嘌呤和嘧啶的不飽和膦酸酯衍生物的制作方法

專利名稱：嘌呤和嘧啶的不飽和膦酸酯衍生物的制作方法
技術領域：
本發明涉及可用作抗病毒藥的某些嘌呤或嘧啶的不飽和膦酸酯衍生物，它們的制備方法和有用中間體，及其作為有效對抗DNA病毒(皰疹病毒1和2，巨細胞病毒、水痘-帶狀皰疹病毒、E-B病毒)、逆轉錄病毒(人免疫缺陷病毒1和2和維斯那病毒)和與腫瘤形成有關的病毒的抗病毒藥的用途。
嘌呤或嘧啶堿基的某些衍生物已顯示出抗病毒和抗腫瘤活性。例如見EP0,173,624；FP0,253,412；EP0,353,955；WO92/01698；EP0,481,214；和J.Org.Chem.572320-2327(1992)。本發明的化合物是衍生自嘌呤和嘧啶堿基的新化合物。
更具體地講，本發明涉及式I和式II的新化合物
其立體異構形式、互變異構形式和藥學上可接受的鹽，其中X1為H或NH2；X2為OH或NH2；X3為H或CH3；及X4為NH2或OH；Z不存在或為CH2、CH2CH2、CH2O或CH2OCH2；W為W為
其中R1和R2各自獨立地為H、F或CH2OH；T不存在或為T’或T″，其中T′為CH2CH2，CH＝CH，CH2CH(OH)，CH2CH(CH2OH)，或CH2CH(CH2F)，及T″為CH＝CH-CH(OH)，CH＝CH-CH(CH2OH)，CH2OCH2，
CH2OCH(CH2OH)，CH2CH(CH2OH)CH2，CH2CH2CH(OH)，CH2CH2CH(CH2OH)，或CH2CH2CH(CH2F)；及R3和R4各自獨立地為OH、OR5、OR5’或-O-CH(R6)-O-C(O)R5，條件是當R3或R4之一為OH時，另一個不為-O-CH(R6)-O-C(O)R5，其中R5和R5’各自獨立地為C1-15烷基或苯基，R6為H或C1-10烷基，條件是當T為CH＝CH或CH2CH2，W為Wc，及Z為CH2時，X1為NH2和X2為OH不同時發生；條件是當W為We時，Z不存在或為CH2，條件是當T不存在時，W不為Wc，條件是當Z為CH2且W為Wa時，T不能為CH＝CH，及條件是當Z不存在及W＝Wc時，T不為CH＝CH。
本發明還包括使用式I和式II化合物制備治療病毒感染的藥物組合物。
本發明化合物為帶有膦酸酯殘基的嘌呤衍生物(式I)或嘧啶衍生物(式II)，本文稱為核酸堿基(點線表示與分子的其余部分相連)
膦酸酯殘基與嘌呤或嘧啶衍生物的連結是T、W和Z基團片段。這些殘基與分子其余部分相連的一個實例是這樣其中T為T″為CH＝CH-CH(CH2OH)，W為Wa，其中R1和R2均為H，Z為CH2O
優選下列組合的本發明的較小分子當W＝Wa或Wb且T＝T″時，則Z不為CH2OCH2；當W＝Wc或Wa且T＝T’時，則Z為CH2OCH2；當W＝Wc或Wa且T＝T″時，則Z為CH2；其它優選化合物為當T為T’，更優選T’為CH＝CH；當T為T″，更優選T″為CH2OCH2；當W為Wa、Wc或Wd；當R1和R2均為H；和/或Z為CH2、CH2CH2或CHO時的化合物。式I比式II更優選。優選的嘧啶型堿基為胞嘧啶、尿嘧啶、和胸腺嘧啶。優選的嘌呤堿基為2，6-二氨基嘌呤(DAP)、鳥嘌呤和腺嘌呤。
本文所用的前提條件“當T為CH＝CH或CH2CH2，W為Wc且Z為CH2時，則X1為NH2和X2為OH不同時發生”意在從權利要求中排除堿基為鳥嘌呤的情況(X1＝NH2同時X2＝OH)。這一前提排除了其中堿基為鳥嘌呤的兩個化合物當(1)T為CH＝CH，W為Wc，Z為CH2，和(2)T為CH2CH2，W為Wc，Z為CH2。
術語C1-10烷基或C1-15烷基分別指具有1-10個碳原子或1-15個碳原子的烷基。烷基可為直鏈或支鏈，如叔丁基。對于C1-15烷基，優選C1-10烷基，更優選C1-6烷基，最優選C1-3烷基。對于C1-10烷基，優選C1-6烷基，最優選C1-3烷基。
術語“藥學上可接受的鹽”指在已知制備適于最終應用的藥物制劑中無毒并為有用衍生物的酸加成鹽和金屬及胺鹽。
藥學上可接受的酸加成鹽包括式I和式II堿基化合物的已知無毒的有機或無機酸加成鹽。形成適宜鹽的有機酸例如包括一元、二元和三元羧酸。這種酸例如為乙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富馬酸、苯甲酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯甲酸、羥基苯甲酸、苯乙酸、肉桂酸、水楊酸、和2-苯氧苯甲酸。形成適宜鹽的其它有機酸為磺酸如甲磺酸和2-羥乙磺酸。既可形成一元酸鹽也可形成二元酸鹽，這種鹽可以水合物形式或以基本無水形式存在。用標準技術制備酸鹽，如將游離堿溶于含有適當酸的水溶液或水-醇溶液或其它適宜溶劑中，然后蒸發溶劑分離，或在有機溶劑中與游離堿反應，此時可直接分離鹽或經溶液濃縮得到鹽。本發明的酸加成鹽一般為結晶物，其可溶于水和各種親水物中，顯示高熔點，穩定性提高。
藥學上可接受的金屬和胺鹽為那些在室溫下穩定且其中陽離子對鹽的生物活性無明顯貢獻的鹽。適宜的金屬鹽包括鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋇鹽、鋅鹽和鋁鹽。優選鈉鹽和鉀鹽。適宜的胺鹽從具有足以形成穩定鹽的堿性之胺制備，優選包含那些因毒性低適于醫用而常用于藥物化學中的胺。這包括三烷胺如三乙胺，其它還有普魯卡因、二芐胺、N芐基-β-苯乙胺、1，2-二苯基-2-羥基N-甲胺、和N，N’-二芐基乙二胺、脫氫樅胺、N-乙基哌啶、芐胺、和二環己基胺。
式I和式II化合物的“立體異構形式”是這些化合物的僅在其原子空間取向上有區別的所有異構體的總稱，包括鏡像異構件(對映異構件)、幾何異構體(順/反)、和具有一個以上手性中心藥物的不互為鏡像的異構體(非對映異構體)。可用本領域中熟知的常規和標準步驟拆分或分離此混合物，例如，色譜分離、分級結晶、利用光學活性酸、酶拆分等。在嘌呤核的6-位可存在烯醇-酮互變異構形式，嘧啶存在胺-亞胺互變異構形式。雖然本文將“Wc”畫成順式，但應理解為指順式和反式。
