專利名稱：N(－芳基/雜芳基乙酰基)氨基酸酯、包括這些酯的藥用組合物以及用這些化合物抑制β淀 ...的制作方法
相關申請的相互參考本申請要求美國臨時申請第60/__,__號，該申請根據37C.F.R.§1.53(b)(2)(ⅱ)由1996年11月22日提交的美國專利申請第08/754,895號轉變而來的權益，該申請通過引用其全部結合到本文中作為參考。
背景技術：
發明領域本發明涉及抑制β-淀粉樣肽釋放和/或其合成的化合物，并因此在治療阿爾茨海默氏病中具有實用性。本發明也涉及包含這類化合物的藥用組合物以及抑制β-淀粉樣肽釋放的方法。參考文獻以下出版物、專利和專利申請在本申請中以上標數字引用1Glenner等，“阿爾茨海默氏病新型腦血管淀粉狀蛋白的純化和鑒定的初步報道”，Biochem.Biophys.Res.
Commun.,120:885-890(1984)。
2Glenner等，“阿爾茨海默氏病的肽標記及其診斷用途”，于1987年5月19日頒發的美國專利第4,666,829號。
3Selkoe，“阿爾茨海默氏病的分子病理學”Neuron,6:487-498(1991)。
4Goate等，“患有家族性阿爾茨海默氏病的淀粉樣前體蛋白基因中錯義突變的分離”，Nature,349:704-706(1990)。
5Chartier-Harlan等，“由β-淀粉狀前體蛋白基因中密碼子717突變引起的阿爾茨海默氏病早期發作”，Nature,353:844-846(1989)。
6Murrell等，“與遺傳性阿爾茨海默氏病有關的淀粉狀前體蛋白突變”，Science,254:97-99(1991)。
7Mullan等，“β-淀粉狀蛋白N末端的APP基因中可能的致阿爾茨海默氏病的病理突變”，Nature Genet.,1:345-347(1992)。
8Schenk等，“檢測可溶性β-淀粉樣肽的方法和組成”，于1994年5月11日公開的國際專利申請公布第WO94/10569號。
9Selkoe，“淀粉狀蛋白和阿爾茨海默氏病”，ScientificAmerican，第2-8頁，1991年11月。
10Losse等，Tetrahedron,27:1423-1437(1971)。
11Citron等，“家族性阿爾茨海默氏病中β-淀粉狀前體蛋白突變增加β-蛋白的產生，Nature,360:672-674(1992)。
12Hansen等，“測定細胞生產和細胞殺傷的精確和快速的染料法的再檢測和進一步開發”，J.Immun.Meth.,119:203-210(1989)。
13P.Seubert,Nature(1992)359:325-32714Johnson-Wood等，PNAS USA(1997)94:1550-155515Tetrahedron Letters,34(48),7685(1993))所有以上出版物、專利和專利申請均通過引用全部結合到本文中作為參考，其程度與每個單獨的出版物、專利或專利申請專門而單獨地表明通過引用全部結合到本文中作為參考一樣。本領域的狀況阿爾茨海默氏病(AD)是一種退行性腦病，其臨床特征在于進行性記憶、認知、推理、判斷和情緒穩定性的喪失，它逐漸導致深度精神退化(mental deterioration)，最終導致死亡。AD為老年人中進行性精神障礙(癡呆)的非常常見的原因，據信在美國為死亡的第四個主要醫學原因。已經在世界范圍的人種和人種群中觀察到AD，并是目前和未來公眾健康的主要問題。該病目前估計僅在美國就影響大約二至三百萬人。目前AD是不可治愈的。目前未知有效預防AD或逆轉其癥狀和病程的療法。
患有AD的個體的大腦表現出特征性損害，該損害稱為老年(或淀粉狀蛋白)斑、淀粉樣血管病(淀粉狀蛋白在血管中沉積)和神經原纖維纏繞。大量的這些損害(特別是淀粉狀蛋白斑和神經原纖維纏繞)一般在患有AD的患者中對記憶和認知功能重要的人腦的幾個區域中發現。更有限解剖分布的少數這些損害也在不具有臨床AD的大部分老年人腦中發現。淀粉狀蛋白斑和淀粉樣血管病特征也為個體的大腦具有第21對染色體三體性(唐氏綜合征)和具有Dutch類型淀粉狀蛋白病的遺傳性大腦出血(HCHWA-D)。目前，AD的確診通常需要在患有此病死亡的患者腦組織中或極少情況下在侵入性神經外科手術期間取出的腦組織小活檢樣品中觀察上述損害。
AD和上述其它疾病的淀粉狀蛋白斑和血管淀粉狀蛋白沉積(淀粉樣血管病)特征性的主要化學組分為大約39-43個氨基酸的約4.2千道爾頓(kD)蛋白，稱為β-淀粉樣肽(βAP)，或有時為Aβ、AβP或β/A4。Glenner等1首先純化了β-淀粉樣肽，并提供了部分氨基酸序列。在美國專利第4,666,8292中描述了前28個氨基酸的分離步驟和序列的數據。
分子生物學和蛋白化學分析已經表明，β-淀粉樣肽為大得多的前體蛋白(APP)的小片段，APP正常由各種動物(包括人)的許多組織中的細胞產生。對編碼APP的基因結構的了解已經證明，β-淀粉樣肽被蛋白酶從APP切下，作為肽片段產生。β-淀粉樣肽片段從APP切下以及隨后作為淀粉狀蛋白斑在腦組織和腦血管壁和腦膜血管壁中沉積的精確的生物化學機制目前尚不清楚。
幾方面的證據表明，進行性β-淀粉樣肽腦沉積在AD發病機理中起初期(seminal)作用，并可以數年或數十年先于認知癥狀。參見例如Selkoe3。最重要的證據是這樣一個發現，即在具有遺傳決定(家族性)形式的AD的幾個家族中，APP的770個氨基酸的同種型的氨基酸717的錯義DNA突變可以在受影響成員中發現，而在未受影響的成員中沒有發現(Goate等4；Chartier-Harlan等5；和Murrell等6)，該突變形式稱為瑞典變異體。1992年報道了在瑞典人家族中發現的賴氨酸595-甲硫氨酸596突變為天冬酰胺595-亮氨酸596(參考695同種型)的雙突變(Mulan等7)。遺傳連鎖分析已經證明，這些突變以及APP基因中的某些其它突變是這類家族中受影響成員AD的特異性分子原因。另外，已經鑒定APP的770個氨基酸同種型的氨基酸693的突變為β-淀粉樣肽沉積病HCHWA-D的原因，而在其它情況下，在某些非HCHWA-D的患者中，于氨基酸692處由丙氨酸向甘氨酸的變化產生類似于AD的表型。基于遺傳的AD病例中APP的這些突變和其它突變的發現證明，APP的改變和其β-淀粉樣肽片段的隨后沉積可以引起AD。
盡管在了解AD和其它β-淀粉樣肽相關疾病的發病機理(underlying mechanisms)方面已取得進展，但仍計算值開發治療所述疾病的方法和組合物。理想的是，所述治療方法最好基于能夠抑制體內β-淀粉樣肽釋放和/或其合成的藥物。
發明概述本發明涉及發現一類抑制β-淀粉樣肽釋放和/或其合成的化合物，因此它們可用于在易患AD患者中預防AD和/或治療患有AD的患者，以抑制其病癥的進一步惡化。具有上述性質的該類化合物由以下式Ⅰ定義
Ⅰ其中R1選自a)烷基、鏈烯基、烷基環烷基(alkcycloalkyl)、苯基-(R)m-、萘基-(R)m-，其中R是1-8個碳原子的亞烷基，m是等于0或1的整數、環烷基、環烯基、3-吡啶基、4-吡啶基以及不是3-吡啶基和4-吡啶基的雜芳基，該雜芳基具有3-10個原子以及1-4個選自氧、硫和氮的雜原子其中所述雜芳基是任選由1-3個選自烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、鹵素、硝基、硫代烷氧基和硫代芳氧基的取代基取代，條件是對此種雜芳基當至少有一個氮原子時，也至少有一個氧和/或硫雜原子；b)式Ⅱ的取代苯基
Ⅱ其中R是1-8個碳原子的亞烷基，m是等于0或1的整數。
Ra和Ra’獨立選自氫、羥基、氟和甲基；Rb和Rb’獨立選自氫、烷基、烷氧基、芳基、氰基、環烷基、鹵素、雜芳基、雜環基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基和-C(O)R4其中R4選自烷基、芳基、烷氧基和芳氧基；及Rc選自氫、烷基、芳基、氰基、鹵素、硝基及當Rb和Rc結合形成帶有苯環的亞甲二氧基環；及當Rb和/或Rb’和/或Rc是氟、氯、溴和/或硝基時，則Ra和/或Ra’也可以是氯；及c)在5、6、7和/或8位用1-4個選自烷基、烷氧基、鹵素、氰基、硝基、三鹵代甲基和硫代烷氧基取代的1-或2-萘基-(R)m-，其中R是1-8個碳原子的亞烷基及m是等于0或1的整數；R2選自氫、烷基、苯基、烷基烷氧基、烷基硫代烷氧基；及R3選自-(CH2)nCR10R5R6，其中n是等于0、1或2的整數，R5和R6獨立選自氫、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、雜環基、-NR7R8其中R7和R8獨立是氫或烷基、-COOR9其中R9是烷基，以及其中R5和R6結合形成環烷基、環烯基、芳基、雜芳基和雜環基，并且當R5和R6不結合形成芳基或雜芳基時，則R10選自氫和烷基，條件是當n是0時，那么R10是氫，而當n大于0且R5和R6結合形成芳基或雜芳基時，則R10成為該基團中的鍵；X是氧或硫；X’是氫、羥基或氟；X”是氫、羥基或氟，或X’和X”一起為氧代，以及所述化合物的藥學上可接受的鹽，其條件是當R1是苯基，R2是-CH(CH3)CH2CH3,X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH3或-CH2CH(CH3)2當R1是苯基，R3是-CH2CH(CH3)2,X是氧，及X’和X”是氫時，則R2不是-CH(CH3)2當R1是吡啶-3-基，R2是乙基，X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH(CH3)2當R1是吲哚并噁嗪-3-基(indoxazin-3-yl)、2,4-二甲基噻唑-5-基、4-甲基-1,2,5-硫代噁二唑-3-基或3,5-二(三氟甲基)苯基，R2是甲基，X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH(CH3)2，和當R1是-CH2-苯基，R3是CH2CH3,X是氧，及X’和X”是氫時，則R2不是-CH2CH(CH3)2。
令人驚奇的是，在苯基的2和/或6位取代基僅限于上述引用的取代基，而不是上述具體指定的取代基的大的取代基時，則去除了所得化合物抑制β-淀粉樣肽釋放和/或其合成的能力。
因此，在其方法的一個方面，本發明涉及在細胞內抑制β-淀粉樣肽釋放和/或其合成的方法，該方法包括給此種細胞抑制β-淀粉樣肽細胞釋放和/或合成有效量的上述式Ⅰ化合物或其混合物。
由于體內β-淀粉樣肽的產生與AD的發病機理有關8,9，所以式Ⅰ化合物也可用于藥用組合物中以預防和/或防治和/或治療AD。因此，在其方法的另一個方面，本發明涉及防止有AD發病危險的患者AD發作的方法，該方法包括給所述患者服以包括藥用惰性載體和有效量的上述式Ⅰ化合物或其混合物的藥用組合物。
在其方法的再一個方面，本發明涉及治療AD患者以抑制患者病情的進一步惡化的治療方法，該方法包括給所述患者服以包括藥用惰性載體和有效量的上述式Ⅰ化合物或其混合物的藥用組合物。
在上述式Ⅰ中，優選的R1未取代芳基包括例如苯基、1-萘基、2-萘基等。
優選的R1取代芳基包括，例如在2、3或4位有單一取代的單取代苯基，其中各特定取代基分別由Ra/Ra’、Rb/Rb’和Rc基團支配；二取代苯基，包括在2,3-位、2,4-位、2,5-位、2,6-位、3,4-位、3,5-位或3,6-位具有兩個取代基的二取代苯基，其中各特定取代基分別由Ra、Ra’、Rb、Rb’和Rc基團支配；及三取代苯基，包括在2,3,4-位、2,3,5-位、2,3,6-位、3,4,5-位和3,4,6-位具有三個取代基的三取代苯基，其中這些取代基中的每一個又分別由Ra、Ra’、Rb、Rb’和Rc基團支配。優選取代苯基不包括多于3個取代基。
取代苯基的實施例包括，例如，4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-硝基苯基、4-甲基苯基、3-甲氧基苯基、3-硝基苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、3-溴苯基、3-硫代甲氧基苯基、3-甲基苯基、3-三氟甲基苯基、2-羥基苯基、2-甲基苯基、2-氟苯基、3,4-二氯苯基、3,4-亞甲二氧基苯基、3,5-二氟苯基、3,5二氯苯基、2,4-二氯苯基和2,5-二氟苯基。
優選的R1由苯基-R-表示，包括例如芐基、3-苯基乙基、4-苯基-n-丙基等。
優選的R1烷基、烷基環烷基、環烷基和環烯基包括，例如仲-丁基、環丙基、環丁基、環己基、環戊基、環己-1-烯基、-CH2-環丙基、-CH2-環丁基、-CH2-環己基、-CH2-環戊基、-CH2CH2-環丙基、-CH2CH2-環丁基、-CH2CH2-環己基、-CH2CH2-環戊基等。
優選的R1雜芳基和取代雜芳基包括，例如吡啶-3-基、吡啶-4-基、噻吩-2-基、噻吩-3-基、苯并噻唑-4-基、2-苯基苯并噁唑-5-基、呋喃-2-基、苯并呋喃-2-基、苯并噻吩-3-基、2-氯噻吩-5-基、3-甲基異噁唑-5-基、2-(苯硫基)噻吩-5-基、6-甲氧基噻吩-2-基、3-苯基-1,2,4硫代噁二唑-5-基、2-苯基噁唑-4-基等。
優選的R2選自1-4個碳原子的烷基、苯基、1-4個碳原子烷基烷氧基和1-4個碳原子的烷硫基烷氧基。特別優選的R2包括，例如甲基、乙基、正-丙基、異-丙基、正-丁基、異-丁基、-CH2CH2SCH3、環己基和苯基。
當X是氧時，優選的R3取代基包括，例如甲基、乙基、異-丙基、正-丙基、正-丁基、異-丁基、環戊基、烯丙基、異-丁-2-烯基、3-甲基戊基、-CH2-環丙基、-CH2-環己基、-CH2-(3-四氫呋喃基)、-CH2-噻吩-2-基、-CH2-(1-甲基)環丙基、-CH2-噻吩-3-基、-CH2-C(O)O-叔丁基、-CH2-C(CH3)3、-CH2CH(CH2CH3)3、-2-甲基環戊基、環己-2-烯基、-CH[CH(CH3)2COOCH3、-CH2CH2N(CH3)2、-CH2C(CH3)=CH2、-CH2CH=C(CH3)2等。
當X是硫時，優選的R3取代基包括，例如異-丁-2-烯基和異-丁基。
本發明也提供包含藥用惰性載體和上述式Ⅰ化合物的新的藥用組合物。
特別優選的用于本發明方法和組合物的化合物包括，例如下述的化合物，其中R2基團(當合適時)的立體化學優選衍生自L-氨基酸N-(苯基乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-(3-苯基丙酰基)丙氨酸異-丁酯N-(3-甲基戊酰基)丙氨酸異-丁酯N-(4-氯苯基)乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(3,4-二氯苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-吡啶基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(1-萘基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-萘基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-(4-苯基丁酰基)丙氨酸異-丁酯N-(5-苯基戊酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(4-吡啶基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯2-[(3,4-二氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-甲氧基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-硝基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3,4-亞甲二氧基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(噻吩-3-基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-硝基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-羥基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-萘基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2,4-二氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-溴苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯
2-[(3-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(苯并噻唑4-基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-甲基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-溴苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-三氟甲基苯基)乙酰氨基丁酸異-丁酯2-[(2-噻吩基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-(苯基乙酰氨基)丁酸異-丁酯N-(苯基乙酰基)纈氨酸2-甲基丁酯N-(苯基乙酰基)甲硫氨酸異-丁酯N-(苯基乙酰基)亮氨酸異-丁酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-甲基丁-2-烯基酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸環丙基甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-噻吩基甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸(1-甲基環丙基)甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-噻吩基甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-甲基環戊酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-甲基丙-2-烯基酯N-[(3-氟苯基)乙酰基]丙氨酸環己-2-烯基酯N-[(2-苯基苯并噁唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-甲基噻吩基(thiophenyl))乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-4-[(2-呋喃基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(苯并呋喃-2-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(苯并噻吩-3-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-氯-5-噻吩基)乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(3-甲基-異噁唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯
N-[(2-苯基硫代噻吩基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(6-甲氧基苯并噻吩-2-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-苯基-1,2,4-噻二唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-苯基噁唑-4-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-甲基苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-噻吩基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(4-甲基苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-(苯基乙酰基)丙氨酸(1-甲氧基羰基)異-丁酯N-[(3-硝基苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸乙酯N-[(3-硝基苯基)乙酰基]甲硫氨酸乙酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-(N,N-二甲基氨基)乙酯2-[(3,5-二氯苯基)乙酰氨基]己酸甲酯N-[(3,5-二氯苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-(環己基乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-(環戊基乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(環己-1-烯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-甲基丁-2-烯基硫酯N-[(2-苯基)-2-氟乙酰基]丙氨酸乙酯N-(3,5-二氟苯基乙酰基)苯基甘氨酸甲酯N(3,5-二氟苯基乙酰基)苯基甘氨酸異-丁酯N-(環戊基乙酰基)苯基甘氨酸甲酯N-(環戊基乙酰基)丙氨酸甲酯N-(環丙基乙酰基)苯基甘氨酸甲酯N-(環丙基乙酰基)丙氨酸甲酯
N-[(3-硝基苯基)乙酰基]甲硫氨酸異-丁酯另外，本發明提供下式Ⅲ的新化合物和其藥學上可接受的鹽
Ⅲ其中R1選自a)烷基、鏈烯基、烷基環烷基、苯基-(R)m-、萘基-(R)m-，其中R是1-8個碳原子的亞烷基及m是等于0或1的整數、環烷基、環烯基、3-吡啶基、4-吡啶基以及不是3-和4-吡啶基的雜芳基，該雜芳基具有3-10個原子以及1-4個選自氧、硫和氮的雜原子，其中所述雜芳基任選由1-3個選自烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、鹵素、氮、硫代烷氧基和硫代芳氧基取代基取代，條件是當此種雜芳基至少有一個氮原子時，也至少有一個氧和/或硫雜原子；b)式Ⅱ的取代苯基
Ⅱ其中，R是1-8個碳原子的亞烷基，m是等于0或1的整數。
Ra和Ra’獨立選自氫、羥基、氟和甲基；Rb和Rb’獨立是選自氫、烷基、烷氧基、芳基、氰基、環烷基、鹵素、雜芳基、雜環基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基和-C(O)R4其中R4選自烷基、芳基、烷氧基和芳氧基；及Rc選自氫、烷基、芳基、氰基、鹵素、硝基及Rb和Rc結合形成帶有苯環的亞甲二氧基環；及當Rb和/或Rb’和/或Rc是氟、氯、溴和/或硝基時，則Ra和/或Ra’也可以是氯；及c)在5、6、7和/或8位用1-4個選自烷基、烷氧基、鹵素、氰基、硝基、三鹵代甲基和硫代烷氧基取代的1-或2-萘基-(R)m-，其中R是1-8個碳原子的亞烷基及m是等于0或1的整數；R2選自氫、烷基、苯基、烷基烷氧基、烷基硫代烷氧基；及R3選自-(CH2)nCR10R5R6，其中n是等于0、1或2的整數，R5和R6獨立選自氫、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、雜環基、-NR7R8，其中R7和R8獨立是氫或烷基及-COOR9，其中R9是烷基，以及其中R5和R6可以結合形成環烷基、環烯基、芳基、雜芳基和雜環基，并且當R5和R6不結合形成芳基或雜芳基時，則R10選自氫和烷基，條件是當n是0時，那么R10是氫以及當n大于0時和R5和R6結合形成芳基或雜芳基時，則R10成為該基團中的鍵；X是氧或硫；X’是氫、羥基或氟；X”是氫、羥基或氟，或X’和X”一起形成氧代基團，其條件是當R1是苯基，R2是-CH(CH3)CH2CH3,X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH3或-CH2CH(CH3)2當R1是苯基，R3是-CH2CH(CH3)2,X是氧，及X’和X”是氫時，則R2不是-CH(CH3)2當R1是吡啶-3-基，R2是乙基，X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH(CH3)2當R1是吲哚并噁嗪-3-基、2,4-二甲基噻唑-5-基、4-甲基-1,2,5-硫代噁二唑-3-基或3,5-二(三氟甲基)苯基，R2是甲基，X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH(CH3)2，和當R1是-CH2-苯基，R3是-CH2CH3,X是氧，及X’和X”是氫時，則R2不是-CH2CH(CH3)2。
