專利名稱：用于治療愛滋病的人類免疫缺陷病毒蛋白酶抑制劑的制作方法
一種指示人類免疫缺陷病毒(HIV)的還原病毒是稱之為獲得性免疫缺陷綜合癥(愛滋病;AIDS)這一復雜疾病的致病因素，它是還原病毒中慢病毒(Lentivirus)家族中的一員。M.A.Gonda，F.Wong-Staal，R.C.Gallo，“SequenceHomologyandMorphologicalSimilarityofHTLVIIIandVisnaVirus，APathogenicLentivirus”，Science，227，173，(1985);P.Sonigo，N.Alizon，等人“NucleotideSequencsoftheVisnaLentivirusRelationshiptotheAIDSVirus”，Cell，42，369，(1985)。復雜的愛滋病包括免疫系統的進行性破壞和中樞及周圍神經系統的變性。HIV病毒以前是已知的或稱為LAV，HTLV-III或ARV。
還原病毒復制的共同特征是通過病毒編碼的蛋白酶作用于前體多蛋白的翻譯后進程以產生病毒組合和發揮作用所需的成熟的病毒蛋白。這一進程的阻斷似乎是阻止了正常感染的病毒的產生。未加工的結構蛋白質也已經從病人體內分離出的非感染的HIV株克隆中觀察到。該結果表明HIV蛋白酶抑制作用是一種預防或治療愛滋病以及預防或治療HIV感染的可行方法。
HIV基因組對稱為gag和pol的結構蛋白質前體編碼，該前體被加工后產生蛋白酶、逆轉錄酶和細胞核內酶/整合酶。該蛋白酶進一步裂解gag和gag-pol多蛋白，就得到病毒核的成熟的結構蛋白。
人們正致力于通過能加工產生還原病毒蛋白酶、逆轉錄酶和細胞核內酶/整合酶的結構蛋白前體來控制HIV。例如，目前所用的治療劑AZT是病毒逆轉錄酶的抑制劑。H.Mitsuya，NS.Broder，“InhibitionoftheInVitroInfeetiivityinCytopathicEffectsofHTLVIII”，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，83，1911(1986)。
人們也已針對HIV蛋白酶抑制劑進行努力的研究。例如，歐洲專利申請(EPA)361341;EPA346847;EPA402646;和EPA337714公開了據說可以用作HIV蛋白酶抑制劑的化合物。
遺憾的是，許多已知的HIV蛋白酶抑制劑具有毒性，缺乏生物有效性或短的體內半衰期。
盡管已經認識到治療的潛力與蛋白酶抑制劑有關并且為此已做了深入的研究，但至今還沒有找到可行的治療劑。
因此，本發明的主要目的是提供一種新的HIV蛋白酶抑制劑，它們可用于治療愛滋病，并不具有如上所述的缺點。
本發明涉及式Ⅰ化合物和其藥學上可接受的鹽，它們可以抑制人體免疫缺陷病毒(HIV)1型(HIV-1)和2型(HIV-2)編碼的蛋白酶。這些化合物可用于治療或預防HIV感染并用于治療或預防由此而得的免疫缺陷綜合癥(愛滋病)。本發明化合物，藥學上可接受的鹽和藥用組合物可單獨使用或與其它抗病毒劑、免疫調節劑、抗生素或疫苗聯合使用。本發明也公開了治療或預防愛滋病的方法，治療或預防HIV感染的方法及抑制HIV復制的方法。
本發明涉及在HIV感染細胞中、在對HIV感染敏感的細胞中或在有些需要的靈長目動物中抑制HIV復制的方法，因此可治療或預防HIV感染和愛滋病，該方法包括服用式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽，
其中R是C1-C6烷基，環烷基，雜環基，不飽和雜環基，芳基，環烷基(C1-C4)烷基，雜環基(C1-C4)烷基，不飽和雜環基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基，或具有式-A-(CH2)q-R0的結構，其中A是-O-，-NH-或-S-;
q是0，1，2或3;
R0是環烷基，芳基，雜環基或不飽和雜環基;
X是
其中R1是芳基，環烷基，雜環基或不飽和雜環基;
R2是氫或C1-C4烷基;
R3是氨基酸側鏈，-CH2CH3，-CH2CH2CH3，-CH2(CH2)2CH3，-C(CH3)3，氰基(C1-C4)烷基，不飽和雜環(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-(CH2)s-A°-(CH2)r-R4或-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的結構，其中s是1，2，3或4;
r是0，1，2或3;
A°是-O-，-NH-或-S-;
R4是C1-C6烷基，環烷基，芳基，雜環基，或不飽和雜環基;
R5是環烷基，芳基，雜環基或不飽和雜環基;
j是0，1，2，3或4;
k是0或1;并且y是-O-，-N(R2)-或-S-。
本發明也涉及式Ⅰ化合物或其藥物上可接受的鹽，其中X和R如上定義。
本發明進一步提供了藥物制劑，它包括將式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽與藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑混合。
此外，本發明提供了式Ⅰa的有用中間體
或式Ⅰb的有用中間體
其中R是C1-C6烷基，環烷基，雜環基，不飽和雜環基，芳基，環烷基(C1-C4)烷基，雜環基(C1-C4)烷基，不飽和雜環基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基，或具有式-A-(CH2)q-R0的結構，其中A是-O-，-NH-或-S-;
q是0，1，2或3;
R0是環烷基，芳基，雜環基或不飽和雜環基;以及J是鹵化物，甲磺酸鹽，苯磺酸鹽，對甲苯磺酸鹽，乙酸鹽或三氟乙酸鹽。
本發明提供了如上所述的新的式Ⅰ化合物，它們可用于治療和/或預防HIV感染和/或愛滋病。
本文所說的所有溫度是攝氏度。本文所用的所有的測量單位是重量單位，除了用體積單位的液體。
本文所用的術語“C1-C6烷基”代表直鏈或支鏈的具有1至6個碳原子的烷基。典型的C1-C6烷基包括甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，新戊基，己基等。術語“C1-C6烷基”包括了術語“C1-C4烷基”的定義。
“鹵”代表氯，氟，溴或碘。
“鹵(C1-C4)烷基”代表直鏈或支鏈的具有1至4個碳原子且有1-3個鹵原子與其相連的烷基。典型的鹵(C1-C4)烷基包括氯甲基，2-溴乙基，1-氯異丙基，2，3-二氟丙基，3-溴丁基，3-氯異丁基，碘叔丁基，三氟甲基等。
“氰基(C1-C4)烷基”代表具有1至4個碳原子且有一個氰基與其相連的直鏈或支鏈烷基。典型的氰基(C1-C4)烷基包括氰甲基，2-氰乙基，3-氰丙基，2-氰異丙基，4-氰丁基等。
“C1-C4烷硫基”代表與硫原子相連的具有1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基。典型的C1-C4烷硫基包括甲硫基，乙硫基，丙硫基，異丙硫基，丁硫基等。
“C1-C4烷硫基(C1-C4)烷基”代表含有1至4個碳原子并且有一個C1-C4烷硫基與之相連的直鏈或支鏈烷基。典型的C1-C4烷硫基(C1-C4)烷基包括甲硫乙基，乙硫丁基，丙硫異丙基，異丙硫甲基，丁硫乙基等。
“C1-C4烷氨基”代表與氮原子相連的具有1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷氨基。典型的C1-C4烷氨基包括甲氨基，乙氨基，丙氨基，異丙氨基，丁氨基，仲丁氨基等。
“二(C1-C4)烷氨基”代表具有兩個烷基鏈的直鏈或支鏈二烷氨基，其中的兩個烷基鏈有1至4個碳原子并且與同一個氮原子相連。典型的二(C1-C4)烷氨基包括二甲氨基，乙基甲基氨基，甲基異丙基氨基，叔丁基異丙基氨基，二叔丁氨基等。
“C1-C4烷氧基”代表與氧原子相連的具有1至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基。典型的C1-C4烷氧基包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，異丙氧基，丁氧基等。
“C1-C4烷氧羰基”代表與羰基相連的具有1至4個碳原子的直鏈或支鏈的烷氧基。典型的C1-C4烷氧羰基包括甲氧羰基，乙氧羰基，丙氧羰基，異丙氧羰基，丁氧羰基，叔丁氧羰基等。
“氨基甲酰基(C1-C4)烷基”代表具有1至4個碳原子并且有一個氨基甲酰基與之相連的直鏈或支鏈烷基。典型的氨基甲酰基(C1-C4)烷基包括氨甲酰甲基，氨甲酰乙基，氨甲酰丙基，氨甲酰異丙基，氨甲酰丁基和氨甲酰叔丁基等。
“環烷基”代表含有3至8個碳原子的飽和烴環結構，它們不被取代或被1，2或3個選自下列的取代基分別取代鹵，鹵(C1-C4)烷基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧基羰基，氨甲酰基，C1-C4烷氨甲酰基，氨基，C1-C4烷氨基，二(C1-C4)烷氨基或具有-(CH2)a-R7結構的基團，其中a是1，2，3或4而R7是羥基，C1-C4烷氨基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨基，氨甲酰基，C1-C4烷氧基或二(C1-C4)烷氨基。典型的環烷基包括環丙基，環丁基，環戊基，環己基，環庚基和環辛基。
“環烷基(C1-C4)烷基”代表具有1至4個碳原子并且有一個環烷基與之相連的直鏈或支鏈的烷基。典型的環烷基(C1-C4)烷基包括環丙甲基，2-環丁乙基，3-環戊丙基，2-環己異丙基，4-環庚丁基等。