本發明化合物或使用本領域中已知的類似化學反應制備，反應物為已知的或可用本領域中已知的標準方法和技術制備。簡言之，制備式I和式II化合物的總方法可用下述反應式I表示。
除非另有說明，下述反應式中所含變量具有前述定義的意義。“Pg”指適當的保護基團。適當的保護基可以在“Protective groups inOrganic Synthesis”，2nd ed.Theodora W.Greene，John Wiky and Sons，Inc.，New-York(1991)中找到，后者并入本文作為參考。一些實例為THP(四氫吡喃基)、TBDMS(叔丁基二甲基甲硅烷基)、TBDPS(叔丁基二苯基甲硅烷基)。Pg的下標用于區分保護基，使某些保護基被選擇性裂解，而其它的保持完整。“B”或“BASE”指本文中定義的核酸堿基。“DEAD”指偶氮二羧酸二乙酯。“TMS Br”指溴化三甲基甲硅烷。“Ph”指苯基。“K2CO3”指碳酸鉀。“DMF”指二甲基甲酰胺。M指藥學上可接受的堿金屬陽離子。“n”為1或2。
反應式I-III表示如何制備反應式A的中間體(3)、(6)和(9)。反應式IV-VI表示從中間體(3)、(6)和(9)開始的合成。反應式A表示這些反應式的大部分是如何連在一起的。反應式B為反應式A一部分的替代合成，而反應式C是反應式A的補加。反應式D、E和F是關于R3和R4位的變量。
反應式I中間體(3)的制備(當T為飽和殘基時)X-CH2-Y1-W-(CH2)n-OPg1(1)
W＝Wa，Wb，Wc，或Wd。Y1＝CH2，CH(OPg2)，OCH2，OCH(CH2OPg2)，CH(CH2OPg2)CH2，CH(CH2OPg2，或CH2CH(CH2OPg2)。n＝1或2。X＝鹵素(Cl，Br，I)。R＝C1-15烷基或芐基。
反應式I中產生的式(3)化合物的制備典型地是利用Arbuzov反應，將三烷基膦或三芐基膦和適當保護的式(1)醇鹵化物一起加熱，Engel R.等，Chem.Rev.77349(1977)和Holy A.等，Collect.Czech.Chem.Commun.522801(1987)。選擇羥基保護基Pg1和Pg2使其在反應條件下穩定，且反應完成后在步驟6中選擇性裂解生成式(3)化合物。
反應式II中間體(6)的制備(當T為不飽和殘基時)OHC-Y2-W-(CH2)n-OPg2(4)
Y2＝無，CH(OPg2)或CH2(CH2OPg2)，條件是當Y2＝0則W不為Wc.W＝與反應式A中相同R＝C1-15烷基或芐基。
反應式II中，用式(4)的醛通過Wittig反應獲得式(6)化合物，Jonts G和Moffot，J.Org.Chem.(1968)，Waszkuc W等，Synthe-sis1025(1984)。例如，適當的式(4)醛在非質子溶劑如四氫呋喃中與稍過量于一摩爾當量的四亞乙基二膦酸酯的鋰鹽反應。反應一般在約-78℃攪拌進行10～24小時。相應的鏈烯基膦酸酯(5)用本領域熟知的萃取方法從反應混合物中回收。反應b中，選擇性地裂解羥基保護基Pg1生成式(6)的醇。
反應式III中間體(9)的制備(當T殘基含氧時)X-Y3-W-(CH2)n-OPg1(7)
Y3＝CH2或CH(CH2OPg2)。W＝同反應式AX＝離去基閉如甲磺酸根、對甲苯磺酸根、三氟甲磺酸根或鹵原子(Cl，Br，I)。R＝C1-15烷基或芐基。
或者
X＝對甲苯磺酸根或甲磺酸根。W，Pg和Y3＝如前所定義R＝C1-15烷基或芐基。反應式III中，步驟a式(7)烯丙型、炔丙型或丙二烯型鹵化物用羥甲基膦酸二酯的烷氧陰離子于-10℃到50℃親核取代6-24小時，獲得式(8)化合物。在步驟b，選擇性裂解羥基保護基Pg1得到(9)的醇。
或者，在如上所述相同反應條件下對甲苯磺酰氧基甲基膦酸二酯用式(10)醇的烷氧陰離子親核取代獲得式(8)化合物。
反應式IV從反應式I、II和III的中間體(3)(6)或(9)開始
表IV(續)或者
Lg＝對甲苯磺酸根、甲苯磺酸根、三氟甲磺酸根Cl，Br，或IPg，B和W＝如前所定義R＝C1-15烷基或芐基在反應式IV、V、VI中，分別向化合物(3)、(6)或(9)中加入適當的本文所定義的嘌呤或嘧啶堿基，分別得到化合物(13)、(16)和(19)。
反應式IV中，化合物(3)、(6)或(9)中羥基被核酸堿基取代是通過將醇轉化成離去基團(步驟a)，得到化合物(11)，然后與一摩爾當量保護形式(BPg3)的適當核酸堿基(B)反應，需要時在堿如碳酸鉀存在下在有機溶劑如無水二甲基甲酰胺中進行(步驟b)。反應物在約0℃到室溫下攪拌10-48小時，生成化合物(12)。然后可以多種方法將堿基脫保護并用溴化三甲基甲硅烷水解膦酸二酯，得到化合物(13)。Bronson J.等，J.Med.Chem.321457(1989)和Kim C.等，J.Mec.Chem.331207(1990)。脫酯化或脫保護步驟可以反過來進行。
或者，(3)、(6)和(9)中的羥基用核酸堿基取代可用Mitsunson反應進行-Jenny T.Tet.Lett.322029(1991)，得到中間體(12)后如上所述處理得到式(13)化合物。
反應式V從(3)、(6)或(9)開始，當Z＝CH2OCH2
B，Pg，W和T＝如前文所定義R＝C1-15烷基或芐基反應式V中，化合物(17)中連結于核酸堿基的甲氧甲基酯官能團(Z＝CH2OCH2)是這樣形成的(3)、(6)或(9)(當n＝1時)的位一化合物和多聚甲醛的混合物用氯化氫氣體在1，2-二氯乙烷中處理，形成中間體氯甲基醚(14)(步驟a)，后者在消除過量氫氯酸后用核酸堿基的甲硅烷基化形式(BTMS)處理，后者是用過量雙三甲基甲硅烷基乙酰胺處理相應的核酸堿基而獲得的(步驟b)。接下來的堿基脫保護和膦酸二酯的水解按反應式I(步驟c和d)所述進行，得到化合物(17)，Ogilvie K等，Can.J.Chem.603005(1982)和Ogilvie K等，Nucleosides and Nudeotides 2147(1983)。
