初乳肽及其用途的制作方法

專利名稱：初乳肽及其用途的制作方法
技術領域：
本發明涉及初乳肽(colostrinin)及其作為藥物的用途。
初乳是由雌性哺乳動物乳房在分娩后最初數天內產出的黃色粘稠液體。分娩4至5天后它將被成熟母乳替代。與成熟母乳相比，初乳含糖較低。然而，初乳中卻含有豐富的脂類、蛋白質、無機鹽、維生素和免疫球蛋白。并且它還含有多種飄浮細胞，例如粒細胞、基質細胞、嗜中性白細胞、單核細胞、巨噬細胞、淋巴細胞，以及生長因子、激素和細胞因子。
已從哺乳動物初乳中分離并定性了多種因子。1974年，Janusz等人(FEBS Lett.,49,276-279)從綿羊初乳中分離出一種高脯氨酸含量的多肽(PRP)。該參考文獻的內容在此引入作為參考。業已發現，除綿羊以外的哺乳動物都以PRP的類似物作為初乳的組分。PRP也因此稱作初乳肽，并且被暫定成一類新的細胞因子。
Janusz等人在“高脯氨酸含量的多肽(PRP)-綿羊初乳中的一種免疫調制肽”(Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis,1993,41,275-279)中指出，綿羊初乳的PRP對小鼠具有親免活性。然而，該文獻卻沒有報導PRP對其他動物有任何治療作用。事實上應承認，從一種對小鼠有治療作用的組合物并不能預見到它也對其他任何動物有治療作用。
本申請人發現，初乳肽具有許多前所未知的治療功效。具體而言，我們發現初乳肽可顯現出親免作用和精神病治療作用。
作為本發明的一個方面，本申請人提供了用作藥物的初乳肽。所述初乳肽可作為藥物用于非嚙齒動物；我們還發現，所述初乳肽特別適合作為治療人類的藥物。
另一方面，本發明提供了初乳肽在制備治療中樞神經系統疾病或免疫系統疾病用藥物中的應用。
在本發明的一個優選實施例中，所述初乳肽被用來治療中樞神經系統的疾病，尤其是中樞神經系統的慢性疾病。可以用初乳肽治療的中樞神經系統病包括神經病和精神病。
適合用初乳肽治療的神經病的例子包括癡呆，誘發癡呆的疾病，例如神經變性疾病。神經變性疾病包括，例如老年性癡呆和運動神經元病；帕金森氏病是一個可用初乳肽治療的運動神經元疾病的實例。現已發現，初乳肽在治療稱作早老性癡呆的神經變性疾病中特別有效。
適合用初乳肽治療的精神病的例子包括精神病和神經官能癥。例如，可用初乳肽治療情緒紊亂，特別是治療處于抑郁狀態的精神病患者的情緒紊亂-已發現初乳肽幫助患者改善感覺安寧和心境安定。初乳肽還可以在藥物癖嗜者、解毒期以后以及興奮劑依賴性人群中用作輔助性戒除治療劑。
在本發明的另一個優選實施例中，所述初乳肽被用于治療免疫系統的疾病，尤其是慢性免疫系統疾病。因此我們發現，可在需要免疫調節的疾病治療中采用所述初乳肽。特別是，初乳肽適合治療包括人類在內的非嚙齒動物的上述疾病。初乳肽在治療許多基于免疫和感染的疾病中十分有效。例如，用初乳肽治療與細菌病原和病毒病原有關的慢性疾病，還可以治療繼發的，例如腫瘤化療和放療繼發的獲得性免疫缺損。本發明特別適合治療需要非特異性免疫刺激和免疫校正的細菌性和病毒性慢性傳染病。
通常，慢性病是一種持續時間較長的疾病，常常至少一周，更常見至少一個月，并且經常是至少3個月或至少6個月。
本發明的特征之一是用初乳肽改善新生兒免疫系統的發育。本發明的另一特征在于用初乳肽校正兒童的免疫缺乏。所述初乳肽的這些用途特別適合未曾獲得初乳的嬰兒或兒童。而這種情況發生在，例如，出生后沒有母乳喂養的嬰兒和兒童中；在給這些嬰兒和兒童的人工食物中不含有初乳肽。
