專利名稱：新的2,5－吡啶二羧酸衍生物的制作方法
技術領域：
本發明涉及新的2,5-吡啶二羧酸衍生物，更具體地涉及作為抗逆轉錄病毒劑的式Ⅰ新的2,5-吡啶二羧酸衍生物及其制藥學上可接受的鹽類。該類化合物對逆轉錄病毒例如肝炎B病毒和人類免疫缺陷病毒的增殖具有抑制活性，本發明還涉及其制備方法 式Ⅰ其中R1代表羥基，1-6碳原子的直鏈或支鏈烷基，未被取代或被1-3碳原子的烷基取代的3-6碳原子環烷基，3-6碳原子環烷基取代的1-3碳原子烷基，1-6碳原子的直鏈或支鏈羥基烷基，3-6碳原子的直鏈或支鏈二羥基烷基，1-4碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，2-4碳原子的羥基烷氧基，2-6碳原子的直鏈或支鏈烷氧烷基，3-6碳原子的二烷氧烷基，2-4碳原子的二烷基氨基，乙酰氨基，乙烯基團，或具有1-3個選自氮、氧和硫雜原子的飽和或不飽和五元或六元雜環，因此，該雜環未被取代或被1-3個相同或不同取代基所取代，所述取代基選自1-3碳原子烷基，1-3碳原子烷氧基，1-3碳原子羥基烷基，苯基，氨甲酰基以及羥基；R2代表氫原子，苯基，1-4碳原子的直鏈或支鏈烷基，2-4碳原子的直鏈或支鏈羥基烷基或2-4碳原子的烷氧烷基；R3代表3-氨基-2-吡啶基 其中Q為氫原子或1-4碳原子的直鏈或支鏈烷基，或者2-羥乙基；n為0或1-4的整數；同時，上述屬于支鏈羥基烷基的R1可以代表(R)-或(S)-型立體專一性。
全世界大約有3億人患有由肝炎B病毒(這里稱為“HBV”)為主要致病源引起的肝炎，并伴隨有急性或慢性肝炎。有報道說，在一些嚴重情況下HBV涉及到肝炎向肝硬變肝細胞癌的轉化。盡管在肝病與HBV及其分子生物特性的相關性方面進行了深入的研究，并且開發出了一些肝炎B病毒疫苗和診斷試劑，但是目前仍然沒有能有效治療肝炎B的藥物問世。最近，一些研究結果表明，一些已知能夠用于AIDS或帶狀皰疹的核苷類化合物(例如拉米夫定和Famvir)可以有效地抑制HBV的增殖。然而，人們普遍知道，由于較高的治療費用以及副反應和毒性等問題，進一步發展核苷類化合物將受到限制。
在這種情況下，對非核苷類化合物作為有效肝炎B藥物的開發具有迫切要求。與此同時，一些有關喹喏酮化合物的專利申請[歐洲專利公開Nos.563732和563734]以及Iridoids化合物的專利申請[韓國未審查專利申請No.94-1886]已經報道了它們具有抗HBV的活性，但是沒有看到明顯的進展。
同時，本申請人也已提交了作為非核苷類化合物并具有抗病毒活性的新對苯二酰胺衍生物的專利申請[韓國專利申請Nos.96-72384和97-36589]。
作為非核苷類化合物的本發明新2,5-吡啶二羧酸衍生物具有獨特的化學結構，并顯示出抗HBV和抗人類免疫缺陷病毒(這里稱為“HIV”)活性。盡管HBV不同于HIV，但它們具有相同的復制過程，即從病毒RNA上進行反轉錄并消化RNA-DNA雜化中間體的RNA部分。由于本發明具式Ⅰ的新2,5-吡啶二羧酸衍生物具有抑制反轉錄的機制，因此其可被開發作為抗-HBV或抗HIV的制劑。
因此，本發明的目標是提供新2,5-吡啶二羧酸衍生物及其制藥上可接受的鹽類，它們可以非常有效地抑制各種病毒的增殖，例如HBV和HIV等，本發明的目標還包括提供上述化合物的制備方法。
本發明涉及具式Ⅰ的新2,5-吡啶二羧酸衍生物及其制藥學上可接受的鹽類式Ⅰ 其中R1代表羥基，1-6碳原子的直鏈或支鏈烷基，未被取代或被1-3碳原子的烷基取代的3-6碳原子環烷基，3-6碳原子環烷基取代的1-3碳原子烷基，1-6碳原子的直鏈或支鏈羥基烷基，3-6碳原子的直鏈或支鏈二羥基烷基，1-4碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，2-4碳原子的羥基烷氧基，2-6碳原子的直鏈或支鏈烷氧烷基，3-6碳原子的二烷氧烷基，2-4碳原子的二烷基氨基，乙酰氨基，乙烯基團，或具有1-3個選自氮、氧和硫等雜原子的飽和或不飽和五元或六元雜環，因此，該雜環未被取代或被1-3個相同或不同取代基所取代，所述取代基選自1-3碳原子烷基，1-3碳原子烷氧基團，1-3碳原子羥基烷基，苯基，氨甲酰基以及羥基；R2代表氫原子，苯基，1-4碳原子的直鏈或支鏈烷基，2-4碳原子的直鏈或支鏈羥基烷基或2-4碳原子的烷氧烷基；R3代表3-氨基-2-吡啶基 其中Q為氫原子或1-4碳原子的直鏈或支鏈烷基，或者2-羥乙基；n為0或1-4的整數；同時，上述屬于支鏈羥基烷基的R1可以代表(R)-或(S)-型立體專一性。
在下文中將更詳細地解釋本發明上述優選的本發明式Ⅰ2,5-吡啶二羧酸衍生物可用下列式Ⅰa或Ⅰb來表示式Ⅰa 其中R1,R2,Q及n的定義分別同上所述。式Ⅰb 其中R1,R2和n的定義相應地同上所述。
本發明中更優選的化合物是由Ⅰa代表的那些化合物；其中R1,R2,Q及n的定義如下其中R1代表羥基，3-5碳原子的支鏈羥基烷基，或3-5碳原子的支鏈二羥基烷基；R2代表氫原子，甲基，乙基，2-羥乙基或苯基；n為0,2或3；其中R1為2-4碳原子的直鏈或支鏈烷基，環丙基，環戊基，甲氧基，乙氧基，2-羥乙氧基，4-5碳原子的支鏈烷氧烷基，3-5碳原子的二烷氧烷基或2-4碳原子的二烷基氨基；R2代表氫原子，甲基，乙基，異丙基或2-甲氧乙基；n為整數0或1-3；其中R1為選自二氧戊環，四氫呋喃，四氫呋喃酮，四氫噻吩酮，吡咯烷酮，嗎啉，哌啶和吡咯烷的飽和五元或六元雜環；R2代表氫原子，甲基或乙基；n為整數0或1-3；其中R1為選自吡唑，異噁唑，噻唑，噻二唑，咪唑，呋喃，噻吩，三唑，吡啶，嘧啶和哌嗪的五元或六元雜芳環，在這種情況下，雜環芳基未被取代或被1-3個相同或不同的取代基所取代，這些取代基選自甲基，乙基，苯基，甲氧基，乙氧基，氨甲酰基，羥基和羥甲基；R2代表氫原子；n為整數0或1-3；在上述情況下，Q代表氫原子，乙基，異丙基或異丁基。
本發明中更優選的式Ⅰb化合物如下R2代表氫原子；R1代表2-4碳原子直鏈或的支鏈烷基，或3-5碳原子的直鏈或支鏈烷氧烷基；n為0。
進一步地，本發明上述式Ⅰ2,5-吡啶二羧酸衍生物可根據本領域內一些常用的并適合本發明的方法與酸形成制藥上可接受的酸加成鹽，例如，酸加成鹽可以包括與無機酸，例如鹽酸、氫溴酸、磷酸和硫酸等形成的鹽，或與有機酸，例如，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、檸檬酸、馬來酸、琥珀酸、富馬酸、酒石酸、三氟乙酸，苯甲酸和甲磺酸等形成的鹽。
同時，由于上述本發明式Ⅰ2,5-吡啶二羧酸衍生物具有強的抗HBV和HIV增殖的能力，其在臨床上可用作抗肝炎B和抗AIDS病毒的藥物。
因此，本發明包括含有上述式Ⅰ2,5-吡啶二羧酸衍生物及其制藥學上可接受鹽作為活性成分的藥物組合物。
當需將本發明藥物組合物用于臨床時，可將其配制成含有一些制藥領域常用賦形劑的劑型。例如，口服制劑(如片劑、膠囊、錠劑、液體以及懸浮劑)；注射制劑(如可注射溶液或懸浮液，或可注射粉劑，其在注射前加入注射用水即可使用)。藥物制劑可經口服或非腸道途徑(例如靜脈內、皮下、腹膜內或局部)進行給藥進一步地，式Ⅰ的2,5-吡啶二羧酸衍生物的臨床劑量可在10-500mg，優選的是50-300mg的范圍內進行適當的選擇。根據醫生和藥劑師的指導，可以一定的間隔分幾次(優選的是1-6次)進行給藥。
本發明還包括制備具式Ⅰ的2,5-吡啶二羧酸衍生物的方法。下列反應路線1給出了制備具式Ⅰ的2,5-吡啶二羧酸衍生物具有代表性的方法。
下列反應路線1是一個直接制備式Ⅰ2,5-吡啶二羧酸衍生物的方法，其使具式2的尼古丁酸衍生物與具式3胺類化合物進行反應。路線1 其中的R1,R2,R3及n的定義同上。
根據路線1，反應在式3胺類化合物和式2的尼古丁酸酯衍生物的甲酯基團之間直接進行親核取代。由于酯基團的活性較下列路線2中所用的酸酐衍生物或酰氯衍生物的活性低，因此親核取代需要更劇烈的反應條件。親核取代反應在40-90℃下，在醇溶劑(例如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇或丁醇)或有機溶劑(例如乙腈，N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、氯仿、四氫呋喃、二噁烷或二氧戊環)存在下，于20小時之內完成。
特別地，式1的2,5-吡啶二羧酸衍生物(其中R3為3-氨基-2-吡啶基)可以通過下列路線2或3進行制備。
下列路線2以路線的形式顯示了通過使式2a尼古丁酸衍生物活性中間體與式3胺類化合物進行反應，來制備所需的式1a的2,5-吡啶二羧酸衍生物(其中R3為3-氨基-2-吡啶基)的方法路線2 其中的R1,R2和Q的定義同上。
下文中將詳細地解釋根據路線2制備本發明中2,5-吡啶二羧酸衍生物的方法。
首先使式2a的尼古丁酸衍生物與酰氯化合物例如新戊酰氯進行反應形成具有良好反應活性的酸酐衍生物，或與亞硫酰氯反應形成具有高反應活性的酰氯衍生物；然后，使中間體與具式3胺類化合物反應，得到具上述式1a的2,5-吡啶二羧酸衍生物，其即為所需產品。
這些反應可在普通叔有機堿(例如三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉，N-甲基哌啶、4-二甲基氨基吡啶、N,N-二乙基苯胺、2,6-二甲基吡啶或吡啶)的存在下，采用1-1.5當量的具式3胺類化合物，或在沒有叔有機堿存在下，采用過量的具式3胺類化合物進行反應。
另外，所需的具式1a 2,5-吡啶二羧酸衍生物還可以按照下法進行制備在1,3-二環己基碳化二亞胺(DCC)的存在下，使式2a尼古丁酸衍生物與1-羥基苯并三唑(HOBT)進行反應，形成具有良好反應活性的活性酯，然后與具式3胺類化合物進行反應。此反應在5-40℃下于8小時之內完成。在這些反應中，優選的是使用選自氯仿、二氯甲烷、乙腈、四氫呋喃、二噁烷、二氧戊環、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺和N-甲基吡咯烷酮的單一溶劑或助溶劑。
下列反應路線3將說明制備本發明中所需的2,5-吡啶二羧酸衍生物(其中R3為3-氨基-2-吡啶基)的另一個方法。
下列反應路線3涉及一個方法，其中使含有硝基吡啶基團的式4尼古丁酸酯衍生物或下式5尼古丁酸衍生物與具下式3的胺類化合物反應，得到具下式6的中間體，然后，進一步還原中間體。
路線3
其中的R1,R2,Q和n的定義同上。
下文中將更詳細地解釋根據路線3制備本發明中2,5-吡啶二羧酸衍生物的方法。
使式4尼古丁酸酯衍生物進行水解可以獲得尼古丁酸衍生物。在此反應中，采用含有低級醇(例如甲醇、乙醇或異丙醇)和水的助溶劑。水解在強堿(例如氫氧化鈉或氫氧化鉀)存在并低于40℃下于3小時內完成。使得到的式5尼古丁酸酯衍生物與酰氯化合物(例如新戊酰氯)進行反應，形成具有良好反應活性的酸酐衍生物，或與亞硫酰氯反應形成具有高反應活性的酰氯衍生物；然后使此中間體與具式3胺類化合物反應，得到式6化合物。這些反應在0-30℃下，并在普通叔有機堿(例如三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉，N-甲基哌啶、4-二甲基氨基吡啶、N,N-二乙基苯胺、2,6-二甲基吡啶或吡啶)的存在下，于6小時之內完成。
另外，在1,3-二環己基碳化二亞胺(DCC)的存在下，使式5尼古丁酸衍生物與1-羥基苯并三唑(HOBT)進行反應，形成具有良好反應活性的活性酯，然后使之與具式3胺類化合物進行反應，得到式6化合物。此反應在5-40℃下于8小時之內完成。在制備式6化合物的這些反應中，優選的是使用選自氯仿、二氯甲烷、乙腈、四氫呋喃、二噁烷、二氧戊環、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺和N-甲基吡咯烷酮的單一溶劑或助溶劑。
進一步的，另一個制備式6化合物的方法是使式4尼古丁酸酯衍生物(反應路線3中式5尼古丁酸衍生物的前體)與式3胺類化合物直接進行反應。此方法的優點是使反應過程縮短了一個步驟。此反應使式3胺類化合物與式4尼古丁酸酯衍生物的甲酯基團直接進行親核取代反應。由于酯基團的活性較式4活性酸衍生物的活性低，因此親核取代需要更劇烈的反應條件。親核取代反應在40-90℃下，在醇溶劑(例如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇或丁醇)或有機溶劑(例如乙腈，N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、氯仿、四氫呋喃、二惡烷或二氧戊環)存在下，于20小時之內完成。
對式6化合物進行催化氫化還原得到式Ⅰa化合物(Q氫原子)。這類還原反應可在高壓條件并在小量活化金屬催化劑(例如Raney-鎳或Pd/活性碳)存在下，采用氫氣進行反應，這是被廣泛采用的還原反應。在此反應中可以使用各種溶劑，例如甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯。
進一步地，如此得到的式Ⅰa化合物(Q氫原子)在選擇性還原劑(例如氰基硼氫化鈉)存在及酸性條件下，用乙醛、丙酮或異丁醛進行還原烷基化，形成所需的式Ⅰa化合物(Q:1-4碳原子的直鏈或支鏈烷基)。此反應可在有機酸(例如乙酸)存在下進行。通常采用低級醇作為溶劑，例如甲醇或乙醇。
在反應路線1,2和3中所使用的式3胺類化合物是一種意在將取代基團R1和R2引入所需產品式1的2,5-吡啶二羧酸衍生物中的試劑。本領域普通技術人員可以根據需要的取代基方便地選擇并使用一些合適的胺類化合物。
同時，與具式1的2,5-吡啶二羧酸衍生物制備過程有關的反應路線1和2中所使用的作為起始物質的式2a尼古丁酸衍生物以及式2b尼古丁酸酯衍生物可在使用前，利用下列反應路線4或5進行制備。
下列反應路線4相應說明了采用具下式7的5-(甲氧羰基)-2-吡啶羧酸以及具下式8的1-(3-硝基-2-吡啶基)哌嗪作為起始物質來制備式2b和式2a化合物的方法。
路線4
其中Q的定義同上。
在反應路線4中作為起始物質的具式7的5-(甲氧羰基)-2-吡啶羧酸可用已知方法方便地從2,5-吡啶二羧酸(=異辛可部酸)進行制備[Nippon Kagaku Kaishi 1967,Vol. 88,553-556]，上述2,5-吡啶二羧酸可以非常便宜的價格購得。同樣反應路線4中具式8的1-(3-硝基-2-吡啶基)哌嗪可采用人們熟知的方法從2-氯-3-硝基吡啶和哌嗪進行制備[J.Med.Chem.1994,Vol.37,999-1014]。在說明書中有關新對苯二酰胺衍生物的制備實施例中將詳細解釋這些起始原料的制備方法，該方法已在兩個專利中被公開，其已由發明者在韓國申請[韓國專利申請，Nos.96-72384和97-36589]。
根據反應路線4，具式7的5-(甲氧羰基)-2-吡啶羧酸與酰氯化合物(例如新戊酰氯)反應，形成具有良好反應活性的酸酐衍生物；然后此中間體與具式8的1-(3-硝基-2-吡啶基)哌嗪反應，得到含有硝基吡啶基團的式4尼古丁酸酯衍生物。此反應在0-30℃并在普通叔有機堿(例如三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉，N-甲基哌啶、4-二甲基氨基吡啶、N,N-二乙基苯胺、2,6-二甲基吡啶或吡啶)的存在下，于6小時之內完成。優選的是使用選自氯仿、二氯甲烷、乙腈、四氫呋喃、二噁烷、二氧戊環、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺和N-甲基吡咯烷酮的單一溶劑或助溶劑。
使如此得到的式4化合物還原形成含有氨基吡啶基團的式9衍生物。
這類還原反應可在高壓條件并在小量活化金屬催化劑(例如Raney-鎳或Pd/活性碳)存在下，采用氫氣進行反應，這是被廣泛采用的還原反應。在此反應中可以使用各種溶劑，例如甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿或乙酸乙酯。
進一步地，如此得到的含有氨基吡啶基團的式9衍生物在選擇性還原劑(例如氰基硼氫化鈉)存在并酸性條件下，用乙醛、丙酮或異丁醛進行還原烷基化，形成含有烷基氨基吡啶基團的式2b尼古丁酸酯衍生物。此反應可在有機酸(例如乙酸)存在下進行。通常采用低級醇作為溶劑，例如甲醇或乙醇。
使式2b尼古丁酸酯衍生物進行水解可以得到式2a尼古丁酸衍生物。在此反應中采用含有低級醇(例如甲醇、乙醇或異丙醇)和水的助溶劑。水解在40℃下于3小時之內完成。
下列反應路線5相應說明了采用具下式7的5-(甲氧羰基)-2-吡啶羧酸以及具下式10的1-[3-(烷氨基)-2-吡啶基]哌嗪作為起始物質來制備式2b和式2a化合物的方法。路線5 其中Q的定義同上。
在反應路線5中作為起始物質的具式7化合物可按照路線4進行制備。同樣，正如反應路線4中所述，反應路線5中作為另一個起始物的具式10的1-[3-(烷氨基)-2-吡啶基]哌嗪可采用已知的4-步方法從具式8的1-(3-硝基-2-吡啶基)哌嗪進行制備[J.Med.Chem.1994,Vol.37,999-1014 ]。在說明書中有關新的對苯二酰胺衍生物的制備實施例中將詳細解釋這些起始原料的制備方法，該方法已在專利中被公開，其已由發明者在韓國登記[韓國專利申請，Nos.96-72384]。