反應式VI從中間體(3)、(6)或(9)開始，當Z＝CH2-O時
反應式VI中，適當功能化的醇(3)，(6)或(9)與1-羥基嘧啶或9-羥基嘌呤用三苯膦、偶氮二羧酸二乙酯在二甲基甲酰胺中通過Mitsunobu反應偶聯(步驟a)，Parkin A.，J.Chem.Soc、Perkin Trans、2983(1991)。按反應式IV所述進行堿基和膦酸二酯脫保護。
反應式AOHC-Y2-W-(CH2)n-OPg2
Lg＝離去基團如對甲苯磺酸根、甲磺酸根、三氟甲磺酸根、Cl，Br或I。
B，W，和T＝如前文所定義。
X＝鹵素R＝C1-15烷基或芐基對于具有連在磷原子上的亞甲氧基甲基的特便(T＝CH2OCH2)，可用如下的對稱二鹵化物(氯化物)烷基化反應式B反應式A的替代合成當T＝CH2OCH2和Z＝CH2
在反應式B引入式(21)的對稱單元這一特例中，連續進行反應式III的步驟a和反應式IV步驟b所述的取代，反應條件與分別在此兩例中所述條件相同，批應式III的步驟a引入甲氧基膦酸二酯得到化合物(22)，反應式IV的步驟b引入保護的核酸堿基得到化合物(23)。接下來堿基脫保護和膦酸二酯水解，得到化合物(24)。
反應式C對反應式A的補充當W＝CH＝CH＝CH
當Z＝0時，W總為丙二烯殘基，式(26)化合物從乙炔衍生物(24)(根據不同的T，由上述方法之一制得)用堿處理將乙炔官能團異構化為丙二烯官能團而獲得，如Phadtar S.等在J.Am.Chem.Soc.1115925(1989)中所述。
反應式D
Q＝-T-W-Z-BASE，其中T、W和Z如式I和II中所定義，BASE代表本文所定義的核酸堿基。R5和R5’如前文所定義。
在反應式D，步驟(a)中，二羥基膦酸酯(27)與亞硫酰氯反應得到二氧膦酸酯，后者再與醇R5OH反應得到二取代的膦酸酯(28)。步驟(b)中，二取代的膦酸酯(28)水解產生(29)。步驟(c)中，單酰氧基烷基單烷基膦酸酯(29)與亞硫酰氯如前所述進行反應，再與R5’OH反應生成不對稱二取代的膦酸酯，其中R5和R5’不同。
反應式E
如反應式D中所定義。
反應式E表示二羥基膦酸酯(27)與取代的氯甲基醚(31)在有機堿如取代的嗎啉存在下反應，生成二取代的膦酸酯(32)。
反應式F
如反應式D中所定義。
反應式F表示單酰氧烷基單烷基膦酸酯(29)與氯甲基醚(31)如前所述進行反應，生成單酰氧烷基膦酸酯(32)。
實施例1
E-9-(5-二羥基磷酰基-3-亞甲基-4-戊烯基)鳥嘌呤(其中X1為NH2，X2為OH，Z為CH2CH2，W為Wa，其中R1和R2都為H，T為T’為CH＝CH)。A步4-叔丁基二甲基氧基-2-亞甲基丁醛4-叔丁基二甲基氧基-2-乙酰氧基-1-丁醇(14g，50mmol)、粉狀分子篩、N-甲基-嗎啉N-氧化物(9.9g，75mmol)和四丙基銨過釕酸鹽(TPAP)10.34g，2.5mmol)在無水二氧甲烷(250ml)中的混合物于20℃攪拌過夜。將反應混合物濾過硅藻土，真空濃縮，在硅酸上快速層析純化標題產物(8.25g，77％)。B步E-5-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-3-亞甲基-1-戊烯基膦酸二乙酯將1.6M正丁基鋰的己烷溶液(4.7ml，7.45mmol)于-78℃氬氣下加至亞甲二膦酸四乙酯(2.14g，7.45mmol)與無水四氫呋喃(70ml)的混合物中。1小時后，滴加4-叔丁基二甲基氧基-2-亞甲基丁醛(1.14g，5.3mmol)的無水四氫呋喃(10ml)溶液。反應混合物于-78℃攪拌3小時，20℃攪拌過夜，然后用氯化銨飽和溶液水解，用乙醚萃取。在硅酸上快速層析分離標題產物(1.7g，91％)。C步E-5-羥基-3-亞甲基-1-戊烯基-膦酸二乙酯E-5-叔丁基二甲基甲硅烷氧基-3-亞甲基-1-戊烯基-膦酸二乙酯(1.7g，4.86mmol)和1M氯化四丁基氟化銨在四氫呋喃(8ml，8mmol)中的混合物于20℃攪拌2小時。然后真空濃縮反應混合物，在硅膠上快速層析純化標題產物(1.1g，94％)。D步E-5-對甲苯磺酰氧基-3-亞甲基-1-戊烯基-膦酸二乙酯E-5-羥基-3-亞甲基-1-戊烯基-膦酸二乙酯(1.07g，4.6mmol)、三乙胺(0.7ml，5mmol)、對甲苯磺酰氯(0.96g，5mmol)和二甲氨基吡啶(0.005g，0.04mmol)在無水二氯甲烷中的混合物于20℃攪拌4小時，真空濃縮，在硅酸上快速層析得到標題產物(1.55g，87％)。E步E-9-(5-二乙氧基膦酰基-3-亞甲基-4-戊烯基)-6-氯-2-氨基嘌呤6-氯-2-氨基嘌呤(0.74g，4.3mmol)、氫化鈉(0.175g，4.3mmol，油中，60％)在無水二甲基甲酰胺(10mmol)中的混合物于20℃攪拌30分鐘。然后加入E-5-對甲苯磺酰氧基-3-亞甲基-1-戊烯基-膦酸二乙酯(1.5g，3.9mmol)的無水二甲基甲酰胺(5ml)溶液，形成的混合物于20℃攪拌過夜。然后真空濃縮反應混合物，殘余物在硅酸上快速層析純化。得到標題產物(1.1g，73％)。F步E-9-(5-二羥基膦酰基-3-亞甲基-4-戊烯基)-6-氯-2-氨基嘌呤E-9-(5-二乙氧基膦酰基-3-亞甲基-4-戊烯基-6-氧-2-氨基嘌呤(0.96g，2.5mmol)和溴化三甲基甲硅烷(1.3ml，10mmol)在無水乙腈(5ml)中的混合物于20℃攪拌過夜。然后用甲酸(5ml)處理反應混合物，真空濃縮。粗產品(0.8g)不經進一步純化用于下步。G步E-9-(5-二羥基膦酰基-3-亞甲基-4-戊烯基)鳥嘌呤E-9-(5-二羥基膦酰基-3-亞甲基-4-戊烯基)-6-氯-2-氨基嘌呤(0.8g，～0.245mmol)粗品和1N鹽酸(5ml)的混合物于20℃攪拌過夜。真空濃縮反應混合物，用無水乙醇稀釋，冷卻生成標題產物(0.46g，60％)。
