專利名稱：一種制備紫菜多糖的方法
技術領域：
本發明涉及一種從海藻中制備有經濟價值的物質的方法，特別是涉及一種制備紫菜多糖的方法。
背景技術：
紫菜多糖有多種生物學功能，目前，對其生物學活性方面正在展開大量的研究。發現紫菜多糖具有凝集素樣作用，參與吞噬細胞的活化和生物防御作用；紫菜多糖的不同組份具有不同的作用，多糖PY3是一種免疫促進劑，而多糖PY2和PY4是一種免疫抑制劑，可用于臨床免疫亢進的治療；有免疫調節的作用。可降低高脂血癥大鼠血清總膽固醇和甘油三酯的含量，并有預防高膽固醇引起的小鼠高膽固醇血癥形成的作用，具有一定的降血脂功能。并且，具有抑制血栓形成的作用，不僅能延長纖維蛋白血栓形成時間及特異性血栓形成時間，還能使血栓長度、干質量和濕質量均出現明顯降低，紫菜多糖可能對防治某些心血管病有重要意義。紫菜多糖不但具有以上作用，而且發現它具有抗腫瘤、抗病毒等方面的作用。曾有人發現紫菜多糖PY3與血癌細胞K562體外共同培養72小時，PY3濃度達160mg/L時，可明顯抑制K562細胞的增殖；當培養96小時，PY3濃度為80mg/L時，顯示出對K562細胞明顯的抑制作用。但是，對于紫菜多糖的提取制備方法至今還沒有人進行深入研究，只是采取了傳統的多糖制備方法，沒有針對性，使得進行系統化的藥理篩選實驗時紫菜多糖樣品采集困難，造成不必要的人力、物力的浪費，為以后進一步研究、開發應用造成了一定的困難，利用傳統提取多糖的方法用于紫菜多糖的提取中主要存在以下缺點，對去脂肪方法在其溫度和時間上沒有一定的標準，不好把握，在有機溶劑脫蛋白方法次數較多，有機溶劑用量大，且多糖的損失量較大，在制備多糖的方法直接用乙醇沉淀多糖，不進行脫色處理，使得多糖色素含量較高，影響其作為藥物和保健品資源的使用，由于上述的原因，使得紫菜多糖的應用范圍的進一步擴大受到阻礙。
發明內容
本發明的目的是要提供一種制備紫菜多糖的方法，它不但能有效地提高紫菜多糖的得率，降低色素含量，而且，還進一步擴大了紫菜多糖應用的范圍。
為了達到上述的目的本發明的解決方案是本發明的一種制備紫菜多糖的方法，一、先取干凈的紫菜，用打碎機打碎到3-5mm的顆粒，然后，化3小時，用索氏抽提法通過乙醇洄流去脂肪，乙醇可反復使用；二、按1∶50料液比加入水，使PH值為8，進行超聲波破碎30min，接著先在溫度為攝氏100度的恒溫水浴鍋內煮一次，取抽提液后再按1∶50料液比加入水繼續再煮一次，取抽提液，后合并兩次抽提液，在以轉速為5000rpm的離心機上離心10min，去雜質，得抽提液，接著經旋轉蒸發儀濃縮，濃縮到原體積的1/2；三、將濃縮液按5∶1加入氯仿與正丁醇的混合液中，氯仿與正丁醇之比例為3∶1，并在搖床以350rpm力度劇烈震蕩30min，接著以轉速為5000rpm的離心機上離心，10min后去沉淀，反復進行六次后取得上清液；四、在取得上清液后按固液比加入3.5％活性碳，調整pH至7.5，在溫度為攝氏70度的水浴鍋中脫色1小時，提取液再離心，離心機轉速為5000rpm，30min后去活性碳，得上清液；五、取上清液由旋轉蒸發儀濃縮到原體積的1/3，后加入4倍乙醇，以溫度為攝氏4度，保存12小時，后離心分出多糖沉淀。
六、最后，將多糖沉淀用丙酮洗滌一次，后冷凍真空干燥，即得紫菜多糖。
由于本發明采用了一種創新的制備紫菜多糖的方法，因此，體現以下主要優點1、有機溶劑用量少，再去脂肪乙醇可以反復使用，脫蛋白次數少，大大減少了有機溶劑的用量；2、紫菜多糖的提取率高，達到了60％左右，與傳統的17％相比，有了很大程度的提高，且最大程度保持了多糖分子活性；3、紫菜多糖的色素含量低，擴大了紫菜多糖的應用范圍。
具體實施例方式下面將詳細說明據依本發明提出的一種從紫菜中制備紫菜多糖的方法的細節。