根據反應路線5，具式7的5-(甲氧羰基)-2-吡啶羧酸與一些酰氯化合物(例如新戊酰氯)反應，形成具有良好反應活性的酸酐衍生物；然后此中間體與具式10的1-[3-(烷氨基)-2-吡啶基]哌嗪反應，得到式2b化合物。此反應在0-30℃并在普通叔有機堿(例如三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉，N-甲基哌啶、4-二甲基氨基吡啶、N,N-二乙基苯胺、2,6-二甲基吡啶或吡啶)的存在下，于6小時之內完成。優選的是使用選自氯仿、二氯甲烷、乙腈、四氫呋喃、二噁烷、二氧戊環、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺和N-甲基吡咯烷酮的單一溶劑或助溶劑。
按照反應路線4的方法，使如此得到的式2b尼古丁酸酯衍生物進行水解，得到式2a尼古丁酸衍生物。
同時，在反應路線1中作為起始原料的式2c尼古丁酸酯衍生物可按下列反應路線6進行制備。
下列反應路線6相應說明使具下式7的5-(甲氧羰基)-2-吡啶羧酸與具下式11的1-(2-羥乙基)哌嗪進行反應，來制備具式2c的6-[1-(2-羥基乙基)哌嗪-4-基羰基]尼古丁酸甲酯的方法。路線6 在反應路線6中作為起始物質的具式7化合物可按照路線4進行制備。同樣，在反應路線6中作為另一個起始物的具式11的1-(2-羥乙基)哌嗪可從市場上方便地購得。
下文中將更詳細地解釋反應路線6中所描述的方法。
使具式7的5-(甲氧羰基)-2-吡啶羧酸與酰氯化合物(例如新戊酰氯)反應，形成具有良好反應活性的酸酐衍生物；然后使之與具式11的1-(2-羥乙基)哌嗪反應，得到具式2c的6-[1-(2-羥基乙基)哌嗪-4-基羰基]尼古丁酸甲酯。此反應在0-30℃并在普通叔有機堿(例如三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉，N-甲基哌啶、4-二甲基氨基吡啶、N,N-二乙基苯胺、2,6-二甲基吡啶或吡啶)的存在下，于6小時之內完成。
或者，在1,3-二環己基碳化二亞胺(DCC)的存在下，使具式7的5-(甲氧羰基)-2-吡啶羧酸與1-羥基苯并三唑(HOBT)進行反應，形成具有良好反應活性的活性酯，然后與具式11的1-(2-羥乙基)哌嗪進行反應，得到具式2c的6-[1-(2-羥基乙基)哌嗪-4-基羰基]尼古丁酸甲酯。此反應在5-40℃下于8小時之內完成。在這些反應中，優選的是使用選自氯仿、二氯甲烷、乙腈、四氫呋喃、二噁烷、二氧戊環、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺和N-甲基吡咯烷酮的單一溶劑或助溶劑。
如上所述，包括制備實施例在內的下列實施例將更詳細地解釋本發明，但并不限制本發明。制備實施例16-[1-(3-硝基-2-吡啶基)哌嗪-4-基羰基]尼古丁酸甲酯的制備將5-(甲氧羰基)-2-吡啶羧酸(20g)加到二氯甲烷(200ml)中，然后加入三乙胺(17ml)使之溶解。冷卻混合物，在0-5℃下慢慢加入新戊酰氯(14.5ml)，于5℃下攪拌2小時。向溶液中依次加入1-(3-硝基-2-吡啶基)哌嗪(23g)和三乙胺(18ml)，使混合物于5-10℃下反應2小時。溶液用碳酸氫鈉水溶液和水洗滌兩次。分出的有機層于減壓下濃縮。濃縮殘余物用乙醇處理使之結晶，加水，濾集沉淀，粗品用乙醇和乙醚重結晶，過濾并干燥，得到35.3g(產率86％)所需產品。m.P.:129～130℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ3.47(m,2H),3.61(m,2H),3.75(m,2H),3.96(m,5H),6.83(m,1H),7.78(m,1H),8.18(m,1H),8.35(m,1H),8.41(m,1H),9.16(m,1H)制備實施例26-[1-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪-4-基羰基]尼古丁酸甲酯的制備將得自制備實施例1的6-[1-(3-硝基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯(6g)溶于甲醇(120ml)中，加入約1ml的Raney-鎳(50％水性漿狀物)，用氫氣充滿混合物，并在40-50psi下還原4小時。反應完成后，使混合物通過硅藻土，減壓濃縮。向濃縮殘余物中加入異丙醇(40ml)，攪拌，過濾，洗滌，干燥，得到4.97g(產率90％)所需產品。m.p.:175～177℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ3.12(m,2H),3.21(m,2H),3.67(m,2H),3.81(m,2H),3.96(m,5H),6.84(m,1H),6.94(m,1H),7.76(m,2H),8.37(m,1H),9.16(m,1H)制備實施例36-[1-(3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基羰基]尼古丁酸甲酯的制備方法1將得自制備實施例2的6-[1-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯(4g)溶于甲醇(80ml)中，10℃下依次加入丙酮(2ml)、乙酸(5ml)和氰基硼氫化鈉(2.5g)。混合物在室溫下攪拌3小時。向其中加入3N氫氧化鈉水溶液用于中和(pH約為7.5)，接著慢慢加入過量的水用于沉淀。攪拌2小時后濾集沉淀。用水和異丙醇洗滌，干燥，得到3.73g(產率83％)所需產品。方法2將5-(甲氧羰基)-2-吡啶羧酸(5g)加到二氯甲烷(70ml)中，然后加入三乙胺(4.3ml)使之溶解。冷卻混合物，在0-5℃下慢慢加入新戊酰氯(3.6ml)，于5℃下攪拌2小時。向溶液中依次加入1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪(5.8g)和三乙胺(4.5ml)，使混合物于5-10℃下反應2小時。溶液用碳酸氫鈉水溶液和水洗滌兩次。分出的有機層于減壓下濃縮。濃縮殘余物用乙醚處理使之結晶，攪拌并過濾。殘余物用異丙醇重結晶，過濾并干燥，得到7.87g(產率78％)所需化合物。m.p.:93-94℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.21(d,6H),3.09(m,2H),3.16(m,2H),3.52(m,1H),3.69(m,2H),3.95(m,5H),4.13(m,1H),6.82(m,1H),6.92(m,1H),7.71(m,2H),8.39(m,1H),9.17(m,1H)制備實施例46-[1-(3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基羰基]尼古丁酸甲酯的制備將6-[1-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯(5g)加到溶于甲醇(100ml)中，5-10℃下加入乙酸(4ml)和乙醛(1.2ml)。混合物攪拌30分鐘。向其中加入氰基硼氫化鈉(1g)，混合物在15℃下攪拌2小時。再次加入氰基硼氫化鈉(1g)，繼續攪拌1小時。向混合物中加入水(50ml)和3N氫氧化鈉水溶液用于中和(pH約為7.5)，接著減壓濃縮甲醇。用氯仿提取混合物后，減壓濃縮分出的有機層。殘余物用乙醚處理使之結晶，并用乙酸乙酯和己烷進行重結晶。過濾產品，干燥，得到4.1g(產率76％)所需化合物。m.p.:80～81℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.29(t,3H),3.13(m,4H),3.20(m,2H),3.70(m,2H),3.96(m,5H),4.17(m,1H),6.87(m,1H),6.95(m,1H),7.72(m,2H),8.38(m,1H),9.17(m,1H)制備實施例56-[1-[3-(異丁基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基羰基]尼古丁酸甲酯的制備按照與制備實施例4相同的方法，以6-[1-(3-氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯和異丁醛為起始原料進行合成。然后用乙醇及己烷對產品進行重結晶，得到所需化合物。產率71％m.p.:82-84℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.01(d,6H),1.90(m,1H),2.87(m,2H),3.07(m,2H),3.16(m,2H),3.68(m,2H),3.91(m,5H),4.32(s,1H),6.79(m,1H),6.90(m,1H),7.66(m,1H),7.71(m,1H),8.38(m,1H),9.17(s,1H)制備實施例66-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基羰基]尼古丁酸的制備將6-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯(3g)溶于甲醇(30ml)中，加入1N氫氧化鈉水溶液(16ml)，混合物在25℃下水解2小時。向混合物中慢慢加入2N鹽酸將之中和(pH約為5)，接著加入過量的水使之沉淀。攪拌2小時后，過濾沉淀，用水洗滌，干燥得到2.63g(產率91％)所需化合物。m.p.:211-214℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.23(d,6H),3.16(m,2H),3.36(m,2H),3.57(m,1H),3.70(m,2H),3.96(m,2H),6.96(m,1H),7.07(m,1H),7.79(m,1H),8.00(m,1H),8.50(m,1H),9.31(m,1H)制備實施例76-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基羰基]尼古丁酸的制備將6-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯(3g)溶于甲醇(18ml)中。向混合物中加入1N氫氧化鈉水溶液(18ml)，混合物于30℃下水解1小時。慢慢加入3N鹽酸將之中和(pH約為5-6)，接著加入異丙醇(25ml)并慢慢加入過量的水使之沉淀。20℃下攪拌2小時后，過濾沉淀，用水洗滌，干燥，得到2.48g(產率86％)所需化合物。m.p.:155～157℃1H-NMR(DMSO-d6),ppm:δ1.17(t,3H),2.84(m,2H),2.98(m,4H),3.52(m,2H),3.86(m,2H),6.94(m,2H),7.54(m,1H),7.71(m,1H),8.38(m,1H),9.06(m,1H),13.58(s,1H)制備實施例86-[1-[3-(異丁基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基羰基]尼古丁酸的制備按照與制備實施例7相同的方法，以6-[1-[3-(異丁基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯為起始原料進行合成。產率92％m.p.:160-163℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.01(d,6H),1.92(m,1H),2.92(m,2H),3.18(m,2H),3.33(m,2H),3.70(m,2H),3.96(m,2H),6.92(m,1H),7.03(m,1H),7.75(m,1H),7.98(m,1H),8.49(m,1H),9.31(s,1H)制備實施例96-[1-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪-4-基羰基]尼古丁酸的制備將6-[1-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯(3g)溶于甲醇(25ml)中。向混合物中加入1N氫氧化鈉水溶液(20ml)，混合物于25℃下攪拌2小時。慢慢加入3N鹽酸將之中和(pH約為5)，接著慢慢加水(25ml)使之沉淀。攪拌1小時后，過濾沉淀，用水洗滌，干燥，得到2.53g(產率88％)所需化合物。m.p.:137-140℃1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ3.68(m,4H),4.08(m,2H),4.31(m,2H),7.45(m,1H),7.81(m,2H),8.54(m,1H),9.41(m,1H),9.67(m,1H)制備實施例106-[1-(3-硝基-2-吡啶基)哌嗪-4-基羰基]尼古丁酸的制備將6-[1-(3-硝基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯(10g)溶于甲醇(75ml)中。向混合物中加入1N氫氧化鈉水溶液(75ml)，混合物于30℃下攪拌2小時。慢慢加入3N鹽酸將之中和(pH約為5)，接著慢慢加水(110ml)使之沉淀。攪拌2小時后，過濾沉淀，用水洗滌，干燥，得到8.66g(產率90％)所需化合物。m.p.:185-187℃1H-NMR(DMSO-d6),ppm:δ3.37(m,2H),3.52(m,4H),3.78(m,2H),6.94(m,1H),7.75(m,1H),8.28(m,1H),8.39(m,2H),9.06(m,1H),13.61(s,1H)制備實施例116-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基羰基]尼古丁酸甲酯的制備方法1將5-(甲氧羰基)-2-吡啶羧酸(50g)加到二氯甲烷(550ml)中，然后加入三乙胺(42.5ml)使混合物溶解。冷卻混合物，在0-5℃下慢慢加入新戊酰氯(36ml)，于5℃下攪拌2小時。5℃下，向混合物中加入1-(2-羥乙基)哌嗪(37g)和N,N-二異丙基乙胺(48ml)，混合物于5-10℃下反應2小時。溶液用碳酸氫鈉水溶液和水洗滌兩次。分出的有機層用硫酸鎂干燥，減壓濃縮。濃縮殘余物用乙醚處理使之結晶，并用乙酸乙酯和異丙醚重結晶，得到57.5g(產率71％)所需產品。m.p.:95-96℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ2.65(m,4H),2.72(m,2H),3.67(m,4H),3.77(m,2H),3.96(s,3H),7.72(d,1H),8.38(m,1H),9.16(d,1H)方法2將5-(甲氧羰基)-2-吡啶羧酸(5g)加到四氫呋喃(40ml)和二氯甲烷(60ml)的助溶劑中，然后于15-20℃下依次加入1,3-二環己基碳化二亞胺(11.5g)和1-羥基苯并三唑(4.1g)，使混合物反應2小時。冷卻后，于10℃下向混合物中加入1-(2-羥乙基)哌嗪(3.8g)，并在同樣溫度下攪拌2小時。加熱混合物，在20-25℃下繼續攪拌30分鐘。加入二氯甲烷(90ml)，用水洗滌3次，硫酸鎂干燥，減壓濃縮。濃縮殘余物用乙醚處理使之結晶，并用乙酸乙酯和四氫呋喃重結晶，得到6.3g(產率78％)所需化合物。m.p.:95-96℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ2.65(m,4H),2.72(m,2H),3.67(m,4H),3.77(m,2H),3.96(s,3H),7.72(d,1H),8.38(m,1H),9.16(d,1H)實施例15-[N-(2-羥乙基)氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶將三乙胺(0.54ml)加到6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸(1.3g)的二氯甲烷(40ml)中，使之溶解并冷卻。在0-5℃下慢慢加入新戊酰氯(0.45ml)，混合物于0℃下攪拌2小時。加入三乙胺(0.6ml)和乙醇胺(0.25ml)，混合物于5-10℃下攪拌3小時。溶液用碳酸氫鈉水溶液和水洗滌兩次。分出的有機層于減壓下濃縮。濃縮殘余物用乙醚處理使之結晶，并用乙醇和異丙醚重結晶，得到1.2g(產率83％)所需產品。m.p.:163-165℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.22(d,6H),3.08(m,2H),3.18(m,2H),3.63(m,5H),3.84(m,2H),3.93(m,2H),4.13(m,1H),6.85(m,1H),6.96(m,1H),7.48-7.65(m,3H),8.10(m,1H),8.89(m,1H)實施例25-[N-(3-羥丙基)氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶將6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯(2.5g)溶于甲醇(40ml)中，加入3-氨基-1-丙醇(0.95g)，混合物加熱回流12小時后冷卻。在25℃下緩慢加入過量的水使之沉淀，混合物攪拌2小時后過濾。用異丙醇和乙醚對過濾固體進行重結晶，過濾并干燥，得到2.17g(產率78％)所需產品。