導管和端口以預防血栓形成。在本發明的另一個方面，除了治療和/或預防血小板介導的炎癥外，沙拉丁素還可以用于治療和/或預防白細胞介導的炎癥。不限于一種作用機理，通過結合暴露的膠原、纖維連接蛋白原纖維或者細胞基質的其他組分，沙拉丁素可以掩蔽白細胞的(例如中性粒細胞，淋巴細胞和單核細胞)識別部位。通過阻斷白細胞遷移到發炎的組織，沙拉丁素能夠預防趨化因子來源之一，所述趨化因子進一步募集炎性細胞。此外，通過在受損部位減少細胞因子產生，沙拉丁素能夠直接阻斷白細胞遷移到受損部位和/或預防其募集。此外，不受限于作用機制，沙拉丁素還抑制成纖維細胞遷移，因此減慢纖維連接蛋白網絡的形成和減少或者預防瘢痕形成。炎性病癥在一個方面，沙拉丁素用于治療炎性病癥。不限于任何作用機理，沙拉丁素減輕急性炎癥的嚴重程度，同時允許新組織的敷設，從而允許愈合進展。炎癥可能在各種嚴重病癥的發展中起作用。炎癥是一種過程，我們的身體利用其保護自身抵抗有害物質例如細菌和病毒。它是身體抵抗感染和損傷的第一道防御，它經常伴隨著發熱、發紅、腫脹和疼痛。炎癥可以在身體的不同部位發生關節，器官，或者動脈。有時我們的免疫系統錯誤地引發炎性應答，即使沒有迫切的感染風險時。通過大量研究已經證明了趨化因子和細胞因子在炎癥反應中的作用。趨化因子的局部給藥，例如，IL-8，通過皮下注射導致急性炎癥反應，所述炎癥反應受中性粒細胞浸潤控制。更延遲的單核細胞浸潤響應B趨化因子而發生，例如MCP-1，RANTES和MIP-la。另一方面，利用中和抗體的治療對趨化因子的抑制已經顯示減弱炎性應答。中和針對IL-8的抗體抑制再灌注損傷、內毒素誘導的關節炎、內毒素引發的皮下炎癥和急性腎小球腎炎引起的急性炎癥反應(J.Leuk.Biol.1994;56:559-564)。抗-IL-8還顯示減輕延遲型過敏性反應(J.Immunol.1995;155:2141-2157)。MIP-la抗體減輕小鼠中實驗性自身免疫腦脊髓炎(EAE)的嚴重性。此夕卜，小鼠中MIP-la基因的缺失減輕post-Coxsackie-誘導的心肌炎的嚴重性，但也降低了這類小鼠對流感感染的抵抗力(J.Leuk.Biol.1996;59:61-67)，提示MIP-la可能促進抗病毒宿主防御。如表2所示，在多種炎性病癥中，分別利用免疫組織化學或者酶聯免疫測定技術，在局部組織或者體液中已經檢測到趨化因子。CNS中MIP-lQ!和MCP-1的產生與大鼠(JImmunol1993;150:2525-2533)和小鼠EAE模型(JNeuroimmunol1995;60:143-150;JImmunol.1995;155:5003-5010;FASEBJ1993;7:592-600)中急性臨床疾病癥狀的發展有關。此外，已經顯示與患有其他神經學疾病的對照患者相比，MS患者腦脊液中MIP-la表達升高，升高的水平與增加的CSF白細胞計數相關聯(J.Neurol.Sci.1995;129:223-227)。此外，近來研究顯示，急性病期間MIP-la調節EAE的免疫發病機理，并且MCP-1調節疾病的復發期。這種差異調節看起來源自MIP-la，所述MIP-la主要由浸潤巨噬細胞和T淋巴細胞產生，而MCP-1主要由CNS固有星形細胞產生(ILARJournal1999;40(4))。在炎性病癥細胞因子作用的另一個實例中，最近的結果表明在響應過敏原暴露中，RANTES、MIP-la和MCP-1可能在哮喘中調節細胞通行(Am.J.Respir.CritCareMed,,1997;156(5)，1377-1383)。表2:疾病狀態下檢測到的趨化因子疾病狀態部位趨化因子囊性纖維化灌洗液IL-8,ENA-78,MCP-1急性肺病組織IL-8,ENA-78,MCP-1，Rantes哮喘反應灌洗液MCP-1，MIP-la，Rantes內毒素血癥和膿毒病血漿IL-8,MIP-la，MCP-1,Rantes類風濕性關節炎滑液IL-8，ENA-78,MCP-1,MIPla骨關節炎滑液MIP-ip銀屑病(psotiaticscale)組織提取物IL-8,GROa，卩，Y，MCP-l，IP-IO，ENA-78胃腸炎癥組織IL-8,MCP-1,MlPla/p,Rantes,IP-10動脈硬化組織MCP-1,MIPla/p,Rantes,IL-8,GRO[3免疫復合物血管球性腎炎組織IL-8,MCP-1眼色素層鞏膜炎組織IL-8,IP-IO，MCP-1,Rantes,MIP-la/|3結核樣麻風組織IP-10大手術后血漿IL-8傷口愈合部位組織MCP-1和IP-10巨細胞病毒腦脊髓炎腦脊液MCP-1特應性和接觸性皮炎組織Rantes,Eotaxin，IL-8，MCP-l，IP-10在一些實施方式中，沙拉丁素用于炎性病癥的治療。例如，沙拉丁素可用于治療腦脊髓炎。腦脊髓炎是腦和脊髓炎癥的泛稱，描述了許多病癥(i)急性播散性腦脊髓炎或者感染后腦脊髓炎，一種腦和脊髓的髓鞘脫失病，可能通過疫苗接種或者病毒感染引發；(ii)播散性腦脊髓炎，多發性硬化的同義詞，一種中樞神經系統(大腦和脊髓)的病癥，特征為神經功能由于髓磷脂流失和繼發性軸索損傷而降低；(iii)馬腦脊髓炎，一種感染馬和人的潛在致命性蚊傳播病毒病；(iv)肌痛性腦脊髓炎，一種涉及中樞神經系統炎癥的綜合征，具有肌肉疼痛和疲勞的癥狀；該術語有時可以與慢性疲勞綜合征互換使用；和(v)實驗性自身免疫腦脊髓炎(EAE)，一種腦炎癥的動物模型。在一些實施方式中，沙拉丁素通過鞘內或者硬膜外注射局部給藥。此外，在其他實施方式中，沙拉丁素用于阻塞性肺病的治療。這是一種疾病狀態，表征為非完全可逆的氣流限制。該氣流限制通常是漸進的，并且與肺對有害顆粒或者氣體的異常炎性應答相關。慢性阻塞性肺病(COPD)是對一組呼吸道疾病的總括術語，特征為氣流阻塞或者限制。該總括術語包括的病癥是慢性支氣管炎，肺氣腫，和支氣管擴張癥。在另一個實施方式中，沙拉丁素用于哮喘的治療。哮喘是呼吸系統疾病，其中氣道收縮，發炎，并附著過量粘液，通常是對一種或者多種觸發的響應，例如接觸環境刺激劑(或者過敏原)、冷空氣、鍛煉或者情緒應激。同時，沙拉丁素可以用于內毒素血癥和膿毒病的治療。膿毒病是一種醫學病癥，由對感染的免疫應答產生。敗血癥是菌血癥造成的血流膿毒病，所述菌血癥是血流中存在細菌。術語敗血病還用于通指膿毒病。引發膿毒病的免疫應答是一種全身炎性應答，引起炎癥和凝結途徑的廣泛活化。內毒素血癥由血液中內毒素的存在引起，如果源自革蘭氏陰性桿狀菌，其可能引起出血、腎壞死和休克。在一個實施方式中，沙拉丁素用于類風濕性關節炎(RA)的治療。RA是一種自身免疫病癥，造成機體的免疫系統攻擊骨關節。在另一個實施方式中，沙拉丁素用于治療牛皮癬，一種皮膚病，其中快速增殖的皮膚細胞在皮膚上產生發癢的、鱗狀發炎斑塊。在另一個實施方式中，沙拉丁素用于接觸性或者特應性皮炎的治療。接觸性皮炎是一種皮膚炎癥，當皮膚接觸某些物質時發生，皮膚對所述物質敏感或者過敏。過敏性接觸性皮炎可能在初始或者長時間暴露于一種刺激物后出現。接觸性皮炎包括刺激性皮炎，光毒性皮炎，過敏性皮炎，光敏性皮炎，接觸蕁麻疹，全身接觸型皮炎等等。當皮膚對某種物質敏感時，并且當過多物質用于皮膚，刺激性皮炎可能發生。特應性皮炎，有時稱為濕疹，是一種皮炎，特應性皮膚病。此外，沙拉丁素可以用于治療痤瘡。此外，沙拉丁素可以用于動脈硬化的治療，包括動脈粥樣硬化。動脈硬化是描述中等或者大動脈的任何硬化的總稱。動脈粥樣硬化是一種具體歸因于粥樣斑塊的動脈硬化。此外，沙拉丁素可以用于腎小球腎炎的治療。腎小球腎炎是一種初發或者繼發自身免疫腎病，特征為腎小球炎癥。它可能是無癥狀的，或者表現為血尿癥和/或蛋白尿。存在許多已識別的類型，分為急性、亞急性或者慢性腎小球腎炎。病因是感染性的(細菌，病毒或者寄生病原體)、自身免疫或者副腫瘤性的。