術語“雜環”代表未取代或取代的穩定的5-至7-元單環及穩定的7-至10-元雙環雜環，該雜環是飽和的并含有碳原子和1至3個選自氮，氧或硫的雜原子，其中任何氮和硫雜原子可以被任意氧化，任何氮雜原子可以被任意季銨化并且包括一個雙環基，在該雙環基中上面定義的任何雜環與一個苯環稠合。雜環可以在任何雜原子或提供穩定結構的碳原子上連接。雜環不被取代或被1，2或3個分別選自下列的取代基所取代鹵，鹵(C1-C4)烷基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨甲酰基，C1-C4烷基氨甲酰基，氨基，C1-C4烷氨基，二(C1-C4)烷氨基或具有-(CH2)a-R7結構的基團，其中a是1，2，3或4;而R7是羥基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨基，氨甲酰基，C1-C4烷氨基或二(C1-C4)烷氨基。
術語“不飽和雜環”代表未取代或取代的穩定的5-至7-元單環及穩定的7-至10-元雙環雜環，它有1個或多個雙鍵并含有碳原子和1至3個選自氮，氧或硫的雜原子，其中氮和硫雜原子可以被任意氧化，氮雜原子可以被任意季銨化并包括一個雙環基，在該雙環基中上面定義的任何雜環與一個苯環稠合。不飽和雜環可以在任何雜原子或提供穩定結構的碳原子上連接。不飽和雜環不被取代或被1，2或3個分別選自下列的取代基所取代鹵，鹵(C1-C4)烷基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨甲酰基，C1-C4烷基氨甲酰基，氨基，C1-C4烷氨基，二(C1-C4)烷氨基或具有-(CH2)a-R7結構的基團，其中a是1，2，3或4;而R7是羥基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨基，氨甲酰基，C1-C4烷氨基或二(C1-C4)烷氨基。
這些雜環和不飽和雜環的例子有哌啶基，哌嗪基，2-氧代哌嗪基，2-氧代哌啶基，2-氧代吡咯烷基，2-氧代吖庚因基，吖庚因基，吡咯基，吡咯烷基，吡唑基，吡唑烷基，咪唑基，咪唑烷基，咪唑啉基，吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，噠嗪基，噁唑基，噁唑烷基，異噁唑基，異噁唑烷基，嗎啉基，噻唑基，噻唑烷基，異噻唑基，奎寧環基，異噻唑烷基，吲哚基，喹啉基，異喹啉基，苯并咪唑基，噻二唑基，苯并吡喃基，苯并噻唑基，苯并吡咯基，呋喃基，四氫呋喃基，四氫吡喃基，噻吩基，苯并噻吩基，硫代嗎啉基，硫代嗎啉基亞砜，硫代嗎啉基砜，噁二唑基，三唑基，四氫喹啉基及四氫異喹啉基。
“雜環(C1-C4)烷基”代表具有1至4個碳原子并且有一個雜環與之相連的直鏈或支鏈烷基。“不飽和雜環(C1-C4)烷基”代表具有1至4個碳原子并且有一個不飽和雜環與之相連的直鏈或支鏈烷基。典型的雜環(C1-C4)烷基和不飽和雜環(C1-C4)烷基包括吡咯甲基，喹啉甲基，1-吲哚乙基，2-呋喃乙基，3-噻吩-2-基丙基，1-咪唑異丙基，4-噻唑丁基等。
“芳基”代表苯基或萘基環。苯基或萘基環任意地被1，2或3個分別選自下列的取代基所取代鹵，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨甲酰基，氨甲酰(C1-C4)烷基，氨基，C1-C4烷基，二(C1-C4)烷氨基或式-(CH2)a-R7的基團，其中a是1，2，3或4;而R7是羥基，C1-C4烷氧基，羧基，C1-C4烷氧羰基，氨基，氨甲酰基，C1-C4烷氨基或二(C1-C4)烷氨基。
“芳基(C1-C4)烷基”代表具有1至4個碳原子并且有一個芳基與之相連的直鏈或支鏈烷基。典型的芳基(C1-C4)烷基包括苯甲基，2-苯乙基，3-萘丙基，1-萘異丙基，4-萘丁基等。
術語“氨基酸側鏈”代表結合到氨基酸的α-碳原子上的特定的原子或基團，在α-碳原子上已結合的還有一個羧基和一個氨基。這些側鏈選自下列氨基酸中的那些側鏈丙氨酸Ala精氨酸Arg天冬酰胺Asn天冬氨酸Asp半胱氨酸Cys谷氨酰胺Gln谷氨酸Glu甘氨酸Gly組氨酸His異亮氨酸Ile亮氨酸Len賴氨酸Lys甲硫氨酸Mel苯丙氨酸Phe脯氨酸Pro絲氨酸Ser蘇氨酸Thr色氨酸Trp酪氨酸Tyr纈氨酸Val說明書中所用的術語“氨基保護基”是指通常用來阻斷或保護氨基官能性而使化合物中其它官能團反應的氨基取代基。這些氨基保護基的例子有甲酰基、三苯甲游基、苯二甲酰亞氨基、三氯乙酰基、氯乙酰基、溴乙酰基和碘乙酰基、尿烷型阻斷劑如芐氧羰基、4-苯芐氧羰基、2-甲芐氧羰基、4-甲氧芐氧羰基、4-氟芐氧羰基、4-氯芐氧羰基、3-氯芐氧羰基、2-氯芐氧羰基、2，4-二氯芐氧羰基、4-溴芐氧羰基、3-溴芐氧羰基、4-硝基芐氧羰基、4-氰基芐氧羰基、2-(4-聯苯基)異丙氧羰基、1，1-聯苯乙-1-基氧羰基、1，1-聯苯丙-1-基氧羰基、2-苯丙-2-基氧羰基、2-(對甲苯基)丙-2-基氧羰基、環戊烷氧羰基、1-甲環戊烷氧羰基、環己烷氧羰基、1-甲環己烷氧羰基、2-甲環己烷氧羰基、2-(4-甲苯磺酰基)乙氧羰基、2-(甲磺酰基)乙氧羰基、2-(三苯膦基)乙氧羰基、芴基甲氧羰基(“FMOC”)、2-(三甲基甲硅烷基)乙氧羰基、烯丙氧羰基、1-(三甲基甲硅烷甲基)丙-1-烯氧羰基、苯異草酰甲氧羰基(benzisoxalylmethoxycarbonyl)、4-乙酰氧芐氧羰基、2，2，2-三氟乙氧羰基、2-乙炔基-2-丙氧羰基、環丙甲氧羰基、4-(癸酰氧基)芐氧羰基、異冰片氧羰基、1-哌啶氧羰基等;苯甲酰甲磺酰基、2-硝基苯亞磺酰基、二苯基氧化膦基等氨基保護基。氨基保護基的種類并不是關鍵，只要衍生的氨基對中間體分子中其它位置上隨后的反應條件是穩定的并能在合適的條件下選擇性地除去，同時對包括任何其它氨基保護基在內的分子的其余部分不發生破壞。優選的氨基保護基是叔丁氧羰基和芐氧羰基。上面術語中所指基團的進一步的例子如下列文獻所述J.W.Barton，“ProtectiveGroupsinOrganicChemistry”，J.G.W.McOmie，Ed.，PlenumPress，NewYork，N.Y.，1973，Chapter2，和T.W.Greene，“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”，JohnWiley和Sons，NewYork，N.Y.，1981，Chapter7。
說明書中所用的術語“羧基保護基”是指通常使用的羧基取代基，該取代基在化合物中其它官能團反應的同時能阻斷或保護羧基的功能。這些羧基保護基的例子有甲基、對硝基芐基、對甲芐基、對甲氧芐基、3，4-二甲氧芐基、2，4-二甲氧芐基、2，4，6-三甲氧芐基、2，4，6-三甲芐基、五甲芐基、3，4-亞甲二氧基芐基、二苯甲基、4，4′-二甲氧二苯甲基、2，2′，4，4′-四甲氧二苯甲基、叔丁基、叔戊基、三苯甲游基、4-甲氧三苯甲游基、4，4′-二甲氧三苯甲游基，4，4′，4″-三甲氧三苯甲游基、2-苯丙-2-基、三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、苯甲酰甲基、2，2，2-三氯乙基、β-(二(丁基)甲基甲硅烷基)乙基、對甲苯磺酰乙基、4-硝基芐磺酰乙基、烯丙基、肉桂基、1-(三甲基甲硅烷甲基)丙-1-烯-3-基等基團。優選的羧基保護基是二苯甲基。這些基團的進一步的例子可以在下列文獻中找到E.Haslam，“ProtectiveGroupsinOrganicChemistry”，J.G.W.McOmie，Ed.，PlenumPress，NewYork，N.Y.，1973，Chapter2，和T.W.Greene，“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”，JohnWiley和Sons，NewYork，N.Y.，1981，Chapter5。
如下式中星號所示，本發明化合物至少有四個不對稱中心。
其中X是
作為這些手性中心的結果，本發明化合物存在有外消旋物，外消旋混合物和單個的對映體。所有的不對稱形式，單獨的異構體和其混合物形式都包括在本發明范圍內。
如上所述，本發明包括式Ⅰ定義的化合物的藥學上可接受的鹽。雖然通常為中性，但本發明化合物也具有酸性、堿性或雙功能基團并相應地與任何無機堿和無機及有機酸反應形成藥學上可接受的鹽。
這里所用的術語“藥學上可接受的鹽”是指上式化合物的鹽，它基本上對生物不具有毒性。典型的藥學上可接受的鹽包括那些通過將本發明化合物與藥學上可接受的無機或有機酸或無機堿進行反應而制得的鹽。這些鹽已知為酸加成和堿加成鹽。
通常使用的用于形成酸加成鹽的酸是無機酸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸等，有機酸如對甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、對溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、檸檬酸、苯甲酸、乙酸等。這些藥學上可接受的鹽的例子有硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、亞硫酸氫鹽、磷酸鹽、磷酸單氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、己酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、丁炔-1，4-二酸鹽、己炔-1，6-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧苯甲酸鹽、對苯二甲酸鹽、磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯乙酸鹽、苯丙酸鹽、苯丁炔酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、1-羥基丁炔酸鹽、乙醇酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、丙磺酸鹽、萘-1-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、偏桃酸鹽等。優選的藥學上可接受的酸加成鹽是那些與無機酸加鹽酸和氫溴酸形成的鹽，以及那些與有機酸如馬來酸和甲磺酸形成的鹽。