進一步的條件是不包括下述已知化合物N-(苯基乙酰基)甲硫氨酸乙酯。
優選的上述式Ⅲ包括下述式Ⅳ提出的化合物
Ⅳ
另一優選的上述式Ⅰ包括化合物，其中R1是苯基，R2是氟及R3是甲基。本發明詳細說明如上所述，本發明涉及抑制β-淀粉樣肽釋放和/或其合成的化合物，并因此具有治療阿爾茨海默氏病的作用。然而，在進一步詳細介紹本發明之前，先定義下列術語。定義術語“β-淀粉樣肽”指分子量約為4.2kD的39-40氨基酸的肽，該肽基本上與Glenner等1所述的蛋白質形式同源，包括正常β-淀粉樣肽的突變和翻譯后修飾。無論為何種形式，該β-淀粉樣肽均是大跨膜糖蛋白的大約39-43氨基酸片段，稱為β-淀粉樣前體蛋白(APP)。其43-氨基酸序列是1Asp Ala Glu Phe Arg His Asp Ser Gly Tyr11Glu Val His His Gln Lys Leu Val Phe Phe21Ala Glu Asp Val Gly Ser Asn Lys Gly Ala31Ile Ile Gly Leu Met Val Gly Gly Val Val41Ile Ala Thr(SEQ ID NO:1)或基本上與其同源的序列。
“烷基”指單價烷基，優選具有1-10個碳原子、更優選1-6個碳原子。該術語由如甲基、乙基、正-丙基、異-丙基、正-丁基、異-丁基、叔-丁基、正-己基等基團示例。
“亞烷基”指二價亞烷基，優選具有1-8個碳原子、更優選1-6個碳原子。該術語由如亞甲基(-CH2-)、亞乙基(-CH2CH2-)、亞丙基異構體(例如，-CH2CH2CH2-和-CH(CH3)CH2-)等示例。
“烷氧基”指“烷基-O-”，其中烷基如此處定義。優選的烷氧基包括，例如，甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、異-丙氧基、正-丁氧基、叔-丁氧基、仲-丁氧基、正-戊氧基、正-己氧基、1,2-二甲基丁氧基等。
“烷基烷氧基”指“-亞烷基-O-烷基”基團，其中亞烷基和烷基如此處定義。此種基團包括，例如亞甲基甲氧基(-CH2OCH3)、亞乙基甲氧基(-CH2CH2OCH3)、正-亞丙基-異-丙氧基(-CH2CH2CH2O-CH(CH3)2)、亞甲基-叔-丁氧基(-CH2OCH(CH3)3)等。
“烷基硫代烷氧基”指“-亞烷基-S-烷基”基團，其中亞烷基和烷基如此處定義。此種基團包括，例如亞甲基硫代甲氧基(-CH2SCH3)、亞乙基硫代甲氧基(-CH2CH2SCH3)、正-亞丙基-異-硫代丙氧基(-CH2CH2CH2SCH(CH3)2)、亞甲基-叔-硫代丁氧基(-CH2S-CH(CH3)3)等。
“鏈烯基”指優選具有2-10個碳原子、更優選2-6個碳原子并且具有至少1個、優選1-2個鏈烯基不飽和位點的鏈烯基。優選的鏈烯基包括乙烯基(-CH=CH2)、正-丙烯基(-CH2CH=CH2)、異-丙烯基(-C(CH3)=CH2)等。
“炔基”指優選具有2-10個碳原子、更優選2-6個碳原子并且具有至少1個、優選和1-2個炔基不飽和位點的炔基。優選的炔基包括乙炔基(-C≡CH)、丙炔基(-CH2C≡CH)等。
“酰基”指烷基-C(O)-、芳基-C(O)-和雜芳基-C(O)-，其中烷基、芳基和雜芳基如此處定義。
“酰氨基”指基團-C(O)NRR，其中每個R獨立是氫或烷基。
“烷基環烷基”指-亞烷基-環烷基基團，其中亞烷基和環烷基如此處定義。
“氨酰基”指-NRC(O)R基團，其中每個R獨立是氫或烷基。
“酰氧基”指烷基-C(O)O-、芳基-C(O)O-、雜芳基C(O)O-和雜環基-C(O)O-基團，其中烷基、芳基、雜芳基和雜環基如此處定義。
“芳基”指6-14碳原子、具有單環(例如，苯基)或多個稠合環(例如，萘基或蒽基)的未飽和芳香碳環基。優選的芳基包括苯基和萘基等。
除對芳基取代基定義的其它限制外，此種芳基可任選被1-3個選自下列的取代基取代羥基、酰基、酰氧基、烷基、烷氧基、鏈烯基、氨基、氨酰基、芳基、芳氧基、羧基、羧基烷基、酰氨基、氰基、鹵素、硝基、雜芳基、三鹵代甲基、硫代烷氧基等。優選的取代基包括烷基、烷氧基、鹵素、氰基、硝基、三鹵代甲基和硫代烷氧基。
“芳氧基”指芳基-O-基團，其中芳基如上定義，包括任選取代芳基，也如上定義。
“羧烷基”指-C(O)O-烷基，其中烷基如此處定義。
“環烷基”指3-10個碳原子、具有單環或多個稠合環的可任選用1-3個烷基取代的環狀烷基。此類環烷基包括，例如單環結構如環丙基、環丁基、環戊基、環辛基、1-甲基環丙基、2-甲基環戊基、2-甲基環辛基等，或多元環結構如金剛烷基等。
“環烯基”指可任選用1-3個烷基取代的4-8個碳原子、具有單環和至少一個內部不飽和點的環狀烯基。合適的環烯基的實例包括，例如環丁-2-烯基、環戊-3-烯基、環辛-3-烯基等。
“鹵代”或“鹵素”指氟、氯、溴和碘，并且優選氟或氯。
“雜芳基”指在環中有2-8個碳原子和1-4個選自氧、氮和硫的雜原子的單價芳基。
除對雜芳基取代基定義的其它限制外，此種雜芳基可任選用1-3個選自下列的取代基取代烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、鹵素、硝基、雜芳基、硫代烷氧基、硫代芳氧基。此類雜芳基可具有一個單環(例如，吡啶基或呋喃基)或多個稠合環(例如，中氮茚基或苯并噻吩基)。優選的雜芳基包括吡啶基和呋喃基。
“雜環”或“雜環的”指，在環內有1-8個碳原子和1-4個選自氮、硫或氧的雜原子、具有單環或多個稠合環的單價(例如，一個連接點)飽和或未飽和基團。
除對雜環取代基定義的其它限制外，此類雜環可任選用1-3個選自下列的取代基取代烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、鹵素、硝基、雜芳基、硫代烷氧基、硫代芳氧基等。此類雜環可為單環(例如，哌啶基或四氫呋喃基)或多個稠合環(例如，二氫吲哚或二氫苯并呋喃或奎寧環基)。優選的雜環基包括哌啶基、吡咯烷基和四氫呋喃基。
雜環和雜芳基的實例包括但不限于呋喃、噻吩、噻唑、噁唑、苯并噻唑、苯并呋喃、苯并噻吩、吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、噠嗪、中氮茚、異吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、異喹啉、喹啉、2,3-二氮雜萘、萘基吡啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、異噻唑、吩嗪、異噁唑、吩噁嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉、哌啶、哌嗪、吡咯烷、二氫吲哚等。
“硫羥基”指-SH基團。
“硫代烷氧基”指-S-烷基，其中烷基如此處定義。
“硫代芳氧基”指芳基-S-基團，其中所述芳基如上定義，包括也如上定義的任選取代的芳基。
“硫代雜芳氧基”指雜芳基-S-基團，其中所述雜芳基如上定義，包括也如上定義的任選取代的芳基。
“藥學上可接受的鹽”指式Ⅰ化合物的藥學上可接受的鹽，該鹽衍生自各種本領域熟知的有機和無機反離子，包括(僅作為實例)，鈉、鉀、鈣、鎂、銨、四烷基銨等；及當分子中含有堿性官能性度時，有機或無機酸鹽，如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、乙酸鹽、馬來酸鹽、草酸鹽等。化合物制備由數條合成途徑，使用選自相對易于化合物制備的特定路徑、可商業購得的原料等可容易地制備上述式Ⅰ化合物。
第一個方法包括乙酸衍生物與酯化氨基酸的伯胺常規偶合，如反應(1)所示
其中R1、R2、R3、X、X’和X”如上定義。
在提供N-乙酰基衍生物3的條件下，反應(1)僅包括合適的乙酸衍生物1與氨基酸酯的伯胺2偶合。該反應按肽合成是常規進行并且用于此的合成方法也可用于制備本發明的N-乙酰基氨基酸酯3。例如，在使用或不使用熟知的輔助劑如N-羥基琥珀酰亞胺、1-羥基-苯并三唑等的情況下，可以使用熟知的偶合劑如碳二亞胺或BOP(苯并三唑-1-基氧基-三(二甲氨基)六氟磷酸鏻)以促進偶合。該反應常規在惰性質子稀釋劑如二甲基甲酰胺、二氯甲烷、氯仿、乙腈、四氫呋喃等中進行。或者，在反應(1)中可使用式1化合物的酰鹵，并且當這樣使用時，一般在適當的堿(用于清除反應中產生的酸)存在下使用。合適的堿包括，例如三乙胺、二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉等。
反應(1)優選于約0℃至約60℃進行直至反應完成，一般在1-約24小時完成。反應完成后，N-乙酰基氨基酸酯3通過常規方法回收，這些方法包括沉淀、層析、過濾等。
在反應(1)中，各試劑(乙酸衍生物1和氨基酸酯2)是本領域熟知的，并可由商業大量購得。
或者，在上述反應(1)中所述的合成可在氨基酸(XR3=OH)上進行，接著如上所述形成N-乙酰基，然后在常規條件下，用醇(HOR3)或硫醇(HSR3)將所述羧酸酯化，得到式Ⅰ化合物N-乙酰基氨基酸酯3。例如，含酯基的R3基團的酯化方法可使用Losse等10的方法完成。
在進一步的實施方案中，常規酯基轉移技術可用于在N-乙酰基氨基酸酯3上制備不同酯基。許多進行酯基轉移的技術是本領域熟知的，并且每一技術僅用衍生自相應醇(即，HOR3)或硫醇(即，HSR3)的不同-OR3/-SR3基團取代N-乙酰基氨基酸酯3中的-OR3基團，并且在某些情況下，使用催化劑如異丙氧鈦(Ⅳ)以促進反應完成。在一種技術中，首先在合適的稀釋劑如甲苯中，用氫化鈉處理醇HOR3或硫醇HSR3生成相應的醇化鈉或硫代醇化鈉，接著用于進行N-乙酰基氨基酸酯的酯基轉移。該技術的有效性對使用高沸點和/或貴重醇特別有用。
在另一酯基轉移技術中，將待酯基轉移的N-乙酰基氨基酸酯3置于進行酯基轉移的大量過量醇或硫醇中。然后加入催化量氫化鈉，該反應在常規條件下迅速進行得到所需酯基轉移產物。由于該方案需要使用大量過量醇或硫醇，所以當醇不貴時，該方法是特別有用的。
酯基轉移提供在上述式Ⅰ化合物中R3取代基多重性的方便方法。在所有情況下，可用于進行酯基轉移的各種商業可獲得的醇和硫醇是本領域熟知的。
制備本發明酯的其它方法包括，例如首先將酯水解成游離酸，接著在堿如碳酸鉀存在下用鹵代-R3基團進行O-烷基化。
此處所述化合物也可用聚合物負載形式的碳二亞胺肽偶合劑制備。例如，聚合物負載形式的EDC已有介紹(Tetrahedron Letters,34(48),7685(1993))15。此外，已經發現新的碳二亞胺偶合劑PEPC及其相應聚合物負載形式，并且對制備本發明化合物是非常有用的。
適用于制備聚合物負載的偶合劑的聚合物或者可商業購得，或者可按聚合物領域技術人員熟知的方法制得。合適的聚合物必須具有帶有與碳二亞胺的端基胺反應的分支側鏈部分。此種反應基團包括氯、溴、碘和甲磺酰基。優選反應基團是氯代甲基。另外，聚合物的骨架對碳二亞胺和最終與聚合物連接的偶合劑使用的反應條件必須是惰性的。
可將一些羥甲基化樹脂轉化成用于制備聚合物負載的偶合劑的氯甲基化樹脂。這些羥甲基化樹脂的實例包括4-羥甲基-苯基乙酰氨基甲基樹脂(Pam Resin)和4-芐氧基芐醇樹脂(Wang Resin)，可得自Advanced Chemtech of Louisville,Kentucky,USA(見AdvancedChemtch1993-1994 catalog,115頁)。這些樹脂的羥甲基可通過任一本領域技術熟練人員熟知的方法轉化成所需的氯甲基。
由于易于商業購得性，所以優選的樹脂是氯甲基化苯乙烯/二乙烯基苯樹脂。如名稱所示，這些樹脂已經是氯甲基化的，并且在使用前不需要化學修飾。這些樹脂在商業上稱為Merrifield’s樹脂，并可得自Aldrich Chemical Company of Milwaukee,Wisconsin,USA(見Aldrich1994-1995catalog,899頁)。制備PEPC和其聚合物負載形式的方法見列流程所示。
此方法詳細介紹于美國臨時專利申請60/019,790,1996年6月14日遞交，介紹該專利的全文結合在此作為參考。簡言之，PEPC的制備首先由異氰酸乙酯與1-(3-氨基丙基)吡咯烷反應。所得脲用4-甲苯磺酰氯處理得到PEPC。聚合物負載形式由PEPC與相應的樹脂在標準條件下反應制備得到所需試劑。
應用這些試劑的羧酸偶合反應在約室溫至約45℃進行約3-120小時。一般而言，該產物可用CHCl3洗滌反應物并在減壓下濃縮剩余有機物來分離。如上討論的，由使用聚合物連接試劑的反應物中分離產物可極大的簡化，僅需要過濾反應混合物及接著在減壓條件下濃縮濾液。
其它酯制備的方法在下面實施例中提供。
在這些合成方法中，所用原料可含有手性中心(例如，丙氨酸)，因此當使用外消旋原料時，所得產物是R,S對映體的混合物。或者可以使用原料的手性異構體，并且如果使用的反應方法不使該原料外消旋化，那么可得到手性產物。此種反應方法可包括合成反應中手性中心的轉化。
因此，除另有指明外，本發明產物是R,S對映體的混合物。然而，優選需要手性產物時，所述手性產物相當于L-氨基酸衍生物。或者，手性產物可經由R,S混合物中分離對映體得到一種或另一種立體異構體的純化技術得到。此種技術是本領域熟知的。藥用制劑當用作藥物時，式Ⅰ化合物通常以藥用組合物的形式給予。這些化合物可經各種途徑給予，這些途徑包括口服、直腸、透皮、皮下、靜脈、肌內和鼻內。這些化合物作為注射和口服組合物均是有效的。這些組合物以制藥領域熟知的方法制備并包括至少一種活性化合物。
本發明也包括藥用組合物，它含有作為活性成分的一種或多種上述式Ⅰ化合物及藥學上可接受的載體。在制備本發明的組合物時，通常將活性成分與賦形劑混合，用賦形劑稀釋或用可以是膠囊、小藥囊、紙或其它容器載體包裹。當賦形劑作為稀釋劑時，它可為固體、半固體或液體物質，作為活性成分的溶媒、載體或介質。這樣，所述組合物可為片劑、丸劑、粉劑、錠劑、小藥囊、扁囊劑、酏劑、懸浮劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑、氣霧劑(為固體或在液體介質中)、含有例如多至10％(重量)活性化合物的軟膏劑、軟和硬膠囊劑、栓劑、無菌注射液和無菌包裝粉劑。
在制備制劑時，在與其它成分混合前，可能需要將活性化合物研磨成合適的顆粒大小。如果活性成分基本不溶，通常將其研磨至小于200目的顆粒大小。如果活性成分基本上是水溶性的，則通過研磨可調整顆粒大小以在制劑中基本均-分布，如約40目。
一些合適的賦形劑的實例包括乳糖、葡聚糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、西黃蓍膠、明膠、硅酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、無菌水、糖漿和甲基纖維素。制劑另外包括潤滑劑如滑石粉、硬脂酸鎂和礦物油；潤濕劑；乳化劑和懸浮劑；防腐劑如甲基-和丙基的羥基苯甲酸酯；甜味劑和矯味劑。本發明組合物可以應用本領域熟知的方法制成在給病人服藥后提供活性成分的迅速、持續或延遲釋放的制劑。
所述組合物優選制成單位劑型，每一劑型含活性成分約5-約100mg，更常見約10-約30mg。術語“單位劑型”指適于作為人和其它哺乳動物的單位劑量的物理可區分單位，每單位含有計算的產生所需治療作用的預計量活性物質和合適的藥用賦形劑。優選使用上述式Ⅰ化合物不超過所述藥用組合物的20％(重量)，更優選不超過15％(重量)，余量為藥用惰性載體。
所述活性化合物在很廣的劑量范圍內有效，并且一般以藥用有效量給予。然而可以理解，實際給藥量將由醫生根據相關的情況包括待治療的疾病、選擇的給藥途徑、實際給予的化合物、個體患者的年齡、體重、反應、患者癥狀的嚴重程度等來決定。
制備固體組合物如片劑時，將主要活性成分與藥用賦形劑混合，形成含有本發明化合物的均一混合物的固體預制劑組合物。當稱這些預制劑組合物為均勻的時，是指活性成分均勻分布于整個組合物中，這樣所述組合物可容易地再分為同樣有效的單位劑型如片劑、丸劑和膠囊劑中。然后將該固體預制劑再分為上述類型的單位劑型中，每個含有例如0.1-約500mg本發明活性成分。
本發明的片劑或丸劑可以包衣或者另外混合，以提供產生延長作用的劑型。例如，片劑或丸劑可包含內層劑量成分和外層劑量成分，后者為前者的包裹形式。該兩種組分可由腸衣層分隔，該腸衣層可阻止在胃中的崩解，并使內層組分完整通過進入十二指腸或延遲釋放。許多物質可用作此種腸衣層或包衣物，此種物質包括許多聚合酸和聚合酸與物質如蟲膠、十六烷基醇及乙酸纖維素的混合物。
可以摻入本發明的新組合物供口服或注射給予的液體形式包括水溶液、適當矯味的糖漿劑、水或油懸浮液和含有食用油如玉米油、棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油的矯味乳劑、以及酏劑和相似的藥用載體。
吸入或吹入組合物包括在藥學上可接受的水溶性或有機溶劑或其混合劑中的溶液和懸浮液劑以及粉劑。所述液體或固體組合物可含有上文所述的合適的藥學上可接受的賦形劑。優選這些組合物經口或經鼻呼吸途徑給藥發揮局部或全身作用。在優選藥學上可接受的溶劑中的組合物可用惰性氣體噴霧給藥。噴霧溶液可由噴霧裝置直接吸入或將噴霧裝置連接于面罩內、或間歇正壓呼吸機上。優選溶液、懸浮液或粉末組合物以適當的方式由傳遞制劑的裝置中經口或經鼻給藥。
下述制劑實施例說明本發明的代表性藥用組合物。
制劑實施例1制備含有下述成分的硬明膠膠囊成分 量(mg/膠囊)活性成分 30.0淀粉 305.0硬脂酸鎂 5.0混合上述成分并以340mg的量填入硬明膠膠囊。
制劑實施例2使用下述成分制備片劑成分 量(mg/片)活性成分 25.0微晶纖維素 200.0膠體二氧化硅 10.0硬脂酸 5.0
將成分混合并壓成片劑，每片重240mg。
制劑實施例3制備含有下述成分的干粉吸入劑成分重量％活性成分5乳糖95將活性成分與乳糖混合，并將混合物加至干燥粉末吸入裝置中。
制劑實施例4如下制備每片含30mg活性成分的片劑成分 量(mg/片)活性成分 30.0mg淀粉 45.0mg微晶纖維素 35.0mg聚乙烯吡咯烷酮(在無菌水中的10％溶液) 4.0mg羧甲基淀粉鈉 4.5mg硬脂酸鎂 0.5mg滑石粉 1.0mg總量 120mg將活性成分、淀粉和纖維素通過20目美國篩并充分混合。將所得粉末與聚乙烯吡咯烷酮溶液混合，然后通過16目美國篩。將如此制備的顆粒于50-60℃干燥，并通過16目美國篩。然后將預先通過30目美國篩的羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂和滑石粉加入所述顆粒中，混合后通過壓片機壓制成每片重120mg的片劑。
制劑實施例5如下制備每片含40mg藥物的膠囊劑
成分 量(mg/膠囊)活性成 40.0mg淀粉 109.0mg硬脂酸鎂 1.0mg總量 150mg將活性成分、淀粉和硬脂酸鎂混合，通過20目美國篩，并以150mg的量填充至硬明膠膠囊中。
制劑實施例6如下制備每粒含25mg活性成分的栓劑成分 量活性成分 25mg飽和脂肪酸甘油酯至2000mg使活性成分通過60目美國篩，并懸浮于預先用最低必須熱量熔融的飽和脂肪酸甘油酯中。然后該混合物倒進標示量為2.0g的栓模中并冷卻。
制劑實施例7如下制備每5.0ml劑量含50mg藥物的懸浮液成分量活性成分50.0mg西黃蓍膠4.0mg羧甲基纖維素鈉(11％)微晶纖維素(89％)50.0mg蔗糖1.75g苯甲酸鈉10.0mg矯味劑和著色劑 適量純凈水 5.0ml
將活性成分、蔗糖和西黃蓍膠混合，并通過10美國篩，然后與預先溶于水的微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉混合。用部分水稀釋苯甲酸鈉、矯味劑和著色劑，并攪拌加入。然后加入足夠的水至所需的體積。
制劑實施例8成分量(mg/膠囊)活性成分15.0mg淀粉407.0mg硬脂酸鎂3.0mg總量425.0mg將活性成分、淀粉和硬脂酸鎂混合，通過20目美國篩，并以425.0mg的量填充至硬明膠膠囊中。
制劑實施例9如下制備皮下制劑成分量活性成分5.0mg玉米油 1.0ml制劑實施例10如下制備局部用制劑成分量活性成分1-10g乳化蠟 30g液體石蠟20g白色軟石蠟 至100g將白色軟石蠟加熱至融。混入液體石蠟和乳化蠟，并攪拌至溶。加入活性成分并繼續攪拌至分散。然后冷卻該混合物成為固體。
用于本發明方法中的另一優選的制劑應用透皮傳遞裝置(“貼劑”)。此種透皮貼劑可用于以控制的量提供本發明化合物連續的或不連續的輸出。藥物經透皮貼劑膚傳遞的構建和使用是本領域熟知的。見例如美國專利5,023,252,1991年6月11日頒發，該專利結合在本文中作為參考。構建此種貼劑可以連續的、脈沖的或根據需要傳遞藥物。
通常，需要或必需在腦內直接或間接引入藥用組合物。直接的技術通常包括將藥物傳遞插管置入宿主的室系統以便繞過血腦屏障。一個用于將生物因子轉運至身體特定解剖學區域的此種置入傳遞系統介紹于美國專利5,011,472，該專利結合在本文中作為參考。
通常優選的間接技術通常包括配制組合物，通過將親水性藥物轉變成酯溶性藥物提供藥物潛伏作用(latentiation)。潛伏作用一般通過保護藥物中存在的羥基、羰基、硫酸酯(sulfate)和伯胺基團，以使藥物更具脂溶性和易于轉運穿過血腦屏障。或者，親水性藥物的傳遞可通過動脈內輸注可瞬間打開血腦屏障的高滲溶液來增強。
用于本發明的其它合適的制劑可見Remington’sPharmaceutical Sciences,Mace Publishing Company,Philadephia,PA第17版(1985年)。應用性本發明化合物和藥用組合物可用于抑制β-淀粉樣肽釋放和/或其合成，因而，具有治療哺乳動物包括人的阿爾茨海默氏病的用途。
如上提及的，文中所述化合物適用于許多上述藥物傳遞系統。另外，為了增加給予的化合物的體內血漿半衰期，可以將所述化合物包裹、引進脂質體腔內、制備為膠體或可以使用其它常規技術提供化合物延長的血漿半衰期。許多方法可用于制備脂質體，例如，如Szoka等的美國專利號4,235,871、4,501,728和4,837,028中所述，所有這些專利均結合在本文中作為參考。
給以患者的化合物的量將根據給予的化合物、給藥目的(如預防或治療)、患者的病情、給藥方式等而定。在治療應用中，給予患有AD患者足以至少部分阻止疾病及其并發癥的癥狀出現的量的組合物。達到該目的足夠量定義為“治療有效量”。用于此用途的有效量將取決于臨床醫生對如患者AD的嚴重程度、年齡、體重和患者的基本情況等因素的判斷。當用作治療劑，優選文中所述的化合物以約0.1-約500mg/kg/天的劑量范圍給藥。
在預防應用中，給有AD發病危險的患者(例如由遺傳篩選或家族遺傳特性決定)服以足夠量的抑制疾病癥狀發作的組合物。足夠完成此目的的量定義為“預防有效量”。用于此用途的有效量將取決于臨床醫生對如患者的年齡、體重和基本情況等因素的判斷。用作預防劑時，優選文中所述的化合物以約0.1-約500mg/kg/天的劑量范圍給藥。
如上提及的，所述化合物以如上所述的藥用組合物形式給藥。可將這些組合物經常規滅菌技術滅菌或過濾除菌。所得水溶液可以原液或凍干包裝使用，將所述凍干制劑與滅菌水載體在給藥前混合。所述化合物制劑的pH一般在3-11之間，更優選在5-9之間及最優選7-8。可以理解，使用部分前述賦形劑、載體或穩定劑將導致藥用鹽的生成。
下述合成和生物學實施例是用來說明本發明，并且不以任何形式限制本發明的范圍。
實施例在上述討論和下述實施例中，下述縮略語有下述意義。如果縮略語沒有定義，則它具有常規接受的意義。
bm =寬多重峰BOC=叔-丁氧羰基
