專利名稱：新的雜環酰胺的制作方法
技術領域：
本發明涉及新的雜環酰胺，它可作為活性物質來預防通過影響鉀通道治愈或改善的疾病。
已知膀胱肌不受控制或不穩定的肌痙攣會導致尿失禁。盡管副交感神經系統在人類膀胱受控制的生理活動中發揮了具大作用，但不受控制的排尿可能更常取決于尿道平滑肌的過度敏感(K，-E Anderson，Pharmacology of lower urinary tractsmooth muscles and Penile ere(t)le tissue，Pharmacol.Rev.45，253-308，1993)。某些藥物，例如解痙藥，鈣拮抗劑和鉀通道激活劑，能夠抑制這種過度敏感。實際上，其中的一些藥物已經用作尿失禁的預防劑(K，-E Anderson，Current concepts in the treat-ment of disorders of micturition，Drugs 35，477-494，1988)。所述的所有化合物的不利條件是它們明顯的副作用形象，它特別包括心血管和胃腸道疾病(出處同上)。
EP-A 0 524 781中公開了引起鉀通道開放的取代酰胺。這些取代的酰胺含有取代的或未取代的苯基或吡啶基來作為取代基。EP-A 0 617 010中公開了類似的活性酰胺，它們含有的取代基為取代的或未取代的苯基，吡啶基，嘧啶基，噠嗪基和吡嗪基。
本發明的目的是提供新的化合物，它具有影向鉀通道的顯著活性和減少副作用的高度選擇性并因此優越于已知化合物。
意外地，通過規定新的雜環酰胺含有的芳香雜環取代基為含硫的環或含硫和氮的環，使得實現本目的已成為可能。
因此，本發明提供式I的雜環酰胺。 其中A為具有5-10個碳原子的芳香或S-或N-芳香雜環，它可以是未取代的或由直鏈或支鏈C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羥基，鹵素或CF3，CF3CF2單或多取代的，Z為C＝0，SO或SO2基，A1為式IIa-IIc芳香雜環系 或式IIIa-IIIc芳香雜環系 R1和R2彼此獨立地為H，直鏈或支鏈(C1-C4)-烷基或氟化的烷基，并且R3為H，直鏈或支鏈(C1-C4)-烷基或可在生理條件下消除的基團。
式I化合物可以其光學異構體的混合物或者也可以對映體純品的任一狀態存在。
在式I中，A基為具有5-10個碳原子的芳香或S-或N-雜環芳香環，例如苯基，噻吩基，吡啶基，嘧啶基，噠嗪基或咪唑基。這些基團可以是未取代的或單或多取代的，例如通過直鏈或支鏈的C1-C4烷基如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基或叔丁基取代或通過直鏈或支鏈的C1-C4烷氧基如甲氧基，乙氧基，丙氧基或丁氧基取代。進一步，該芳香雜環可以被羥基，鹵素如氯、氟或溴、或被CF3、CF3CF2基單或多取代。
優選的化合物為A基是苯基，被鹵素，優選氯或溴，或CF3，CF3CF2單取代的苯基或是2或3-噻吩基的化合物。
特別優選的化合物為A基是未取代或被鹵素取代的苯基的化合物。Z基為羰基C＝0，亞硫酰基SO或磺酰基SO2。
優選的化合物為Z基是羰基或磺酰基的化合物A1基為式IIa-IIc的芳香雜環系 或式IIIa-IIIc的芳香雜環系 優選的化合物為A1基是芳香雜環系式IIb、IIIb、或IIIc的化合物。
特別優選的化合物為A1基是芳香雜環系式IIb的化合物。
R1和R2基彼此獨立地為H，直鏈或支鏈的C1-C4烷基，如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基或叔丁基，或氟化的烷基如CF3或CF3CF2基。
優選的化合物為R1和R2基彼此獨立地是直鏈或支鏈的C1-C4烷基或CF3基的化合物。
特別優選的化合物為R1和R2基彼此獨立地是甲基或CF3基的化合物。R3基是H，具有1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基，即甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基或叔丁基，或能在生理條件下消除的基團。能在生理條件下消除的基團的實例為CON基，乙酰基或乙酰基烷基。
另外，本發明提供制備式I化合物的方法， 該方法通過使用已知的偶合劑，將式IV化合物A-Z-A1-NH2和式V化合物偶合 并且，如果需要，將產生的光學異構體混合物分成其對映體。
也可以使用一種式V化合物的旋光體，在該旋光體形式下，得到的產物為式I化合物對映體純品的任一形式。
式IV和V化合物可從文獻中知道或可通過本專業技術人員熟悉的方法來制備。
例如，所用的偶合劑為肽合成中公知的偶合劑，其例子為SO-CL2，DCC，N，N-碳酰二咪唑等。