堿加成鹽包括那些由無機堿衍生出的鹽如銨鹽或堿金屬或堿土金屬氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽等。用于制備本發明鹽的堿包括氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、氫氧化鈣、碳酸鈣等。鉀鹽和鈉鹽是特別優選的。
應該認識到，形成本發明鹽的一部分的具體抗衡離子并不重要，只要整個鹽是藥理上可接受的并且該抗衡離子對整個鹽不產生不需要的性質就可以了。
本發明優選的化合物是下述的式Ⅰ化合物和其藥學上可接受的鹽，其中X是
R是芳基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的結構，其中
A是-S-;
q是0;
R0是芳基;
R1是芳基或不飽和雜環;
j是0，1或2;
y是-O-或-N(R2)-;
k是1;
R2是氫或甲基;
R3是氨基酸側鏈，-CH2CH3，-CH2CH2CH3，-CH2(CH2)2CH3，-C(CH3)3或具有式-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的結構，其中r是0，1，2或3;且R5是環烷基，芳基，雜環基或不飽和雜環基。
在這些化合物中，更為優選的化合物是下述化合物及其藥學上可接受的鹽，其中R是苯基，苯硫基，萘基，萘硫基，苯乙基或萘乙基;
R1是苯基，萘基或喹啉基;
j是1;
R2是氫;
R3是氨基酸側鏈，-CH2CH3或具有式-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的結構，其中r是0，1，2或3;且R5是芳基或不飽和雜環基。
最優選的化合物是下述的式Ⅰ化合物及其藥學上可接受的鹽，其中
R是苯基或苯乙基;
R1是苯基或喹啉基;且R3是-CH2CH3或-CH(CH3)2。
式Ⅰ化合物可以用領域技術人員已知的化學合成方法來制備。例如，一種用于制備式Ⅰ化合物的優選的方法包括將式Ⅰa適當取代的環氧乙烷在堿的存在下，或將式Ⅰb的環氧乙烷，與適當取代的羧酸化合物在質子惰性溶劑中在偶合劑的存在下進行反應。優選的環氧乙烷試劑是式Ⅰb。該反應用下列反應式Ⅰ表示反應式Ⅰ
其中R、X和J如上定義。
上面的反應可以在有或沒有催化劑的情況下進行，但優選有催化劑。優選的催化劑是羥基苯并三唑水合物(HOBT·H2O)。偶合劑的典型例子包括碳二亞胺如N，N′-二乙基碳二亞胺、二環己基碳二亞胺(DCC);咪唑如羰基二咪唑;以及試劑如1-羥基苯并三唑甲磺酸酯、N-乙氧羰基-2-乙氧基-1，2-二氫喹啉(EEDQ)、苯并三唑-1-基氧三(二甲氨基)鏻六氟磷酸鹽(BOP)、(鄰-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基鈾六氟磷酸鹽(HBTV)和苯并三唑-1-基氨三吡咯烷基鏻六氟磷酸鹽(PyBOP)。
通常使用的羧酸反應物的量相對于環氧乙烷反應物為等摩爾比至過量3摩爾，優選過量2摩爾。偶合劑通常使用相對于羧酸反應物的等摩爾比至微微過量。用于該反應的典型的溶劑包括二甲基甲酰胺和四氫呋喃。溶劑的選擇并不是關鍵，只要所用溶劑對所進行的反應呈惰性并能充分溶解反應物以完成所需的反應。當在約-15至反應混合物的回流溫度下進行時，該反應通常在約1至72小時后基本上完成。反應優選地在約0℃至30℃的溫度下進行24小時至48小時。反應得到式Ⅰ化合物。
反應一旦完成，產品可以用本領域已知的方法分離，如過濾，或通過萃取，蒸發或傾析除去反應溶劑。如果需要，可以通過常用技術如結晶或在固體支持物如硅膠或鋁上進行色譜分離而將產品進一步純化。
式Ⅰa化合物
其中R和J如上定義，如上所述，可用于制備式Ⅰ化合物。式Ⅰa化合物可通過下列反應式Ⅱ來制備
其中R和J如上定義。
上面的反應式Ⅱ可以通過順序完成反應A-G來實現。一旦反應完成，可以用本領域已知方法將中間體化合物分離，如可以將化合物結晶然后過濾收集，或通過萃取，蒸發或傾析除去反應溶劑。如果需要，可以通過柱技術如在固體支持物如硅膠或鋁上結晶或色譜分離將中間體化合物進一步純化，該純化可以在下步反應之前進行。反應式Ⅱ在下面制備例1-5中舉例說明。
在反應A中，反應通過將2，2-二甲基-4，5-二環氧乙烷-1，3-二氧戊環與親核劑(R-Z)(其中Z是鹵化鎂，鋰或銨，優選溴化鎂)在亞惰性溶劑中進行混合來完成。通過用銅鹽如碘化銅(Ⅰ)或溴化銅(Ⅰ)催化可以得到較好的結果。相對于環氧乙烷反應物，通常使用等摩爾比至約2摩爾過量的親核劑，優選約0.5摩爾過量。適用于該反應的典型的溶劑包括任何有機溶劑如乙醚或四氫呋喃。溶劑的選擇并不是關鍵，只要所用的溶劑對進行的反應是惰性的并能充分溶解反應物以完成所需的反應。當在約-40℃至10℃的溫度下進行時，該反應通常在約1至24小時后基本上完成。反應優選地在約-5℃至5℃下進行2至6小時。
在反應B中，反應通過將反應A分離到的化合物與甲磺酰氯在互惰性溶劑中混合來完成。通常使用約等摩爾比至約3摩爾過量的甲磺酰氯反應物，優選約2摩爾過量。可以將堿，如2，6-二甲基吡啶或三烷基胺或三乙胺或二異丙基乙基胺等任意地加入以促進該反應。用于該反應的優選堿是三烷基胺，特別是三乙胺。適用于該反應的典型溶劑包括任何有機溶劑，優選質子惰性溶劑，如二氯甲烷或氯仿。溶劑的選擇并不是關鍵，只要所用的溶劑對進行的反應是惰性的并能充分溶解反應物以完成所需的反應。當在約0℃至反應混合物的回流溫度下進行時，該反應通常在約15分鐘至24小時后基本上完成。該反應優選地在約15℃至30℃的溫度范圍內進行15分鐘至4小時。
在反應C中，該反應通過將從反應B中分離到的化合物與疊氮離子在互惰性溶劑中混合來完成。用于該反應的疊氮離子可以從無機鹽如堿金屬疊氮化物如疊氮化鋰或有機鹽如四甲基疊氮化鈲中得到。通常使用約等摩爾比至3摩爾過量的疊氮離子，優選約2摩爾過量，通過加入堿如2，6-二甲基吡啶可以獲得提高的產率。適用于該反應的典型的溶劑包括任何有機溶劑如六甲基磷酸三胺(HMPA)，二甲基甲酰胺或N，N′-二甲基亞丙基脲(DMPU)。溶劑的選擇并不是關鍵，只要所用的溶劑對進行的反應呈惰性并能充分溶解反應物以完成所需的反應。當在約0℃至反應混合物的回流溫度下進行時，該反應通常在約1至24小時后基本上完成。該反應優選地在約25℃至100℃的溫度范圍內進行約4至12小時。
在反應D中，該反應通過將從反應C中分離到的化合物與強酸在醇溶劑中混合來完成，醇溶劑如甲醇或乙醇。適用于該反應的典型的酸包括氫鹵酸如鹽酸或氫溴酸，硫酸等。優選的酸是氫鹵酸，特別是氫氯酸。通常使用大大過量如約10摩爾過量至20摩爾過量的酸反應物。當在約0℃至40℃的溫度范圍內進行時，反應通常在約1至24小時后基本上完成。反應優選地在約20℃至30℃的溫度范圍內進行約2至4小時。
在反應E中，反應按反應B所述基本上相同的方法，用甲磺酰氯和從反應D中分離到的化合物進行。然而，相對于甲磺酰氯反應物通常使用約等摩爾比至1摩爾過量的反應D分離到的化合物。
在反應F中，環氧乙烷環的形成通過堿催化環化，優選地通過將從反應E中分離到的化合物與烷氧離子在合適的溶劑中混合來完成。烷氧離子可以從銨或堿金屬醇鹽等中得到。用于該反應的優選的烷氧離子是甲醇鈉和甲醇鉀。適用于該反應的典型的溶劑包括任何有機溶劑，如甲醇或四氫呋喃。當在約0℃至40℃的溫度范圍內進行時，反應通常在約1至12小時后基本上完成。反應優選地在約20℃至30℃的溫度范圍內進行約1至2小時。
在反應G中，疊氮基還原成相應的胺的反應優選地通過催化氫化來完成，優選的方法是將從反應F中分離到的化合物與氫氣在乙酸和鈀碳催化劑的存在下混合。適用于該反應的典型溶劑包括任何有機溶劑如乙酸乙酯。溶劑的選擇并不是關鍵，只要所用的溶劑對進行的反應呈惰性并能充分溶解疊氮基反應物以完成所需的反應。當在約0℃至40℃的溫度范圍內進行時，反應通常在約1至24小時后基本上完成。反應優選地在約20℃至30℃的溫度范圍內進行約2至5小時。
另外，疊氮基還原成相應的胺的反應也可以通過將從反應F中分離到的化合物與三烷基或三芳基膦在乙酸水溶液存在下混合來完成。優選的膦反應物是三丁基膦。適用于該反應的典型的有機溶劑包括混合物如含10%水的乙酸乙酯/乙腈。當在約0℃至40℃的溫度范圍內進行時，反應通常在約1至12小時后基本上完成。反應優選地在約20℃至30℃的溫度范圍內進行約0.5至2小時。
式X-COOH化合物(其中X如上定義)可以通過下列反應式Ⅲ來制備反應式Ⅲ
其中J-、R3、R1、j、k和y如上定義。
上面的反應式Ⅲ可以通過順序完成反應A-D來實現。一旦反應完成，可以通過本領域的已知方法分離中間體化合物，例如可以將化合物結晶然后過濾收集，或通過萃取，蒸發或傾析除去反應溶劑。如果需要，可以在進行下一步反應式之前，將中間體化合物用常規技術進一步純化。例如在固體支持物如硅膠或鋁上結晶或色譜分離。反應式Ⅲ在下面制備例6和7中舉例說明。
在反應A中，在適當取代的2-氨基羧酸化合物中的羧基用一個標準的羧基保護基來保護，例如通過將二苯基重氮甲烷與2-氨基羧酸化合物簡單地混合。典型地2-氨基羧酸以鹽的形式如對甲苯磺酸鹽使用，這樣與氨基部分有關的陰離子對進行的反應呈惰性。通常使用等摩爾比至約3摩爾過量的二苯基重氮甲烷，優選約2摩爾過量。適用于該反應的典型溶劑包括任何有機溶劑如乙腈。溶劑的選擇并不是關鍵，只要所用的溶劑對正在進行的反應呈惰性并且能充分溶解反應物以完成所需的反應。當在約10℃至40℃的溫度范圍內進行時，反應通常在約15分鐘至3小時后基本完成。反應優選地在約20℃至30℃的溫度范圍內進行15分鐘至4小時。