本發明的另一方面中，我們提供了初乳肽作為食品強化劑的用途。所述初乳肽特別適合用作嬰兒和幼童的食品強化劑，以校正其免疫系統發育中的缺乏。正如上文所述，這種缺乏發生在出生后未母乳喂養的嬰兒和兒童中。所述初乳肽也可以作為接受化療或患有惡病質或因慢性病而體重減輕的成人的食品強化劑。作為本發明的一個方面，我們提供了一種含有與生理可接受載體合用的口服可攝取初乳肽結合物的食品強化劑。該食品強化劑是液體或固體的形式；也適于將其以片劑形式供給。
本發明中可預防性給予所述初乳肽，以便有助于預防中樞神經系統疾病和免疫系統疾病的發展。
本發明上述初乳肽可以是綿羊初乳肽，或者是非綿羊產的初乳肽。非綿羊產的初乳肽可以從，例如人、母牛、馬、山羊、豬、牦牛、美洲駝和驢的初乳中獲得。初乳肽通常存在于上述動物分娩后1至4天后的初乳中。
此處的術語“初乳肽”是指一種從哺乳動物初乳中獲得的天然形式的多肽。有時初乳肽也稱作“colostrinine”，并且具有下列性質(ⅰ)分子量在16,000至26,000道爾頓之間；(ⅱ)它是亞單位的二聚體或三聚體，各亞單位的分子量是5,000至10,000道爾頓，優選6,000道爾頓；(ⅲ)它含有脯氨酸，并且脯氨酸的含量高于其他任何一種氨基酸的量。
我們發現，所述初乳肽以及組成它的亞單位都是非極性的。
在SDS(十二烷基硫酸鈉)存在下采用電泳法可對所述初乳肽的分子量進行測定；這種技術也可顯示出存在的二聚體和三聚體。還原或非還原條件的電泳皆表明，亞單位之間的鍵是非共價鍵。通過常規的氨基酸分析技術可以確定存在的脯氨酸。非極性色譜可能夠證實初乳肽的非極性。
本發明所用初乳肽可以是綿羊初乳肽或非綿羊初乳肽。綿羊初乳肽的分子量約為18,000道爾頓，并且由三個非共價鍵合亞單位組成，每個亞單位的分子量分別是約6,000道爾頓，其中含有22％重量的脯氨酸。每個亞單位的氨基酸組成由數量如下的殘基構成賴氨酸-2、組氨酸-1、精氨酸-0、天門冬氨酸-2、蘇氨酸-4、絲氨酸-3、谷氨酸-6、脯氨酸-11、甘氨酸-2、丙氨酸-0、纈氨酸-5、蛋氨酸-2、異亮氨酸-2、亮氨酸-6、酪氨酸-1、苯丙氨酸-3和半胱氨酸-0。
如上所述，天然形式的初乳肽來源于哺乳動物的初乳。通過除去初乳中的脂類和多數蛋白質可以獲取哺乳動物初乳的初乳肽。廣義上，初乳肽是從例如大型畜牧動物的初乳中通過柱色譜技術和其他生物技術獲得，或者通過基因工程技術來制得。
具體而言，可以通過下列步驟從哺乳動物初乳中分離出初乳肽(ⅰ)脫脂，例如通過離心法；(ⅱ)去除蛋白質(例如酪蛋白)，例如通過降低pH；(ⅲ)分離出與免疫球蛋白鍵合的初乳肽，例如通過(a)對脫脂和除蛋白后的乳清進行離子交換色譜；和(b)用磷酸鹽緩沖鹽水洗脫，并收集含有與免疫球蛋白，例如綿羊的IgG2鍵合的初乳肽的餾分；(ⅳ)從免疫球蛋白上分離初乳肽，例如采用篩分色譜法；和(ⅴ)提純初乳肽，優選通過(a)將分子量低于30,000道爾頓的部分進行脫鹽；和(b)為免疫球蛋白引入抗體，由此除去此類蛋白質，得到終產物。
盡管上述定義是指天然的哺乳動物初乳肽，但此處的術語“初乳肽”也包括其生物活性基本相同的類似物和片斷，以及通過DNA重組技術生產的哺乳動物初乳肽、其類似物或片斷。此處的初乳肽還包括通過多肽合成技術制備的、組成與天然初乳肽基本相同的生物活性多肽。