為實現本方法，將在適宜稀釋劑中的式IV化合物與偶合劑，例如亞硫酰氯，DCC或N，N-碳酰二咪唑接觸。適宜的稀釋劑為在反應條件下為惰性的稀釋劑或溶劑，例如N，N-二甲基乙酰胺，二甲基甲酰胺或四氫呋喃等等。反應溫度依賴于偶合劑的選擇并可在-25℃-100℃之間變化。然后加入式V化合物并且混合物在-25℃-100℃的溫度下反應，優選室溫下反應。隨后，通過萃取并除去溶劑來分離得到的反應產物，并且如果需要，可按公知的方法進一步純化，例如按重結晶和色譜法純化。
通過本專業技術人員熟悉的方法，例如通過與(1S)-(-)-莰烷酰氯或與(R)-(+)-甲基-芐基異氰酸酯偶合，拆開以旋光異構體的混合物形式存在的反應產物，然后，按常規方法，例如按重結晶或色譜法，分離得到的非對應體并消除保護基。
本發明化合物在影響鉀通道并減小副作用方面表現出顯著的活性。對那些通過影響鉀通道可治愈或改善的膀胱和輸尿管道疾病，有高度選擇性。
由于這些藥理性質，可以常規藥物制劑形式，單獨或與其它活性物質混合使用新化合物，作為藥物來治療通過影響鉀通道可治愈或改善的疾病。
另外，本發明提供，例如，以藥物制劑形式使用的藥物，該藥物包含與適于口服，腸道，非腸道和皮膚表面給藥的可藥用的，有機或無機賦形劑形成混合物的本發明式I化合物及其鹽，這些賦形劑的例子為水，明膠，阿拉伯膠，乳糖，淀粉，硬脂酸鎂，滑石粉，植物油，聚二醇，凡士林等等。
藥用制劑可以是固體形式，例如片劑，薄膜包衣片，其它包衣片，栓劑，膠囊劑或微囊，或液體形式，例如溶液，注射液，懸浮液或乳濁液，或具有緩釋活性物質的組合物形式。如果需要，可以消毒制劑和/或加輔劑，如防腐劑，穩定劑或乳化劑，或調節滲透壓的鹽，或緩沖劑。
尤其，藥用制劑可包含與其它有治療作用的物質相結合的本發明化合物。可將本發明化合物和這些物質一起與上述輔劑和/或賦形劑配制，得到復合制劑。
新的化合物可以每片0.1-200mg的比例存在于本發明組合物中，剩余部分為可藥用的填料。盡管依據治療病人的狀況，其它劑量是適宜的，但給予化合物的適宜劑量約為0.01-100mg/kg/天，新化合物也可以以多劑量給藥。
實施例1N-〔5-(苯基羰基)噻吩-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺在-15/-10℃下，將亞硫酰氯(110ul，1.51mmol)加到含3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(240mg，1.52mmol)的5mlN，N-二甲基乙酰胺中，并在該溫度下攪拌該混合物1小時，然后加入2-氨基-5-(苯基羰基)噻吩(200mg，0.983mmol)并將反應混合物平衡到室溫。反應結束后，將反應混合物傾入200ml水中并用乙酸乙酯3×100ml萃取。合并有機相，經硫酸鎂干燥后過濾并蒸掉溶劑。得到橙色油經閃式色譜法純化(洗脫劑50％v/v乙酸乙酯/石油醚(40/60))。產率290mg N-〔5-(苯基羰基)噻吩-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺(理論值的86％)的淡黃色結晶。M.P.169-170℃。
1H NMR(400MHz，CDCl3)1.74(s，3H)，6.89(d，J＝4.0Hz，1H)，7.41-7.46(m，2H)，7.48(d，J＝4.0Hz，1H)，7.51-7.56(m，1H)，7.73-7.78(m，2H)，10.02(s，1H).13CNMR(100MHz，CDCl3)20.0，75.6(q，2JC，F＝30.2Hz)，114.5，123.9(q，1JC，F＝285.8Hz)，128.5，129.0，132.2，134.6，134.7，138.0，147.3，166.3，189.5.
R.A.Darrall，F.Smith，M.Stacey and J.C.Tatlow J，Chem.Soc.1951，2329中描述了3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸的合成。
如下制備初始化合物5-(苯基羰基)噻吩-2-羧酸在-70℃，將1.6M正-丁基鋰的正己烷溶液(51.0ml，81.3mmol)滴加到二異丙胺(11.6ml，82.2mmol)的150ml純THF中，在-70℃攪拌15分鐘后，加入噻吩-2-羧酸(5.00g，39.0mmol)并將混合物保持在-70℃。45分鐘后，滴加芐腈(5.0ml，49mmol)并將混合物在-70℃攪拌90分鐘，平衡到室溫后，將反應混合傾入200ml水中并用200ml乙醚萃取，并棄去該有機相。用6N HCL將水相調至pH2并用乙醚2×200ml萃取。合并有機相，經硫酸鎂干燥并蒸掉溶劑。將殘余物懸浮在50ml 6N HCL溶液中并將懸浮液在80℃加熱1小時。濾出沉淀的結晶并真空干燥過夜。產率8.3g 5-(苯基羰基)噻吩-2-羧酸(理論值的92％)的淡黃色結晶。
M.p.176-177℃.