此外，沙拉丁素可以用于治療粘液囊炎，狼瘡，急性播散性腦脊髓炎(ADEM)，阿狄森氏病，抗磷脂抗體綜合征(APS)，再生障礙性貧血，自身免疫肝炎，乳糜泄，克羅恩氏病，糖尿病(l型)，古德帕斯徹氏綜合征，葛瑞夫茲氏病，Guillain-Barre綜合征(GBS)，橋本病，炎性腸病，紅斑狼瘡，重癥肌無力，眼陣攣肌陣攣綜合征(OMS)，視神經炎，ord's甲狀腺炎，骨性關節炎，眼色素層鞏膜炎，天皰瘡，多發性關節炎，原發性膽汁性肝硬變，萊特爾氏綜合征，多發性大動脈炎，顳動脈炎，溫自身免疫性溶血性貧血，韋格納肉芽腫病，普禿，查加斯氏病，慢性疲勞綜合征，家族性自主神經異常，子宮內膜異位，化膿性汗腺炎，間質性膀胱炎，神經性肌強直，結節病，硬皮病，潰瘍性結腸炎，白癜風，外陰痛，闌尾炎，動脈炎，關節炎，瞼緣炎，細支氣管炎，支氣管炎，子宮頸炎，膽管炎，膽囊炎，絨毛膜羊膜炎，結腸炎，結膜炎，膀胱炎，淚腺炎，皮肌炎，心內膜炎，子宮內膜炎，腸炎，小腸結腸炎，上髁炎，附睪炎，筋膜炎，纖維織炎，胃炎，腸胃炎，齒齦炎，肝炎，汗腺炎，回腸炎，虹膜炎，喉炎，乳腺炎，腦膜炎，脊髓炎，心肌炎，肌炎，腎炎，臍炎，卵巢炎，睪丸炎，骨炎，耳炎，胰腺炎，腮腺炎，心包炎，腹膜炎，咽炎，胸膜炎，靜脈炎，肺炎，直腸炎，前列腺炎，腎盂腎炎，鼻炎，輸卵管炎，竇炎，口腔炎，滑膜炎，腱炎，扁桃腺炎，葡萄膜炎，陰道炎，血管炎，或者外陰炎。組合療法沙拉丁素也可以在公開的方法中與其他合適的藥劑聯用。例如，沙拉丁素可以與此處描述的藥劑一起使用。若干種預防血小板粘附的抑制劑是針對vWF的單克隆抗體。已經清楚地表明，糖蛋白1Ib/IIIa抑制劑可能有利于抑制血小板粘附。這些抑制劑有的像單克隆Abc7E3已經進行臨床試驗，而其他抑制劑像KGD-和RGDF-抑制劑仍在研究中。一種用于篩選新化合物的來源是從自然界的吸血動物獲得，所述新化合物干擾膠原誘導的血小板粘附。如文獻所述，已經從自然界分離出若干種抑制劑從歐洲醫蛭分離的稱為Calin的65kDa蛋白(美國專利5，587，360WO92/07005)(Munro,R.等人，BloodCoagulationandFibrinolysis,1991,2,179-184)和從水蛭Haementeraofficinalis唾液腺分離的16kDa(LAPP)蛋白(美國專利5,324,715)。當在膠原依賴性血小板凝集的靜態分析中檢測時，兩種蛋白均被描述為聚集抑制劑。軟蜱，Omithodorosmoubata，也包含一種抗血小板的蛋白(Moubatin)，其具有預防膠原刺激的血小板凝集的活性(Waxman,L.等人；J.Biol.Chem,1993，268，5445-49)。Noeske-JungblutC.等人在WO9309137中公開了另一種來自吸血昆蟲的血小板凝集抑制劑。從蛇毒中分離出一種50kDa蛋白，從吸血蟲Triatomapallidipennis的唾液中分離出一種19kDa蛋白。發現所述蛋白包含特異抑制膠原誘導的血小板凝集的因子。名為pallidipin的19kda蛋白在血漿中抑制膠原介導的血小板聚集。Gan等人將鋸鱗蝰素(Echistatin)描述為結合纖維蛋白原受體GPIla/IIIb的抑制劑(J.Biol.Chem，1988，263，19827-32)。用于冠狀動脈應用的實例是抗血栓劑，例如，前列環素和水楊酸鹽，溶栓劑，例如，鏈激酶，尿激酶，組織纖溶酶原活化因子(TPA)和茴香酰化纖溶酶原-鏈激酶活化劑復合物(APSAC)，抗血小板劑，例如，乙酰水楊酸(ASA)和氯吡格雷，血管舒張劑，例如，硝酸鹽，鈣離子通道阻斷藥，抗增殖劑，例如，秋水仙堿和烷化劑，插入劑，生長調節因子例如白介素，轉化生長因子-P和血小板來源生長因子的同類物，針對生長因子的單克隆抗體，甾族的和非甾族的抗炎劑，和能夠調節介入后血管彈性、功能、動脈硬化、和對血管或者器官損傷的愈合響應的其他藥劑。抗生素也可以包括在本發明包含的組合或者涂層中。此外，涂層可用于影響血管壁內治療劑的局部遞送。通過在可膨脹的多聚體中摻入活性劑，活性劑將在多聚體膨脹時釋放。沙拉丁素可以與其他藥劑一起配制或者聯合給藥，所述藥劑能夠緩解炎性病癥例如腦脊髓炎、哮喘和此處描述的其他疾病的癥狀。這些藥劑包括非甾族的抗炎藥物(NSAIDs)，例如乙酰水楊酸；布洛芬；奈普生；吲哚美辛；萘丁美酮；托美汀；等等。皮質激素用于減輕炎癥并抑制免疫系統的活性。這類最常開處方的藥物是潑尼松。氯奎(Aralen)或者羥氯奎(Plaquenil)在患有狼瘡的一些個體中也非常有用。它們最常針對狼瘡的皮膚和關節癥狀開藥。硫唑嘌呤(Imuran)和環磷酰胺(Cytoxan)抑制炎癥并傾向于抑制免疫系統。其他藥劑，例如氨甲蝶呤和環孢菌素用于控制狼瘡癥狀。抗凝劑用于防止血液快速凝結。它們的范圍從以極低劑量預防血小板粘附的阿司匹林到肝素/可密定。沙拉丁素可以與液體或者固體組織屏障亦稱為潤滑劑一起配制或者聯合給藥。組織屏障的實例包括，但不限于，多糖，聚多糖，生物膜(seprafilm)，interceed和透明質酸。可以與沙拉丁素聯合給藥的藥物包括通過吸入有效遞送的任何合適藥物，例如，止痛劑，如可待因，二氫嗎啡，麥角胺，芬太尼或者嗎啡；心絞痛制劑，例如地爾硫卓；抗過敏劑，如色甘酸鹽，酮替芬或者奈多羅米；抗感染劑，如頭孢菌素，青霉素，鏈霉素，磺胺，四環素或者戊烷脒；抗組胺劑，例如美沙吡林；抗炎劑，例如倍氯米松，氟尼縮松，布地奈德，替潑尼旦，曲安奈德或者氟替卡松；止咳劑，例如那可汀；支氣管擴張劑，例如麻黃素，腎上腺素，非諾特羅，福莫特羅，異丙腎上腺素，間羥異丙腎上腺素，苯腎上腺素，苯丙醇胺，吡布特羅，瑞普特羅，利米特羅，沙丁胺醇，沙美特羅，特布他林，新異丙腎上腺素，妥洛特羅，奧西那林或者(-)-4-氨基-3，5-二氯--[[[6-[2-(2-吡啶基)乙氧基]己基]-氨基]甲基]苯甲醇;利尿藥，例如阿米洛利；抗膽堿劑例如異丙托銨，阿托品或者氧托溴銨；激素，例如可的松，氫化可的松或者潑尼松；黃嘌呤例如氨茶堿，膽茶堿，賴氨酸茶堿或者茶堿；以及治療蛋白和肽，例如胰島素或者胰高血糖素。以下對于本領域技術人員來說是顯而易見的，在合適情況下，藥物可以采用鹽的形式(例如作為堿金屬或者胺鹽或者作為酸加成鹽)或者作為酯(例如低級垸基酯)或者作為溶劑化物(例如水合物)，以優化藥物的活性和/或穩定性。根據接受治療的病癥，沙拉丁素可以與此處公開的藥劑或者其他合適的藥劑聯用。當用于聯合治療時，沙拉丁素可能與第二藥劑同時或者分開給藥。這種聯合給藥可以包括兩種藥劑以相同劑型同時給藥、不同劑型同時給藥和分開給藥。也就是說，沙拉丁素和任意上述藥劑可以在相同劑型中一起配制并同時給藥。或者，沙拉丁素和任意上述藥劑可以同時給藥，其中兩種藥劑存在于分開的制劑中。在另一種替代方式中，沙拉丁素可以在任意上述藥劑之后即刻給藥，或者反之亦然。在分開給藥方式中，沙拉丁素和任意上述藥劑可以間隔幾分鐘，或者間隔幾小時，或者間隔幾天給藥。制劑和包衣此處描述的沙拉丁素化合物通常以治療組合物的形式給藥。本發明的沙拉丁素化合物可以摻入適合給人類施用的治療組合物中。因此本發明提供治療組合物，其包含作為活性成分的一種或者多種沙拉丁素化合物或者此處描述的修飾形式、或者治療上可接受的鹽和/或其配位絡合物，以及一種或者多種治療上可接受的賦形劑、載體(包括惰性固體稀釋劑和填料)、稀釋劑(包括無菌水溶液和不同的有機溶劑)、滲透增強劑、增溶劑和佐劑。這類組合物利用本領域公知的方法制備。本發明的沙拉丁素多肽可以與任意無毒的有機或者無機酸形成治療上可接受的鹽。無機酸是，例如，鹽酸，氫溴酸，硫酸或者磷酸和酸金屬鹽例如正磷酸一氫鈉和硫酸氫鉀。有機酸的實例是單、二和三羧酸，例如乙酸，乙醇酸，乳酸，丙酮酸，丙二酸，琥珀酸，戊二酸，富馬酸，蘋果酸，酒石酸，檸檬酸，抗壞血酸，馬來酸，羥基馬來酸，苯甲酸，羥基苯甲酸，苯乙酸，肉桂酸，水楊酸和磺酸例如甲烷磺酸。羧基末端氨基酸部分的鹽包括與任意合適的無機或者有機堿形成的無毒羧酸鹽。這些鹽包括，例如，堿金屬例如鈉和鉀，堿土金屬例如鈣和鎂，IIIA族的輕金屬包括鋁，和有機伯、仲和叔胺例如三垸基胺，包括三乙胺，普魯卡因，二芐基胺，l-乙烯胺，N，N'-二芐乙烯-二胺，二氫松香胺和N-垸基吡啶。本發明的沙拉丁素多肽可以被共價修飾。這些共價修飾有益于，例如在此處描述的治療組合物內或者體內給藥后穩定本發明的沙拉丁素多肽。