m.p.:139-140℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.23(d,6H),1.84(m,2H),3.08(m,2H),3.16(m,2H),3.52(m,1H),3.62(m,4H),3.75(m,2H),3.94(m,2H),4.13(m,1H),6.84(m,1H),6.94(m,1H),7.50(m,1H),7.65(m,2H),8.13(m,1H),8.91(m,1H)實施例35-[N-[(1R)-2-羥基-1-甲基乙基]氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例1相同的方法，以6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和(R)-(-)-2-氨基-1-丙醇為起始原料進行合成。然后用乙醇及己烷對產品進行重結晶，得到所需化合物。產率80％m.p.:129-130℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.22(d,6H),1.28(d,3H),3.05(m,2H),3.21(m,2H),3.63(m,4H),3.85(m,2H),4.01(m,1H),4.11(m,1H),4.25(m,1H),6.83(m,1H),6.94(m,1H),7.28(m,1H),7.41(m,1H),7.65(m,1H),8.03(m,1H),8.85(m,1H)實施例45-[N-[(1S)-2-羥基-1-甲基乙基]氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例3相同的方法，以(S)-(+)-2-氨基-1-丙醇為起始原料進行合成。產率76％m.p.:129-130℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.22(d,6H),1.30(d,3H),3.04(m,2H),3.20(m,2H),3.60(m,4H),3.83(m,2H),4.01(m,1H),4.11(m,1H),4.25(m,1H),6.82(m,1H),6.94(m,1H),7.31(m,1H),7.39(m,1H),7.64(m,1H),8.04(m,1H),8.84(m,1H)實施例55-[N-(2-羥基-1-甲基乙基)氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例3相同的方法，以2-氨基-1-丙醇為起始原料進行合成。產率82％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.22(d,6H),1.30(d,3H),3.05(m,2H),3.21(m,2H),3.62(m,4H),3.84(m,2H),4.00(m,1H),4.11(m,1H),4.26(m,1H),6.82(m,1H),6.95(m,1H),7.30(m,1H),7.41(m,1H),7.95(m,1H),8.03(m,1H),8.84(m,1H)實施例65-[N-(1,1-二甲基-2-羥乙基)氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例1相同的方法，以6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和2-氨基-2-甲基-1-丙醇為起始原料進行合成。用乙酸乙酯和乙醚對產品進行重結晶，得到所需產品。產率74％m.p.:145-146℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.21(d,6H),1.43(d,6H),3.08(m,2H),3.17(m,2H),3.54(m,1H),3.63(m,2H),3.69(m,2H),3.94(m,2H),4.14(m,1H),6.68(m,1H),6.86(m,1H),6.94(m,1H),7.55(m,1H),7.67(m,1H),8.09(m,1H),8.88(m,1H)實施例75-[N-[(1R)-1-乙基-2-羥乙基]氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例1相同的方法，以6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和(R)-(-)-2-氨基-1-丁醇為起始原料進行合成。然后用乙醇及石油醚對產品進行重結晶，得到所需化合物。產率83％m.p.:85-88℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ0.99(t,3H),1.22(d,6H),1.68(m,2H),3.06(m,2H),3.17(m,2H),3.52(m,3H),3.68(m,1H),3.82(m,2H),4.01(m,3H),6.85(m,1H),6.96(m,1H),7.30(m,1H),7.38(m,1H),7.65(m,1H),8.03(m,1H),8.85(m,1H)實施例85-[N-[(1S)-1-乙基-2-羥乙基]氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例7相同的方法，以(S)-(+)-2-氨基-1-丁醇為起始原料進行合成。產率81％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ0.99(t,3H),1.21(d,6H),1.67(m,2H),3.06(m,2H),3.17(m,2H),3.52(m,3H),3.67(m,1H),3.81(m,2H),4.01(m,3H),6.84(m,1H),6.96(m,1H),7.30(m,1H),7.37(m,1H),7.65(m,1H),8.05(m,1H),8.86(m,1H)實施例95-[N-[1-乙基-2-羥乙基]氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例7相同的方法，以2-氨基-1-丁醇為起始原料進行合成。產率77％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ0.98(t,3H),1.22(d,6H),1.67(m,2H),3.06(m,2H),3.16(m,2H),3.53(m,3H),3.68(m,1H),3.82(m,2H),4.02(m,3H),6.85(m,1H),6.97(m,1H),7.29(m,1H),7.38(m,1H),7.65(m,1H),8.03(m,1H),8.85(m,1H)實施例105-[N-[(1R)-2-羥基-1-異丙基乙基]氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例1相同的方法，以6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和(R)-(-)-2-氨基-3-甲基-1-丁醇為起始原料進行合成。然后用丙酮及己烷對產品進行重結晶，得到所需化合物。產率73％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.01(d,6H),1.22(d,6H),2.00(m,1H),3.10(m,4H),3.50(m,4H),3.83(m,2H),4.00(m,3H),6.82(m,1H),6.93(m,1H),7.29(m,1H),7.40(m,1H),7.65(m,1H),8.02(m,1H),8.85(m,1H)實施例115-[N-[(1S)-2-羥基-1-異丙基乙基]氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例10相同的方法，以(S)-(+)-2-氨基-3-甲基-1-丁醇為起始原料進行合成。產率75％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.00(d,6H),1.23(d,6H),2.01(m,1H),3.13(m,4H),3.52(m,4H),3.83(m,2H),4.00(m,3H),6.83(m,1H),6.94(m,1H),7.29(m,1H),7.39(m,1H),7.66(m,1H),8.00(m,1H),8.85(m,1H)實施例125-[N-[2-羥基-1-異丙基乙基]氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例10相同的方法，以2-氨基-3-甲基-1-丁醇為起始原料進行合成。產率80％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.01(d,6H),1.23(d,6H),2.01(m,1H),3.12(m,4H),3.52(m,4H),3.82(m,2H),4.01(m,3H),6.82(m,1H),6.95(m,1H),7.28(m,1H),7.39(m,1H),7.66(m,1H),8.01(m,1H),8.84(m,1H)實施例135-[N-[雙(羥甲基)甲基]氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例2相同的方法，以6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯和2-氨基-1,3-丙二醇為起始原料進行合成。然后用丙酮及己烷對產品進行重結晶，得到所需化合物。產率78％m.p.:90-93℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.21(d,6H),3.07(m,4H),3.51(m,4H),3.85(m,6H),4.16(m,2H),6.85(m,1H),6.93(m,1H),7.48(m,1H),7.62(m,1H),7.85(m,1H),8.13(m,1H),8.92(m,1H)實施例145-[N-乙基-N-(2-羥乙基)氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例1相同的方法，以6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和2-(乙基氨基)乙醇為起始原料進行合成。然后用異丙醇及己烷對產品進行重結晶，得到所需化合物。產率74％m.p.:134-135℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.15(t,3H),1.22(d,6H),3.14(m,4H),3.33(m,2H),3.54(m,1H),3.71(m,4H),3.92(m,4A),4.14(m,1H),6.85(m,1H),6.93(m,1H),7.68(m,2H),7.84(m,1H),8.64(m,1H)實施例15；5-[N-(2-羥乙基)-N-甲基氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例14相同的方法，以2-(甲基氨基)乙醇為起始原料進行合成。產率82％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.22(d,6H),3.02(s,3H),3.12(m,4H),3.54(m,1H),3.72(m,4H),3.93(m,4H),4.13(m,1H),6.85(m,1H),6.93(m,1H),7.68(m,2H),7.84(m,1H),8.64(m,1H)實施例165-[N,N-雙(2-羥乙基)氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例1相同的方法，以6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和二乙醇胺為起始原料進行合成。然后用異丙醇及乙醚對產品進行重結晶，得到所需化合物。產率77％m.p.:130-132℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.22(d,6H),3.05(m,2H),3.13(m,2H),3.55(m,1H),3.61(m,6H),3.90(m,2H),4.05(m,4H),4.21(m,1H),6.91(m,1H),7.02(m,1H),7.64(m,1H),7.69(m,1H),8.20(m,1H),8.95(s,1H)實施例175-[N-(2-羥乙基)-N-苯基氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例1相同的方法，以6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和N-苯基乙醇胺為起始原料進行合成。然后用異丙醚對產品進行重結晶，得到所需化合物。產率65％m.p.:127-130℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.23(d,6H),3.06(m,2H),3.14(m,2H),3.55(m,1H),3.62(m,2H),3.88(m,4H),4.16(m,3H),6.86(m,1H),6.95(m,1H),7.13(m,2H),7.23(m,1H),7.30(m,2H),7.50(m,1H),7.68(m,1H),7.74(m,1H),8.51(s,1H)實施例18:2-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(2-羥乙基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例2相同的方法，以6-[1-[3-(乙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯和乙醇胺為起始原料進行合成。然后用乙醇及己烷對產品進行重結晶，得到所需化合物。產率73％m.p.:178-180℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.31(t,3H),3.13(m,4H),3.21(m,2H),3.63(m,4H),3.84(m,2H),3.96(m,2H),4.22(m,1H),6.86(m,1H),6.96(m,1H),7.51(m,1H),7.64(m,1H),7.69(m,1H),8.10(m,1H),8.91(s,1H)實施例195-[N-(1,1-二甲基-2-羥乙基)氨甲酰基]-2-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例1相同的方法，以6-[1-[3-(乙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和2-氨基-2-甲基-1-丙醇為起始原料進行合成。然后對產品進行重結晶，得到所需化合物。產率70％m.p.:128-130℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.30(t,3H),1.46(s,6H),3.16(m,4H),3.23(m,2H),3.96(m,4H),3.97(m,2H),6.70(s,1H),6.90(m,1H),6.99(m,1H),7.61(m,1H),7.71(m,1H),8.12(m,1H),8.91(s,1H)實施例202-[1-[3-氨基-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(2-羥乙基)氨甲酰基]吡啶將6-[1-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸(0.5g)加到四氫呋喃(10ml)和二氯甲烷(10ml)的助溶劑中，再于15-20℃下依次加入1,3-二環己基碳化二亞胺(0.65g)和1-羥基苯并三唑(0.23g)。混合物攪拌2小時。加入乙醇胺(0.18ml)，混合物再于20-25℃下攪拌2小時。向其中再次加入二氯甲烷(30ml)，用水洗滌3次，硫酸鎂干燥，減壓濃縮。用乙醚處理濃縮殘余物使之結晶。用乙醇及己烷對固體進行重結晶，得到0.44g(產率77％)所需化合物。m.p.:197-199℃1H-NMR(CDCl3+CD3OD),ppm:δ3.16(m,2H),3.25(m,2H),3.59(m,2H),3.68(s,2H),3.77(m,2H),3.98(m,2H),6.94(m,1H),7.09(m,1H),7.74(m,2H),8.30(m,1H),9.30(s,1H)實施例212-[1-[3-氨基-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(1,1-二甲基-2-羥乙基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例20相同的方法，以2-氨基-2-甲基-1-丙醇為起始原料進行合成。產率67％m.p.:120-122℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.46(s,6H),3.16(m,2H),3.26(m,2H),3.67(m,2H),3.71(s,2H),3.97(m,2H),6.67(s,1H),6.89(m,1H),7.01(m,1H),7.60(m,1H),7.79(m,1H),8.11(m,1H),8.90(s,1H)實施例225-[N-(2-羥乙基)氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丁基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例1相同的方法，以6-[1-[3-(異丁氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸為起始原料進行合成得到所需化合物。