在反應B中，通過將從反應A中分離到的化合物與堿如硫酸氫鹽在水中簡單地混合可以將氨基轉變成相應的胺。用于該反應的碳酸氫根離子可以從無機鹽如堿金屬碳酸氫鹽如碳酸氫鋰或碳酸氫鈉得到。使用任何有機溶劑如二氯甲烷可以將產物從反應混合物中萃取出來。當反應在20℃至40℃的溫度范圍內進行時，反應通常在約15分鐘至3小時后基本上完成。反應優選地在約15℃至30℃的溫度范圍內進行約15分鐘至2小時。
在反應C中，反應通過將從反應B中分離到的化合物與三光氣在互惰性溶劑中簡單地混合來完成。通常使用約等摩爾比至2摩爾過量的反應B中分離到的化合物，優選約1摩爾過量。加入一種堿，例如三烷基胺如三乙胺或二異丙基乙基胺等以促進該反應。適用于該反應的典型的溶劑包括任何有機溶劑如甲苯。溶劑的選擇并不是關鍵，只要所用的溶劑對進行的反應呈惰性并能充分溶解反應物以完成所需的反應。當在約25℃至反應混合物的回流溫度下進行時，反應通常在約6至24小時后基本上完成。反應優選地在約80℃至反應混合物的回流溫度下進行約8小時至12小時。
在反應D中，通過將從反應C中分離到的化合物與下式化合物R1-(CH1)j-(Y)k-H(其中R1，j，k和y如上定義，條件是當Y為-N(R2)-時，R2必須是氫)，在互惰性溶劑中簡單地混合來完成該反應。通過用銅鹽如碘化銅(Ⅰ)或氯化銅(Ⅰ)催化可以得到較好的結果。通常使用約等摩爾比至1摩爾過量的從反應C中分離到的化合物。適用于該反應的典型溶劑包括任何有機溶劑如二甲基甲酰胺。溶劑的選擇并不是關鍵，只要所用的溶劑對正在進行的反應呈惰性并能充分溶解反應物以完成所需的反應。當在約10℃至40℃的溫度范圍內進行時，反應通常在約15分鐘至3小時后基本上完成。反應優選地在約15℃至30℃的溫度范圍內進行約15分鐘至2小時。
從反應D中分離到的化合物上的羧基可以通過酯水解去保護以得到相應的羧酸。反應通過將從反應D中分離到的化合物與強酸在互惰性溶劑中簡單地混合來完成。適用于該反應的典型的溶劑包括任何有機溶劑如二噁烷。溶劑的選擇并不是關鍵，只要所用的溶劑對進行的反應呈惰性并充分溶解反應物以完成所需的反應。當在約25℃至反應混合物的回流溫度下進行時，反應通常在約15分鐘至4小時后基本完成。反應優選地在約60℃至100℃的溫度范圍內進行約15分鐘至1小時。
另外，羧基可以用催化氫化去保護，優選地通過將從反應A中分離到的化合物與甲酸銨和鈀碳催化劑在醇溶劑如甲醇或乙醇中進行混合。當在約0℃至反應混合物的回流溫度下進行時，反應通常在約1至4小時后基本上完成。反應優選地在回流溫度下進行約2至5小時。
其中X如上定義的、特別是其中R2是C1-C4烷基的式X-COOH化合物也可以通過下列反應式Ⅳ來制備反應式Ⅳ
上面的反應式Ⅳ可以通過順序進行反應A和B來完成。一旦反應完成，可以用本領域中的已知方法分離產品，例如將產品結晶，然后過濾收集，或通過萃取，蒸發或傾析除去溶劑。如果需要，在進行下一步反應之前，可以用常規技術如在固體支持物如硅膠或鋁上結晶或色譜分離將產品進一步純化。反應式Ⅳ在下面制備例8和9中舉例說明。
在反應A中，反應通過將從反應式Ⅲ反應B中分離到的化合物與1，1′-羰基二咪唑在互惰性溶劑中混合來完成。通常使用約等摩爾比至2摩爾過量的羰基二咪唑反應物，優選地用約等摩爾比。適用于該反應的典型的溶劑包括任何標準的有機溶劑如乙腈。溶劑的選擇并不是關鍵，只要所用的溶劑對進行的反應呈惰性并充分溶解反應物以完成所需的反應。當在約15℃至30℃的溫度范圍內進行時，反應通常在約15分鐘至2小時后基本上完成。反應優選地在約20℃至25℃的溫度范圍內進行約15分鐘至1小時。
在反應B中，反應通過將從反應C中分離到的化合物與下式化合物進行混合來完成，-R1-(CH2)j-(Y)k-H其中R1，j，k和Y如上定義。通常使用約等摩爾比至1摩爾過量的從反應A分離到的化合物。適用于該反應的典型溶劑包括任何有機溶劑如乙腈。溶劑的選擇并不是關鍵，只要所用的溶劑對進行的反應呈惰性并充分溶解反應物以完成所需的反應。當在約10℃至40℃的溫度范圍內進行時，反應通常在約30分鐘至6小時后基本上完成。反應優選地在約15℃至30℃的溫度范圍內進行約1分鐘至4小時。
從反應B中分離到的化合物上的羧基可以通過前面所述的方法去保護。
如前所述，式Ⅰ化合物的任何活性對映體都被認為是本發明的一部分。這些活性異構體可以通過前面所述的方法從它們各自的活性前體制備，或通過拆分外消旋混合物來制備。拆分可以在拆分試劑的存在下通過色譜法，重結晶或本領域技術人員已知的這些技術的混合方法來完成。關于拆分的更詳細的內容見Jacques等人的“Enantiomers，RacematesandResolutions，”JohnWiley&Sons1981。
本發明化合物合成中所用的原料化合物是已知的，對于買不到的那些可以用本領域普通技術人員通常使用的標準方法容易地合成。
本發明藥學上可接受的鹽可通過式Ⅰ化合物與等摩爾或過量的酸或堿反應來形成。通常將反應物在互溶劑中混合，如對酸加成鹽用二乙醚或苯，對堿加成鹽用水或醇。通常鹽在約1小時至10天內從溶液中沉淀出來，將其用過濾或其他常規方法分離。
下面制備例和實施例對本發明的具體內容作進一步說明。然而，應理解到這些實施例僅用于說明本發明，而不在任何方面限制本發明的范圍。
在下面的制備例和實施例中，術語熔點、質子核磁共振譜、質譜、紅外光譜、紫外光譜、元素分析、高效液相色譜、和薄層層析分別簡寫為“m.p.”、“NMR”、“MS”、“IR”、“VV”、“Analysis”、“HPLC”和“TLC”。此外，IR光譜中列出的最大吸收僅僅是那些有意義的并不是所有觀察到的。
在NMR譜中，使用了下列簡寫“s”是單峰，“d”是雙峰，“dd”是雙峰，“t”是三重峰，“q”是四重峰，“m”是多重峰，“dm”是雙多重峰，“br.s”、“br.d”、“br.t”和“br.m”分別是寬的單峰、雙峰、三重峰和多重峰。“J”表示偶合常數，以赫茲(Hz)表示。除非另有說明，NMR值是指目的化合物的游離堿。
用VarianAssociatesEM-39090MHz或T-6060MHz儀、JolFX-90Q90MHz儀、BrukerCorp.270MHz儀或GeneralElectricQE-300300Hz儀測得核磁共振譜。化學位移用δ值表示(用四甲基硅烷內標，用它的百萬分之幾表示)。質譜在VarionMAT731分光計為用碳樹枝狀晶體發射體測定。紅外光譜在Perkin-Elmer281儀上測得。紫外光譜在Cary118儀上測得。薄層層析在E.Merck硅膠板上進行。熔點未校正。
制備例1A.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-羥基-2-苯乙基)1，3-二氧戊環在氮氣下將14.6ml(43.8mmol)苯基溴化鎂的24.6ml二乙醚溶液加到冷的(-40℃)0.278g(1.46mmol)碘化銅(Ⅰ)的2ml二甲亞砜和22ml四氫呋喃溶液中。將該溶液攪拌5-10分鐘后，加入2.72g(14.6mmol)1，2∶5，6-二脫水-3，4-鄰異亞丙基-D-甘露糖醇的12ml四氫呋喃溶液。然后將反應混合物熱至0℃并反應2小時15分鐘，此時緩慢地加入飽和氯化銨溶液。將所得溶液劇烈攪拌5分鐘，然后移入含二乙醚和2∶1混合物的分液漏斗中。將所得的各層分開并將有機層減壓濃縮至干。然后將所得物用柱色譜法純化(用2.5%丙酮的二氯甲烷洗脫)。將含有所需產品的組份合并并減壓濃縮至干得到4.07g所需的副標題中間體油狀物。
NMR(CDCl3)δ7.35(m，10);3.78(m，4);3.15(dd，2);
2.90(d，2);2.70(m，2);1.45(s，6).
MSm/e342(M′).
B.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-甲磺酰氧基-2-苯乙基)-1，3-二氧戊環將2.97ml(38.3mmol)甲磺酰氯的20ml二氯甲烷溶液加到5.47ml(39.3mmol)三乙胺和6.4g(18.7mmol)制備例1A副標題中間體的20ml二氯甲烷冷(0℃)溶液中。然后將反應混合物熱至室溫。當用薄層層析(TLC)檢測反應完成時，將反應混合物倒入50ml0.2N鹽酸和150ml二乙醚溶液中。分開所得的各層并將有機層用飽和硫酸氫鈉溶液洗滌，然后減壓濃縮至干。然后將所得物用柱色譜法純化(用1∶1的二乙醚/己烷溶液洗脫)。將含有所需產品的組份合并，減壓濃縮至干得到3.7g所需標題中間體。
NMR(CDCl3)δ7.30(m，10);4.88(m，2);4.25(d，2);
3.10(m，4);2.32(s，6);1.52(s，6).
MSm/e 499(M++1).
C.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(S)-疊氮基-2-苯乙基)-1，3-二氧戊環將0.784g(16.0mmol)疊氮化鋰，4.0g(14.6mmol)18-冠醚-6和1.7ml(14.6mmol)2，6-二甲基吡啶的溶液加到3.6g(7.2mmol)制備例1B副標題中間體的25mlN，N′-二甲基亞丙基脲中。然后將反應混合物加熱至95-100℃并反應約7小時。當由TLC檢測反應完成時，將反應混合物倒入200ml0.1N鹽酸和二乙醚的1∶1混合物中。將所得的各層分離并將有機層用硫酸鈉干燥，然后減壓濃縮至干得到2.8g油狀物。將該油狀物用柱色譜法純化(用5-10%二氯甲烷的甲苯梯度洗脫劑洗脫)。將含有所需產品的組份合并，減壓濃縮至干得到1.03g所需的副標題中間體。
NMR(CDCl3)δ7.30(m，10);4.12(s，2);3.22(t，2);
3.05(m，4);1.55(s，6).