一種類型的共價修飾包括將本發明的肽連接到各種非蛋白多聚體之一上，例如，聚乙二醇(PEG)，聚丙二醇，或者聚氧亞垸基，利用本領域己知的方法。其他修飾包括谷氨酰胺酰和天冬酰胺酰殘基分別脫酰胺成相應的谷氨酰和天冬氨酰殘基，脯氨酸和賴氨酸的羥化，絲氨酰或者蘇氨酰殘基羥基的磷酸化，賴氨酸、精氨酸和組氨酸側鏈a-氨基的甲基化(T.E.Creighton,Proteins:StructureandMolecularProperties,W.H.Freeman&Co.，SanFrancisco,pp.79-86(1983))，N端胺的乙酰化，和任意C端羧基的酰胺化。另一類型的修飾包括肽表面面積的人工親水化，通過將酪氨酸殘基轉化為氨基酪氨酸或者通過在賴氨酸殘基中添加羧基。其他修飾包括形成沙拉丁素肽-寡胺復合物。本發明肽的另一類型的共價修飾包括添加糖基化部位。進行本文所述修飾的方法是本領域公知的。將本發明的治療組合物配制為適合其預定的給藥途徑。給藥途徑的實例包括，但不限于，口服，含服，靜脈內，腸胃外，吸入，直腸，皮內，皮下，經粘膜，經皮，肺，關節內，氣管內，肌內，胸骨內，鼻或者局部給藥。局部給藥可能還涉及經皮給藥的用途，例如透皮貼片或者離子電滲療法裝置。本發明還提供本發明沙拉丁素肽通過局部遞送裝置/導管或者通過支架和支架涂層和血管移植物和移植物包被技術的用途。根據待給藥的化合物、待治療的患者和疾病狀況，選擇給藥途徑。化合物可以通過不同途徑給藥，這取決于疾病的嚴重性或者類型或者治療介入，例如緊急情況可能需要靜脈內給藥，急性的但不危急生命的情況下可能口服治療，而手術過程后的治療可以通過支架或者基于導管的裝置給藥。利用一種或者多種生理上可接受的載體，治療組合物可以采用常規方式配制，所述載體包括賦形劑和輔劑，其促進活性化合物制備成可以治療使用的制劑。合適的制劑取決于所選的給藥途徑和標準治療規范。此處使用的術語"治療上可接受的載體"是指一種惰性、無毒的固體或者液體填充劑、稀釋劑或者包囊物質，與活性化合物或者患者沒有不利的反應。合適的液體載體是本領域公知的，例如無菌水，鹽水，水性右旋糖，糖溶液，乙醇，多元醇和油，包括石油、動物油、植物油、或者合成來源的油，例如，花生油，豆油和礦物油。本發明的沙拉丁素肽可以與其他藥劑復合，所述藥劑作為它們治療配制的一部分。治療組合物可以采用以下形式，例如，利用治療上可接受的賦形劑通過常規方法制備的片劑或者膠囊，所述賦形劑例如結合劑(例如，阿拉伯膠，甲基纖維素，羧甲基纖維素鈉，聚乙烯吡咯烷酮(聚維酮)，羥丙基甲基纖維素，蔗糖，淀粉，和乙基纖維素)；填充劑(例如，玉米淀粉，明膠，乳糖，阿拉伯膠，蔗糖，微晶纖維素，高嶺土，甘露醇，磷酸二鈣，碳酸鈣，氯化鈉，或者藻酸)；潤滑劑(例如硬脂酸鎂，硬脂酸，硅酮液，滑石，蠟，油，和膠態氧化硅)；和崩解劑(例如微結晶纖維素，玉米淀粉，淀粉羥基乙酸鈉和藻酸。如果是水溶性的，這類配制的復合物然后可以在合適的緩沖液中配制，例如，磷酸鹽緩沖鹽水或者其他生理上可相容的溶液。或者，如果所獲復合物在水溶劑中溶解性差，則它可以與非離子表面活性劑例如TWEENTM或者聚乙二醇一起配制。因此，該化合物和它們生理上可接受的溶劑化物可以配制用于給藥。用于腸胃外、皮內或者皮下給藥的溶液或者懸浮液可以包括下列組分無菌稀釋劑例如注射用水，鹽水溶液，固定油，聚乙二醇，甘油，丙二醇或者其他合成溶劑；抗菌劑例如苯甲醇或者對羥基苯甲酸甲酯；抗氧化劑例如抗壞血酸或者亞硫酸氫鈉；螯合劑例如乙二胺四乙酸；緩沖液例如乙酸鹽、檸檬酸鹽或者磷酸鹽和用于張力調整的藥劑例如氯化鈉或者右旋糖。利用酸或者堿，例如鹽酸或者氫氧化鈉，可以調節pH。腸胃外制劑可以裝入安瓿、一次性注射器或者由玻璃或者塑料制成的多劑量小瓶。適于注射用途的治療組合物包括無菌水溶液(水溶性情況下)或者分散劑和用于無菌注射溶液或者分散劑的臨時制備的無菌粉劑。對于靜脈內給藥，合適的載體包括生理鹽水、抑菌水、Crem叩horEL.TM.(BASF,Parsippany，NJ.)或者磷酸鹽緩沖液(PBS)。組合物優選的是無菌的，并且應該流動到產生易于注射性的程度。該組合物在制備和儲存條件下應該是穩定的，并且保持抗微生物例如細菌和真菌的污染作用。載體可以是溶劑或者分散介質，包含，例如，水，乙醇，多元醇(例如，甘油，丙二醇，和液態聚乙二醇，等等)，和其合適的混合物。例如，通過使用包衣例如卵磷脂，在分散劑的情況下保持所需的粒度和通過使用表面活性劑，可以保持適當的流動性。微生物作用的預防可以利用各種抗細菌和抗真菌劑實現，例如，對羥苯甲酸，氯代丁醇，苯酚，抗壞血酸，硫柳汞，等等。很多情況下，優選在組合物中包括等滲劑，例如，糖，多元醇例如甘露醇，山梨糖醇，或者氯化鈉。通過在組合物中包括延緩吸收的藥劑，例如，單硬脂酸鋁和明膠，可以實現注射組合物的吸收延長。根據需要，將治療有效或者有益量的活性化合物(例如，沙拉丁素化合物)與上面所列成分中的一種或者組合摻入合適的溶劑，繼之以過濾滅菌，可以制備無菌注射溶液。通常，通過將活性化合物摻入無菌介質來制備分散劑，所述介質包含基本的分散媒介和來自所需的上面列舉的其他成分。就用于無菌注射溶液制備的無菌粉劑來說，優選的制備方法是真空干燥和冷凍干燥，這產生一種活性成分外加任意其他所需成分的粉劑，所述其他所需成分來自其預先無菌過濾的溶液。本發明還提供沙拉丁素和衍生物通過例如局部遞送裝置/導管或者通過支架和支架涂層和血管移植物和移植物涂層技術的用途。本發明還提供施用組合物中沙拉丁素的方法，所述組合物在局部區域隨時間洗脫規定量的沙拉丁素。特別的，本發明的一個實施方式涉及基于導管的裝置局部遞送沙拉丁素的用途。沙拉丁素還可以利用導管與或者不與其他治療劑從多聚基質進入身體組織。在本方法中使用的聚合材料的基本要求是適于專門應用的生物相容性和藥劑釋放性質。局部控制的沙拉丁素釋放可以只通過滲透、只通過離子電滲、只通過電穿孔或者組合的離子電滲來實現，并且電穿孔可以用于在血管腔內有效釋放和摻入沙拉丁素。優選導管能夠進行設計好的程序，在選擇的血管空間中保持高濃度的治療劑，這樣的話結果產生一種改進的只涂布沙拉丁素或者還有其它治療劑的血管。本發明特別適合在介入性心臟病學程序期間或者之后沙拉丁素的局部遞送，所述介入心臟病學程序例如血管成形術和支架植入術和動脈內膜切除術。在一個優選的方面，本發明是包被了沙拉丁素的植入物。所述植入物可以部分或者完全被沙拉丁素包被。通常，植入物是一種醫療裝置。植入物還可以包括生物學植入物，例如器官，組織，或者細胞移植物。沙拉丁素還可以用于手術部位。本發明的一個實施方式是，通過用包括聚合物的組合物至少部分包被支架或者基于導管的裝置，提供具有本發明沙拉丁素肽的支架或者基于導管的裝置。本發明的聚合物是促進沙拉丁素肽連接到支架或者基于導管的裝置和/或促進沙拉丁素的控制釋放的任何多聚體。聚合物可能是，例如，可吸收或者不可吸收的成膜聚合物。聚合物可以是生物穩定的或者生物可吸收的，取決于需要的釋放速率或者需要的多聚體穩定性程度。可以使用的合適生物可吸收多聚體包括，但不限于，選自下列的多聚體脂族聚酯，聚(氨基酸)，共聚(醚-酯)，聚亞垸基草酸酯，聚酰胺，聚(亞氨碳酸酯)，聚酸酐，聚原酸酯，聚氧雜酯(polyoxaesters)，聚氨基酯，聚乳酸(PLA)，聚環氧乙垸(PEO)，聚己內酯(PCL)，聚羥丁酸戊酸鹽，包含胺基的聚氧雜酯，聚(酸酐)，聚磷腈，硅樹脂，水凝膠，生物分子和其混合物。用于本發明目的的其他聚合生物分子，優選其不是沙拉丁素的靶標，包括天然存在的物質，其可以在人體內酶解或者在人體中水解不穩定，例如明膠，糖胺多糖和可吸收的生物相容性多糖例如殼聚糖，淀粉，脂肪酸(和其酯)，葡萄糖(glucoso)-聚糖和透明質酸。具有相對較低慢性組織響應的合適的生物穩定多聚體，例如聚氨酯，硅樹脂，聚(甲基)丙烯酸酯，聚酯，聚環氧烷(聚環氧乙烷)，聚乙烯醇，聚乙二醇和聚乙烯基吡咯烷酮，以及，水凝膠例如由交聯的聚乙烯吡咯垸酮和聚酯形成的水凝膠，也可以被使用。還可以使用其他多聚體，如果它們能夠在支架或者基于導管的裝置上溶解、固化或者聚合。