產率80％m.p.:136-139℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ0.99(d,6H),1.90(m,1H),2.88(m,2H),3.06(m,2H),3.18(m,2H),3.60(m,4H),3.82(m,2H),3.94(m,2H),4.32(m,1H),6.78(m,1H),6.91(m,1H),7.46(m,1H),7.55(m,1H),7.65(m,1H),8.05(m,1H),8.86(s,1H)實施例235-[N-(1,1-二甲基-2-羥乙基)氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丁基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例6相同的方法，以6-[1-[3-(異丁氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸為起始原料進行合成得到所需化合物。產率71％m.p.:140-143℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ0.99(d,6H),1.43(s,6H),1.90(m,1H),2.88(m,2H),3.05(m,2H),3.17(m,2H),3.62(m,2H),3.68(s,2H),3.94(m,2H),4.32(m,1H),6.65(s,1H),6.79(m,1H),6.81(m,1H),7.53(m,1H),7.65(m,1H),8.05(m,1H),8.86(s,1H)實施例242-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-異丙基氨甲酰基]吡啶將三乙胺(1.6ml)加到6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸(4g)的二氯甲烷(50ml)中，使之溶解并冷卻。在0-5℃下慢慢加入新戊酰氯(1.4ml)，混合物于5℃下攪拌1小時。加入三乙胺(1.7ml)和異丙胺(1.2ml)，混合物于10℃下攪拌2小時。溶液用碳酸氫鈉水溶液和水洗滌兩次。分出的有機層用硫酸鎂干燥，減壓濃縮。向濃縮殘余物中加入異丙醇(40ml)，攪拌并過濾。固體用乙酸乙酯和乙醚重結晶，得到3.6g(產率81％)所需產品。m.p.:175-176℃1HNMR(CDCl3),ppm:δ1.21(d,6H),1.28(d,6H),3.07(m,2H),3.15(m,2H),3.54(m,1H),3.67(m,2H),3.94(m,2H),4.13(m,1H),4.28(m,1H),6.33(m,1H),6.84(m,1H),6.93(m,1H),7.65(m,2H),8.11(m,1H),8.90(m,1H)實施例252-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-異丙基氨甲酰基]吡啶將6-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯(2g)溶解于甲醇(25ml)中，加入并丙胺(5ml)，混合物加熱回流12小時。減壓濃縮除去溶劑。殘余物用乙醚處理使之結晶，并用氯仿和己烷使固體重結晶，得到1.59g(產率74％)所需產品。m.p.:188-190℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.29(m,9H),3.16(m,6H),3.70(m,2H),3.97(m,2H),4.20(m,1H),4.32(m,1H),6.27(m,1H),6.87(m,1H),6.96(m,1H),7.71(m,2H),8.14(m,1H),8.93(m,1H)實施例262-[1-[3-(異丁基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-異丙基氨甲酰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以6-[1-[3-(異丁氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸為起始原料進行合成得到所需化合物。產率76％m.p.:132-134℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.02(d,6H),1.30(d,6H),1.93(m,1H),2.91(m,2H),3.08(m,2H),3.19(m,2H),3.69(m,2H),3.98(m,2H),4.31(m,2H),6.21(d,1H),6.83(m,1H),6.93(m,1H),7.68(m,2H),8.15(m,1H),8.93(s,1H)實施例272-[1-[3-氨基-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-(N-異丙基氨甲酰基)吡啶步驟(1)5-(N-異丙基氨甲酰基)-2-[1-(3-硝基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]吡啶的制備將三乙胺(0.85ml)加到6-[1-[3-硝基-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸(2g)的二氯甲烷(25ml)中，使之溶解并冷卻。在0-5℃下慢慢加入新戊酰氯(0.7ml)，混合物于5-10℃下攪拌2小時。加入N,N-二異丙基乙基胺(1.1ml)和異丙胺(0.55ml)，混合物于10-15℃下攪拌3小時。反應混合物用碳酸氫鈉水溶液和水洗滌兩次。分出的有機層用硫酸鎂干燥，減壓濃縮。將殘余物溶于氯仿(15ml)中，慢慢加入乙醚，有結晶析出。攪拌2小時后，過濾沉淀，乙醚洗滌，干燥，得到1.74g(產率78％)所需產品。m.p.:143-145℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.28(d,6H),3.46(m,2H),3.63(m,2H),3.75(m,2H),3.97(m,2H),4.32(m,1H),6.28(m,1H),6.85(m,1H),7.72(m,1H),8.18(m,2H),8.37(m,1H),8.94(m,1H)步驟(2)2-[1-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]-5-(N-異丙基氨甲酰基)-吡啶的制備將步驟(1)中得到的5-(N-異丙基氨甲酰基)-2-[1-(3-硝基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]吡啶(1.5g)以及約0.3ml Raney-鎳(50％的水漿物)加到在壓力反應器中的甲醇(30ml)中，向混合物中充入氫氣，在50-60psi的壓力下反應3小時。還原完成后，混合物經硅藻土過濾，減壓濃縮。殘余物用乙醚處理使之結晶，并用乙酸乙酯和異丙醚進行重結晶，得到1.05g(產率75％)所需化合物。m.p.:142-143℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.29(d,2H),3.13(m,2H),3.24(m,2H),3.67(m,2H),3.98(m,2H),4.32(m,1H),6.40(m,1H),6.86(m,1H),6.99(m,1H),7.63(m,1H),7.80(m,1H),8.15(m,1H),8.92(m,1H)實施例285-[N-(1，1-二甲基乙基)氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以6-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和2-甲基-2-丙烷胺為起始原料進行合成。用異丙醇對產品進行重結晶，得到所需化合物。產率82％m.p.:161-162℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.27(d,6H),1.49(s,9H),3.11(m,2H),3.20(m,2H),3.54(m,1H),3.71(m,2H),3.97(m,2H),4.16(m,1H),6.05(m,1H),6.87(m,1H),6.97(m,1H),7.70(m,2H),8.14(m,1H),8.90(m,1H)實施例295-[N-(1,1-二甲基乙基)氨甲酰基]-2-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例25相同的方法，以2-甲基-2-丙胺為起始原料進行合成。產率70％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.28(t,3H),1.50(s,9H),3.15(m,6H),3.71(m,2H),3.97(m,2H),4.15(m,1H),6.05(m,1H),6.88(m,1H),6.98(m,1H),7.70(m,2H),8.14(m,1H),8.91(m,1H)實施例302-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(2-甲基丙基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以異丁胺為起始原料進行合成。產率82％m.p.:131-134℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.01(d,6H),1.25(d,6H),1.95(m,1H),3.13(m,2H),3.21(m,2H),3.33(m,2H),3.57(m,1H),3.72(m,2H),3.98(m,2H),4.16(m,1H),6.40(m,1H),6.89(m,1H),6.98(m,1H),7.70(m,2H),8.19(m,1H),8.95(m,1H)實施例312-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(2-甲基丙基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以6-[1-[3-(乙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和異丁胺為起始原料進行合成。用乙醇和己烷對產品進行重結晶，得到所需化合物。產率77％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.01(d,6H),1.28(t,3H),1.96(m,1H),3.14(m,4H),3.23(m,2H),3.34(m,2H),3.72(m,2H),3.98(m,2H),4.16(m,1H),6.39(m,1H),6.90(m,1H),6.98(m,1H),7.71(m,2H),8.19(m,1H),8.96(m,1H)實施例322-[1-(3-氨基-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(2-甲基丙基)氨甲酰基]吡啶步驟(1)5-[N-(2-甲基丙基)氨甲酰基)-2-[1-(3-硝基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]吡啶的制備按照與實施例27步驟(1)相同的方法，以異丁胺為起始原料進行合成。產率80％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.02(d,6H),1.96(m,1H),3.13(m,2H),3.21(m,2H),3.33(m,2H),3.72(m,2H),3.98(m,2H),6.89(m,1H),6.98(m,1H),7.70(m,2H),8.20(m,1H),8.94(m,1H)步驟(2)2-[1-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(2-甲基丙基)氨甲酰基]吡啶的制備按照與實施例27步驟(2)相同的方法，以步驟(1)中得到的5-[N-(2-甲基丙基)氨甲酰基)-2-[1-(3-硝基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]吡啶和異丁胺為起始原料進行合成。產品用乙醇和乙醚進行重結晶，得到所需產品。產率72％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.01(d,6H),1.96(m,1H),3.12(m,2H),3.22(m,2H),3.34(m,2H),3.73(m,2H),3.98(m,2H),6.39(m,1H),6.89(m,1H),6.97(m,1H),7.65(m,1H),7.78(m,1H),8.19(m,1H),8.97(m,1H)實施例335-(N,N-二乙基氨甲酰基)-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸為起始原料進行合成。產品用乙醇和四氫呋喃進行重結晶，得到所需化合物。產率78％m.p.:100-102℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.13(m,3H),1.24(m,9H),3.10(m,2H),3.18(m,2H),3.27(m,2H),3.56(m,3H),3.74(m,2H),3.97(m,2H),4.17(m,1H),6.86(m,1H),6.96(m,1H),7.70(m,2H),7.81(m,1H),8.63(m,1H)實施例345-(N,N-二異丙基氨甲酰基)-2-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以6-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和二異丙胺為起始原料進行合成。產品用丙酮和己烷進行重結晶，得到所需化合物。產率72％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.15(m,6H),1.24(m,12H),3.10(m,2H),3.18(m,2H),3.53(m,3H),3.60(m,2H),3.95(m,2H),6.87(m,1H),6.96(m,1H),7.71(m,2H),7.81(m,1H),8.64(m,1H)實施例355-(N-環丙基氨甲酰基)-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例25相同的方法，以6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯和環丙胺為起始原料進行合成。產品用異丙醇和石油醚進行重結晶，得到所需化合物。產率77％m.p.:188-190℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ0.71(m,2H),0.84(m,2H),1.25(d,6H),2.93(m,1H),3.05(m,2H),3.16(m,2H),3.55(m,1H),3.63(m,2H),3.95(m,2H),4.15(m,1H),6.83(m,1H),6.93(m,1H),7.38(m,1H),7.49(m,1H),7.67(m,1H),8.09(m,1H),8.87(m,1H)實施例365-(N-環丙基氨甲酰基)-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例25相同的方法，以6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯和環丙胺為起始原料進行合成。產品用乙醇和己烷進行重結晶，得到所需化合物。產率69％m.p.:164-165℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ0.65(m,2H),0.87(m,2H),0.98(d,6H),1.90(m,1H),2.89(m,3H),3.04(m,2H),3.16(m,2H),3.64(m,2H),3.94(m,2H),4.32(m,1H),6.78(m,2H),6.89(m,1H),7.57(m,1H),7.65(m,1H),8.08(m,1H),8.86(s,1H)實施例375-(N-環戊基氨甲酰基)-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以環戊胺為起始原料進行合成。