D.1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二疊氮基-3(R)，4(R)-二羥基己烷在3小時內向0.370g(0.943mmol)制備例1C的副標題中間體的4ml甲醇溶液中緩慢地加入1.26ml12M鹽酸。當用TLC檢測反應完成時，將反應混合物用10ml乙腈稀釋并濃縮兩倍。將所得物重新溶解在乙酸乙酯中并用碳酸氫鈉的半飽和溶液洗滌。將所得的各層分離并將有機層以濃縮至干得到一油狀物。將該油狀物用柱色譜法純化(用0-20%乙酸乙酯的二氯甲烷梯度洗脫劑洗脫)。將含有所需產品的組份合并，減壓濃縮至干，然后從二乙醚和己烷溶液中重結晶得到0.309g所需的副標題中間體。
NMR(CDCl3)δ7.25(m，10);3.60(m，4);3.0(m，4);2.65(d，2).
MSm/e 353(M++1).
元素分析 C18H20N6O2計算值C，61.35;H，5.72;N，23.85;
實測值C，61.15;H，5.73;N，23.70.
E.1，6-二苯基-(S)，5(S)-二疊氮基-3(R)-甲磺酰氧基-4(R)-羥基己烷將13.5μl(0.170mmol)甲磺酰氯的300μl二氯甲烷溶液緩慢地加到80mg(0.23mmol)制備例1D副標題中間體和32μl(0.23mmol)三乙胺的0.6ml二氯甲烷冷(0℃)溶液中。將反應混合物熱至室溫，使其反應15分鐘，然后倒入50ml二乙醚和0.1N鹽酸的3∶2混合物中。將所得各層分開，將有機層用碳酸氫鈉半飽和溶液洗滌，然后減壓濃縮至干得到一泡沫狀物。將該泡沫狀物用柱色譜法純化(用1∶2的乙酸乙酯/二氯甲烷溶液洗脫)。將含有所需產品的組份合并，減壓濃縮至干得到100mg所需副標題中間體和起始物1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二疊氮基-3(R)，4(R)-二羥基己烷的60∶40混合物。
F.1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二疊氮基-3，4-順環氧己烷向60mg(0.14mmol)制備例1E的副標題中間體的1.5ml2∶1甲醇/四氫呋喃冷(0℃)溶液中加入0.325ml0.5M甲醇鈉的甲醇溶液。然后將反應混合物熱至室溫并使其反應1小時，之后加入3ml含2滴乙酸的二乙醚。然后將所得溶液倒入25ml飽和硫酸氫鈉溶液和40ml二乙醚的混合物中。將所得的各層分開，將有機層減壓濃縮至干得到一油狀物。將該油狀物用柱色譜法純化(用20%己烷的二氯甲烷洗脫)。將含有所需產品的組份合并，減壓濃縮至干得到31mg所需的副標題中間體。
NMR(CDCl3)δ7.30(m，10);3.57(m，1);3.45(m，1);
3.18(m，2);2.94(m，4).
G.1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二氨基-3，4-順環氧己烷二鹽酸鹽向350mg5%鈀碳在10ml9∶1乙酸乙酯/乙酸溶液中的懸浮液中加入0.368g(1.11mmol)上面制備1F副標題中間體。然后將混合物在氫氣下快速攪拌約31/2小時。當用TLC檢測反應完成時，將混合物用乙酸乙酯稀釋并過濾除去5%鈀碳。然后將濾液冷卻過液得到0.325g1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二氨基-3，4-順環氧己烷二乙酸鹽。向0.100g(0.249mmol)二乙酸鹽的4ml1∶1二氯甲烷/二己醚溶液中緩慢地加入在乙腈中的0.498ml1N鹽酸得到一白色固體。將該固體離心分離得到0.090g所需副標題產品。
NMR(d6-DMSO)δ8.40(br.s，6);7.30(m，10);
3.40(m，4);3.05(m，4).
MSm/e 284(M+-2Cl).
制備例2A.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-羥基-2-萘-2-基乙基)-1，3-二氧戊環基本上按制備例1A中所述方法制備所需的副標題中間體，使用在約58ml四氫呋喃中的27.29mmol2-萘基溴化鎂，183mg碘化銅(Ⅰ)，1.30ml(17.70mmol)二甲基亞砜和1.502g(8.07mmol)1，2∶5，6-二脫水-3，4-鄰異亞丙基-D-甘露糖醇得到2.81g白色固體。
NMR(CDCl3)δ7.78(m，8);7.43(m，6);3.90(m，2);
3.81(m，2);3.32(dd，2);2.90(dd，2);
2.81.(br.s，2);1.53(s，6).
MSm/e 442(M+).
元素分析C29H30O4計算值C，78.71;H，6.83;
實測值C，78.44;H，7.11.
B.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-甲磺酰氧基-2-萘-2-基乙基)-1，3-二氧戊環基本上按制備1B所述的方法制備所需副標題中間體，使用2.40ml(31.0mmol)甲磺酰氯，2.80ml(20.1mmol)三乙胺和2.81g(6.35mmol)制備例2A副標題中間體得到3.02g白色固體。
NMR(CDCl3)δ7.80(m，8);7.50(m，4);7.36(m，2);
5.00(m，2);4.35(br.s，2);3.26(m，4);
2.27(s，6);1.57(s，6).
MSm/e 598(M+).
元素分析 C31H34O8S2計算值C，62.19;H，5.72;
實測值C，62.00;H，5.70.
C.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(S)疊氮基-2-萘-2-基乙基)-1，3-二氧戊環基本上按制備例1C所述方法制備所需副標題中間體，使用1.999g(40.80mmol)疊氮化鋰，1.175ml(10.09mmol)2，6-二甲基吡啶和3.00g(5.01mmol)制備例2B副標題中間體得到946mg含894mg所需化合物的粘性油。
NMR(CDCl3)δ7.83(m，6);7.70(br.s，2);7.52(m，4);
7.35(m，2);4.23(s，2);3.39(m，2);
3.20(m，4);1.59(s，6).
MSm/e 492(M+).
元素分析 C29H28N6O2計算值C，70.71;H，5.73;N，17.06;
實測值C，70.77;H，5.82;N，16.82.
D.1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二疊氮基-3(R)，4(R)-二羥基己烷基本上按制備例1D所述方法使用在0.25ml2.5∶1∶6.5乙酸/水/四氫呋喃溶液中的41.9mg(0.0851mmol)制備例2C標題中間體和4滴濃鹽酸制備所需的標題中間體。將反應溶液在回流下攪拌17小時得到28.7mg白色固體。
NMR(CDCl3)δ7.75(m，8);7.50(m，4);7.34(m，2);
3.70(br.s，4);3.15(m，4);
2.48(br.s，2).
MSm/e 452(M+).
元素分析 C26H24N6O2計算值C，69.01;H，5.35;N，18.57;
實測值C，69.15;H，5.37;N，18.37.
E.1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二疊氮基-3(R)-甲磺酰氯基-4(R)-羥己烷基本上按制備例1E所述方法制備所需的副標題中間體，用40μl(0.52mmol)甲磺酰氯，697mg(1.54mmol)制備例2D副標題中間體和0.212ml(1.52mmol)三乙胺得到一固體，不用進一步純化將其直接使用。
F.1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二疊氮基-3，4-順式-環氧己烷基本上按制備例1F所述方法制備所需副標題中間體，使用制備例2E副標題中間體和4.50ml在甲醇中的0.5M甲醇鈉得到261mg白色固體。
NMR(CDCl3)δ7.80(m，8);7.44(m，6);3.73(m，1);
3.62(m，1);3.34(dd，1);3.23(dd，1);
3.11(m，4).
MSm/e 434(M+).
元素分析 C26H22N6O計算值C，71.87;H，5.10;N，19.34;
實測值C，72.09;H，5.29;N，19.32.
G.1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二氨基-3，4-順環氧己烷二鹽酸鹽基本上按制備1G所述方法制備所需的副標題產物，通過將322mg(0.741mmol)制備例2F副標題中間體和330mg5%鈀碳在氫氣下混合得到95.8mg1，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二氨復鹽-3，4-順環氧己烷二乙酸鹽。然后用二乙酸鹽和0.5ml在乙腈中的1N鹽酸制備二鹽酸鹽得到69.2mg白色固體。
NMR(d6-DMSO)δ8.53(br.s，3);8.23(br.s，3);
3.90(m，8);7.54(m，6);
3.05-3.85(m，8).
MSm/e 383(M++1-2Cl).
元素分析 C26H28N2OCl2計算值C，68.57;H，6.20;N，6.15;
實測值C，68.48;H，6.32;N，6.32.
制備例3A.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-羥基-2-萘-2-基硫乙基)-1，3-二氧戊環向1.172g(6.29mmol)2，2-二甲基-4，5-二環氧乙烷-1，3-二氧戊環的64ml四氫呋喃溶液中加入4.075g(25.43mmol)2-萘硫醇。固體完全溶解后，加入2.20ml(12.6mmol)二異丙基乙基胺。將所得溶液熱至回流并將其反應約24小時。冷卻后，將溶液移至含二氯甲烷和飽和鹽水溶液的分液漏斗中。將所得各層分離并將有機層減壓濃縮至干。然后將所得物用柱色譜法純化(用30%乙酸乙酯/65%己烷/5%二氯甲烷溶液洗脫)。將含有所需產物的組份合并并減壓濃縮至干得到2.88g所需副標題中間體。
NMR(CDCl3)δ7.76(m，8);7.44(m，6);3.85(m，4);
3.72(s，2);3.60(dd，2);3.02(dd，2);
1.32(s，6).
MSm/e 506(M+).
元素分析 C29H30O4S2計算值C，68.74;H，6.90;
實測值C，69.03;H，6.09.
B.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(R)-甲磺酰氧基-2-萘-2-基硫乙基)-1，3-二氧戊環基本上按制備1B所述方法制備所需副標題中間體，用1.10ml(14.2mmol)甲磺酰氯，2.12ml(15.2mmol)三乙胺和2.84g(5.60mmol)制備例3A副標題中間體得到3.02g固體。
C.2，2-二甲基-4(R)，5(R)-二(1(S)-疊氮基-2-萘-2-基硫乙基)-1，3-二氧戊環基本上按制備例1C所述方法制備所需的副標題中間體，用602mg(12.3mmol)疊氮化鋰，1.40ml(12.0mmol)2，6-二甲基吡啶和制備例3B副標題中間體得到894mg無色油狀物，經計算其中含539mg所需化合物。
NMR(CDCl3)δ7.91(s，1);7.78(m，7);7.49(m，6);
4.78(s，2);3.73(m，4);3.39(m，2);
1.56(s，6).
MSm/e 556(M+).
D.1，6-二萘-2-基硫基-2(S)，5(S)-二疊氮基-3(R)，4(R)-二羥基己烷基本上按照制備2D所述方法使用1.24g(2.23mmol)制備例3C副標題中間體和0.5ml濃鹽酸的15.2ml3∶1∶7.7乙酸/水/四氫呋喃溶液制備所需副標題中間體。將反應溶液在回流下攪拌8小時得到937mg白色固體。
NMR(CDCl3)δ7.79(m，8);7.46(m，6);
4.23(br.s，2);3.72(m，2);
3.60(m，2);3.37(m，2);3.02(d，2).
