專利名稱：非肽g－csf模擬物的制作方法
背景技術：
粒細胞集落刺激因子(G-CSF)是最初通過由其在體外刺激骨髓原質(progenitor)中主要的嗜中性粒細胞的生存、增生和分化的能力證實的、由巨噬細胞、成纖維細胞以及內皮細胞分泌的蛋白糖[Nicola,N.A.,Annu.Rev.Biochem.(1989)58:45]。動物及臨床研究證實了G-CSF在體內調整粒細胞生成的能力，該研究證明作為對所給予的重組G-CSF的應答，循環的嗜中性粒細胞水平可逆性增高[Gabrilove,J.L.等，N.Engl.J.Med.(1988)318:1414]。G-CSF對成熟中性白細胞具有多效性影響，可增加其存活及刺激功能的活性，包括對中性白細胞堿性磷酸酶(Sato.N.等，J.Cell.Physiol.(1988)37:272)及對高親和力IgA Fc受體(Weisbart.R.H.等，Nature(Lond.)(1988)332:647)的誘導、引發呼吸爆發(Nathan,C.F.Blood(1989)73:301)及增加的趨化性(Wang.J.M.Blood(1988)72:1456)。也在不屬于粒細胞譜系的造血細胞上發現了G-CSF的作用，如對某些骨髓白血病的細胞體外單核細胞分化增生的刺激(Geissler,K.J.Immunol.(1989)143:140)以及對某些多能造血前體的體外增生的刺激(Ferrero,D.,Blood(1989)73:402)。
對由各種原因引起的中性白細胞減少癥的患者給予重組G-CSF，結果表明G-CSF在化療及骨髓移植上是一有益的輔助治療劑(Morstyn.G等，Trends Pharmacol.Sci.10(1989)154-159)。G-CSF活性還與從骨髓到外周血液的造血干細胞轉移有關。(見綜述文章，Good Review文章Haylock等，Blood89:2233-2258,1997)。
需要提供能治療白細胞減少癥的化合物以便通過G-CSF模擬物(mimetics)的作用來增加白細胞產生。
如此所述，意外地發現了某些非肽化合物具有G-CSF模擬物作用。
如此所述，意外地發現了某些選擇的2,5-二亞氨基-3a,6a-二芳基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑具有G-CSF模擬物作用。
本發明概要本發明涉及式(Ⅰ)化合物以及其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和酯:
其中R1、R2、R3和R4獨立為芳基，芳環為C3-C12環或多環芳環時，任選含有一或多個雜原子，條件是當C為3時，芳環含有至少2個雜原子，而當C為4時，芳環含有至少1個雜原子，而且任選由一或多個選自下列的取代基取代C(O)NR6R7及NR6R7、芳氧基、環烷基、取代的環烷基、烷基、C6-C12芳基、烷氧基、酰氧基、取代的C6-C12芳基、氨基、N-酰氨基、硝基、氰基、鹵素、羥基、-C(O)OR6、-S(O)nR5、被保護的-OH以及由一或多個選自下列的取代基取代的烷基烷氧基、酰氧基、C6-C12芳基、取代的C6-C12芳基、氨基、N-酰氨基、氧代、羥基、環烷基、取代的環烷基、-C(O)OR6、-S(O)nR7、芳氧基、硝基、氰基、鹵素和被保護的-OH，其中R6為氫或烷基，n為0-2，
R7為氫或烷基，和R5為氫、環烷基、C6-C12芳基、取代的環烷基、取代的C6-C12芳基、烷基或由一或多個選自下列的取代基取代的烷基烷氧基、酰氧基、芳氧基、氨基、N-乙酰氨基、氧代、羥基、-C(O)OR6、-S(O)nR7、硝基、氰基、環烷基、取代的環烷基、鹵素、C6-C12芳基、取代的C6-C12芳基及被保護的-OH其中R6為氫或烷基，n為0-2而R7為氫或烷基。
本發明還涉及發現式(Ⅰ)化合物具有G-CSF模擬物活性。
本發明還涉及治療哺乳動物包括人類的白細胞減少癥，其包括化療引起的白細胞減少癥及骨髓移植，以及外周血液干細胞轉移和其它白細胞產生降低的癥狀的方法，該方法包括給所需的接受者一有效劑量的本發明的G-CSF模擬化合物。
本發明還涉及治療哺乳動物包括人類的細菌和真菌感染的方法，其包括給所需的接受者一有效劑量的本發明的G-CSF模擬化合物。
本發明的另一方面提供了用于制備本發明G-CSF模擬化合物的新方法。
本發明包括藥用組合物，其含有藥物載體及本發明方法中所用的化合物。
本發明還包括本發明的G-CSF模擬化合物與其它活性成分共同給藥的方法。
本發明還涉及發現某些非肽化合物具有G-CSF模擬物效用。
本發明的詳細說明用作G-CSF模擬物的本發明化合物為具有下式(Ⅰ)的化合物及其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和酯
其中R1、R2、R3和R4獨立為芳基，芳環為C3-C12環或多環芳環時，任選含有一或多個雜原子，條件是當C為3時芳環含有至少2個雜原子，而當C為4時，芳環含有至少1個雜原子，而且任選由一或多個選自下列的取代基取代C(O)NR6R7及NR6R7、芳氧基、環烷基、取代的環烷基、烷基、C6-C12芳基、烷氧基、酰氧基、取代的C6-C12芳基、氨基、N-酰氨基、硝基、氰基、鹵素、羥基、-C(O)OR6、-S(O)nR5、被保護的-OH以及由一或多個選自下列的取代基取代的烷基烷氧基、酰氧基、C6-C12芳基、取代的C6-C12芳基、氨基、N-酰氨基、氧代、羥基、環烷基、取代的環烷基、-C(O)OR6、-S(O)nR7、芳氧基、硝基、氰基、鹵素和被保護的-OH，其中R6為氫或烷基，n為0-2，R7為氫或烷基，和R5為氫、環烷基、C6-C12芳基、取代的環烷基、取代的C6-C12芳基、烷基或由一或多個選自下列的取代基取代的烷基烷氧基、酰氧基、芳氧基、氨基、N-乙酰氨基、氧代、羥基、-C(O)OR6、-S(O)nR7、硝基、氰基、環烷基、取代的環烷基、鹵素、C6-C12芳基、取代的C6-C12芳基及被保護的-OH其中R6為氫或烷基，n為0-2而R7為氫或烷基。
本發明式Ⅰ化合物中優選的化合物及其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和酯是其中芳基為C5-C12芳基，其任選含有1或2個雜原子及任選由一或多個選自-OC6-C12芳基、-(CH2)mOH、C6-C12芳基、C1-C4烷基、-OC1-C4烷基、氨基、硝基、氰基、N-酰氨基、三氟甲基、C3-C7環烷基、鹵素、-(CH2)pCOOH、-S(O)nR7和被保護的-OH的取代基取代，其中m為0-4,p為0-3,n為0-2而R7為氫或C1-4烷基的那些化合物。
本發明化合物中特別優選那樣一些化合物，其中R1和R2獨立為苯基、萘基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、吲哚基或喹啉基，所有這些基團可未被取代或由選自鹵素、C1-5烷基、C3-7環烷基及-OC1-4烷基的取代基取代；R3和R4獨立為苯基、萘基、噻吩基、吡啶基、喹啉基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、噻唑基或咪唑基，所有這些基團可未被取代或由選自鹵素、氨基、氰基、N-酰氨基、C1-3烷基、-O-C1-3烷基、硝基、-CO2H及CF3的一或二個取代基取代；以及這些化合物的藥學上可接受鹽、水合物、溶劑化物及酯。
本發明中特別優選的是那樣一些化合物及其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和酯，其中R1和R2獨立為苯基、呋喃基、噻吩基或吡啶基，所有這些基團可未被取代或由選自鹵素、C1-5烷基、C3-6環烷基及-OC1-3烷基的取代基所取代；R3和R4獨立為吡啶基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、噻唑基或咪唑基，所有這些基團可未被取代或由選自鹵素、氨基、氰基、N-酰氨基、C1-3烷基、-O-C1-3烷基、硝基、-CO2H及CF3的一或二個取代基取代。
本發明最優選的化合物為那樣一些化合物，其中R1和R2為2-吡啶基，兩者獨立未被取代或由C1-3烷基取代；而R3和R4為2-苯并咪唑基，兩者獨立未被取代或由C1-3烷基取代，條件是R3和R4不都被取代。