產率83％m.p.:197-199℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.25(d,6H),1.56(m,2H),1.67-1.76(m,4H),2.13(m,2H),3.12(m,2H),3.20(m,2H),3.56(m,1H),3.71(m,2H),3.97(m,2H),4.17(m,1H),4.43(m,1H),6.39(m,1H),6.89(m,1H),6.96(m,1H),7.68(m,2H),8.16(m,1H),8.92(m,1H)實施例385-(N-環戊基氨甲酰基)-2-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以6-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和環戊胺為起始原料進行合成。產品用異丙醇和乙醚進行重結晶，得到所需化合物。產率76％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.28(t,3H),1.56(m,2H),1.68-1.77(m,4H),2.14(m,2H),3.17(m,6H),3.70(m,2H),3.98(m,2H),4.16(m,1H),4.44(m,1H),6.30(m,1H),6.87(m,1H),6.95(m,1H),7.66(m,2H),8.16(m,1H),8.90(m,1H)實施例392-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(2-甲氧乙基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例25相同的方法，以6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯和2-甲氧乙胺為起始原料進行合成。產品用二氯甲烷和己烷進行重結晶，得到所需化合物。產率73％m.p.:122-124℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.23(d,6H),3.09(m,2H),3.16(m,2H),3.38(s,3H),3.55(m,3H),3.67(m,4H),3.95(m,2H),4.13(m,1H),6.67(m,1H),6.84(m,1H),6.95(m,2H),7.69(m,2H),8.17(m,1H),8.94(m,1H)實施例402-[1-[3-(乙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(2-甲氧乙基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例25相同的方法，以2-甲氧乙胺為起始原料進行合成。產率70.5％m.p.:115-116℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.31(t,3H),3.14(m,4H),3.21(m,2H),3.40(s,3H),3.57(m,2H),3.70(m,4H),3.98(m,2H),4.21(m,1H),6.71(m,1H),6.86(m,1H),6.96(m,1H),7.72(m,2H),8.20(m,1H),8.98(m,1H)實施例412-[1-[3-(異丁氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(2-甲氧乙基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例25相同的方法，以6-[1-[3-(異丁基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯和2-甲氧乙胺為起始原料進行合成。產品用異丙醇進行重結晶，得到所需化合物。產率65％m.p.:123-125℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ0.99(d,6H),1.89(m,1H),2.88(m,2H),3.07(m,2H),3.16(m,2H),3.37(s,3H),3.55(m,2H),3.65(m,4H),3.95(m,2H),4.33(m,1H),6.79(m,2H),6.90(m,1H),7.67(m,2H),8.16(m,1H),8.94(s,1H)實施例425-[N,N-雙(2-甲氧乙基)氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶·HCl將三乙胺(0.8ml)加到6-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸(2g)的二氯甲烷(30ml)中，使之溶解并冷卻。在0-5℃下慢慢加入新戊酰氯(0.7ml)，混合物于5℃下攪拌1小時。加入N,N-二異丙基乙胺(1ml)及雙(2-甲氧乙基)胺(0.85ml)，混合物于10℃下攪拌3小時。反應混合物用碳酸氫鈉水溶液和水洗滌兩次。分出的有機層用硫酸鎂干燥，減壓濃縮。將殘余物溶于氯仿(15ml)中，慢慢加入4.5ml無水1N-鹽酸(溶液為異丙醇)，有結晶析出。攪拌1小時后，過濾。分出的結晶用二氯甲烷和己烷進行重結晶，得到1.92g(產率68％)所需產品的鹽酸鹽。1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.33(d,6H),3.31-3.39(m,6H),3.48(m,2H),3.54(m,6H),3.66(m,3H),3.78(m,2H),3.95(m,2H),4.04(m,2H),7.28(m,2H),7.79(m,1H),7.88(m,1H),7.97(m,1H),8.67(m,1H)實施例432-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(2-甲氧基-1-甲基乙基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以2-甲氧異丙胺為起始原料進行合成。產率79％m.P.:134～135℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.24(d,6H),1.33(d,3H),3.10(m,2H),3.18(m,2H),3.40(s,3H),3.46(m,1H),3.54(m,2H),3.72(m,2H),3.97(m,2H),4.15(m,1H),4.37(m,1H),6.54(m,1H),6.86(m,1H),6.95(m,1H),7.69(m,2H),8.17(m,1H),8.96(m,1H)實施例442-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(2-甲氧-1-甲基乙基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以6-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和2-甲氧異丙胺為起始原料進行合成。產品用異丙醇和己烷進行重結晶，得到所需化合物。產率82％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.30(t,3H),1.34(d,3H),3.14(m,4H),3.19(m,2H),3.41(s,3H),3.52(m,2H),3.72(m,2H),3.96(m,2H),4.15(m,1H),4.38(m,1H),6.56(m,1H),6.86(m,1H),6.97(m,1H),7.70(m,2H),8.16(m,1H),8.98(m,1H)實施例452-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(3-甲氧丙基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以3-甲氧丙胺為起始原料進行合成。產品用乙醇和異丙醚進行重結晶，得到所需化合物。產率77％m.p.:95-96℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.25(d,6H),1.93(m,2H),3.15-3.21(m,4H),3.40(s,3H),3.62(m,5H),3.73(m,2H),3.98(m,2H),4.17(m,1H),6.89(m,1H),6.99(m,1H),7.27(m,1H),7.73(m,2H),8.19(m,1H),8.94(m,1H)實施例462-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(3-甲氧丙基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例25相同的方法，以3-甲氧丙胺為起始原料進行合成。產品用乙腈和乙醚進行重結晶，得到所需化合物。產率72％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.29(t,3H),1.93(m,2H),3.15-3.20(m,6H),3.41(s,3H),3.60(m,4H),3.73(m,2H),3.98(m,2H),4.17(m,1H),6.89(m,1H),6.98(m,1H),7.27(m,1H),7.73(m,2H),8.19(m,1H),8.94(m,1H)實施例472-[1-[3-(異丁基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(3-甲氧丙基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例25相同的方法，以6-[1-[3-(異丁氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯和3-甲氧丙胺為起始原料進行合成。產品用甲醇和異丙醚進行重結晶，得到所需化合物。產率64％m.p.:109-110℃1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ1.25(d,6H),2.19(m,1H),2.33(m,2H),3.28(d,2H),3.74(s,3H),3.82(m,4H),3.94(m,2H),4.02(m,2H),4.21(m,2H),4.42(m,2H),7.65(m,1H),7.73(m,1H),7.80(m,1H),8.62(m,1H),9.42(m,1H),9.78(s,1H)實施例485-[N-[2-(2-羥基乙氧基)乙基]氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例25相同的方法，以6-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯和2-(2-氨基乙氧基)乙醇為起始原料進行合成。產品用丙酮和己烷進行重結晶，得到所需化合物。產率79％m.p.:93-95℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.25(d,6H),3.10(m,2H),3.21(m,2H),3.52(m,1H),3.67(m,8H),3.77(m,2H),3.96(m,2H),4.17(m,1H),6.86(m,1H),6.95(m,1H),7.49(m,1H),7.68(m,2H),8.18(m,1H),8.97(m,1H)實施例492-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-[2-(2-羥基乙氧基)乙基]氨甲酰基]吡啶按照與實施例25相同的方法，以2-(2-氨基乙氧基)乙醇為起始原料進行合成。產率75％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.30(t,3H),3.14(m,4H),3.21(m,2H),3.67(m,8H),3.76(m,2H),3.96(m,2H),4.16(m,1H),6.87(m,1H),6.95(m,1H),7.49(m,1H),7.68(m,2H),8.18(m,1H),8.97(m,1H)實施例505-[N-(2,2-二甲氧乙基)-N-甲基氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶·HCl按照與實施例42相同的方法，以6-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和甲基氨基乙醛二甲縮醛為起始原料進行合成，得到所需化合物的鹽酸鹽。產率70％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.33(d,6H),3.15(s,3H),3.50(m,8H),3.66(m,1H),3.94(m,4H),4.10(m,4H),4.70(m,2H),7.34(m,2H),7.85(m,2H),8.76(m,1H),9.72(m,1H)實施例515-[N-(2,2-二甲氧乙基)氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以6-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和2,2-二甲氧乙胺為起始原料進行合成，產品用乙醇和己烷進行重結晶，得到所需化合物。產率78％m.p.:167-169℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.16(d,6H),3.01(m,2H),3.10(m,2H),3.38(s,6H),3.48(m,1H),3.57(m,2H),3.64(m,2H),3.90(m,2H),4.08(m,1H),4.44(m,1H),6.44(m,1H),6.78(m,1H),6.86(m,1H),7.61(m,2H),8.12(m,1H),8.90(s,1H)實施例525-[N-(1,3-二氧戊環-2-基)甲基]-N-甲基氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以2-甲氨基甲基-1,3-二氧戊環為起始原料進行合成。產率67％m.p.:108-110℃1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ1.53(d,6H),3.62(s,3H),3.70(m,2H),3.79(m,2H),3.94(m,2H),4.11(m,2H),4.41(m,3H),4.79(m,1H),4.92(t,4H),7.65(m,1H),7.78(m,2H),8.53(m,1H),9.04(m,1H),9.54(s,1H)實施例532-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(四氫呋喃-2-基-甲基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以6-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和四氫糠胺為起始原料進行合成，產品用乙醇和己烷進行結晶，得到所需化合物。產率83％m.p.:108-110℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.26(d,6H),1.63(m,1H),1.98(m,2H),2.07(m,1H),3.18～3.23(m,4H),3.38(m,1H),3.57(m,1H),3.78(m,4H),3.83(m,1H),3.91(m,2H),4.09(m,1H),4.11(m,1H),6.66(m,1H),6.93(m,1H),6.99(m,1H),7.73(m,2H),8.19(m,1H),8.98(m,1H)實施例542-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(四氫呋喃-2-基-甲基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以6-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和四氫糠胺為起始原料進行合成，產品用乙酸乙酯和己烷進行結晶，得到所需化合物。產率77％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.29(t,3H),1.63(m,1H),1.99(m,2H),2.06(m,1H),3.18～3.22(m,6H),3.38(m,1H),3.78(m,4H),3.82(m,1H),3.92(m,2H),4.09(m,1H),4.11(m,1H),6.67(m,1H),6.92(m,1H),6.98(m,1H),7.73(m,1H),8.19(m,1H),8.99(m,1H)實施例552-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(四氫-2-呋喃酮-3-基)氨甲酰基]吡啶將三乙胺(0.8ml)加到6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸(2g)的二氯甲烷(40ml)中，使之溶解并冷卻。