本發明另一方面提供了一種用初乳肽治療中樞神經系統疾病或免疫系統疾病的方法。上文已對適合用本發明所述方法治療的疾病作了描述。在本發明一個優選實施例中，患者接受初乳肽的第一階段給藥，該第一階段中每天給予約1至2個治療單位，隨后是沒有初乳肽給藥的第二階段。所述第一階段優選是約2至4周，更優選約3周；并且，第二階段優選約2至5周，更優選約4周。優選至少重復一次這種治療循環，并且更優選重復不止一次。
本發明方法中所用的治療單位優選25至1,000微克，更優選50至100微克的初乳肽。
可以將初乳肽制成適當的形式來給藥。例如，制成口服、直腸或非腸道給藥的形式。具體而言，可將初乳肽配制成注射劑給藥，或者優選配制成適合通過口腔/鼻咽腔粘膜、食道或其他粘膜表面吸收的形式給藥。所述口服制劑可以是適于吞咽的形式；或優選溶于唾液的形式，這種制劑是在口腔/鼻咽腔粘膜內吸收。所述口服制劑也可以是口服給藥的片劑、糖錠(即適合留在口腔內含服的甜片)、可咀嚼成口膠的粘性凝膠。還可將所述初乳肽配制成膠用粘性硬膏或貼劑。所述初乳肽還可以是涂敷在生殖泌尿器官粘膜上的制劑。
當然，盡管能夠以完整初乳的形式給予所述初乳肽，但這并不可取，因為完整的初乳具有不適的味道并且難以儲存。
本發明所用初乳肽可以來源于任何哺乳動物，例如取自人類或動物，例如母牛、馬、山羊、豬、牦牛、綿羊、美洲駝或驢、駱駝等。
對綿羊初乳肽和人初乳肽進行試驗。綿羊的初乳肽以ColostrininTM的商標出售。
在動物試驗中發現，初乳肽的特征是其體內外親免作用，這種親免作用是基于對胸腺細胞向活性T細胞分化和成熟的發展的調節性質，基于對免疫反應的刺激或抑制作用，并且基于對胸腺細胞上多種表面標記的表達的誘導作用。在對小鼠腹膜內給藥中，初乳肽可抑制NZB系小鼠溶血性貧血的發展，也抑制小鼠肉瘤180的生長，并且對于受到γ射線照射的小鼠，初乳肽可以保護該動物對抗放射病。小鼠的毒理學試驗表明，口服和非腸道給藥后毒性極低，這是由于LD50高于1.25g/kg體重。初乳肽還表現出對人和試驗動物中免疫活性細胞的生長、成熟和分化的刺激能力。在人外周血液的淋巴細胞培養物(包括從臍帶血中分離出的淋巴細胞的培養物)中，初乳肽的特征在于它可刺激細胞因子，特別是γ-干擾素(IFN-γ)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、白介素類(例如IL-6和IL-10)以及多種生長因子的產生。通過已知方法可以定量測定所生產的細胞因子。
在自然狀況下，分娩后1至4天內，人的初乳和所有哺乳動物，尤其是大型畜牧動物(例如母牛、馬、山羊、豬、牦牛、綿羊、美洲駝或驢、駱駝等)的初乳中都存在具有該生化活性的綿羊初乳肽類似物。初乳肽在新生動物吸吮和吞咽母體初乳的過程中進入到體內。由于初乳肽分子量較低，初乳肽可以在口腔/鼻咽腔粘膜上通過細胞受體起作用，甚至進行簡單擴散(ordinary diffusion)。研究表明，由于消化道上段的粘膜和上皮含有某些免疫調制劑的受體，所述初乳肽可以以片劑和舌下含片、吞咽用片劑和膠囊、粘性凝膠形式以及與樹膠固定在一起的粘性硬膏形式來給藥。也可以將初乳肽涂敷在生殖泌尿器官的粘膜上。
以弄清初乳肽所誘導的生化活性為目的的科學試驗還揭示了，來源于產后1至7天婦女的人類初乳具有類似生物活性。人體原料中初乳肽的分離方法類似于從畜牧動物的初乳，尤其是綿羊初乳中獲取初乳肽的方法。由產后1至7天婦女乳腺分泌的初乳含有多肽類的初乳肽，它的量取決于泌乳作用，并且在2至3天內最佳，此時1升初乳中可檢測出300mg初乳肽。這樣的人初乳肽產量可見于綿羊初乳中。現已證明，人初乳肽具有許多與例如綿羊產類似物相似的生物性質。來源于人初乳的初乳肽可刺激初乳所含淋巴細胞以及臍血淋巴細胞分泌細胞因子，所述細胞因子主要包括干擾素(IFN-γ)、腫瘤壞死因子TNF-α、白介素類(IL-10和IL-6)或其它細胞因子。這些細胞因子參與體液和細胞的免疫反應。
