專利名稱：：旋光的反式－3－取代的縮水甘油酸酯的制備方法
技術領域：
：本發明涉及旋光的反式-3-取代的縮水甘油酸酯的制備方法。更具體地說，本發明涉及可用于藥物化合物合成的中間體的反式-3-(取代的或未取代的苯基)縮水甘油酸酯的旋光異構體的制備方法以及所述旋光異構體的用途。硫氮酮鹽酸鹽，其化學名稱是(2S，3S)-3-乙酸基-5-[2-(二甲氨基)乙基]-2，3-二氫-2-(4-甲氧苯基)-1，5-苯并硫雜吖庚因-4(5H)-酮鹽酸鹽，是廣泛用作用于治療心絞痛，原發性高血壓等的鈣通道阻滯劑的藥物化合物(MerkIndex，XIIEd.，P541)。為了制備硫氮酮，正如日本專利公告第46-16749，53-18038和61-52142號中所公開的，傳統的已知方法是使用外消旋的反式-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸酯作原料并在合成的較后階段進行旋光拆分。在日本專利公開第60-13776號中也提出了制備硫氮酮的方法，該方法使用了通過外消旋的反式-縮水甘油酸酯的旋光拆分得到的(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯。因此，現已對旋光的反式-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸酯的不同制備方法進行了研究，例如，提出了如下所述的幾種方法(a)一種方法，包括將外消旋的反式-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯水解形成堿金屬鹽，使用例如(-)-α-甲芐基胺的光學拆分劑以形成其非對映異構體的鹽，拆分該鹽并重新酯化所得到的旋光的鹽(日本專利公開第61-145174號和第2-231480號)，(b)一種方法，包括使具有不對稱酯基如(-)基，(-)-2-苯基環己基或(-)-8-苯基基的氯乙酸酯與對-茴香醛進行達村斯反應(日本專利公開第61-268663，2-17170和2-17169號)，(c)一種方法，包括將消旋的反式-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯中的(2S，3R)-異構體進行酶催化不對稱水解，并回收剩余的(2R，3S)-異構體(日本專利公開第2-109995和3-15398號以及WO90/04643號)，(d)一種用于不對稱合成(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯的方法，包括在不對稱催化劑存在下，使反式-4-甲氧基肉桂酸甲酯進行鋨氧化作用得到旋光的二醇，并使二醇進行分子內的閉環作用得到所要的化合物(WO89/02428和WO89/10350)，和(e)一種方法，包括用丁醇使外消旋的反式-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯中的(2S，3R)-異構體進行酶催化不對稱酯基轉移作用得到(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯(日本專利公開第4-228095和6-78790號)。現亦知道，除硫氮酮外，一些1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物具有很好的藥理活性。例如日本專利公開第60-202871號中公開了在2-和3-位上具有硫氮酮的反式絕對構型的苯并硫雜吖庚因衍生物具有血小板凝聚抑制活性等。現還知道，用于合成所述衍生物的(2S，3R)-3-(4-甲基苯基)縮水甘油酸甲酯可通過外消旋的反式-3-(4-甲基苯基)縮水甘油酸甲酯的酶催化不對稱水解來制備(日本專利公開第3-175995號)。日本專利公開第8-259552號公開了由外消旋物以高旋光純度得到反式-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯的兩種異構體的方法，該方法是通過將外消旋物中的(2S，3R)-異構體和丁醇進行酶催化的不對稱酯基轉移，回收未經酯基轉移的(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯，并將經酯基轉移得到的產物即(2S，3R)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸丁酯進行化學酯基轉移形成相應的甲酯。日本專利公開第4-217969公開了得到反式-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯的(2R，3S)-異構體的結晶的方法，該方法通過在加熱條件下將(2S，3R)-異構體和(2R，3S)-異構體的等摩爾混合物和(2R，3S)-異構體溶解在叔丁基甲基醚溶劑中，加入(2R，3S)-異構體晶種，結晶(2R，3S)-異構體，由此得到結晶的(2R，3S)-異構體，其量稍大于最初與等摩爾混合物一起溶解的(2R，3S)-異構體的量。日本專利公開第5-301864號中也公開了獲得反式-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸的4-氯-3-甲基苯基酯的(2R，3S)-異構體的結晶的方法，該方法通過將(2R，3S)-異構體和(2S，3R)-異構體的等摩爾混合物和(2R，3S)-異構體在四氫呋喃中熱溶解，加入(2R，3S)-異構體的晶種，在30℃下結晶(2R，3S)-異構體，從而得到(2R，3S)-異構體的結晶，其量稍大于最初與等摩爾混合物一起溶解的(2R，3S)-異構體的量。另外，日本專利公開第8-259552號中公開了從(2R，3S)-異構體和(2S-3R)-異構體的等摩爾混合物中得到反式-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯的(2R，3S)-異構體的方法，該方法通過將等摩爾混合物中的(2S，3R)-異構體與丁醇進行酶催化不對稱酯基轉移直到(2S，3R)-丁酯/(2S，3R)-甲酯的摩爾比為7.8/1，并從其中結晶出(2R，3S)-異構體。然而，在該方法中，為了避免由于少量殘余的未酯化的(2S，3R)-甲酯的結晶污染所需的(2R，3S)-甲酯，應將結晶作用停止在一定階段，在該階段中(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯以大于未進行酯基轉移的(2S，3R)-異構體的量仍殘留在母液中。這樣，盡管在酯基轉移反應中，(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯幾乎不發生酯基轉移，并且(2S，3R)-異構體的酯基轉移作用的轉化率是高的，但以結晶形式得到的(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯的收率仍并不令人滿意。本發明的目的是提供一種用簡單方法以高收率和高旋光純度旋光拆分反式-3-(取代的或未取代的苯基)縮水甘油酸酯的方法。本發明的另一個目的是提供一種從含有反式-3-(取代的或未取代的苯基)縮水甘油酸酯的旋光異構體混合物的溶液中以高純度和高收率結晶出所需的所述旋光異構體的方法，這是因為與已知方法相比，所需旋光異構體能被結晶直到母液中殘留的所需旋光異構體濃度是極低的程度。本發明的又一個目的是提供一個從外消旋物的酶催化不對稱酯基轉移的反應混合物中以高純度結晶所需的反式-3-(取代或未取代的苯基)縮水甘油酸酯的所需旋光異構體的方法，和已知方法相比，所需旋光異構體能被結晶直到其在母液中的殘留濃度是極低的程度。本發明的上述和其它目的通過下文的描述是明顯的。本發明的發明人發現，如果在溶液中含有外消旋的反式-3-(取代的或未取代的苯基)縮水甘油酸酯和一種酯化合物，該酯化合物和外消旋酯的一種異構體的區別僅在于酯基不同并且具有比反式-3-(取代的或未取代的苯基)縮水甘油酸酯的異構體更高的溶解度，那么具有與酯化合物相同的絕對構型的異構體的結晶作用將被阻止。因此，根據本發明，提供了制備式(I)所示的反式-3-取代的縮水甘油酸酯化合物的旋光異構體的方法式中，A環是取代的或未取代的苯環，R1是酯基，該方法包括制備含有酯化合物(I)的一種旋光異構體(A)和另一種旋光異構體(B)以及酯化合物(B’)的溶液，由于在2-和3-位上不對稱碳原子的存在，(A)和(B)都為旋光異構體，(B’)和異構體(B)的不同僅在于酯基R1，從溶液中結晶旋光異構體(A)，由于酯化合物(B’)的存在，達到旋光異構體(A)結晶而旋光異構體(B)不沉淀的程度，如果酯化合物(B’)不存在，則旋光異構體(B)會沉淀，并分離出旋光異構體(A)的結晶。可結晶出旋光異構體(A)的溶液還可含有少量酯化合物(A’)，其與旋光異構體(A)的區別僅在于酯基R1，并具有與酯化合物(B’)相同的酯基。可結晶出旋光異構體(A)的溶液可以是通過在具有立體選擇性的酯基轉移能力的酶存在下，使旋光異構體(A)和(B)與醇的溶液進行酯基轉移作用，以使異構體(B)和醇發生酯基轉移從而產生酯化合物(B’)而得到的溶液。這樣，本發明還提供了制備具有式(I)的反式-3-取代的縮水甘油酸酯化合物的旋光異構體的方法式中，A環是取代的或未取代的苯環，R1是酯基，該方法包括在醇和具有立體選擇性的酯基轉移能力的酶存在下，使酯化合物(I)的一種旋光異構體(A)和另一種旋光異構體(B)的混合物，由于在2-和3-位上不對稱碳的存在，二者都是旋光異構體，進行酯基轉移，從而使旋光異構體(B)和醇進行酯基轉移產生酯化合物(B’)直到酯化合物(B’)/異構體(B)的摩爾比落到13/7-7.8/1的范圍內，酯化合物(B)與異構體(B)的區別僅在于酯基R1，從所得到的含有異構體(A)，未酯基轉移的異構體(B)和酯化合物(B’)的溶液中結晶出旋光異構體(A)，并分離出異構體(A)，其旋光純度至少為99％，以旋光異構體(A)的初始量為基準，收率至少為75％。在分離出異構體(A)之后，通過使母液中的酯化合物(B’)進行化學酯基轉移，將其轉化為異構體(B)，結晶異構體(B)并隨后分離，這樣也能以高純度和高收率獲得另一個旋光異構體(B)。根據本發明，從含有酯(I)的兩種旋光異構體和一種與該異構體之一的區別僅在于酯基的酯化合物的混合物的溶液中可以高純度結晶得到反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的旋光異構體，與傳統的方法相比，結晶能達到在母液中的所需旋光異構體的濃度是很低的程度。另外，從外消旋的反式-3-取代的縮水甘油酸酯中，通過進行外消旋酯的酶催化不對稱酯基轉移作用，并隨后從所得的反應混合物中結晶出所需異構體，可以用簡單的方式以高收率得到高純度的所需異構體。圖1通過使用溫度和時間參數說明了從含有旋光異構體(A)和(B)和酯化合物(B’)的溶液(a)中結晶出旋光異構體(A)的條件，但是由于酯化合物(B’)的存在，旋光異構體(B)不會沉淀出來，盡管在沒有酯化合物(B’)時，旋光異構體(B)將會沉淀出來。就此而論，假設在所述溶液(a)中旋光異構體(A)和(B)和酯化合物(B’)的比率足以阻止旋光異構體(B)的結晶。在本發明中，一種溶液被用于結晶(下文稱為“溶液ABB’”)，其中將具有式(I)的反式-3-取代的縮水甘油酸酯的一種旋光異構體(A)和另一種旋光異構體(B)與酯化合物(B’)溶解在溶劑中，式(I)中A環是取代的或未取代的苯環，R1是酯基，由于在酯化合物(I)的2-和3-位上的不對稱碳的存在，(A)和(B)都是旋光異構體，酯化合物(B’)和旋光異構體(B)的區別僅在于酯基。