BOP=苯并三唑-1-基氧基-三(二甲氨基)六氟磷酸鏻bd =寬二重峰bs =寬單峰CDI=1,1”-羰基二咪唑(carbodiimidazole)d =二重峰dd =雙二重峰dq =雙四重峰dt =雙三重峰DMF=二甲基甲酰胺DMAP =二甲基氨基吡啶DMSO =二甲基亞砜EDC=1-(3-二甲氨基丙基)-乙基碳二亞胺鹽酸鹽eq.=當量EtOAc =乙酸乙酯g =克h =小時Hunig’s base =二異丙基乙胺kg =公斤L =升m =多重峰M =摩爾M％=摩爾百分數max=最大meq=毫當量mg =毫克
ml=毫升mm=毫米mmol =毫摩爾N =當量ng=納克nm=納米OD=光密度P-EPC =1-(3-(1-吡咯烷基)丙基)-3-乙基碳二亞胺psi =磅/平方英寸φ =苯基q =四重峰quint.=五重峰rpm =轉數/分鐘s =單峰t =三重峰TFA =三氟乙酸THF =四氫呋喃tlc =薄層層析μl =微升UV=紫外此外，術語“Aldrich”是指下述方法中所用的化合物和試劑可由Aldrich Chemical Company,Inc.,1001West Saint Paul Avenue,Milwaukee,WI53233USA商業購得；術語“Fluka”是指所用的化合物或試劑可由Fluka Chemical Corp.,980South2nd Street,Ronkonkoma NY11779USA商業購得；Lancaste Synthesis,Inc.,P.O.Box100Windham,NH03087USA；術語“Lancaster”表示所用的化合物或試劑可商業則購自Lancaster Synthesis,Inc.,P.O.Box100Windham,NH03087USA；該術語“Sigma”是指所用的化合物或試劑可由Sigma,P.O.Box14508,St.Louis MO63178USA商業購得；術語“Chemservice”是指所用的化合物或試劑可由Chemservice Inc.,Westchester,PA.USA商業購得；術語“Bachem”是指所用的化合物或試劑可由Bachem Bioscience Inc.,3700Horizon Drive,Renaissance at Gulph Mills,King of Prussia,PA19406USA商業購得；術語“Maybridge”是指所用的化合物或試劑可由Maybrigdge Chemical Co.Trevillett,Tintagel,CornwallPL34OHW United Kingdom商業購得；及術語“TCI”是指所用的化合物或試劑可由TCI America,9211North Harborgate St.,Portland,Oregon,97203,OR,USA商業購得；術語“Alfa”是指所用的化合物或試劑可由Johnson Matthey Catalog Company,Inc.30BondStreet,Ward Hill,MA01835-0747商業購得；以及術語“NovaBiochem”是指所用的化合物或試劑可由NovaBiochem USA,10933North Torrey Pines Road,P.O.Box12078,La Jolla CA92039-2087商業購得。
在下述實施例中，所有溫度都是指Celsius溫度(除另有指明外)并且下述通用方法用于制備所述化合物。
通用方法AR1C(X’)(X”)C(O)Cl與H2NCH(R2)C(O)XR3偶合向在5ml吡啶中的(D,L)-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自下述實施例B)(4.6mmol)攪拌的溶液中加入4.6mmol酰氯。立即生成沉淀。將混合物攪拌3.5小時，用100ml乙醚稀釋，用10％HCl洗滌三次，用鹽水洗一次，20％碳酸鉀洗一次和鹽水洗一次。溶液用硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發得到產物。其它氨基酸酯也可用于此方法。
通用方法B
R1C(X’)(X”)C(O)OH與H2NCH(R2)C(O)XR3偶合將在20ml THF中的所述酸(3.3mmol)和CDI溶液攪拌2小時。加入L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自下述實施例B)(3.6mmol)，接著加入1.5ml(10.8mmol)三乙胺。將反應混合物攪拌過夜。該反應混合物用100ml乙醚稀釋，用10％HCl洗滌三次，鹽水洗一次，20％碳酸鉀洗一次和鹽水洗一次。溶液用硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發得到產物。其它氨基酸酯也可用于此方法。
通用方法CR1C(X’)(X”)C(O)NHCH(R2)C(O)OH與HOR3的酯化向攪拌的20ml THF的苯基乙酰基纈氨酸(1.6470g,7.0mmol)溶液中加入CDI(1.05g,6.5mmol)，并將該混合物攪拌1.5小時。將2-甲基丁醇(0.53g,6mmol)加入該混合物中，然后加入NaH(0.16g,6.5mmol)。立即發生鼓泡。將該反應混合物攪拌過夜。用100ml乙醚稀釋該反應混合物，用10％HCl洗滌三次，鹽水洗一次，20％碳酸鉀洗一次和鹽水洗一次。溶液用硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發得到產物。其它N-酰基氨基酸和醇也可應用此方法。
通用方法D酯水解成游離酸酯水解成游離酸通過常規方法進行。下述為此種常規脫酯化方法的兩個實施例。
向在CH3OH/H2O的1∶1的混合物中的所述酯中加入2-5當量的K2CO3。將該混合物加熱至約50℃約0.5-1.5小時，至tlc顯示完成反應。將該反應物冷至室溫，并將甲醇減壓蒸除。將剩余的水溶液的pH調節至約2，加入乙酸乙酯以提取產物。然后有機相用飽和NaCl水溶液洗滌，并用MgSO4干燥。該溶液減壓下除去溶劑得到產物。
將所述氨基酸酯溶于二噁烷/水(4∶1)中，并加入溶于水的LiOH(約2當量)，加完后全部溶劑為二噁烷∶水約2∶1。攪拌反應混合物至反應完成，并在減壓下除去二噁烷。殘留物用EtOAc稀釋，分層并將水層酸化至pH2。水層再用EtOAc提取，合并的有機層用MgSO4干燥，過濾后減壓除去溶劑。殘留物經常規方法(例如，重結晶)純化。
下述介紹此后一實施例。將3-NO2苯基乙酰基丙氨酸的甲酯9.27g(0.0348mol)溶于60ml二噁烷和15ml H2O中，并加入溶于15mlH2O中的LiOH(3.06g,0.0731mOl)。攪拌4小時后，減壓除去二噁烷并將殘留物用EtOAc稀釋，分層并將水層酸化至pH2，水層再用EtOAc(4×100ml)提取，合并的有機層用MgSO4干燥，過濾后減壓除去溶劑。殘留物由EtOAc/異辛烷重結晶得到7.5g(85％)3-硝基苯基乙酰基丙氨酸。C11H12N2O5理論值C=52.38,H=4.80，及N=11.11。分析實測值C=52.54,H=4.85，及N=11.08。[α]23=-29.9于589nm處。
通用方法E低溫下酸和醇BOP的偶合在氮氣下，將含有所述羧酸(100M％)和N-甲基嗎啉(150M％)的二氯甲烷溶液冷至-20℃。一次性加入BOP(105M％)，并將該反應混合物保持在-20℃15分鐘。加入相應的醇(120M％)，使該反應混合物溫熱至室溫，并攪拌12小時。然后將該反應混合物倒至水中，并用乙酸乙酯提取(3×)。合并的乙酸乙酯部分再用飽和檸檬酸水溶液(2×)、飽和碳酸氫鈉水溶液(2×)、鹽水(1×)洗滌，用無水硫酸鎂或硫酸鈉干燥，并減壓除去溶劑得到粗產物。
通用方法F酸和胺的EDC偶合將所述酸衍生物溶于二氯甲烷。順序加入胺(1當量)、N-甲基嗎啉(5當量)和羥基苯并三唑-水合物(1.2當量)。將反應物冷卻至約0℃，然后加入1.2當量1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺。將該溶液攪拌過夜，并在氮氣下恢復至室溫。在用Na2SO4干燥前，用飽和Na2CO3水溶液、0.1M檸檬酸和鹽水洗滌處理該反應混合物，并除去溶劑得到粗產物。經用合適的溶劑快速層析得到純產物。
通用方法G酸和胺的EDC偶合在氮氣下，將在THF中的羧酸(1.0當量)、羥基苯并三唑水合物(1.1當量)和胺(1.0當量)加入圓底燒瓶中。將適當量(對游離胺用1.1當量，對胺的鹽酸鹽用2.2當量)的堿如Hunig氏堿加至充分攪拌的混合物中，接著加入EDC(1.1當量)。室溫攪拌4-17小時后，減壓除去溶劑，將殘留物溶于EtOAc(或類似溶劑)/水中。有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液、1N HCl、鹽水洗滌，并用無水硫酸鈉干燥。在有些情況下，分得的產物在此階段是分析純的，而在另一些情況下，需要在生物學評價前經層析和/或重結晶純化。
通用方法HR1C(X’)(X”)C(O)Cl與H2NCH(R2)C(O)XR3偶合將在二氯甲烷中的過量草酰氯與一滴DMF一起加至酸衍生物中。所得混合物攪拌2小時或直至鼓泡停止。然后減壓除去溶劑，并用干燥二氯甲烷再稀釋。向所得溶液中加入約1.1當量的適當的氨基酸酯和三乙胺(1.1當量，在二氯甲烷中)。于室溫將體系攪拌2小時，然后減壓除去溶劑。殘留物溶于乙酸乙酯，用1N HCl接著用1N NaOH洗滌。有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾并減壓除去溶劑得到所需產物。
通用方法IP-EPC偶合P-EPC偶合使用氨基酸酯和取代乙酸化合物。所述乙酸衍生物在本領域是熟知的，并且一般可商業購得。所述氨基酸酯由常規方法由已知和可商業購得的N-BOC氨基酸制得，如下述通用方法J中所介紹。
具體地講，將適當的氨基酸酯游離堿(0.0346mmol)和取代苯基乙酸(0.069mmol)溶于2.0ml CHCl3(無EtOH)中，用150mg的P-EPC(0.87meq./g)處理，并將該反應物于23℃混合4天。該反應物經棉塞過濾，用2.0ml CHCl3清洗，將濾液在氮氣流下蒸發。各樣品的純度經1H-NMR確定，并在50％至＞95％范圍。各反應所得終產物在8.0和15.0mg之間，不經另外純化即可用于實驗。
通用方法J由相應N-BOC氨基酸合成氨基酸酯A．酸的酯化將N-BOC氨基酸溶于二噁烷，并于0℃用過量醇(～1.5當量)和催化的DMAP(100mg)處理。繼續攪拌至反應完成，所得產物由常規方法回收。B．除去N-BOC基團將N-BOC保護的氨基酸溶于二氯甲烷(0.05M)中，并于室溫在氮氣下用10當量TFA處理。反應用tlc監測，直至原料消耗掉(一般在1-5小時內)。5小時后如果仍存在原料，則再向反應物中加入10eg.TFA。反應物用Na2CO3小心中和、分離，有機層用鹽水洗滌，并用無水Na2SO4干燥。然后粗品胺不經純化直接使用。
這些方法的具體示例如下1．將外消旋(+/-)-N-BOC-α-氨基丁酸(Aldrich)(9.29g,0.0457mol)溶于100ml二噁烷，并用異丁醇(6.26ml,0.0686mol)、EDC(8.72g,0.0457)和催化的DMAP(100mg)于0℃處理。攪拌17小時后，減壓蒸除有機溶劑，殘留物用EtOAc稀釋，用NaHCO3和鹽水洗滌，用Na2SO4干燥。蒸發得到8.42g(71％)油狀物。C13H25NO4理論值C=60.21,H=9.72，及N=5.40。分析實測值C=59.91,H=9.89，及N=5.67。
如上述將所得N-BOC氨基酸酯(8.00g,0.032mol)脫保護得到3.12g(61％)無色油狀游離堿，該堿放置固化。
2．將L-N-BOC-丙氨酸(Aldrich)(8.97g,0.047mol)溶于100ml CH2Cl2和異丁醇(21.9ml,0.238mol)中，于0℃用DMAP(100mg)和EDC(10.0g,0.52mol)處理。該混合物攪拌17小時，用H2O稀釋，用1.0N HCl和NaHCO3洗滌，然后用鹽水洗滌，有機相用Na2SO4干燥。過濾并蒸發得到11.8g(定量)含有少量溶劑的L-N-BOC丙氨酸異丁酯。樣品真空干燥以便分析。C12H23NO4理論值C=58.79,H=9.38，及N=5.71。分析實測值C=58.73,H=9.55，及N=5.96。
上述N-BOC氨基酸酯(11.8g,0.0481mol)如上脫保護。用飽和HCl(g)/EtOAc將游離堿轉變成相應的HCl鹽，得到L-N-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽。得到4.2g(48％)的無色固體。C7H15NO2HCl理論值C=46.28,H=8.88，及N=7.71。分析實測值C=46.01,H=8.85，及N=7.68。
通用方法K由氨基酸生成甲酯將氨基酸(氨基酸或氨基酸鹽酸鹽)懸浮于甲醇中，并冷卻至0℃。將HCl氣通入該溶液中5分鐘。使反應物溫熱至室溫，然后攪拌4小時。減壓除去溶劑，得到所需的氨基酸甲酯鹽酸鹽。該產物通常不經純化直接使用。
實施例A
游離的或聚合物結合的PEPC的合成N-乙基-N’-3-(1-吡咯烷基)丙脲在冷卻下，向250ml氯仿中的27.7g(0.39mol)異氰酸乙酯溶液中滴加50g(0.39mol)3-(1-吡咯烷基)丙胺。滴加結束后，立即移去冷卻浴，并于室溫下攪拌反應混合物4小時。然后減壓濃縮反應混合物，得到74.5g(96.4％)所需脲，為澄清油狀物。1-(3-(1-吡咯烷基)丙基)-3-乙基碳二亞胺(P-EPC)向500ml二氯甲烷中的31.0g(0.156mol)N-乙基-N’-3-(1-吡咯烷基)丙脲中加入62.6g(0.62mol)三乙胺，并將該溶液冷至0℃。然后向該溶液中滴加在400ml二氯甲烷中的59.17g(0.31mol)4-甲苯磺酰氯，滴加速度為保持反應物為0-5℃。滴加結束后，將反應混合物溫熱至室溫，然后加熱至回流4小時。冷至室溫后，將反應混合物用飽和碳酸鉀水溶液(3×150ml)洗滌。合并水相，并用二氯甲烷提取。合并全部有機相并減壓濃縮。所得有機淤漿懸浮于250ml乙醚中，并從固體中傾出溶液。該淤漿/傾出過程重復3次。合并醚溶液并減壓濃縮，得到18.9g(67％)所需產物；為粗的橙色油狀物。部分油在78-82℃(0.4mm Hg)真空減壓蒸餾得到無色油狀物。制備聚合物負載形式的1-(3-(1-吡咯烷基)丙基)-3-乙基碳二亞胺(P-EPC)于100℃，將在二甲基甲酰胺中的8.75g(48.3mmol)1-(3-(1-吡咯烷基)丙基)-3-乙基碳二亞胺和24.17g(24.17mmol)Merrifield氏樹脂(2％交聯，200-400目，氯甲基化苯乙烯/二乙烯基苯聚合物，1meq,Cl/g)的懸浮液加熱2天。冷卻該反應物并過濾，所得樹脂順序用1L DMF、1L THF和1L乙醚洗滌。然后將剩下的樹脂真空減壓干燥18小時。
實施例B
丙氨酸異丁酯鹽酸鹽的制備將35.64g(0.4mol)(D,L)-丙氨酸(Aldrich)(或L-丙氨酸(Aldrich))、44ml(0.6mol)的亞硫酰氯(Aldrich)和200ml異丁醇回流1.5小時，并于減壓下、在90℃的旋轉蒸發儀上徹底蒸發除去揮發物，得到(D,L)-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(或L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽)，該鹽足夠純可用于進一步的轉化反應。
實施例C3,5-二氯苯乙酸的制備于0℃，向在75ml二氯甲烷中的3.5g 3,5-二氯芐醇(Aldrich)溶液中加入1.8ml甲磺酰氯，接著滴加3.5ml三乙胺。2小時后，該溶液用二氯甲烷稀釋至150ml，用3N HCl和NaHCO3飽和水溶液洗滌，用Na2SO4干燥，并除去溶劑得到所需的黃色油狀物3,5-二氯芐基甲磺酸酯，該酯不經純化可直接使用。
于0℃，將所述粗品磺酸酯溶于50ml DMF中，然后加入3g KCN。2小時后，再加入50ml DMF，并攪拌該溶液16小時。所得紅色溶液用1L H2O稀釋，并用3N HCl酸化至pH3。水溶液用二氯甲烷提取。合并的有機相用3N HCl洗滌，用Na2SO4干燥并減壓除去溶劑，得到粗品3,5-二氯苯乙腈，該腈不經純化可直接使用。
將該腈加入40ml濃硫酸和50ml H2O混合物中，并加熱至回流48小時，冷至室溫并攪拌48小時。將反應物倒至1L碎冰中稀釋，溫熱至室溫，并用2×200ml二氯甲烷和2×200ml乙酸乙酯提取。合并兩部分有機部分，并用NaHCO3飽和水溶液洗滌。合并NaHCO3部分，并3N HCl酸化至pH1。所得的白色固體太細小難以過濾，用2×200ml二氯甲烷提出。合并的有機相用Na2SO4干燥，并減壓除去溶劑得到白色固體粗品3,5-二氯苯乙酸。該固體用己烷制成淤漿，過濾得到白色固體1.75g。
NMR(CDCl3)(以ppm表示)3.61(s,2H),7.19(s,1H),7.30(s,1H)實施例DN-(3-氯苯乙酰基)丙氨酸的合成使用L-丙氨酸(Nova Biochem)和3-氯苯乙酸(Aldrich)，按照通用方法F或G，接著使用通用方法D水解制備目標化合物。
實施例1N-(苯乙酰基)-D,L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法A，使用苯乙酰氯(Aldrich)和D,L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并用Et2O提取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.23-7.36(m,5H),6.18(d,1H),4.58(t,J=7.3Hz,1H),3.87(m,2H),3.57(s,2H),1.90(m,1H),1.34(d,J=7.2Hz,3H),0.89(d,J=6.8Hz,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=172.7,170.3,134.5,129.2,128.8,127.2,71.3,48.1,43.4,27.5,18.8,18.3。
C15H21NO3(MW=263.34；質譜(MH+=264))實施例2N-(3-苯丙酰基)-D,L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法A，使用3-苯基丙酰氯(Aldrich)和D,L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得具有熔點51-54℃的固體目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并用Et2O提取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.25(m,2H),7.19(m,3H),6.28(d,J=7.2Hz,1H),4.58(五重峰，J=7.2Hz,1H),3.89(m,2H),2.95(t,J=7.7Hz,2H),2.50(m,2H),1.92(m,1H),1.33(d,J=7.1Hz,3H),0.91(d,J=6.7Hz,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.0,171.5,140.6,128.3,128.1,126.0,71.2,47.8,37.9,31.4,27.5,18.79,18.77,18.3。
C16H23NO3(MW=277.37，質譜(MH+278))實施例3N-(3-甲基戊酰基)-L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法B，使用3-甲基戊酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得目標化合物，為油狀物。該反應用硅膠tlc監測，并用Et2O提取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.08(d,J=5.9Hz,1H),4.62(五重峰，J=7.3Hz,1H),3.92(m,2H),2.22(m,1H),1.84-2.00(m,3H),1.40(d,J=7.2Hz,3H),1.35(m.1H),1.20(m,1H),0.85-0.96(m,12H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.3,172.1,71.4,47.9,43.9,32.3,29.38,29.35,27.6,19.10,19.06,18.93,18.91,18.72,18.67,11.3。
C13H25NO3(MW=243.35，質譜(MH+244))實施例4N-[(4-氯苯基)乙酰基]-L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法B，使用4-氯苯基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得具有熔點111-113℃的固體目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并用Et2O提取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.30(d,J=8.2Hz,2H),7.21(d,J=8.3Hz,2H),6.18(d,J=5.5Hz,1H),4.57(五重峰，J=7.2Hz,1H),3.88(m,2H),3.53(s,2H),1.91(m,1H),1.36(d,J=7.1Hz,3H),0.90(d,J=6.8Hz,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=172.8,169.8,133.1,133.0,130.6,128.9,71.4,48.2,42.6,27.6,18.85,18.82,18.4。
C15H20NO3Cl(MW=297.78，質譜(MH+298))實施例5N-[(3,4-二氯苯基)乙酰基]-L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法B，使用3,4-二氯苯基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得具有熔點81-83℃的固體目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并用Et2O提取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.90(d,J=6.8Hz,6H),1.38(d,J=7.1Hz,3H),1.91(m,1H),3.50(s,2H),3.90(m,2H),4.57(五重峰，J=7.1Hz,1H),6.31(d,J=4.9Hz,1H),7.12(m,1H),7.38(m,2H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=18.4,18.8,18.9,27.6,42.2,48.3,71.5,128.6,130.6,131.2,131.3,132.6,134.7,169.2,172.8。
C15H19NO3Cl2(MW=332.23，質譜(MH+332))實施例6N-[(4-甲基苯基)乙酰基]-D,L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法B，使用4-甲基苯基乙酸(Aldrich)和D,L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得具有熔點102-104℃的固體目標化合物。該反應用在硅膠上的tlc(33％乙酸乙酯/己烷，Rf=0.6)監測，并用Et2O提取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.90(d,J=6.7Hz,6H),1.35(d,J=7.2Hz,3H),1.91(m,1H),2.34(s,3H),3.55(s,2H),3.88(m,2H),4.58(m,1H),6.05(bd,1H),7.16(s,4H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=18.5,18.85,18.87,21.0,27.6,43.1,48.1,71.3,129.2,129.6,131.3,136.9,170.6,172.8。