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)7.55-7.63(m，2H)，7.68-7.75(m，1H)，7.70(d，J＝3.9Hz，1H)，7.77(d，J＝3.9Hz，1H)，7.83-7.90(m，2H).13C NMR(100MHz，DMSO-d6)128.9，129.1，133.2，133.5，135.2，136.8，141.4，14 6.8，162.5，187.7.
〔5-(苯基羰基)噻吩-2-基〕氨基甲酸叔丁基酯將三乙胺(0.72ml，5.2mmol)和二苯基磷酰基疊氮化合物(1.1ml，5.1mmol)加到5-(苯基羥基)-噻吩-2-羧酸(0.99g，4.3mmol)的40ml純叔丁醇中。將反應混合物煮沸回流5小時。蒸掉溶劑。將殘留物用乙酸乙酯溶解并用水洗滌。用硫酸鎂干燥有機相后過濾并蒸掉溶劑。得到的固體用閃式色譜法純化(洗脫劑2.5％，v/v乙酸乙酯/石油醚(40/60))。產率400mg〔5-(苯基羰基)噻吩-2-基〕氨基甲酸叔丁基酯(理論值的31％)的橙色結晶。
M.p.185-186℃.
1H NMR(400MHz，CDCl3)1.54(s，9H)，6.58(d，J＝4.2Hz，1H)，7.43(d，J＝4.2Hz，1H)，7.43-7.48(m，2H)，7.52(bs，1H)，7.50-7.55(m，1H)，7.78-7.82(m，2H).
13C NMR(100MHz，CDCl3)28.2，82.7，111.1，128.3，128.9，131.6，133.6，134.5，138.6，150.1，151.6，188.1.
2-氨基-5-(苯基羰基)噻吩將〔5-(苯基羰基)噻吩-2-基〕氨基甲酸叔丁基酯(0.30g，0.99mmol)溶解在5ml三氟乙酸中并將溶液在室溫下攪拌2小時。蒸掉三氟乙酸并將殘留物在半飽和的碳酸氫鈉和二氯甲烷之間分配。分離兩相并用二氯甲烷萃取水相。合并有機相經碳酸鉀干燥后過濾并蒸掉溶劑。產率0.2g 2-氨基-5-(苯基羰基)噻吩(理論值的99％)的紅色結晶。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)5.99(d，J＝4.3Hz，1H)，7.18(bs，2H)，7.23(d，J＝4.3Hz，1H)，7.45-7.60(m，3H)，7.62-7.67(m，2H).實施例2N-〔5-(苯基羰基)噻唑-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺在-15/-10℃下，將亞硫酰氯(80ul，1.1mmol)加到3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(150mg，0.949mmol)的5ml N，N-二甲基乙酰胺中并將混合物在該溫度下攪拌1小時。加入2-氨基-5-(苯基羰基)-噻唑(130mg，0.636mmol)并平衡至室溫后，將反應混合物攪拌2.5小時，然后傾入100ml水中并用乙酸乙酯3×100ml萃取。合并有機相，用50ml飽和氯化鈉溶液洗滌，用硫酸鎂干燥后過濾并蒸掉溶劑，得到的油經閃式色譜法純化(洗脫劑33％v/v乙酸乙酯/石油醚(40/60))，得到N-〔5-(苯基羰基)噻唑-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺(0.10g，46％)的淡黃色結晶。將這些結晶在二氯甲烷中加熱浸提。產率50mg標題化合物的白色結晶。M.p.193-194℃.1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.62(s，3H)，7.56-7.61(m，3H)，7.67-7.72(m，1H)，7.84-7.88(m，2H)，8.17(s，1H).
如下制備初始化合物噻唑-2-基氨基甲酸叔丁基酯將2-氨基噻唑(5.00g，49.9mmol)和焦碳酸二叔丁基酯(23.0ml，100mmol)的250ml純甲醇液煮沸回流2小時。另外，滴加焦碳酸二叔丁基酯(11.5ml，50.1mmol)并將混合物再加熱回流2小時。將反應混合物溶解在250ml甲醇中并與活性炭一起攪拌，過濾混合物并用二氯甲烷洗滌活性炭。蒸掉合并有機相中的溶劑后，用己烷加熱浸提殘留物。產率9.41g噻唑-2-基氨基甲酸叔丁基酯(理論值的94％)的淡黃色結晶。
M.p.178-179℃(己烷)1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.48(s，9H)，7.13(d，J＝3.8Hz)，1H)，7.35(d，J＝3.8Hz，1H).13C NMR(100MHz，DMSO-d6)28.0，81.1，112.9，137.9，152.9，159.9.