采用公開在波蘭專利(PL 170592B1)和歐洲專利EP-B-0609225中的性能試驗免疫學方法，可對人和動物來源的初乳肽的生物活性進行測定。
在對人類志愿者的研究中發現，用至少含有25μg初乳肽的含片以每天至少一片的劑量給藥約3周后，沒有觀察到任何副作用；另一方面，卻形成一種對誘導IFN-γ以及部分腫瘤壞死因子TNF-α的低反應狀態。在停止初乳肽給藥后，這種低反應性狀態將恢復正常。這些反應的結果是Th1和Th2淋巴細胞和輔助細胞產生細胞因子。
臨床試驗還表明，初乳肽具有免疫調節作用以及對中樞神經系統的作用，它可以預防性和治療性地應用于下列疾病，例如，用于預防早老性癡呆的出現和進行，并緩解這種疾病；也可應用于一些其它起因的老年性癡呆，并可治療與免疫和感染有關的慢性疾病。
可用具有下列組成和氨基酸序列的、縮寫為NP的九肽取代初乳肽Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro。通過糜蛋白酶的消化作用和柱色譜的分離，可從初乳肽中獲取NP，或者通過化學合成法來制得NP。NP是初乳肽有效片段的一個例子。現已發現，NP具有與初乳肽相似的生物作用，特別是，它適合治療上述慢性免疫疾病和中樞神經系統疾病(尤其是早老性癡呆)。可以用NP治療上述任何一種疾病。也可以將它應用于食品強化劑中。可以按照與初乳肽相同的方法來配制它。NP適合治療哺乳動物，尤其是人類。
為了更全面地理解本發明，可以參考下列僅作說明作用的實施例。實施例1分子量18,000道爾頓的綿羊初乳肽是由三個非共價連接的亞單位構成，亞單位的分子量為6000道爾頓，各亞單位具有下列氨基酸組成<
>
所用初乳肽來源于在綿羊分娩至多24小時后泌乳開始后的綿羊初乳。將原料在35000×g離心，以便除去脂肪及部分酪蛋白。將所得部分的1g置于DEAE-纖維素柱中，從而分離出與免疫球蛋白IgG2絡合的多肽初乳肽，利用葡聚糖膠凝G-100柱色譜法以及用葡聚糖凝膠G-75再次進行的色譜，可從柱中洗脫出與IgG2分離的初乳肽。隨后，將一部分多肽通過結合有綿羊IgG2抗體的瓊脂糖膠凝柱，以除去痕量的IgG2雜質。所得制備物通過葡聚糖膠凝G-25的方式脫鹽并冷凍干燥，此后將其儲存在+4℃或-20℃下。
所得初乳肽的商標名被命名為ColostrininTM。
在有SDS存在的聚丙烯酰胺凝膠電泳中，在與分子量5800道爾頓相對應處可以觀察到一個強帶，同時還出現兩個弱帶，它們分別與分子量12400道爾頓和18200道爾頓相對應。實施例Ⅱ從實施例1所述初乳肽中可以得到九肽NP,NP的組成和氨基酸序列為Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro。
通過10個活性單位的蛋白水解酶糜蛋白酶在30℃的溫度下對50mg初乳肽進行20小時的消化。對消化產物的分離應通過至少一個循環的葡聚糖凝膠G-10柱色譜。凍干所得制備物，隨后儲存在+4℃或-20℃的溫度下。通過測定N-末端氨基酸對九肽進行分離。實施例Ⅲ吸吮片形式的劑量單位具有下列組成活性成分 實施例1所得的Colostrinin多肽 0.0001g穩定劑 白蛋白，無雜質，主要I.P.S 0.000135g潤滑劑/粘合劑硬脂酸鎂 0.003g載體 甘露糖醇0.1g(0.1497g)將上述組分懸浮在0.0001M NaCl中。