C16H23NO3(MW=277.37，質譜(MH+278))實施例7N-[(3-吡啶基)乙酰基]-D,L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法F，使用3-吡啶基乙酸鹽酸鹽(Aldrich)和D,L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得具有熔點62-64℃的固體目標化合物。該反應用在硅膠上的tlc(10％甲醇/二氯甲烷，Rf=0.48)監測，并經硅膠層析純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.40(d,J=2.8,2H),7.6(m,1H),7.16(m,2H),4.5(五重峰，J=7.2,7.2,1H),3.8(m,2H),3.48(s,2H),1.8(m,1H),1.30(d,J=7.2,3H),0.81(d,J=6.7,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.4,170.1,150.6,148.8,137.4,131.4,124.1,71.9,48.9,40.6,28.1,19.5,19.4,18.6。
C14H20N2O3(MW=264，質譜(MH+265))實施例8N-[(1-萘基)乙酰基]-L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法B，使用1-萘基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得具有熔點69-73℃的固體目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并用Et2O提取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.83(m,6H),1.25(d,J=7.1Hz,3H),1.81(m,1H),3.79(m,2H),4.04(2s,2H),4.57(五重峰，J=7.3Hz,1H),5.99(d,J=7.1Hz,1H),7.44(m,2H),7.53(m,2H),7.85(m,2H),7.98(m,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=18.2,18.81,18.83,27.5,41.5,48.2,71.3,123.7,125.6,126.1,126.6,128.2,128.5,128.7,130.7,132.0,133.9,170.3,172.5。
C19H23NO3(MW=313.40，質譜(MH+314))實施例9N-[(2-萘基)乙酰基]-L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法B，使用2-萘基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得具有熔點128-129℃的固體目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并用Et2O提取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.86(m,6H),1.35(d,J=7.1Hz,3H),1.78(m,1H),3.76(s,2H),3.87(m,2H),4.62(五重峰，J=7.2Hz,1H),6.13(d,J=7.1Hz,1H),7.41(m,1H),7.48(m,2H),7.74(s,1H),7.83(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=18.4,18.82,18.85,27.6,43.7,48.2,71.4,125.9,126.3,127.2,127.6,127.7,128.2,128.7,132.0,132.5,133.5,170.3,172.8。C19H23NO3(MW=313.40，質譜(MH+314))實施例10N-(4-苯基丁酰基)-L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法B，使用4-苯基丁酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得目標化合物，為油狀物。該反應用硅膠tlc監測，并用Et2O提取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.92(d,J=6.7Hz,6H),1.38(d,J=7.1Hz,3H),1.96(m,3H),2.21(t,J=7.1Hz,2H),2.64(t,J=7.3Hz,2H),3.90(m,2H),4.59(五重峰，J=7.2Hz,1H),6.31(d,1H),7.16(m,3H),7.24(m,2H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=18.3,18.75,18.78,26.8,27.5,34.9, 35.3,47.8,71.2,125.7,128.2,128.3,141.3,172.1,173.0。
C17H25NO3(MW=291.39，質譜(MH+292))實施例11N-(5-苯基戊酰基)-L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法B，使用4-苯基戊酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得目標化合物，為油狀物。該反應用硅膠tlc監測，并用Et2O提取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.23(m,2H),7.17(m,3H),6.30(d,1H),4.59(五重峰，J=7.3Hz,1H),3.91(m,2H),2.61(t,J=7.2Hz,2H),2.22(t,J=7.2Hz,2H),1.93(m,1H),1.66(m,4H),1.38(d,J=7.2Hz,3H),0.92(d,J=6.7Hz,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.1,172.3,142.0,128.2,128.1,125.6,71.2,47.8,36.1,35.5,30.8,27.5,25.0,18.80,18.77,18.4。
C18H27NO3(MW=305.39，質譜(MH+306))實施例12N-[(4-吡啶基)乙酰基]-D,L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法F，使用4-吡啶基乙酸鹽酸鹽(Aldrich)和D,L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得具有熔點64-66℃的固體目標化合物。該反應用硅膠tlc(10％甲醇/二氯甲烷，Rf=0.43)監測，并經硅膠層析純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.51(dd,J=1.6,2.8,1.6,2H),7.23(dd,J=4.3,1.6,4.4,2H),6.71(d,J=6.8,1H),4.56(五重峰，J=7.3,7.2,1H),3.88(m,2H),3.53(s,2H),1.89(m,1H),1.36(d,J=7.2,3H),0.88(d,J=6.7,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.5,169.3,150.5,144.4,125.1,72.1,48.9,43.0,28.2,19.5,19.5,18.9。
C14H20N2O3(MW=264，質譜(MH+265))實施例13N-(苯基乙酰基)-L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法B，使用苯基乙酰氯(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法B)，制得具有熔點45-47℃的固體目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并用Et2O提取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.24-7.39(m,5H),6.14(d,1H),4.58(t,J=7.3Hz,1H),3.88(m,2H),3.58(s,2H),1.90(m,1H),1.35(d,J=7.2Hz,3H),0.89(d,J=6.7Hz,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=172.8,170.4,134.5,129.3,128.9,127.2,71.3,48.1,43.5,27.5,18.9,18.8,18.4。
C15H21NO3(MW=263.34，質譜(MH+264))實施例142-[(3,4-二氯苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用3,4-二氯苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.36(m,3H),6.03(bd,1H),4.54(m,1H),3.87(m,2H),3.49(s,2H),1.93(m,2H),1.72(m,1H),0.88(d,6H),0.80(t,3H)。
實施例152-[(3-甲氧基苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用3-甲氧基苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.75(m,4H),5.93(bd,1H),4.51(m,1H),3.83(m,2H),3.75(s,2H),3.52(s,2H),1.82(m,2H),1.60(m,1H),0.84(d,6H),0.74(t,3H)。
C17H25NO4(MW=307.39，質譜(MH+309))實施例162-[(4-硝基苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用4-硝基苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.16(d,4H),7.44(d,2H),6.04(bd,1H),4.55(m,1H),3.86(m,2H),3.66(s,2H),1.86(m,2H),1.67(m,1H),0.85(d,6H),0.81(t,3H)。
C16H22N2O5(MW=322.36，質譜(MH+323))實施例172-[(3,4-亞甲二氧基苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用3,4-(亞甲二氧基)-苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.72(m,3H),5.92(bd,1H),4.54(m,1H),3.86(m,2H),3.66(s,2H),1.86(m,2H),1.66(m,1H),0.89(d,6H),0.79(t,3H)。
實施例182-[(噻吩-3-基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用3-噻吩基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.37(m,1H),7.16(m,1H),7.04(m,1H),6.05(bd,1H),4.57(m,1H),3.66(s,2H),1.93(m,2H),1.67(m,1H),0.91(d,6H),0.86(t,3H)。
實施例192-[(4-氯苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用4-氯苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.22(m,2H),7.11(m,2H),5.80(m,1H),4.44(m,1H),3.78(m,2H),3.43(s,2H),1.77(m,2H),1.56(m,1H),0.83(d,6H),0.71(t,3H)。
實施例202-[(3-硝基苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用3-硝基苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.15(m,2H),7.65(m,1H),6.08(m,1H),4.46(m,1H),3.92(m,2H),3.68(s,2H),1.91(m,2H),1.75(m,1H),0.98(d,6H),0.71(t,3H)。
實施例212-[(2-羥基苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用2-羥基苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.14(m,1H),7.01(m,1H),6.93(m,1H),6.79(m,1H),6.46(m,1H),4.51(m,1H),3.87(m,2H),3.57(s,2H),2.01(m,2H),1.75(m,1H),0.89(d,6H),0.85(t,3H)。
實施例222-[(2-萘基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用2-萘基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.83(m,7H),5.95(m,1H),4.58(m,1H),3.84(m,2H),3.75(s,2H),1.89(m,2H),1.63(m,1H),0.91(d,6H),0.81(t,3H)。
C20H25NO3(MW=327.42，質譜(MH+328))實施例232-[(2,4-二氯苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用2,4-二氯苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.49(m,1H),7.22(m,2H),5.98(m,1H),4.52(m,1H),3.86(m,2H),3.61(s,2H),1.84(m,2H),1.62(m,1H),0.87(d,6H),0.80(t,3H)。
實施例242-[(4-溴苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用4-溴苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.43(d,2H),7.19(d,2H),5.85(m,1H),4.51(m,1H),3.81(m,2H),3.47(s,2H),1.84(m,2H),1.61(m,1H),0.84(d,6H),0.76(t,3H)。
C16H22NO3Br(MW=356.26，質譜(MH+358))實施例252-[(3-氯苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用3-氯苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.25(m,3H),7.12(m,1H),5.80(m,1H),4.52(m,1H),3.86(m,2H),3.50(s,2H),1.87(m,2H),1.67(m,1H),0.88(d,6H),0.77(t,3H)。
C16H22NO3Cl(MW=311.81，質譜(MH+313))實施例262-[(3-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用3-氟苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.31(m,1H),7.01(m,3H),5.95(m,1H),4.54(m,1H),3.84(m,2H),3.54(s,2H),1.88(m,2H),1.65(m,1H),0.87(d,6H),0.81(t,3H)。
C16H22NO3F(MW=295.35，質譜(MH+296))
實施例272-[(苯并噻唑-4-基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用4-苯并噻唑-4-基乙酸(Chemservice)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.82(m,1H),7.51-7.21(m,4H),5.84(m,1H),4.51(m,1H),3.90(s,2H),3.79(m,2H),1.78(m,2H),1.58(m,1H),0.80(d,6H),0.66(t,3H)。
實施例282-[(2-甲基苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用2-甲基苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.18(m,4H),5.79(m,1H),4.54(m,1H),3.85(m,2H),3.59(s,2H),3.29(s,3H),1.81(m,2H),1.59(m,1H),0.87(d,6H),0.77(t,3H)。
C17H25NO3(MW=291.39，質譜(MH+291))實施例292-[(2-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用2-氟苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下
1H-nmr(CDCl3):δ=7.28(m,1H),7.09(m,3H),6.03(m,1H),4.54(m,1H),3.87(m,2H),3.57(s,2H),1.89(m,2H),1.64(m,1H),0.88(d,6H),0.80(t,3H)。
實施例302-[(4-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用4-氟苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.20(m,2H),6.97(m,2H),5.87(m,1H),4.492(m,1H),3.83(m,2H),3.48(s,2H),1.86(m,2H),1.60(m,1H),0.87(d,6H),0.78(t,3H)。
C16H22NO3F(MW=295.35，質譜(MH+296))實施例312-[(3-溴苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用3-溴苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.45(m,2H),7.23(m,2H),5.95(m,1H),4.55(m,1H),3.84(m,2H),3.55(s,2H),1.89(m,2H),1.68(m,1H),0.91(d,6H),0.81(t,3H)。
C16H22NO3Br(MW=356.26，質譜(MH+357))實施例322-[(3-三氟甲基苯基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用3-三氟甲基苯基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.52(m,1H),7.47(m,2H),6.01(m,1H),4.56(m,1H),3.86(m,2H),3.61(s,2H),1.84(m,2H),1.62(m,1H),0.87(d,6H),0.80(t,3H)。
C17H22NO3F3(MW=345.36，質譜(MH+345))實施例332-[(2-噻吩基)乙酰氨基]丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用2-噻吩基乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.89(m,3H),6.07(bd,1H),4.50(m,1H),3.82(m,2H),3.71(s,2H),1.85(m,2H),1.62(m,1H),0.81(d,6H),0.75(t,3H)。
C14H21NO3S(MW=283.39，質譜(MH+284))實施例342-(苯基乙酰氨基)丁酸異丁酯的合成按照上述通用方法H，使用苯乙酸(Aldrich)和2-氨基丁酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經硅膠層析(使用9∶1甲苯∶EtOAc作洗脫劑)純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.17-7.28(m,5H),6.23(bd,1H),4.51(m,1H),3.86(m,2H),3.54(s,2H),1.87(m,2H),1.62(m,1H),0.87(d,6H),0.78(t,3H)。
C16H23NO3(MW=277.36，質譜(MH+277))實施例35N-(苯基乙酰基)纈氨酸2-甲基丁酯的合成步驟A．N-(苯乙酰基)纈氨酸的制備向攪拌的、冷至0℃的在50ml(100mmol)2N NaOH中的5.15g(44mmol)纈氨酸(Bachem)溶液中滴加5.3ml(40mmol)苯乙酰氯(Aldrich)。析出無色油狀物。使反應混合物溫熱至室溫，并攪拌18小時，用50ml乙醚洗滌，用HCl水溶液酸化至pH2-3。濾出生成的白色沉淀，用水充分洗滌。接著用乙醚洗滌得到7.1g(30mmol，得率69％)的目標化合物。
NMR數據如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=12.63(s,1H),8.25(d,J=8.6Hz,1H),7.27(m,5H),4.15(m,1H),3.56(d,J=13.8Hz,1H),3.47(d,J=13.8Hz,1H),2.05(m,1H),0.87(d,J=6.8,Hz,3H),0.84(d,J=6.8Hz,3)。
13C-nmr(DMSO-d6):δ=173.2,170.4,136.6,129.0,128.2,126.3,57.1,41.9,30.0,19.2,18.0。
C13H17NO3(MW=235.29，質譜(MH+236))步驟B．N-(苯基乙酰基)纈氨酸2-甲基丁酯的合成按照通用方法C，使用上述步驟A制備的N-(苯乙酰基)纈氨酸和2-甲基丁-1-醇(Aldrich)，制得的目標化合物，為非對映體混合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.25-7.40(m,5H),5.95(d,1H),4.56(m,1H),3.84-4.00(m,2H),3.61(s,2H),2.10(m,1H),1.68(m,1H),1.38(m,1H),1.15(m,1H),0.82-0.94(m,9H),0.76(d,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=171.84,171.81,170.7,134.6,129.31,129.27,128.9,127.3,69.8,57.0,43.7,33.9,31.3,25.9,25.8,18.9,17.4,16.34,16.27,11.12,11.07。
C18H27NO3(MW=305.42，質譜(MH+306))實施例36N-(苯基乙酰基)-L-甲硫氨酸異丁酯的合成將L-甲硫氨酸(0.129g,0.869mmol)(Aldrich)溶于二噁烷(5.0ml)，并用碳酸氫鈉水溶液(5.0ml)處理，接著用苯乙酰氯(Aldrich)(0.114ml,0.822mmol)處理。室溫攪拌17小時后，該混合物用乙酸乙酯稀釋，分層并將水層用5N HCl酸化至pH2。粗產物用乙酸乙酯提取，用Na2SO4干燥，真空干燥并不經純化直接使用。