含有異構體(A)和(B)和酯化合物(B’)的溶液中還可含有少量的酯化合物(A’)(下文稱為“溶液AA’BB’”)，其中酯化合物(A’)與異構體(A)的不同僅在于酯基R1并與酯化合物(B’)具有相同的酯基R1。本發明中使用的反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)，即其旋光異構體(A)和(B)的混合物，是式(I)所示化合物，其中A環是取代的或未取代的苯環，并且R1是能使結晶所用的溶劑中的反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)被結晶出來的酯基。所述的反式-3-取代的縮水甘油酸酯是例如結構式(I)所示的化合物，其中A環是可以被下列基團取代的苯基(a)直鏈或支鏈的低級烷基，例如甲基，乙基，丙基，異丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正己基，2-己基或3-己基；(b)直鏈或支鏈的低級烷氧基，例如甲氧基，乙氧基，丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，仲丁氧基，叔丁氧基，正己氧基，2-己氧基或3-己氧基；或(c)鹵原子，例如，氟原子，氯原子，溴原子或碘原子，且R1是(a)直鏈或支鏈的低級烷基，例如甲基，乙基，丙基，異丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正己基，2-己基或3-己基；(b)被取代的環烷基，例如2-苯基-環烷基；或(c)取代的或未取代的芳基，例如，4-氯-3-甲苯基。反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的優選例子是例如結構式(I)的化合物，其中A環是甲苯基或甲氧苯基且R1是甲基，乙基，2-苯基環己基或4-氯-3-甲苯基。特別地，其中A環是4-甲苯基或4-甲氧苯基且R1是甲基或乙基的式(I)的化合物是更優選的化合物。任何酯基可以用作酯化合物(B’)的酯基，只要其能使酯化合物(B’)在結晶所用的溶劑中具有好的溶解度。酯化合物(B’)的酯基是，例如，(a)可具有取代基和具有比旋光異構體(B)的酯基R1更多的碳原子的直鏈或支鏈的烷基，例如，丙基，異丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正戊基，2-戊基，3-戊基，正己基，2-己基，3-己基，正庚基，2-庚基，3-庚基，4-庚基，正辛基，2-辛基，3-辛基，4-辛基，正壬基，2-壬基，3-壬基，4-壬基，5-壬基，正癸基，2-癸基，3-癸基，4-癸基或5-癸基；(b)可具有取代基的烷氧基烷基，例如，甲氧基甲基，乙氧基甲基，丙氧基甲基，甲氧基乙基，甲氧基丙基，甲氧基丁基，乙氧基乙基或丙氧基丙基；和(c)可具有取代基的芳基烷基，例如，芐基，苯乙基，苯丙基或萘甲基。直鏈或支鏈的烷基(a)和烷氧基烷基(b)的取代基包括例如，鹵原子如氟原子，氯原子，溴原子或碘原子。芳基烷基(c)的取代基包括例如，直鏈或支鏈的低級烷基如甲基，乙基，丙基，異丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正己基，2-己基或3-己基；直鏈或支鏈低級烷氧基如甲氧基，乙氧基，丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，仲丁氧基，叔丁氧基，正己氧基，2-己氧基或3-己氧基；鹵原子如氟原子，氯原子，溴原子或碘原子，等等。如果反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的酯基是甲基或乙基，那么酯化合物(B’)的酯基的優選例子是，例如，異丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正戊基，正己基，正辛基，正壬基，正癸基，芐基和苯乙基。另外，酯化合物(B’)的絕對構型可以是(2R，3S)和(2S，3R)之一。如果將(2R，3S)-酯化合物(B’)溶解在溶液中，則能結晶(2S，3R)-異構體(A)得到高純度的晶體，和傳統的方法相比，結晶能達到在母液中(2S，3R)-異構體(A)的濃度是很低的程度。另一方面，如果將(2S，3R)-酯化合物(B’)溶解在溶液中，則能結晶(2R，3S)-異構體(A)得到高純度的晶體，和傳統的方法相比，結晶能達到在母液中(2R，3S)-異構體(A)的濃度是很低的程度。因此，和傳統的方法相比，在任何一種情況下都能以極高的收率得到所需產物。任何能用于重結晶反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的溶劑也可以用作本發明的結晶溶劑。這樣的結晶溶劑的實例是，例如，醇溶劑如甲醇，乙醇，正丙醇，異丙醇或正丁醇；醚溶劑如乙醚，叔丁基甲基醚，二異丙醚，四氫呋喃或二氧雜環己烷；可被鹵原子取代的芳烴溶劑如苯，甲苯，二甲苯，氯苯或二氯苯；可被鹵原子取代的脂族烴溶劑如己烷，環己烷，正庚烷，正辛烷，二氯甲烷，氯仿，1，2-二氯乙烷或四氯化碳；酯溶劑如乙酸甲酯或乙酸乙酯；等等。所述溶劑可單獨或混合使用。根據反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)和酯化合物(B’)的酯基以及酯(I)的苯基上的取代基，可選擇合適的溶劑。優選使用溶劑，其中反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的旋光異構體(A)的溶解度隨溫度而顯著變化，并且酯化合物(B’)的溶解度遠遠大于旋光異構體(A)的溶解度。例如當反式-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯用作酯(I)并且將其正丁酯用作酯化合物(B’)時，優選使用甲醇，乙醇，二甲苯等作為溶解所述化合物的溶劑。溶劑的合適用量可以在旋光異構體(A)和(B)以及酯化合物(B’)能被一次溶解并且旋光異構體(A)能通過降低溶液的溫度而結晶出來的范圍內決定。這樣，根據旋光異構體(A)和(B)和酯化合物(B’)的種類，其比例，結晶溫度等，可通過實驗發現溶劑用量的適當范圍。一般，當所用溶劑中旋光異構體(A)和(B)的溶解度大且溶解度隨溫度而顯著變化時，有可能降低溶劑用量。例如，如果將下述反式-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸酯的混合物溶解在100ml的二甲苯中并且將所得溶劑冷卻到-10℃，則即使是在溶液中(2R，3S)甲酯的濃度小于(2S，3R)甲酯的濃度的范圍內，也僅有(2R，3S)甲酯能從溶液中有效結晶出來。溶解在100ml二甲苯中的縮水甘油酸酯混合物(2R，3S)甲酯49克(2S，3R)甲酯14克(2S，3R)正丁基酯39克結晶出(2R，3S)甲酯后殘留在溶液中的縮水甘油酸酯的組成(2R，3S)甲酯9克(2S，3R)甲酯無變化(2S，3R)正丁基酯無變化在結晶之前，溶液中旋光異構體(A)的濃度隨異構體(A)和溶劑的種類，結晶的溫度等而變化，但是一般在0.5-4摩爾/升之間。在本發明方法的溶液中，需要旋光異構體(A)/旋光異構體(B)比率在一定范圍內，在此范圍內旋光異構體(A)比旋光異構體(B)更容易結晶，用酯化合物(B’)抑制旋光異構體(B)的結晶。即使是在如果酯化合物(B’)不存在時旋光異構體(B)將沉淀出來的(A)/(B)比率條件下，仍可用本發明的方法以晶體得到旋光異構體(A)。當然，在本發明的方法中可使用并優選使用含有大于旋光異構體(B)的量的旋光異構體(A)的溶液，這是因為除了通過由于酯化合物(B’)的存在來抑制異構體(B)的結晶從而得到的旋光異構體(A)的結晶之外，還能以晶體形式得到額外大量的旋光異構體(A)。因此可能由含有較異構體(B)更大量的異構體(A)的溶液開始實施本發明的方法。而且，酯化合物(B’)對于旋光異構體(B)的結晶的抑制作用隨著酯化合物(B’)/旋光異構體(B)的比率的增加而增加，并可得到增加量的旋光異構體(A)。因此，酯化合物(B’)/旋光異構體(B)的比率越高，在本發明的方法中越被優選。在本發明用于結晶的初始溶液中的這些化合物的比率隨著在結晶中使用的酯化合物(B’)的酯基和溶劑的種類而變化。一般，旋光異構體(A)/旋光異構體(B)的摩爾比是約4/6-約10/1，并且酯化合物(B’)/旋光異構體(B)的摩爾比是在約5/3-約10/1。異構體(A)/異構體(B)的摩爾比優選約1/1-約4/1，并且酯化合物(B’)/異構體(B)的摩爾比優選約2/1-約7.8/1。在本發明的方法中，也能從含有除異構體(A)和(B)和酯化合物(B’)以外的其他組分的溶液進行結晶。例如，除了所述的三個組分外，溶液還可以含有與旋光異構體(A)的區別僅在于酯基的旋光異構體(酯化合物(A’))。如果在溶液中含有酯化合物(A’)，則酯化合物(A’)/異構體(A)的摩爾比優選至多是酯化合物(B’)/異構體(B)的摩爾比的9/35，這樣酯化合物(A’)對異構體(A)的結晶的抑制作用能降低至最低程度，并且能以高純度得到大量的異構體(A)。也就是說，雖然酯化合物(A’)的存在能抑制旋光異構體(A)的結晶，但是在用于本發明結晶的溶液中可存在酯化合物(A’)，只要因為酯化合物(B’)對旋光異構體(B)的結晶的抑制作用能僅結晶出旋光異構體(A)即可。當溶液中存在的酯化合物(B’)對異構體(B)的結晶的抑制作用大于酯化合物(A’)對異構體(A)的結晶的抑制作用時，異構體(A)比異構體(B)容易結晶出來，并且用本發明的方法可得到異構體(A)。在本發明的方法中，溶液中需要存在至少三種異構體，即旋光異構體(A)和(B)和酯化合物(B’)。在這方面，本發明的方法明顯不同于從僅含有異構體(A)和(B)的溶液中選擇性結晶的方法。本發明的方法還利用了酯化合物(B’)對異構體(B)的結晶的抑制作用，并且通過一個結晶-分離步驟實現了所需異構體(A)的分離。在這些方面，本發明的方法也不同于必須重復下述步驟(i)和(ii)的選擇性結晶法(i)將旋光異構體(A)的晶種加入僅含有異構體(A)和(B)的溶液中以結晶和分離出旋光異構體(A)，和(ii)將旋光異構體(B)的晶種加入在步驟(i)中所得的溶液中以結晶和分離出旋光異構體(B)。而且，本發明的方法不同于選擇性結晶法，其中后者的旋光異構體的結晶必須使用含有較大量的一種旋光異構體和較少量的另一種旋光異構體的溶液。與此相反，根據本發明的方法，旋光異構體(A)的結晶可以在從溶液中旋光異構體(A)＞＞旋光異構體(B)至溶液中旋光異構體(A)＜旋光異構體(B)的寬的范圍內進行。本發明的方法相應地包括由還含有旋光異構體(A)的晶體的溶液進行結晶的實施方案。然而，本發明不包括從不含有至少旋光異構體(B)和酯化合物(B’)之一的溶液中結晶出旋光異構體(A)，這是因為不可能存在對旋光異構體(B)的結晶的抑制作用。按照本發明的方法的結晶必須在反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的旋光異構體(A)被結晶出來，但是旋光異構體(B)和酯化合物(B’)不被沉淀出來的溫度下進行。僅在溶液被允許放置一定時間后開始旋光異構體(B)的結晶的溫度包括在本發明的溫度范圍內。所述結晶溫度隨反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的種類，溶劑的種類和將要進行結晶作用的溶液的組成而變化。