實施例2
E-9-[(4-二羥基磷酰基-2-亞甲基-3-丁烯氧基)甲基]鳥嘌呤(其中X1為NH2，X2為OH，Z為CH2CH2，W為Wa，其中R1和R2均為H，T為T’為CH＝CH)A步2-叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基-2-丙烯-1-醇將氯化叔丁基二苯基甲硅烷(45g，165mmol)的無水二氯甲烷(60ml)的溶液于0℃攪拌下滴加到2-羥甲基-2-丙烯-1-醇(12g，165mmol)、三乙胺(27.5ml)和4-二甲氨基吡啶(2g)的無水二氯甲烷(300ml)溶液中。然后于20℃攪拌此混合物過夜，用飽和氯化銨和鹽水洗滌。在硅膠上快速層析得到標題產物(19.4g，40％)。B步2-叔丁基二苯基甲硅烷氧甲基-2-丙烯醛
2-叔丁基二苯基甲硅烷氧甲基-2-丙烯-1-醇(25.5g，86.7mmol)、粉狀分子篩(26g)、N-甲基嗎啉-N氧化物(15.3g，130mmol)和四丙基銨過釕酸鹽(1.5g，4mmol)在無水二氯甲烷(400ml)中的混合物于20℃攪拌過夜。然后真空濃縮反應混合物，在硅膠上快速層析純化，得到標題產物(21g，83％)。C步E-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-1.3-丁二烯基膦酸二乙酯將1.6M的正丁基鋰己烷溶液(70ml，120mmol)于-78℃加至亞甲二膦酸四乙酯(34.5g，120mmol)無水四氫呋喃(150ml)溶液中。30分鐘后，滴加2-叔丁基二苯基甲硅烷氧基甲基-2-丙烯醛(21g，71.5mmol)的無水四氫呋喃溶液。反應混合物于-78℃攪拌4小時，20℃攪拌過夜，然后用氯化銨飽和溶液水解，用乙醚萃取。在硅膠上快速層析得到標題產物(20g，55％)。D步E-4-羥基-1.3-丁二烯基膦酸二乙酯將E-4-叔丁基二苯基甲硅烷氧基-1.3-丁二烯基膦酸二乙酯(11g，26.4mmol)，和氟化四丁基銨三水合物(10g，31mmol)在四氫呋喃(100ml)中的混合物于20℃攪拌2小時。真空濃縮反應混合物，用乙酸乙酯稀釋，用鹽水洗滌。在硅膠上快速層析得到標題產物(4.6g，80％)。E步E-9-[(4-二乙氧基磷酰基-2-亞甲基-3-丁烯氧基)甲基]-6-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基)-2-氨基嘌呤向多聚甲醛(0.17g，5.0mmol)，E-4-羥基-1.3-丁二烯基膦酸二乙酯(0.9g，4.5mmol)在無水1.2-二氯乙烷(5ml)中的0℃混合物中通入無水氯化氫15分鐘。于20℃攪拌反應混合物2小時，真空濃縮，用1.2-二氯甲烷(10ml)稀釋，并加至雙三甲基甲硅烷基-6-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基)-2-氨基嘌呤(6-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基)-2-氨基嘌呤(1.3g，5mmol)和雙三甲基甲硅烷基乙酰胺(2.5g)在1.2-二氯乙烷(5ml)中于60℃加熱1小時得到)和碘化四丁銨(0.19g，0.5mmol)的溶液中。于20℃攪拌反應混合物3小時，回流4小時，用飽和氯化銨溶液水解，用氯仿萃取。在硅膠上快速層析獲得標題產物(0.37g，96％)。F步E-9-[(4-二羥基膦酰基-2-亞甲基-3-丁烯氧基)甲基]鳥嘌呤E-9-[(4-二乙氧基膦酰基-2-亞甲基-3-丁烯氧基)甲基]-6-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基)-2-氨基嘌呤(10.24g，0.5mmol)和溴化三甲基甲硅烷(0.26ml，2mmol)在無水乙腈(3ml)中的混合物于20℃攪拌過夜。用甲醇(2ml)處理反應混合物，真空濃縮，在乙醇水中結晶得到標題產物(0.12g，65％]。
實施例3
9-(3-二羥基膦酰基甲氧基-2-亞甲基丙基)鳥嘌呤(其中X1為NH2，X2為OH，Z為CH2，W為Wa，其中R1和R2均為H，T為T″為CH2OCH2)A步(2-氯甲基-2-丙烯氧基甲基)膦酸二乙酯向羥甲基膦酸二乙酯(0.84g，5mmol)、1-氯-2-氯甲基-2-丙烯(0.95g，7.6mmol)和碘化四丁基銨(0.18g，0.5mmol)在無水四氫呋喃(10ml)中的混合物0℃下加入氫化鈉(0.24g，6mmol，油中60％)。于20℃攪拌此混合物過夜。用飽和氯化銨溶液水解反應混合物，用乙酸乙酯萃取，在硅膠上快速層析得到標題產物(0.35g，27％)。B步9-(3-二乙氧磷酰基甲氧基-2-亞甲基-丙基)-6-氯-2-氨基嘌呤(2-氯甲基-2-丙烯氧基甲基)膦酸二乙酯(0.285g，1.1mmol)、6-氯-2-氨基嘌呤(0.25g，1.5mmol)和碳酸鉀(0.24g，1.5mmol)在無水二甲基甲酰胺中的混合物于20℃攪拌2天。真空濃縮反應混合物，在硅膠上快速層析得到標題產物(0.22g，51％)。C步9-(3-二羥基膦酰基甲氧基-2-亞甲基-丙基)鳥嘌呤9-(3-二乙氧基磷酰基甲氧基-2-亞甲基-丙基)-6-氯-2-氨基鳥嘌呤(0.22g，0.56mmol)、溴化三甲基甲硅烷(0.43g，2.8mmol)和2.6-二甲基吡啶(0.59g，5.5mmol)在無水乙腈(2ml)中的混合物于20℃氬氣下攪拌24小時。然后，真空濃縮反應混合物，用1M NaOH(10ml)于20℃處理2天。用乙酸沉淀得到標題產物(0.11g，61％)。
實施例4