本發明優選的化合物為2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a-(2-吡啶基)-6a-苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(4-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(5-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[5,6-二甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-二苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-呋喃基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-雙(2-吡啶基)八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(3-甲氧基苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(4-甲氧基苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(4-氟苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(6-甲基-2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a-(4-吡啶基)-6a-苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[(5-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[(5-硝基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[(5-氯-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[(4-甲基-2-噻唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并噁唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[(4-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，5-(2-苯并咪唑基亞氨基)-2-[(5-氟-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[(5-氟-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，5-(2-苯并咪唑基亞氨基)-2-[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(4-甲基-2-噻唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[(5-溴-4-甲基-2-噻唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(5-氯-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[(5,6-二甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[(5-羧基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，5[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[2-苯并噁唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[2-苯并噻唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[2-苯并噻唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，5-[(2-苯并咪唑基亞氨基)]-2-[(5-羧基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[(5-碘-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，和5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(5-碘-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(4-溴苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙[4-三氟甲基苯基]-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a-(3-氯苯基)-6a-苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑,2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a-(2-氯苯基)-6a-苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，5-(2-苯并咪唑基亞氨基)-2-[(5-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-6a-苯基-3a-(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-二苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(4-甲基苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，及2,5-雙[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(4-溴苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑。
在此所用術語“被保護羥基”或“被保護-OH”是指能由本領域中常用的保護基團保護的醇-OH或羧酸-OH，這些保護基團見“Pnotective Groups In Onganic Synthesis”(Theodora W.Greene,Wiley-Interscience,1981,New York)中的說明。
除另有說明，此處所用術語“C5-C12芳基”是指任選含有一或二個雜原子的C5-C12芳香單或多環。
除另有說明，此處所用術語“C6-C12芳基”是指苯基、萘基、3,4-亞甲二氧基苯基、吡啶基或聯苯基。
除另有說明，此處所用術語“被取代”是指主要化學部分含有一或多個取代基，其選自羥烷基、烷氧基、酰氧基、烷基、氨基、N-酰氨基、羥基、-(CH2)gC(O)OR6、-S(O)nR7、硝基、氰基、鹵素、三氟甲基和被保護的-OH，其中g為0-6,R6為氫或烷基，n為0-2,R7為氫或烷基。
此處所用術語“烷氧基”是指-O烷基，其中烷基如本文中所定義，其包括-OCH3及-OC(CH3)2CH3。
除另有說明，此處所用術語“環烷基”是指非芳香族、不飽和或飽和的、C3-C12單或多環。
此處所用的環烷基及取代的環烷基取代基的實例包括環己基、4-羥基環己基、2-乙基環己基、丙基4-甲氧基環己基、4-甲氧基環己基、4-羧基環己基和環戊基。
此處所用的術語“酰氧基”指-OC(O)烷基其中烷基如本文中所定義。此處所用的酰氧基取代基的實例包括-OC(O)CH3、-OC(O)CH(CH3)2和-OC(O)(CH2)3CH3。
此處所用的術語“N-酰氨基”是指-N(H)C(O)烷基，其中烷基定義同上。此處所用的N-酰氨基取代基的實例包括-N(H)C(O)CH3、-N(H)C(O)CH(CH3)2和-N(H)C(O)(CH2)3CH3。
此處所用的術語“芳氧基”指-OC6-C12芳基，其中C6-C12芳基為苯基、萘基、3,4-亞甲二氧基苯基、吡啶基或聯苯基，其任選由一或多個選自烷基、羥基烷基、烷氧基、三氟甲基、酰氧基、氨基、N-酰氨基、羥基、-(CH2)gC(O)OR6、-S(O)nR7、硝基、氰基、鹵素及被保護的-OH的取代基取代，其中g為0-6,R6為氫或烷基，n為0-2,R7為氫或烷基。此處所用芳氧基取代基的實例包括苯氧基、4-氟苯氧基和聯苯氧基。
此處所用術語“雜原子”是指氧、氮或硫。
此處所用術語“鹵素”是指選自溴、碘、氯和氟的取代基。
此處所用術語“烷基”和其衍生物及所有碳鏈中的烷基是指直鏈或支鏈、飽和或不飽和的含有C1-C12碳原子的碳氫鏈。此處所用烷基取代基的實例包括-CH3、-CH2CH3、-CH2-CH2-CH3、-CH(CH3)2、C(CH3)3、-(CH2)3-CH3、-CH2CH(CH3)2和-CH(CH3)-CH2-CH3、-CH=CH2。
此處所用術語“醫治”及其派生詞是指預防或治療。
此處所用短語“轉移外周血液干細胞”是指轉移造血干細胞從骨髓至外周血液中。
此處所用短語“非肽雙功能配位體”是能夠通過結合兩個非相鄰位點活化G-CSF受體的配位體。
此處所用詞組“非肽”是指主要不含有天然氨基酸的蛋白質或肽。
除另有說明，在此所用術語“初級地”是指少于60％(重量)的天然產生的氨基酸殘基。
本說明書中引用的所有出版物，包括但不限于專利和專利申請，在此結合以供參考，似乎每個單獨出版物專門及單獨來表明在此完全提出以供參考。
式(Ⅰ)化合物包含在本發明的藥用組合物中以及用于本發明的用法中。當-COOH或-OH存在時，可應用藥學上可接受的酯，如與-COOH形成甲酯、乙酯、新戊酰氧甲酯等，與-OH形成乙酸酯、馬來酸酯等，以及那些用來改善溶解性或水解性以用于緩釋或前藥制劑的本領域已知的酯。
此處所用術語“共同給藥”及其派生詞是指將按此定義的G-CSF模擬化合物與另外的活性組分如抗菌劑、抗真菌劑及已知的藥劑一起或者同時給藥或者以任何單獨的接順序給藥的方式給藥來醫治白細胞減少癥，包括化療誘發的白細胞癥少癥及骨髓移植以及轉移外周血液干細胞和其它降低白細胞產生的癥狀。若不是同時給藥，優選將化合物在彼此接近的時間內給藥。另外，這些化合物是否以相同的劑型給。藥關系不大，例如，一種化合物可局部給藥而另一化合物可以口服給藥。