考慮到反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的環氧乙烷環的穩定性，不希望在較高的溫度下通過溶解旋光異構體(A)和(B)和酯化合物(B’)來制備結晶溶液。優選在不超過70℃溫度下進行溶解，并在不高于室溫的溫度下進行結晶。而且，一般當溶劑的量大時，不發生異構體(A)的結晶，除非溶液被冷卻至低溫，然而當溶劑的量少時，即使在相對高的溫度下結晶也能發生。因此，當以工業規模實施本發明的方法時，從溶劑的量，設備和能量的觀點看，優選降低溶劑的量并且在約室溫時從濃縮溶液中進行結晶。另一方面，當從濃縮溶液中進行結晶時，產物常常會含有增加量的雜質量。因此，從純度的觀點出發，優選使用大量溶劑并在低溫下進行結晶。為此，為了使旋光異構體(A)的結晶能有效進行，應該根據反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的種類，酯化合物(B’)的酯基，所用溶劑的種類和將要進行結晶作用的溶液的組成，用實驗測定最佳溫度范圍。例如，當旋光異構體(A)和(B)是甲酯且酯化合物(B’)是正丁酯并從甲醇中進行結晶時，優選在-30至+15℃的溫度下進行結晶。其它情況下可采用相似的溫度范圍。在本發明的方法中，由于旋光異構體(B)的結晶被酯化合物(B’)抑制，因而可在沒有任何非常嚴格的溫度控制條件下得到不受旋光異構體(B)的任何污染的旋光異構體(A)，而溫度控制對于選擇性結晶是必要的，選擇性結晶是利用具有相同溶解度的旋光異構體間的沉淀速度的差別。因此，本發明允許的溫度范圍比選擇性結晶法更寬。根據本發明的方法，旋光異構體(B)的結晶被酯化合物(B’)抑制。當發生旋光異構體(B)沉淀時，旋光異構體(B)和酯化合物(B’)一同以類似無定形狀被沉淀出來。旋光異構體(A)的結晶在視覺上與所述沉淀不同。相應地，按照本發明的旋光異構體(A)的結晶可從含有旋光異構體(A)和(B)和酯化合物(B’)的溶液進行，該結果可進行到如果不存在酯化合物(B’)時旋光異構體(B)將會沉淀出來的程度。因為能否達到所述程度取決于旋光異構體(A)和(B)和酯化合物(B’)的溶解度，所以即使在某溫度下未達到所述程度，也可以在另一個溫度下達到所述程度，反之亦然。在下文中，由通過使用溫度和時間參數來說明按本發明的方法所能達到的程度的圖1解釋從含有旋光異構體(A)和(B)和酯化合物(B’)的溶液中結晶出旋光異構體(A)，但同時由于酯化合物(B’)的存在而不沉淀出異構體(B)的條件，盡管在此條件下如果沒有酯化合物(B’)，旋光異構體(B)將會沉淀出來。就此而言，假設溶液中旋光異構體(A)的初始濃度大于旋光異構體(B)的濃度，并且溶液中酯化合物(B’)的量足以抑制旋光異構體(B)的結晶。溶液(a)是完全均相的溶液。如果冷卻溶液(a)，則異構體(A)在(b)點開始結晶。如果進一步冷卻溶液，在溶液中過量于異構體(B)的異構體(A)結晶達到(c)點，在該點異構體(A)/異構體(B)的摩爾比率為1/1。理論上講，在溶液(a)的冷卻過程中，例如，從(b)點至(c)點可能僅結晶出異構體(A)。然而，在日本專利公開第8-259552號所公開的方法中，異構體(A)被結晶僅能達到在結晶作用后的母液中異構體(A)/異構體(B)的摩爾比為約1.3/1的程度。這是因為根據一般的結晶技術的知識，如果將溶液(a)從(b)點冷卻至(c)點，則溶液中旋光異構體(B)/旋光異構體(A)的比率通過旋光異構體(A)的結晶的沉淀而增加，并且降低了旋光異構體(B)的溶解度。因此，溶液的波動即溶液的溫度，濃度等的部分不均勻性對異構體(B)的結晶產生影響。在(c)點的溶液含有等量的異構體(A)和(B)。因此，當從(c)點冷卻溶液時，認為旋光異構體(A)和(B)以其等摩爾混合物的形式被結晶。然而，在本發明中，因為在溶液中存在酯化合物(B’)，因此抑制了異構體(B)的結晶。這樣，即使從(c)點進一步冷卻溶液，結晶出異構體(A)，但異構體(B)不會被結晶出來，所以可增加異構體(A)的收率。經過(c)點以后，如果進一步冷卻溶液到更低溫度，溶液最終達到(d)點，此時整個溶液變得渾濁，不僅異構體(A)被結晶出來，而且類似無定形狀的異構體(B)和酯化合物(B’)被沉淀出來。因此，必須在高于(d)點的溫度下實施本發明的方法。在經過(c)點后，如果進一步冷卻溶液達到例如(e)點，并在該溫度下將溶液保持一段時間，在經過t時間后，溶液到達(f)點，此時整個溶液變得渾濁并有和(d)點相同的現象產生。即被酯化合物(B’)抑制沉淀的形成的異構體(B)與酯化合物(B’)一同以類似無定形狀沉淀出來。因此，本發明的方法需要在溶液變得渾濁的時間t之前完成旋光異構體(A)的結晶和分離。如上所釋，用本發明的方法所要達到的結晶程度在如圖1所示的“要用本發明的方法達到的程度”的范圍內。該范圍隨各種因素如異構體(A)和(B)和酯化合物(B’)的種類和比率，溶劑的種類和量而變化。這樣，根據這些因素可測定適當的范圍。例如，當在如圖1所示的溶液(a)中的異構體(A)的量小于異構體(B)的量的情況下，異構體(A)的結晶起點在(d)點和(c)點之間并且可能結晶和分離純的異構體(A)達到(d)點。可以用通常的方法，如傾析和過濾進行結晶的異構體(A)的分離。如果大規模進行結晶，則需要長時間進行分離，盡管小規模的分離可以在短時間內完成。如進行實驗規模的分離，甚至可能快速分離。正如在工業生產中分離需要長時間，此時優選在例如(e)點中斷結晶，以便在到達t點的時間范圍內可以沒有任何污染地完成分離。根據本發明的方法，如果例如從含有外消旋的反式-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯和(2S，3R)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸正丁酯的溶液中進行結晶，(2S，3R)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸正丁酯的量足以抑制甲酯的(2S，3R)-異構體的沉淀，(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯可結晶直到在結晶后的母液中(2S，3R)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯的濃度至少是(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯的濃度的兩倍。而且還可能得到旋光純度至少為99％的(2R，3S)-異構體結晶。這樣，根據本發明，在沒有異構體(B)的任何沉淀的情況下，進行異構體(A)的結晶直到在母液中異構體(A)的量等于異構體(B)的量之后，可以繼續高純度異構體(A)的結晶直到母液中異構體(A)的量小于異構體(B)的量。日本專利公開第8-259552號公開了在由粘質沙雷氏菌(Serratiamarcescens)衍生的酯酶存在下，通過使外消旋的反式-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯進行不對稱酯基轉移從而將7.8/8.8(約88.6％)的(2S，3R)-異構體轉化為正丁酯，除去酶，減壓蒸餾除去溶劑，然后從異丙醇中結晶，可以得到旋光純度至少為99％的(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯的結晶。然而，當在結晶后的母液中所需的(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯的量是(2S，3R)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯的量的大約1.3倍時應將結晶中斷。這是因為為了避免不需要的(2S，3R)-異構體的結晶帶來的污染，中斷結晶是必要的。相反，根據本發明，可進行結晶直到在結晶后母液中的所要的(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯的量大約為不需要的(2S，3R)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯量的一半。結晶異構體(A)的程度，即繼續結晶所能達到的程度隨著反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)/酯化合物(B’)的比率，結晶所用溶劑，結晶溫度等而變化。然而，因為當類似無定形狀的異構體(B)和酯化合物(B’)開始沉淀時，進行結晶的溶液變得渾濁，所以通過監測溶液中渾濁的現象可以判定異構體(A)的結晶終點。結晶的純度一般受將要進行結晶的溶液濃度(或溶劑/旋光異構體的量的比率)，旋光異構體(A)/旋光異構體(B)的比率，溫度，所得晶體的量等的影響。一般來說，如果結晶進行到異構體(A)和(B)難以結晶并且沉淀出的旋光異構體(A)的結晶量是少量的程度，那么旋光異構體(A)的結晶傾向于高純度。例如，如果在結晶溶液中異構體(A)和(B)的濃度低，異構體(A)/異構體(A)和(B)的比率高，結晶溫度高并且旋光異構體(A)的結晶量少，則結晶的異構體(A)的純度高。與此相反，如果濃度低，則旋光異構體晶體收率低。然而，根據本發明，由于酯化合物(B’)的存在量抑制了旋光異構體(B)的沉淀，這樣，可以以高收率獲得純度高于99％的旋光異構體(A)。因為結晶步驟僅包括從旋光異構體(A)和(B)和酯化合物(B’)的溶液中進行旋光異構體(A)的結晶，直至在酯化合物(B’)的存在下不沉淀出旋光異構體(B)的程度，盡管在沒有酯化合物(B’)時將沉淀出旋光異構體(B)，并由此繼續結晶直到在結晶的母液中旋光異構體(A)的量小于旋光異構體(B)的量的范圍，所以結晶步驟很簡單。在傳統的結晶方法中，通過從含有旋光異構體(A)和(B)的溶液(AB)中結晶直到在母液中異構體(A)的量大于異構體(B)的量的程度從而得到旋光異構體(A)的結晶。在這樣的結晶中，為了在沒有旋光異構體(B)的任何結晶情況下以高純度得到旋光異構體(A)，應分別仔細選擇溶劑，溫度和濃度，但旋光異構體(A)的收率在某種程度上被迫減少。然而，根據本發明的方法，在沒有異構體(B)的沉淀情況下，旋光異構體(A)甚至能結晶到在傳統的方法中旋光異構體(A)和(B)都將結晶的程度，在傳統方法中結晶溶液中沒有酯化合物(B’)。下文解釋了進行結晶的溶液(ABB’)和溶液(AA’BB’)的制備。酯化合物(A’)可起到降低異構體(A)收率的作用，因此，將要進行結晶的溶液中優選不含有酯化合物(A’)。因為酯化合物(A’)不是一種要加入溶液中的組分，盡管在某些情況下這樣的污染在制備溶液的過程中不可避免，所以溶液(ABB’)比溶液(AA’BB’)更優選。例如，通過向含有旋光異構體(A)和(B)的溶液(AB)中加入酯化合物(B’)或通過在具有立體選擇性酯基轉移能力的酶存在下使用醇(R3-OH，其中R3是可被取代的直鏈或支鏈的烷基，可被取代的烷氧基烷基或可被取代的芳烷基)將溶液(AB)中的旋光異構體(B)進行酯基轉移形成酯化合物(B)，可以制得溶液(ABB’)。在酶催化的酯基轉移情形中，只有當酶的立體選擇性為100％時可得到溶液(ABB’)，而酶的立體選擇性小于100％時得到溶液(AA’BB’)。因此優選使用具有好的立體選擇性的酶。一般通過化學合成得到溶液(AB)，這是因為除了不對稱合成之外，其產物都為旋光異構體的等摩爾混合物。酯化合物(B’)以高濃度保留在根據本發明結晶并分離出旋光異構體(A)的母液中，如果需要，可將其從母液中取出。