吸吮片主要用于治療早期和晚期癡呆癥(包括早老性癡呆)以及不同時期的老年性癡呆；還可以治療慢性細菌性及病毒性感染、所需的非特異性免疫刺激和免疫校正以及由多種試劑誘發的獲得性免疫缺乏。此外，也可用它治療情緒紊亂，特別是治療不同抑郁狀態的精神病患者，從而改善他們的全身安全感和心境穩定性；初乳肽還可以在藥物癖嗜者、解毒期以后以及興奮劑依賴性人群中用作輔助性戒除治療劑。ColostrininTM也可以作為人工食品來校正新生兒和幼童的營養缺乏。實施例Ⅳ制備具有下列組成的粘膜涂敷用凝膠形式活性成分實施例1所得ColostrininTM多肽穩定劑 白蛋白膠凝載體Orabase-Plain，它含有果膠、膠凝、羧甲基纖維素鈉和碳氫化合物膠每1ml凝膠載體使用0.0003g多肽ColostrininTM和0.0015g白蛋白。如此配制的劑量單位主要用于口腔和上呼吸道細菌性及病毒性感染的循環治療。實施例Ⅴ肌肉內、皮下或靜脈內注射形式的制劑。活性成分實施例1所得ColostrininTM多肽穩定劑 人白蛋白，無雜質膠凝載體滅菌的無熱原水每1ml安瓿中使用0.0003g ColostrininTM多肽、0.0015g白蛋白、作為抗菌劑的0.001％硫柳汞(即乙汞硫代水楊酸鈉鹽)。這種劑量單位主要用于細菌性和病毒性感染的循環治療。實施例Ⅵ肌肉內、皮下或靜脈內注射形式的制劑。活性成分實施例Ⅱ所得NP穩定劑 白蛋白，無雜質膠凝載體滅菌的無熱原水每1ml安瓿中使用0.0003gNP、0.0015g白蛋白、作為抗菌劑的0.001％硫柳汞(即乙汞硫代水楊酸鈉鹽)。這種劑量單位主要用于細菌性和病毒性感染的循環治療。實施例Ⅶ按照下列方法從接受實施例Ⅲ所述藥物形式循環治療的健康和患病志愿者中采集血液，分析血中多肽ColostrininTM對體外細胞因子的誘導作用。
將不含防腐劑但每1ml含有10個單位肝素的全血以1∶10的配比稀釋在RPMI1640培養基中。在37℃和含有5％二氧化碳的條件下于相同培養基中孵育20小時，孵育所用培養基不含有誘導物(陰性對照)，或者含有1至100μg/ml多肽ColostrininTM，或含有2μg/ml血的植物凝集素(PHA)和2μg/ml血的脂多糖(LPS)。含有PHA和LPS的混合物的樣品作為陽性對照物，原因在于它們可以刺激最高量的細胞因子。表1和2中列出了試驗結果。結果表明，ColostrininTM在1至100μg/ml的濃度下以劑量依賴方式刺激細胞因子的產生。與陰性對照物(不含誘導物)比較，這些結果有統計學意義(p＜0.0001)。早老性癡呆患者的IFN生產能力降低，并且TNF的也較小程度地降低。
表1綿羊ColostrininTM(系列A 1993)在健康志愿者或早老性癡呆患者的全血淋巴細胞培養物中的細胞因子誘導作用
健康志愿者組(22人)的年齡各不相同(年齡在20至64歲間)。早老性患者組(50人)年齡也不相同(年齡63±7.5歲)。盡管不含(無)誘導物的空白對照組之間的標準偏差(±SD)差異性較大，但ColostrininTM有統計學意義(p＜0.001)。
表2綿羊ColostrininTM(A系列1993)在用健康志愿者和多種疾病患者全血進行的試驗中對干擾素(IFN)生產的刺激例
<p>附注對存在的IFN進行的生物試驗可以測出不同類型干擾素的含量，而ELISA試驗僅檢測免疫活性IFN-γ的水平。實施例Ⅷ從Wroclaw的地區專業醫院的婦產科獲得臍帶血。在產后4至6小時獲取的臍帶血的淋巴細胞中，ColostrininTM通過下列途徑體外有效誘導細胞因子。