將N-苯基乙酰基-L-甲硫氨酸(0.1285g,0.447mmol)溶于3.0ml二噁烷和異丁醇(0.2ml)中，并用EDC(0.094g,0.492mmol)和催化的DMAP(0.015g)處理。于23℃攪拌17小時后，減壓蒸發該混合物得油狀物，殘留物用EtOAc稀釋并用0.1N HCl和飽和碳酸氫鈉洗滌。在硅膠上層析(用98∶2的CHCl3/MeOH作洗脫劑)得到純產物。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.4-7.23(m,5H),6.14(bd,1H),4.70(m,1H),3.89(d,2H),3.62(s,2H),2.43(m,2H),2.12(m,1H),1.93(m,2H),0.94(d,6H)。
C17H25NO3S(MW=323.17，質譜(MH+323))實施例37N-(苯基乙酰基)-L-亮氨酸異丁酯的合成將L-亮氨酸(Aldrich)(0.114g,0.869mmol)溶于二噁烷(5.0ml)，并用碳酸氫鈉飽和溶液(5.0ml)處理，接著用苯乙酰氯(Aldrich)(0.114ml,0.822mmol)處理。室溫攪拌17小時后，該混合物用乙酸乙酯稀釋，分層并將水層用5N HCl酸化至pH2。粗產物用乙酸乙酯提取，用硫酸鈉干燥，真空干燥并不經純化直接使用。
將N-苯基乙酰基-L-亮氨酸(0.0081g,0.038mmol)溶于2.0mlCHCl3(無乙醇)和異丁醇(0.055ml)中，并用P-EPC(100mg,0.87毫當量)處理。將混合物旋轉4天，通過棉塞過濾，并將濾液減壓蒸發得到足夠純的用于實驗的油狀物。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.22(m,5H),5.57(d,1H),4.35(m,1H),3.35(m,3H),1.35(m,4H),0.68(m,9H)。
C18H27NO3(MW=305.40，質譜(MH+305))實施例38N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-甲基丁-2-烯基酯的合成按照上述通用方法C，使用N-(3-氯苯基乙酰基丙氨酸(得自上述實施例D)和3-甲基-丁-2-烯-1-醇(Aldrich)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經液相層析以30％EtOAc/己烷作洗脫劑純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.39-7.16(m,4H),6.06(bd,1H),5.38-5.29(m,1H),4.63(d,J=9Hz,2H),3.56(s,2H),1.79(s,3H),1.7(s,3H),1.39(d,J=9Hz,3H)。
實施例39N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸-環丙基甲酯的合成按照上述通用方法C，使用N-(3-氯苯基乙酰基丙氨酸(得自上述實施例D)和環丙基甲醇(Aldrich)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經液相層析以3∶7的EtOAc∶己烷作洗脫劑純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.2-7.1(m,4H),6.09(bs,1H),4.6(dq,J=9Hz,1H),3.96(dd,J=9Hz,2H),3.59(s,2H),1.2(d,J=9Hz,3H),1.2-1.0(m,1H),0.603-0.503(m,2H),0.300-0.203(m,2H)。
實施例40N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-噻吩基甲酯的合成按照上述通用方法C，使用N-(3-氯苯基乙酰基丙氨酸(得自上述實施例D)和2-噻吩基甲醇(Aldrich)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經液相層析以3∶7的EtOAc∶己烷作洗脫劑純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.37-6.97(m,7H),5.97(q,J=14Hz,2H),4.6(dq,J=9Hz,1H),3.76(s,2H),1.38(d,J=9Hz,3H)。
實施例41N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸(1-甲基環丙基)甲酯的合成按照上述通用方法C，使用N-(3-氯苯基乙酰基丙氨酸(得自上述實施例D)和(1-甲基環丙基)甲醇(Aldrich)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經液相層析以3∶7的EtOAc∶己烷作洗脫劑純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.6(bd,J=9Hz,1H),3.86(q,J=14Hz,2H),3.4(s,2H),2.29(q,J=9Hz,1H),1.3(d,J=9Hz,3H),1.03(s,3H),0.5-0.4(m,2H),0.4-0.28(m,2H)。
實施例42N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-噻吩基甲酯的合成按照上述通用方法C，使用N-(3-氯苯基)乙酰基丙氨酸(得自上述實施例D)和3-噻吩甲醇(Aldrich)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經液相層析以3∶7的EtOAc∶己烷作洗脫劑純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.03(bd,J=9Hz,1H),7.56-7.5(m,1H),7.47(bs,1H),7.4-7.17(m,4H),7.06(d,J=9Hz,1H),5.1(s,2H),4.3(dq,1H),1.3(d,J=9Hz,3H)。
實施例43N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-甲基環丙酯的合成按照上述通用方法C，使用N-(3-氯苯基乙酰基丙氨酸(得自上述實施例D)和2-甲基環丙醇(Aldrich)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經液相層析以3∶7的EtOAc∶己烷作洗脫劑純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.39-7.16(m,4H),6.3(bd,1H),4.79-4.7(m,1H),4.6-4.25(m,J=9Hz,1H),3.577(s,2H),2.09-1.8(m,2H),1.74-1.6(m,2H),1.39(dd,J=9Hz,3H),1.2(dt,J=9Hz,1H),0.979(dd,J=9Hz,2H)。
C17H22NO3Cl(MW=323.82，質譜(MH+323))實施例44N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-甲基丙-2-烯基酯的合成按照上述通用方法C，使用N-(3-氯苯基乙酰基丙氨酸(得自上述實施例D)和2-甲基丙-2-烯-1-醇(Aldrich)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經液相層析以3∶7的EtOAc∶己烷作洗脫劑純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.39-7.16(m,4H),6.03(bs,1H),4.77(s,2H),4.7-4.29(m,3H),2.59(s,2H),1.73(s,3H),1.43(d,J=9Hz,3H)。
C15H18NO3Cl(MW=295.76，質譜(MH+295))
實施例45N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸-環己-2-烯基酯的合成按照上述通用方法C，使用N-(3-氯苯基乙酰基丙氨酸(得自上述實施例D)和環己-2-烯-1-醇(Aldrich)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經液相層析以3∶7的EtOAc∶己烷作洗脫劑純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.6(bd,J=9Hz,1H),7.4-7.2(m,4H),6.0-5.8(m,1H),5.7-5.5(m,1H),5.1(bs,1H),4.13-4.29(m,1H),3.5(s,2H),2.1-1.9(m,2H),1.8-1.69(m,1H),1.69-1.49(m,4H),1.3(dd,J=9Hz,3H)。
C17H20NO3Cl(MW=321.8，質譜(MH+321.2))實施例46N-[(2-苯基苯并噁唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用5-(2-苯并噁唑)-基-乙酸(CAS#62143-69-5)和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.24(m,3H),7.68(m,1H),7.51(m,5H),6.04(m,1H),4.58(m,1H),3.85(m,2H),3.68(s,2H),1.9(m,1H),1.35(d,3H),0.87(d,6H)。
C22H24N2O4(MW=380，質譜(MH+381))實施例47N-[(3-甲基噻吩基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用3-甲基噻吩乙酸(CAS#18698-73-2)和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.14(m,2H),7.01(m,1H),4.56(m,1H),3.88(m,2H),3.54(s,2H),2.46(s,3H),1.89(m,1H),1.35(d,3H),0.85(d,6H)。
C16H23NO3S(MW=309，質譜(MH+310))實施例48N-4-[(2-呋喃基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用2-呋喃基乙酸(CAS#2745-26-8)和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.36(m,1H),6.34(m,1H),6.21(m,1H),4.56(m,1H),3.91(m,2H),3.61(s,2H),1.92(m,1H),1.38(d,3H),0.89(d,6H)。
C13H19NO4(MW=253，質譜(MH+254))實施例49N-[(苯并呋喃-2-基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用苯并呋喃-2-基乙酸(Maybridge)和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.51(m,1H),7.44(m,1H),7.25(m,2H),6.67(s,1H),4.60(m,1H),3.87(m,2H),3.77(s,2H),1.88(m,1H),1.38(d,3H),0.87(d,6H)。
C17H21NO4(MW=303，質譜(MH+304))
實施例50N-[(苯并噻吩-3-基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用硫茚-3-基乙酸(Lancaster)和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.89(m,1H),7.76(m,1H),7.38(m,3H),6.07(m,1H),4.57(m,1H),3.92(m,2H),3.82(s,4H),1.84(m,1H),1.32(d,3H),0.85(d,6H)。
C17H21NO3S(MW=319，質譜(MH+320))實施例51N-[(2-氯-5-噻吩基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用5-氯-2噻吩基乙酸(CAS#13669-19-7)和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.77(m,1H),6.68(d,1H),6.31(bm,1H),4.59(m,1H),3.91(m,2H),3.38(s,2H),1.90(m,1H),1.39(d,3H),0.89(d,6H)。
C13H18NO3SCl(MW=303，質譜(MH+303))實施例52N-[(3-甲基異噁唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用(3-甲基異噁唑-5-基)乙酸(CAS#19668-85-0)和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下
1H-nmr(CDCl3):δ=6.07(s,2H),4.56(m,1H),3.92(m,2H),3.68(s,2H),2.29(s,3H),1.94(m,1H),1.89(d,3H),0.91(d,6H)。
C13H20N2O4(MW=268，質譜(MH+269))實施例53N-[(2-苯硫基噻吩基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用(2-苯硫基噻吩基)乙酸和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.21-7.11(m,6H),6.92(d,1H),4.56(m,1H),3.87(m,2H),3.72(s,2H),1.94(m,1H),1.38(d,3H),0.89(d,6H)。
C19H23NO3S2(MW=377，質譜(MH+378))實施例54N-[(6-甲氧基苯并噻吩-2-基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I和使用(6-甲氧基硫茚-2-基)乙酸和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.59(d,1H),7.33(d,1H),7.16(s,1H),7.03(dd,1H),4.56(m,1H),3.87(s,3H),3.84(m,2H),3.76(s,2H),1.85(m,1H),1.30(d,3H),0.86(d,6H)。
C18H23NO4S(MW=349，質譜(MH+350))實施例55N-[(3-苯基-1,2,4-噻二唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用(3-苯基-1,2,4-噻二唑-5-基)乙酸(CAS#90771-06-5)和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.47(m,5H),4.66(m,1H),4.16(s,2H),3.91(m,2H),1.93(m,1H),1.48(d,3H),0.93(d,6H)。
C17H21N3O3S(MW=347，質譜(MH+348))實施例56N-[(2-苯基噁唑-4-基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用(2-苯基噁唑-4-基)乙酸(CAS#22086-89-1)和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
實施例57N-[(3-甲基苯基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用3-甲基苯基乙酸(Aldrich)和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.21(m,1H),7.07(m,3H),4.54(m,1H),3.83(m,2H),3.52(s,2H),2.35(s,3H),1.87(m,1H),1.32(d,3H),0.88(d,6H)。
C16H23NO3(MW=277，質譜(MH+278))實施例58N-[(2,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用2,5-二氟苯基乙酸(Aldrich)和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.08-6.94(m,3H),4.57(m,1H),3.91(m,2H),3.56(s,2H),1.92(m,1H),1.41(d,3H),0.91(d,6H)。
C15H19NO3F2(MW=299，質譜(MH+300))實施例59N-[(3,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用3,5-二氟苯基乙酸(Aldrich)和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.81(m,2H),6.74(m,1H),6.06(m,1H),4.57(m,1H),3.92(m,2H),3.51(s,2H),1.94(m,1H),1.36(d,3H),0.87(d,6H)。
C15H19NO3F2(MW=299，質譜(MH+300))實施例60N-[(3-噻吩基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用3-噻吩基乙酸(Aldrich)和丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.33(m,1H),7.14(m,1H),7.01(m,1H),6.09(m,1H),4.58(m,1H),3.88(m,2H),3.60(s,2H),1.91(m,1H),1.37(d,3H),0.92(d,6H)。
旋光度[α]23-52(c1MeOH)于589nm處
C13H19NO3S(MW=269，質譜(MH+269))實施例61N-[(4-甲基苯基)乙酰基]-L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法I，使用4-甲基苯基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯(得自上述通用方法J)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經通用方法所述過濾純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.11(s,4H),5.93(m,1H),4.58(m,1H),3.88(m,2H),3.54(s,2H),2.33(s,3H),1.89(m,1H),1.32(d,3H),0.89(d,6H)。
C16H23NO3(MW=277.35，質譜(MH+278))實施例62N-(苯基乙酰基)-L-丙氨酸S-1-(甲氧基羰基)異丁酯的合成按照上述通用方法K，使用(S)-(+)-2-羥基-2-甲基丁酸(Aldrich)替代所述氨基酸，制得(S)-(+)-2-羥基-2-甲基丁酸甲酯。
根據通用方法E，使(S)-(+)-2-羥基-2-甲基丁酸甲酯與羰基芐氧基-L-丙氨酸(Aldrich)偶合，得到羰基芐氧基-L-丙氨酸S-1-(甲氧基羰基)異丁酯。
然后將羰基芐氧基-L-丙氨酸S-1-(甲氧基羰基)異丁酯(1.0g)溶于20ml甲醇和6N HCl(0.5ml)中，并加入10％鈀炭(0.1g)。于室溫、40psi氫氣下，在Parr裝置內將該反應混合物氫化5小時，然后通過硅藻土墊過濾。濾液減壓濃縮得到L-丙氨酸S-1-(甲氧基羰基)異丁酯鹽酸鹽(得率98％)。
使用通用方法G，將L-丙氨酸S-1-(甲氧基羰基)異丁酯鹽酸鹽與苯乙酸偶合，得到目標化合物。
NMR數據如下
1H-nmr(CDCl3):δ=7.35-7.20(m,5H),6.22(bd,1H),4.83(d,1H),4.65(p,1H),3.68(s,3H),3.55(s,2H),2.21(m,1H),1.40(d,3H),0.97(d,3H),0.93(d,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.25,171.18,170.22,135.11,129.94,129.50,127.88,52.67,48.49,43.98,30.53,19.21,18.75,17.58。
實施例63N-[(3-硝基苯基)乙酰基]-L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法H，使用3-硝基苯基乙酸(Aldrich)和丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經由丁基氯重結晶純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.17(m,2H),7.68(d,1H),7.52(t,1H),6.18(m,1H),4.48(m,1H),3.94(m,2H),3.67(s,2H),1.93(m,1H),1.42(d,3H),0.91(d,3H)。
旋光度[α]23-49(c5MeOH)實施例64N-[(3,5-二氟苯基)乙酰基]-L-丙氨酸乙酯的合成按照上述通用方法G，使用3,5-二氟苯基乙酸(Aldrich)和丙氨酸乙酯(Aldrich)，制得具有熔點93-95℃的固體目標化合物。該反應用在硅膠上的tlc(乙酸乙酯，Rf=0.8)監測，并用硅膠層析(用EtOAc作洗脫劑)，隨后經由1-氯丁烷重結晶純化。
NMR數據如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=1.30(d,3H)；3.52(s,2H)。
C13H15NO3F2(MW=271.26，質譜(MH+271))
實施例65N-[(3-硝基苯基)乙酰基]甲硫氨酸乙酯的合成按照上述通用方法G，使用3-硝基苯基乙酸(Aldrich)和甲硫氨酸乙酯鹽酸鹽(Aldrich)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經由丁基氯重結晶純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.18(s,1H),8.15(d,1H),7.66(d,1H),7.48(t,1H),6.30(m,1H),4.67(m,1H),4.21(t,2H),3.67(s,2H),2.47(t,2H),2.12(m,2H),2.08(s,3H),1.27(t,3H)。
旋光度[α]23-30(c5,MeOH)實施例66N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法G，使用3-氯苯基乙酸(Aldrich)和丙氨酸異丁酯(由上述通用方法J制得)，制得目標化合物。該反應由硅膠tlc監測。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.29(m,3H),7.18(m,1H),6.0(m,1H),4.56(m,1H),3.89(m,2H),3.53(s,2H),1.91(m,1H),1.39(d,3H),0.91(d,3H)。