〔5-(苯基羰基)噻唑-3-基〕氨基甲酸叔丁基酯在-70℃將1.6M正丁基鋰的正己烷(6.90ml，11.0mmol)溶液滴加到二異丙胺(1.55ml，11.0mmol)的100ml純THF中。在-70℃下攪拌30分鐘后，滴加芐乙腈(0.60ml，5.9mmol)并將混合物在-70℃下攪拌60分鐘。反應混合物平衡到室溫后攪拌2小時。將反應混合物傾入300ml半飽和的氯化銨溶液中并用二氯甲烷4×100ml萃取。合并的有機相經硫酸鎂干燥，過濾并蒸掉溶劑。將粗品(1.40g)懸浮在150ml乙醚中并加入100ml 0.1NHCL溶液。將反應混合物煮沸回流1.5小時。反應混合物溶解在100ml 0.1N HCL溶液中并用二氯甲烷4×100ml萃取。合并有機相經硫酸鎂干燥后過濾并蒸掉溶劑。產率1.15g〔5-(苯基羰基)噻唑-2-基〕氨基甲酸叔丁基酯(理論值的76％)的黃色結晶。
M.P.232-233(分解)1H NMR(400MHz，CDCl3+10％DMSO-d6)1.36(s，9H)，7.26-7.32(m，2H)，7.36-7.41(m，1H)，7.58-7.63(m，2H)，7.68(s，1H)，11.26(bs，1H).13C NMR(100MHz，CDCl3+10％DMSO-d6)28.1，82.7，128.4，128.5，131.8，132.1，138.1，146.7，152.5，166.6，187.4.
2-氨基-5-(苯基羰基)噻唑將〔5-(苯基羰基)噻唑-2-基〕氨基甲酸叔丁基酯(0.82g，2.70mmol)溶解在25ml三氟乙酸中并將溶液在室溫下攪拌1.5小時。蒸掉三氟乙酸并將殘留物在半飽和的碳酸氫鈉溶液和二氯甲烷中分配。分離兩相并用二氯甲烷萃取水相。合并有機相，用半飽和的碳酸氫鈉洗滌，經碳酸鉀干燥后過濾并蒸掉溶劑。產率0.37g 2-氨基-5-(苯基羰基)噻唑(理論值的67％)的黃色結晶。
M.p.147-149℃.
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)7.48-7.53(m，2H)，7.57-7.62(m，1H)，7.62(s，1H)，7.68-7.73(m，2H).13C NMR(100MHz，DMSO-d6)127.1，128.3，128.7，131.7，13 8.4，151.0，174.9，185.5.實施例3N-〔5-(苯基羰基)-1，3，4-噻唑-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺在-20/-15℃下，將亞硫酰氯(80ul，1.1mmol)加到3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(157mg，0.993mmol)的5.0mlN，N-二甲基乙酰胺中并將混合物在-15/-10℃下攪拌1小時。加入2-氨基-5-(苯基羰基)-1，3，4-噻二唑(127.7mg，0.622mmol)并平衡至室溫后并且反應結束后，將反應混合物傾入80ml水中并用乙酸乙酯3×25ml萃取。合并有機相，經硫酸鎂干燥后過濾并蒸掉溶劑。得到的油經閃式色譜法純化(洗脫劑50％v/v乙酸乙酯/石油醚(40/60))。產率160mg N-〔5-(苯基羰基)-1，3，4-噻二唑-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺(理論值的75％)的米色結晶。
M.p.182-183℃.
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.65(s，3H)，7.60-7.65(m，2H)，7.62(bs，1H)，7.73-7.78(m，1H)，8.33-8.37(m，2H)，10.8(bs，1H).13C NMR(100MHz，DMSO-d6)19.8，75.3(q，2JC，F＝29.2Hz)，125.9(q，1JC，F＝285.8hz)，128.8，130.7，134.3，134.9，161.9，163.6，169.4，184.2.G.Werber，F.Buccheri and M.L.Marino，J.Heterocyclic Chem，12(1975)，581中描述了2-氨基-5-(苯基羰基)-1，3，4-噻二唑。實施例4N-〔5-(苯基磺酰基)噻吩-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺在-15/-10℃下，將亞硫酰氯(80ul，1.1mmol)加到3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(170mg，1.08mmol)的5ml N，N-二甲基乙酰胺中并將混合物在該溫度下攪拌1小時。加入2-氨基-5-(苯基磺酰基)噻吩(170mg，0.710mmol)并平衡至室溫后并且反應結束后，將反應混合物傾入200ml水中并用乙酸乙酯3×100ml萃取。合并有機相，經硫酸鎂干燥后過濾并蒸掉溶劑。得到的橙色油經閃式色譜法純化(洗脫劑50％V/V乙酸乙酯/石油醚(40/60))。產率202mg N-〔5-(苯基磺酰基)噻吩-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺(理論值的75％)的灰色結晶。
M.p.161-163℃.