新的式(Ⅰ)化合物通過如下所示的方案Ⅰ來制備，條件是‘R’取代基不包括任何使方案Ⅰ過程不能進行的取代基。式(2)的1,2-二酮可由商業提供或者通過根據Ide等(Organic Reaction volⅣ,269)說明的方法由芳醛進行苯偶姻縮合，再按Mancuso等(J.Org.Chem.1979,44,4148)報道的中間體α-羥基酮的氧化來制備。式(3)的胍衍生物可由商業提供或可按King等(J.Chem.Soc.1948,1366)的方法由商業提供的鄰苯二胺來制備。
方案(Ⅰ)制備式(Ⅰ)化合物式(Ⅰ)化合物
其中R1、R2、R3和R4如以上式(Ⅰ)中定義；可通過將式(2)的1,2-二酮
其中R1和R2如式(Ⅰ)中定義，用一種或多種式(3)的胍衍生物處理而制備
其中R5為R3或R4，因此當利用一種以上的式(3)胍衍生物時，R5不必是相同的取代基。該反應在一溶劑如苯或吡啶中，在回流共沸脫水下如使用Dean-Stark裝置或者另外在堿催化劑(如氫氧化鈉)存在下，在適當的質子溶劑(如甲醇、乙醇或水)中進行。
藥學上可接受的鹽、水合物及溶劑化物可用對本領域技術人員熟悉的方法適時而制備。
由于本發明的藥學活性化合物具有G-CSF模擬物的活性，所以它們具有醫療用途，用于醫治細菌感染、真菌感染、白細胞減少癥，包括化療引起的白細胞減少癥及骨髓移植以及轉移外周血液干細胞和其它降低白細胞產生的癥狀。
測定G-CSF模擬物的效能，采用下列方法熒光素酶檢測測定本發明化合物作為G-CSF受體的模擬物效能用熒光素酶檢測，該法在Lamb等，Nucleic Acids Research23:3283-3289(1995)及Seidel等，Proc.Natl.Acad.Sci.,USA92:3041-3045(1995)中說明，并用NFS60細胞代替其中所用的HepG2細胞。在Lamb檢測中用NFS60細胞(Holmes等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA82:6687-6691(1985))代替HepG2細胞，原因是NSF60細胞所表達的內源性G-CSF受體與在初生鼠及入的骨髓細胞中發現的STAT(轉錄的信號傳導因子和活化因子)活化的方式緊密匹配。
本發明的某些最優選化合物在CFU-G檢測中也有活性，該檢測的一個實例介紹于King AG.Talmadge J.、Badger AM、Pelus LM中。血調節肽HP-5調節來自骨髓基質細胞的菌落刺激的活性產生(Exp.Hematol.20:223-228,1992)。
本發明范圍內的藥學活性化合物作為G-CSF模擬物用于所需其的哺乳動物包括人類。
實施例1、2、4-8、13、15-18、20、25、26、30、32b、34、35、37和39的化合物在熒光素酶檢測中在濃度1-32μM范圍內顯示出為對照的150％以上的激活作用。
實施例3、9-12、14、19、21-24、27-29、31、32a、33、36、38和40的化合物在熒光素酶檢測中盡管在濃度1-32μM范圍內沒有顯示出為對照的150％以上的激活作用，但確信在濃度＞32μM時可顯示為對照的150％以上的激活作用。
因此本發明提供了治療細菌感染、真菌感染、白細胞減少癥，包括化療誘發的白細胞減少癥及骨髓移植以及轉移外周血干細胞和其它降低白細胞產生癥狀的方法，其包括給予一有效劑量的式(Ⅰ)化合物及其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和酯來增加白細胞產生
其中R1、R2、R3和R4獨立為芳基，芳環為C3-C12環或多環芳環時，任選含有一或多個雜原子，條件是當C為3時，芳環含有至少2個雜原子，而當C為4時，芳環含有至少1個雜原子，而且任選由一或多個選自下列的取代基取代C(O)NR6R7及NR6R7、芳氧基、環烷基、取代的環烷基、烷基、C6-C12芳基、烷氧基、酰氧基、取代的C6-C12芳基、氨基、N-酰氨基、硝基、氰基、鹵素、羥基、-C(O)OR6、-S(O)nR5、被保護的-OH以及由一或多個選自下列的取代基取代的烷基烷氧基、酰氧基、C6-C12芳基、取代的C6-C12芳基、氨基、N-酰氨基、氧代、羥基、環烷基、取代的環烷基、-C(O)OR6、-S(O)nR7、芳氧基、硝基、氰基、鹵素和被保護的-OH，其中R6為氫或烷基，n為0-2，R7為氫或烷基，和R5為氫、環烷基、C6-C12芳基、取代的環烷基、取代的C6-C12芳基、烷基或由一或多個選自下列的取代基取代的烷基烷氧基、酰氧基、芳氧基、氨基、N-酰氨基、氧代、羥基、-C(O)OR6、-S(O)nR7、硝基、氰基、環烷基、取代的環烷基、鹵素、C6-C12芳基、取代的C6-C12芳基及被保護的-OH，其中R6為氫或烷基，n為0-2而R7為氫或烷基。式(Ⅰ)化合物還提供了治療以上所述的病癥的方法，原因是它們顯示出作為G-CSF模擬物的功能。可將這些藥物以任何常用的給藥途徑給予所需其的患者，包括(但不限于此)靜脈、肌內、口服、皮下、真皮內及非胃腸道給藥。
可將本發明的藥學活性化合物加入常用的劑型如膠囊、片劑或注射劑中。可應用固體或液體藥物載體。固體載體包括淀粉、乳糖、硫酸鈣二水合物、石膏粉、蔗糖、滑石粉、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、硬脂酸鎂和硬脂酸。液體載體包括糖漿、花生油、橄欖油、鹽水和水。類似地，載體或稀釋劑可包括任何延長釋放的物質，如單硬脂酸甘油酯或雙硬脂酸甘油酯單獨或與蠟一起使用。固體載體的用量變化很大，但優選每劑量單位25mg至約1g。當用液體載體時，制劑將采用糖漿劑、酏劑、乳劑、軟明膠膠囊、無菌注射液體如安瓿或水或非水液體混懸液的形式。
藥物制劑可按照藥物化學家常用的技術制備，對于片劑而言(當必要時)包括混合、制粒及壓片，或混合、填充及溶解所述成分(如合適)，以制得所需的口服或非胃腸道給藥制品。
以上所說明的藥物劑型單位中本發明藥用活性化合物的劑量應為有效、無毒的量，優選含0.001～100mg/kg活性化合物，更優選0.001-50mg/kg。當醫治需G-CSF模擬物的患者時，給藥所選劑量優選每日口服或非胃腸道給藥1-6次。非胃腸道給藥的優選形式為局部給藥、直腸給藥、真皮內給藥、注射及連續輸注。給人口服的劑量單位優選含有0.05-3500mg的活性化合物。對于口服給藥，優選使用較低劑量。但是當對患者安全且方便時，也可用高劑量的非胃腸道給藥形式。
最適的給藥劑量可由本領域技術熟練的人員來容易地確定，它將隨著使用的具體G-CSF模擬物、制劑的強度、給藥的方式、以及病癥的發展而變化。取決于所醫治的個別患者的另外一些因素也需要調節劑量，這些因素包括患者年齡、體重、飲食以及給藥時間等。
本發明在哺乳動物包括人體上引起G-CSF模擬活性的方法包括給予所需這種活性的接受者一有效G-CSF模擬劑量的本發明藥用活性的化合物。
本發明還提供應用式(Ⅰ)化合物來制備用作G-CSF模擬物的藥物。
本發明還提供應用式(Ⅰ)化合物來制備用于醫療中的藥物。
本發明還提供應用式(Ⅰ)化合物來制備用于增加白細胞產生的藥物。
本發明還提供應用式(Ⅰ)化合物來制備用于治療細菌和真菌感染的藥物。
本發明還提供用作G-CSF模擬物的藥用組合物，其包含式Ⅰ化合物和藥學上可接受的載體。
本發明還提供用于治療白細胞減少癥的藥用組合物，其包含式Ⅰ化合物和藥學上可接受的載體。
本發明還提供用于增加白細胞產生的藥用組合物，其包含式Ⅰ化合物和藥學上可接受的載體。
本發明還提供用于治療細菌感染的藥用組合物，其包含式Ⅰ化合物和藥學上可接受的載體。
本發明還提供用于治療真菌感染的藥用組合物，其包含式Ⅰ化合物和藥學上可接受的載體。
本發明還提供制備含有藥學上可接受的載體或稀釋劑以及式Ⅰ化合物的藥用組合物的方法，其包括將式Ⅰ化合物與藥學上可接受的載體或稀釋劑相混合。
當按照本發明給予本發明化合物時，沒有出現不能接受的毒理作用。
另外，可將本發明的藥用活性化合物與另外的活性成分共同給藥，如熟知的用于治療細菌感染、真菌感染、白細胞減少癥，包括化療誘發的白細胞減少癥及骨髓移植及轉移外周血液干細胞以及其它降低白細胞產生癥狀的化合物，或者在用于與G-CSF模擬物結合使用時已知可利用的化合物。
不需進一步詳盡闡述，確信本領域的技術熟練人員利用以上說明能最大程度地實施本發明。因此，下列實施例僅供說明之用而絕不限制本發明的范圍。
實驗詳解實施例1制備2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑(化合物1)
將2,2’-二吡啶基乙二酮(pyridil)(15.8g,74.4mmol)和2-胍基苯并咪唑(19.5g,111.7mmol)的甲醇(440ml)混合液用氫氧化鈉(2.97g,74.4mmol)的74ml溶液處理，將形成的混合液在室溫下放置4天。過濾結晶的物質，真空干燥得到21.1g標題化合物，為灰白色結晶(72％)。mp305-307℃(分解)；1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ11.5(brs,NH,2H),10.0(brs,NH,2H),8.6(brs,NH,2H),8.38(d,J=4.2Hz,2H),7.55(t,J=7.8Hz,2H),7.29(d,J=7.8Hz,2H),7.27-7.21(m,4H),7.14(brs,2H),6.98(dd,J=5.8,3.2Hz,4H)；MS(ESI)m/z527[M+H]+；分析計算值C28H22N12.2/3H2O:C,62.44；H,4.37,N,31.21；實測值C,62.72；H,4.08；N,30.86。