這些包括聚烯烴，聚異丁烯和乙烯-OC烯烴共聚物；丙烯酸類聚合物(包括甲基丙烯酸酯)和共聚物，乙烯基卣化物多聚體和共聚物，例如聚氯乙烯；聚乙烯醚，例如聚乙烯甲醚；聚乙二烯鹵化物例如聚偏二氟乙烯和聚偏二氯乙烯；聚丙烯腈，聚乙烯酮；聚乙烯芳香族例如聚苯乙烯；聚乙烯酯例如聚乙酸乙烯酯；乙烯單體彼此之間和烯烴的共聚物，例如乙烯-丙烯酸甲酯共聚物，丙烯腈-苯乙烯共聚物，ABS樹脂和乙烯-乙酸乙烯共聚物；聚酰胺例如尼龍66和聚己內酰胺；醇酸樹脂樹脂；聚碳酸酯；聚甲醛；聚酰亞胺；聚醚；環氧樹脂，聚氨酯；人造纖維；嫘縈三乙酸酯(rayontriacetate)，纖維素，乙酸纖維素，乙酸丁酸纖維素酯；玻璃紙；硝酸纖維素酯；丙酸纖維素酯；纖維素醚(即，羧甲基纖維素和羥垸基纖維素)；和其組合。適用于本發明的其他多聚體是生物可吸收的彈性體，例如，脂族聚酯彈性體。在合適的比例下，脂族聚酯共聚物是彈性體。彈性體表現出它們傾向于與金屬支架良好粘合并且能承受明顯的變形而不裂開的優勢。合適的涂層材料的實例包括，但不限于，纖維素聚合物例如鄰苯二甲酸乙酸纖維素酯，羥基丙基纖維素，羥丙基甲基纖維素，羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯和羥丙基甲基纖維素乙酸琥珀酸酯；聚乙酸乙烯鄰苯二甲酸酯，丙烯酸聚合物和共聚物，和甲基丙烯酸樹脂即商品化供應的商品名為EUDRAGIT(RothPharma，Westerstadt，Germany)，玉米蛋白，蟲膠，和多糖。此外，涂層材料可以包含常用載體例如增塑劑，顏料，著色劑，助流劑，穩定劑，造孔劑和表面活性劑。在一個實施方式中，涂層由水凝膠組成，例如聚環氧乙烷，白蛋白，親水性聚甲基丙烯酸酯和親水性聚氨酯。抗血栓和抗再狹窄涂層是常規的生物相容性涂層，還可以作為局部藥劑遞送的藥池。涂層主要基于水凝膠，而制備各種類型水凝膠和涂層醫療裝置的方法的專利文獻的實例包括W09211896,W09811828,WO0147572,EP0887369和WO01398U。涂層內所含的治療物質的釋放模式可以進行調整，例如通過改變聚合物層的厚度或者通過選擇有助于所選的物理化學性質(例如電荷，疏水性，親水性)的特異性聚合物涂層和/或通過將涂層制成不同層。本領域普通技術人員都了解聚合物選擇的標準和釋放速率的優化。Fischell(Circulation,1996，94:1494-95)、Topol等人(Circulation,1998,98:1802-20)和McNair等人在deviceTechnology,1996，16-22中描述了其他涂層。理想的是沙拉丁素治療可以與合適的治療介入同時給藥，這可以通過將沙拉丁素摻入手術裝置的涂層實現。另一個方面還可能涉及用沙拉丁素直接包被受損的組織。此外，在本發明中也可以使用常規的沙拉丁素遞送方法，例如自由流體形式，包括與其他治療劑的組合。優選地，使用聚合物/水凝膠基質。沙拉丁素在醫療裝置或者涂層向受損組織局部施用的常規技術方案是例如將沙拉丁素摻入聚合物或者水凝膠涂層。就聚合物組合物而言，此處使用的術語"水凝膠"包括具有不同大小和容量的孔或者空隙和不同物理化學性質的合成聚合物，所述物理化學性質尤其針對凝膠基質的電荷或者親水性/疏水性，所述凝膠基質可以在涂層或者涂層的裝置的制備期間引入。各種合成彈性體和天然存在的聚合物質是本領域技術人員己知的。沙拉丁素可以在多聚物制備期間摻入基質或者在聚合物包被或者塑形成所需形狀后添加。此外，多種不同的聚合材料和制造方法很多可以用于形成本發明所用的聚合物基質。合適聚合材料或者組合的實例包括，但不限于，生物相容性和/或可生物降解的聚合物。己經對若千種烷基烷基-和氰基丙烯酸酯用于手術用途進行了研究，發現一些異丁基氰基丙烯酸酯是特別適合的。典型的水凝膠聚合物可以由單體混合物制備，所述單體混合物包括40-60重量份有一個烯烴雙鍵的羥垸基垸基丙烯酸酯的純化單酯，40-60重量份包含一個烯烴雙鍵的甲基丙酸烯單體，和0.001-5重量份的聚合引發劑。通過本體聚合、溶液聚合、懸浮聚合或者乳液聚合的常規技術，可以完成聚合。使用的聚合技術取決于所需聚合物的體積和要產生的終產物的性質。典型的水凝膠產物將被描述單酯與甲基丙酸烯單體的摩爾比例為1:1到2.3:1范圍內，優選1.5:1，其中聚合物的孔徑大于90埃。作為具有單一烯烴雙鍵的羥垸基丙烯酸酯的單酯，可接受的化合物包括，但不限于，甲基丙烯酸2-羥乙酯，甲基丙烯酸縮水甘油酯，甲基丙烯酸2-羥丙酯，甲基丙烯酸縮水甘油酯，丙烯酸2-羥乙酯，和丙烯酸2-羥丙酯。可接受的甲基丙酸單體是甲基丙烯酸，甲基丙烯酰胺5和甲基丙烯腈。聚合引發劑取決于聚合方法或者聚合物的最終預期用途。例如，當聚合物要被制備為固體物品時，可以使用自由基引發劑。優選該類型的引發劑包括雙功能的聚酯，例如2,5-二甲基-2，5-二(2乙基己氧基過氧(ethylhexoylperoxy))己烷，或者叔丁基過氧新戊酸酯(peroxypivilate)。或者，當聚合物的最終用途是作為涂層以單體混合物形式應用并在原位聚合時，引發劑可以是輻射活化的，例如UV催化劑2，2偶氮雙(2-甲基丙腈)或者偶氮雙異丁腈(AIBN)。引發劑不限于在特定聚合方法中使用或者用于特定終產物。例如，自由基引發劑可以在涂層中使用，而輻射活化的引發劑可以在固體物品的形成中使用。除單酯和甲基丙酸烯單體基本上相似的部分之外，單體混合物可以用痕量的更長鏈的垸基丙烯酸酯或者甲基丙烯酸酯共聚單體例如甲基丙烯酸環己酯、三羥甲基丙烷三甲基丙烯酸酯或者乙二醇二甲基丙烯酸酯來增強。在需要增加聚合物強度的情況下，這類附加的共聚單體增強聚合物交聯。這些共聚單體的痕量通常小于總體單體混合物的0.1重量％。可以將本發明使用的水凝膠聚合物制備為產生通過內部作用充分交聯的物體，所獲的物體不需要其他的交聯單體。可生物降解的聚合物的其他實例是聚(丙交酯)，聚乙交酯，聚酸酐，聚原酸酯，聚縮醛(polyactals)，聚二氫吡喃，聚腈基丙烯酸酯以及這些和聚乙二醇的共聚物。這些可以采用共聚聚合物水凝膠或者交聯聚合物網絡的形式，其中增強局部輸送的藥劑或者在聚合期間被摻入，或者就某些水凝膠來說隨后加入。優選的基質將根據試劑的分子特征制作以控制向外的自由擴散。可以制備延遲釋放和延長釋放組合物。通過將藥劑與可接受的離子交換樹脂復合并包被這類復合物，或者在組合物內包括一種或者多種緩釋劑以促進本發明沙拉丁素肽的緩釋，可以獲得延遲釋放/延長釋放的治療組合物。緩釋劑的實例包括，但不限于，鎂合金，聚(乙醇)酸，聚(乳酸)或者通常基于乙醇酸-和乳酸的聚合物，共聚物，聚己內酯和通常，聚羥基烷羧酸鹽，聚(羥基垸醇酸)，聚(乙二醇)，聚乙烯醇，聚(原酸酯)，聚(酸酐)，聚(碳酸酯)，聚酰胺，聚酰亞胺，聚亞胺，聚(亞氨基碳酸酯)，聚(乙烯亞胺)，聚二噁烷，聚氧化乙烯(聚環氧乙烷)，聚(磷腈)，聚砜，脂類，聚丙烯酸，聚甲基丙烯酸甲酯，聚丙烯酰胺，聚丙烯腈(聚氰基丙烯酸酯)，聚HEMA，聚氨酯，聚烯烴，聚苯乙烯，聚對苯二酸酯，聚乙烯，聚丙烯，聚醚酮，聚氯乙烯，聚氟化物，硅樹脂，聚硅酸酯(生物活性玻璃)，硅氧烷(聚二甲基硅氧烷)，羥磷灰石，丙交酯-己內酯，天然和非天然的聚氨基酸，聚b-氨基酯，白蛋白，藻酸鹽，纖維素/乙酸纖維素，幾丁質/殼聚糖，膠原，纖維蛋白/纖維蛋白原，明膠質，木質素，基于蛋白的聚合物，聚(賴氨酸)，聚(谷氨酸酯)，聚(丙二酸酯)，聚(透明質酸)，聚核酸，聚糖，聚(羥基烷羧酸酯)，聚異戊間二烯，基于淀粉的聚合物，其共聚物，其線性的、支化的、超支化的、樹枝狀、交聯的、官能化的衍生物，或者水凝膠，所述水凝膠基于活化聚乙二醇與堿性水解的動物或者植物蛋白的結合。此外，速釋組合物和延遲釋放/延長釋放組合物的組合可以配制在—起。口服液體制劑可以采用水性或者油性懸浮液、溶液、乳液、糖漿劑或者酏劑的形式，并與活性化合物一起包含濕潤劑、甜味劑、以及著色和調味劑，或者可以表現為干燥品，在使用前用水或者其他合適的介質復溶。這類液體制劑可以包含常規添加劑像懸浮劑，乳化劑，非水介質和防腐劑。在水或者其他水性介質中制備的用于口服給藥的液體制劑可以包含不同的懸浮劑，例如甲基纖維素，藻酸鹽，黃芪膠，果膠，藻膠鈉，角叉菜膠，阿拉伯膠，聚乙烯吡咯烷酮，和聚乙烯醇。