用每100ml含有5.7g Ficoll 400和9.0g泛影酸鈉的Ficoll-Paque梯度物分離淋巴細胞。以每1ml培養基2×106個淋巴細胞的密度將分離的淋巴細胞懸浮在RPMI-1640培養基中。向該淋巴細胞懸浮液中加入濃度為1至20μg/ml的ColostrininTM或10μg/ml植物凝集素。將該培養物在37℃下孵育20小時。隨后通過生物學方法對培養液中細胞因子的水平進行檢測。表3中給出了一個典型實例。1至100μg/ml濃度的ColostrininTM所具有的細胞因子(IFN和TNF)刺激作用與傳統IFN-γ誘導物一植物凝集素的相類似。
表3ColostrininTM(A系列1996)在臍帶血淋巴細胞培養物(CBL)中的細胞因子誘導作用
N-被檢測CBL樣品數學生t-檢驗中，ColostrininTM的顯著性差異幾率(p)-IFN和TNF中所用的“無”是p＜0.0001。
由于臍帶血中富含未成熟干細胞，而這種細胞能夠繁殖成造血細胞和多種免疫活性細胞，所以ColostrininTM極大地加快了干細胞的成熟。結果還表明，ColostrininTM可以有效治療不同類型的免疫缺陷，也可以在例如外傷、感染、化療和放療后用于刺激造血系統。在生物醫學研究中，具有類似作用的天然產物很罕見。實施例Ⅸ對一組患有早期和中期早老性癡呆癥的志愿者進行中樞神經系統疾病療法的試驗。所用劑量單位以吸吮片形式在兩餐之間給藥，該劑量單位含有0.00015實施例Ⅰ和Ⅲ所述的ColostrininTM。首先，每天使用一片并持續3周，隨后中止治療達2至4周，此后再次進行治療并且每天服用2片且持續3周。發現ColostrininTM療法可誘導一種低反應性或耐受的狀態。這表明沒有合成IFN及腫瘤壞死因子TNF-α的能力。可以用這種現象對活性劑的功效進行定量測定。
在中止上述藥物的給藥后，這種耐受狀態也發生自發性逆轉。ColostrininTM的這種暫時性耐受狀態歸因于由Th1和Th2淋巴細胞、輔助細胞所產生的細胞因子，所述輔助細胞例如是單核細胞、巨噬細胞、樹狀細胞、內皮細胞及其產物。其結果是，可在早老性癡呆患者中觀察到人際關系的改善和心境高漲。
附

圖1圖示了女性早老性癡呆患者(J.M)中的對于γ-干擾素(IFN-γ)誘導作用的低反應性狀態部分耐受的出現以及自然消失，這些患者每隔一天服用100μg的ColostrininTM片劑并持續3周。隨后將治療中止3周(在暫定期間，對誘導物的耐受性恢復正常)。每周采集血樣以用于檢測ColostrininTM和空白對照(PHA-10μg/ml)的IFN-γ刺激作用。上文部分已描述了進行細胞因子誘導試驗及其定量測定的方法。
被誘導IFN-γ水平的檢測結果表明，低反應性早在服用ColostrininTM(每2天100μg/片)的第一周即出現并在治療的第三周達到最高值。在中止治療的3周內(即治療開始后第6周內)，對IFN-γ誘導作用的耐受狀態發生自發性逆轉。并且，該附圖表示，“特別是”綿羊ColostrininTM(OvCal)，這種低反應性在觀察的第6周仍能夠維持，而PHA低反應性卻完全消失。實施例Ⅹ對一組患有早期早老性癡呆癥的志愿者進行中樞神經系統疾病療法的試驗。所用劑量單位以吸吮片形式在兩餐之間給藥，該劑量單位含有0.00015實施例Ⅱ所述NP。首先，每天使用一片并持續3周，隨后中止治療達3周，此后再次進行治療并且每天服用2片且持續3周。發現NP療法可誘導一種低反應性或耐受的狀態。這表明沒有合成IFN及腫瘤壞死因子TNF-α的能力。可以用這種現象對活性劑的功效進行定量測定。