實施例2制備2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-二苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑(化合物2)
將二苯乙二酮(1.05g,5.0mmol)和2-胍基苯并咪唑(1.57g,9.0mmol)的苯(25ml)混合液在吡啶(10ml)中回流1小時。減壓蒸去大部分吡啶后，將殘留物用熱甲苯處理，過濾生成的沉淀。然后將沉淀溶解于9∶1水∶乙酸(30ml)中；過濾溶液，濾液用磷酸鹽緩沖液中和至pH7。生成沉淀，過濾收集，用水研磨得標題化合物(0.42g,16％)。1HNMR(300MHz,d6-DMSO)δ11.5(brs,NH,2H),10.0(brs,NH,2H),8.6(brs,NH,2H),7.28-7.10(m,14H),6.97(dd,J=6.0,3.0Hz,4H)；MS(ESI)m/z525[M+H]+；分析計算值C30H24N10.1/2CH3CO2H.3/4H2O:C,65.37；H,4.88；N,24.65。實測值C,65.36；H,4.79；N,24.48。
實施例3制備2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-呋喃基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-雙(2-吡啶基)八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1中步驟，將2,2’-糠偶酰(1.91g,10mmol)和2-胍基苯并咪唑(2.10g,12.0mmol)的甲醇(60ml)液用氫氧化鈉(400mg,10mmol)的10ml水溶液處理。過濾黑色沉淀，將其溶于30ml10％乙酸中，過濾。用氫氧化鈉水溶液中和濾液。沉淀得標題化合物，為灰色固體(105mg,10％收率)。mp222-225℃(分解)；MS(ESI)m/z505[M+H]+。
實施例4制備2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(3-甲氧基苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1中步驟，將3,3’-二甲氧基二苯乙二酮(1.0g,3.69mmol)和2-胍基苯并咪唑(540mg,3.08mmol)的甲醇(40ml)液用氫氧化鈉(200mg,5mmol)的5ml水溶液處理。分離標題化合物，為淡黃色結晶(655mg,73％收率)。mp276-278℃(分解)；MS(ESI)m/z585[M+H]+。
實施例5制備2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(4-甲基苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1中步驟，將4,4’-二甲基二苯乙二酮(1.91g,12mmol)與2-胍基苯并咪唑(2.10g,10mmol)的甲醇(60ml)液用氫氧化鈉(400mg,10mmol)的10ml水溶液處理。過濾橙黃色固體，將其溶于40ml10％乙酸中，過濾。將濾液用氫氧化鈉水溶液中和形成標題化合物沉淀，為淡黃色固體(185mg,7％收率)。mp245-248℃(分解)；MS(ESI)m/z553[M+H]+。
實施例6制備2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(4-氟苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1中步驟，將4,4’-二氟二苯乙二酮(1.0g,4.06mmol)與2-胍基苯并咪唑(0.6g,3.4mmol)的甲醇(40ml)液用氫氧化鈉(200mg,5mmol)的5ml水溶液處理。分離標題化合物，為淡黃色結晶(750mg,79％收率)。MS(ESI)m/z561[M+H]+。
實施例7制備2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(6-甲基-2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1的步驟，將6,6’-二甲基-2,2’-二吡啶基乙二酮(100mg,0.41mmol)和2-胍基苯并咪唑(60mg,0.35mmol)的甲醇(5ml)液用氫氧化鈉(20mg,0.55mmol)的0.5ml水溶液處理。分離標題化合物，為淡黃色結晶(55mg,28％收率)。MS(ESI)m/z555[M+H]+。
實施例8制備2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a-(2-吡啶基)-6a-苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1的步驟，將1-苯基-2-(2-吡啶基)乙二酮(800mg,3.79mmol)和2-胍基苯并咪唑(560mg,3.15mmol)的甲醇(20ml)液用氫氧化鈉(40mg,1.0mmol)的1ml水溶液處理。分離標題化合物，為淺黃色結晶(160mg,20％收率)。1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ12.0(br,s,NH,1H)11.5(brs,NH,2H),10.0(brs,NH,1H),8.6(brs,NH,1H),8.41(m,2H),7.55(t,J=6.9Hz,2H),7.30-7.10(m,8H),6.98(dd,J=6.0,3.1Hz,4H)；MS(ESI)m/z526[M+H]+。
實施例9制備2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a-(4-吡啶基)-6a-苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1的步驟，將1-苯基-2-(4-吡啶基)乙二酮(500mg,2.42mmol)和2-胍基苯并咪唑(1.0g,6.0mmol)的甲醇(10ml)液用氫氧化鈉(40mg,1.0mmol)的1ml水溶液處理。分離標題化合物，為淺黃色結晶(45mg,3％收率)。
1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ11.5(brs,NH,1H),11.0(br.s,NH,1H),10.0(brs,NH,1H),8.6(brs,NH,1H),8.4(m,2H),7.4-6.8(m,15H)；MS(ESI)m/z526[M+H]+。
實施例10制備2,5-雙[(5-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1的方法，將2,2’-二吡啶基乙二酮(603mg,2.84mmol)和5-甲基-2-胍基苯并咪唑(489mg,2.58mmol)的甲醇(17ml)液用氫氧化鈉(113.6mg,2.84mmol)的2.8ml水溶液處理。分離標題化合物，為灰色粉末(450mg,63％收率)。mp290-291℃(分解)。
1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ11.3(brs,NH,2H),10.0(brs,NH,2H),8.5(brs,NH,2H),8.32(d,J=4.2Hz,2H),7.54(t,J=7.6Hz,2H),7.31(d,J=7.6Hz,2H),7.16(d,J=7.8Hz,2H),7.16-7.09(m,2H),7.09(s,2H),7.14(brs,2H),6.86(d,J=7.8,Hz,2H),2.34(s,6H)；MS(ESI)m/z555[M+H]+。
實施例11制備2,5-雙[(5-硝基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1的方法，將2,2’-二吡啶基乙二酮(245mg,1.15mmol)和5-硝基-2-胍基苯并咪唑(254mg,1.15mmol)的甲醇(6.9ml)液用氫氧化鈉(46mg,1.15mmol)的1.1ml水溶液處理。分離標題化合物，為橙黃色結晶(182mg,51％收率)。mp340-350℃(分解)；MS(ESI)m/z617[M+H]+。
實施例12制備2,5-雙[(5-氯-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1的方法，將2,2’-二吡啶基乙二酮(352mg,1.66mmol)和5-甲基-2-胍基苯并咪唑(350mg,1.66mmol)的甲醇(10ml)液用氫氧化鈉(66.4mg,1.66mmol)的2.5ml水溶液處理。分離標題化合物，為棕色固體(247mg,50％收率)。MS(ESI)m/z596[M+H]+。
實施例13制備2,5-雙[(4-甲基-2-噻唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1的方法，將2,2’-二吡啶基乙二酮(1.06g,5.0mmol)和4-甲基噻唑-2-基胍鹽酸鹽(1.35g,7.0mmol)的甲醇(30ml)液用氫氧化鈉(450mg,11.25mmol)的7.5ml水溶液處理。過濾沉淀，將其溶解于30ml10％乙酸中，過濾；然后將濾液用氫氧化鈉水溶液中和。標題化合物沉淀，為褐色固體(265mg,16％收率)。mp＞300℃(分解)；MS(ESI)m/z489[M+H]+。