可以按照常規方法制備用于患者吸入的各種液體和粉末制劑。口服組合物通常包括惰性稀釋劑或者可食載體。合適的口服組合物可以被例如封裝入明膠膠囊中或者壓縮成片劑。用于口服給藥的片劑、錠劑和膠囊包含常規賦形劑例如結合劑，填充劑，稀釋劑，成片劑，潤滑劑，崩解劑，和濕潤劑。片劑可以根據本領域公知的方法進行包衣。還可以使用液體載體將口服組合物制備用作漱口藥，其中液體載體中的化合物口服應用并含漱和吐出或者吞咽。治療相容性的結合劑，和/或可以包括佐劑材料作為組合物的一部分。片劑、丸劑、膠囊、錠劑等等可能包含任何下列成分，或者具有相似性質的化合物結合劑例如微晶纖維素，西黃蓍膠或者明膠；賦形劑例如淀粉或者乳糖，崩解劑例如藻酸，Primogel，或者玉米淀粉；潤滑劑例如硬脂酸鎂或者Sterotes;助流劑例如膠體二氧化硅；甜味劑例如蔗糖或者糖精；或者調味劑例如薄荷，水楊酸甲酯，或者柑桔調味料。對于通過吸入給藥，化合物以氣溶膠噴射的形式從壓力容器或者分配器或者噴霧器遞送，所述壓力容器或分配器包含合適的推進劑，例如，氣體例如二氧化碳，或噴霧劑。局部施用，可以采用水性或者油性懸浮液、，溶液、乳液、膠凍或者乳化膏劑的形式。局部組合物可以采用治療劑的形式，但它不是必須的。例如，它可以是化妝品。在本發明的一個實施方式中，提供局部給藥的局部組合物。局部給藥的局部組合物包括局部載體。局部載體是通常適于局部藥劑給藥的載體，并包括本領域己知的任意這類材料。選擇局部載體使其提供期望形式的組合物，例如，作為液體，洗液，面霜，糊劑，凝膠，粉劑，或者膏劑，并且可以包含天然存在或者合成來源的材料。所選載體對活性劑或者局部制劑的其他組分不會產生不利的影響是非常重要的。此處使用的合適局部載體的實例包括水，醇和其他無毒的有機溶劑，甘油，礦物油，有機硅，礦脂，羊毛脂，脂肪酸，植物油，對羥苯甲酸酯，蠟，等等。本發明的沙拉丁素多肽適合作為治療組合物和組合中的治療有效化合物。本發明的治療制劑任選可以包括其他活性成分像阿司匹林、抗凝血劑例如水蛭素或者肝素或者血栓溶解劑例如纖溶酶原活化劑或者鏈激酶或者包括此處所述的任意其他藥劑。本發明的制劑可以作為單位劑量給藥，所述單位劑量包含對于所選給藥途徑典型的常用無毒治療上可接受的載體、稀釋劑、佐劑和介質。本發明的單位劑量可以包含每日所需量的本發明沙拉丁素肽，或者其等分數之一，以構成所需量。用于指定患者(哺乳動物，包括人)的最佳治療上可接受的劑量和劑量率取決于各種因素，例如使用的特定活性物質的活性，年齡，體重，健康狀況，性別，飲食，給藥時間和途徑，清除率，治療目的，例如，治療或者預防和待治療的血栓性疾病的性質。本發明的劑量無須保持不變，但可以根據本領域技術人員公知的參數進行調整。此外，本發明的劑量可以是亞-或者超-治療。在一個實施方式中，本發明的肽的治療有效量在大約0.001和100mg/kg體重之間，優選在0.01和10mg/kg體重之間。在一個實施方式中，本發明肽的劑量是0.33mg/kg體重。在一個實施方式中，對于血管應用，制劑包括大約0.1mg/mL到大約30mg/mL沙拉丁素。在另一個實施方式中，用于血管應用的制劑包括大約0.1mg/mL到大約1mg/mL沙拉丁素，大約1mg/mL到大約5mg/mL沙拉丁素，大約5mg/mL到大約10mg/mL沙拉丁素，大約10mg/mL到大約15mg/mL沙拉丁素，大約15mg/mL到20mg/mL沙拉丁素，大約20mg/mL到大約25mg/mL沙拉丁素，或者大約25mg/mL到大約30mg/mL沙拉丁素。在一個優選的實施方式中，用于血管應用的制劑包括大約lmg/mL到大約5mg/mL沙拉丁素。對于非血管應用，制劑包括大約0.01mg/mL到大約20mg/mL沙拉丁素。在一個實施方式中，非血管應用的制劑包括大約0.01mg/mL到大約0.1mg/mL沙拉丁素，大約0.1mg/mL到大約1mg/mL沙拉丁素，大約1mg/mL到大約5mg/mL沙拉丁素，大約5mg/mL到大約10mg/mL沙拉丁素，大約10mg/mL到大約15mg/mL沙拉丁素，或者大約15mg/mL到20mg/mL沙拉丁素。在一個優選的實施方式中，用于非血管應用的制劑包括大約0.1mg/mL到大約1mg/mL沙拉丁素。通常，使用的制劑量取決于應用部位所需要的劑量。醫生可以使用過量的制劑，然后通過海綿揩拭或者灌洗去除多余的量，以到達所需濃度。在另一個實施方式中，0.1mg/mL到20mg/mL沙拉丁素以足以覆蓋預定區域的體積被用于血管用途。在一個實施方式中，lmg/mL到5mg/mL,5mg/mL至(J10mg/mL，或者10mg/mL到20mg/mL沙拉丁素以足以覆蓋預定區域的量被用于血管用途。在一個優選的實施方式中，1mg/mL至lj5mg/mL沙拉丁素以足以覆蓋預定區域的量被用于血管用途。在另一個實施方式中，0.01mg/mL到10mg/mL沙拉丁素以足以覆蓋預定區域的量被用于非血管用途。在一個實施方式中，0.01mg/mL到5mg/mL，或者5mg/mL到10mg/mL沙拉丁素以足以覆蓋預定區域的量被用于血管用途。在一個優選的實施方式中，Q.Olmg/mL到5mg/mL沙拉丁素以足以覆蓋預定區域的量被用于非血管用途。本領域普通技術人員應該理解，在一些實施方式中，可能需要使用更高的局部濃度以達到有效濃度，因為一些治療劑可能損失，例如，因為沖洗或者海綿揩拭去除。此外當與其他治療劑例如凝血酶抑制劑或者抗凝劑聯用時，沙拉丁素的治療有效量可能不同。本發明的目的還在于提供用于接觸體液的可移植或者體外的醫療裝置，以便使裝置表面基本抗血栓，所述裝置包被如上文和權利要求所定義的固定多肽。在醫療裝置上固定本發明的多肽，這使得表面是生物相容和抗血栓。這類裝置有時具有通常誘導血小板凝集的表面特性，這對于它們預期用于與血液或者其他體液接觸的可移植的體外裝置是不利的。通常由塑料材料和合成纖維制備的這類裝置的實例是假體，人工器官，眼晶體，縫線，人工血管段，導管，透析器，管道和載血液的血管。優選的制劑是單純的磷酸鹽緩沖鹽水，而矯形外科應用利用粘性更高的制劑，例如含有水凝膠的制劑。合適的制劑可以是大約0.01mg/mL到大約0.1mg/mL沙拉丁素，大約0.1mg/mL到大約1mg/mL沙拉丁素，大約1mg/mL到大約5mg/mL沙拉丁素，大約5mg/mL到大約10mg/mL沙拉丁素，大約10mg/mL到大約15mg/mL沙拉丁素，大約15mg/mL到20mg/mL沙拉丁素，大約20mg/mL到大約25mg/mL沙拉丁素，大約25mg/mL到大約30mg/mL沙拉丁素，大約30mg/mL到大約40mg/mL沙拉丁素，或者大約40mg/mL到大約50mg/mL沙拉丁素，溶于PBS或者水凝膠或者其他合適的介質。該材料可以冷凍、冷藏或者作為凍干粉劑保存。實施例實施例1:犬屈肌腱修復模型中沙拉丁素的用途對于手外科醫生來說，指內肌腱損傷仍是一個臨床挑戰。犬模型常用于研究肌腱損傷及其治療的生物學效果。本研究的的目的是評價體內犬模型中屈肌腱修復后沙拉丁素對結果的影響。在犬屈肌腱修復模型中肌腱損傷后，沙拉丁素以凝膠制劑或者作為單純的液體用于損傷部位。在對照組，使用凝膠或者液體對照(無沙拉丁素)。在犬肌腱撕裂和修復后評價屈曲功(WOF)和肌腱強度，所述犬在術后10天處死。預期在用沙拉丁素治療的犬中，WOF和肌腱強度更高，并且疤痕縮小。實施例2:沙拉丁素促進傷口愈合和瘢痕形成小鼠模型在小鼠中測定沙拉丁素對傷口愈合的影響。傷口由精細手術剪產生，由4mm全層的皮膚切口構成。無菌膠繃帶用于覆蓋每個傷口。在傷口形成后，在切口上使用沙拉丁素。在損傷后第O、1、2、3和5天，使用磁共振顯微成像(MRI)評定每個傷口部位新血管的形成。在損傷后第l-2天，沙拉丁素治療將縮少圍繞傷口的大量新生血管形成，加快傷口愈合，并減少疤痕形成。對傷口的目測也提供了沙拉丁素治療有益的證據。在后來的時間點，與對照動物比較，用沙拉丁素治療的動物幾乎沒有顯示疤痕形成的證據。對小鼠的傷口破壞強度，或者跨傷口的組織拉伸強度進行評價。在右腰部產生全層皮膚切口，然后在傷口上局部施用沙拉丁素。