Z-9-(4-二羥基磷酰基甲氧基-2-丁烯基)鳥嘌呤(其中X1為NH2，X2為OH，Z為CH2，W為Wc，其中R1和R2均為H，T為T″為CH2OCH2)A步Z-(4氯-2-丁烯氧基)甲基膦酸二乙酯向羥甲基膦酸二乙酯(1.68g，10mmol)、Z-1.4-二氯-2-丁烯(1.9g，15mmol)、和碘化四正丁基銨(0.36g，1mmol)在無水四氫呋喃(15ml)中的混合物中0℃下加入氫化鈉(0.48g，12mmol，油中60％)。形成的混合物于20℃攪拌過夜，用飽和氯化銨水解，用乙醚萃取。在硅膠上快速層析得到標題產物(1.2g，45)。B步Z-9-(4-二乙氧基磷酰基甲氧基-2-丁烯基)-6-氯-2-氨基嘌呤Z-(4-氯-2-丁烯-氧基)甲基膦酸二乙酯(1.05g，4mmol)、6-氯-2-氨基嘌呤(1g，6mmol)和碳酸鉀(0.92g，6mmol)在無水二甲基甲酰胺(10ml)中的混合物于20℃攪拌2天。真空濃縮反應混合物，殘余物在硅膠上快速層析純化，得到標題產物(0.858，55％)。C步Z-9-(4-二羥基磷酰基甲氧基-2-丁烯基)鳥嘌呤Z-9-(4-二羥基膦酰基甲氧基-2-丁烯基)-6-氯-2-氨基嘌呤(0.788，2mmol)，溴化三甲基甲硅烷(1.5g，10mmol)和2.6-二甲基吡啶(2.15g，20mmol)在無水乙腈(10ml)中的混合物于20℃氬氣下攪拌24小時。真空濃縮反應混合物，殘余物用1MNaOH(15ml)于20℃處理2天。用乙醇∶水連續沉淀，得到標題化合物的鈉鹽(0.55g，75％)。
實施例5
9-(4-二羥基磷酰基甲氧基-2-丁炔基)鳥嘌呤(其中X1為NH2，X2為OH，Z為CH2，W為Wa，T為T″為CH2OCH2)。A步(4-氯-2-丁炔氧基)甲基膦酸二乙酯向羥甲基膦酸二乙酯(3.35g，20mmol)，1，4-二氯-2-丁炔(3.8g，30mmol)和碘化四正丁基銨(0.75g，2mmol)在無水四氫呋喃(100ml)中的混合物中，于0℃下分批加入氫化鈉(0.95g，24mmol，油中60％)。形成的混合物于0℃攪拌過夜。反應混合物于20℃攪拌過夜，用氯化銨飽和水溶液水解，用乙醚萃取。在硅膠上快速層析獲得標題產物(2.3g，30％)。B步9-(4-二乙氧基磷酰基甲氧基-2-丁炔基)-6-氯-2-氨基嘌呤(4-氯-2-丁炔氧基)甲基膦酸二乙酯(2.03g，8mmol)、6-氯-2-氨基嘌呤(2g，12mmol)和碳酸鉀(1.85g，12mmol)在無水二甲基甲酰胺(15ml)中的混合物于20℃氬氣下攪拌2天。真空濃縮反應混合物，在硅膠上快速層析純化殘余物，得到標題化合物(1.7g，65％)。C步9-(4-二羥基磷酰基甲氧基-2-丁炔基)鳥嘌呤9-(4-二乙氧基磷酰基甲氧基-2-丁炔基)-6-氯-2-氨基嘌呤(1.5ml，4mmol)、溴化三甲基甲硅烷(3g，20mmol)和2.6-二甲基吡啶(4.3g，40mmol)在無水乙腈(20ml)中的混合物于在氬氣下20℃攪拌1天。真空濃縮反應混合物，殘余物用1M氫氧化鈉(20ml)于20℃處理2天。在乙醇∶水中連續沉淀，得到標題化合物的鈉鹽(1.05g，70％)。
實施例6
9-(3-二新戊酰甲氧基膦酰基甲氧基-2-亞甲基丙基)鳥嘌呤(其中X1＝NH2，X2＝OH，Z＝CH2，W＝Wa其中R1和R2均為H，T＝T″＝CH2OCH2，R3和R4均為-O-CH(R6)-O-C(O)R5，其中R6為H)將N1N’-二環己基碳化二亞胺(1.13g，0.4mmol)和新戊酸氯甲酯(1.8g，12mmol)加至9-(3-二羥基磷酰基甲氧基-2-亞甲基丙基)烏嘌呤(630mg，2mmol)在無水DMF(10ml)中的混合物中，于20℃攪拌混合物過夜；然后濾除不溶物，真空濃縮濾液。殘余物用甲苯稀釋，用水洗滌。在硅膠上快速層析純化，用5％MaOH/CH2洗脫得到標題化合物。
實施例7核酸堿基修飾腺嘌呤衍生物在使用6-氯-2-氯基嘌呤的所有實驗中，也或以使用腺嘌呤，在用溴化三甲基甲硅烷處理膦酸二酯脫保護后得到相應的9-取代的腺嘌呤。胞嘧啶衍生物在所有實驗中，可用4-N-乙酰胞嘧啶代替6-氯-2-氨基嘌呤。脫保護可分兩步進行a)用氨的乙醇溶液處理去除N-乙酰基團，和b)用溴化三甲基甲硅烷處理水解膦酸二酯胸腺嘧啶衍生物在所有實驗中，可用胸腺嘧啶代替6-氯-2-氨基嘌呤。可用溴化三甲基甲硅烷處理進行膦酸二酯的水解。2.6-二氨基嘌呤通過溴化三甲基甲硅烷處理或在相應實驗中用2，6-二氨基嘌呤代替2-氯-2-氨基嘌呤可得到二氨基嘌呤類似物。
本發明化合物在醫療中有用，特別是在治療或預防病毒感染中，例如作為抗病毒藥有效地對抗DNA病毒(皰疹病毒1和2，巨細胞病毒、水痘一帶狀皰疹病毒，E-B病毒)，逆轉錄病毒(人免疫缺陷病毒1和2及維斯那病毒)和相關的臨床狀況如AIDS相關綜合組(ARC)，以及抗與腫瘤形成有關的病毒。本發明的抗病毒藥可作為單一治療藥使用，也可以與其它抗病毒藥聯合治療特別是人逆轉錄病毒感染；特別是人免疫缺陷病毒感染。特別優選與2’3’-二脫氧嘌呤核苷聯合治療，它們是2’，3’-二脫氧腺苷、2’，3’-二脫氧烏苷、2’，3’-二脫氧硫代肌苷和2’，3’-二脫氧肌苷。其它可能的聯合治療藥包括治療或預防病毒感染或相關狀況有效的藥物，如3’-疊氮-3’-脫氧胸腺嘧啶(Zidovudine)，2’，3’-二脫氧核苷，如2’，3’-二脫氧胞苷、2’，3’-二脫氧腺苷和2’，3’-二脫氧肌苷，非環核苷(如acyclovir)，干擾素如α-干擾素，腎分泌抑制劑如羧苯磺胺，核苷轉運抑制劑如潘生丁，以及免疫調節劑如白細胞介素II和粒巨細胞集落刺激因子。這種聯合治療的各化合物成分可或分劑或合劑同時使用，或在不同時間使用，如相繼使用，以取得聯合效果。
可用任何適當的方法測定本發明化合物的抗病毒效力。以下是檢測這些化合物效力的幾種代表性方法。對人免疫缺陷病毒(HIV)的MTT細胞存活力實驗。