實施例14制備2,5-雙[2-苯并噁唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1的步驟，將2,2’-二吡啶基乙二酮(301mg,1.42mmol)和2-胍基苯并噁唑(250mg,1.42mmol)的甲醇(12ml)液用氫氧化鈉(56.7mg,1.42mmol)的2ml水溶液處理。分離標題化合物，為棕色固體(151mg,40％收率)。1HNMR(300MHz,d6-DMSO)δ10.28(s,NH,4H),8.36(d,J=4.6Hz,2H),7.57(td,J=7.8 1.8Hz,2H),7.47(d,J=7.8Hz,2),7.39(d,J=7.8Hz,2H),7.30(d,J=4.6Hz,2H),7.19(dt,J=7.7,1.3Hz,2H),7.16-7.10(m,4H)；MS(ESI)m/z529[M+H]+。
實施例15制備2,5-雙[(4-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1的步驟，將2,2’-二吡啶基乙二酮(1.87g,8.83mmol)和4-甲基-2-胍基苯并咪唑(2.0g,10.5mmol)的甲醇(63ml)液用氫氧化鈉(420mg,10.5mmol)的6ml水溶液處理。分離標題化合物，為白色結晶(1.9g,65％)。MS(ESI)m/z555[M+H]+。
實施例16制備5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(4-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽將2,2’-二吡啶基乙二酮(135mg,0.636mmol)、2-胍基苯并咪唑(92.8mg,0.530mmol)和4-甲基-2-胍基苯并咪唑(100mg,0.530mmol)的甲醇(3ml)混合液用氫氧化鈉(38mg,0.95mmol)的0.5ml水溶液處理，將得到的混合液在室溫下放置2天。過濾結晶物，用反相制備HPLC(Rainin Dynamax,5μM C18柱21.4mm×25cm，用含0.1％三氟乙酸的乙腈-水梯度洗脫)純化得標題化合物，為白色粉末(100mg,25％)。MS(ESI)m/z541[M+H]+。
實施例17制備5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(5-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽按實施例16的步驟，除用5-甲基-2-胍基苯并咪唑代替4-甲基-2-胍基苯并咪唑外，制得標題化合物(88mg,11％)。
1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ13.0(brs,NH,4H),9.8(brs,NH,4H),8.39(d,J=4.3Hz,2H),7.64(td,J=7.8,1.7Hz,2H),7.57(d,J=7.8Hz,2H),7.49-7.46(m,2H),7.38-7.33(m,3H),7.27(s,1H),7.21-7.13(m,3H),2.44(s,3H)；MS(ESI)m/z541[M+H]+。
實施例18制備2,5-雙[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽按實施例1的步驟，將2,2’-二吡啶基乙二酮(187mg,0.88mmol)和1-甲基-2-胍基苯并咪唑(0.20g,1.57mmol)的甲醇(6ml)液用氫氧化鈉(60mg,1.5mmol)的0.6ml水溶液處理。過濾結晶物質，經反相制備HPLC(Rainin Dynamax,5μM C18柱21.4mm×25cm，用含0.1％三氟乙酸的乙腈-水梯度洗脫)純化得標題化合物，為白色粉末(200mg,48％)。1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ9.9(brs,NH,4H),8.41(d,J=4.5Hz,2H),7.68-7.62(m,4H),7.54(d,J=7.7Hz,2H),7.55-7.50(m,2H),7.39-7.36(m,4H),7.20(ddd,J=7.3,4.9,1.0Hz,2H),3.78(s,6H)；MS(ESI)m/z555[M+H]+。
實施例19制備5-(2-苯并咪唑基亞氨基)-2-[(5-氟-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽將2,2’-二吡啶基乙二酮(345mg,1.6mmol)、2-胍基苯并咪唑(181mg,1.036mmol)和5-氟-2-胍基苯并咪唑(250mg,1.036mmol)的甲醇(3m1)混合液用氫氧化鈉(60mg,1.5mmol)的0.5ml水溶液處理，將得到的混合液在室溫下放置2天。過濾結晶物質，經反相制備HPLC(RaininDynamax,5μM C18柱21.4mm×25cm，用含0.1％三氟乙酸的乙腈-水梯度洗脫)純化得標題化合物，為白色粉末(92mg,12％)。
1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ13.2(brs,NH,2H),9.8(brs,NH,4H),8.40(d,J=4.2Hz,2H),7.64(td,J=7.6,1.2Hz,2H),7.55(d,J=7.5Hz,2H),7.49-7.43(m,3H),7.34-7.30(m,3H),7.19(dd,J=7.0,5.0Hz,2H)；MS(ESI)m/z545[M+H]+。
實施例20制備2,5-雙[(5-氟-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽將2,2’-二吡啶基乙二酮(262mg,1.2mmol)和5-氟-2-胍基苯并咪唑(200mg,1.04mmol)的甲醇(3ml)混合液用氫氧化鈉(60mg,1.5mmol)的0.6ml水溶液處理。過濾結晶物質，經反相制備HPLC(Rainin Dynamax,5μM C18柱21.4mm×25cm，用含0.1％三氟乙酸的乙腈-水梯度洗脫)純化得標題化合物，為白色粉末(147mg,37％)。
1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ13.0(brs,NH,2H),9.9(brs,NH,4H),8.39(d,J=4.6Hz,2H),7.64(td,J=7.7 1.6Hz,2H),7.52(d,J=7.8Hz,2),7.45-7.41(m,2H),7.32-7.28(m,2H),7.21-7.16(m,2H),7.15-7.11(m,2H)；MS(ESI)m/z563[M+H]+。
實施例21制備5-(2-苯并咪唑基亞氨基)-2-[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽將2,2’-二吡啶基乙二酮(265mg,1.25mmol)、2-胍基苯并咪唑(231mg,1.32mmol)和1-甲基-2-胍基苯并咪唑(350mg,1.59mmol)的甲醇(3ml)混合液用氫氧化鈉(95mg,2.4mmol)的0.5ml水溶液處理，將得到的混合液在室溫下放置2天。過濾結晶物質，經反相制備HPLC(RaininDynamax,5μM C18柱21.4mm×25cm，用含0.1％三氟乙酸的乙腈-水梯度洗脫)純化得標題化合物，為白色粉末(125mg,14％)。
1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ13.2(brs,NH,2H),9.9(brs,NH,4H),8.40(d,J=4.3Hz,2H),7.68-7.62(m,3H),7.57(d,J=7.8Hz,2H),7.50-7.47(m,3H),7.38-7.30(m,4H),7.20(ddd,J=7.3,5.3,1.0Hz,2H),3.78(s,3H)；MS(ESI)m/z541[M+H]+。
實施例22制備5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(4-甲基-2-噻唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽按實施例19步驟，除用4-甲基噻唑-2-基胍代替5-氟-2-胍基苯并咪唑外，制得標題化合物(63mg,7％)。MS(ESI)m/z510[M+H]+。
實施例23制備2,5-雙[(5-溴-4-甲基-2-噻唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1步驟，將2,2’-二吡啶基乙二酮(215mg,1.016mmol)和5-溴-4-甲基-2-胍基苯并咪唑(200mg,0.847mmol)的甲醇(3ml)液用氫氧化鈉(51mg,1.27mmol)的0.5ml水溶液處理。分離標題化合物，為白色結晶(50mg,18％)。MS(ESI)m/z647[M+H]+。