在0-5℃下慢慢加入新戊酰氯(0.7ml)，混合物于5℃下攪拌1小時。加入三乙胺(2.2ml)和α-氨基-γ-丁酸內酯氫溴酸鹽(1.4g)，混合物于10℃下攪拌3小時。溶液用碳酸氫鈉水溶液和水洗滌兩次。分出的有機層經硫酸鎂干燥，減壓下濃縮。濃縮殘余物用小量氯仿溶解，加入乙醚，有結晶沉淀出來。固體用丙腈和己烷重結晶，得到1.84g(產率75％)所需產品。m.p.:199-201℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.25(d,6H),2.42(m,1H),2.83(m,1H),3.10(m,2H),3.18(m,2H),3.56(m,1H),3.67(m,2H),3.96(m,2H),4.13(m,1H),4.36(m,1H),4.55(m,1H),4.81(m,1H),6.86(m,1H),6.95(m,1H),7.68(m,2H),7.81(m,1H),8.19(m,1H),8.97(m,1H)實施例562-[1-(3-氨基-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(四氫-2-呋喃酮-3-基)氨甲酰基]吡啶將6-[1-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸(1g)加到四氫呋喃(25ml)和二氯甲烷(15ml)的助溶劑中，再于15-20℃下依次加入1,3-二環己基碳化二亞胺(1.3g)和1-羥基苯并三唑(0.46g)。混合物攪拌2小時。20℃下再次向其中加入α-氨基-γ-丁酸內酯氫溴酸鹽(1.1g)和三乙胺(0.9ml)的混合物，并于20-25℃下攪拌3小時。加入二氯甲烷(50ml)，混合物用水洗滌3次，硫酸鎂干燥，減壓濃縮。用乙醚處理濃縮殘余物使之結晶。用氯仿及四氫呋喃進行重結晶，得到1.07g(產率71％)所需化合物。1H-NMR(CDCl3),ppm:δ2.44(m,1H),2.67(m,1H),3.18(m,2H),3.26(m,2H),3.70(m,2H),3.98(m,2H),4.35(m,1H),4.53(m,1H),4.87(m,1H),6.92(m,1H),7.12(m,1H),7.72(m,2H),8.38(m,1H),9.14(m,2H)實施例572-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-(四氫-2-噻吩酮-3-基)氨甲酰基]吡啶按照與實施例55相同的方法，以高半胱氨酸硫代內酯鹽酸鹽為起始原料進行合成。產率68％m.p.:195-196℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.26(d,6H),2.21(m,1H),2.96(m,1H),3.08(m,2H),3.17(m,2H),3.32(m,1H),3.41(m,1H),3.54(m,1H),3.64(m,2H),3.96(m,2H),4.12(m,1H),4.81(m,1H),6.84(m,1H),6.95(m,1H),7.47(m,1H),7.68(m,2H),8.17(m,1H),8.96(m,1H)實施例582-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-[3-(2-吡咯烷酮-1-基)丙基]氨甲酰基]吡啶·HCl按照與實施例42相同的方法，以6-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和1-(3-氨基丙基)-2-吡咯烷酮為起始原料進行合成。產率63％1H-NMR(FA-d1),ppm:δ1.64(d,6H),2.43(m,2H),2.63(m,2H),3.28(m,2H),3.95(m,8H),4.10(m,3H),4.30(m,2H),4.51(m,2H),7.79(m,1H),7.93(m,2H),8.76(m,1H),9.56(m,1H),9.92(s,1H)實施例592-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-[2-(嗎啉-4-基)乙基]氨甲酰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以4-(2-氨基乙基)嗎啉為起始原料進行合成。產率75％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.24(d,6H),2.62(m,4H),2.72(m,2H),3.08(m,2H),3.18(m,2H),3.53(m,1H),3.63(m,2H),3.72(m,2H),3.80(m,4H),3.98(m,2H),4.15(m,1H),6.84(m,1H),6.94(m,1H),7.67(m,1H),7.76(m,1H),8.26(m,1H),8.99(m,1H)實施例602-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-[2-(嗎啉-4-基)乙基]氨甲酰基]吡啶·HCl按照與實施例42相同的方法，以6-[1-[3-(乙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和4-(2-氨基乙基)嗎啉為起始原料進行合成。產率70％m.p.:223-225℃1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ1.48(t,3H),3.45(m,4H),3.82(m,6H),4.02(m,2H),4.13(m,2H),4.30(m,6H),4.47(m,2H),7.56(m,1H),7.67(m,1H),7.77(m,1H),8.59(m,1H),9.43(m,1H),9.80(m,1H)實施例612-[1-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]-5-[N-[2-(嗎啉-4-基)乙基]氨甲酰基]吡啶按照與實施例56相同的方法，以4-(2-氨基乙基)嗎啉為起始原料進行合成。產品用乙酸乙酯和己醚進行重結晶，得到所需化合物。產率73％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ2.63(m,4H),2.74(m,2H),3.08(m,2H),3.18(m,2H),3.64(m,2H),3.73(m,2H),3.83-3.96(m,6H),6.84(m,1H),6.95(m,1H),7.67(m,1H),7.76(m,1H),8.26(m,1H),8.98(m,1H)實施例625-[N-[2-(二甲基氨基)乙基]氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]吡啶·HCl按照與實施例42相同的方法，以N,N-二甲基亞乙基二胺為起始原料進行合成。產品用丙酮和石油醚進行重結晶，得到所需化合物的鹽酸鹽。產率72％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.24(d,6H),2.84(s,6H),3.10(m,4H),3.26(m,2H),3.54(m,3H),3.95(m,4H),4.16(m,1H),6.83(m,1H),6.92(m,1H),7.67(m,2H),8.49(m,1H),8.96(m,1H),9.26(m,1H)實施例635-[N-[2-(二甲基氨基)乙基]氨甲酰基]-2-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]-吡啶·HCl按照與實施例42相同的方法，以6-[1-[3-(乙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和N,N-二甲基乙二胺為起始原料進行合成。產品用丙酮和乙醚進行重結晶，得到所需化合物的鹽酸鹽。產率67％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.28(t,3H),2.79(s,6H),3.10(m,6H),3.26(m,2H),3.54(m,2H),3.93(m,4H),4.16(m,1H),6.82(m,1H),6.93(m,1H),7.67(m,2H),8.46(m,1H),8.97(m,H),9.26(m,1H)實施例645-[N-[2-(二乙基氨基)乙基]氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]-吡啶·HCl按照與實施例42相同的方法，以2-(二乙基氨基)乙胺為起始原料進行合成。產率76％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.02(m,6H),1.25(d,6H),3.10(m,8H),3.27(m,2H),3.53(m,3H),3.95(m,4H),4.16(m,1H),6.83(m,1H),6.94(m,1H),7.67(m,2H),8.47(m,1H),8.97(m,1H),9.27(m,1H)實施例655-[N-[3-(二甲基氨基)丙基]-N-甲基氨甲酰基]-2-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]吡啶按照與實施例24相同的方法，以N,N,N-三甲基-1,3-丙二胺為起始原料進行合成。產品用乙腈和異丙醚進行重結晶，得到所需化合物。產率70％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.25(d,6H),2.80(s,6H),3.01(s,3H),3.10(m,4H),3.26(m,2H),3.54(m,3H),3.95(m,4H),4.16(m,1H),6.83(m,1H),6.92(m,1H),7.67(m,2H),8.96(m,1H),9.26(m,1H)實施例666-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)尼古丁酰胺將三乙胺(0.8ml)加到6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸(2g)的二氯甲烷(30ml)中，使之溶解并冷卻。在0-5℃下慢慢加入新戊酰氯(0.7ml)，混合物于5℃下攪拌1小時。加入三乙胺(0.9ml)和3-氨基-5-甲基吡唑(0.56g)，混合物于5-10℃下攪拌3小時。慢慢加熱溶液并在15-20℃下攪拌30分鐘。溶液用碳酸氫鈉水溶液和水洗滌兩次。分出的有機層進行減壓濃縮。濃縮殘余物進行硅膠柱層析(氯仿/異丙醇=10/1,v/v)純化。回收純化的溶液，減壓濃縮。殘余物用乙醚處理進行結晶，加入異丙醚(20ml)并攪拌2小時，過濾，洗滌，得到1.77g(產率73％)所需化合物。m.p.:116-117℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.26(d,6H),2.17(s,3H),3.12(m,2H),3.21(m,2H),3.55(m,1H),3.78(m,2H),3.99(m,2H),4.16(m,1H),5.34(s,1H),5.63(bs,1H),6.86(m,1H),6.96(m,1H),7.70(m,1H),7.76(m,1H),8.53(m,1H),9.25(m,1H)實施例676-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-N-(5-甲基異噁唑-3-基)尼古丁酰胺按照與實施例66相同的方法，以3-氨基-5-甲基異噁唑為起始原料進行合成。產率75％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.25(d,6H),2.44(s,3H),3.16(m,4H),3.55(m,1H),3.75(m,2H),3.98(m,2H),4.15(m,1H),6.87(m,2H),6.96(m,1H),7.68(m,1H),7.77(m,1H),8.39(m,1H),9.15(m,1H),10.40(s,1H)實施例686-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-N-(4-甲基-1,3噻唑-2-基)尼古丁酰胺按照與實施例66所述同樣步驟，用2-氨基-4-甲基噻唑進行合成。產率69％m.p.:128～130℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.25(d,6H),2.21(s,3H),3.14(m,4H),3.56(m,1H),3.73(m,2H),4.01(m,2H),4.16(m,1H),6.61(s,1H),6.88(m,1H),6.96(m,1H),7.70(m,1H),7.76(m,1H),8.35(m,1H),9.13(m,1H)實施例696-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-N-(1,3,4-噻二唑-2-基)尼古丁酰胺按照與實施例66相同的方法，以2-氨基-1,3,4-噻二唑為起始原料進行合成。產品用乙酸乙酯和己烷進行重結晶，得到所需化合物。產率64％m.p.:260-262℃1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ1.45(d,6H),3.67(m,4H),3.86(m,1H),4.09(m,2H),4.34(m,2H),7.56(m,1H),7.72(m,2H),8.61(m,1H),9.53(m,1H),9.92(m,2H)實施例706-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-N-(2-吡啶基)尼古丁酰胺將亞硫酰氯(0.3ml)加到6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸(1g)的二氯甲烷(25ml)中，加熱混合物并在35℃下攪拌2小時。加入2-氨基吡啶(1g)和乙腈(5ml)，混合物于30-35℃下攪拌5小時。將混合物冷卻至室溫，用水和碳酸氫鈉水溶液洗滌。分出的有機層進行減壓濃縮。濃縮殘余物進行硅膠柱層析(己烷/氯仿/甲醇=5/4/2,v/v/v)純化。回收純化的溶液，減壓濃縮。殘余物用乙醚(25ml)處理進行結晶，攪拌1小時后，過濾殘余物并洗滌，得到0.86g(產率71％)所需化合物。m.p.:164-165℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.23(d,6H),3.14(m,4H),3.52(m,1H),3.71(m,2H),3.96(m,2H),4.15(m,1H),6.83(m,1H),6.92(m,1H),7.08(m,1H),7.65(m,1H),7.76(m,2H),8.22(m,1H),8.34(m,2H),9.10(m,2H)實施例716-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-N-(6-甲氧基-3-吡啶基)尼古丁酰胺按照與實施例70相同的方法，以5-氨基-2-甲氧基吡啶為起始原料進行合成。產率63％m.p.:173-176℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.25(d,6H),3.11(m,2H),3.21(m,2H),3.56(m,1H),3.76(m,2H),3.92(m,3H),3.99(m,2H),4.16(m,1H),6.78(m,1H),6.89(m,1H),6.97(m,1H),7.51(m,1H),7.69(m,1H),8.16(m,2H),8.49(m,1H),8.99(s,1H),9.36(s,1H)實施例726-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-N-(哌嗪-2-基)尼古丁酰胺按照與實施例70相同的方法，以氨基哌嗪為起始原料進行合成。產率68％m.p.:209-210℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.23(d,6H),3.18(m,4H),3.56(m,1H),3.72(m,1H),3.98(m,2H),4.13(m,1H),6.92(m,2H),7.67(m,1H),7.75(m,1H),8.32(m,2H),8.42(m,1H),8.95(s,1H),9.12(m,1H),9.67(s,1H)實施例736-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-N-(2-吡啶基甲基)尼古丁酰胺·HCl將三乙胺(0.8ml)加到6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸(2g)的二氯甲烷(30ml)中，使之溶解并冷卻。在0-5℃下慢慢加入新戊酰氯(0.7ml)，混合物于5℃下攪拌1小時。加入N,N-二異丙基乙胺(1ml)和2-(氨基甲基)吡啶(0.65ml)，混合物于10℃下攪拌2小時。