MTT細胞存活力實驗最早是由Pauwe等描述的(J.Virol.Mth-ods，198820，309-321)。它是一種基于能存活又沒有死亡的細胞將黃色3-(4，5-二甲基-2-基)-2，5-二苯基-四唑翁溴化物(MTT)(Sigma Chemical Co.Ltd.)還原為藍色甲產物能力的比色實驗。這一還原反應是通過代謝活性細胞的線粒體脫氫酶進行的。該實驗能夠快速準確地評估潛在抗病毒藥物HIV活性，同時得到它們的細胞毒性，使得可以確定選擇性指數(S.I)。
使用對HIV感染高敏性的MT-4細胞，用HIV-1RF毒株感染。在一96孔平底塑料微滴定板(Sterilin Ltd.)的中央60孔中加入100ul含試驗化合物的系列稀釋的生長培養基，濃度為所需終濃度的2倍。外周的孔中加入無菌蒸餾水以防止在溫育時蒸發。對化合物的每個濃度，有兩套三孔，以便能同時評價化合物對感染和未感染細胞的作用。一些孔中不含藥物作為擬感染和病毒感染細胞的未處理對照。對指數生長期MT-4細胞計數，調節細胞數邊每孔5×104細胞。然后沉降細胞并分成兩組。一半細胞用病毒(100TCID50/5×104細胞)感染，另一半摸擬感染。室溫吸收病毒1小時。然后沉降細胞，用RPMI洗滌一次，然后再懸浮于一定體積培養其中使得能向微滴定板的每個孔中加入100μl。培養板在含5％CO2的孵箱中37℃溫育。
溫育6天后，向每孔中加入10μlMTT的PBS溶液(7.5mg/ml)，再于37℃溫育1小時。加入100μl10％(v/v)Triton X-100的酸性異丙醇溶液(2ml濃HCl/500ml溶劑)并混合使甲結晶溶解。最后用Multiskan MCC分光光度計(Flow Ladoratories)讀取540nm處的吸光度。對每一化合物，擬感染和病毒感染細胞的光密度(O.D.)讀數均對藥物濃度做圖。可用下式計算代表50％終點的O.D.值，從而可以確定試驗化合物的50％細胞毒劑量(CD50)和(IC50)(模擬感染組平均O.D.-病毒感染組平均O.D.)/2用C-8166檢測化合物的抗HIV活性的方法向一96孔平底塑料微滴定板中央60孔中加入100μl含系列稀釋的試驗化合物的生長培養基，濃度為所需終濃度的2倍。外周孔中加入無菌蒸餾水以防止在溫育時蒸發。化合物每個濃度使用三個孔。一些孔中不含藥物作為對照。將指數生長期C-8166細胞計數，調節細胞數至1×105細胞/孔。濃降細胞并用HIV感染，感染量為0.001-0.0001感染單位/細胞。
室溫下吸收病毒1小時。然后沉降細胞，用RPMI洗滌三次，再懸于一定體積培養基中使得可以向微滴定板的每孔中加入100μl。培養板在含5％CO2的孵箱中溫育。三天后觀察感染細胞，并根據含細胞體的存在打分+++＝50％-100％cpe；++＝10％-50％cpe；+＝＜10％cpe和○＝無合胞體。從每孔中收集100μl上清液，用ELISA測定P24病毒核抗原的水平。P24 ELISA一96孔‘U’形底微滴定板(Falcon，Becton Dickinson)的中央60孔用100μl親和純化的羊抗＝HIV-1-P24(Aalto Bioreagents，Rath-farnham，Dublin，Ireland，code D7320)在包被緩沖液(100mMNaH-CO3，PH8.5)中濃度為10μg/ml的溶液包被。此產品是用三種相當于HIV-1 BH-10毒株P24 gag蛋白的氨基酸283-297(LDIRQGPKEPFRDYV)；173-188(SALSEGATPODLNTML)和226-237(GQM-REPRGSDIA)的合成肽免疫羊而產生的。+4℃靜置培養板過夜讓抗體附著，然后用Tris緩沖鹽水(TBS)(0.144M Nacl，25mM TrispH7.5)用微滴定板洗滌器(Laminar Technologies)洗滌2次，然后用溶于TBS中的2％脫脂牛奶(Cadburys Marvel)于室溫封閉1小時(200μl/孔)。用TBS洗兩次后，向孔中加入100μl無細胞培養液，以及10μl 1％(v/v)兩性表面活性劑Empigtnl(Cal biochem)的溶液。根據所期望的P24水平，將培養溶篩至純細胞或1∶10或1∶100的稀釋度。樣品于室溫溫育過夜，再洗孔三次，與100μl第二抗-P24抗體——與堿性磷酸酯酶直接偶聯的EH12E1-AP(APP452)一起溫育，此抗體在含20％羊血清(Seralab)、2％脫脂牛奶(Cadburys Mavtl)和0.5％Tween20(Sigma chemical CO.)的TBS中，濃度為1∶3000。此抗體是由Bridget Ftrns、Richard Tedder和他們的同事在MiddlessexHospotal Medical School對HIV-1 CB1-1分離物產生的，并經分析它是針對一種含兩種不同肽序列的復合表位。它們是GHQAAMQMLKETINEEAAEWDRVHPVHAGIPLAPGQ(aa 193-227)和NPPIPVGEIYKRWII(aa 253-267)，并在不同HIV-1株間保守。EH12E1的堿性磷酸酯酶偶連物(EH12E-AP)是由Novo Biolabs，Cambridge，U.K.制備的。通過APP試劑庫得到此偶聯抗體。培養板用孵箱/搖床(Luminar Technologies)于37℃溫育1小時，然后用TBS洗孔三次。這些孔用市場上供應的堿性磷酸酯酶檢測和擴增試劑盒AMPAK(IQ(Bio)Ltd.)中提供的緩沖液最后洗滌，按制造商的指示加入50μl AMPAK底物。室溫30分鐘后，加入50μlAMPAK擴增劑，用酸停止反應后的紫色強度，在約10分鐘后用Multiskan Mcc/340分光光計(Flow Laboratorits)在492nm處讀取。