通過將酯化合物(A’)和(B’)混合物中的酯化合物(A’)進行酶催化的選擇性水解也能得到酯化合物(B’)。在制備溶液(ABB’)的情況下，一般將酯化合物(B’)加入到溶液(AB)中以使所得溶液(ABB’)滿足在酯化合物(B’)存在下結晶出異構體(A)而不結晶出異構體(B)的條件。向其中加入酯化合物(B’)的溶液(AB)不局限于旋光異構體(A)和(B)的等摩爾混合物溶液，可以是含有不同量的異構體(A)和(B)的溶液。例如，通過如日本專利公開第61-268663號，第2-17170號和第2-17169號，WO89/02428和WO89/10350中所公開的不對稱合成法可制備所述溶液(AB)。通過使外消旋的溶液進行如日本專利公開2-109995和3-15398和日本專利公告4-501360中所公開的酶催化不對稱水解或通過使外消旋溶液進行如日本專利公開61-145174和2-231480號中公開的化學旋光拆分，也可以制備含有不同量的異構體(A)和(B)的溶液(AB)。如上所述，本發明的方法可以與已知方法，如不對稱合成法，化學或酶催化旋光拆分法等聯合進行。在這些情況中，即使已知方法中的不對稱誘導或旋光拆分速度是不夠好的，通過將所述不夠好的方法與本發明的方法聯合也能以好的收率回收高純度的旋光異構體(A)。而且，本發明的方法可以應用于通過使溶液(AB)進行酶催化的酯基轉移作用代替向溶液(AB)中加入酯化合物(B’)而制得的溶液。例如，本發明的方法可應用于按照在日本專利公開第4-228095，6-78790和8-259552號中公開的方法得到的溶液(ABB’)，其中通過使外消旋的反式-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯與正丁醇進行酶催化的不對稱酯基轉移作用而使(2S，3R)-異構體轉化，得到(2R，3S)-3-(4-甲氧苯基)縮水甘油酸甲酯。本發明的方法的不同應用和改進是可能的。例如，通過包括下述步驟的循環方法可以高純度得到旋光異構體(A)和(B)(a)制備含有酯化合物(I)的一種旋光異構體(A)和另一種旋光異構體(B)以及酯化合物(B’)的溶液，由于在2-和3-位上不對稱碳原子存在，(A)和(B)都是旋光異構體，酯化合物(B’)與異構體(B)的不同僅在于酯基R1，(b)從溶液中結晶旋光異構體(A)，由于酯化合物(B’)的存在，直到旋光異構體(A)被結晶而不伴隨有旋光異構體(B)被沉淀的程度，但是如果酯化合物(B’)不存在，則旋光異構體(B)將會沉淀，(c)分離旋光異構體(A)的晶體，(d)將與殘余的旋光異構體(A)和(B)一起包含在所得母液中的酯化合物(B’)進行化學酯基轉移，以使酯化合物(B’)轉化為旋光異構體(B)，然后結晶和分離異構體(B)，(e)向所得母液中加入外消旋的反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)和酯化合物(B’)，以提供進行步驟(b)的結晶的溶液，并(f)按順序重復上述步驟(b)，(c)，(d)和(e)。在循環方法中，在步驟(d)中進行化學酯基轉移的反應混合物中的異構體(B)的濃度高于異構體(A)的濃度，因而只有異構體(B)能通過進行傳統的結晶和分離獲得。如果在步驟(d)的異構體(B)結晶之前向化學酯基轉移的反應混合物中加入酯化合物(A’)，則通過酯化合物(A’)對異構體(A)的結晶的抑制作用，能更有效地結晶異構體(B)。如果在步驟(d)中加入酯化合物(A’)，則包含在所得母液中的酯化合物(A’)在步驟(e)中進行化學酯基轉移成異構體(A)。在步驟(d)中所加入的酯化合物(A’)的量優選與包含在步驟(a)的溶液中的酯化合物(B’)的量相應。酯化合物(A’)的量隨異構體(A)和(B)的酯基以及酯化合物(A’)和用于結晶的溶劑而變化，但一般可調節酯化合物(A’)的量以使酯化合物(A’)/異構體(A)的摩爾比為約5/3-約10/1。通過向在步驟(c)中得到的母液中加入有機胺和與將要得到的旋光異構體的酯基相應的醇，并進行酯基轉移，隨后蒸出有機胺和醇來進行在循環方法中采用的化學酯基轉移。以相同方法進行酯化合物(A’)的化學酯基轉移。對于每摩爾將被酯基轉移的酯，在化學酯基轉移中醇的用量可優選是1-1000摩爾，特別是2-10摩爾。考慮到異構體(A)和(B)的循環，化學酯基轉移可優選使用具有低沸點的醇如甲醇或乙醇。在化學酯基轉移中所用胺是，例如，單烷基胺(如甲胺，乙胺，丙胺，丁胺)；二烷基胺(如二甲胺，二乙胺，二丙胺，二異丙胺)；三烷基胺(如三甲胺，三乙胺)；環胺(如嗎啉)；和芳胺(如吡啶)。特別優選使用具有低沸點的二烷基胺如二甲胺，二丙胺或二異丙胺。對于每摩爾將被酯基轉移的酯，有機胺的用量優選為0.01-1000摩爾，特別是0.1-10摩爾。當進行上述循環法時，可在一個循環中得到高純度的異構體(A)和(B)。由于如果在化學酯基轉移作用后能充分蒸餾除去有機胺和醇該方法實際上可無限制地進行，所以僅通過循環該方法而不需進行不對稱化學反應就能有效獲得高純度的異構體(A)和(B)。而且，由于結晶溶液的波動(溶液的溫度，濃度等的部分不均勻性)，由對映體的污染所導致的旋光純度的降低能被抑制，并且在一個循環中得到的旋光異構體是大量的。因此，循環方法在工業上是有利的。下文解釋了一種方法，其中通過酯基轉移過程制備含有旋光異構體(A)和(B)及酯化合物(B’)的溶液，并隨后將該溶液用于本發明的方法。優選通常將旋光異構體(A)和(B)的溶液中的異構體(B)進行酶催化酯基轉移成酯化合物(B’)來制備用于旋光異構體(A)的結晶的溶液，這是因為有可能在一個單獨的反應步驟中得到含有大量異構體(A)和少量異構體(B)以及能抑制異構體(B)結晶的酯化合物(B’)的溶液。在本發明的方法中，經酯基轉移作用得到的反應混合物中異構體(A)/異構體(B)的比率優選盡可能大。換言之，優選在反應混合物中酯化合物(B’)是大量的。這樣為了降低其中異構體(B)的量，例如，增加用于酯基轉移作用的酶和醇的量并進行較長時間反應是必要的。然而所述步驟增加了費用并導致副反應。根據本發明的方法，即使酯基轉移程度低，但與傳統方法不同，所得溶液仍可成功用于旋光拆分。這是因為酯化合物(B’)抑制了異構體(B)的沉淀。只要異構體(A)/異構體(B)的摩爾比率為4/6-10/1，并且酯化合物(B’)/異構體(B)的摩爾比為5/3-10/1，就能以高收率得到高純度的異構體(A)。異構體(A)/異構體(B)的摩爾比特別優選為3/1-4/1，且酯化合物(B’)/異構體(B)的摩爾比特別優選為2/1-7.8/1。酯基轉移所用的醇是與上述酯化合物(B’)的酯基相一致的醇。在酯基轉移中可使用任何具有使反式-3-取代的縮水甘油酸酯與醇進行立體選擇性酯基轉移的能力的酶。所述的能使反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的(2S，3R)-異構體發生選擇性酯基轉移的酶包括，例如，屬于下列屬的微生物衍生的酯酶沙雷氏菌屬(Serratia)，假絲酵母屬(Candida)，毛霉菌屬(Mucor)，假單胞菌屬(Pseudomonas)，曲霉屬(Aspergillus)，產堿桿菌屬(Alcaligenes)，犁頭霉屬(Absidia)，鐮孢屬(Fusarium)，赤霉屬(Giberalla)，鏈孢霉屬(Neurospora)，木霉屬(Trichoderma)，根霉屬(Rhizopus)、無色桿菌屬(Achromobacter)，芽孢桿菌屬(Bacillus)，短桿菌屬(Brevibacterium)，棒狀桿菌屬(Corynebacterium)，普羅威登斯菌屬(Providencia)，復膜孢糖酵母屬(Saccharomycopsis)，諾卡氏菌屬(Nocardia)和節桿菌屬(Arthrobacter)；α-胰凝乳蛋白酶，Porcineheper酯酶，porcine胰酯酶，等等。具有代表性的上述酶的實施例是，例如，由下列微生物衍生的酯酶傘枝犁頭酶(Absidiacorymbifera)IFO4009和IFO4010，赭曲霉(Aspergillusochraceus)IFO4346，土曲霉(Aspergillusterreus)IFO6123，尖孢鐮孢(Fusariumoxysporum)IFO5942，尖孢鐮孢(Fusariumoxysporum)ATCC659，茄病鐮孢(Fusariumsolani)IFO5232，稻惡苗赤霉(Gibberellafujikuroi)IFO5368，MucorangulimacrosporusIAM6149，卷枝毛霉(Mucorcircinelloides)IFO6746，黃色毛霉(Mocorflavus)IAM6143，易脆毛霉(Mucorfragilis)IFO6449，日內瓦毛霉(Mucorgenevensis)IAM6091，球形毛霉(Mucorglobosus)IFO6745，詹森氏毛霉(Mucorjanssenii)IFO5398，爪哇毛霉(Mucorjavanicus)，IFO4569，IFO4570，IFO4572和IFO5382，閃孢毛霉(Mucorlamprosporus)IFO6337，碎囊毛霉(Mucorpetrinsularis)IFO6751，密叢毛霉(Mucorplumbeus)IAM6117，布萊氏毛霉(Mucorpraini)IAM6120，微小毛霉(Mucorpusillus)IAM6122，總狀毛霉(Mucorracemosus)IFO4581，拉莫氏毛霉(Mucorramannianus)IAM6128，下彎毛霉(Mucorrecurvus)IAM6129，林生毛霉(Mucorsilvaticus)IFO6753，MucorspinescensIAM6071，細胞毛霉(Mucorsubtilissimus)IFO6338，粗糙鏈孢霉(Neurosporacrassa)IFO6068，無根根霉(Rhizopusarrhizus)IFO5780，德列馬根霉(Rhizopusdelemar)ATCC34612，日本根霉(Rhizopusjaponicus)IFO4758，綠色木霉(Trichodermaviride)IFO4847，裂環無色桿菌(Achromobactercycloclastes)IAM1013，球形芽孢桿菌(Bacillussphaericus)IFO3525，酮式二酸短桿菌(Brevibacteriumketoglutamicum)ATCC15588，CorynebacteriumalkanolyticumATCC21511，裂烴棒狀桿菌(Corynebacteriumhydrocarboclastum)ATCC15592，CorynebacteriumprimorioxydansATCC31015，產堿普羅威登斯菌(Providenciaalcalifaciens)JCM1673，可變假單胞菌(Pseudomonasmutabilis)ATCC31014，惡臭假單胞菌(Pseudomonasputida)ATCC17426，ATCC17453和ATCC33015，解凝沙雷氏菌(Serratialiquefaciens)ATCC27592，粘質沙雷氏菌(Serratiamarcescens)ATCC13800，ATCC14764，ATCC19180，ATCC21074，ATCC27117和ATCC21212，粘質沙雷氏菌Sr41FERMBP-487，近平滑假絲酵母(Candidaparapsilosis)IFO0585，SaccharomycopsislipolyticaIFO0717，IFO0746，IFO1195，IFO1209和IFO1548，星狀諾卡氏菌(Nocardiaasteroides)IFO3384，IFO3424和IFO3423，加德那諾卡氏菌(Nocardiagardneri)ATCC9604，Arthrobacterureafaciensnov.var.