在切口后40小時和第7天測量破壞傷口所需的力。相對于對照，用沙拉丁素治療的動物在愈合傷口的強度方面將顯示顯著的增強。Yucatan豬模型利用Yucatan豬，還可檢測沙拉丁素在傷口愈合和瘢痕形成中的作用。豬皮被認為在生理上類似于人的皮膚。每只動物可以誘導4組手術傷口。每組由3個損傷組成(i)部分層損傷(lcm2)，(2)全層損傷(1cm2)，和(3)切割傷口(4cm)。這些手術傷口模擬急性淺表傷口(例如，磨損，全層褥瘡，潰瘍)和術后切口或者撕裂傷。無菌膠繃帶用于覆蓋每個傷口。在傷口形成后，在切口上使用沙拉丁素。在損傷后第0、1、2、3和5天，使用磁共振顯微成像(MRI)評定每個傷口部位新血管的形成。在損傷后第1-2天，沙拉丁素治療將減少圍繞傷口的大量新生血管形成，加快傷口愈合，并使疤痕形成最小化。對傷口的目測也提供了沙拉丁素治療有益的證據。在后來的時間點與對照動物比較，接受沙拉丁素治療的動物幾乎沒有顯示疤痕形成的證據。對豬的傷口破壞強度，或者跨傷口的組織拉伸強度進行評價。在右腰部產生全層皮膚切口，然后在傷口上局部施用沙拉丁素。在切口后40小時和第7天測量破壞傷口所需的力。相對于對照，接受沙拉丁素治療的動物在愈合傷口的強度方面將顯示顯著的增強。實施例3:在體外沙拉丁素抑制MCP-1誘導的人單核細胞遷移單核細胞細胞分離從外周血單核細胞(PBMC)分離單核細胞。通過Ficoll-Paque梯度離心從白膜層(SanDiegoBloodBank)分離PBMC。通過在100mm陪替氏培養皿中孵育1X107細胞/mL的PBMC2個小時并收集粘附細胞，分離單核細胞。單核細胞趨化性利用盲孔Boyden小室技術定量單核細胞遷移。在添加0.5%BSA的RPMI1640中懸浮單核細胞，濃度為1X106細胞/mL。包含不同濃度化合物(沙拉丁素)的200微升(200iiL)孔置于Boyden小室的頂部孔。小室底部孔載有100ng/mLMCP-1。在頂部孔和底部孔之間放置8-um孔聚碳酸酯濾紙。在分析中，使用前聚碳酸酯濾紙分別用10ug/mLIV型膠原、lmg/mLIV型膠原、0.01mg/mL纖維連接蛋白或者1mg/mL纖維連接蛋白在4t:包被過夜。濾紙還用10ug/mL或者1mg/mLBSA包被。小室在37°C,5%C02中孵育2小時。孵育后，去除頂部孔中的細胞，然后濾紙用甲醇固定并用吉姆薩染色劑染色。通過計數遷移通過濾紙的細胞總數來定量細胞運動。結果已知沙拉丁素以高親合力結合膠原。還不清楚它是否還結合其他細胞外基質蛋白(ECM)或者普通蛋白例如牛血清白蛋白(BSA)。在本研究中這個問題被探究。首先，趨化性濾紙用10ug/mL膠原或者BSA包被，檢測單核細胞向趨化因子的遷移。圖1A中的結果顯示，100ng/mLMCP-l顯著誘導人單核細胞的趨化性(P<0.0026，與無MCP-1下細胞的遷移相比)。100，10，1和O.lyg/mL沙拉丁素的添加抑制MCP-1-誘導的單核細胞通過膠原包被濾紙的遷移。該抑制的ICso是172pM(圖1B)。沙拉丁素還抑制MCP-1誘導的單核細胞通過包被0.01mg/mLBSA的趨化性，IC50為1.1nM(圖1C)。似乎沙拉丁素的抑制效果可能歸因于使用蛋白的量。例如，10Ug/mL濃度的膠原或者BSA可能過低，這可能促進沙拉丁素的抑制效果，尤其在BSA包被濾紙上。因此，我們用1mg/mL膠原或者BSA包被濾紙，并且我們還添加另一種細胞外基質，纖維連接蛋白。與圖l結果類似，MCP-1(100ng/mL)對于人單核細胞遷移通過包被膠原、BSA或者纖維連接蛋白的濾紙來說是一種有效的趨化因子。在3種底物上沙拉丁素抑制MCP-1的這種活性。對于膠原、BSA和纖維連接蛋白上細胞遷移的這種抑制的IC5o分別為62.3pM，37nM和19.4nM(圖2A，B和C)。這些結果表明沙拉丁素是免疫細胞流入的抑制劑，并且沙拉丁素可以影響免疫細胞對組織損傷的響應。實施例4:在體外沙拉丁素抑制MIP-la誘導的人T淋巴細胞遷移T淋巴細胞分離從外周血單核細胞(PBMC)分離T淋巴細胞群。通過Ficoll-Paque梯度離心從白膜層(SanDiegoBloodBank)分離PBMC。通過在100mm陪替氏培養皿中孵育1Xl(^細胞/mL的PBMC2個小時并收集粘附細胞，分離單核細胞。利用尼龍毛柱從PBMC分離T淋巴細胞。簡單來說，PBMC在尼龍毛柱上37。C孵育1小時，利用RPMI完全生長培養基從尼龍毛柱洗掉非粘附細胞。這些細胞包含大約950/。T淋巴細胞。T淋巴細胞趨化性通過盲孔Boyden小室技術定量T淋巴細胞的遷移。在添加0.5%BSA的RPMI1640中懸浮T淋巴細胞，濃度為1X10^細胞/mL。包含不同濃度化合物(沙拉丁素)的200微升(200iiL)孔置于Boyden小室的頂部孔。小室底部孔載有100ng/mLMIP-lo;。在頂部孔和底部孔之間放置8-um孔聚碳酸酯濾紙。在分析中，使用前聚碳酸酯濾紙分別用10Ug/mLIV型膠原、1mg/mLIV型膠原、0.01mg/mL纖維連接蛋白或者1mg/mL纖維連接蛋白在4'C包被過夜。濾紙還用lOyg/mL或者lmg/mLBSA包被。小室在37°C，5%C02中孵育2小時。孵育后，去除頂部孔中的細胞，然后濾紙用甲醇固定并用吉姆薩染色劑染色。通過計數遷移通過濾紙的細胞總數來定量細胞的運動。結果當使用100ng/mL時，MIP-1a顯著地(PO.02)誘導位于10Ug/mL膠原包被濾紙上的T淋巴細胞的趨化性(圖3A)。當隨細胞放入濾紙的上層孔中時，若干種濃度的沙拉丁素抑制MIP-1a誘導的T淋巴細胞趨化性。10iig/mL膠原包被濾紙上抑制趨化性的ICso是6.863nM(圖3B)。但是，當使用10ug/mLBSA作為底物時，沒有觀察到明顯的抑制(圖3C)。我們還研究了沙拉丁素對置于濾紙上的T淋巴細胞的趨化性的作用，所述濾紙包被了1mg/mL膠原、BSA或者纖維連接蛋白。沙拉丁素抑制這些細胞MIP-1a誘導的趨化性。對于細胞遷移通過1mg/mL膠原、BSA或者纖維連接蛋白包被濾紙的作用的ICso分別是7.9pM、184.9nM和3.69nM(圖4A，B禾卩C)。實施例5:測定沙拉丁素對MCP-1誘導遷移的影響的體內研究利用小鼠氣囊模型測定沙拉丁素對MCP-1誘導遷移和細胞因子產生的體內影響。材料小鼠TNF-oc的ELISA試劑盒(Biosource，目錄#_CMC3013)，小鼠TGF-/3的ELISA試劑盒(Biosource，目錄#—CHC1683)，小鼠IL-1/3的ELISA試劑盒(Biosource，目錄#—CMC0813)，小鼠IL-8的ELISA試劑盒(Biosource,目錄#—CMC1063)，人堿性FGF的DuosetELISA試劑盒(R&D，目錄#—DY233)，重組人MCP-l(PeprotechInc.,目錄#—300-04)，PBS(Mediatech，目錄弁_21-031-CV)方法第0天對雌性BALB/c小鼠皮下注射6mL無菌空氣產生背部氣囊，3天后第二次注射3mL無菌空氣。第6天，溶于IOOyl無菌PBS的lygMCP-l被注入氣囊，或者在分開的注射中，使用100u1PBS作為對照。2分鐘后，溶于900uLPBS的lOOixg沙拉丁素被注入氣囊，900ulPBS作為對照。兩小時后，用lmLPBS沖洗氣囊，測量回收體積，并通過血細胞計數器測定回收細胞的數目。根據廠商說明書，利用滲出液的上清評定TNF-a,IL-Ie，IL-8，TGF-e和堿性FGF的分泌。結果為了證明體外觀察到的活性是否能轉換到體內，研究沙拉丁素對體內細胞遷移的影響。氣囊模型是用于細胞遷移研究的大家公認的技術。為了這項研究，氣囊中注入lwgMCP-1，2小時后通過抽吸收集細胞。圖5證明在小鼠氣囊中給藥lngMCP-l導致細胞顯著地被募集到這些氣囊中(PO.0037,與接受介質治療的動物相比)。但是，在MCP-1注射后2分鐘施用沙拉丁素(O.lmg)顯著地抑制MCP-1募集細胞進入氣囊(P〈0.0028)。隨后，我們研究了沙拉丁素對小鼠氣囊中積聚的細胞因子水平的影響。