MSm/e 516(M+).
元素分析 C26H24N6O2S2計算值C，60.44;H，4.68;N，16.27;
實測值C，60.39;H，4.85;N，15.97.
E.1，6-二萘-2-基硫基-2(S)，5(S)-二疊氮基-3(R)-甲磺酰氧基-4(R)-羥基己烷基本上按制備例1E所述方法制備所需副標題中間體，使用23.7μl(0.306mmol)甲磺酰氯，211mg(408mmol)制備例3D副標題中間體和0.60ml(0.30mmol)三乙胺得到一固體。
F.1，6-二萘-2-基硫基-2(S)，5(S)-二疊氮基-3，4-順-環氧己烷基本上按制備例1F所述方法制備所需副標題中間體，使用制備例3E副標題中間體和0.70ml0.5M甲醇鈉甲醇溶液得到94mg無色油狀物。
NMR(CDCl3)δ8.03(m，2);7.79(m，6);7.52(m，6);
3.65(m，2);3.43(m，2);3.50(dd，1);
3.20(dd，1);3.00(m，1).
MSm/e 498(M+).
元素分析 C26H22N6OS2計算值C，62.63;H，4.45;N，16.85;
實測值C，62.88;H，4.58;N，16.73.
G.1，6-二萘-2-基硫基-2(S)，5(S)-二氨基-3，4-順-環氧己烷二乙酸鹽向172mg(0.345mmol)制備例3F副標題中間體在6∶4∶1的乙酸乙酯/乙腈/水混合物中的溶液中加260μl(1.04mmol)三正丁基膦和60.0μl冰醋酸。將反應混合物在室溫下反應約30分鐘并減壓濃縮得到一油狀物。將該油狀物用乙酸乙酯/己烷溶液重結晶得到12.4mg白色粉末狀所需的標題中間體。
NMR(d6-DMSO)δ8.09(s，1);7.95(s，1);
7.72-7.90(m，9);7.38-7.62(m，9);
3.08-3.34(m，4);2.53-2.95(m，4);
1.86(s，6).
MSm/e 446(M+-2HOAc).
元素分析 C30H34N2O5S2計算值C，63.58;H，6.05;N，4.94;S，11.32;
實測值C，63.74;H，6.17;N，4.85;S，11.10.
制備例41，8-二苯基-3(S)，6(S)-二氨基-4，5-順-環氧辛烷鹽酸鹽基本上按制備1A-G所述方法制備了所需的標題產物。
NMR(d6-DMSO)δ8.35(br.s，6);7.20(m，10);
3.30(m，3);3.10(m，1);2.70(m，4);
2.0(m，4).
制備例51，10-二苯基-4(S)，7(S)-二氨基-5，6-順-環氧癸烷鹽酸鹽基本上按制備例1A-G所述方法制備了所需的標題產物。
NMR(d6-DMSO)δ8.35(br.s，6);7.35(m，10);3.45(m，3);
3.35(m，1);3.05(m，4);1.8(m，8).
制備例6A.(2S)-氨基-3(S)-甲基戊酸二苯甲酯的對甲苯磺酸鹽將二苯基重氮甲烷加到15.03g(49.54mmol)L-異亮氨酸，對甲苯磺酸鹽的450ml4∶5乙腈/甲醇溶液中直至保持淺粉色(17.12g(88.16mmol)二苯基重氮甲烷)，此時加入2ml冰醋酸。將所得溶液室溫下攪拌約15分鐘，然后減壓濃縮得到黃色固體。然后將該固體在熱乙腈中重結晶以純化得到21.64g所需的標題中間體。
NMR(CD3OD)δ7.67(d，J＝9Hz，2);7.37(m，10);
7.20(d，J＝9Hz，2);6.98(s，1);
4.13(d，J＝3Hz，1);2.34(s，3);
2.01(m，1);1.17-1.46(m，2);
0.80-0.97(m，6).
B.2(S)-氨基-3(S)-甲基戊酸二苯甲酯向21.64g(46.08mmol)制備例4A標題中間體的溶液中加入450ml飽和碳酸氫鈉溶液，釋放出氣體。當反應完成時，將所得的各層分開并減壓濃縮至干得到13.61g所需的標題中間體。
NMR(CDCl3)δ7.19-7.45(m，10);7.93(s，1);
3.47(d，J＝3Hz，1);1.85(m，1);
1.33-1.50(m，4);0.92(d，J＝8Hz，3);
0.83(t，J＝8，3).
C.2(S)-氨基甲酰基-3(S)-甲基戊酸二苯甲酯將4.97g(16.7mmol)制備例4B副標題中間體和4.7ml(33.7mmol)三乙胺溶液通過套管加入2.51g(8.46mmol)三光氣的90ml甲苯熱(60℃)溶液中。將溫度升至100℃并將溶液反應過夜。將反應混合物冷至0℃，結果形成沉淀。過濾除去該沉淀并用1∶1的乙酸乙酯/己烷溶液洗滌。將所得溶液減壓濃縮至干得到5.45g所需的標題中間體，它具有足夠的純度(NMR測定約90%)以用于下一步反應。
NMR(CDCl3)δ7.23-7.47(m，10);6.98(s，1);
4.05(d，J＝3Hz，1);2.05(m，1);
1.18(quintet，J＝8Hz，2);
1.00(d，J＝8Hz，3);0.80(t，J＝8Hz，3).
D.2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3(S)甲基戊酸二苯甲酯向0.506g(3.18mmol)2-羥甲基喹啉和0.315g(3.18mmol)氯化銅(Ⅰ)的無水二甲基甲酰胺溶液中加入1.13g(3.50mmol)制備例4C副標題中間體。TLC顯示反應基本上完成時，將反應混合物用乙酸乙酯稀釋并用半飽和鹽水溶液洗滌。將所得的各層分開并將有機層用硫酸鈉干燥，減壓濃縮至干得到棕色油。將該油通過柱色譜法純化(用65%己烷的乙酸乙酯洗脫)得到1.23g所需的標題中間體。
NMR(CDCl3)δ8.15(d，1);8.05(d，1);7.8(d，1);
7.70(t，1);7.55(t，1);7.45(d，1);
7.30(m，10);6.92(s，1);5.43(d，1);
5.40(s，2);4.5(m，1);2.0(m，1);
1.2(m，2);0.9(d，3);0.82(t，3).
E.2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸將上面制備例4C副標題中間體溶解在12ml含3ml濃鹽酸的二噁烷中。將所得溶液熱至100℃并使其反應約5分鐘，然后冷至室溫并攪拌直到TLC顯示反應基本上完成。將所得的溶液減壓濃縮至干，然后重新溶解在碳酸氫鈉水溶液中。將所得溶液用100ml乙醚洗滌，然后用1N鹽酸酸化至pH4。然后用10%異丙醇的二氯甲烷溶液萃取所需產品，用硫酸鈉干燥并過濾。然后將溶液減壓濃縮至干得到0.567g所需標題產品。
NMR(d6-DMSO)δ8.35(d，1);7.92(d，2);7.70(m，2);
7.53(m，2);5.22(s，2);3.92(m，1);
1.78(m，1);1.40(m，1);1.20(m，1);
0.90(m，6).
制備例7A.2(S)-N-[[N(甲基)-N-(吡啶-2-基乙基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸二苯甲酯向1.13g(3.50mmol)制備例4C副標題中間體的2ml二氯甲烷溶液中加入0.441ml(3.18mmol)N-(吡啶-2-基乙基)胺。當TLC顯示反應完成時，將反應溶液倒進二氧化硅柱(用5%甲醇的乙酸乙酯洗脫)。將含有所需產品的組份合并并濃縮至干得到1.33g所需的標題中間體。
NMR(CDCl3)δ8.43(d，1);7.55(t，1);7.3(m，10);
7.10(m，2);6.90(s，1);5.63(d，1);
4.60(m，1);3.65(m，2);3.02(t，2);
2.81(s，3);1.95(m，1);1.3(m，1);
1.15(m，1);0.85(m，6).
B.2-(S)-N-[[N-(甲基)-N-(吡啶-2-基乙基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸基本上按制備例4E所述的方法制備所需的副標題產物，用1.1g(2.39mmol)制備例5A標題中間體和3ml濃鹽酸得到0.527g固體。
NMR(CDCl3)δ10.00(br.s，1);8.55(d，1);
7.62(d，1);7.2(m，2);5.7(d，1);
4.35(m，1);3.70(m，2);3.06(t，2);
2.83(s，3);1.95(m，1);1.50(m，1);
1.20(m，1);0.9(m，6).
制備例8A.2(S)-N-(咪唑-1-基羰基)氨基己酸二苯甲酯將400mg(1.34mmol)2(S)-氨基己酸二苯甲酯的3ml乙腈溶液加到在2ml乙腈中的218mg(1.34mmol)1，1′-羰基二咪唑中。將所得溶液在室溫下攪拌約45分鐘，然后用柱色譜法純化(用25%乙酸乙酯的二氯甲烷洗脫)得到350mg所需的標題中間體。
NMR(CDCl3)δ8.15(s，1);7.35(s，10);7.08(s，1);
6.95(s，1);6.50(d，1);4.80(m，1);
2.0(m，1);1.80(m，1);1.30(m，3);
1.15(m，3);0.82(t，3).
B.2(S)-N-[[N-(甲基)-N-[(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]]氨基己酸二苯甲酯將300mg(0.766mmol)制備例6A副標題中間體的1ml乙腈溶液加到132mg(0.766)N-(甲基)-2-氨基喹啉的1ml乙腈中。當TLC顯示反應完成時，將反應溶液減壓濃縮至干得到一種油。將該油用柱色譜法純化(用10-30%乙酸乙酯的二氯甲烷梯度洗脫劑)。將含有所需產品的組份減壓濃縮至干得到330mg所需的標題中間體。
NMR(CDCl3)δ8.15(d，1);8.0(d，1);7.80(d，1);
7.70(t，1);7.55(t，1);7.40(d，1);
7.30(s，10);6.90(s，1);
6.08(br.s，3);4.70(m，3);3.02(s，3);
1.90(m，1);1.75(m，1);1.20(m，4);
0.80(t，3).