旋光度[α]23-45(c5,MeOH)C15H20NO3Cl(MW=297.78，質譜(MH+297))實施例67N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-(N,N-二甲基氨基)乙酯的合成按照上述通用方法C，使用N-(3-氯苯基乙酰基)丙氨酸(得自上述實施例D)和2-(N,N-二甲基氨基)乙醇(Aldrich)，制得目標化合物。該反應由硅膠tlc監測，并使用0.1∶2.0∶0.79的NH4OH∶EtOH∶CHCl3作洗脫劑的液相層析純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.37(s,1H),7.33-7.2(m,3H),4.675-4.6(m,1H),4.5-4.37(m,1H),4.25-4.13(m,1H),3.6(d,J=7Hz,2H),2.86(bs,2H),2.3(s,6H),1.23(d,J=9Hz,3H)。
C15H21N2O3Cl(MW=313.799，質譜(MH+313))實施例682-[(3,5-二氯苯基)乙酰氨基]己酸甲酯的合成按照上述通用方法F，使用3,5-二氯苯基乙酸(得自上述實施例C)和L-正亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Bachem)，制得具有熔點77-78℃的固體目標化合物。該反應用在硅膠上的tlc(40％EtOAc/己烷，Rf=0.7)監測，并用硅膠快速層析(用40％EtOAc/己烷作洗脫劑)純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.20(s),7.18(s),6.6(m),4.55(m),3.7(s),3.5(s),3.4(s),2.0(s),1.8(m),1.6(m),1.2(m),0.8(t)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.54,169.67,138.43,135.72,128.33,128.07,78.04,77.62,77.19,53.04,52.90,43.14,32.57,27.87,22.81,14.41。
實施例69N-[(3,5-二氯苯基)乙酰基]-L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法F，使用3,5-二氯苯基乙酸(得自上述實施例C)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得具有熔點115-116℃的固體目標化合物。該反應用在硅膠上的tlc(3％甲醇/二氯甲烷，Rf=0.40)監測，并用硅膠快速層析(用3％甲醇/二氯甲烷作洗脫劑)純化。
NMR數據如下
1H-nmr(CDCl3):δ=7.27(d,J=2Hz,1H),7.19(s,2H),6.22(d,J=6Hz,1H),4.59(五重峰，J=7Hz,1H),3.9(q,J=4Hz,2H),3.5(s,2H),1.9(m,1H),1.4(d,J=7Hz,3H),0.91(d,J=7Hz,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.45,169.37,138.31,135.75,128.39,128.11,78.04,77.61,77.19,72.19,54.03,48.97,43.12,28.24,19.52,19.49,19.09。
C15H19NO3Cl2(MW=331.9，質譜(MH+332))實施例70N-(環己基乙酰基)-L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法B，使用環己基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得具有熔點92-93℃的固體目標化合物。該反應用在硅膠上的tlc(1∶3的EtOAc/己烷，Rf=0.39)監測，并用Et2O提取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.93(d,J=6.7Hz,6H),0.85-1.01(m,2H),1.05-1.35(m,3H),1.40(d,J=7.1Hz,3H),1.60-1.85(m,6H),1.95(m,1H),2.06(d,J=7.0Hz,2H),3.92(m,2H),4.61(m,1H),6.08(bd,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=18.7,18.9,26.0,26.1,27.6,33.0,35.3,44.6,47.9,71.4,171.8,173.3。
C15H27NO3(MW=269.39，質譜(MH+270))實施例71N-(環戊基乙酰基)-L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法B，使用環戊基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得具有熔點62-64℃的固體目標化合物。該反應用在硅膠上的tlc(1∶3的EtOAc/己烷，Rf=0.37)監測，并用Et2O提取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.87(d,J=6.8Hz,6H),1.01-1.17(m,2H),1.34(d,J=7.2Hz,3H),1.40-1.62(m,4H),1.70-1.83(m,2H),1.89(m,1H),2.15(m,3H),3.86(m,2H),4.55(m,1H),6.30(d,J=7.1Hz,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=18.4,18.78,18.80,24.8(很高)，27.5,32.27,32.32,36.9,42.5,47.7,71.2,172.2,173.2。
元素分析理論值(％)C,65.85；H,9.87；N,5.49；實測值(％)C,66.01；H,10.08；N,5.49。
C14H25NO3(MW=255.36，質譜(MH+256))實施例72N-[(環己-1-烯基)乙酰基]-L-丙氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法B，使用環己-1-烯基乙酸(Alfa)和L-丙氨酸異丁酯鹽酸鹽(得自上述實施例B)，制得具有熔點49-51℃的固體目標化合物。該反應用在硅膠上的tlc(1∶3的EtOAc/己烷，Rf=0.40)監測，并用Et2O提取，接著用K2CO3水溶液和HCl水溶液洗滌純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.91(d,J=4.5Hz,3H),0.93(d,J=6.7Hz,3H),1.40(d,J=7.2Hz,3H),1.52-1.70(m,4H),1.97(m,3H),2.06(bs,2H),2.89(s,2H),3.92(m,2H),4.59(m,1H),5.65(s,1H),6.33(d,J=6.6Hz,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=18.7,18.91,18.93,21.9,22.7,25.3,27.6,28.3,46.1,47.9,71.4,127.1,132.5,170.6,173.1。
元素分析理論值(％)C,67.38；H,9.42；N,5.24；實測值(％)C,67.34；H,9.54；N,5.16。
C15H25NO3(MW=267.37，質譜(MH+268))實施例73N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-甲基丁-2-烯基硫酯的合成按照上述通用方法C，使用N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸和3-甲基丁-2-烯基硫酯(TCI)，制得目標化合物。該反應用硅膠tlc監測，并經液相層析以3∶7的EtOAc∶己烷作洗脫劑純化。
NMR數據如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=5.2-5.075(m,1H),4.37(dq,J=9Hz,1H),3.56(s),3.43(d,J=12Hz,2H),1.266(d,J=12Hz,6H),1.3(d,J=9Hz,3H)。
C16H20NO2ClS(MW=325.86，質譜(M+325))實施例74N-[(2-苯基)-2-氟乙酰基]丙氨酸乙酯的合成按照上述通用方法F，使用α-氟苯基乙酸(Aldrich)和丙氨酸乙酯(Aldrich)，制得目標化合物。該反應用在硅膠上的tlc(1∶1的EtOAc∶己烷，Rf=0.75)監測，并用硅膠層析(用1∶1的乙酸乙酯/己烷作洗脫劑)純化。
NMR數據如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=1.14(q,3H),1.34(d,3H),4.07(m,2H),4.33(m,1H),5.84(d,1H),6.01(d,1H),7.40-7.55(m,5H),8.87(m,1H)。
C13H16NO3F(MW=253.27，質譜(MH+253))實施例75N-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-苯基甘氨酸甲酯的合成按照上述通用方法F，使用(3,5-二氟苯基乙酸(Aldrich)和L-苯基甘氨酸甲酯鹽酸鹽(Bachem)，制得目標化合物。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.4-7.3(m,5H),6.9-6.7(m,3H),6.55(d1H,7.1Hz),5.56(d1H,7Hz),3.72(s3H),3.57(s2H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=197.6,177.6,171.8,169.3,136.7,129.6,129.3,127.8,113.0,112.9,112.7,111.4,103.8,103.5,65.1,57.2,53.5,45.1,43.3,43.3。
C17H15NO3F2(MW=319.31，質譜(MH+320))實施例76N-(3,5-二氟苯基乙酰基)-L-苯基甘氨酸異丁酯的合成經上述通用方法F，使(3,5-二氟苯基乙酸(Aldrich)與L-苯基甘氨酸甲酯鹽酸鹽(Bachem)EDC偶合。
將所得化合物置于大量過量所需醇中。加入催化量干燥NaH，反應經tlc監測直到不再檢測到原料為止。該反應用數毫升1N HCl淬滅，攪拌數分鐘后加入飽和碳酸氫鈉水溶液。通過旋轉蒸發儀減少該反應混合物的體積直至除掉過量的醇，然后將剩余殘留物溶于乙酸乙酯并另外加入水。有機相用飽和NaCl水溶液洗滌并用MgSO4干燥。該溶液在旋轉蒸發儀內除去溶劑，然后所得粗產品殘留物經層析進一步純化。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.35-7.3(m,5H),6.8-6.7(m,3H),6.60(d,1H,7Hz),5.55(d,1H,7.1Hz),3.9(m,2H),3.60(s,2H),1.85(m,1H,7Hz),0.8(q,6H,7Hz)。
13C-nmr(CDCl3):δ=171.3,169.3,165.4,138.5,137.0,129.5,129.2,127.6,113.1,113.0,112.8,112.7,103.8,103.5,103.2,75.5,57.2,43.4,43.3,28.2,19.3。
C20H21NO3F2(MW=361.39，質譜(MH+362))
實施例77N-(環戊基乙酰基)-L-苯基甘氨酸甲酯的合成按照上述通用方法D，使用環戊基乙酸(Aldrich)和L-苯基甘氨酸甲酯鹽酸鹽(Bachem)，制得目標化合物。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.35(s,5H),6.44(bd,1H),5.6(d,1H),3.72(s,3H),2.24(bs,3H),1.9-1.4(m,6H),1.2-1.05(m,2H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=172.3,171.7,136.7,129.0,128.6,127.3,56.2,52.7,42.5,36.9,32.40,32.38,24.8。
實施例78N-(環戊基乙酰基)-L-丙氨酸甲酯的合成按照上述通用方法D，使用環戊基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)，制得目標化合物。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):=6.38(d,1H),4.50(m,1H),3.65(s,3H),2.13(bs,3H),1.80-1.00(m(包括在1.30處的d,3H),11H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.7,172.5,52.1,47.6,42.3,36.8,32.15,32.14,18.0。
C11H19NO3(MW=213.28，質譜(MH+214))實施例79N-(環丙基乙酰基)-L-苯基甘氨酸甲酯的合成按照上述通用方法D，使用環丙基乙酸(Aldrich)和L-苯基甘氨酸甲酯鹽酸鹽(Bachem)，制得目標化合物。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.35(m,5H),6.97(bd,J=7.2Hz,1H),5.59(d,J=7.8Hz,1H),3.71(s,3H),2.17(m,2H),1.05-0.95(m,1H),0.62(m,2H),0.02(m,2H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=171.9,174.6,136.6,129.0,128.5,127.2,56.1,52.7,41.0,6.9,4.37,4.33。
實施例80N-(環丙基乙酰基)-L-丙氨酸甲酯的合成按照上述通用方法D，使用環丙基乙酸(Aldrich)和L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)，制得目標化合物。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.60(d,1H),4.55(m,1H),3.69(s,3H),2.10(m,2H),1.34(d,3H),0.95(m,1H),0.58(m,2H),0.15(m,2H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.7,172.3,52.3,47.7,41.0,18.2,6.7,4.27,4.22。
實施例81N-[(3-硝基苯基)乙酰基]-L-甲硫氨酸異丁酯的合成按照上述通用方法H，使用硝基苯基乙酸(Aldrich)和L-甲硫氨酸(Aldrich)，制得褐色油狀目標化合物。該反應由硅膠tlc監測。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.16(m,2H),7.67(d,1H),7.32(t,1H),6.31(bd,1H),4.69(m,1H),3.90(d,2H),3.68(s,2H),2.47(t,2H),2.15(m,1H),2.02(s,3H),1.90(m,2H),0.91(d,6H)。
C17H24N2O5S(MW=368.4，質譜(MH+368))實施例82β-淀粉狀蛋白產生的抑制劑的檢測的細胞篩選在具有Swedish突變的細胞系中測定上述多種式Ⅰ化合物，以評價它們抑制β-淀粉狀蛋白產生的能力。該篩選測定使用細胞(K293=人腎臟細胞系)，可以根據國際專利申請號94/105698和Citron等11所述的方法，用淀粉狀蛋白的前體蛋白751(APP751)基因對該細胞系進行穩定轉染，所述前體蛋白具有雙突變，即由Lys651Met652突變為Asn651Leu652(APP751編號)。該突變通常被稱為Swedish突變，將稱為“293751SWE”的細胞以每孔1.5-2.5×104細胞的濃度加至Corning96-孔培養板的各孔(含有Dulbecco氏極限必需培養基+10％胎牛血清)中。為了在測定的線性范圍內(約0.2-2.5ng/ml)獲得β-淀粉狀蛋白的ELISA結果，細胞的數目是很重要的。
于37℃、在用10％二氧化碳平衡的孵箱內孵育過夜后，去除培養基，每孔加入200μl含有式Ⅰ化合物(藥物)的培養基替代進行兩個小時的預處理，并如前孵育細胞。在100％的DMSO中制備藥物儲備液，使在處理時所用的藥物終濃度中，二甲基亞砜的濃度不超過0.5％，事實上通常為0.1％。
在預處理結束后，再次去除培養基，用含有藥物的新鮮培養基代替，將細胞再孵育兩個小時。處理后，于室溫、1200rpm，將培養板在Beckman GPR上離心5分鐘，以從條件培養基中沉淀細胞碎片。根據國際專利申請號94/105698所述方法，從各孔中取100μl條件培養基或其適當的稀釋液，轉移至用抗體26613預包被的ELISA培養板上，該抗體為β-淀粉樣肽的氨基酸13-28的抗體，將上述培養板于4℃儲存過夜。在第二天，用標記抗體6C613進行ELISA測定，以檢測β-淀粉樣肽產生的量，該抗體為抗β-淀粉樣肽氨基酸1-16的抗體。
根據Hansen等12方法的改良方法，測定化合物的細胞毒效應。向組織培養板中的殘留細胞中加入25μl的3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑鎓溴化物(MTT)儲備液(5mg/ml)，至終濃度為1mg/ml。于37℃，將細胞孵育1小時，加入等體積的MTT裂解緩沖液(20％w/v十二烷基硫酸鈉的50％二甲基甲酰胺溶液，pH4.7)終止細胞活性。于室溫振搖過夜以獲得完全萃取。在MolecularDevice’s UVmax微量滴定板讀板儀上測定OD562nm和OD650nm的差異，作為細胞生存率的指標。
將β-淀粉樣肽ELISA的結果擬合為標準曲線，并以ng/ml的β-淀粉樣肽表示。為進行細胞毒性的歸一化，將這些結果除以MTT的結果，并以不含藥物的對照結果的百分比表示。所有的結果為至少六個重復測定的平均值和標準差。
用該測定檢測受試化合物在細胞中對β-淀粉樣肽產生的抑制活性。該測定的結果證明與對照相比，本發明化合物的每個化合物均對β-淀粉樣肽產生至少有30％的抑制。
實施例83β-淀粉狀蛋白釋放和/或合成的體內抑制該實施例說明如何檢測本發明的化合物對β-淀粉狀蛋白釋放和/或合成的體內抑制。在這些實驗中，使用3-5月齡的PDAPP小鼠[Games等(1995)Nature373:523-527]。根據待實驗的化合物的不同，通常將化合物配制為5或10mg/ml的濃度。由于這些化合物的低的溶解性的因素，所以可以在各種溶媒中進行配制，如玉米油(Safeway,South San Francisco,CA)；10％乙醇玉米油；2-羥丙基-β-環糊精(Research Biochemicals International,Natick MA)以及羧甲基纖維素(Sigma Chemical Co.,St.Louis MO)。具體講，對于實施例141的化合物，溶媒為羧甲基纖維素(Sigma)。
用26號針皮下給小鼠藥物，3小時后，經二氧化碳窒息使所述動物安樂死，用1cc25G5/8”結核菌素注射器/針(涂有0.5MEDTA溶液，pH8.0)進行心臟穿刺取血。將血液置于含有EDTA的Becton-Dickinson真空(vacutainer)管中，于5℃、以1500×g旋轉15分鐘。然后取出小鼠腦，解剖出皮層和海馬，置于冰上。
1．腦測定用Kontes電動研棒(Fisher,Pittsburgh PA)，將每個腦區域在10倍體積的冰冷的胍緩沖液(5.0M鹽酸胍，50mM Tris-HCl,pH8.0)中勻漿，以制備用于酶聯免疫吸附測定(ELISAs)的海馬和皮層組織。于室溫下，將勻漿在旋轉臺上輕輕搖動3-4小時，于-20℃儲存待進行β-淀粉狀蛋白的定量。
用冰冷的酪蛋白緩沖液
以1∶10稀釋腦勻漿，因此胍的終濃度降低為0.5M，然后于4℃、16,000×g離心20分鐘。制備β-淀粉狀蛋白標準品(1-40或1-42個氨基酸)，使終組成含有0.5M胍和0.1％牛血清白蛋白(BSA)。
總的β-淀粉狀蛋白夾層ELISA含有β-淀粉狀蛋白的兩個單克隆抗體(mAb)，該夾層ELISA可定量β-淀粉狀蛋白(aa1-40)和β-淀粉狀蛋白(aa1-42)。捕捉抗體26613為β-淀粉狀蛋白的氨基酸13-28的特異抗體。生物素化的抗體3D614為β-淀粉狀蛋白的氨基酸1-5的特異抗體，該抗體在測定中用作報告抗體。3D6生物素化的方法根據產商(Pierce,Rockford IL)關于免疫球蛋白的NHS-生物素標記的方法，但是使用100mM碳酸氫鈉的pH為8.5的緩沖液。3D6抗體不能識別分泌的淀粉狀蛋白的前體蛋白(APP)或全長的APP，但是可以檢測具有氨基末端天冬氨酸的β-淀粉狀蛋白類。該測定的敏感度下限約為50pg/ml(11pM)，在濃度高至1ng/ml時對內源性β-淀粉樣肽不顯示交叉反應性。
定量β-淀粉狀蛋白水平的夾層ELISA構型使用作為捕捉抗體的mAb21F1214(可以識別β-淀粉狀蛋白的氨基酸33-42)。在該測定中使用的生物素化的3D6也是報告抗體，其敏感度下限約為125pg/ml(28pM)。
于室溫下，將266和21F12捕捉mABs在96孔免疫測定板(Costar,Cambidge MA)中以10μg/mL包被過夜。然后吸出培養板中的培養基，于室溫下，用0.25％人血清白蛋白的PBS緩沖液封閉至少1小時，然后于4℃、干燥下儲存待用。在用前，用洗滌緩沖液(Tris-緩沖鹽水，0.05％Tween)，使所述板再水化。將樣品和標準品加至培養板中，于4℃孵育過夜。在測定的每個步驟之間均用洗滌緩沖液將所述培養板洗滌至少3次。于室溫下，將生物素化的3D6(用酪蛋白孵育緩沖液(0.25％酪蛋白，PBS,0.05％Tween20,pH7.4)稀釋至0.5μg/ml)在各孔中孵育1小時。于室溫下，將用酪蛋白孵育緩沖液以1∶4000稀釋的抗生物素蛋白-HRP(載體，Burlingame CA)加至各孔中1小時。加入生色底物Slow TMB-ELISA(Pierce,CambridgeMA)，使其反應15分鐘，然后加入2N硫酸終止酶反應。用MolecularDevices Vmax(Molecular Devices,Menlo Park CA)，于450nm和650nm處測定吸收度的差異，以對反應產物進行定量。
2．血液測定將EDTA血漿在樣品稀釋液(0.2g/L磷酸鈉一水合物(一元堿)、2.16g/L磷酸鈉七水合物(二元堿)、0.5g/L硫柳汞、8.5g/L氯化鈉、0.5ml Triton X-405、6.0g/L不含球蛋白的牛血清白蛋白和水)中進行1∶1稀釋。根據上述腦測定中所述方法，用總β-淀粉狀蛋白測定(266捕捉/3D6報告抗體)測定樣品稀釋液中的樣品和標準品，但是用樣品稀釋液代替所述的酪蛋白稀釋液。
從上述的描述中可以看出，本領域的技術人員可以對組合物和方法進行各種修改和改變。所有此類修改均在所附的權利要求包括的范圍內。序列表(1)一般資料(ⅰ)申請人ATHENA NEUROSCIENCES,INC.
ELI LILLY & COMPANYJING WUEUGENE D.PHORSETTJEFFREY S.NISSENTHOMAS E.MABRYLEE H.LATIMERVARCHESE JOHNLAWRENCE Y.FANGJAMES E.AUDIA(ⅱ)發明名稱N-(芳基/雜芳基乙酰基)氨基酸酯、包括這些化合的藥用組合物以及用這些化合物抑制β-淀粉樣肽釋放和/或合成的方法(ⅲ)序列數1(ⅳ)通信地址(A)收信人Burns,Doane,Swecker&Mathis,LLP(B)街道P.O.Box1404(C)城市Alexandria(D)州Virginia(E)國家美國(F)由政編碼22313-1404(ⅴ)計算機可讀形式(A)媒體類型軟盤(B)計算機IBM兼容機(C)操作系統PC-DOS/MS-DOS(D)軟件PatentIn Release#1.0，版本1.30
(ⅵ)當前申請數據(A)申請號未頒發(B)提交日期Unassigned(C)分類(ⅶ)在先申請數據(A)申請號US08/754,895(B)提交日期1996年11月22日(ⅷ)代理律師/代理人資料(A)姓名Swiss,Gerald F.