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.57(s，3H)，7.11(d，J＝4.2Hxz，1H)，7.58-7.70(m，5H)，7.90-7.93(m，2H).13C NMR(100MHz，DMSO-d6)19.9，75.3(q，2JC，F＝29.2Hz)，114.3，125.9(q，1JC，F＝285.8Hz)，126.6，129.8，131.4，132.5，133.5，142.6，147.1，167.3.如下制備初始化合物5-(苯基磺酰基)噻吩-2-羧酸在-78℃下，將1.6M正丁基鋰的正己烷溶液(51.0ml，81.3mmol)滴加到二異丙基胺(11.6ml，82.2mmol)的150ml純THF中。在-70℃攪拌30分鐘后，加入噻吩-2-羧酸(5.00g，39.0mmol)并將混合物保持在-78℃60分鐘。反應混合物平衡到室溫后，將其傾入400ml 1N HCL溶液中并用二氯甲烷3×200ml萃取。合并有機相，經硫酸鎂干燥后，過濾并蒸掉溶劑。得到的橙色油(14.59g)溶解在150ml甲醇中，并在0℃下滴加Oxone(113.87g，185.22mmol)的450ml水溶液。反應混合物平衡至室溫后，連續攪拌3小時。用乙醚3×200ml萃取反應混合物。合并有機相，用100ml 1N HCL溶液洗滌，經硫酸鎂干燥后過濾并蒸掉溶劑。得到的黃色結晶(9.76g)懸浮在二氯甲烷中。濾出結晶并用冷的二氯甲烷稍加洗滌。產率4.80g 5-(苯基磺酰基)噻吩-2-羧酸(理論值的46％)的白色結晶。
M.p.184-185℃.
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)7.64-7.69(m，2H)，7.71(d，J＝4.0Hz，1H)，7.72-7.77(m，1H)，7.85(d，J＝4.0Hz，1H)，8.00-8.05(m，2H).13C NMR(100MHz，DMSO-d6)127.4，130.1，133.4，134.2，134.5，140.7，142.2，147.1，161.8.
〔5-(苯基磺酰基)噻吩-2-基〕氨基甲酸叔丁基酯
將三乙胺(0.62ml，4.4mmol)和二苯基磷酰基疊氮化物(0.97ml，4.5mmol)加到5-(苯基磺酰基)噻吩-2-羧酸(1.00g，3.7mmol)的40ml純叔丁醇中。將反應混合物煮沸回流5小時。蒸掉溶劑。將殘留物溶解在乙酸乙酯中并用水洗滌。經硫酸鎂干燥有機相后過濾并蒸掉溶劑。得到的墨綠色油經閃式色譜法純化(洗脫劑33％v/v乙酸乙酯/石油醚(40/60))。產率520mg〔5-(苯基磺酰基)噻吩-2-基〕氨基甲酸叔丁基酯(理論值的41％)的白色結晶。
M.p.170-171℃.
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.47(s，9H)，6.53(d，J＝4.3Hz，1H)，7.56d，J＝4.3Hz，1H)，7.57-7.68(m，3H)，7.87-7.92(m，2H)，11.13(bs，1H).13C NMR(100MHz，DMSO-d6)28.0，81.6，110.2，126.5，129.0，129.7，133.3(2×C)，142.9，150.5，152.5.
2-氨基-5-(苯基磺酰基)噻吩將〔5-(苯基磺酰基)噻吩-2-基〕氨基甲酸叔丁基酯(0.37g，1.1mmol)溶解在5ml三氟乙酸中并將溶液在室溫下攪拌2小時。蒸掉三氟乙酸并將殘留物在半飽和的碳酸氫鈉溶液和二氯甲烷之間分配。分離兩相并用二氯甲烷萃取水相。合并有機相，經碳酸鉀干燥后過濾并蒸掉溶劑。產率0.20g 2-氨基-5-(苯基磺酰基)噻吩(理論值的76％)的淡黃色結晶。
M.p.144-145℃.
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)5.90(d，J＝4.0Hz，1H)，6.81(bs，2H)，7.32(d，J＝4.0Hz，1H)，7.55-7.65(m，3H)，7.79-7.84(m，2H).13C NMR(100 MHz，DMSO-d6)104.4，117.9，126.1，129.5，132.7，136.5，143.8，165.1.實施例5N-〔5-(苯基羰基)-1，3，4-噻二唑-2-基〕-2-羥基-2-甲基丙酰胺在-20/-15℃下，將亞硫酰氯(60ul，0.82mmol)加到2-羥基異丁酸(82.9mg，0.796mmol)的5.0ml N，N-二甲基乙酰胺中并將混合物在-15/-10℃下攪拌1小時，加入2-氨基-5-(苯基羰基)-1，3，4-噻二唑(97.5mg，0.475mmol)并將混合物平衡至室溫后，攪拌過夜。將反應混合物傾入75ml水中并用乙酸乙酯3×25ml萃取。合并有機相，經硫酸鎂干燥后過濾并蒸掉溶劑。得到的油經閃式色譜法純化(洗脫劑33％v/v乙酸乙酯/石油醚(40/60))。產率30.1mg N-〔5-(苯基羰基)-1，3，4-噻二唑-2-基〕-2-羥基-2-甲基丙酰胺(理論值的22％)的淡黃色結晶。
M.p.189-190℃.