，球形節桿菌(Arthrobacterglobiformis)和Candidacylindracea。市場上可以買到的酶也可以使用，例如，堿性脂肪酶(Achromobacter，WakoPureChemicalIndustries，Ltd.)，脂肪酶B(Pseudomonasfragi22-39B，WakoPureChemicalIndustries，Ltd.)，脂肪酶MAMANO”10(Mucorjavanicum，AmanoSeiyakuKabushikiKaisha)，脂肪酶XI(Rhizopusarrhizus，SigmaChemicalCo.，Ltd.)，Talipase(Rhizopusdelemar，TanabeSeiyakuCo.，Ltd.)，脂肪酶NK-116(Rhizopusjaponicus，NagaseSangyoKabushikiKaisha)，脂肪酶N(Rhizopusniveus，AmanoSeiyakuKabushikiKaisha)，脂肪酶SP435和535(Candidaantarctica，Novo)，Alcalase(Bacilluslicheniformis，Novo)，脂肪酶VII(Candidacylindracea，SigmaChemicalCo.Ltd.)，脂肪酶(porcinepancreas，WakoPureChemicalIndustries，Ltd.)，酯酶(porcineheper，SigmaChemicalCo.，Ltd.)，膽固醇酯酶(Candidarugosa，NagaseSangyoKabushikiKaisha)，脂肪酶OF(Candidacylindracea，MeitoSangyoKabushikiKaisha)，脂肪酶QL(Alcaligenessp.，MeitoSangyoKabushikiKaisha)，脂肪酶AL(Achromobactersp.，MeitoSangyoKabushikiKaisha)和脂肪酶PL(Alcaligenessp.，MeitoSangyoKabushikiKaisha)。在這些酶中，優選屬于下列屬的微生物產生的酯酶沙雷氏菌屬(Serratia)、假絲酵母菌屬(Candida)、產堿桿菌屬(Alcaligenes)和無色桿菌屬(Achromobacter)，特別是由諸如粘質沙雷氏菌(Serratiamarcescens)和Candidacylindracea的微生物產生的酯酶。另一方面，可以使反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的(2R，3S)-異構體選擇性地酯基轉移的酶包括，例如，由屬于下列屬的微生物產生的酯酶微球菌屬(Micrococcus)、土壤桿菌屬(Agrobacterium)、微桿菌屬(Microbacterium)、根瘤菌屬(Rhizobium)、檸檬桿菌屬(Citrobacter)、德巴利氏酵母屬(Debaryomyces)、有孢漢遜氏酵母屬(Hanseniaspora)、漢遜氏酵母屬(Hansenula)、畢赤氏酵母屬(Pichia)、紅冬孢屬(Rhodosporidium)、裂殖糖酵母屬(Schizosaccharomyces)、擲孢酵母屬(Sporobolomyces)、克雷克氏酵母屬(Kloeckera)、有孢圓酵母屬(Torulaspora)、鏈霉菌屬(Streptomyces)，等等。可以使(2R，3S)-異構體選擇性地酯基轉移的上述微生物酶的有代表性的實例是，例如，由下列菌種產生的酯酶尿素微球菌(Micrococcusureae)IAM1010(FERMBP-2996)、放射形土壤桿菌(Agrobacteriumradiobacter)IAM1526和IFO13259、微桿菌(Microbacteriumsp.)ATCC21376、苜蓿根瘤菌(Rhizobiummelioti)IFO13336、帶勞地氏檸檬桿菌(Citrobacterfreundii)ATCC8090、Debaryomyceshanseniivar.fabryiIFO0015、DevaryomycesnepalensisIFO0039，法爾皮氏有孢漢遜氏酵母(Hanseniasporavalbyens)IFO0115、多形漢遜氏酵母(Hansenulapolymorpha)IFO1024、土星漢遜氏酵母(Hansenulasaturnus)HUT7087、粉狀畢赤氏酵母(Pichiafarinosa)IFO0607、巴斯德畢赤氏酵母(Pichiapastoris)IFO0948，IFO1013和IAM12267、威克曼氏畢赤氏酵母(Pichiawickerhamii)IFO1278、類酵母紅冬孢(Rhodosporidiumtoruloides)IFO0559、粟酒裂殖糖酵母(Schizosaccharomycespombe)IFO0358、纖細擲孢酵母(Sporobolomycesgracillis)IFO1033、皮質克雷克氏酵母(Kloeckeracorticis)IFO0633、戴爾凱氏有孢圓酵母(Torulasporadelbrueckii)IFO0422、灰色鏈霉菌灰色亞種(Streptomycesgriseussubsp.griseus)IFO3430和IFO3355，和淡紫灰鏈霉菌淡紫灰亞種(Streptomyceslavendulaesubsp.lavendulae)IFO3361、IFO3415和IFO3146。本發明中使用的酶可以是市場上可以買到的或從微生物細胞的培養液得到的酶。也可以是從野生菌株或突變體得到的酶，或從通過生物工程技術如基因重組或細胞融合得到的微生物產生的酶。上述微生物酶可以用下述方法得到以一般的方法，例如，在含有通常的碳源、氮源和無機鹽的培養基中在室溫或高溫下在有氧條件下在pH5-8培養微生物，用一般方法如離心或過濾從培養液中分離細胞，和任選用樹脂吸附劑除去雜質。上述微生物培養液可以直接用作酶。這樣得到的溶液可以直接用作酶或可以冷凍干燥。也可以用已知方法，例如，聚丙烯酰胺法，含硫的多糖凝膠法(例如角叉菜膠法)、瓊脂膠法、光交聯樹脂法、聚乙二醇法、硅藻土法或膜吸附法，固定所述酶。固定化酶可以裝在柱中和用于酯基轉移。同時，有高E-值的酶具有高立體選擇性。用上述酶，旋光異構體(A)被酯基轉移成少量酯化合物(A’)，而異光異構體(B)被酯基轉移成大量酯化合物(B’)。由于抑制希望的異構體(A)的沉淀的酯化合物(A’)的量必須減少，以便增加結晶的異構體(A)的量，同時異構體(B)的沉淀受酯化合物(B’)抑制，所以，在上述酶中優選具有高E-值的酶。E-值是表示酶的立體選擇性的常規指標之一，是每單位濃度的各個立體異構體的酶反應速度比(例如，(2R，3S)-異構體與(2S，3R)-異構體酯基轉移的速度比)。一般，在反應顯著進行時，E-值受酶失活、副反應、測定誤差等很大影響。因此，本發明中使用的E-值是在轉化率10％時(即在10％反式-dl-式被酯基轉移時)測定的值，這時階段副反應，逆反應和測定誤差很小。E-值由下面公式表示，它是每種酶特有的值。其中因此，如果測定出E-值和酯基轉移的轉化率，則可以測定酯基轉移后的旋光異構體的比例，而與酶的種類無關，由此可以預期得到旋光純度和收率。對于制備根據本發明進行結晶的溶液，優選的E-值是至少20，特別是至少50。上述的具有優選的E-值的酶可用實驗方法合適地選擇。酶的量根據使用的酶種類、使用形式等而變化。但是，對每克異構體(B)，最好使用具有橄欖油水解活性1×10-1×105U，特別是1×102-1×104U的量的酶。根據在IyakuhinKenkyu，Vol.11，No.3，505-506(1980)中報道的脂肪消化能力試驗，通過測定用酯酶解離橄欖油中的酯鍵產生的脂肪酸量來估計橄欖油水解活性。酯基轉移反應可以在合適的溶劑中或無溶劑存在下進行。溶劑的例子是芳族有機溶劑，例如苯、甲苯或二甲苯；鹵代芳族有機溶劑，例如氯苯或二氯苯；脂族有機溶劑，例如己烷、庚烷或環己烷；鹵代脂族有機溶劑，例如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳或三氯乙烷；酮溶劑，例如丙酮、甲基乙基酮或甲基異丁基酮；醚溶劑，例如二甲基醚、二乙基醚、二異丙基醚、叔丁基甲基醚、四氫呋喃或1，4-二噁烷；酯溶劑，例如乙酸乙酯或乙酸丁酯；等等。特別優選甲苯、二甲苯、己烷、四氯化碳、叔丁基甲基醚和二異丙基醚，因為酶的失活少，因而反應以高速度進行。底物，即異構體(A)和(B)的濃度優選約0.02-約3摩爾/升，特別約0.02-約2摩爾/升，因為反應速度高從而使得酯基轉移反應的設備小型化。用于酯基轉移的醇量優選每摩爾異構體(B)用0.6-10摩爾，特別是0.8-5摩爾的醇，以便可以防止酶失活，和反應速度可以提高。在酯基轉移的同時反應體系被水污染會引起水解，在將得到的溶液用于本發明的方法中時導致收率降低。因此，優選在盡可能避免超過顯示酯基轉移活性的酶所需的過量水存在的條件下進行反應。此外，水解產物不溶于某些溶劑，這導致由于這些副產物的污染而引起希望產物的純度降低。酯基轉移反應在室溫或高溫下，優選在溫度10-50℃，特別是20-40℃下進行。酯基轉移反應的轉化率根據酶的立體選擇性、旋光異構體(A)的收率等可以適當選擇。根據底物，反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)和酯化合物(B’)的酯基，通過改變酶活性、反應溫度、反應時間等可以隨意調節所述轉化率。為了用常規方法以高收率得到高純度的旋光異構體(A)，一般需要提高酯基轉移反應的轉化率和使用具有很高選擇性的酶。但是，為了提高轉化率，在反應進行到很大程度的階段時，在反應混合物中剩余的少量異構體(B)必須進一步酯基轉移。因此，鑒于必需大量的昂貴的酶，在長時間反應中酶容易失活，在長時間反應中不穩定的反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)容易分解，由于酶的選擇性不夠一些異構體(A)的酶催化酯基轉移是不可避免的，所以，工業上不可能將轉化率提高到高水平。例如，日本專利公開8-259552公開了用由粘質沙雷氏菌(Serratiamarcescens)產生的酯酶進行外消旋的反式-3-(4-甲氧基苯基)縮水甘油酸甲酯的不對稱酯基轉移，將外消旋的甲基酯的(2S，3R)-異構體轉化為(2S，3R)-正丁基酯，直到(2S，3R)-正丁基酯/(2S，3R)-甲基酯的摩爾比是7.8/1[(2S，3R)-甲基酯10.8g和(2S，3R)-正丁基酯101.85g]。該酯基轉移反應用下述方式進行首先用每摩爾底物5×105U酯酶進行反應24小時，在減壓下蒸發出溶劑直到反應混合物的體積成為1/3后，加入5×105U酯酶，反應再進行16小時。但是，該方法實際上不可能用于工業生產，因為反應時間太長，生產過程太復雜，并且昂貴的酶的用量太大。與此對比，根據本發明，即使酯基轉移的轉化率不提高至高水平，也可以高收率得到高純度的旋光異構體(A)。