專利名稱：欖香烯的羥丙基－β－環糊精包合物及其制劑和制備方法
技術領域：
本發明涉及欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物及制劑和制備方法，該包和物可用來注射、口服、外用，具有抗病毒、抗癌的作用。
背景技術：
欖香烯是自姜科植物蓬莪術Curcuma phaeocaulis Valeton.或廣西莪術Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.或溫郁金CurcumaWenyujin Y.H.chen et C.Ling或香茅草提取的植物有效成分，英文名為Elemene，化學名為1-甲基-1-乙烯基-2，4-二異丙烯基環己烷，分子式為C15H24，欖香烯中含有多種異構體，主要有α-欖香烯、β-欖香烯、γ-欖香烯、δ-欖香烯，以及含有姜黃烯、丁香烯，欖香烯具有抗癌、抗病毒等作用，以欖香烯制成的乳注射劑已廣泛應用于臨床上，臨床應用中取得了較好的療效。欖香烯的制備方法已有較多文獻報道，一般從上述植物中提取精制，或從莪術油中直接分離，如中國專利CN1060038和中國專利CN1200266中都有描述。
欖香烯為脂溶性成分，難溶于水，臨床上一般制成乳劑或加有助溶劑的注射液應用，如已經上市的按中國專利CN1060038方法制備的欖香烯乳注射劑，該制劑穩定性較差，易分層，顆粒大，給臨床應用帶來潛在的危險。也有一些文獻報道采用一些表面活性劑助溶，如吐溫等。在中國專利CN1076613A中描述采用聚氧乙烯甘油三蓖麻油酸脂35助溶制備成注射液，采用這些表面活性劑助溶制備注射液通常具有刺激性大、不穩定、溶血、易過敏等弱點，限制了欖香烯的應用。曾有文獻報道(王麗君，中草藥2001.4.314.316；陳星燦，中草藥1990-8 11-18)，采用β-環糊精，對含有欖香烯的莪術油進行包合，取得了成功，包合后的莪術油包合物可溶于水，穩定性提高，并提高了生物利用度，但β-環糊精有溶血反應，不易做注射劑。另外在中國專利申請02109680.5也曾描述莪術油可被羥丙基-β-環糊精包合，形成的包合物極易溶于水。這些文獻和專利均未說明是否包合欖香烯，檢索國內外其他文獻及專利，未發現有關于欖香烯采用羥丙基-β-環糊精對欖香烯進行包合的專利及文獻。
發明內容
本發明的目的是提供一種欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物及凍干粉針制劑和制備方法以及其他制劑制備方法。該方法利用環糊精包合作用，將欖香烯包合，形成穩定的包合物，使其易溶于水。
本發明中的欖香烯可以是符合中國西藥質量標準WS-048(X-040)-96的β-欖香烯、γ-欖香烯、δ-欖香烯混合物，可以是α-欖香烯、β-欖香烯、γ-欖香烯、δ-欖香烯及姜黃烯、丁香烯等的混合物，也可以是欖香烯單體化合物，或α-欖香烯，或β-欖香烯，或γ-欖香烯，或δ-欖香烯，或姜黃烯，或丁香烯。
羥丙基-β-環糊精(HPCD)為β-環糊精的衍生物，具有筒狀分子結構，分子量為1540，極易溶于水，包合量大，無溶血反應，毒性低，可應用于注射劑。由于欖香烯為具有較小分子量的環狀分子，分析羥丙基-β-環糊精容易將其包合。經試驗，欖香烯與羥丙基-β-環糊精(HPCD)按一定的重量比包合后，溶解度可達到10％以上，由不溶于水達到易溶于水，穩定性也有較大提高。經冷凍干燥后，由液體狀態變成固體狀態。