1H NMR(400MHz，CDCl3)1.65(s，6H)，7.55-7.60(m，2H)，7.68-7，73(m，1H)，8.41-8.45(m，2H).13C NMR(100MHz，CDCl3)27.6，74.1，128.6，130.9，134.2，134.9，163.4，164.2，175.7，184.0.實施例6N-〔5-(苯基羰基)-1，3，4-噻二唑-2-基〕-2-羥基-2-甲基丁酰胺在-20/-15℃下，將亞硫酰氯(60ul，0.82mmol)加到2-羥基-甲基丁酸(96.0mg，0.813mmol)的5.0ml N，N-二甲基乙酰胺中并將混合物在-15/-10℃下攪拌1小時，加入2-氨基-5-(苯基羰基)-1，3，4-噻二唑(102.3mg，0.499mmol)并將反應混合物平衡至室溫后，攪拌過夜。將反應混合物傾入100ml水中并用乙酸乙酯3×25ml萃取。合并有機相，經硫酸鎂干燥后過濾并蒸掉溶劑。得到的油經閃式色譜法純化(洗脫劑33％v/v乙酸乙酯/石油醚(40/60))。產率20.0mg N-〔5-(苯基羰基)-1，3，4-噻二唑-2-基〕-2-羥基-2-甲基丁酰胺(理論值的13％)的淡黃色結晶。
1H NMR(400MHz，CDCl3)0.98(t，J＝7.4Hz，3H)，1.61(s，3H)，1.80-1.90(m，1H)，2.00-2.10(m，1H)，7.55-7.60(m，2H)，7.68-7.73(m，1H)，8.41-8.45(m，2H).13C NMR(100MHz，CDCl3)7.8，25.8，33.3，76.9，128.6，130.9，134.2，134.9，163.3，164.1，175.4，184.0.實施例7N-〔5-(4-甲基苯基磺酰基)噻吩-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺在-15/-10℃下，將亞硫酰氯(70ul，1.51mmol)加到3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酸(140mg，0.89mmol)的10ml N，N-二甲基乙酰胺中并將混合物在該溫度下攪拌1小時，隨后，加入2-氨基-5-(4-甲基苯基磺酰基)噻吩(145mg，0.57mmol)并將反應混合物平衡至室溫。反應結束后，將反應混合物傾入200ml水中并用乙酸乙酯3×100ml萃取。合并有機相，經硫酸鎂干燥后過濾并蒸掉溶劑。得到的棕色油經閃式色譜法純化(洗脫劑50％v/v乙酸乙酯/石油醚(40/60))。產率111mg N-〔5-(4-甲基苯基磺酰基)噻吩-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺(理論值的50％)的淡棕色結晶。
M.p.191-193℃1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.57(s，3H)，2.37(s，3H)，7.10(d，J＝4.2Hz，1H)，7.41(d，J＝7.9Hz，2H)，7.59(bs，1H)，7.61(d，J＝4.2Hz，1H)，7.79(d，J＝7.9Hz，2H).
類似地制備下列化合物實施例8N-〔5-(4-氯苯基磺酰基)-噻吩-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.58(s，3H)，7.13(d，J＝4.0Hz，1H)，7.66-7.70(m，3H)，7.90-7.93(m，2H).實施例9N-〔5-(4-氟苯基磺酰基)-噻吩-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺1H NMR(400MHz，DMSO-d6)1.58(s，3H)，7.12(d，J＝4.2Hz，1H)，7.41-7.46(m，2H)，7.60(s，1H)，7.67(d，J＝4.2Hz，1H)，7.96(m，2H)，8.01(m，2H).實施例10N-〔5-(2-噻吩基磺酰基)-2-噻吩基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺1H NMR(400MHz，CDCl3)1.71(s，3H)，6.70(d，J＝4.2Hz，1H)，7.03(dd，J＝4.9，3.8Hz，1H)，7.50(d，J＝4.2Hz，1H)，7.59(dd，J＝5.0，1.3Hz，1H)，7.64(dd，J＝3.9，1.3Hz，1H)，9.68(bs，1H).
13C NMR(100MHz，CDCl3)20.2，75.6(q，2JC，F＝30.2Hz)，112.9，123.6(q，1JC，F＝285.8Hz)，127.9，131.4，133.0，133.7，133.9，143.7，145.9，165.6.實施例11N-〔5-吡啶基(2-吡啶基磺酰基)-2-噻吩基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺
1H NMR(400MHz，CDCl3)1.69(s，3H)，6.79(d，J＝4.0Hz)，7.43-7.47(m，1H)，7.57(d，J＝4.0Hz)，7.90(td，J＝8.0，1.2Hz，1H)，8.07(d，J＝8.0Hz，1H)，8.59-8.62(m，1H)，10.11(bs，1H).實施例12(-)-N-〔5-(苯基磺酰基)噻吩-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺在0℃下，將三乙胺(0.81ml，5.81mmol)和少量N，N-二甲基-4-氨基-吡啶結晶加到N-〔5-(苯基磺酰基)-噻吩-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺(2.00g，5.27mmol)的100ml二氯甲烷中。加入(IS)-(-)-莰烷酰氯(1.26g，5.81mmol)的20ml二氯甲烷液后，將反應混合物平衡至室溫。反應結束后，將反應混合物傾入200ml水中并用二氯甲烷2×50ml萃取。合并有機相，經硫酸鎂干燥后過濾并蒸掉溶劑。非對映體的混合物(灰色泡沫體，3.06g)經閃式色譜法純化(洗脫劑9％v/v乙醚/二氯甲烷)。分離先洗脫下來莰烷酸酯的白色泡沫體(0.74g，產率理論值的25％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)1.01(s，3H)，1.07(s，3H)，1.11(s，3H)，1.71(ddd，J＝13.3，9.3，4.2Hz，1H)，1.95(ddd，J＝13.3，10.8，4.6Hz，1H)，2.03(s，3H)，2.12(ddd，J＝13.6，9.3，4.5Hz，1H)，2.43(ddd，J＝13.6，10.8，4.2Hz，1H)，6.75(d，J＝4.2Hz，1H)，7.45-7.57(m，4H)，7.91-7.95(m，2H)，9.27(bs，1H).