例如，從通過用粘質沙雷氏菌(Serratiamarcescens)Sr41FERMBP-487產生的酯酶(1×105U，24小時)進行外消旋的反式-3-(4-甲氧基苯基)縮水甘油酸甲酯的酯基轉移得到的反應混合物，以至少80％的收率得到純度99％或更高的(2R，3S)-3-(4-甲氧基苯基)縮水甘油酸甲酯，其中只有70％(2S，3R)-異構體轉化為正丁酯(酯化合物B’/旋光異構體B＝7/3)。本發明包括一個實施方案，其中因為底物在某溶劑中的溶解度低，在酯基轉移反應中底物的結晶保留在反應混合物中。在該情況下，在酯基轉移反應后，其中不需要的異構體轉化為可溶的酯化合物，需要的產物可以從反應混合物中用下述方法得到過濾酶和需要的結晶異構體的混合物，除去需要的異構體中沾污的酶，同時冷卻濾液，通過過濾得到產生的結晶；或者直接冷卻反應混合物，過濾酶和需要的結晶異構體的混合物，除去其中的酶。本發明還包括一個實施方案，其中當用一般方法進行反應時，在酯基轉移中無結晶的沉淀，但是在反應過程中通過主動地蒸發出溶劑則結晶沉淀。通過蒸出溶劑而沉淀出的結晶的分離可以用與上述相同的方法進行。在蒸出大量溶劑和將不同的溶劑加入反應混合物中的情況下，結晶的分離也可以用上述相同的方法進行。在上述情況下，在蒸出溶劑的同時，由酯基轉移得到的醇也可以排除到反應體系的外面，因此，隨后的酯基轉移容易進行。如上所述，本發明的方法的優點是反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的旋光異構體(A)優選以工業規模生產。這是因為即使外消旋物的酯基轉移停止在低轉化率的階段，異構體(A)也可以通過將結晶和酯基轉移聯合以高收率和高純度得到，而單獨的結晶被認為在工業上是不可應用的。關于下述方法作了上述說明，其中可通過結晶異構體A直到由于酯化合物(B’)的存在而不結晶出異構體(B)的程度來分離旋光異構體(A)，不過酯化合物(B’)不存在時旋光異構體B會沉淀。但是，根據本發明的方法，也可以得到與常規的方法比較較大量的旋光異構體(A)的結晶，常規方法中異構體(A)在異構體(A)結晶的條件下從溶液(AB)中結晶，但是異構體B不結晶。這是因為在溶液(AA’BB’)或(ABB’)中酯化合物(B’)抑制旋光異構體(B)從其中沉淀。此外，與常規的方法比較，即使從由低轉化率的酯基轉移得到的溶液(ABB’)或溶液(AA’BB’)，也能以高收率高純度得到旋光異構體(A)。例如，反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的異構體(A)用下述方法以旋光純度大于99％的結晶形式和收率大于75％(特別是大于80％)得到用與酯化合物(B’)相應的醇和用具有使異構體(B)立體選擇性地酯基轉移成酯化合物(B’)的能力的酶(特別是E-值大于20的酶，例如由粘質沙雷氏菌Sr41FERMBP-487產生的酯酶)，酯基轉移異構體(A)和(B)的混合物，直到酯化合物(B’)/異構體(B)的摩爾比是13/7-7.8/1(特別是2/1-8/2)，和從得到的反應溶液(其中溶劑可以更換)中結晶異構體(A)。更換了溶劑的上述反應溶液包括，例如，通過部分或全部更換反應溶液的溶劑以致除去了在酯基轉移中生成的醇得到的反應溶液，或通過在酯基轉移后部分或全部更換溶劑以便酯基轉移在合適的溶劑中進行且結晶在合適的溶劑中完成得到的反應溶液。由酯基轉移得到的溶液也可以是用常規方法如過濾或傾析由反應混合物中除去酶得到的溶液，所述反應混合物是由酯基轉移得到的。由上面得到的旋光異構體(A)，即反式-3-取代的縮水甘油酸酯的(2R，3S)-異構體，用各種方法可以制備(2S，3S)-1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物或可藥用的鹽，所述方法是例如在下列文獻中公開的方法日本專利公告46-16749、63-13994、日本專利公開5-201865、2-289558和日本專利公告2-28594、ChemPharm.Bull.，18(10)，2028-2037(1970)、日本專利公開2-17168、4-234866、5-222016、4-221376、5-202013、2-17170、2-286672、6-279398、58-99471、8-269026、61-118377、6-228117和2-78673、歐洲專利公開796853和荷蘭專利公開1006293。換句話說，(2S，3S)-1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物或可藥用的鹽可用下述方法制備將(2R，3S)-異構體與式(IV)的氨基苯硫酚衍生物反應式中B環如同上述定義，R4是氫原子、2-(二甲基氨基)乙基或下式的基式(IV)化合物是例如2-氨基苯硫酚、2-氨基-5-氯苯硫酚、2-氨基-5-芐基苯硫酚、2-(二甲基氨基乙基氨基)苯硫酚或下式的化合物式中B環如上述定義；或將(2R，3S)-異構體與式(V)的硝基苯硫酚衍生物反應式中B環如上述定義，式(V)化合物是例如2-硝基苯硫酚、2-硝基-5-氯苯硫酚或2-硝基-5-芐基苯硫酚，接著還原硝基，得到式(VI)的(2S，3S)-3-(2-氨基苯硫基)-3-苯基-2-羥基丙酸酯式中A和B環、R1和R4如同上述定義，使得到的化合物(VI)直接或進行水解后進行分子內閉環，得到式(VII)的(2S，3S)-2-苯基-3-羥基-1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物式A和B環和R4如上述定義，和將得到的化合物(VII)以任選順序在5-位氮原子上進行二甲基氨基乙基化和在3-位上取代的羥基上進行乙酰化，得到式(II)的(2S，3S)-1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物或其可藥用的鹽式中A和B環和R2如同上述定義。上述轉化的全反應圖解如下所示。(2S，3S)-1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物(II)和其可藥用鹽的例子是，例如，(2S，3S)-2-(4-甲氧基苯基)-3-乙酰氧基-5-[2-(二甲基氨基)乙基]-2，3-二氫-1，5-苯并硫雜吖庚因-4(5H)-酮(硫氮酮)、(2S，3S)-2-(4-甲氧基苯基)-3-乙酰氧基-5-[2-(二甲氨基)乙基]-8-氯-2，3-二氫-1，5-苯并硫雜吖庚因-4(5H)-酮、(2S，3S)-3-乙酰氧基-5-[3-[4-(2-甲氧基苯基)-1-哌嗪基]丙基]-2，3-二氫-2-(4-甲氧基苯基)-8-氯-1，5-苯并硫雜吖庚因-4(5H)-酮、(2S、3S)-3-乙酰氧基-8-芐基-2，3-二氫-5-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-(4-甲氧基苯基)-1，5-苯并硫雜吖庚因-4(5H)-酮，和它們的可藥用的鹽。同時用與上述已知方法相似的方法，從上面得到的反式-3-取代的縮水甘油酸酯的(2S，3R)-異構體，即從旋光異構體(A)可以制備(2R，3R)-1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物或可藥用的鹽。換句話說，(2R，3R)-1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物或可藥用的鹽可用下述方法制備用與上述的從(2R，3S)-異構體制備(2S，3S)-1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物(II)的相同方法，將(2S，3R)-異構體與氨基苯硫酚衍生物(IV)反應，或與硝基苯硫酚衍生物(V)反應然后還原硝基，得到式(VIII)的(2R，3R)-3-(2-氨基苯硫基)-3-苯基-2-羥基丙酸酯式中A環、B環和R1如同上述定義，使得到的化合物(VIII)直接或在其進行水解后進行分子內閉環，得到式(IX)的(2R，3R)-2-苯基-3-羥基-1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物式中A環和B環如同上述定義，和將得到的化合物(IX)以任何順序在5-位的氮原子上進行二甲基氨基乙基化和在3-位上取代的羥基上乙酰化，得到式(III)的(2R，3R)-1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物或其可藥用的鹽式中A環和B環如同上述定義。上述轉化的總反應圖解如下所示。(2R，3R)-1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物(III)和其可藥用的鹽的例子是，例如，(2R，3R)-順式-2-(4-甲基苯基)-3-乙酰氧基-5-[2-(二甲基氨基)乙基]-8-甲基-2，3-二氫-1，5-苯并硫雜吖庚因-4(5H)-酮和其可藥用的鹽。另外，由用本發明的方法得到的反式-3-取代的縮水甘油酸酯的旋光異構體(A)可以制備用作旋光拆分試劑的下式的旋光的蘇-硝基羧酸化合物式中A環和B環如同上述定義，*代表不對稱碳原子。在上述的旋光的蘇-硝基羧酸化合物的制備中，A環和B環是，例如，與上述1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物的制備中記述的A環和B環相同的環。優選A環是4-低級烷氧基苯基和B環是下式的取代的苯環式中Hal是鹵原子。更優選，A環是4-甲氧基苯基和B環是上式所示的取代的苯環，式中Hal是氯原子。蘇-硝基羧酸化合物的制備方法可以實施，例如，通過用日本專利公告61-18549中公開的方法將反式-3-取代的縮水甘油酸酯的旋光異構體(A)與下式的硝基苯硫酚化合物反應，式中環B如同上述定義，然后根據Chem.Pharm.Bull.，18(10)，2028-2037(1970)中公開的方法水解得到的產物。根據上述方法，如果使用反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的(2R，3S)-異構體，則可以得到蘇-硝基羧酸化合物的(2S，3S)-異構體；如果使用反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的(2S，3R)-異構體，則可以得到蘇-硝基羧酸化合物的(2R，3R)-異構體。順便地說，本發明中使用的術語“直鏈或支鏈低級烷基”表示含有1-6個碳原子的直鏈或支鏈烷基，“直鏈或支鏈低級烷氧基”表示含有1-6個碳原子支鏈或支鏈烷氧基。另外，本發明中使用的術語“環烷基”表示含有3-6個碳原子的環烷基，術語“芳基”表示含有6-10個碳原子的芳基。本發明中使用的術語“直鏈或支鏈烷基”表示含有1-12個碳原子的直鏈或支鏈烷基，術語“烷氧基烷基”表示其中烷氧基含有1-6個碳原子和烷基含有1-6個碳原子的烷氧基烷基，術語“芳烷基”表示其中芳基含有6-10個碳原子和烷基含有1-6個碳原子的芳烷基。本發明用下列實施例更具體的描述和說明。當然，本發明不限于這些實施例。實施例1向300ml茄形燒瓶中加入表1所示量的(2R，3S)-3-(4-甲氧基苯基)縮水甘油酸甲酯(下文中稱為“MPGM”)，(2S，3R)-MPGM和(2S，3R)-MPGR3[(2R，3S)-3-(4-甲氧基苯基)縮水甘油酸R3酯，即(2S，3R)-MPGM的甲基變為R3基的化合物；R3＝正丙基、正丁基、正辛基、正癸基、芐基、環己基或2-辛基]和30ml甲醇。在高溫下這些化合物溶于甲醇中。在用磁性攪拌器攪拌下將溶液冷卻至-15℃，在-15℃放置5分鐘。得到的上清液中各組分的濃度用HPLC*測定。*HPLC條件柱，CHIRALCELOD(DaicelChemicalCo.)