(B)注冊號30,113(C)參考/檔案號002010-051(ⅸ)電訊資料(A)電話650-854-7400(B)傳真650-854-8275(2)SEQ ID NO:1的信息(ⅰ)序列特征(A)長度43個氨基酸(B)類型肽(D)拓撲學線性(ⅱ)分子類型肽(ⅹⅰ)序列描述SEQ ID NO:1:Asp Ala Glu Phe Arg His Asp Ser Gly Tyr Glu Val His His1 5 10Gln Lys Leu Val Phe Phe Ala Glu Asp Val Gly Ser Asn Lys15 20 25Gly Ala Ile Ile Gly Leu Met Val Gly Gly Val Val Ile Ala30 35 40Thr
權利要求
1．在細胞內抑制β-淀粉樣肽釋放和/或其合成的方法，該方法包括給此種細胞以抑制細胞β-淀粉樣肽釋放和/或合成的有效量的化合物或化合物的混合物，其中所述化合物由式Ⅰ表示
Ⅰ其中R1選自a)烷基、鏈烯基、烷基環烷基、苯基-(R)m-、萘基-(R)m-其中R是1-8個碳原子的亞烷基及m是等于0或1的整數、環烷基、環烯基、3-吡啶基、4-吡啶基以及3-10個原子和1-4個選自氧、硫和氮的雜原子的雜芳基，該雜芳基不是3-和4-吡啶基，且任選由1-3個選自下列的取代基取代烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、鹵素、硝基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，條件是對此種雜芳基當至少有一個氮原子時，也至少有一個氧和/或硫雜原子；b)式Ⅱ的取代苯基
Ⅱ其中，R是1-8個碳原子的亞烷基，m是等于0或1的整數。Ra和Ra’獨立選自氫、羥基、氟和甲基；Rb和Rb’獨立選自氫、烷基、烷氧基、芳基、氰基、環烷基、鹵素、雜芳基、雜環基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基和-C(O)R4其中R4選自烷基、芳基、烷氧基和芳氧基；及Rc選自氫、烷基、芳基、氰基、鹵素、硝基，及Rb和Rc結合形成帶有苯環的亞甲二氧基環；及當Rb和/或Rb’和/或Rc是氟、氯、溴和/或硝基時，則Ra和/或Ra’也可以是氯；及c)在5、6、7和/或8位用1-4個選自烷基、烷氧基、鹵素、氰基、硝基、三鹵代甲基和硫代烷氧基取代的1-或2-萘基-(R)m-，其中R是1-8個碳原子的亞烷基及m是等于0或1的整數；R2選自氫、烷基、苯基、烷基烷氧基、烷基硫代烷氧基；及R3選自-(CH2)nCR10R5R6其中n是等于0、1或2的整數，R5和R6獨立選自氫、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、雜環基、-NR7R8其中R7和R8獨立是氫或烷基和-COOR9其中R9是烷基，以及其中R5和R6一起形成環烷基、環烯基、芳基、雜芳基和雜環基，并且當R5和R6不一起形成芳基或雜芳基時，則R10選自氫和烷基，條件是當n是0時，則R10是氫，當n大于0和R5和R6一起形成芳基或雜芳基時，則R10成為該基團中的鍵；X是氧或硫；X’是氫、羥基或氟；X”是氫、羥基或氟，或X’和X”一起形成氧代基，以及所述化合物的藥學上可接受的鹽，其條件是當R1是苯基，R2是-CH(CH3)CH2CH3,X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH3或-CH2CH(CH3)2當R1是苯基，R3是-CH2CH(CH3)2,X是氧，及X’和X”是氫時，則R2不是-CH(CH3)2當R1是吡啶-3-基，R2是乙基，X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH(CH3)2當R1是吲哚并噁嗪-3-基(indoxazin-3-yl)、2,4-二甲基噻唑-5-基、4-甲基-1,2,5-硫代噁二唑-3-基或3,5-二(三氟甲基)苯基，R2是甲基，X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH(CH3)2，和當R1是-CH2-苯基，R3是-CH2CH3,X是氧，及X’和X”是氫時，則R2不是-CH2CH(CH3)2。
2．在有AD發病危險的患者中預防AD發作的方法，該方法包括給所述患者服以包括藥用惰性載體和有效量式Ⅰ化合物或其混合物的藥用組合物，所述式Ⅰ化合物如下
Ⅰ其中R1選自a)烷基、鏈烯基、烷基環烷基、苯基-(R)m-、萘基-(R)m-其中R是1-8個碳原子的亞烷基及m是等于0或1的整數、環烷基、環烯基、3-吡啶基、4-吡啶基以及不是3-吡啶基和4-吡啶基的雜芳基，該雜芳基具有3-10個原子以及1-4個選自氧、硫和氮的雜原子，其中所述雜芳基任選由1-3個選自烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、鹵素、硝基、硫代烷氧基和硫代芳氧基的取代基取代，條件是對此種雜芳基當至少有一個氮原子時，那么也至少有一個氧和/或硫雜原子；b)式Ⅱ的取代苯基
Ⅱ其中R是1-8個碳原子的亞烷基，m是等于0或1的整數。Ra和Ra’獨立選自氫、羥基、氟和甲基；Rb和Rb’獨立是選自氫、烷基、烷氧基、芳基、氰基、環烷基、鹵素、雜芳基、雜環基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基和-C(O)R4其中R4選自烷基、芳基、烷氧基和芳氧基；及Rc選自氫、烷基、芳基、氰基、鹵素、硝基，及Rb和Rc結合形成帶有苯環的亞甲二氧基環；及當Rb和/或Rb’和/或Rc是氟、氯、溴和/或硝基時，則Ra和/或Ra’也可以是氯；及c)在5、6、7和/或8位用1-4個選自烷基、烷氧基、鹵素、氰基、硝基、三鹵代甲基和硫代烷氧基取代的1-或2-萘基-(R)m-，其中R是1-8個碳原子的亞烷基及m是等于0或1的整數；R2選自氫、烷基、苯基、烷基烷氧基、烷基硫代烷氧基；及R3選自-(CH2)nCR10R5R6其中n是等于0、1或2的整數，R5和R6獨立選自氫、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、雜環基、-NR7R8其中R7和R8獨立是氫或烷基和-COOR9其中R9是烷基，以及其中R5和R6一起形成環烷基、環烯基、芳基、雜芳基和雜環基，并且當R5和R6不一起形成芳基或雜芳基，則R10選自氫和烷基，條件是當n是0時，則R10是氫，以及當n大于和R5和R6一起形成芳基或雜芳基時，則R10成為該基團中的鍵；X是氧或硫；X’是氫、羥基或氟；X”是氫、羥基或氟，或X’和X”一起形成氧代基，以及所述化合物的藥學上可接受的鹽，其條件是當R1是苯基，R2是-CH(CH3)CH2CH3,X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH3或-CH2CH(CH3)2當R1是苯基，R3是-CH2CH(CH3)2,X是氧，及X’和X”是氫時，則R2不是-CH(CH3)2當R1是吡啶-3-基，R2是乙基，X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH(CH3)2當R1是吲哚并噁嗪-3-基、2,4-二甲基噻唑-5-基、4-甲基-1,2,5-硫代噁二唑-3-基或3,5-二(三氟甲基)苯基，R2是甲基，X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH(CH3)2，和當R1是-CH2-苯基，R3是-CH2CH3,X是氧，及X’和X”是氫時，則R2不是-CH2CH(CH3)2。
3．治療患有AD的患者以便抑制患者病情惡化的方法，該方法包括給所述患者服以包括藥用惰性載體和有效量式Ⅰ化合物或其混合物的藥用組合物，所述式Ⅰ化合物如下
Ⅰ其中R1選自a)烷基、鏈烯基、烷基環烷基、苯基-(R)m-、萘基-(R)m-其中R是1-8個碳原子的亞烷基及m是等于0或1的整數、環烷基、環烯基、3-吡啶基、4-吡啶基以及不是3-吡啶基和4-吡啶基的雜芳基，該雜芳基具有3-10個原子以及1-4個選自氧、硫和氮的雜原子，其中所述雜芳基是任選由1-3個選自烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、鹵素、硝基、硫代烷氧基和硫代芳氧基取代基取代，條件是對此種雜芳基當至少有一個氮原子時，那么也至少有一個氧和/或硫雜原子；b)式Ⅱ的取代苯基
Ⅱ其中，R是1-8個碳原子的亞烷基，m是等于0或1的整數。Ra和Ra’獨立選自氫、羥基、氟和甲基；Rb和Rb獨立是選自氫、烷基、烷氧基、芳基、氰基、環烷基、鹵素、雜芳基、雜環基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基和-C(O)R4其中R4選自烷基、芳基、烷氧基和芳氧基；及Rc選自氫、烷基、芳基、氰基、鹵素、硝基，及Rb和Rc結合形成 帶有苯環的亞甲二氧基環；及當Rb和/或Rb’和/或Rc是氟、氯、溴和/或硝基時，則Ra和/或Ra’也可以是氯；及c)在5、6、7和/或8位用1-4個選自烷基、烷氧基、鹵素、氰基、硝基、三鹵代甲基和硫代烷氧基取代的1-或2-萘基-(R)m-，其中R是1-8個碳原子的亞烷基及m是等于0或1的整數；R2選自氫、烷基、苯基、烷基烷氧基、烷基硫代烷氧基；及R3選自-(CH2)nCR10R5R6其中n是等于0、1或2的整數，R5和R6獨立選自氫、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、雜環基、-NR7R8其中R7和R8獨立是氫或烷基和-COOR9其中R9是烷基，以及其中R5和R6一起形成環烷基、環烯基、芳基、雜芳基和雜環基，并且當R5和R6不一起形成芳基或雜芳基時，則R10選自氫和烷基，條件是當n是0時，R10是氫，以及當n大于0,R5和R6一起形成芳基或雜芳基時，則R10成為該基團中的鍵；X是氧或硫；X’是氫、羥基或氟；X”是氫、羥基或氟，或X’和X”一起形成氧代基，以及所述化合物的藥學上可接受的鹽，其條件是當R1是苯基，R2是-CH(CH3)CH2CH3,X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH3或-CH2CH(CH3)2當R1是苯基，R3是-CH2CH(CH3)2,X是氧，及X’和X”是氫時，則R2不是-CH(CH3)2當R1是吡啶-3-基，R2是乙基，X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH(CH3)2當R1是吲哚并噁嗪-3-基、2,4-二甲基噻唑-5-基、4-甲基-1,2,5-硫代噁二唑-3-基或3,5-二(三氟甲基)苯基，R2是甲基，X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH(CH3)2，和當R1是-CH2-苯基，R3是-CH2CH3,X是氧，及X’和X”是氫時，則R2不是-CH2CH(CH3)2。
4．按照權利要求1、2或3的方法，其中R1是未取代苯基。
5．按照權利要求1、2或3的方法，其中R1是選自1-萘基和2-萘基的未取代萘基。
6．按照權利要求1、2或3的方法，其中R1是式Ⅱ的取代苯基。
7．按照權利要求6的方法，其中所述取代苯基如下定義(a)在2、3或4位具有單一取代的單取代苯基，其中每一具體取代基分別由Ra、Rb和Rc基團支配(governed)；(b)在2,3-位、2,4-位、2,5-位、2,6-位、3,4-位、3,5-位或3,6-位具有兩個取代基的二取代苯基，其中這些取代基中的每一個分別由Ra、Ra’、Rb、Rb’和Rc基團支配；及(c)在2,3,4-位、2,3,5-位、2,3,6-位、3,4,5-位和3,4,6-位具有三個取代基的三取代苯基，其中這些取代基中的每一個分別由Ra、Ra’、Rb、Rb’和Rc基團支配。
8．按照權利要求7的方法，其中所述取代苯基選自4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-硝基苯基、4-甲基苯基、3-甲氧基苯基、3-硝基苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、3-溴苯基、3-硫代甲氧基苯基、3-甲基苯基、3-三氟甲基苯基、2-羥基苯基、2-甲基苯基、2-氟苯基、3,4-二氯苯基、3,4-亞甲二氧基苯基、3,5-二氟苯基、3,5-二氯苯基、2,4-二氯苯基和2,5-二氟苯基。
9．按照權利要求1、2或3的方法，其中R1是苯基-(R)m-基團，所述R是1-8個碳原子的亞烷基及m等于1。
10．按照權利要求9的方法，其中R1選自芐基、3-苯基-正-丙基和4-苯基-正-丁基。
11．按照權利要求1、2或3的方法，其中R1選自烷基、鏈烯基、烷基環烷基、環烷基和環烯基。
12.按照權利要求11的方法，其中R1是烷基。
13．按照權利要求11的方法，其中R1是環烷基。
14．按照權利要求11的方法，其中R1是鏈烯基。
15．按照權利要求11的方法，其中R1是環烯基。
16．按照權利要求11的方法，其中R1烷基、環烷基、烷基環烷基、鏈烯基和環烯基選自仲-丁基、環丙基、環丁基、環己基、環戊基、環己-1-烯基、-CH2-環丙基、-CH2-環丁基、-CH2-環己基、-CH2-環戊基、-CH2CH2-環丙基、-CH2CH2-環丁基、-CH2CH2-環己基和-CH2CH2-環戊基。
17．按照權利要求1、2或3的方法，其中R1選自雜芳基和取代雜芳基。
18．按照權利要求17的方法，其中R1雜芳基和取代雜芳基選自吡啶-3-基、吡啶-4-基、噻吩-2-基、噻吩-3-基、苯并噻唑-4-基、2-苯基苯并噁唑-5-基、呋喃-2-基、苯并呋喃-2-基、苯并噻吩-3-基、2-氯噻吩-5-基、3-甲基異噁唑-5-基、2-(苯硫基)噻吩-5-基、6-甲氧基噻吩-2-基、3-苯基-1,2,4硫代噁二唑-5-基和2-苯基噁唑-4-基。
19．按照權利要求1、2或3的方法，其中R2選自1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷基烷氧基、苯基和1-4個碳原子的烷硫基烷氧基。
20．按照權利要求9的方法，其中R2選自甲基、乙基、正-丙基、異-丙基、正-丁基、異-丁基、-CH2CH2SCH3和苯基。
21．按照權利要求1、2或3的方法，其中X’和X”均為氫及X是氧。
22．按照權利要求21的方法，其中R3選自甲基、乙基、異-丙基、正-丙基、正-丁基、異-丁基、環戊基、烯丙基、異-丁-2-烯基、3-甲基戊基、-CH2-環丙基、CH2-環己基、-CH2-(3-四氫呋喃基)、-CH2-噻吩-2-基、-CH2-(1-甲基)環丙基、-CH2-噻吩-3-基、-CH2-C(O)O-叔丁基、-CH2-C(CH3)3、-CH2CH(CH2CH3)3、-2-甲基環戊基、環己-2-烯基、-CH[CH(CH3)2]COOCH3、-CH2CH2N(CH3)2、-CH2-CHCH3=CH2、-CH2CH=C(CH3)2等。
23．按照權利要求1、2或3的方法，其中X’和X”均為氫及X是硫。
24．按照權利要求21的方法，其中R3選自異-丁-2-烯基和異-丁基。
25．按照權利要求1、2或3的方法，其中式Ⅰ化合物選自N-(苯基乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-(3-苯基丙酰基)丙氨酸異-丁酯N-(3-甲基戊酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(4-氯苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3,4-二氯苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-吡啶基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(1-萘基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-萘基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-(4-苯基丁酰基)丙氨酸異-丁酯N-(5-苯基戊酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(4-吡啶基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯2-[(3,4-二氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-甲氧基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-硝基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3,4-亞甲二氧基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(噻吩-3-基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-硝基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-羥基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-萘基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2,4-二氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-溴苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(苯并噻唑4-基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-甲基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-溴苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-三氟甲基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-噻吩基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-(苯基乙酰氨基)丁酸異-丁酯N-(苯基乙酰基)纈氨酸2-甲基丁酯N-(苯基乙酰基)甲硫氨酸異-丁酯N-(苯基乙酰基)亮氨酸異-丁酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-甲基丁-2-烯基酯N-[(3-氯苯基)乙酰基丙氨酸環丙基甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-噻吩甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸(1-甲基環丙基)甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-噻吩基甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-甲基環戊酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-甲基丙-2-烯基酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸環己-2-烯基酯N-[(2-苯基苯并噁唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-甲基噻吩(thiophenyl))乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-4-[(2-呋喃基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(苯并呋喃-2-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(苯并噻吩-3-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-氯-5-噻吩基)乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(3-甲基-異噁唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-苯硫基噻吩基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(6-甲氧基苯并噻吩-2-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-苯基-1,2,4-噻二唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-苯基噁唑-4-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-甲基苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-噻吩基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(4-甲基苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-(苯基乙酰基)丙氨酸(1-甲氧基羰基)異-丁酯N-[(3-硝基苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸乙酯N-[(3-硝基苯基)乙酰基]甲硫氨酸乙酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-(N,N-二甲基氨基)乙酯2-[(3,5-二氯苯基)乙酰氨基]己酸甲酯N-[(3,5-二氯苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-(環己基乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-(環戊基乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(環己-1-烯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-甲基丁-2-烯基硫酯N-[(2-苯基)-2-氟乙酰基]丙氨酸乙酯N-(3,5-二氟苯基乙酰基)苯基甘氨酸甲酯N-(3,5-二氟苯基乙酰基)苯基甘氨酸異-丁酯N-(環戊基乙酰基)苯基甘氨酸甲酯N-(環戊基乙酰基)丙氨酸甲酯N-(環丙基乙酰基)苯基甘氨酸甲酯N-(環丙基乙酰基)丙氨酸甲酯；及N-[(3-硝基苯基)乙酰基]甲硫氨酸異-丁酯
26．包括藥用惰性載體和有效量的式Ⅰ化合物的藥用組合物，所述式Ⅰ化合物如下
Ⅰ其中R1選自a)烷基、鏈烯基、烷基環烷基、苯基-(R)m-、萘基-(R)m-其中R是1-8個碳原子的亞烷基及m是等于0或1的整數、環烷基、環烯基、3-吡啶基、4-吡啶基以及不是3-吡啶基和4-吡啶基的雜芳基，該雜芳基具有3-10個原子以及1-4個選自氧、硫和氮的雜原子，其中所述雜芳基是任選由1-3個選自烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、鹵素、硝基、硫代烷氧基和硫代芳氧基取代基取代，條件是對此種雜芳基當至少有一個氮原子時，那么也至少有一個氧和/或硫雜原子；b)式Ⅱ的取代苯基
Ⅱ其中R是1-8個碳原子的亞烷基，m是等于0或1的整數。Ra和Ra’獨立選自氫、羥基、氟和甲基；Rb和Rb’獨立是選自氫、烷基、烷氧基、芳基、氰基、環烷基、鹵素、雜芳基、雜環基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基和-C(O)R4其中R4選自烷基、芳基、烷氧基和芳氧基；及Rc選自氫、烷基、芳基、氰基、鹵素、硝基，及Rb和Rc結合生成具有苯環的亞甲基二氧基環；及當Rb和/或Rb’和/或Rc是氟、氯、溴和/或硝基時，則Ra和/或Ra’也可以是氯；及c)在5、6、7和/或8位用1-4個選自烷基、烷氧基、鹵素、氰基、硝基、三鹵代甲基和硫代烷氧基取代的1-或2-萘基-(R)m-，其中R是1-8個碳原子的亞烷基及m是等于0或1的整數；R2選自氫、烷基、苯基、烷基烷氧基、烷基硫代烷氧基；及R3選自-(CH2)nCR10R5R6其中n是等于0、1或2的整數，R5和R6分別選自氫、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、雜環基、-NR7R8其中R7和R8分別是氫或烷基和-COOR9其中R9是烷基，以及其中R5和R6一起生成環烷基、環烯基、芳基、雜芳基和雜環基，并且當R5和R6不一起生成芳基或雜芳基，則R10選自氫和烷基，條件是當n是0時，R10是氫以及當n大于0時和R5和R6一起生成芳基或雜芳基時，則R10成為該基團中的鍵；X是氧或硫；X’是氫、羥基或氟；X”是氫、羥基或氟，或X’和X”一起生成氧代基，以及所述化合物的藥學上可接受的鹽，其條件是當R1是苯基，R2是-CH(CH3)CH2CH3,X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH3或-CH2CH(CH3)2當R1是苯基，R3是-CH2CH(CH3)2,X是氧，及X’和X”是氫時，則R2不是-CH(CH3)2當R1是吡啶-3-基，R2是乙基，X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH(CH3)2當R1是吲哚并噁嗪-3-基、2,4-二甲基噻唑-5-基、4-甲基-1,2,5-硫代噁二唑-3-基或3,5-二(三氟甲基)苯基，R2是甲基，X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH(CH3)2，和當R1是-CH2-苯基，R3是-CH2CH3,X是氧，及X’和X”是氫時，則R2不是-CH2CH(CH3)2。
27．按照權利要求26的藥用組合物，其中R1是未取代苯基。
28．按照權利要求27的藥用組合物，其中R1是選自1-萘基和2-萘基的未取代萘基。
29．按照權利要求26的藥用組合物，其中R1是式Ⅱ的取代苯基。
30．按照權利要求29的藥用組合物，其中所述取代苯基如下定義(a)在2、3或4位具有單一取代的單取代苯基，其中每一具體取代基分別由Ra、Rb和Rc基團支配；(b)在2,3-位、2,4-位、2,5-位、2,6-位、3,4-位、3,5-位或3,6-位具有兩個取代基的二取代苯基，其中這些取代基中的每一個分別由Ra、Ra’、Rb、Rb’和Rc基團支配；及(c)在2,3,4-位、2,3,5-位、2,3,6-位、3,4,5-位和3,4,6-位具有三個取代基的三取代苯基，其中這些取代基中的每一個分別由Ra、Ra’、Rb、Rb’和Rc基團支配。