在中止上述藥物的給藥后，這種耐受狀態發生自發性逆轉。NP的這種暫時性耐受狀態歸因于由Th1和Th2淋巴細胞、輔助細胞所產生的細胞因子，所述助細胞例如是單核細胞、巨噬細胞、樹狀細胞、內皮細胞及其產物。其結果是，可在早老性癡呆患者中觀察到人際關系的改善和心境高漲。
權利要求
1．用作藥物的初乳肽。
2．作為人用藥物的初乳肽。
3．用于治療中樞神經系統慢性疾病的初乳肽。
4．根據權利要求3所述的初乳肽，是用于治療神經病和/或精神病的初乳肽。
5．根據權利要求3所述的初乳肽，是用于治療癡呆和/或神經變性疾病的初乳肽。
6．根據權利要求3所述的初乳肽，是用于治療早老性癡呆和/運動神經元疾病的初乳肽。
7．根據權利要求3的初乳肽，是用于治療精神病和/或神經官能癥的初乳肽。
8．用于治療慢性免疫系統疾病的初乳肽。
9．用于治療人的慢性免疫系統疾病的初乳肽。
10．根據權利要求8或9所述的初乳肽，是用于治療與細菌性和病毒性病原有關的疾病和/或治療獲得性免疫缺損的初乳肽。
11．根據權利要求8、9或10的初乳肽，是用于治療慢性細菌性和/或病毒性感染的初乳肽。
12．根據上述權利要求任一項所述的初乳肽，其中該初乳肽來自非綿羊來源。
13．初乳肽在制備用于治療慢性中樞神經系統疾病的藥物中的應用。
14．根據權利要求13所述的應用，其中所述藥物用于治療神經病和/或精神病。
15．根據權利要求14所述的應用，其中所述藥物用于治療癡呆和/或神經變性疾病。
16．根據權利要求14所述的應用，其中所述藥物用于治療早老性疾病和/或運動神經元疾病。
17．根據權利要求14所述的應用，其中所述藥物用于治療精神病和/或神經病。
18．初乳肽在制備用于治療慢性免疫系統疾病的藥物中的應用。
19．初乳肽在制備用于治療人的慢性免疫系統疾病的藥物中的應用。
20．根據權利要求18或19的應用，用于治療與細菌性和病毒性病原有關的疾病和/或治療獲得性免疫缺損。
21．根據權利要求18、19或20的應用，所述藥物用于治療慢性細菌性和/或病毒性感染。
22．根據權利要求18至21任一項所述的應用，其中該初乳肽來自非綿羊來源。
23．一種利用初乳肽治療中樞神經系統和/或免疫系統疾病的方法。
24．一種治療中樞神經系統和/或免疫系統疾病的方法，該方法包括給患者在預定時期內施用含有預定量初乳肽的組合物。
25．根據權利要求24的方法，其中所述患者是病人。
26．根據權利要求23、24或25任一項所述的應用，其中該初乳肽來自非綿羊來源。
27．根據權利要求23至26任一項所述的方法，其中包括，所述初乳肽的預定量是在約25至2000微克內。
28．根據權利要求27的方法，該方法包括一個循環，循環的第一階段每天給患者施用25至2000微克初乳肽，隨后是沒有初乳肽給藥的第二階段。
29．根據權利要求28的方法，其中所述第一階段是約2至4周間，并且所述第二階段是在約2至5周。
30．根據權利要求28或29的方法，其中所述循環至少重復一次。
31．一種藥物組合物，該藥物組合物含有預選量的與生理可接受載體結合的初乳肽。
32．根據權利要求31所述的組合物，其中所述初乳肽是非綿羊的初乳肽。
33．根據權利要求31或32的組合物，該組合物是適合注射的形式。
35．根據權利要求31或32所述的組合物，該組合物是適合通過口腔/鼻咽腔粘膜吸收的形式和/或適合食道吸收的形式。