本發明為一種制備紫菜多糖的方法，其實現步驟如下一、取10克來自江蘇呂泗海區紫菜，洗凈，在溫度為攝氏70度環境下烘干，用打碎機打成3-5mm的顆粒狀，再以索氏抽提法，進行3小時，通過乙醇洄流去脂肪；二、加入500ml蒸餾水，超聲波破碎30min，接著在恒溫水浴鍋內以溫度為攝氏100度的水中煮，后抽提液，再加入500ml蒸餾水煮，最后合并兩次抽提液，接著離心10min，離心機轉速為5000rpm，實現去雜質，所得抽提液經旋轉蒸發儀濃縮，濃縮為原體積的1/2；三、濃縮液按5∶1加入氯仿與正丁醇的混合液中，氯仿與正丁醇之比例為3∶1，使用搖床，以350rpm力度劇烈震蕩30min，再用離心機離心10min去沉淀，離心機轉速為5000rpm，如此反復六次，取得上清液；四、取得上清液按固液比加入3.5％活性碳，調整pH為7.5，在溫度為70度的水浴鍋中脫色1小時，提取液離心30min去活性碳，得上清液，離心機轉速為5000rpm；五、上清液再通過旋轉蒸發儀濃縮，濃縮到原體積的1/3，后加入4倍乙醇并以溫度為攝氏4度保存12小時，再以離心機轉速為5000rpm離心，分出多糖沉淀；六、所得多糖沉淀用丙酮洗滌一次，冷凍真空干燥，得紫菜多糖。
權利要求
1.一種制備紫菜多糖的方法，其特征在于(1)、先取干凈的紫菜，用打碎機打碎到3-5mm的顆粒，然后，用索氏抽提法，通過乙醇洄流去脂肪，進行3小時，乙醇可反復使用；(2)、按1∶50料液比加入水，在PH值為8的水中，使用超聲波破碎30min，后在溫度為攝氏100度的恒溫水浴鍋內，煮一次，提取抽提液，后再以1∶50料液比加入水，并在同樣的條件下再煮一次，然后再提取抽提液，合并兩次抽提液，以轉速為5000rpm的離心機離心10min，去雜質，以得抽提液，接著經旋轉蒸發儀濃縮為原體積的1/2；(3)、將濃縮液按5∶1加入氯仿與正丁醇的混合液中，氯仿與正丁醇之比例為3∶1，并在搖床以350rpm力度劇烈震蕩30min，再以轉速為5000rpm的離心機離心，10min后去沉淀，反復進行六次，取得上清液；(4)、在取得上清液中按固液比加入3.5％活性碳，調節pH為7.5，接著在溫度為攝氏70度的水浴鍋中脫色1小時，提取液再以5000rpm的的離心機離心，30min后去活性碳，得上清液；(5)、將上清液經旋轉蒸發儀再濃縮到原體積的1/3，加入4倍乙醇，在溫度為攝氏4度時，保存12小時，后離心分出多糖沉淀；(6)、最后，將多糖沉淀用丙酮洗滌一次，冷凍真空干燥，即得紫菜多糖。
2.根據權利要求1所述的一種制備紫菜多糖的方法，其特征在于在提取所得紫菜多糖中，去蛋白的方法比較溫和，最大程度保持了紫菜多糖和活性，且紫菜多糖的最后得率為60％左右，色素去除率達到86％左右。
全文摘要
一種制備紫菜多糖的方法。現有的紫菜多糖的提取存在提取率低，色素含量高等問題。本發明的一種制備紫菜多糖的方法的主要特征是先取干凈紫菜打碎，通過乙醇洄流去脂肪，接著在水料比為1∶50，pH值為8的水中，超聲波破碎30min，再在溫度為攝氏100度的恒溫水浴鍋內分別煮二次，合并二次提取液，接著離心去雜質，后濃縮為原體積的二分之一，濃縮液按5∶1加入有機溶液中，接著搖床以350rpm力度劇烈震蕩30min，再以轉速為5000rpm的離心機離心，10min后去沉淀，反復進行六次，取得上清液，將上清液經旋轉蒸發儀再濃縮到原體積的1/3，加入4倍乙醇，在溫度為攝氏4度時，保存12小時，后離心分出多糖沉淀，后用丙酮洗滌一次，冷凍真空干燥，即得紫菜多糖。
文檔編號C08B37/00GK1872882SQ200510026279
公開日2006年12月6日 申請日期2005年5月30日 優先權日2005年5月30日
發明者何培民, 劉鳳 申請人:上海水產大學