本發明的目的是通過如下技術方案實現的它是由下述原料按重量比組成欖香烯∶羥丙基-β-環糊精＝1∶1-100本發明的制備方法為選擇符合中國西藥質量標準WS-048(X-040)-96的欖香烯或欖香烯單體，將按上述重量比量的欖香烯溶于適量的有機溶媒中，一般為甲醇、乙醇、丙酮等，加入量(欖香烯或欖香烯單體的重量有機溶媒的體積)約為1∶1-5或更多范圍內；將按上述重量比的羥丙基-β-環糊精(HPCD)溶于蒸餾水中，水加入量按HPCD計算(HPCD的重量∶水的體積)，在1∶5-50范圍內；將含HPCD的水溶液強烈攪拌，緩慢滴加欖香烯溶液，全部加完后，繼續攪拌0.5-24小時，在潔凈度百級車間中，使用0.45μm或0.22μm微孔濾膜過濾，濾液冷凍干燥，得疏松白色粉末，即為欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物。得到的包合物也可以采用乙醚洗滌，以除掉未包合的欖香烯。
本發明的包合物也可以采用其它方法制備，如超聲波法，即將上述含欖香烯溶液加到HPCD溶液后，置于超聲波發生器中，如超聲波清洗機，振蕩機等中，進行超聲振蕩代替上述攪拌，也可得到包合物。或采用研磨法，即將欖香烯溶液加入HPCD中，加入適量水研均，低溫干燥得包合物。其干燥方法，也可以采用噴霧干燥方法制備。
本發明中的包合物中欖香烯與HPCD重量比為1∶1-100，其中以1∶2-5比例溶解度較大，包合率較高，含量最高，羥丙基-β-環糊精用量最少。而兩者重量比為1∶1時，即有包合物形成，其中以1∶5包合率、含量最為適宜，包合率可達95％以上，含量為19％。
按本發明得到的包合物特征為含有欖香烯和羥丙基-β-環糊精化學成分，且易溶于水。其薄層色譜圖譜，包括欖香烯，欖香烯包合物醇提取物，欖香烯包和物醚提取物樣品，經展開后斑點顯示，欖香烯與欖香烯包和物醇提取物斑點(化學成分)完全一致，而欖香烯包和物醚提取物未顯示上述斑點成分，說明欖香烯與HPCD形成了包合物，且包合物中含有欖香烯所有成分；其紅外光譜(IR譜)欖香烯包合物IR譜不同于羥丙基-β-環糊精及欖香烯和欖香烯與HPCD混和物IR譜；其DSC差熱掃描圖譜，欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物與欖香烯的HPCD混和物和欖香烯及HPCD明顯不同；相溶解度法證實，隨著HPCD濃度提高，欖香烯溶解度增大。
本發明的包合物，在百級凈化車間，經過超濾除熱源和無菌過濾(0.22μm)，經過冷凍干燥后，可制成凍干粉針。本發明的包合物，可加入適量的輔料，制備成栓劑，軟膏劑和滴眼劑，片劑，膠囊等。本發明的包合物中羥丙基-β-環糊精可以采用β-環糊精替代，制成口服的片劑、膠囊、栓劑等。
本發明優點在于提供了一種易溶于水的欖香烯的羥丙基-β-環糊精包和物，同時可提高其穩定性，提高其生物利用度，提供了可注射用的欖香烯及凍干粉針制備方法。其制劑極易溶于水，穩定性好，沒有溶血反應，無刺激，不過敏，在臨床上使用很方便。
本發明中的包合物主要通過如下方法證明，其一采用薄層色譜法測定其包合物是否形成。其方法為取欖香烯乙醇溶液(1→1ml)，欖香烯包合物乙醇溶液(1→1ml)，欖香烯包合物石油醚溶液(1→3ml)，分別點樣1-5μl，在硅膠G-CMC板上展開，展開劑為石油醚-丙酮-乙酸乙酯(94∶5∶1)，顯色劑為5％香草醛冰醋酸-高氯酸(5∶1)溶液，結果，薄層色譜圖顯示欖香烯與欖香烯包合物乙醇溶液斑點完全一致，而欖香烯石油醚溶液無斑點，說明欖香烯HPCD形成了包合物。其二對欖香烯包合物，欖香烯與HPCD混和物和HPCD，欖香烯做了紅外光譜(IR譜)，采用溴化鉀壓片法，欖香烯采用涂膜法，用聚苯乙烯薄膜校正，進行上述IR譜比較，發現欖香烯包合物IR譜不同于欖香烯與HPCD混和物IR譜，說明形成了欖香烯HPCD的包合物。