實施例24制備5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(5-氯-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽將2,2’-二吡啶基乙二酮(242mg,1.14mmol)、2-胍基苯并咪唑(166mg,0.95mmol)和5-氯-2-胍基苯并咪唑(200mg,0.95mmol)的甲醇(3ml)混合液用氫氧化鈉(57mg,1.42mmol)的0.5ml水溶液處理，將得到的混合液在室溫下放置2天。過濾結晶物質，經反相制備HPLC(RaininDynamax,5μM C18柱21.4mm×25cm，用含0.1％三氟乙酸的乙腈-水梯度洗脫)純化得標題化合物，為白色粉末(173mg,23％)。MS(ESI)m/z562[M+H]+。
實施例25制備2,5-雙[(5,6-二甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽將2,2’-二吡啶基乙二酮(254mg,1.2mmol)和5,6-二甲基-2-胍基苯并咪唑(203mg,1.0mmol)的甲醇(3ml)混合液用氫氧化鈉(60mg,1.5mmol)的0.6ml水溶液處理。過濾結晶物質，經反相制備HPLC(RaininDynamax,5μM C18柱21.4mm×25cm，用含0.1％三氟乙酸的乙腈-水梯度洗脫)純化得標題化合物，為白色粉末(170mg,42％)。MS(ESI)m/z583[M+H]+。
實施例26制備5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(5,6-二甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽將2,2’-二吡啶基乙二酮(254mg,1.2mmol)、2-胍基苯并咪唑(175mg,1.0mmol)和5,6-二甲基-2-胍基苯并咪唑(203mg,1.0mmol)的甲醇(3ml)混合液用氫氧化鈉(60mg,1.5mmol)的0.5ml水溶液處理，將得到的混合液在室溫下放置2天。過濾結晶物質，經反相制備HPLC(Rainin Dynamax,5μM C18柱21.4mm×25cm，用含0.1％三氟乙酸的乙腈-水梯度洗脫)純化得標題化合物，為白色粉末(96mg,12％)。1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ13.1(brs,NH,2H),12.9(brs,NH,2H),9.9(brs,NH,2H),9.8(brs,NH,2H),8.39(d,J=4.3Hz,2H),7.64(td,J=7.9,1.5Hz,2H),7.58(d,J=7.9Hz,2H),7.48(dd,J=6.0,3.2Hz,2H),7.34-7.31(m,2H),7.25(s,2H),7.19(dd,J=7.0,5.0Hz,2H),2.33(s,6H)；MS(ESI)m/z555[M+H]+。
實施例27制備2,5-雙[5-羧基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽按實施例25的步驟，除用4-羧基-2-胍基苯并咪唑代替5,6-二甲基-2-胍基苯并咪唑外，經反相制備HPLC純化后制得標題化合物(42mg,10％)。MS(ESI)m/z615[M+H]+。
實施例28制備5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[2-苯并噁唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽將2,2’-二吡啶基乙二酮(143mg,0.68mmol)、2-胍基苯并咪唑(100mg,0.56mmol)和2-胍基苯并噁唑(100mg,0.56mmol)的甲醇(3ml)混合液用氫氧化鈉(34mg,0.85mmol)的0.5ml水溶液處理，將得到的混合液在室溫下放置2天。過濾結晶物質，經反相制備HPLC(RaininDynamax,5μM C18柱21.4mm×25cm，用含0.1％三氟乙酸的乙腈-水梯度洗脫)純化得標題化合物，為白色粉末(42mg,10％)。MS(ESI)m/z528[M+H]+。
實施例29制備2,5-雙[2-苯并噻唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑將2,2’-二吡啶基乙二酮(212mg,1.0mmol)和2-胍基苯并噻唑(403mg,2.2mmol)的甲醇(10ml)混合液用氫氧化鈉(30mg,0.75mmol)的0.3ml水溶液處理。得到標題化合物，為結晶性粉末(407mg,73％)。
1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ10.3(brs,NH,2H),8.38(d,J=4.0Hz,2H),7.94(s,J=7.8,2H),7.64(m,4H),7.41(m,4H),7.30(t,J=7.5Hz,2H),7.18(dd,J=7.5,4.9Hz,2H)；MS(ESI)m/z561[M+H]+。
實施例30制備5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[2-苯并噻唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽將2,2’-二吡啶基乙二酮(255mg,1.2mmol)、2-胍基苯并咪唑(175.2mg,1.0mmol)和2-胍基苯并噻唑(192mg,1.0mmol)的甲醇(10ml)混合液用氫氧化鈉(40mg,1.0mmol)的0.4ml水溶液處理，將得到的混合液在室溫下放置2天。過濾結晶物質，經反相制備HPLC(RaininDynamax,5μM C18柱21.4mm×25cm，用含0.1％三氟乙酸的乙腈-水梯度洗脫)純化得標題化合物，為白色粉末(30mg,4％)。
1HNMR(300MHz,d6-DMSO)δ13.0(brs,NH,2H),9.8(brs,NH,2H),8.40(d,J=4.0Hz,2H),7.83(d,J=7.7,H),7.55(t,J=7.8Hz,2H),7.54(d,J=7.7Hz,1H),7.50-7.38(m,4H),7.38-7.25(m,3H),7.23-7.15(m,H)；MS(ESI)m/z544[M+H]+。
實施例31制備5-[(2-苯并咪唑基亞氨基)]-2-[(5-羧基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽將2,2’-二吡啶基乙二酮(508mg,2.4mmol)、2-胍基苯并咪唑(350mg,2.0mmol)和5-羧基-2-胍基苯并咪唑(428mg,2.0mmol)的甲醇(6ml)混合液用氫氧化鈉(120mg,3.0mmol)的0.8ml水溶液處理，將得到的混合液在室溫下放置2天。得到共490mg結晶物質，將其部分(250mg)經反相制備HPLC(Rainin Dynamax,5μM C18柱21.4mm×25cm，用含0.1％三氟乙酸的乙腈-水梯度洗脫)純化得標題化合物，為白色粉末(50mg,6％)。MS(ESI)m/z571[M+H]+。
實施例32制備2,5-雙[(5-碘-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽和5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(5-碘-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽將2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑(2.0g,3.8mmol)的35ml N,N-二甲基甲酰胺、3.5ml乙酸和3.5ml的混合物中的溶液用N-碘代琥珀酰亞胺(1.71g,7.6mmol)處理，將得到的混合液室溫下攪拌3天。蒸除溶劑，將殘留物在乙酸乙酯和水之間分配；將水層用碳酸氫鈉溶液中和，用乙酸乙酯提取二次。將合并的有機提取液用水、鹽水洗滌，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸除溶劑得固體物(3.2g)；將其部分(1.0g)經反相制備HPLC(Rainin Dynamax,5μM C18柱21.4mm×25cm，用含0.1％三氟乙酸的乙腈-水梯度洗脫)純化得標題化合物，為白色粉末。5-碘代衍生物(12.5mg,1％):1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ13.0(brs,NH,2H),10.0(brs,NH,2H),8.39(d,J=4.7Hz,2H),7.64(t,J=5.9Hz,2H),7.40-7.60(m,4H),7.32(m,2H),6.98(dd,J=4.6,3.2Hz,2H)；MS(ESI)m/z653[M+H]+。5,5’-二碘衍生物(62.5mg,12％):1H NMR(300MHz,d6-DMSO)δ9.9(brs,NH,2H),8.40(d,J=4.5Hz,2H),7.74(s,2H),7.62(t,J=5.9,1.7Hz,2H),7.45-7.56(m,4H),7.28(d,2H),7.19(m,3H)；MS(ESI)m/z779[M+H]+。
實施例33制備2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(4-溴苯基)-