溶液用碳酸氫鈉水溶液和水洗滌。分出的有機層用硫酸鎂干燥，減壓濃縮。濃縮的殘余物進行硅膠柱層析(氯仿/并丙醇=7/1,v/v)純化。回收純化的溶液，減壓濃縮。將殘余物溶于二氯甲烷(20ml)中，加入1.9ml無水鹽酸(2N-乙醇溶液)，殘余物進行減壓濃縮。將殘余物再次溶于二氯甲烷(10ml)中，減壓濃縮。然后用乙醚(20ml)處理殘余物使之結晶，減壓濃縮，得到1.75g(產率65％)所需化合物的鹽酸鹽。1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.27(d,6H),3.25(m,4H),3.58(m,1H),3.75(m,2H),3.98(m,2H),4.15(m,1H),4.86(m,2H),7.01(m,2H),7.43(m,1H),7.56(m,1H),7.76(m,2H),7.92(m,1H),8.36(m,2H),8.61(m,1H),9.12(m,1H)實施例746-[1-[3-(乙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-N-(2-吡啶基甲基)尼古丁酰胺按照與實施例73相同的方法，以6-[1-[3-(乙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和2-(氨基甲基)吡啶為起始原料進行合成。產品進行柱層析(己烷/二氯甲烷/乙酸乙酯=2/1/1,v/v/v)純化。用乙醚結晶，得到所需化合物。產率70％m.p.:129-131℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.28(t,3H),3.21(m,6H),3.73(m,2H),3.98(m,2H),4.21(m,1H),4.80(m,2H),6.85(m,1H),6.96(m,1H),7.25(m,1H),7.37(m,1H),7.75(m,3H),7.98(s,1H),8.29(m,1H),8.57(m,1H),9.10(m,1H)實施例756-[1-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]-N-(2-吡啶基甲基)尼古丁酰胺·HCl按照與實施例73相同的方法，以6-[1-(3-氨基-2-吡啶基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸為起始原料進行合成。產率60％1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ3.92(m,4H),4.22(m,2H),4.43(m,2H),5.37(d,2H),7.56(m,1H),7.98(m,2H),8.19(m,1H),8.38(m,1H),8.69(m,1H),8.80(m,1H),8.98(m,1H),9.51(m,1H),9.88(s,1H)實施例766-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-N-(3-吡啶基甲基)尼古丁酰胺將6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸(2g)加到四氫呋喃(30ml)和二氯甲烷(30ml)的助溶劑中，再于15-20℃下依次加入1,3-二環己基碳化二亞胺(2.4g)和1-羥基苯并三唑(0.85g)。混合物于同樣的溫度下攪拌2小時。20℃下向其中加入3-(氨基甲基)吡啶(0.65g)，反應混合物于20-25℃下攪拌2小時。加入二氯甲烷(60ml)，混合物用水洗滌3次，硫酸鎂干燥，減壓濃縮。濃縮殘余物進行硅膠柱層析(己烷/二氯甲烷/乙醇=5/2/1,v/v/v)純化。減壓濃縮純化的溶液，殘余物用乙醚處理使之結晶，得到1.87g(產率75％)所需化合物。m.p.:164-166℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.24(d,6H),3.08(m,2H),3.16(m,2H),3.55(m,1H),3.66(m,2H),3.92(m,2H),4.14(m,1H),4.68(m,2H),6.84(m,1H),6.94(m,1H),7.35(m,1H),7.62(m,1H),7.68(m,2H),7.84(m,1H),8.19(m,1H),8.53(m,1H),8.65(m,1H),9.01(s,1H)實施例776-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-N-(4-吡啶基甲基)尼古丁酰胺按照與實施例76相同的方法，以4-(氨基甲基)吡啶為起始原料進行合成。產率72％m.p.:171-173℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.24(d,6H),3.05(m,2H),3.12(m,2H),3.55(m,1H),3.65(m,2H),3.89(m,2H),4.15(m,1H),4.67(d,2H),6.83(m,1H),6.94(m,1H),7.27(m,2H),7.57(m,1H),7.66(m,2H),8.15(m,1H),8.58(m,2H),8.97(m,1H)實施例78N-[[3-羥基-5-(羥甲基)-2-甲基-4-吡啶基]甲基]-6-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺按照與實施例76相同的方法，以4-(氨基甲基)-5-羥基-6-甲基-3-吡啶甲醇二鹽酸鹽和三乙胺(2當量)為起始原料進行合成。產率64％m.p.:118-122℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.24(d,6H),2.46(s,3H),3.04(m,2H),3.14(m,2H),3.61(m,3H),3.92(m,2H),4.14(m,1H),4.63(d,2H),4.73(s,2H),6.83(m,1H),6.93(m,1H),7.50(m,1H),7.65(m,1H),7.77(s,1H),8.13(m,1H),8.28(m,1H),8.67(s,1H)實施例79N-(2-呋喃基甲基)-6-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺·HCl按照與實施例73相同的方法，以糠胺為起始原料進行合成。產率61％m.p.:173-176℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.33(d,6H),3.50(m,4A),3.64(m,1H),3.86(m,2H),4.02(m,2H),4.68(d,2H),6.34(s,2H),7.25(m,2H),7.38(s,1H),7.70(m,2H),7.81(m,1H),8.28(m,1H),8.99(s,1H)實施例80N-[2-(1H-咪唑-4-基)乙基]-6-[1-[3-(異丙氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺按照與實施例76相同的方法，以組胺為起始原料進行合成。產率72％m.p.:98-102℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.24(d,6H),2.96(m,2H),3.07(m,2H),3.15(m,2H),3.53(m,1H),3.67(m,2H),3.74(m,2H),3.95(m,2H),4.15(m,1.H),6.83(m,1H),6.94(m,2H),7.67(m,2H),7.81(m,1H),8.28(m,1H),8.46(m,1H),9.08(s,1H)實施例816-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-N-[2-(2-噻吩基)乙基]尼古丁酰胺將三乙胺(0.8ml)加到6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸(2g)的二氯甲烷(30ml)中，使之溶解并冷卻。在0-5℃下慢慢加入新戊酰氯(0.7ml)，混合物于5℃下攪拌1小時。依次加入三乙胺(0.9ml)和2-硫代苯乙基胺(0.75g)，混合物于5-10℃下攪拌2小時。溶液用碳酸氫鈉水溶液和水洗滌。分出的有機層用硫酸鎂干燥，減壓濃縮。濃縮殘余物用乙醚處理使之結晶。所得固體用乙醇和己烷重結晶，得到1.92g(產率74％)所需化合物。m.p.:131-134℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.22(d,6H),3.03(m,2H),3.16(m,4H),3.53(m,1H),3.64(m,2H),3.73(m,2H),3.91(m,2H),4.14(m,1H),6.87(m,5H),7.16(m,1H),7.55(m,1H),7.63(m,1H),8.08(m,1H),8.85(m,1H)實施例826-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]-N-[2-(2-吡啶基)乙基]尼古丁酰胺按照與實施例81相同的方法，以2-(2-氨基乙式)吡啶為起始原料進行合成。產率68％m.p.:79-82℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.22(d,6H),3.07(m,6H),3.52(m,1H),3.66(m,2H),3.84(m,2H),3.94(m,2H),4.14(m,1H),6.81(m,1H),6.88(m,1H),7.20(m,2H),7.65(m,3H),8.15(m,1H),8.21(m,1H),8.54(m,1H),8.96(m,1H)實施例83N-[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]-6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺按照與實施例81相同的方法，以1-(3-氨基丙基)咪唑為起始原料進行合成。所得產品用二氯甲烷和乙醚結晶，得到所需化合物。產率71％m.p.:105-108℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.23(d,6H),2.16(m,2H),3.05(m,2H),3.16(m,2H),3.48(m,2H),3.54(m,1H),3.64(m,2H),3.94(m,2H),4.13(m,2H),6.82(m,1H),6.94(m,1H),7.06(m,2H),7.57(m,1H),7.65(m,1H),7.76(m,1H),7.89(m,1H),8.18(m,1H),8.99(s,1H)實施例84N-[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]-6-[1-[3-(異丁基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺按照與實施例81相同的方法，以6-[1-[3-(異丁氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和1-(3-氨基丙基)咪唑為起始原料進行合成。所得產品用異丙醇重結晶，得到所需化合物。產率66％1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ1.23(d,6H),2.17(m,1H),2.58(m,2H),3.26(d,2H),3.84(m,6H),4.18(m,2H),4.40(m,2H),4.60(m,2H),7.65(m,4H),7.78(m,1H),8.62(m,1H),8.92(m,1H),9.39(m,1H),9.78(s,1H)實施例85N-(3-羥基-2-吡啶基)-6-[1-[3-(異丙基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺按照與實施例70相同的方法，以2-氨基-3-羥基吡啶為起始原料進行合成。產率62％m.p.:116-119℃1HNMR(DMSO-d6),ppm:δ1.17(d,6H),2.94(m,2H),3.03(m,2H),3.55(m,3H),3.86(m,2H),4.45(m,1H),6.91(m,2H),7.21(m,1H),7.34(m,1H),7.55(m,1H),7.73(m,1H),7.95(m,1H),8.43(m,1H),9.14(s,1H),9.87(s,1H),10.73(s,1H)實施例86N-(3-羥基-2-吡啶基)-6-[1-[3-(異丁基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺按照與實施例70相同的方法，以6-[1-[3-(異丁基氨基)-2-吡啶基]哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸和1-(3-氨基丙基)咪唑為起始原料進行合成。產率60％m.p.:165-167℃1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ1.85(d,6H),2.14(m,1H),3.23(d,2H),3.74(m,4H),4.12(m,2H),4.39(m,2H),7.72(m,4H),8.25(m,2H),8.61(m,1H),9.49(m,1H),9.87(s,1H)實施例876-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]-N-異丙基尼古丁酰胺·HCl將6-[1-(2-羥基乙基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯(3g)溶于甲醇(40ml)中，加入異丙胺(6ml)，混合物加熱回流12小時。減壓濃縮混合物除去溶劑及過量的異丙胺。濃縮殘余物進行硅膠柱層析(己烷/氯仿/甲醇=7/5/1)純化。回收純化的溶液并減壓濃縮，然后溶于氯仿中。向此溶液在中加入2N-鹽酸的異丙醇溶液(4.3ml)，逐步加入乙醚使之沉淀。攪拌1小時后，過濾并洗滌(乙醚)沉淀，得到2.74g(產率75％)所需化合物的鹽酸鹽。1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ1.52(d,6H),3.81(m,4H),4.10(m,1H),4.22(m,2H),4.46(m,4H),4.58(m,1H),5.22(m,1H),8.65(d,1H),9.41(d,1H),9.80(s,1H)實施例886-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]-N-異丁基尼古丁酰胺·HCl按照與實施例87相同的方法，以異丁胺為起始原料進行合成。產率70％1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ1.20(d,6H),2.18(m,1H),3.60(m,2H),3.80(m,4H),4.01(m,1H),4.21(m,2H),4.45(m,4H),5.15(m,1H),8.64(d,1H),9.41(d,1H),9.79(s,1H)實施例89N-乙基-6-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺·HCl將6-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯(3g)溶于乙醇(25ml)中，加入70％乙胺(8ml)，混合物加熱回流6小時。減壓濃縮混合物除去溶劑及過量的乙胺，然后溶于氯仿中，并用硫酸鎂干燥。殘余物進行硅膠柱層析(己烷/氯仿/甲醇=10/5/2)純化。回收純化的溶液并減壓濃縮，然后溶于異丙醇中。向此溶液中加入2N-鹽酸的異丙醇溶液(4.3ml)，逐步加入乙醚使之沉淀。過濾并分離沉淀，得到2.38g(產率68％)所需化合物的鹽酸鹽。1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.28(t,3H),2.56(m,2H),2.64(m,4H),3.50(m,2H),3.57(m,2H),3.67(m,2H),3.85(m,2H),6.57(m,1H),7.63(d,2H),8.14(m,1H),8.92(s,1H)實施例906-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]-N-丙基尼古丁酰胺·HCl按照與實施例87相同的方法，以丙胺為起始原料進行合成。產率65％1H-NMR(CDCl3),ppm:δ0.98(t,3H),1.92(m,2H),2.51(m,2H),2.65(m,4H),3.51(m,5H),3.68(m,2H),3.83(m,2H),6.58(m,1H),7.64(d,2H),8.14(m,1H),8.93(m,1H)實施例91N-環丙基-6-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺·HCl按照與實施例87相同的方法，以環丙胺為起始原料進行合成。