13C NMR(100MHz，CDCl3)9.55，16.42，16.50，16.55，28.71，30.79，54.58，54.95，81.62(q，2JC，F＝30.8Hz)，90.63，113.38，122.36(q，1JC，F＝285.8Hz)，127.13，129.32，131.35，133.18，134.36，142.34，145.54，160.93，164.67，177.61.光學純度＞99％de(Chiral HPLC，Chiral OD-H柱10％v/v乙醇/己烷，流速1.0ml/min)。
在室溫下，將2M NaOH(0.60ml，1.2mmol)溶液加到先洗脫下來的莰烷酸酯的30ml甲醇液中。反應結束后，蒸掉溶劑。將得到的油溶解在250ml二氯甲烷中并將溶液傾入250ml水中和用二氯甲烷3×100ml萃取。合并有機相，經硫酸鎂干燥后過濾并蒸掉溶劑。得到的白色結晶用己烷/乙酸乙酯重結晶。產率340mg(-)-N-〔5-(苯基磺酰基)噻吩-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺(理論值的77％)的白色結晶。M.P.189-190℃，〔α〕D＝-46.5°(C 0.94，甲醇)，光學純度＞99％ee(Chiral HPLC，Chiral OD-H柱，10％v/v乙醇/己烷，流速1.0ml/min)H NMR和C NMR數據與那些外消旋物質相同。實施例A體外對膀胱肌的作用在下述特別開展的體外實驗中，可以證明本發明化合物對膀胱肌的作用。在這些實驗中，IC50表示收縮作用減小50％時物質的濃度。
雄性白化荷蘭豬，體重約400g，通過打擊頸部無痛處死并迅速放血。打開腹腔并小心切除膀胱。將其放在充滿Krebs溶液的佩特里細菌培養皿中并除掉周圍連接物和脂肪組織。準備兩條水平向的組織。用兩條線將兩條組織的兩端系住，并將其懸浮在器官浴中。其底部固定在鉤狀物上，頂部固定在能準確測定收縮強度為0-10g的電力換轉器上。通過橋放大器來放大測定的收縮并用熱標繪器記錄。得到的信號也可以經電線接到另一標繪器電路中，以便確定同期收縮。
用37℃，通入O2/CO2混合氣泡的Krebs溶液充滿器官浴，并且該溶液具有如下組成(mmol/l)NaCL 118.4；KCL 4.7；Ca-CL22.5；KH2PO41.2；MgSO41.2；NaHCO325；葡萄糖11。
用約0.5g的基礎張力伸展兩條組織。平衡約30分鐘后，其中一條每分鐘用嵌入電極電刺激一次(刺激持續期2秒鐘，30Hz，0.5ms的脈沖寬度，10伏特)來觸發短期收縮。另一條經過去極化(向器官浴中加入15mM KCL)使其產生同期收縮。由電刺激觸發的收縮和電去極化引起的同期收縮及兩條膀胱肌上所出現的一切都迅速到達停滯期。當這種停滯期一到達(“100％值”)，就向器官浴中加入試驗物質，開始以低濃度，例如10M，然后以有規律的間隔增加劑量，直到收縮減弱或最終濃度達到10M。每種試驗物質按此方法試驗2-4次。
為了評價，每次實驗中，加入每種試驗濃度后，測定繪圖紙上記下的收縮高度。用此方法，根據加入物質前收縮的原始高度(100％)可以計算IC50值。所有IC50值見表1A列。
實施例B對脈管肌肉的作用主動脈環雄性鼠，重約300g，通過打擊頸部無痛處死并迅速放血。打開胸腔并小心地切除主動脈。將其放在充滿Krebs溶液的佩特里細菌培養皿中并除去周圍連接物和脂肪組織。準備兩個環形主動脈。將其懸浮在器官浴中。其底部系在鉤狀物上，頂部接到能準確測定收縮強度為0-10g的電力轉換器上。通過橋放大裝置放大測定的收縮并用熱標繪器記錄。
用37℃，通入O2/CO2混合氣泡的Krebs溶液充滿器官浴，并且該溶液具有如下組成(mmol/l)NaCL 118.4；KCL 4.7；Ca-CL22.5；KH2PO41.2；MgSO41.2；NaHCO325；葡萄糖11。
用約0.5g的基礎張力伸展主動脈環。平衡約30分鐘后，通過去極化(向器官浴中加入25mM KCL)引起主動脈環收縮。由去極化觸發的主動環的收縮迅速到達停滯期。這種停滯期一到達(“100％值)，就向器官浴中加入試驗物質，開始以低濃度，例如10M，然后以有規律的間隔增加劑量，直到收縮減弱或最終濃度達到10M。每種試驗物質按此方法試驗2-4次。