C.2(S)-N-[[N-(甲基)-N-(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基己酸向330mg(0.666mmol)制備例6B副標題中間體的2ml甲醇溶液中加入105mg(1.66mmol)甲醇銨和83mg5%鈀碳。將反應混合物在回流溫度下反應約2小時。當TLC檢測反應完成時，將反應混合物冷卻，用乙酸乙酯稀釋并過濾除去5%鈀碳。然后將溶液與50ml水合并，分離所得的各層并將有機層減壓濃縮至干得到165mg所需的標題產物。
NMR(d6-DMSO)δ8.30(d，1);7.92(d，2);7.70(t，1);
7.55(t，2);7.35(d，1);6.60(d，1);
4.62(s，2);4.03(m，1);2.85(s，3);
1.62(m，2);1.20(m，4);0.80(t，3).
制備例9A.2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基己酸二苯甲酯將40mg(0.10mmol)制備例6A標題中間體的1ml二甲基甲酰胺溶液加到在二甲基甲酰胺中的16.5mg(0.104mmol)2-羥甲基喹啉、12.5mg(0.102mmol)4-二甲氨基吡啶和0.10mmol氯化銅(Ⅰ)中。將所得的反應混合物在室溫下反應約3小時，然后用柱色譜法純化(用65%己烷的乙酸乙酯洗脫)得到37mg所需的標題中間體。
NMR(CDCl3)δ8.15(d，1);8.05(d，1);7.80(d，1);
7.70(t，1);7.55(t，1);7.45(d，1);
7.30(s，10);6.90(s，1);5.45(d，1);
5.40(s，2);4.55(m，1);1.90(m，1);
1.72(m，1);1.20(m，4);0.80(t，3).
實施例11，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-(芐氧羰基)氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷制備215mg(0.818mmol)2(S)-N-(芐氧羰基)氨基-3-甲基丁酸，12mg(0.082mmol)羥基苯并三唑單水合物(HOBT·H2O)、104μl(0.818mmol)N-甲基嗎啉(NMM)和362mg(0.818mol)苯并三唑-1-基氧三(二甲氨基)鏻六氟磷酸鹽(BOP)的2ml二甲基甲酰胺溶液并使其在室溫下攪拌約10分鐘。同時，將80μl(0.40mmol)N，N-二環己胺加到71mg(0.20mmol)制備例1G標題中間體的6ml二甲基甲酰胺溶液中，得到一白色固體。將該固體離心除去并將溶液加到上面的溶液中。將所得反應混合物減壓濃縮至體積2.0ml，使其在室溫下反應約48小時。然后將反應混合物用20ml乙酸乙酯稀釋并將所得的溶液加到120ml2∶1乙酸乙酯/0.1N鹽酸溶液。將所得的各層分開并將有機層用1∶1的飽和碳酸氫鈉/鹽水溶液洗滌，用硫酸鈉干燥，過濾，然后減壓濃縮至干得到110mg物質。然后將該物質用快速色譜法純化(用65%甲苯的乙酸乙酯洗脫)。將含有所需產物的組份合并，減壓濃縮至干得到52mg所需標題產物。
NMR(80%CDCl3/20% CD3OD)δ7.35(s，10);7.18(m，10);
5.12(s，4);4.20(d，2);4.12(m，1);
3.90(d，1);3.18(m，1);2.82(m，5);
2.05(m，2);0.90(m，9);(d，3).
MSm/e 749(M++1).
元素分析 C44H52N4O7計算值C，70.57;H，7.00;N，7.48;
實測值C，70.31;H，7.11;N，7.76.
實施例21，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-(芐氧羰基)氨基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法制備了標題化合物。用194mg(0.818mmol)2(S)-N-(芐氧羰基)氨基-丁酸，12mg(0.082mmol)HOBT·H2O、104μl(0.818mmol)NMM和370mg(0.818mmol)BOP，80μl(0.40mmol)N，N-二環己胺和71mg(0.20mmol)制備例1G標題中間體，得到21mg所需化合物。
NMR(80% CDCl3/20% CD3OD)δ7.35(s，10);7.20(m，10);
5.15(s，4);4.25(d，2);4.10(m，1);
3.90(d，1);3.15(m，1);2.80(m，5);
1.45(m，4);0.8(m，6).
實施例31，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-(喹啉-2-基羰基)氨基-3-氰基丙酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法制備了標題化合物。用163mg(0.605mmol)2(S)-N-(喹啉-2-基羰基)氨基-3-氰基丙酸，8.1mg(0.06mmol)HOBT·H2O，67μl(0.60mmol)NMM和268mg(0.605mmol)BOP、61μl(0.30mmol)N，N-二環己基胺和53mg(0.15mmol)制備例1G副標題中間體，得到32mg非對映體混合物。用反相高效液相色譜(HPLC)分離這些非對映異構體(含0.36%乙酸的1∶1∶1乙腈/甲醇/水)得到7mg所需化合物。
NMR(80% CDCl3/20% CD3OD)δ8.20(m，6);7.75(m，6);
7.0(m，10);4.75(m，2);4.25(m，2);
3.0(m，8).
MSm/e 785(M++1).
實施例41，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法制備了標題化合物，用231mg(0.762mmol)2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酸，11mg(0.076mmol)HOBT·H2O、92μl(0.84mmol)NMM和337mg(0.762mmol)BOP，76μl(0.38mmol)N，N-二環己基胺和66mg(0.19mmol)制備例1G標題中間體制得70mg粗品。用反相HPLC純化該混合物(含0.5%乙酸的35%乙腈/35%甲醇/30%水)得到7mg含92%所需標題產物的物質。
NMR(80% CDCl3/20% CD3OD)δ8.05(m，2);7.72(m，2);
7.45(m，2);7.10(m，10);5.35(s，4);
4.15(m，2);3.95(m，2);3.10(d，1);
2.80(m，5);2.0(m，2);0.8(m，12).
實施例51，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(芐氧羰基)氨基-3-氨基甲酰基丙酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法制備標題化合物，用218mg(0.818mg)2(S)-N-(芐氧羰基)氨基-3-氨基甲酰基丙酸，12mg(0.082mmol)HOBT·H2O，104μl(0.818mmol)NMM和362mg(0.818mmol)BOP，80μl(0.40mmol)N，N-二環己基胺和71mg(0.20mmol)制備例1G標題中間體，得到7mg含80-85%所需的標題產物的物質。
實施例61，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(芐氧羰基)氨基-3-氰基丙酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用137mg(0.552mmol)2(S)-N-(芐氧羰基)氨基-3-氰基丙酸，8mg(0.06mmol)HOBT·H2O，6μl(0.552mmol)NMM和244mg(0.552mmol)BOP、55μl(0.28mmol)N，N-二環己胺和49mg(0.14mmol)制備例1G副標題中間體制得了標題化合物。用反相HPLC純化所得物質(含0.2%乙酸銨的32.5%乙腈/32.5%甲醇/35%水)得到38mg所需標題產物。
NMR(90% CDCl3/10% D2O)δ7.10(m，20);5.10(s，4);
4.58(m，1);4.40(m，1);4.25(m，1);
4.10(m，2);3.22(m，1);2.80(m，8).
MSm/e 743(M++1).
元素分析 C42H42N6O7計算值C，67.91;H，5.70;N，11.31;
實測值C，68.02;H，5.84;N，11.06.
實施例71，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(芐氧羰基)氨基-3-吡唑-1-基丙酰基]氨基]-3，4-順環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用250mg(0.901mmol)2(S)-N-(芐氧羰基)氨基-3-吡唑-1-基丙酸，12mg(0.09mmol)HOBT·H2O，100μl(0.901mmol)NMM和398mg(0.901mmol)BOP，90μl(0.45mmol)N，N-二環己基胺和80mg(0.22mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的37.5%乙腈/37.5%甲醇/25%水)得到所需的標題產物。
實施例81，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法制備標題化合物，用328mg(1.31mmol)2(S)-N-(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-3-甲基丁酸，17.6mg(0.13mmol)HOBT·H2O，143μl(1.30mmol)NMM和575mg(1.30mmol)BOP，124μl(0.619mmol)N，N-二環己胺和110mg(0.310mmol)制備例1G標題中間體得到195mg粗品。將該物用反相HPLC純化(用含0.05%乙酸銨的30%乙腈/25%甲醇/45%水)得到95mg所需產品。
NMR(80% d6-DMSO/20% D2O)δ8.42(s，1);7.72(m，1);
7.25(m，2);7.05(m，10);5.02(m，4);
4.0(m，2);3.75(m，2);3.15(d，1);
2.70(m，5);1.85(m，2);0.7(m，12).
MSm/e 751(M++1).
元素分析 C42H50N6O7計算值C，67.18;H，6.71;N，11.19;
實測值C，67.39;H，6.87;N，11.92.
實施例91，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(芐氧羰基)氨基-3-咪唑-4-基丙酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用248mg(0.856mmol)2-N-(芐氧羰基)氨基-3-咪唑-4-基丙酸，12mg(0.085mmol)HOBT·H2Ol，94μl(0.86mmol)NMM和378mg(0.856mmol)BOP，87μl(0.438mmol)N，N-二環己胺和76mg(0.214mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.3%乙酸銨的35%乙腈/35%甲醇/30%水)得到19mg所需產品。
NMR(80% d6-DMSO/20% D2O)δ7.50(s，2);7.10(m，20);
6.68(s，2);4.95(s，4);4.05(m，4);
3.20(m，1);2.60(m，8).
實施例101，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用333mg(1.154mmol)2(S)-N[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基丁酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，128μl(1.16mmol)NMM和510mg(1.15mmol)BOP，112μl(0.563mmol)N，N-二環己基胺和100mg(0.282mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的45%乙腈/35%甲醇/20%水)得到75mg所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ8.25(m，2);7.90(m，2);7.80(m，2);
7.70(m，2);7.50(m，4);7.10(m，10);
5.3(m，4);4.2(m，3);4.0(m，2);
3.22(m，1);2.80(m，4);1.65(m，2);
1.55(m，2);0.85(m，6).
MSm/e 823(M++1).
元素分析 C48H50N6O7計算值C，70.05;H，6.12;N，10.21;
實測值C，69.85;H，6.14;N，10.37.
實施例111，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(芐氧羰基)氨基-3-甲硫丙酰基]氨基]-3，4-順環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用318mg(1.18mmol)2(S)-N(芐氧羰基)氨基-3-甲硫丙酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，132μl(1.2mmol)NMM和523mg(1.18mmol)BOP，0.112ml(0.563mmol)N，N-二環己胺和100mg(0.282mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.2%乙酸銨的40%乙腈/35%甲醇/25%水)得到27mg所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ7.30(m，10);7.15(m，10);5.08(s，4);
4.45(m，1);4.25(m，2);4.15(m，1);
4.0(m，1);3.25(m，1);2.70(m，8);
2.02(s，6).