產率69％1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ0.71(m,2H),0.87(m,2H),2.91(m,1H),3.72(m,4H),4.12(m,3H),4.46(m,4H),4.59(m,1H),8.65(d,1H),9.42(d,1H),9.81(s,1H)實施例92N-環丙甲基-6-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺·HCl按照與實施例87相同的方法，以(氨基甲基)環丙烷為起始原料進行合成。產率76％1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ0.31(m,1H),0.72(m,2H),0.87(m,2H),3.61(m,2H),3.81(m,4H),4.01(m,1H),4.21(m,2H),4.45(m,4H),5.15(m,1H),8.64(d,1H),9.41(d,1H),9.79(s,1H)實施例93N-(2-羥乙基)-6-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺將6-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯(2g)溶于甲醇(20ml)中，加入乙醇胺(2ml)，混合物加熱回流8小時。減壓濃縮混合物。將濃縮殘余物溶于異丙醇(14ml)中，加入異丙醚中使之沉淀。攪拌2小時后，過濾固體并用乙酸乙酯和己烷進行重結晶，得到1.74g(產率79％)所需化合物。m.p.:126-128℃1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ3.71(m,4H),4.01(m,3H),4.23(m,5H),4.41(m,3H),5.13(m,1H),8.57(d,1H),9.38(m,1H),9.78(s,1H)實施例946-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]-N-[(1R)-1-(羥甲基)丙基]尼古丁酰胺·HCl將6-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯(3g)溶于乙醇(30ml)中，加入(R)-(-)-2-氨基-1-丁醇(4ml)，混合物加熱回流10小時，減壓濃縮混合物。使濃縮殘余物進行硅膠柱層析(己烷/乙酸乙酯/乙醇=5/3/1)純化。回收純化的溶液并減壓濃縮，然后溶于二氯甲烷中。向此溶液中加入2N-鹽酸的異丙醇溶液(4.2ml)，逐步加入乙醚使之沉淀。攪拌2小時后，過濾混合物，得到2.85g(產率72％)所需化合物的鹽酸鹽。1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ1.21(t,3H) 1.91(m,2H),3.77(m,4H),4.01(m,1H),4.25(m,4H),4.43(m,3H),4.53(m,1H),5.18(m,1H),8.62(d,1H),9.42(d,1H),9.81(s,1H)實施例956-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]-N-[(1S)-1-(羥甲基)丙基]尼古丁酰胺·HCl按照與實施例94相同的方法，以(S)-(+)-2-氨基-1-丁醇為起始原料進行合成。產率67％1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ1.22(t,3H),1.92(m,2H),3.77(m,4H),3.99(m,1H),4.23(m,4H),4.43(m,1H),4.53(m,1H),5.16(m,1H),8.63(d,1H),9.43(d,1H),9.81(s,1H)實施例966-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]-N-[1-(羥甲基)丙基]尼古丁酰胺·HCl按照與實施例94相同的方法，以DL-2-氨基-1-丁醇為起始原料進行合成。產率69％1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ1.21(t,3H),1.93(m,2H),3.78(m,4H),4.01(m,1H),4.22(m,4H),4.43(m,1H),4.53(m,1H),5.15(m,1H),8.63(d,1H),9.43(d,1H),9.80(s,1H)實施例97N-[2-羥基-1-(羥甲基)乙基]6-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺·HCl
按照與實施例94相同的方法，以2-氨基-1,3-丙二醇為起始原料進行合成。產率64％1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ3.67(m,4H),4.11～4.25(m,8H),4.43(m,3H),4.53(m,1H),5.22(m,1H),8.63(d,1H),9.43(d,1H),9.81(s,1H)實施例986-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]-N-[(2-甲氧乙基]尼古丁酰胺·HCl將6-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酸甲酯(3g)溶于甲醇(18ml)中，加入2-甲氧乙基胺(4ml)，混合物加熱回流12小時，減壓濃縮混合物。濃縮殘余物進行硅膠柱層析(己烷/二氯甲烷/甲醇=7/4/1)純化。回收純化的溶液并減壓濃縮，然后將其溶于異丙醇中。向此溶液中加入2N-鹽酸的異丙醇溶液(4.4ml)，加入乙醚(20ml)，混合物攪拌1小時后進行過濾，乙醚洗滌，干燥，得到3.05g(產率80％)所需化合物的鹽酸鹽。m.p.:150-152℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ2.84～2.92(m,7H),3.13～3.30(m,7H),3.48(m,1H),3.57(m,2H),3.87(m,1H),4.31(m,1H),7.33(d,1H),7.95(m,1H),8.16(s,1H),8.64(s,1H)實施例996-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]-N-(3-甲氧丙基)尼古丁酰胺按照與實施例93相同的方法，以3-甲氧丙胺為起始原料進行合成。產率73％m.p.:88-90℃1H-NMR(CDCl3),ppm:δ1.87(m,2H),2.63(m,6H),3.38(s,3H),3.56(m,6H),3.66(m,2H),3.86(m,2H),7.23(m,1H),7.68(d,2H),8.15(m,1H),8.89(d,1H)實施例100N,N-雙(2-甲氧基乙基)-6-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺按照與實施例94相同的方法，以雙(2-甲氧乙基)胺為起始原料進行合成。產率58％1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ3.68(m,3H),3.76(m,2H),3.84(s,6H),3.94(m,4H),4.06(m,1H),4.15(m,1H),4.17(m,6H),4.41(m,1H),4.47(m,2H),5.19(m,1H),8.55(d,1H),9.08(d,1H),9.51(s,1H)實施例101N-(2,2-二甲氧基乙基)-6-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺按照與實施例93相同的方法，以2,2-二甲氧乙胺為起始原料進行合成。產率65％m.p.:107-109℃1H-NMR(FFA-d1),ppm:δ3.78(m,2H),4.15(m,3H),4.23-4.45(m,13H),4.90(d,1H),5.09(m,2H),5.21(m,1H),8.67(d,1H),9.45(d,1H),9.87(s,1H)實施例1026-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]-N-[2-(嗎啉-4-基)乙基]尼古丁酰胺·HCl按照與實施例94相同的方法，以4-(2-氨基乙基)嗎啉為起始原料進行合成。產率70％1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ3.86(m,4H),4.01(m,5H),4.10(m,1H),4.22(m,2H),4.34～4.43(m,7H),4.54(m,5H),5.19(m,1H),8.60(d,1H),9.06(d,1H),9.51(s,1H)實施例103N-(2-呋喃基甲基)-6-[1-(2-羥乙基)哌嗪-4-基-羰基]尼古丁酰胺·HCl按照與實施例94相同的方法，以糠胺為起始原料進行合成。產率64％1H-NMR(TFA-d1),ppm:δ3.69(m,2H),3.87(m,4H),4.23(m,2H),4.37(m,4H),4.54(m,2H),5.21(m,1H),7.78(m,2H),8.60(d,1H),9.01(d,1H),9.36(d,1H),9.51(s,1H)實驗1體外針對HBV聚合酶抑制活性最近，本發明的發明者生產了重組HBV聚合酶，其通過大腸桿菌變形物進行表達，發明者還測定了該酶的活性并申請了專利[韓國專利申請Nos.94-3918和96-33998]。
發明者還建立了體內測定HBV聚合酶的逆轉錄酶活性的方法。該方法的原理與ELISA方法相同，在使底物與生物素和DIG-修飾的核苷酸進行反應后，采用了利用過氧化酶識別作為抗DIG抗體的聚合底物方法。
將20μlHBV聚合物，20μl反應混合物以及20μl受試化合物進行混合，并在14-30℃下反應18-24小時。然后對受試化合物針對HBV聚合酶中逆轉錄酶活性的抑制效果進行測定，并與沒有受試化合物的對照實驗結果進行比較。
下列表1a-1g及表2中給出了每一種受試化合物的抑制活性。表1aHBV的逆轉錄酶(RT)酶活性抑制效果 表1b 表1c 表1d 表1e 表1f 表1g 表2 實驗2體外針對HIV逆轉錄酶的抑制實驗采用非放射活性的逆轉錄酶分析方法對體外抑制活性進行測定(Boehringer Mannheim)。
最初，向被抗生蛋白鏈菌素包裹的培養皿中加入20μl(40ng)HIV-RT，加入20μl反應混合物，其中含有模板/引物雜交的多聚(A)/低聚(dT)、DIG-(異羥基洋地黃毒甙元)-dUTP、生物素-dUTP以及TTP，然后再加入20μl受試化合物，并在37℃下反應1小時。采用不含受試化合物的對照作為有關活性比較。由于可以通過HIV-RT的作用來制備用異羥基洋地黃毒甙元及生物素標記的含有核苷酸的NDA，故將其與包裹在培養皿底部的抗生蛋白鏈菌素進行結合。反應完成后，用250μl緩沖液(pH 7.0)洗滌每個培養皿，每次30秒鐘，共計5次，以除去殘留的雜質，然后加入200μl抗DIG-POD抗體，混合物在37℃下反應1小時。為了再次除去殘留的雜質，用緩沖溶液洗滌反應溶液，并在每個中加入200μl ABTSTM(一種POD(過氧化酶)底物)，溶液在室溫下反應30分鐘。借助ELISA讀數器在405nm處讀取吸收值，用來評定反相轉錄活性及其抑制活性。
下列表3a-3f及表4中給出了每個樣品的抑制活性結果。表3a 表3b 表3c 表3d 表3e 表3f 表4 實驗3細胞毒性實驗采用HepG2細胞進行體外的細胞毒性實驗。結果發現，2,5-吡啶二羧酸衍生物及其制藥學上可接受的鹽類被證明沒有細胞毒性，其CC50≥200μM，因此從安全性角度而言非常有效。
如上所討論的，本發明式Ⅰ化合物及其制藥學上可接受的鹽類可有效地作為抑制逆轉錄病毒(包括HBV和HIV)增殖的活性成分，并且其不具任何細胞毒性。
權利要求
1．式Ⅰ的2,5-吡啶二羧酸衍生物或其制藥學上可接受的鹽 式Ⅰ其中R1代表羥基，1-6碳原子的直鏈或支鏈烷基，未被取代或被1-3碳原子的烷基取代的3-6碳原子環烷基，3-6個碳原子環烷基取代的1-3個碳原子烷基，1-6碳原子的直鏈或支鏈羥基烷基，3-6碳原子的直鏈或支鏈二羥基烷基，1-4碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，2-4碳原子的羥基烷氧基，2-6碳原子的直鏈或支鏈烷氧烷基，3-6碳原子的二烷氧烷基，2-4碳原子的二烷基氨基，乙酰氨基，乙烯基團，或具有1-3個選自氮、氧和硫等雜原子的飽和或不飽和五元或六元雜環，因此，該雜環未被取代或被1-3個相同或不同取代基所取代，所述取代基選自1-3碳原子烷基，1-3碳原子烷氧基團，1-3碳原子羥基烷基，苯基，氨甲酰基以及羥基；R2代表氫原子，苯基，1-4碳原子的直鏈或支鏈烷基，2-4碳原子的直鏈或支鏈羥基烷基或2-4碳原子的烷氧烷基；R3代表3-氨基-2-吡啶基 其中Q為氫原子或1-4碳原子的直鏈或支鏈烷基)，或者2-羥乙基；n為0或1-4的整數；同時，上述屬于支鏈羥基烷基的R1可以代表(R)-或(S)-型立體專一性。
2．權利要求1中所述的2,5-吡啶二羧酸衍生物或其制藥學上可接受的鹽，其中所述的化合物具有下列式Ⅰa式Ⅰa 其中R1,R2,Q及n的定義相應地與權利要求1中所述相同。
3．權利要求2中所述的2,5-吡啶二羧酸衍生物或其制藥學上可接受的鹽，其中所述的化合物中R1為羥基，3-5碳原子的支鏈羥基烷基，3-5碳原子的支鏈二羥基烷基；R2為氫原子，甲基，乙基，2-羥基乙基或苯基；n為0,2或3。
4．權利要求2中所述的2,5-吡啶二羧酸衍生物或其制藥學上可接受的鹽，其中所述的化合物中R1為2-4碳原子的直鏈或支鏈烷基，環丙基，環戊基，甲氧基，乙氧基，2-羥基乙氧基，4-5碳原子的支鏈烷氧烷基，3-5碳原子二烷氧烷基或2-4碳原子的二烷基氨基；R2為氫原子，甲基，乙基，異丙基或2-甲氧乙基；n為0或1-3的整數。
5．權利要求1中所述的2,5-吡啶二羧酸衍生物或其制藥學上可接受的鹽，其中所述的化合物具有下列式Ⅰb式Ⅰb 其中R1,R2和n的定義與權利要求1中所述相同。
6．權利要求5中所述的2,5-吡啶二羧酸衍生物或其制藥學上可接受的鹽，其中所述R2為氫原子；R1為2-4碳原子的直鏈或支鏈烷基，或2-5碳原子的直鏈或支鏈烷氧烷基；n為0。
7．含有式Ⅰ2,5-吡啶二羧酸衍生物或其制藥學上可接受的鹽作為活性成分的作為有效抗逆轉錄病毒劑的藥物組合物式Ⅰ 其中R1,R2和R3的定義與權利要求1中所述相同。
8．權利要求7中的藥物組合物，其中所述的逆轉錄病毒代表肝炎B病毒(HBV)或人類免疫缺陷病毒(HIV)。
9．制備式Ⅰ2,5-吡啶二羧酸衍生物的方法，其包括使式2尼古丁酸酯衍生物與式3胺類化合物進行反應式2 式3 式1 其中R1,R2,R3和n定義相應地與權利要求1中所述相同。
10．制備式Ⅰa2,5-吡啶二羧酸衍生物的方法，其包括使式2a化合物-尼古丁酸衍生物的活性中間體與式3胺類化合物進行反應式2a 式3a 式1a 其中R1,R2,Q和n定義相應地與權利要求1中所述相同。
11．制備式Ⅰa2,5-吡啶二羧酸衍生物的方法，其包括以下步驟使包括硝基吡啶基團的尼古丁酸酯衍生物與式3胺類化合物進行反應形成式6的中間體；進行該中間體還原或該中間體還原后的還原烷基化，式4 式3 式6 式Ⅰa 其中R1,R2,Q和n定義相應地與權利要求1中所述相同。
12．制備式Ⅰa 2,5-吡啶二羧酸衍生物的方法，其包括以下步驟使包括硝基吡啶基團的式5尼古丁酸酯衍生物與式3的胺類化合物進行反應形成式6的中間體；進行該中間體還原或中間體還原后的還原烷基化，式5 式3 式6 式Ⅰa 其中R1,R2,Q和n定義相應地與權利要求1中所述相同。
13．制備式2a尼古丁酸衍生物的方法，其包括以下步驟使式7的5-(甲氧基糖基)-2-吡啶羧酸與酰氯衍生物進行反應，形成酸酐衍生物；然后，反應混合物進一步與式8的1-(3-硝基-2-吡啶基)哌嗪進行反應，形成包括硝基吡啶基團的式4尼古丁酸酯衍生物；使式4化合物進行還原得到包括氨基吡啶基的式9衍生物；在酸性條件并還原劑存在下，使包括氨基吡啶基的式9衍生物進行還原烷基化，得到式2b的尼古丁酸酯衍生物；并且使式2b的尼古丁酸酯衍生物進行水解，得到式2a的尼古丁酸衍生物。式7 式8 式4 式9 式2b 式2a 其中Q的定義與權利要求1中所述相同。
14．制備式2b酯衍生物的方法，其包括使式7的5-(甲氧基羰基)-2-吡啶羧酸與式10的1-[3-(烷氨基)-2-吡啶基]哌嗪進行反應式7 式10 式2b 其中Q的定義與權利要求1中所述相同。
15．式2的尼古丁酸酯衍生物式2 其中R3的定義與權利要求1中所述相同。
全文摘要
本發明涉及作為抗逆轉錄病毒劑的新的2,5－吡啶二羧酸衍生物,更具體地涉及具式Ⅰ的新的2,5－吡啶二羧酸衍生物及其制藥學上可接受的鹽。該類化合物對逆轉錄病毒(例如肝炎B病毒和人類免疫缺陷病毒)的增殖具有抑制作用,本發明還涉及其制備方法,其中的R
文檔編號C07D213/82GK1305472SQ99807321
公開日2001年7月25日 申請日期1999年5月1日 優先權日1998年5月13日
發明者尹晟俊, 李常旭, 沈炯秀, 樸容均, 梁王龍, 金鐘宇, 韓在辰, 尹濟仁, 樸相珍, 樸禧貞, 申東赫, 張桓鳳 申請人:株式會社同和藥品工業