其三對上述樣品做了差熱掃描分析DSC，發現欖香烯包合物DSC譜不同于欖香烯與HPCD混和物DSC譜，判斷形成了包合物。其四，采用相溶解度法測定其包合物形成，其方法為取0.1g欖香烯，加入至不同濃度的HPCD溶液中，攪拌24小時，0.45μm濾膜過濾，石油醚洗去未包合油類，采用GC氣相色譜法，以β-欖香烯為對照品，測定其濃度，以β-欖香烯濃度對HPCD濃度做圖，得溶解度曲線，曲線顯示，隨著HPCD的濃度加大，欖香烯濃度增高，證明形成了包合物。
欖香烯中的欖香烯含量分析測定方法采用氣相色譜法，參照中國西藥質量標準WS-048(X-040)-96，以β-欖香烯為對照品(中國藥典對照品)，以外標法測定，其測定條件為聚乙醇20M(PEG20M)為固定相，涂布濃度為10％，shimalit W擔體，60-80目，柱溫135℃-140℃，理論板數按β-欖香烯峰計算不低于1000。
具體實施例方式
實施例1取欖香烯0.1g，溶于0.5ml乙醇中，取羥丙基-β-環糊精0.5g，溶于20ml注射用水中，將欖香烯乙醇溶液逐滴加入HPCD溶液中，室溫磁力攪拌3小時，使用0.45μm微孔濾膜過濾冷凍，得白色疏松粉末，經薄層色譜證實，形成了欖香烯與羥丙基-β-環糊精包合物。氣相色譜測定，包合率為95％。
實施例2將例1得到的包合物粉末，用乙醚洗滌，揮盡乙醚得白色包合物粉末。
實施例3其它同例1，將磁力攪拌法改為超聲振蕩法，室溫，振蕩20分鐘，將包合后溶液經0.45μm微孔濾膜過濾，濾液冷凍干燥，得白色疏松粉末，經薄層色譜證實，形成了包合物，經氣相色譜測定，包合率為90％。
實施例4其它同例1，將磁力攪拌法改為研磨法，研均后，乙醚洗，揮盡乙醚，低溫減壓干燥，得白色粉末，經薄層色譜證實，形成了包合物，經氣相色譜測定，包合率為62％。
實施例5將例1得到的濾液，進行噴霧干燥，得到包合物。
實施例6自例1，包合后溶液經0.45μm微孔濾膜過濾后，采用超濾法，用載留分子量5000-10000的濾膜超濾，除熱原之后，再經0.22μm濾膜過濾除菌，得到濾液在百級凈化車間無菌分裝，冷凍干燥得到注射用欖香烯凍干粉針。
實施例7將例1中磁力攪拌法改為超聲振蒎20分鐘，其它同例6。
實施例8將例6中超濾除熱原法改為活性炭法，其它同例6。
實施例9將例1中羥丙基-β-環糊精0.5g改為0.1g，其他同例1，經氣相色譜測定，包合率為70％。
實施例10將例1中羥丙基-β-環糊精0.5g改為10g，其他同例1，經氣相色譜測定，包合率為98，含量1.0％。
實施例11將例1得到的包合物，加入適量輔料，調節滲透壓，配成滴眼劑。
實施例12將例1得到的包合物，加入適量的輔料，制成速溶舌下片劑。
實施例13將例1得到的包合物，加入適量的輔料，制成膠囊、栓劑。
實施例14將例1中羥丙基-β-環糊精替換為β-環糊精，其他同例1，制成包合物，加入適量的輔料，制成片劑、膠囊、栓劑。
權利要求
1.一種欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物，它是由下述原料按重量比組成欖香烯∶羥丙基-β-環糊精＝1∶1-100)；通過將溶于有機溶媒的欖香烯加入到含羥丙基-β-環糊精的水溶液中，攪拌后，經干燥形成易溶于水的包合物；所述的欖香烯可以是符合中國西藥質量標準WS-048(X-040)-96的β-欖香烯、γ-欖香烯、δ-欖香烯混合物，可以是α-欖香烯、β-欖香烯、γ-欖香烯、δ-欖香烯及姜黃烯、丁香烯的混合物，也可以是欖香烯單體化合物，或α-欖香烯、或β-欖香烯、或γ-欖香烯、或δ-欖香烯、或姜黃烯、或丁香烯；所述的有機溶媒為乙醇，也可以是甲醇、丙酮。