采用經ADP獲得的重組HIV-IP24(American BiotechnologiesInc.)，用從100ng/ml開始的一系列兩倍稀釋進行免疫檢測的標定。該檢測一般得到300-10,000pg/ml范圍內的線性反應，盡管每天之間存在差異。檢測化合物的抗皰疹(HSV-1和HSV-2)活性為了檢測，將適當生長培養基中的LeLa(人宮頸癌)細胞(0.8×105/0.1ml)或Vero(非洲綠猴腎)細胞(1.0×105/0.1ml)轉至一平底96孔(0.1ml細胞/孔)微滴定板(Falcon)上。在一加濕CO2(5％CO2，95％空氣)孵箱中37℃培養24小時后，培養物待用。
每次檢測從微滴定板培養物中吸出生長培養基并換入100μl維持培養基(細胞和病毒對照)或用維持培養基稀釋至2倍檢測濃度的化合物(毒性對照，實驗孔)。在加濕CO2孵箱中37℃培養3小時后，每個培養物中加入100μl維持培養基(細胞和毒性對照)或用維持培養基稀釋的病毒[1型單純性皰疹病毒(HSV-1；HF株，ATCC VR-260)或2型單純性皰疹病毒(HSV-2；G株，ATCC VR-734)](病毒對照，化合物實驗孔)。然后所有培養物于37℃培養，于48和72小時(皰疹病毒)或7、10和14天(CMV)用顯微鏡檢查病毒和化合物誘導的細胞病變效果(CPE)。CPE分級為0(無)、1+(25％)、3+(75％)或4+(100％)細胞單層破壞。然后這些數據用于計算化合物的50％抑制濃度(IC50)。檢測化合物的抗巨細胞病毒活性為進行檢測，將在適當生長培養基中的MRC-5細胞(1.2×105/0.1ml)轉至平底96孔(0.1ml細胞/孔)微滴定板上(Falcon)。在一加濕CO2(5％CO2，95％空氣)孵箱中于37℃培養24小時，培養物待用。
每次檢測從微滴定板培養物中吸出生長培養基并換入100μl維持培養基(細胞和病毒對照)或用維持培養基稀釋至2倍檢測濃度的的化合物(毒性對照，實驗孔)。在加濕CO2孵箱中37℃培養3小時后，每個培養物中加入100μl維持培養基(細胞和毒性對照)或用維持培養基稀釋的病毒[人巨細胞病毒(CMV-1；AD169株，ATCCVR-538)](病毒對照，化合物實驗孔)。然后所有培養物于37℃培養，于48和72小時(皰疹病毒)或7、10和14天(CMV)用顯微鏡檢查病毒和化合物誘導的細胞病變效果(CPE)。CPE分級為0(無)、1+(25％)、3+(75％)或4+(100％)細胞單層破壞。然后這些數據用于計算化合物的50％抑制濃度(IC50)。
鳥嘌呤的非環核苷酸衍生物通過鳥苷酸激酶磷酰化的效力(定義為Vmax/Km比)與用作參照底物的GMP的磷酰化效力比較。用于確定Vmax和Vm參數的實驗如Nave等在Arch.Biochem.Biophys.(1992)，295，253-257中所述。
活性成分的給藥量根據所用的具體劑量單位、治療時間、治療的患者年齡和性別和所治療疾病的性質和程度，在一寬范圍內變化。所用活性成分有效抗病毒量的總量一般為約1ng/kg到100mg/kg，優選3-25mg/kg。單位劑量可含有25-500mg活性成分，每天可用一次或多次。式I或II活性化合物可與藥物載體一起用常規劑量單位形式通過口服、腸外、表皮或透皮途徑給藥。
本文所用術語“患者”包括哺乳動物如小鼠、大鼠、貓、狗、牛、羊、豬和包括人的靈長類。
對口服給藥，可將化合物配制成固態或液態制劑，如膠囊、丸劑、片劑、錠劑、糖錠、熔化物、粉劑、溶液、懸液、或乳液。固體單位劑量形式可為膠囊，它可為普通的硬殼或軟殼明膠型，含有例如表面活性劑、潤滑劑、和惰性填充劑如乳糖、蔗糖、磷酸鈣、和玉米淀粉。在另一方案中，本發明化合物可與常規片基如乳糖、蔗糖、和玉米淀粉一起壓制成片，并結合粘合劑如阿拉伯膠、玉米淀粉、或明膠；給藥后幫助片劑破裂并溶解的崩解劑如馬鈴薯淀粉、藻酸、玉米淀粉、瓜爾膠；用于提高片劑顆粒的流動性防止片劑材料粘附在片劑沖模和沖床上的潤滑劑，如滑石粉、硬脂酸、或硬脂酸鎂、鈣或鋅；和用于提高片劑的美學性質使它們對病人更易接受的顏料、著色劑和調味劑。用于口服液態劑型的適當賦形劑包括稀釋劑如水和醇如乙醇、苯甲醇、和聚乙烯醇，添加或不添加藥用表面活性劑、懸浮劑、或乳化劑。
本發明式I化合物還可以腸外給藥，即皮下、靜脈內、肌內、或腹膜內，以生理可接受的稀釋劑中的化合物的可注射劑型給藥，其中還含有藥用載體，可為無菌液體或液體混合物如水、鹽水、葡萄糖水溶液和有關的糖溶液，醇如乙醇、異丙醇、或十六烷醇，二醇如丙二醇或聚乙二醇，甘油縮酮，如2，2-二甲基-1，3-二氧戊環-4-甲醇，醚如聚乙二醇400，油，脂肪酸，脂肪酸酯或甘油脂，或乙酰化脂肪酸甘油酯，加或不加藥學上可接受的表面活性劑如皂或洗滌劑，懸浮劑如果膠、carbomers、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、或羧甲基纖維素，或乳化劑和其它藥學上可接受的添加劑。可用于本發明的腸外制劑的油的實例為那些來自石油、動物、植物、或合成的油，例如花生油、豆油、芝麻油、棉籽油、玉米油、橄欖油、石油、和礦物油。適當的脂肪酸包括油酸、硬脂酸、和異硬脂酸。適合的脂肪酸酯例如為油酸乙酯和肉豆莞酸異丙酯。適宜的皂包括脂肪酸堿金堿鹽、銨鹽、和二乙醇胺鹽，適宜的洗滌劑包括陽離子洗滌劑如二甲基二烷基鹵化銨、烷基吡啶翁鹵化物、烷基胺醋酸鹽；陰離子洗滌劑如烷基、芳基和烯屬磺酸鹽，烷基、烯屬、醚、和單甘油酯硫酸鹽，和磺基琥珀酸鹽；非離子洗滌劑如脂肪胺氧化物，脂肪酸烷醇酰胺，和聚氧亞乙基聚亞丙基共聚物；和兩性洗滌劑如β-氨基丙酸烷基酯、和2-烷基咪唑啉季銨鹽，及其混合物。本發明的腸外用組合物一般在溶液中含有約0.5到約25％(重量)的活性成分。最好還使用防腐劑和緩沖劑。為了將注射位點的刺激減至最小或將其消除，這種組合物可含有親水-親脂平衡值(HLB)為約12到約17的非離子表面活性劑。在這種制劑中此表面活性劑的量為約5％到約15％(重量)。這種表面活性劑可以是具有以上HLB值的單一成分或兩種或多種成分的具有所需HLB的混合物。用于腸外用制劑的表面活性劑的實例是聚乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯類，例如脫水山梨醇單油酸酯和環氧乙烷與一疏水基的高分子量加合物，通過環氧丙烷與丙二醇縮合而成。