為了評價，每次實驗中，加入每種試驗濃度的物質后，測定繪圖紙上記下的收縮高度。用此方法，根據加入物質前收縮的原始高度(100％)可以計算IC50值。IC50值見表1B列。
實施例C體內對血壓的作用神志清醒的鼠雄性Sprague-Dawleg鼠(Charles River，Sulzfeld，Germany)，重約400g，為了能用常規壓力轉換器(例如StathamP23d)連續測定動脈血壓，在實驗開始前，在無菌條件下，將一導管植入其頸動脈中。在實驗前一天，老鼠禁食過夜。
在實驗的當天，將老鼠帶入實驗室并記錄其血壓和心率約30分鐘。然后通過胃管，經口腔給予懸浮在0.5％甲基纖維中的試驗物質(體積3ml/kg體重)并測定接下來6小時內的血壓和心率。計算測定值對初值改變的百分數并測定3-4組類似處理的動物的該值。結果見表1C列。
表1AB C化合物 IC50IC50選擇性 劑量舒張壓減小為初值的百分數mol/lmol/lmg/kg15 3060120min.
11.0×10-42.5×10-60.025 6 3 2 421.0×10-42.0×10-50.2 62 8 535.0×10-51.0×10-50.2 63 2 441.7×10-61.2×10-60.7 61 5 4 618 0 8 1015v1.0×10-66.5×10-80.065 153 494026表1體外，上述物質對膀胱組織條(A列)和主動脈環(B列)的松馳作用。膀胱的IC50與主動脈的IC50之比得到選擇性。C列列出口服給予物質后15，30，60和120分鐘時體內的低血壓作用。參考物質(化合物V)CromaRalim的相應值顯示其對照。
權利要求
1.式I雜環酰胺 其中A為具有5-10個碳原子的芳香或S-或N-雜環芳香環，該環可以是未取代的或由直鏈或支鏈的C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羥基，鹵素或CF3，CF3CF2單或多取代的，Z為C＝0，SO或SO2基，A1為式IIa-IIc雜環芳香系 式IIIa-IIIc雜環芳香系 R1和R2彼此獨立地為H，直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基或氟化的烷基，并且R3為H，直鏈或支鏈的(C1-C4)-烷基，乙酰基，烷基乙酰基或在生理條件下可消除的基團。
2.權利要求1的式I雜環酰胺，其中A為未取代的苯基或由鹵素，CF3或CF3CF2取代的苯基，或為2-或3-噻吩基。Z為C＝0或SO2基，A1是雜環芳香系中的式IIb、IIIb、或IIIc。R1和R2彼此獨立地為具有1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基或CF3基。并且R3為H或具有1-4個碳原子的直鏈或支鏈烷基。
3.權利要求1的式I雜環酰胺，其中A為未取代的苯基或由鹵素，CF3或CF3CF2取代的苯基，或為2-或3-噻吩基。Z為C＝0或SO2基，A1為雜環芳香系中的式IIb，R1為甲基，R2為CF3，并且R3為H。
4.N-〔5-(苯基磺酰基)-噻吩-2-基〕-3，3，3-三氟-2-羥基-2-甲基丙酰胺。
5.權利要求1-4中任一雜環酰胺，其中化合物以其對映體純品形式存在。
6.權利要求1-4中任一雜環酰胺，其中化合物以其光學異構體混合物形式存在。
7.式I化合物的制備方法 該方法包括用公知的偶合劑將式IV化合物和式V化合物偶合。A-Z-A1-NH2IV 并且，如果需要，將產生的光學異構體的混合物分離成其對映體。
8.權利要求7的方法，其中使用式V化合物的旋光異構體。
9.含權利要求1中式I雜環酰胺和常規藥用輔劑和/或賦形劑和/或稀釋劑的藥物制劑。
10.使用權利要求1中式I雜環酰胺來治療通過影響鉀通道可治愈或改善的疾病。
11.使用權利要求1中式I雜環酰胺來治療膀胱或輸尿管疾病。
12.使用權利要求1中式I雜環酰胺來治療失禁。
全文摘要
本發明涉及式I雜環酰胺，制備這些酰胺的方法和以它們為活性物質來治愈和改善通過影響鉀通道可治療的疾病。其中A，Z，A
文檔編號C07D277/46GK1132204SQ9512021
公開日1996年10月2日 申請日期1995年12月4日 優先權日1994年12月5日
發明者P·埃施, R·托瓦爾特, F·羅文斯基 申請人:哈夫斯倫德·尼科美藥物股份公司