1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1步驟，將4,4’-二溴二苯乙二酮(4.42g,12mmol)和2-胍基苯并咪唑(1.75g,10mmol)的甲醇(100ml)液用氫氧化鈉(400mg,10mmol)的10ml水溶液處理。分離標題化合物，為淡黃色結晶(800mg,24％收率)。mp274-278℃(分解)；MS(ESI)m/z683[M+H]+。
實施例34制備2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(4-三氟甲基苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1步驟，將4,4’-三氟甲基二苯乙二酮(0.253g,0.73mmol)和2-胍基苯并咪唑(0.154g,0.88mmol)的甲醇(10ml)液用氫氧化鈉(35.2mg,0.88mmol)的1ml水溶液處理。分離標題化合物，為淡黃色結晶(180mg,62％收率)。MS(ESI)m/z661[M+H]+。
實施例35制備2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a-雙(3-氯苯基)-6a-苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1步驟，將1-(3-氯苯基)-2-苯基乙二酮(0.25g,1.0mmol)和2-胍基苯并咪唑(0.215g,1.2mmol)的甲醇(12ml)液用氫氧化鈉(48mg,1.2mmol)的1.2ml水溶液處理。分離標題化合物，為淡黃色結晶(130mg,39％收率)。MS(ESI)m/z559[M+H]+。
實施例36制備2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a-(2-氯苯基)-6a-苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑按實施例1步驟，將1-(2-氯苯基)-2-苯基乙二酮(0.25g,1.0mmol)和2-胍基苯并咪唑(0.215g,1.2mmol)的甲醇(12ml)液用氫氧化鈉(48mg,1.2mmol)的1.2ml水溶液處理。分離標題化合物，為淡黃色結晶(130mg,39％收率)。MS(ESI)m/z559[M+H]+。
實施例37制備5-(2-苯并咪唑基亞氨基)-2-[(5-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a-(2-吡啶基)-6a-苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽將2-苯基-1-(2-吡啶基)乙二酮(253mg,1.2mmol)、2-胍基苯并咪唑(175mg,1.0mmol)和5-甲基-2-胍基苯并咪唑(189mg,1.0mmol)的甲醇(6ml)混合液用氫氧化鈉(40mg,0.95mmol)的1.0ml水溶液處理，將得到混合液在室溫下放置2天。過濾結晶物質，經反相制備HPLC(RaininDynamax,5mM C18柱21.4mm×25cm，用含0.1％三氟乙酸的乙腈-水梯度洗脫)純化得標題化合物，為白色粉末(20mg,5％)。MS(ESI)m/z540[M+H]+。
實施例38制備2,5-雙[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-二苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑將二苯乙二酮(210mg,1.0mmol)和1-甲基-2-胍基苯并咪唑(207g,1.1mmol)的乙醇(5ml)溶液用氫氧化鈉(40mg,1.0mmol)的0.8ml水溶液處理，將得到混合液回流2小時。標題化合物沉淀，分離，為亮黃色粉末(125mg,41％收率)。MS(ESI)m/z553[M+H]+。
實施例39制備2,5-雙[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(4-甲基苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑將4,4’-二甲基二苯乙二酮(238mg,1.0mmol)和1-甲基-2-胍基苯并咪唑(207g,1.1mmol)的乙醇(5ml)溶液用氫氧化鈉(40mg,1.0mmol)的0.8ml水溶液處理，將得到混合液回流2小時。標題化合物沉淀，分離，為黃色粉末(50mg,16％收率)。MS(ESI)m/z581[M+H]+。
實施例40制備2,5-雙[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(4-溴苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑將4,4’-二溴二苯乙二酮(368mg,1.0mmol)和1-甲基-2-胍基苯并咪唑(207g,1.1mmol)的乙醇(5ml)溶液用氫氧化鈉(40mg,1.0mmol)的0.8ml水溶液處理，將得到混合液回流2小時。標題化合物沉淀，分離，為淡黃色粉末(320mg,82％收率)。MS(ESI)m/z711[M+H]+。
實施例41膠囊組合物供口服的本發明G-CSF受體激動劑的劑型是通過將下表Ⅰ中所示比例的組分填充入標準的兩節硬明膠膠囊中而制成。
表Ⅰ組分 用量2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶25mg基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑(化合物1)乳糖 55mg滑石粉16mg硬脂酸鎂 4mg實施例42胃腸外注射劑組合物供注射給藥的本發明G-CSF受體激動劑的劑型是通過將1.5％(重量)的2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-二苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑(化合物2)在10％(體積)的丙二醇水溶液中攪拌而制得。
實施例43片劑組合物將下表Ⅱ中所示的蔗糖、硫酸鈣二水合物及本發明的G-CSF受體的激動劑混合，以所示的比例用10％明膠溶液制粒。將濕粒過篩，干燥，與淀粉、滑石粉及硬脂酸混合，過篩，壓制成片劑。
表Ⅱ組分 用量2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶 20mg基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑(化合物1)硫酸鈣二水合物 30mg蔗糖 4mg淀粉 2mg滑石粉 1mg硬脂酸 0.5mg盡管以上說明了本發明的優選實施方案，應理解本發明并不限于此處所公開的明確的內容，在下列權利要求書的范圍內保留進行所有更改的權利。
權利要求
1．式(Ⅰ)化合物以及藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和酯
其中R1、R2、R3和R4獨立為芳基，芳環為C3-C12環或多環芳環時，任選含有一或多個雜原子，條件是當C為3時所述芳環含有至少2個雜原子，而當C為4時，所述芳環含有至少1個雜原子，而且任選由一或多個選自下列的取代基取代C(O)NR6R7及NR6R7、芳氧基、環烷基、取代的環烷基、烷基、C6-C12芳基、烷氧基、酰氧基、取代的C6-C12芳基、氨基、N-酰氨基、硝基、氰基、鹵素、羥基、-C(O)OR6、-S(O)nR5、被保護的-OH以及由一或多個選自下列的取代基取代的烷基烷氧基、酰氧基、C6-C12芳基、取代的C6-C12芳基、氨基、N-酰氨基、氧代、羥基、環烷基、取代的環烷基、-C(O)OR6、-S(O)nR7、芳氧基、硝基、氰基、鹵素和被保護的-OH，其中R6為氫或烷基，n為0-2，R7為氫或烷基，和R5為氫、環烷基、C6-C12芳基、取代的環烷基、取代的C6-C12芳基、烷基或由一或多個選自下列的取代基取代的烷基烷氧基、酰氧基、芳氧基、氨基、N-酰氨基、氧代、羥基、-C(O)OR6、-S(O)nR7、硝基、氰基、環烷基、取代的環烷基、鹵素、C6-C12芳基、取代的C6-C12芳基及被保護的-OH，其中R6為氫或烷基，n為0-2而R7為氫或烷基。
2．根據權利要求1的化合物及其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和酯，其中R1和R2獨立為苯基、呋喃基、噻吩基或吡啶基，所有這些基團可未被取代或由選自下列的一個取代基取代鹵素、C1-5烷基、C3-6環烷基及-OC1-3烷基；R3和R4獨立為吡啶基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、噻唑基或咪唑基，所有這些基團可未被取代或由一或二個選自下列的取代基取代鹵素、氨基、氰基、N-酰氨基、C1-3烷基、-O-C1-3烷基、硝基、-CO2H和CF3。
3．根據權利要求1的化合物選自2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a-(2-吡啶基)-6a-苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(4-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(5-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，和5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[5,6-二甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，或其藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物。
