專利名稱：一種提取卵黃中抗體的新方法
技術領域：
本發明屬卵黃中抗體的提取方法。
卵黃能富集機體所產生的抗體，其中抗體的濃度與血清中抗體濃度相近或略高，且卵黃比血清易獲取，因此往往采用含抗體的卵黃進行人工被動免疫接種。但是由于卵黃中含有大量卵磷脂等脂質，大大增加了卵黃的粘稠度，將卵黃脂質與水溶性蛋白質分開是能否更有效地利用其中抗體的關鍵。近年來，在這方面的研究，主要有PEG提取法(Polson et al.，1985)，生物膠提取法(Hajime HATTA et al.，1990)，乙醇超臨界CO2脫脂法(八田一等，1994)等，雖然在收率及純度上較好，但難以解決試劑用量大、毒性大、操作繁瑣及需高速離心等難題，因此未能在生產中推廣應用。
本發明是對由卵黃中提取抗體的方法的創新，旨在簡化卵黃抗體的提取程序，提高回收率，保持較高的活性，降低成本，且具有一定的防腐作用。
本發明的要點是，對產蛋雞免疫接種傳染性法氏囊病病毒等抗原，經2～3次免疫接種后，將含高效價抗體的卵黃，用磷酸鹽緩沖液(PBS)等稀釋(卵黃∶稀釋液＝1∶3—6)，按0.3—1.2％的比例加入甲醛溶液(含甲醛37％)，混勻，置于-10℃以下溫度經4—10小時凍結，取出快速解凍，卵黃呈膠凍狀，并可出現少量清亮的液體。將卵黃擠壓，即可有液體流出，并將余渣用稀釋液(原體積的1/4)漂洗，收集兩次液體，即為所制備的抗體溶液，凍存。
本發明提取工藝流程如下 本發明各成份的添加比例如下卵黃1份稀釋液 3—6份甲醛溶液0.3—1.2％(占卵黃＋稀釋液之和)制備過程無需特殊或貴重的儀器，所用甲醛的量很少，也不需其他化學藥品，因此，實現本發明的費用很低。獲得的卵黃中抗體活性高，注射于動物體易吸收，副作用小，保護力強，易保存。本發明克服了以往卵黃抗體提取法的不足之處，具有很大的實用價值。
實施例將高免卵黃液1份，加0.01M pH7.4磷酸鹽緩沖液3份，混勻，再加入0.5％甲醛溶液(甲醛含量為37％)，混勻，置-10℃條件下結冰，解凍，去除卵黃固形物，即為富含抗體的提取物。
權利要求
1.一種提取卵黃中抗體的新方法，其特征在于應用甲醛溶液與卵黃、稀釋液磷酸鹽緩沖液混勻，將其置于低溫下凍結，然后快速解凍提取，即為富含抗體的提取物。
2.根據權利要求1所述的一種提取卵黃中抗體的新方法，其特征在于濃度為37％的甲醛溶液占稀釋卵黃液總量的0.3—1.2％。
3.根據權利要求1所述的一種提取卵黃中抗體的新方法，其特征在于卵黃與稀釋液的添加比例為1∶3—6。
全文摘要
本發明提供了一種提取卵黃中抗體的新方法。該方法是將高免卵黃用磷酸鹽緩沖液等稀釋液稀釋(卵黃∶稀釋液＝1∶3-6)，加入0.3-1.2％甲醛溶液(含37％甲醛)，混勻，置于-10℃以下溫度，經4-10小時凍結，然后快速解凍，將固形物去除，收集液體，即為富含抗體的提取物。本發明工藝簡單可行。按本發明提取的抗體，純度高，收獲率高，活性強，注射于動物體內易吸收，防治效果良好。因此，該方法易于推廣應用。
文檔編號C07K1/14GK1117974SQ95110458
公開日1996年3月6日 申請日期1995年5月19日 優先權日1995年5月19日
發明者柴家前, 陳鑫磊, 姚永秀, 張紹學, 牛鐘相 申請人:山東農業大學