；檢測，UV，在237；溫度，40℃；流速，1.0ml/min；展開溶劑，己烷/異丙醇＝20/1。由濃度估算上清液中包含的各組分的量。另外，根據下面公式估算結晶的量(結晶前(2R，3S)-MPGM的量)-(上清液中(2R，3S)-MPGM的量)結晶在表1中顯示。用過濾得到少量結晶，用等量甲醇(-15℃)洗滌，真空干燥，結晶的純度用HPLC測定。發現在各種情況下結晶中(2R，3S)-MPGM的含量是99％或更大。表1實施例2向300ml茄形燒瓶中加入表2-7所示量的(2R，3S)-MPGM，(2S，3R)-MPGM和(2S，3R)-MPGnBu[(2S，3R)-3-(4-甲氧基苯基)縮水甘油酸正丁基酯]和30ml甲醇。用2.5cm磁性攪拌器以300r.p.m.攪拌混合物使這些化合物溶解。將溶液冷卻至表2-7所示的溫度，在經過預定時間(0，0.5或1小時)后停止攪拌。取出少量上清液，用HPLC測定上清液中各個組分的濃度。由濃度估算上清液中包含的各組分的量。另外，根據下列公式估算結晶的量(結晶前(2R，3S)-MPGM的量)-(在上清液中(2R，3S)-MPGM的量)。渾濁時間表示在達到結晶溫度后直到溶液變渾濁的時間。關于出現渾濁前取出的試樣上清液中各個異構體的量用HPLC測定。表2(2S，3R)-MPGnBu/(2S，3R)-MPGM＝1.7(摩爾)</tables>表3(2S，3R)-MPGnBu/(2S，3R)-MPGM＝2.0(摩爾)</tables>表4(2S，3R)-MPGnBu/(2S，3R)-MPGM＝2.2(摩爾)表5(2S，3R)-MPGnBu/(2S，3R)-MPGM＝2.4(摩爾)表6(2S，3R)-MPGnBu/(2S，3R)-MPGM＝2.7(摩爾)表7(2S，3R)-MPGnBu/(2S，3R)-MPGM＝3.8(摩爾)</tables>實施例3向1,000ml茄形燒瓶中加入表8所示量的(2R，3S)-MPGM，(2S，3R)-MPGM和(2S，3R)-MPGnBu和表8所示量的溶劑。用2.5cm磁性攪拌器以300r.p.m.攪拌混合物使這些化合物溶于溶劑中。將溶液冷卻至表8所示溫度，并立即停止攪拌。取出少量上清液，用HLPC測定上清液中各個組分的濃度。由濃度估算上清液中包含的各個組分的量。另外，根據下面公式估算結晶的量(結晶前(2R，3S)-MPGM的量)-(上清液中(2R，3S)-MPGM的量)。結果在表8中顯示。用過濾得到少量結晶，用等量甲醇(-10℃)洗滌，真空干燥，用HPLC測定結晶的純度。發現在各種情況下結晶中(2R，3S)-MPGM的含量是99％或更大。表8</tables>實施例4向300ml茄形燒瓶中加入表9所示量的(2R，3S)-MPGM，(2S，3R)-MPGM和(2S，3R)-MPGnBu和表9所示量的甲醇。用2.5cm磁性攪拌器以300r.p.m.攪拌混合物使這些化合物溶于甲醇中。將溶液冷卻至-10℃。在該溫度下攪拌1小時后，馬上停止攪拌。取出少量上清液，用HLPC測定上清液中各個組分的濃度。由濃度估算上清液中包含的各個組分的量。此外，用過濾得到少量結晶，用等量甲醇(-10℃)洗滌，真空干燥，用HPLC測定結晶的組成。結果在表9中顯示。表9</tables>實施例5向300ml茄形燒瓶中加入表10所示量的(2R，3S)-MPGM、(2S，3R)-MPGM、(2R，3S)-MPGnBu和(2S，3R)-MPGnBu和30ml甲醇。用2.5cm磁性攪拌器以300r.p.m.攪拌混合物使這些化合物溶解在甲醇中。經30分鐘將溶液冷卻至-15℃。在該溫度下再攪拌2小時后停止攪拌，取出少量上清液，用HPLC測定上清液中各個組分的濃度。由濃度估算上清液中包含的各個組分的量。另外，根據下面公式估算結晶的量(結晶前(2R，3S)-MPGM的量)-(上清液中(2R，3S)-MPGM的量)另外，用過濾得到結晶，用等量甲醇(-15℃)洗滌，真空干燥，用HPLC測定結晶的組成。結果在表10中顯示。表10實施例6將10.4g(2R，3S)-MPGM，10.4g(2S，3R)-MPGM和40.5g(2S，3R)-MPGnBu在150ml甲醇中的溶液加入500ml茄形燒瓶中，用2.5cm磁性攪拌器以300r.p.m.攪拌。經30分鐘將溶液冷卻至-10℃，再攪拌10分鐘。用過濾得到結晶，用10ml甲醇(-10℃)洗滌，真空干燥。用HPLC測定結晶的組成。發現在4.5g結晶中(2R，3S)-MPGM的含量是99％或更大(以結晶前(2R，3S)-MPGM的量為基準計算收率為43％)。在得到結晶后，蒸出在濾液和洗滌液混合物中與洗滌液相應的10ml甲醇。將濃縮的混合物冷卻到-10℃，向其中加入(2S，3R)-MPGM晶種。當在上述溫度下攪拌混合物30分鐘時，其變為渾濁且類似非晶形的物質沉淀。用過濾得到類似非晶形的物質，用HPLC測定其組成。已發現類似非晶形的物質是固體，其中含有與晶種相同構型的最大量的(2S，3R)-MPGM，以及幾乎相同量的(2R，3S)-MPGM和約三分之二量的(2S，3R)-MPGnBu。實施例7將104g(0.5mol)(2RS，3SR)-MPGM[52g(2R，3S)-MPGM和52g(2S，3R)-MPGM]溶于500ml二甲苯，80ml正丁醇和0.25ml水的混合溶劑中。將200mg由粘質沙雷氏菌得到的酯酶(橄欖油水解活性4×104U)懸浮于得到的溶液中，上述菌種在下述參考實施例1-(2-b)中得到。溶液在30℃攪拌24小時，反應混合物用HPLC分析。發現產物由50g(2R，3S)-MPGM，13.5g(2S，3R)-MPGM和44g(2S，3R)-MPGnBu組成。用過濾從反應混合物中除去酶，在減壓下從濾液中蒸發出全部溶劑，得到油狀剩余物。向該剩余物中加入150ml甲醇，攪拌以進行結晶。為了進一步提高收率，將混合物冷卻至-15℃，在相同溫度下攪拌30分鐘。用過濾得到結晶，用40ml甲醇(-15℃)洗滌，真空干燥，得到44.2g(2R，3S)-MPGM。從當時得到的濾液的分析中還發現母液含有6g(2R，3S)-MPGM，13.5g(2S，3R)-MPGM和44g(2S，3R)-MPGnBu。結晶收率是85.0％(以加入的外消旋化合物中的(2R，3S)-MPGM是100％為基準計算的百分數)。發現結晶中(2R，3S)-MPGM的含量是99％或更大。實施例8將20.8g(2RS，3SR)-MPGM[10.4g(2R，3S)-MPGM和10.4g(2S，3R)-MPGM]，100ml二甲苯，16ml正丁醇，25μl水和10mg從下述的參考實施例1-(2-b)中得到的由粘質沙雷氏菌產生的酯酶(橄欖油水解活性2×103U)混合。混合物在30℃進行酶催化酯基轉移反應直至達到表11中所示的酯基轉移的轉化率。用過濾從反應混合物中除去酶，在減壓下在溫度60-70℃從濾液中蒸發出全部溶劑，得到油狀剩余物。向剩余物中加入30ml甲醇，在茄形燒瓶中用2.5cm磁性攪拌器以300r.p.m.攪拌。冷卻混合物至-10℃后停止攪拌。取出少量上清液，用HLPC測定上清液中各組分的濃度。由濃度估算上清液中包含的化合物的量。另外，根據下面公式估算結晶的量(結晶前(2R，3S)-MPGM的量)-(上清液中(2R，3S)-MPGM的量)結果在表11中顯示。用過濾得到少量結晶，用等量甲醇(-10℃)洗滌，真空干燥，用HPLC分析。發現在所有情況下結晶中(2R，3S)-MPGM含量是99％或更大。表11</tables>實施例9將104g(0.5mol)(2RS，3SR)-MPGM[52g(2R，3S)-MPGM和52g(2S，3R)-MPGM]溶于500ml二甲苯和80ml正丁醇的混合溶劑中。將3.0g在下述的參考實施例1-(2-a)中得到的固定在硅藻土上的酯酶(橄欖油水解活性2.5×104U)懸浮于得到的溶液中。溶液在30℃攪拌24小時，用HPLC分析反應混合物。發現產物由51g(2R，3S)-MPGM，14.7(2S，3R)-MPGM和38g(2S，3R)-MPGnBu組成。用過濾從反應混合物中除去固定在硅藻土上的酯酶，在減壓下在溫度60-70℃從濾液中蒸出全部溶劑，得到油狀剩余物。向剩余物中加入150ml甲醇，攪拌以進行結晶。為了進一步提高收率，將混合物冷卻至-10℃，在相同溫度下攪拌30分鐘。用過濾得到結晶，用40ml-10℃甲醇洗滌，真空干燥，得到43.1g(2R，3S)-MPGM。從當時得到的濾液分析還發現母液含有7g(2R，3S)-MPGM，14.7g(2S，3R)-MPGM和38g(2S，3R)-MPGnBu。結晶收率是82.9％(以加入的外消旋化合物中的(2R，3S)-MPGM是100％為基準計算的百分數)。發現結晶中(2R，3S)-MPGM的含量是99％或更大。實施例10(1)在溫度30-40℃將20g(2RS，3SR)-MPGM和41g(2S，3R)-MPGnBu溶于150ml甲醇中。在攪拌下將溶液冷卻，在0℃將10mg(2R，3S)-MPGM的晶種加入溶液中。溶液經30分鐘繼續冷卻至-10℃，在該溫度下攪拌10分鐘。用玻璃過濾器過濾得到結晶，用20ml-10℃甲醇洗滌，真空干燥，得到(2R，3S)-MPGM。將濾液和洗滌液合并，得到含有(2R，3S)-MPGM，(2S，3R)-MPGM和(2S，3R)-MPGnBu的甲醇溶液。(2)向上述甲醇溶液中加入100ml甲醇和10ml二異丙基胺。溶液在30℃攪拌16小時，使(2S，3R)-MPGnBu轉化為(2S，3R)-MPGM。(3)步驟(2)中得到的反應混合物在0℃放置30分鐘。用過濾得到(2S，3R)-MPGM結晶，用40ml5℃甲醇洗滌。濾液在減壓下濃縮，得到含有約等量的(2S，3R)-MPGM和(2R，3S)-MPGM的剩余物。(4)向剩余物中加入(2RS，3SR)-MPGM以使(2RS，3SR)-MPGM的總量為約20g。向其中再加入(2S，3R)-MPGnBu和甲醇。得到的溶液用于上述步驟(1)。重復由步驟(1)-(4)組成的方法三次，其結果在表12中顯示。表12(甲醇溶液中各組分組成的變化)*酯基轉移時的損失**洗滌結晶時的損失***由洗滌等引起的損失用上述三個循環方法得到總計16.2g(2R，3S)-MPGM。在每個循環中得到的(2R，3S)-MPGM的純度和旋光純度分別是98％或更大和97％或更大。由于(2S，3R)-MPGM可以比使用的酯化合物(2S，3R)-MPGnBu更大的摩爾量以結晶形式得到，如果這樣得到的(2S，3R)-MPGM被化學酯基轉移為僅在下一循環中需要量的(2S，3R)-MPGnBu，則還可能得到高純度的(2S，3R)-MPGM。實施例11在2升裝有攪拌器的反應器中，將187g(0.9mol)(2RS，3SR)-MPGM(93.5g(2R，3S)-MPGM和93.5g(2S，3R)-MPGM]溶于720ml二甲苯和57.6ml(0.9mol)正丁醇的混合溶劑中。將3.0g在下述的參考實施例1-(2-a)中得到的硅藻土固定的酯酶(向其中預先加入0.81ml純化水，其橄欖油水解活性為2.5×104U)懸浮于得到的溶液中。在15mmHg的減壓下在30℃攪拌溶液4小時。反應混合物用HPLC分析。發現產物由91.6g(2R，3S)-MPGM，24.3g(2S，3R)-MPGM和83.2g(2S，3R)-MPGnBu組成。用過濾從反應混合物中除去硅藻土固定的酯酶，濾液在減壓下在溫度60-70℃下濃縮，得到油狀剩余物。向剩余物中加入150ml甲醇，在攪拌下冷卻到-10℃，在該溫度下再攪拌30分鐘。用過濾得到結晶，用-10℃甲醇洗滌，真空干燥，得到82.3g(2R，3S)-MPGM。