2.按權利要求1所述的欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物，它是由下述原料按重量比組成欖香烯∶羥丙基-β-環糊精＝1∶2-5。
3.一種欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物的制備方法，它是由下述原料按重量比組成欖香烯∶羥丙基-β-環糊精＝1∶1-100；按上述重量比將欖香烯溶于1-5倍的有機溶媒中，按上述重量比將羥丙基-β-環糊精溶于5-50的蒸餾水中，將含羥丙基-β-環糊精的水溶液強烈攪拌，緩慢滴加欖香烯溶液，全部加完后，繼續攪拌0.5-24小時，使用微孔濾膜過濾，濾液冷凍干燥，得疏松白色粉末，即為欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物。
4.按權利要求3所述的欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物的制備方法，也可以采用超聲波法，即將上述含欖香烯溶液加到羥丙基-β-環糊精溶液后，置于超聲波發生器中，進行超聲振蕩代替上述攪拌，也可得到包合物。
5.按權利要求3所述的欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物的制備方法，還可以采用研磨法，即將欖香烯溶液加入羥丙基-β-環糊精中，加入適量水研均，低溫干燥得包合物。
6.按權利要求3所述的欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物制劑的制備方法，所述的欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物，包合后溶液經微孔濾膜過濾，除熱原之后，再經濾膜過濾除菌，得到濾液在百級凈化車間無菌分裝，冷凍干燥得到注射用欖香烯凍干粉針。
7.按權利要求1或2所述的欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物，將所述的包合物，加入輔料，調節滲透壓，配成滴眼劑。
8.按權利要求1或2所述的欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物，將所述的包合物，加入輔料，制成速溶舌下片劑。
9.按權利要求1或2所述的欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物，將所述的包合物，加入輔料，制成栓劑、膠囊。
10.按權利要求8或9所述欖香烯的羥丙基-β-環糊精包合物，羥丙基-β-環糊精可以用β-環糊精替代。
全文摘要
本發明涉及一種欖香烯的羥丙基－β－環糊精包合物及制劑和制備方法，它是由下述原料按重量比組成欖香烯∶羥丙基－β－環糊精＝1∶1－100；通過將溶于有機溶媒的欖香烯加入到含羥丙基－β－環糊精的水溶液中，經攪拌后，冷凍干燥形成易溶于水的包合物；包合后水溶液，經超濾和0.22μm微孔濾膜過濾后，冷凍干燥制成注射用凍干粉針。得到的包合物，配以其它輔料，可制成栓劑、軟膏劑、片劑膠囊劑。
文檔編號C08L5/00GK1508176SQ0214494
公開日2004年6月30日 申請日期2002年12月18日 優先權日2002年12月18日
發明者董英杰, 艾莉, 張乃先 申請人:沈陽市萬嘉生物技術研究所