31．按照權利要求30的藥用組合物，其中所述取代苯基選自4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴代苯基、4-硝基苯基、4-甲基苯基、3-甲氧基苯基、3-硝基苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、3-溴代苯基、3-硫代甲氧基苯基、3-甲基苯基、3-三氟甲基苯基、2-羥基苯基、2-甲基苯基、2-氟苯基、3,4-二氯苯基、3,4-亞甲二氧基苯基、3,5-二氟苯基、3,5-二氯苯基、2,4-二氯苯基和2,5-二氟苯基。
32．按照權利要求26的藥用組合物，其中R1是苯基-(R)m-基團，所述R是1-8個碳原子的亞烷基及m等于1。
33．按照權利要求32的藥用組合物，其中R1選自芐基、3-苯基-正-丙基和4-苯基-正-丁基。
34．按照權利要求26的藥用組合物，其中R1選自烷基、鏈烯基、烷基環烷基、環烷基和環烯基。
35．按照權利要求34的藥用組合物，其中R1是烷基。
36．按照權利要求34的藥用組合物，其中R1是環烷基。
37．按照權利要求34的藥用組合物，其中R1是鏈烯基。
38．按照權利要求34的藥用組合物，其中R1是環烯基。
39．按照權利要求34的藥用組合物，其中R1烷基、鏈烯基、烷基環烷基、環烷基和環烯基選自仲-丁基、環丙基、環丁基、環己基、環戊基、環己-1-烯基、-CH2-環丙基、-CH2-環丁基、-CH2-環己基、-CH2-環戊基、-CH2CH2-環丙基、-CH2CH2-環丁基、-CH2CH2-環己基和-CH2CH2-環戊基。
40．按照權利要求26的藥用組合物，其中R1選自雜芳基和取代雜芳基。
41．按照權利要求40的藥用組合物，其中R1雜芳基和取代雜芳基選自吡啶-3-基、吡啶-4-基、噻吩-2-基、噻吩-3-基、苯并噻唑-4-基、2-苯基苯并噁唑-5-基、呋喃-2-基、苯并呋喃-2-基、苯并噻吩-3-基、2-氯噻吩-5-基、3-甲基異噁唑-5-基、2-(苯硫基)噻吩-5-基、6-甲氧基噻吩-2-基、3-苯基-1,2,4-硫代噁二唑-5-基和2-苯基噁唑-4-基。
42．按照權利要求26的藥用組合物，其中R2選自1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷基烷氧基、苯基和1-4個碳原子的烷硫基烷氧基。
43．按照權利要求42的藥用組合物，其中R2選自甲基、乙基、正-丙基、異-丙基、正-丁基、異-丁基、-CH2CH2SCH3和苯基。
44．按照權利要求26的藥用組合物，其中X’和X”均為氫及X是氧。
45．按照權利要求44的藥用組合物，其中R3選自甲基、乙基、異-丙基、正-丙基、正-丁基、異-丁基、環戊基、烯丙基、異-丁-2-烯基、3-甲基戊基、-CH2-環丙基、-CH2-環己基、-CH2-(3-四氫呋喃基)、-CH2-噻吩-2-基、-CH2-(1-甲基)環丙基、-CH2-噻吩-3-基、-CH2-C(O)O-叔丁基、-CH2-C(CH3)3、-CH2-CH(CH2CH3)3、-2-甲基環戊基、-環己-2-烯基、-CH[CH(CH3)2]COOCH3、-CH2CH2N(CH3)2、-CH2-C(CH3)=CH2、-CH2CH=C(CH3)2等。
46．按照權利要求26的藥用組合物，其中X’和X”均為氫及X是硫。
47．按照權利要求46的藥用組合物，其中R3選自異-丁-2-烯基和異-丁基。
48．按照權利要求26的藥用組合物，其中式Ⅰ化合物選自N-(苯基乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-(3-苯基丙酰基)丙氨酸異-丁酯N-(3-甲基戊酰基)丙氨酸異-丁酯N-(4-氯苯基)乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(3,4-二氯苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-吡啶基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(1-萘基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-萘基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-(4-苯基丁酰基)丙氨酸異-丁酯N-(5-苯基戊酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(4-吡啶基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯2-[(3,4-二氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-甲氧基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-硝基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3,4-亞甲二氧基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(噻吩-3-基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-硝基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-羥基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-萘基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2,4-二氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-溴苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(苯并噻唑4-基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-甲基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-溴苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-三氟甲基苯基)乙酰氨基丁酸異-丁酯2-[(2-噻吩基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-(苯基乙酰氨基)丁酸異-丁酯N-(苯基乙酰基)纈氨酸2-甲基丁酯N-(苯基乙酰基)甲硫氨酸異-丁酯N-(苯基乙酰基)亮氨酸異-丁酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-甲基丁-2-烯基酯N-[(3-氯苯基)乙酰基丙氨酸環丙基甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-噻吩甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸(1-甲基環丙基)甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-噻吩基甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-甲基環戊酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-甲基丙-2-烯基酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸環己-2-烯基酯N-[(2-苯基苯并噁唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-甲基噻吩基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-4-[(2-呋喃基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(苯并呋喃-2-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(苯并噻吩-3-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-氯-5-噻吩基)乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(3-甲基-異噁唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-苯硫基噻吩基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(6-甲氧基苯并噻吩-2-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-苯基-1,2,4-噻二唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-苯基噁唑-4-基)乙酰基]丙氨酸異丁酯N-[(3-甲基苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-噻吩基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(4-甲基苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-(苯基乙酰基)丙氨酸(1-甲氧基羰基)異-丁酯N-[(3-硝基苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸乙酯N-[(3-硝基苯基)乙酰基]甲硫氨酸乙酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-(N,N-二甲基氨基)乙酯2-[(3,5-二氯苯基)乙酰氨基]己酸甲酯N-[(3,5-二氯苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-(環己基乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-(環戊基乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(環己-1-烯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-甲基丁-2-烯基硫酯N[(2-苯基)-2-氟乙酰基]丙氨酸乙酯N-(3,5-二氟苯基乙酰基)苯基甘氨酸甲酯N-(3,5-二氟苯基乙酰基)苯基甘氨酸異-丁酯N-(環戊基乙酰基)苯基甘氨酸甲酯N-(環戊基乙酰基)丙氨酸甲酯N-(環丙基乙酰基)苯基甘氨酸甲酯N-(環丙基乙酰基)丙氨酸甲酯；及N-[(3-硝基苯基)乙酰基]甲硫氨酸異-丁酯
49．式Ⅲ化合物
Ⅲ其中R1選自a)烷基、鏈烯基、烷基環烷基、苯基-(R)m-、萘基-(R)m-其中R是1-8個碳原子的亞烷基及m是等于0或1的整數、環烷基、環烯基、3-吡啶基、4-吡啶基以及不是3-吡啶基和4-吡啶基的雜芳基，該雜芳基具有3-10個原子以及1-4個選自氧、硫和氮的雜原子其中雜芳基是任選由1-3個選自烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、鹵素、硝基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，條件是對此種雜芳基當至少有一個氮原子時，也至少有一個氧和/或硫雜原子；b)式Ⅱ的取代苯基
其中，R是1-8個碳原子的亞烷基，m是等于0或1的整數。Ra和Ra’分別選自氫、羥基、氟和甲基；Rb和Rb’分別是選自氫、烷基、烷氧基、芳基、氰基、環烷基、鹵素、雜芳基、雜環基、硝基、三鹵代甲基、硫代烷氧基、硫代芳氧基、硫代雜芳氧基和-C(O)R4其中R4選自烷基、芳基、烷氧基和芳氧基；及Rc選自氫、烷基、芳基、氰基、鹵素、硝基及Rb和Rc結合生成具有苯環的亞甲基二氧基環；及當Rb和/或Rb’和/或Rc是氟、氯、溴和/或硝基時，則Ra和/或Ra’也可以是氯；及c)在5、6、7和/或8位用1-4個選自烷基、烷氧基、鹵素、氰基、硝基、三鹵代甲基和硫代烷氧基取代的1-或2-萘基-(R)m-，其中R是1-8個碳原子的亞烷基及m是等于0或1的整數；R2選自氫、烷基、苯基、烷基烷氧基、烷基硫代烷氧基；及R3選自-(CH2)nCR10R5R6其中n是等于0、1或2的整數，R5和R6分別選自氫、烷基、鏈烯基、芳基、雜芳基、雜環基、-NR7R8其中R7和R8分別是氫或烷基和-COOR9其中R9是烷基，以及其中R5和R6一起生成環烷基、環烯基、芳基、雜芳基和雜環基，并且當R5和R6不一起生成芳基或雜芳基，則R10選自氫和烷基，條件是當n是0時，R10是氫以及當n大于0時和R5和R6一起生成芳基或雜芳基時，則R10成為該基團中的鍵；X是氧或硫；X’是氫、羥基或氟；X”是氫、羥基或氟，或X’和X”一起生成氧代基，以及所述化合物的藥學上可接受的鹽，其條件是當R1是苯基，R2是-CH(CH3)CH2CH3,X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH3或-CH2CH(CH3)2當R1是苯基，R3是-CH2CH(CH3)2,X是氧，及X’和X”是氫時，則R2不是-CH(CH3)2當R1是吡啶-3-基，R2是乙基，X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH(CH3)2當R1是吲哚并噁嗪-3-基、2,4-二甲基噻唑-5-基、4-甲基-1,2,5-硫代噁二唑-3-基或3,5-二(三氟甲基)苯基，R2是甲基，X是氧，及X’和X”是氫時，則R3不是-CH2CH(CH3)2，和當R1是-CH2-苯基，R3是-CH2CH3,X是氧，及X’和X”是氫時，則R2不是-CH2CH(CH3)2，另外的條件為不包括下列己知化合物N-(苯基乙酰基)甲硫氨酸乙酯。
50．按照權利要求49的化合物，其中R1是未取代苯基。
51．按照權利要求49的化合物，其中R1是選自1-萘基和2-萘基的未取代萘基。
52．按照權利要求49的化合物，其中R1是式Ⅱ的取代苯基。
53．按照權利要求52的化合物，其中所述取代苯基如下定義(a)在2、3或4位具有單一取代的單取代苯基，其中每一具體取代基分別由Ra、Rb和Rc基團支配；(b)在2,3-位、2,4-位、2,5-位、2,6-位、3,4-位、3,5-位或3,6-位具有兩個取代基的二取代苯基，其中這些取代基中的每一個分別由Ra、Ra’、Rb、Rb’和Rc基團支配；及(c)在2,3,4-位、2,3,5-位、2,3,6-位、3,4,5-位和3,4,6-位具有三個取代基的三取代苯基，其中這些取代基中的每一個分別由Ra、Ra’、Rb、Rb’和Rc基團支配。
54．按照權利要求53的化合物，其中所述取代苯基選自4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴代苯基、4-硝基苯基、4-甲基苯基、3-甲氧基苯基、3-硝基苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、3-溴代苯基、3-硫代甲氧基苯基、3-甲基苯基、3-三氟甲基苯基、2-羥基苯基、2-甲基苯基、2-氟苯基、3,4-二氯苯基、3,4-亞甲二氧基苯基、3,5-二氟苯基、3,5-二氯苯基、2,4-二氯苯基和2,5-二氟苯基。
55．按照權利要求49的化合物，其中R1是苯基-(R)m-基團，所述R是1-8個碳原子的亞烷基及m等于1。
56．按照權利要求55的化合物，其中R1選自芐基、3-苯基-正-丙基和4-苯基-正-丁基。
57．按照權利要求49的化合物，其中R1選自烷基、鏈烯基、烷基環烷基、環烷基和環烯基。
58．按照權利要求57的化合物，其中R1是烷基。
59．按照權利要求57的化合物，其中R1是環烷基。
60．按照權利要求57的化合物，其中R1是鏈烯基。
61．按照權利要求57的化合物，其中R1是環烯基。
62．按照權利要求57的化合物，其中R1烷基、環烷基、烷基環烷基、鏈烯基和環烯基選自仲-丁基、環丙基、環丁基、環己基、環戊基、環己-1-烯基、-CH2-環丙基、-CH2-環丁基、-CH2-環己基、-CH2-環戊基、-CH2CH2-環丙基、-CH2CH2-環丁基、-CH2CH2-環己基和-CH2CH2-環戊基。
63．按照權利要求49的化合物，其中R1選自雜芳基和取代雜芳基。
64．按照權利要求63的化合物，其中R1雜芳基和取代雜芳基選自吡啶-3-基、吡啶-4-基、噻吩-2-基、噻吩-3-基、苯并噻唑-4-基、2-苯基苯并噁唑-5-基、呋喃-2-基、苯并呋喃-2-基、苯并噻吩-3-基、2-氯噻吩-5-基、3-甲基異噁唑-5-基、2-(苯基硫代)噻吩-5-基、6-甲氧基噻吩-2-基、3-苯基-1,2,4-硫代噁二唑-5-基和2-苯基噁唑-4-基。
65．按照權利要求49的化合物，其中R2選自1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷基烷氧基、苯基和1-4個碳原子的烷硫基烷氧基。
66．按照權利要求65的化合物，其中R2選自甲基、乙基、正-丙基、異-丙基、正-丁基、異-丁基、苯基和-CH2CH2SCH3。
67．按照權利要求49的化合物，其中X’和X”均為氫及X是氧。
68．按照權利要求67的化合物，其中R3選自甲基、乙基、異-丙基、正-丙基、正-丁基、異-丁基、環戊基、烯丙基、異-丁-2-烯基、3-甲基戊基、-CH2-環丙基、-CH2-環己基、-CH2-(3-四氫呋喃基)、-CH2-噻吩-2-基、-CH2-(1-甲基)環丙基、-CH2-噻吩-3-基、-CH2-C(O)O-叔丁基、-CH2-C(CH3)3、-CH2-CH(CH2CH3)3、-2-甲基環戊基、環己-2-烯基、-CH[CH(CH3)2]COOCH3、-CH2CH2N(CH3)2、-CH2-C(CH3)=CH2、-CH2CH=C(CH3)2等。
69．按照權利要求49的化合物，其中X’和X”均為氫及X是硫。
70．按照權利要求69的化合物，其中R3選自異-丁-2-烯基和異-丁基。
71．按照權利要求49的化合物，其中式Ⅰ化合物選自N-(苯基乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-(3-苯基丙酰基)丙氨酸異-丁酯N-(3-甲基戊酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(4-氯苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3,4-二氯苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-吡啶基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(1-萘基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-萘基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-(4-苯基丁酰基)丙氨酸異-丁酯N-(5-苯基戊酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(4-吡啶基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯2-[(3,4-二氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-甲氧基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-硝基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3,4-亞甲二氧基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(噻吩-3-基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-硝基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-羥基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-萘基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2,4-二氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-溴苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-氯苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(苯并噻唑4-基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-甲基苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(2-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(4-氟苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-溴苯基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-[(3-三氟甲基苯基)乙酰氨基丁酸異-丁酯2-[(2-噻吩基)乙酰氨基]丁酸異-丁酯2-(苯基乙酰氨基)丁酸異-丁酯N-(苯基乙酰基)纈氨酸2-甲基丁酯N-(苯基乙酰基)甲硫氨酸異-丁酯N-(苯基乙酰基)亮氨酸異-丁酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-甲基丁-2-烯基酯N-[(3-氯苯基)乙酰基丙氨酸環丙基甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-噻吩甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸(1-甲基環丙基)甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-噻吩基甲酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-甲基環戊酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-甲基丙-2-烯基酯N-[(3-氯苯基)乙酰基[丙氨酸環己-2-烯基酯N-[(2-苯基苯并噁唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-甲基噻吩基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-4-[(2-呋喃基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(苯并呋喃-2-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(苯并噻吩-3-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-氯-5-噻吩基)乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(3-甲基-異噁唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-苯硫基噻吩基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(6-甲氧基苯并噻吩-2-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-苯基-1,2,4-噻二唑-5-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2-苯基噁唑-4-基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-甲基苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(2,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-噻吩基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(4-甲基苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-(苯基乙酰基)丙氨酸(1-甲氧基羰基)異-丁酯N-[(3-硝基苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3,5-二氟苯基)乙酰基]丙氨酸乙酯N-[(3-硝基苯基)乙酰基]甲硫氨酸乙酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸2-(N,N-二甲基氨基)乙酯2-[(3,5-二氯苯基)乙酰氨基]己酸甲酯N-[(3,5-二氯苯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-(環己基乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-(環戊基乙酰基)丙氨酸異-丁酯N-[(環己-1-烯基)乙酰基]丙氨酸異-丁酯N-[(3-氯苯基)乙酰基]丙氨酸3-甲基丁-2-烯基硫代酯N-[(2-苯基)-2-氟乙酰基]丙氨酸乙酯N-(3,5-二氟苯基乙酰基)苯基甘氨酸甲酯N-(3,5-二氟苯基乙酰基)苯基甘氨酸異-丁酯N-(環戊基乙酰基)苯基甘氨酸甲酯N-(環戊基乙酰基)丙氨酸甲酯N-(環丙基乙酰基)苯基甘氨酸甲酯N-(環丙基乙酰基)丙氨酸甲酯；及N-[(3-硝基苯基)乙酰基]甲硫氨酸異-丁酯。
全文摘要
公開可抑制β－淀粉樣肽釋放和/或其合成的化合物，并且因此具有治療阿爾茨海默氏病的用途。也公開包括抑制β－淀粉樣肽釋放和/或其合成的化合物的藥用組合物以及用此種藥用組合物預防性和治療性地用于治療阿爾茨海默氏病的方法。
文檔編號C07D317/60GK1237960SQ97199775
公開日1999年12月8日 申請日期1997年11月20日 優先權日1996年11月22日
發明者J·吳, E·D·托爾瑟特, J·S·尼森, T·E·馬布賴, L·H·拉蒂默, V·約翰, L·Y·方, J·E·奧迪爾 申請人:伊蘭藥品公司, 伊萊利利公司