本發明化合物還可以表皮給藥。這可通過簡單地制備所需化合物的溶液來進行，優先用已知促進透皮吸收的溶劑如乙醇或二甲基亞砜(DMSO)，加或不加其它賦形劑來制備溶液。優選的表皮給藥使用貯器和多孔膜型的藥包或具有固體基質變化的藥包來進行。表皮給藥還包括將本發明化合物摻入適于眼或耳給藥的溶液或懸液中。
一些適宜的透皮裝置描述在美國專利3,742,951、3,797,494、3,996,934和4,031,894中。這些裝置一般含有限定其一個外表面的背襯、一個可透過活性藥物的限定另一外表面的粘性層和置于外表面間的含有活性藥物的至少一個貯器。或者，活性藥物包含在分布于整個可透性粘性層中的許多微膠囊中。無論那種情形，活性藥物從貯器或微膠囊通過一膜連續地運送至可透過活性藥物的粘性層，后者與患者的皮膚或粘膜接觸。如果活性藥物透過皮膚被吸收，則可將有控制的和預定流速的活性藥物施用于患者。當用微膠囊時，包被劑還起到膜的作用。
將本發明化合物透皮給品的另一裝置中，藥物活性化合物包含在基質中，它從基質中以預期的逐步、恒定和可控制的速度釋放。基質是通透性的，化合物通過擴散或微孔流釋放。釋放速度可以控制。這種系統不需要任何膜，見美國專利3,921,636中。在這些系統中至少有兩類釋放是可能的。當基質為非多孔性時發生擴散釋放。藥物活性化合物溶解在基質中并擴散透過基質本身。當藥物活性化合物在基質的小孔中通過液相運輸時，發生微孔流釋放。
下表代表本發明的一些優選化合物，其中R1和R2存在時均為氫，R3和R4均代表OH。
<p>下表為本發明的優選化合物，其中X1和X2分別為MH2和OH，Z為CH2，W為Wa，T為CH2OCH2。R5和R5’各自為CH3，CH2CH3，CH(CH3)2，CH2C(CH3)2或芐基，但R5和R5’不同。
還包括叔丁基作為R5或R5’。
權利要求
1.下式化合物
其立體異構形式和其混合物、互變異構形式或藥學上可接受的鹽，其中X3為H或CH3；X4為NH2或OH；Z不存在或為CH2，CH2CH2，CH2O或CH2OCH2；
其中R1和R2各自獨立地為H、F或CH2OH；T不存在或為T′或T″，其中T′為CH2CH2，CH＝CH，CH2CH(OH)，CH2CH(CH2OH)，或CH2CH(CH2F)，及T″為CH＝CH-CH(OH)，CH＝CH-CH(CH2OH)，CH2OCH2，CH2OCH(CH2OH)，CH2CH(CH2OH)CH2，CH2CH2CH(OH)，CH2CH2CH(CH2OH)，或CH2CH2CH(CH2F)；R3和R4各自獨立地為OH，OR5，OR5′或-O-CH(R6)-O-C(O)R5，條件是當R3或R4之一為OH時，另一個不為-O-CH(R6)-O-C(O)R5，其中R5和R5′各自獨立地為C1- 15烷基或芐基，R6為H或C1-10烷基，條件是當T為CH＝CH或CH2CH2，W為Wc，及Z為CH2時，X1為NH2和X2為OH不同時發生；條件是當W為We時，Z不存在或為CH2，條件是當T不存在時，W不為Wc，條件是當Z為CH2且W為Wa時，T不能為CH＝CH，及條件是當Z不存在及W＝Wc時，T不為CH＝CH。
2.權利要求1的化合物，其中當W＝Wa或Wb且T＝T″時，Z不為CH2OCH2；當W＝Wc或Wd且T＝T′時，Z不為CH2OCH2；當W＝Wc或Wd且T＝T″時，Z為CH2。
3.權利要求1的化合物，其中W為Wa或Wc。
4.權利要求1的化合物，其中T為T′，T′為CH＝CH。
5.權利要求1的化合物，其中T為T″，T″為CH2OCH2。
6.權利要求1的化合物，其中Z為CH2或CH2O。
7.含有權利要求1的化合物和藥學上可接受的載體的藥物組合物。
8.權利要求1的化合物的用途，其任選與藥學上可接受的載體結合用于制備治療DNA病毒、逆轉錄病毒或腫瘤形成中相關病毒的病毒感染的藥物組合物。
9.下式化合物、其立體異構體形式和其混合物、其互變異構體形式或藥學上可接受的鹽的制備方法
其中X3為H或CH3；X4為NH2或OH；Z不存在或為CH2，CH2CH2，CH2O或CH2OCH2；W為
其中R1和R2各自獨立地為H、F或CH2OH；T不存在或為T′或T″，其中T′為CH2CH2，CH＝CH，CH2CH(OH)，CH2CH(CH2OH)，或CH2CH(CH2F)，及T″為CH＝CH-CH(OH)，CH＝CH-CH(CH2OH)，CH2OCH2，CH2OCH(CH2OH)，CH2CH(CH2OH)CH2，CH2CH2CH(OH)，CH2CH2CH(CH2OH)，或CH2CH2CH(CH2F)；R3和R4各自獨立地為OH，OR5，OR5′，或-O-CH(R6)-O-C(O)R5，條件是當R3或R4之一為OH時，另一個不為-O-CH(R6)-O-C(O)R5，其中R5和R5各自獨立地為C1-15烷基或芐基，R6為H或C1-10烷基，條件是當T為CH＝CH或CH2CH2，W為Wc，及Z為CH2時，X1為NH2和X2為OH不同時發生；條件是當W為We時，Z不存在或為CH2，條件是當T不存在時，W不為Wc，條件是當Z為CH2且W為Wa時，T不能為CH＝CH，及條件是當Z不存在及W＝Wc時，T不為CH＝CH，該方法包括下式化合物的脫保護步驟
其中R為如前文所定義的R5、R5′或CH-(R6)-O-C(O)R5，Pg為保護基，Base為
和任選地水解生成
全文摘要
公開了可用作抗病毒藥的某些嘌呤或嘧啶的新不飽和膦酸酯衍生物,用于制備它們的方法和這些化合物作為對抗DNA病毒、逆轉錄病毒和腫瘤形成中相關病毒的抗病毒藥的用途。
文檔編號C07F9/6512GK1229084SQ99101008
公開日1999年9月22日 申請日期1999年1月7日 優先權日1993年4月1日
發明者P·卡薩拉, J·F·納沃, S·哈拉茲 申請人:默里爾多藥物公司