4．根據權利要求1的化合物選自2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-二苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-呋喃基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-雙(2-吡啶基)八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(3-甲氧基苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(4-甲氧基苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(4-氟苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(6-甲基-2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a-(4-吡啶基)-6a-苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[(5-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[(5-硝基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[(5-氯-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[(4-甲基-2-噻唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并噁唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[(4-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，5-(2-苯并咪唑基亞氨基)-2-[(5-氟-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[(5-氟-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，5-(2-苯并咪唑基亞氨基)-2-[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(4-甲基-2-噻唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[(5-溴-4-甲基-2-噻唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(5-氯-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[(5,6-二甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[(5-羧基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，5[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[2-苯并噁唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[2-苯并噻唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[2-苯并噻唑基亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，5-[(2-苯并咪唑基亞氨基)]-2-[(5-羧基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[(5-碘-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，和5-[2-苯并咪唑基亞氨基]-2-[(5-碘-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(2-吡啶基)-1,2,2a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，或其藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物。
5．藥用組合物，其包括藥學上可接受的載體和權利要求1的化合物。
6．用于增加白細胞產生的藥用組合物，其包括權利要求1的化合物和藥學上可接受的載體。
7．用于醫治細菌感染的藥用組合物，其包括權利要求1的化合物和藥學上可接受的載體。
8．用于醫治真菌感染的藥用組合物，其包括權利要求1的化合物和藥學上可接受的載體。
9．增加接受者白細胞產生的方法，其包括給該接受者治療有效劑量的權利要求1的化合物。
10．醫治接受者白細胞減少癥的方法，其包括給該接受者治療有效劑量的權利要求1的化合物。
11．制備式(Ⅰ)化合物的方法
其中R1、R2、R3和R4如權利要求1中定義；其包括使式(2)的1,2-二酮
其中R1和R2如權利要求1中定義，與一種或多種式(3)的胍衍生物反應
其中R5為R3或R4，因此當利用一種以上的式(3)胍衍生物時，R5不必是相同的取代基，在一種溶劑中共沸脫水而制備，之后可任選形成其藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物。
12．制備式(Ⅰ)化合物的方法
其中R1、R2、R3和R4如權利要求1中定義；其包括使式(2)的1,2-二酮
其中R1和R2如權利要求1中定義，與一種或多種式(3)的胍衍生物反應
其中R5為R3或R4，因此當利用一種以上的式(3)胍衍生物時，R5不必是相同的取代基，在一種堿催化劑存在下在一種適當的質子溶劑中制備，之后可任選形成其藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物。
13．根據權利要求1的化合物，選自2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙(4-溴苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a,6a-雙[4-三氟甲基苯基]-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a-(3-氯苯基)-6a-苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[2-苯并咪唑基亞氨基]-3a-(2-氯苯基)-6a-苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，5-(2-苯并咪唑基亞氨基)-2-[(5-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-6a-苯基-3a-(2-吡啶基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑雙(三氟乙酸)鹽，2,5-雙[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-二苯基-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，2,5-雙[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(4-甲基苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑，及2,5-雙[(1-甲基-2-苯并咪唑基)亞氨基]-3a,6a-雙(4-溴苯基)-1,2,3,3a,4,5,6,6a-八氫咪唑并[4,5-d]咪唑。
14．用作活性醫療物質的式(Ⅰ)化合物。
15．應用式(Ⅰ)化合物制備供醫療用途的藥物。
16．制備含有藥學上可接受的載體或稀釋劑以及有效劑量的權利要求1所述的式(Ⅰ)化合物及其藥學上可接受的鹽、水合物、溶劑化物和酯的藥用組合物的方法，該法包括將式(Ⅰ)化合物與所述藥學上可接受的載體或稀釋劑混合。
17．活化G-CSF受體的方法，其包括給予非肽雙功能配位體。
全文摘要
本發明涉及非肽G－CSF模擬物。本發明也涉及取代的2,5－二亞氨基－3a,6a－二芳基－1,2,3,3a,4,5,6,6a－八氫咪唑并[4,5－d]咪唑、含有這些化合物的藥用組合物及用這些化合物作為G－CSF模擬物的方法。本發明還涉及制備這些化合物的新方法。
文檔編號C07D235/00GK1225013SQ97196426
公開日1999年8月4日 申請日期1997年5月22日 優先權日1996年5月22日
發明者J·I·魯恩戈, J·A·陳, A·L·布雷恩 申請人:史密絲克萊恩比徹姆公司