合并母液和洗滌液，用HPLC分析。發現混合物含有9.1g(2R，3S)-MPGM，24.1g(2S，3R)-MPGM和83.0g(2S，3R)-MPGnBu。參考實施例1(1)將18升pH7.0的液體培養基加入30升的發酵缸中，所述培養基含有1％糊精，0.2％硫酸銨，2％MeastS(AsahiBreweries，Ltd.制造)，0.2％磷酸二氫鉀，0.05％硫酸鎂，0.001％硫酸鐵，1.5％(w/v)脫水山梨糖醇三油酸酯表面活性劑(RheodolSP-030，KaoCorporation制造)和0.2％(v/v)聚亞烷基二醇衍生物表面活性劑(商標Kararin102，SanyoChemicalIndustries，Ltd.制造)。在培養基滅菌后，將通過在與上述相同的培養基中在27.5℃用往復震蕩器預先培養20小時得到的200ml粘質沙雷氏菌Sr41FERMBP-487的預培養液接種在滅菌的培養基中。當在0.33vvm，0.5kg/cm2·G和300r.p.m.條件下向培養基中連續加入1.5％L-脯氨酸時混合物在25℃培養28小時。離心分離10升培養液以除去細胞，用吸附樹脂SP207(MitsubishiChemicalCorporation制造)從上清液中除去雜質。用超濾膜(SLPl053，AsahiChemicalIndustryCo.，Ltd制造)將得到的上清液濃縮至1升，得到具有橄欖油水解活性1.0×104U/ml的酯酶濃縮液1080ml。(2-a)在將30ml在(1)中得到的濃縮酶液體注入500ml茄形燒瓶中的30g硅藻土(美國加利福尼亞CeliteCorporation制造)中后，均勻混合，在外部溫度30℃和減壓下用旋轉蒸發器干燥，得到36.5g活性為8.2U/mg的硅藻土固定的酯酶。(2-b)將1,000ml(1)中得到的濃縮的酶液體凍干，得到54g具有橄欖油水解活性為1.96×l05U/g的酯酶。參考實施例2將225ml2％聚乙烯醇(商標Poval117，KurarayCo.，Ltd.制造)水溶液和75ml橄欖油的混合物在溫度5-10℃以14,500r.p.m.攪拌10分鐘，形成乳狀液。然后，將5.0ml得到的橄欖油乳狀液和4.0ml0.25Mtris-HCl緩沖液(pH8.0，含有2.5mM氯化鈣)在37℃預熱10分鐘，向其中加入1ml酶液體。在37℃進行反應20分鐘，向反應混合物中加入20ml丙酮-乙醇(1∶1)混合溶劑以終止反應。反應混合物用0.05NNaOH溶液滴定，用酚酞作指示劑。用上述方法每分鐘釋放1μmol脂肪酸的酶量定義為1單位(U)。如上所述，根據本發明，從含有反式-3-取代的縮水甘油酸酯的旋光異構體混合物的溶液中可以結晶出高純度的所需的旋光異構體，直到母液中所需的旋光異構體的濃度與常規方法比較是很低的程度。另外，在不對稱和酶催化酯基轉移外消旋的反式-3-取代的縮水甘油酸酯后，從反應混合物中可以結晶出所需的高純度的旋光異構體，直到母液中所需的旋光異構體的濃度與常規方法比較是很低的程度。權利要求1.制備式(I)的旋光的反式-3-取代的縮水甘油酸酯化合物的方法，式中，A環是取代的或未取代的苯環，R1是酯基，該方法包括制備酯化合物(I)的一種旋光異構體(A)和另一種旋光異構體(B)以及酯化合物(B’)的溶液，由于在2-和3-位置上不對稱碳原子存在，(A)和(B)都為旋光異構體，(B’)和異構體(B)的不同僅在于酯基R1，從溶液中結晶旋光異構體(A)，由于酯化合物(B’)的存在，能達到旋光異構體(A)結晶而旋光異構體(B)不沉淀的程度，但是如果酯化合物(B’)不存在，則旋光異構體(B)將會沉淀，并分離出旋光異構體(A)的結晶。2.根據權利要求1的方法，其中溶液還含有少量酯化合物(A’)，其與異構體(A)的不同僅在于酯基R1，并具有與酯化合物(B’)相同的酯基。3.根據權利要求1或2的方法，其中異構體(B)的酯基是甲基或乙基，而酯化合物(B’)的酯基是選自下列的基(a)含有比異構體(B)的酯基R1的碳原子更多碳原子和可以被鹵原子取代的直鏈或支鏈烷基，(b)可以被鹵原子取代的烷氧基烷基，和(c)可以被直鏈或支鏈低級烷基，直鏈或支鏈低級烷氧基或鹵原子取代的芳烷基。4.根據權利要求1的方法，其中在溶液中異構體(A)/異構體(B)的摩爾比是4/6-10/1，而溶液中酯化合物(B’)/異構體(B)的摩爾比是5/3-10/1。5.根據權利要求2的方法，其中酯化合物(A’)/異構體(A)的摩爾比最多是酯化合物(B’)/異構體(B)的摩爾比的9/35。6.根據權利要求1-5中任一的方法，其中溶液的溶劑是選自下列的一種溶劑醇溶劑、醚溶劑、可被鹵原子取代的芳族烴溶劑，可被鹵原子取代的脂族烴溶劑和酯溶劑。7.根據權利要求1-6中任一的方法，其中在結晶前溶液中異構體(A)的濃度是0.5-4摩爾/升，結晶在溫度-30至+15℃下進行。8.根據權利要求1-7中任一的方法，其中進行結晶的溶液是通過在具有立體選擇性酯基轉移能力的酶存在下用醇將異構體(A)和(B)溶液中的旋光異構體(B)酯基轉移成酯化合物(B’)得到的溶液。9.根據權利要求8的方法，其中在酯基轉移反應的轉化率是10％時測定的酶的E-值至少為20。10.根據權利要求8的方法，其中酯基轉移進行到酯化合物(B’)/異構體(B)的摩爾比是5/3-10/1。11.根據權利要求1-10中任一的方法，其中異構體(A)具有(2R，3S)的絕對構型，異構體(B)具有(2S，3R)的絕對構型。12.根據權利要求1-11中任一的方法，其中A環是4-甲氧基苯基，異構體(B)的酯基是甲基，酯化合物(B’)的酯基是正丁基。13.制備式(I)的反式-3-取代的縮水甘油酸酯化合物的旋光異構體的方法，式中，A環是取代的或未取代的苯環，R1是酯基，該方法包括在醇和具有立體選擇性的酯基轉移能力的酶存在下，使酯化合物(I)的一種旋光異構體(A)和另一種旋光異構體(B)的混合物，由于在2-和3-位上不對稱碳的存在，二者都是旋光異構體，進行酯基轉移，從而用醇使旋光異構體(B)酯基轉移產生酯化合物(B’)直到酯化合物(B’)/異構體(B)的摩爾比落到13/7-7.8/1的范圍內，酯化合物(B’)與異構體(B)的區別僅在于酯基R1，從所得到的含有異構體(A)，未酯基轉移的異構體(B)和酯化合物(B’)的溶液中結晶出旋光異構體(A)，并分離出異構體(A)，其旋光純度至少為99％，以異構體(A)的初始量為基準，收率至少為75％。14.根據權利要求13的方法，其中在酯基轉移反應的轉化率是10％時測定的酶的E-值至少為20。15.根據權利要求13或14的方法，其中異構體(A)具有(2R，3S)的絕對構型，異構體(B)具有(2S，3R)的絕對構型。16.根據權利要求13的方法，其中酶是由粘質沙雷氏菌產生的酯酶，酯化合物(B’)/異構體(B)的摩爾比是2/1-8/2，異構體(A)的收率至少是80％。17.根據權利要求13-16中任一的方法，其中A環是4-甲氧基苯基，異構體(B)的酯基是甲基，酯化合物(B’)的酯基是正丁基。18.分離式(I)的反式-3-取代的縮水甘油酸酯化合物的各種旋光異構體的方法，式中A環是取代的或未取代的苯環，R1是酯基，該方法包括(a)制備含有酯化合物(I)的一種旋光異構體(A)和另一種旋光異構體(B)以及酯化合物(B’)的溶液，由于在2-和3-位上不對稱碳原子存在，(A)和(B)都是旋光異構體，酯化合物(B’)與異構體(B)的不同僅在于酯基R1，(b)由于酯化合物(B’)的存在，從溶液中結晶旋光異構體(A)直到旋光異構體(A)被結晶而旋光異構體(B)不沉淀的程度，但是如果酯化合物(B’)不存在，則旋光異構體(B)將會沉淀，(c)分離旋光異構體(A)的結晶，(d)將與殘余的旋光異構體(A)和(B)一起包含在所得母液中的酯化合物(B’)進行化學酯基轉移，以使酯化合物(B’)轉化為旋光異構體(B)，然后結晶和分離異構體(B)，(e)向所得母液中加入外消旋的反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)和酯化合物(B’)，以提供進行步驟(b)的結晶的溶液，并(f)按順序重復上述步驟(b)，(c)，(d)和(e)。19.根據權利要求18的方法，其中在步驟(d)中，將酯化合物(A’)加入得到的母液中，酯化合物(A’)與異構體(A)的區別僅在于酯基R1并具有與異構體(B’)相同的酯基，在步驟(e)中，將加入的酯化合物(A’)化學酯基轉移，得到旋光異構體(A)。20.根據權利要求18或19的方法，其中步驟(a)中的溶液還含有少量酯化合物(A’)，酯化合物(A’)與異構體(A)的區別僅在于酯基R1并具有與酯化合物(B’)相同的酯基。21.根據權利要求18，19或20的方法，其中異構體(B)的酯基是甲基或乙基，酯化合物(B’)的酯基是選自下列的基含有比異構體B的酯基的碳原子更多碳原子且可以被鹵原子取代的直鏈或支鏈烷基，可以被鹵原子取代的烷氧基烷基，和可以被直鏈或支鏈低級烷基，直鏈或支鏈低級烷氧基或鹵原子取代的芳烷基。22.根據權利要求18的方法，其中在步驟(a)中的溶液中，異構體(A)/異構體(B)的摩爾比是4/6-10/1，酯化合物(B’)/異構體(B)的摩爾比是5/3-10/1。23.根據權利要求19的方法，其中在步驟(a)中的溶液中，異構體(A)/異構體(B)的摩爾比是4/6-10/1，酯化合物(B’)/異構體(B)的摩爾比是5/3-10/1，步驟(d)中加入的酯化合物(A’)的量應使得到的溶液中異構體(A’)/異構體(A)的摩爾比是5/3-10/1。24.根據權利要求20的方法，其中在步驟(a)中的溶液中，酯化合物(A’)/異構體(A)的摩爾比最多是酯化合物(B’)/異構體(B)的摩爾比的9/35。25.根據權利要求18-24中任一的方法，其中使用的溶劑是選自下列的一種溶劑醇溶劑、醚溶劑、可以被鹵原子取代的芳族烴溶劑、可以被鹵原子取代的脂族烴溶劑，和酯溶劑。26.根據權利要求18-25中任一的方法，其中在步驟(a)中在結晶異構體(A)之前的溶液含有的異構體(A)的濃度是0.5-4摩爾/升，異構體(A)的結晶在溫度-30至+15℃進行。27.制備式(II)的(2S，3S)-1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物或其可藥用鹽的方法，式中A環和B環獨立地是取代的或未取代的苯環，R2是2-(二甲基氨基)乙基或下式的基其改進包括用在權利要求1-26中任一方法中得到的反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的(2R，3S)-異構體，即旋光異構體A，作為起始物料。28.根據權利要求27的方法，其中A環是4-甲氧基苯基，B環是未取代的苯環，R2是2-(二甲基氨基)乙基。29.制備式(III)的(2R，3R)-1，5-苯并硫雜吖庚因衍生物或其可藥用的鹽的方法，式中A環和B環獨立地是取代的或未取代的苯環，其改進包括用在權利要求1-26中任一方法中得到的反式-3-取代的縮水甘油酸酯(I)的(2S，3R)-異構體，即旋光異構體(A)，作為起始物料。30.制備下式的旋光的蘇-硝基羧酸化合物的方法，式中A環和B環獨立地是取代的或未取代的苯環，*表示不對稱碳原子，其改進包括用在權利要求1-26中任一方法中得到的旋光異構體(A)作為起始物料。全文摘要制備式(Ⅰ)的旋光的反式－3－取代的縮水甘油酸酯化合物的方法,式中,A環是取代或未取代苯環,R文檔編號C07C319/14GK1199733SQ98108069公開日1998年11月25日申請日期1998年2月26日優先權日1997年2月27日發明者古井正勝,古谷敏行申請人:田邊制藥株式會社