36．根據權利要求31至34任一項所述的組合物，該組合物是片劑、錠劑、凝膠、貼劑或硬膏。
36．根據權利要求31至35任一項所述的組合物，該組合物含有25至1000微克的初乳肽。
37．根據權利要求31至35任一項所述的組合物，該組合物含有50至100微克的初乳肽。
39．初乳肽作為食品強化劑的用途。
40．初乳肽作為嬰兒、幼兒、接受化療的成人和/或患有惡質病或因慢性疾病體重減輕的成人的食品強化劑。
41．一種食品強化劑，其中含有與生理可接受載體結合的口服可攝取的初乳肽。
42．用于刺激和/或調節哺乳動物免疫系統的初乳肽。
43．用于刺激和/或調節人免疫系統的初乳肽。
44．初乳肽在制備用于刺激和/或調節哺乳動物免疫系統的藥物中的應用。
44．初乳肽在制備用于刺激和/或調節人免疫系統的藥物中的應用。
45．用作預防性藥物的初乳肽。
46．用作人用預防性藥物的初乳肽，所述藥物可預防或抑制早老性癡呆的發展。
47．初乳肽在制備人用預防性藥物中的應用，所述藥物用于預防或抑制早老性癡呆的發展。
48．一種從哺乳動物初乳中制備初乳肽的方法，該方法包括(1)除去初乳中的脂和大部分蛋白質；(2)從初乳中分離出與免疫球蛋白鍵合的初乳肽；和(3)分離初乳肽和免疫球蛋白，并提純初乳肽。
49．根據權利要求48所述的方法，其中在步驟(1)中通過離心脫脂，通過降低pH值除去蛋白質；在(2)中通過對已除去脂類和蛋白質的產物進行離子交換色譜、用磷酸鹽緩沖鹽水洗脫并收集含有與免疫球蛋白鍵合的初乳肽，從而分離出初乳中的與免疫球蛋白鍵合的初乳肽；和在步驟(3)中包括，通過篩分色譜將免疫球蛋白與初乳肽分離，并且初乳肽的提純是通過將分子量在30,000道爾頓以下的部分脫鹽，并引入免疫球蛋白的抗體以除去此類蛋白質，從而得到終產物。
50．一種制備藥物組合物的方法，其中包括將初乳肽與生理可接受載體混合，并且將所得混合物成形為適合患者給藥的形式。
51．一種用作藥物的九肽，該九肽的組成和氨基酸序列如下Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro。
52．組成和氨基酸序列是Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro的九肽在制備治療人的慢性免疫系統疾病的藥物中的應用。
53．組成和氨基酸序列是Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro的九肽在制備治療慢性中樞神經系統疾病的藥物中的應用。
54．一種藥物組合物，該組合物含有與生理可接受載體結合的、組成和氨基酸序列為Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro的九肽。
55．一種制備藥物組合物的方法，其中包括將組成和氨基酸序列為Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro的九肽與生理可接受載體混合，并且將所得混合物成形為適合患者給藥的形式。
全文摘要
初乳肽作為藥物，特別是治療慢性中樞神經系統和免疫系統疾病的藥物的應用。
文檔編號C07K14/47GK1238782SQ9719853
公開日1999年12月15日 申請日期1997年3月10日 優先權日1996年10月3日
發明者馬林·雅努什, 約瑟夫·利索夫斯基, 安娜·杜博夫斯卡－因格洛特 申請人:波蘭科學院路德維克·希爾斯費爾德免疫學和實驗治療學研究所, 喬治亞季斯生物技術有限公司