測量促炎性和炎性細胞因子和趨化因子IL-8，TGF-e，TNF-a，IL-1P和堿性FGF的水平。在MCP-1給藥到氣囊中之后，IL-8,TNF-a和IL-1P的水平增加，而在對照和MCP-1治療動物之間沒有觀察到TGF-e或者堿性FGF水平的差異(圖6)。結果還顯示0.1mg沙拉丁素的給藥將IL-8、TNF-a和IL-lP的水平降低到刺激前水平，但是，這種減少在統計上沒有顯著意義(圖6)。盡管能夠證明沙拉丁素給藥對堿性FGF沒有效果，但是沙拉丁素給藥伴隨著TGF-e水平顯著降低到低于未刺激的介質組的基礎水平(P<0.001，當在賦形劑治療和沙拉丁素治療動物之間比較時)。但是，受刺激的比較組的差異使我們不能確定這種降低是歸因于MCP-1給藥、沙拉丁素給藥還是這兩個方面。實施例6;確定炎性病癥中沙拉丁素影響的研究沙拉丁素對多發性硬化癥的影響為了檢驗沙拉丁素對腦脊髓炎的影響，尤其是多發性硬化，一種或者多種此處描述的化合物可以施用于實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)的小鼠模型，一種CD4+T-輔助細胞(Thl)介導的、中樞神經系統(CNS)的炎性髓鞘脫失病，用作多發性硬化的模型。材料和方法動物雌性SJL小鼠(H-2s)購自HarlanSpragueDawley(Indianapolis,Indiana)。在實驗開始時小鼠通常是6到7周齡。抗原和抗體-PLP139-151肽(HSLGKWLGHPDKF)購自PeptidesInternational(Louisville,Kentucky)。利用質譜法確認氨基酸組成，并利用高效液相色譜測定純度(>98°/。)。用于MIP-1a,MCP-1,MIP-2,TNF-a，IL-1g，IL-8,TGF-e,FGF-2,RANTES,IL-1a,IL-2,IL-6,MIP-1P和ENA-78的ELISA檢測的抗體是商品化供應的。供體淋巴細胞的初免，細胞培養，和EAE的轉移利用25ugPLP139-151對正常SJL/J小鼠進行皮下免疫，引發供體淋巴細胞進行初免，所述PLP139-151溶于包含4mg/mL結核分枝桿菌(M少co6a"en'wmMez-cw/o^)(Difco，Detroit,Michigan)的CFA中。7天后，收集引流淋巴結細胞，在完全Dulbecco's極限必需培養基(Biowhitaker,Bethesda，Maryland)中體外培養，所述培養基包含5X10陽5M2-ME(GIBCO)，2mML-谷氨酰胺(GIBCO),100U/mL青霉素(GIBCO),100ug/mL鏈霉素(GIBCO)，O.lmM非必需氨基酸(GIBCO)，和5%胎牛血清(Hy-Clone)，細胞濃度為6Xl()6細胞/mL，在50yg/mLPLP139-151存在條件下培養72小時。收集并洗滌細胞，3X106個活T淋巴細胞團轉移到正常SJL/J受體的腹膜內。細胞轉移后，評價小鼠的EAE發展。細胞因子ELISAMIP-la,MCP-1，MIP-2,TNF-a，IL隱lP,IL-8，TGF-P,FGF-2,RANTES，IL-1a，IL-2，IL-6，MIP-1P和ENA-78以及其他趨化因子的評定，可以利用ELISA從組織樣品和培養物上清中定量。脊髓樣品在1mL磷酸鹽緩沖鹽水中勻漿，通過離心(400Xg)澄清10分鐘。ELISA板用稀釋在PBS中的2ng/mL捕獲抗體包被，并在4'C包被過夜。樣品在封閉緩沖液中稀釋，室溫下在ELISA板中孵育2小時。堿性磷酸酶偶聯的二抗用作檢測試劑。通過構建已知值的標準曲線并計算樣品中趨化因子的皮克/毫升，確定細胞因子濃度。臨床評價通過轉移3X1()S個體外-刺激的PLP139-151-特異性T淋巴細胞團，誘導繼承性R-EAE，所述T淋巴細胞團來自PLP139-151肽-初免的小鼠。每日觀察單個動物，根據它們的臨床嚴重程度分級如下0=無異常；1=尾不舉；2=尾不舉和部分后肢無力(步態蹣跚)；3=完全后肢麻痹；4=死亡。在大多數實驗中，最高嚴重程度的范圍在1和3級之間。小鼠很少死于EAE;但是，當死亡沒有其他原因可以造成時，使用評分4。在穩定或者改善一段時間后，當小鼠發展出其他神經病學缺陷(增加至少一個臨床等級)時，被評為復發。利用上述方法可以確定沙拉丁素治療是否阻斷或者改善了小鼠的EAE，或者改變樣品中產生的細胞因子濃度。這可以證明沙拉丁素在這類疾病治療中的有效性。沙拉丁素對哮喘的影響為檢驗沙拉丁素對哮喘的影響，一種或者多種此處描述的化合物施用于哮喘的鼠模型，例如OVA-免疫的BALB/c小鼠，或者具有ci-GalCe誘導的氣道高應答性(AHR)的小鼠。材料和方法動物BALB/cByJ小鼠可以從JacksonLaboratory,BarHarbor,ME獲得。單克隆抗體單克隆抗體可以通過硫酸銨沉淀和離子交換層析從腹水純化。可以使用下列雜交瘤R46A^抗-IFN-YmAb)XMG1.2(抗-IFN-Y抗體)；BVD4-1D11，BVD6-24G2(抗-IL-4mAb)。這些雜交瘤可以從ATCC(美國典型微生物菌種保藏中心，AmericanTypeCultureCollection,Rockville，MD)獲得。抗-38C13獨特型mAb4G10(大鼠IgG2a)可以用作同種型對照。免疫BALB/c小鼠在足墊用吸附到200yg明礬(Al[OH]3)的OVA(100ug/小鼠)初免。7、8和9天后，小鼠用溶于50u1NaCl0.9%的50ugOVA鼻內攻擊。在最后一次用OVA鼻內攻擊的一天后，在全身體積描記器中測量清醒小鼠吸入增加濃度的乙酰甲膽堿后的氣道高反應性。如所述進行利用a-GalCer的免疫。為了在鼻內抗原給藥期間促進肺吸氣，可以通過腹膜內(i.p.)注射溶于生理鹽水的0.25mL氯胺酮(0.44mg/mL)/甲苯噻嗪(6.3mg/mL)對小鼠進行輕度麻醉。通常，隨后在肺中能夠檢測到75%的鼻內給藥的抗原(J.Exp.Med.1997;185:1671-9)。細胞因子ELISA。可以按照前面所述進行ELISA。可以使用如下抗體對，按照捕獲/生物素化的檢測所列IL-4，BVD4-1D11/BVD6-24G2;IFN-Y，R4-6A2/XMG1.2。重組細胞因子可以用作標準品，從IL-4的500到39pg/m和IFN-Y的20-2,156ng/mL進行l:2稀釋產生曲線。抗OVA抗體同種型的測量可以在處死時從小鼠取血，利用改進的抗原-特異性ELISA測量OVA-特異抗體。為了OVA特異IgG的測量，板用g/mLOVA包被過夜。在洗滌和封閉后，在板中可以添加系列稀釋的血清。過夜孵育后，可以利用HRPO-偶聯的山羊抗-IgG亞類特異性抗體(SouthernBiotechnologyAssociates,Birmingham,ALA)進行反應。在再次洗滌后，添加OPD底物，板進行反應，在492nm測定OD。抗OVAIgGlmAb6C1和抗OVAIgG2amAb3All可以用作各IgG亞類定量的標準品。利用大鼠抗小鼠IgEmAbEM95(5.0Pg/ml)包被板，通過ELISA可以進行OVA特異IgE的測定。在施加樣品和孵育過夜后，洗滌板并添加生物素化的OVA(10Ug/mL)。兩小時后，洗滌板并可以添加HRPO-偶聯的鏈霉親和素(SouthernBiotechnologyAssociates)。板可以與OPD底物反應，在492nm測定OD。可以定量來自明磯中OVA超免小鼠血清中的IgE，并用作OVA特異IgEELISA的標準品。氣道應答的測量通過來自有清醒小鼠的乙酰甲膽堿誘導的氣流阻塞，可以評定氣道應答，所述小鼠置于全身體積描記器(modelPLY3211，BuxcoElectronicsInc.,Troy,NY)中。利用下列公式可以計算肺部氣流阻塞為Penh:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage55</formula>其中Penh-提高的間歇(無量綱)，Te-呼氣時間，RT-弛豫時間，PEF-峰值呼氣流(mL/s),和PIF-峰值吸氣流(mL/s)(Am.J.Respir.Crit.CareMed.,1997;156:766-75)。提高的間歇(Penh),分鐘容量，潮氣量，和呼吸頻率可以從小室壓力獲得，利用連接到前置放大器模塊(MAX2270型)的傳感器(TRD5100型)測量，并用XA軟件系統(SFT1810型)進行分析。通過將小鼠暴露于NaC10.9。/。2分鐘，可以獲得對乙酰甲膽堿應答的測量。BAL液體的收集和肺部組織學動物可以腹腔注射致死劑量的苯巴比妥(450mg/kg)。氣管插管，然后用0.8mLPBS灌洗肺3次，收集液體。利用血細胞計數器計數灌洗液體中的細胞，在用HanselStain染色的載玻片制品上(LideLaboratories,Florissant,MO)可以確定BAL細胞差異。通過光學顯微鏡檢，根據常規形態學標準，可以至少區分200個細胞。在一些動物中，沒有進行BAL但是肺部被去除，用PBS洗滌，10%福爾馬林固定并用蘇木精和曙紅染色。利用上述方法可以確定沙拉丁素治療是否阻斷a-GdCer誘導的AHR，減少OVA/明礬誘導的AHR，或者改變a-GalCe誘導AHR后血清中產生的細胞因子濃度。這可以證明沙拉丁素在這類疾病治療中的有效性。實施例7:沙拉丁素的制備沙拉丁素制備的實例描述于美國專利6，774，107和6，881，722。在本文所述的研究中，疏水性相互作用層析(HIC)被描述為減少表3所述培養物上清中存在的蛋白水解活性的替代步驟。在該程序中，在接種培養步驟，酵母樣品在搖瓶中培養，觀察培養物中的污染物。然后按美國專利6,774,107和6,881,722所述進行主發酵步驟。按照表3細胞分離步驟取出上清和分離細胞。為進一步從上清去除微粒和細胞碎片，按表3過濾步驟所述過濾上清。過濾步驟后，上清直接上樣到HIC(不需要更換緩沖液)。HIC去除上清中存在的蛋白酶，使不再需要如美國專利6,774,107和6,881,722所述添加熱休克蛋白。然后將流過HIC的流體用DEAE上樣緩沖液1:1稀釋，再上樣到DEAE柱中。洗滌DEAE柱，然后用線性梯度洗脫，如美國專利6，774，107和6,881,722所述。，按照表3的滲濾和過濾步驟所述進行具有至少90%純度的捕獲級分的重組和過濾。然后將沙拉丁素在合適的介質中稀釋到所需濃度。表2:規劃的沙拉丁素GMP過程的概述<table>tableseeoriginaldocumentpage56</column></row><table>盡管此處己經展示和描述了本發明的優選實施方式，本領域技術人員都清楚提供這類實施方式只是為了舉例。在不脫離本發明的情況下本領域技術人員將會產生眾多的變化、改變和取代。應了解對此處描述的本發明實施方式的不同替換可用于實現本發明。下列權利要求旨在限定了本發明的范圍和這些權利要求范圍內的方法和結構以及因此涵蓋的它們的等同物。權利要求1.一種治療白細胞介導的炎性病癥的方法，包括將有效量的沙拉丁素施用于需要其的患者。2.如權利要求1所述的方法，其中炎性病癥選自急性肺病，哮喘，內毒素血癥，膿毒病，類風濕性關節炎，牛皮癬，動脈粥樣硬化，腎小球腎炎，腦脊髓炎，接觸性皮炎，特應性皮炎，滑囊炎，狼瘡，急性播散性腦脊髓炎(ADEM)，阿狄森氏病，抗磷脂抗體綜合征(APS)，再生障礙性貧血，自身免疫肝炎，乳糜泄，克羅恩氏病，糖尿病(l型)，古德帕斯徹氏綜合征，葛瑞夫茲氏病，Guillain-Barre綜合征(GBS)，橋本病，紅斑狼瘡，重癥肌無力，眼陣攣肌陣攣綜合征(OMS)，視神經炎，ord's甲狀腺炎，天皰瘡，多發性關節炎，原發性膽汁性肝硬化，萊特爾氏綜合征，多發性大動脈炎，顳動脈炎，溫自身免疫性溶血性貧血，韋格納肉芽腫病，普禿，査加斯氏病，慢性疲勞綜合征，家族性自主神經異常，子宮內膜異位，化膿性汗腺炎，間質性膀胱炎，神經性肌強直，結節病，硬皮病，潰瘍性結腸炎，白癜風，外陰痛，闌尾炎，動脈炎，關節炎，瞼緣炎，細支氣管炎，支氣管炎，子宮頸炎，膽管炎，膽囊炎，絨毛膜羊膜炎，結腸炎，結膜炎，膀胱炎，淚腺炎，皮肌炎，心內膜炎，子宮內膜炎，腸炎，小腸結腸炎，上髁炎，附睪炎，筋膜炎，纖維織炎，胃炎，腸胃炎，齒齦炎，肝炎，汗腺炎，回腸炎，虹膜炎，喉炎，乳腺炎，腦膜炎，脊髓炎，心肌炎，肌炎，腎炎，臍炎，卵巢炎，睪丸炎，骨炎，耳炎，胰腺炎，腮腺炎，心包炎，腹膜炎，咽炎，胸膜炎，靜脈炎，肺炎，直腸炎，前列腺炎，腎盂腎炎，鼻炎，輸卵管炎，竇炎，口腔炎，滑膜炎，腱炎，扁桃腺炎，葡萄膜炎，陰道炎，血管炎和外陰炎。3.如權利要求1所述的方法，其中所述治療包括抑制血小板粘附，血白細胞粘附或者血白細胞遷移。4.如權利要求3所述的方法，其中所述血白細胞是淋巴細胞，巨噬細胞，單核細胞或者多形核白細胞。5.—種抑制血白細胞遷移和/或血白細胞粘附至細胞外基質蛋白的方法，包括將有效量的沙拉丁素施用于需要其的患者。6.如權利要求5所述的方法，其中所述有效量的沙拉丁素作為局部藥劑或者植入物上的涂層給藥。7.如權利要求6所述的方法，其中所述植入物是天然或者人工植入物。8.如權利要求7所述的方法，其中所述人工植入物是醫療裝置。9.如權利要求8所述的方法，其中所述醫療裝置是整形手術植入物，心血管植入物或者矯形外科植入物。10.如權利要求8所述的方法，其中所述醫療裝置是心臟瓣膜，支架，移植物，導管，椎間盤，桿，螺釘，板，軟骨，或者粘附屏障。11.如權利要求7所述的方法，其中所述天然植入物是器官，組織或者細胞植入物。12.如權利要求7所述的方法，其中所述天然植入物是血管移植物。13.如權利要求5所述的方法，其中所述細胞外基質蛋白是膠原，白蛋白，彈性蛋白或者纖維連接蛋白。14.一種'治療手術誘導的并發癥的方法，包括將有效量的沙拉丁素施用于需要其的患者。15.如權利要求14所述的方法，其中所述手術誘導的并發癥是手術誘導的炎癥或者手術誘導的粘附。16.如權利要求14所述的方法，其中所述有效量的沙拉丁素作為局部藥劑或者植入物上的涂層給藥。17.如權利要求16所述的方法，其中所述植入物是天然或者人工植入物。18.如權利要求17所述的方法，其中所述人工植入物是醫療裝置。19.如權利要求18所述的方法，其中所述醫療裝置是整形手術植入物，心血管植入物或者矯形外科植入物。20.如權利要求18所述的方法，其中所述醫療裝置是心臟瓣膜，支架，移植物，導管，椎間盤，桿，螺釘，板，軟骨，或者粘附屏障。21.如權利要求17所述的方法，其中所述天然植入物是器官，組織或者細胞植入物。22.如權利要求17所述的方法，其中所述天然植入物是血管移植物。23.如權利要求15所述的方法，其中所述手術誘導的粘附包括血小板或者血白細胞的粘附。24.如權利要求23所述的方法，其中所述血白細胞是淋巴細胞，巨噬細胞，單核細胞或者多形核白細胞。25.如權利要求14所述的方法，其中所述手術是矯形外科手術，整形手術，移植手術或者心血管手術。26.如權利要求14所述的方法，其中所述手術是肌腱重建手術或者心臟手術。27.—種治療和/或預防疤痕和/或瘢痕疙瘩的方法，包括將有效量的沙拉丁素施用于需要其的患者。28.如權利要求27所述的方法，其中所述疤痕和/或瘢痕疙瘩是手術誘導的，燒傷誘導的或者炎性皮膚病造成的。29.如權利要求27所述的方法，其中所述疤痕和/或瘢痕疙瘩歸因于整形手術，重建和/或移植手術。30.—種治療凝膠制劑，包括大約0.01mg/mL到大約5.0mg/mL沙拉丁素和至少一種治療上可接受的賦形劑。31.如權利要求30所述的制劑，還包括至少一種染料。32.—種包括植入物和涂層的裝置，所述涂層包括沙拉丁素。33.如權利要求32所述的裝置，其中所述植入物是心血管植入物。全文摘要本發明提供沙拉丁素組合物及其使用方法。本發明的一個方面是一種預防或者減緩粘附、瘢痕疙瘩和疤痕發展的方法。粘附、瘢痕疙瘩和疤痕可能由手術造成，例如整形手術或者矯形手術，或者可以是原有疤痕。本發明的另一個方面是一種治療屈肌腱損傷的方法。文檔編號C08L89/00GK101278012SQ200680036243公開日2008年10月1日申請日期2006年9月28日優先權日2005年9月28日發明者保羅·F·格利登申請人:拜奧瓦斯庫勒公司