MSm/e 784(M+).
實施例121，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(芐氧羰基)氨基-4-氨甲酰基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用331mg(1.18mmol)2(S)-N(芐氧羰基)氨基-4-氨甲酰基丁酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，132μl(1.2mmol)NMM和523mg(1.18mmol)BOP，0.112ml(0.563mmol)N，N-二環己胺和100mg(0.282mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的32.5%乙腈/32.5%甲醇/35%水)得到28mg所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ7.2(m，20);5.10(s，4);4.30(m，1);
4.10(m，3);3.18(d，1);2.80(m，5);
2.2(m，4);1.90(m，4).
MSm/e 807(M++1).
元素分析 C44H50N6O9計算值C，65.49;H，6.25;N，10.41;
實測值C，65.25;H，6.30;N，10.21.
實施例131，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-4-甲基戊酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用315mg(1.18mmol)2(S)-N(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-4-甲基戊酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，0.132ml(1.2mmol)NMM和523mg(1.18mmol)BOP，0.112ml(0.563mmol)N，N-二環己胺和100mg(0.282mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的32.5%乙腈/32.5%甲醇/35%水)得到76mg所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ8.4(s，2);7.75(m，2);7.40(m，4);
7.25(m，4);7.10(m，10);5.10(s，4);
4.10(m，4);4.00(d，1);3.25(d，1);
2.80(m，4);1.4(m，4);0.8(m，12).
MSm/e 778(M+).
元素分析 C44H54N6O7計算值C，67.85;H，6.99;N，10.79;
實測值C，67.60;H，6.93;N，10.76.
實施例141，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(芐氧羰基)氨基-3(S)-甲基丙酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用306mg(1.15mmol)2(S)-N(芐氧羰基)氨基-3(S)-甲基丙酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，128μl(1.16mmol)NMM和510mg(1.154mmol)BOP，112μl(0.563mmol)N，N-二環己胺和100mg(0.282mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物棕色固體。將該固體用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的45%乙腈/35%甲醇/20%水)以得到46mg所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ7.35(m，10);7.15(s，10);5.10(s，4);
4.2(m，3);4.0(q，1);3.92(d，1);
3.22(m，1);2.80(m，4);1.75(m，2);
1.45(m，2);1.1(m，2);0.8(m，12).
MSm/e 777(M++1).
元素分析 C46H56N4O7計算值C，71.11;H，7.26;N，7.21;
實測值C，70.84;H，7.36;N，7.29.
實施例151，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基]-3(S)-甲基戊酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用365mg(1.15mmol)2(S)-N[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸，16mg(0.12mmol)HOBT·H2O，0.128ml(1.16mmol)NMM和510mg(1.154mmol)BOP，112μl(0.563mmol)N，N-二環己胺和100mg(0.282mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的45%乙腈/35%甲醇/20%水)得到90mg所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ8.25(d，2);7.95(d，2);7.85(d，2);
7.70(m，2);7.55(m，4);7.10(m，10);
5.35(m，4);4.25(m，2);4.20(d，1);
4.0(m，2);3.22(m，1);2.80(m，4);
1.8(m，2);1.5(m，1);1.3(m，1);
1.1(m，2);0.8(m，12).
MSm/e 879(M++1).
元素分析 C52H58N6O7計算值C，71.05;H，6.65;N，9.56;
實測值C，71.05;H，6.70;N，9.75.
實施例161，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N-(吡啶-2-基乙基)氨基]羰基]氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用522mg(1.87mmol)2(S)-N[[N(甲基)-N(吡啶-2-基乙基)氨基]羰基]氨基-3-甲基丁酸，16mg(0.115mmol)HOBT·H2O，0.207ml(1.88mmol)NMM和825mg(1.87mmol)BOP，183μl(0.919mmol)N，N-二環己胺和162mg(0.455mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.4%乙酸銨的45%乙腈/20%甲醇/35%水)得到42mg所需產物。
NMR(CD3OD)δ8.42(m，2);7.70(m，2);7.20(m，14);
4.22(m，3);4.0(q，1);3.85(d，1);
3.6(m，4);3.22(m，1);2.95(m，4);
2.82(s，6);2.80(m，4);1.95(m，2);
0.8(m，12).
實施例171，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[(8-氟喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用286mg(0.892mmol)2(S)-N[(8-氟喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酸，12mg(0.089mmol)HOBT·H2O，0.100ml(1.89mmol)NMM和395mg(0.892mmol)BOOP，87μl(0.44mmol)N，N-二環己胺和78mg(0.22mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的35%乙腈/35%甲醇/30%水)得到34mg所需產物。
NMR(CD3OD)δ8.25(d，2);7.60(m，4);7.45(m，4);
7.10(m，10);5.35(m，4);4.25(m，2);
4.15(d，1);4.05(m，1);3.95(m，1);
3.25(m，1);2.80(m，4);2.0(m，2);
0.85(m，12).
MSm/e 888(M++2).
實施例181，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用187mg(0.62mmol)2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰甲酰基]氨基丁酸，9mg(0.06mmol)HOBT·H2O，70μl(0.620mmol)NMM和274mg(0.620mmol)BOP，71μl(0.355mmol)N，N-二環己胺和63mg(0.18mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到50mg所需產物。
NMR(CD3OD)δ8.25(dd，2);7.95(m，2);7.85(m，2);
7.70(m，2);7.55(t，2);7.40(dd，2);
7.15(m，10);4.80(ABX，4);
4.35(m，2);4.15(m，2);4.0(m，1);
3.25(m，1);3.02(s，3);2.97(s，3);
2.80(m，4);1.7(m，4);0.85(m，6).
MSm/e 849(M++1).
實施例191，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酰基]氨基-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用232mg(0.704mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸，10mg(0.070mmol)HOBT·H2O，78μl(0.70mmol)NMM和312mg(0.704mmol)BOP，80μl(0.40mmol)N，N-二環己胺和72mg(0.201mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ8.25(dd，2);7.95(m，2);7.85(d，2);
7.70(m，2);7.55(t，2);7.40(d，2);
7.15(m，10);4.75(ABX，4);
4.38(d，1);4.28(t，1);4.20(m，1);
4.0(m，2);3.25(m，1);3.02(s，6);
2.75(m，4);1.78(m，2);
1.05-1.45(m，4);0.75(m，12).
MSm/e 906(M++2).
實施例201，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(芐氧羰基)氨基]丙酰基]氨基-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用94mg(0.42mmol)2(S)-N(芐氧羰基)氨基丙酸，6mg(0.04mmol)HOBT·H2O，46μl(0.42mmol)NMM和187mg(0.42mmol)BOP，56μl(0.28mmol)N，N-二環己胺和50mg(0.14mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到15mg所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ7.30(m，10);7.10(m，10);5.05(s，4);
4.30(m，1);4.20(m，1);4.1(m，2);
3.95(m，1);3.20(m，1);2.75(m，4);
1.22(m，6).
MSm/e 694(M++2).
實施例211，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基戊酰基]氨基-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用90mg(0.28mmol)2(S)-N-[[(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基戊酸，4mg(0.03mmol)HOBT·H2O，32μl(0.28mmol)NMM和126mg(0.285mmol)BOP，41μl(0.20mmol)N，N-二環己胺和36.2mg(0.102mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到32mg所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ8.25(dd，2);7.95(m，2);7.85(m，2);
7.70(m，2);7.52(t，2);7.40(dd，2);
7.15(m，10);4.75(ABX，4);
4.42(m，1);4.30(m，1);4.18(m，2);
3.97(m，1);3.25(m，1);3.03(s，3);
2.98(s，3);2.78(m，4);1.65(m，4);
1.25(m，4);0.85(m，6).
MSm/e 878(M++2).
實施例221，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基己酰基]氨基-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用130mg(0.394mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基己酸，5.3mg(0.039mmol)HOBT·H2O，45μl(0.39mmol)NMM和175mg(0.394mmol)BOP，45μl(0.20mmol)N，N-二環己胺和40mg(0.11mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到45mg所需標題產物。
1H NMR(CD3OD)δ8.25(dd，2);7.95(m，2);
7.85(dd，2);7.70(m，2);7.55(t，2);
7.40(dd，2);7.15(m，10);
4.75(ABX，4);4.40(m，1);4.25(m，1);
4.15(m，2);3.95(m，1);3.25(m，1);
3.05(s，3);3.0(s，3);2.80(m，4);
1.60(m，4);1.20(m，8);0.82(m，6).
MSm/e 906(M++2).
實施例231，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(吡啶-3-基甲氧羰基)氨基-3，3-二甲丁酰基]氨基-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用214.9mg(0.807mmol)2(S)-N(吡啶-3-基甲氧羰基)氨基-3，3-二甲基丁酸，11.2mg(0.0829mmol)HOBT·H2O，100μl(0.909mmol)NMM和344.0mg(0.778mmol)BOP，80μl(0.40mmol)N，N-二環己胺和69.1mg(0.194mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到43.6mg白色固體，它為4種非對映異構體的混合物。
NMR(CD3OD)δ8.57(br.s，2);8.47(m，2);
7.84(d，2);7.42(m，2);
6.96-7.27(m，10);5.15(AB，4);
4.14-4.24(m，2);3.89(br.s，1);
3.25(m，1);3.07(m，2);
2.61-2.97(m，4);0.90(m，18).
MSm/e 780(M++2).
實施例241，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用142.0mg(0.508mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酸，7.5mg(0.056mmol)HOBT·H2O，60μl(0.55mmol)NMM和243.8mg(0.551mmol)BOP，63μl(0.32mmol)N，N-二環己胺和52.5mg(0.148mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的40%乙腈/20%甲醇/30%水)得到10.9mg所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ8.47(br.s，2);7.76(m，2);
7.03-7.33(m，14);4.46-4.64(m，4);
4.13-4.39(m，3);4.04(q，2);
3.25(s，1);2.98(s，6);
2.67-2.98(m，4);1.88(m，2);
1.43(m，2);1.10(m，2);0.84(m，12).
MSm/e 807(M++3).
實施例251，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(吡啶)-2-基甲氧羰基)氨基]己酰基]氨基-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用136.7mg(0.513mmol)2(S)-N(吡啶-2-基甲基羰基)氨基己酸，10.4mg(0.0770mmol)HOBT·H2O，0.060ml(0.55mmol)NMM和242.8mg(0.549mmol)BOP，62μl(0.311mmol)N，N-二環己胺和51.4mg(0.145mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到24.5mg所需標題產品。
NMR(CD3OD)δ8.47(m，2);7.81(m，2);
7.02-7.53(m，14);5.18(AB，4);
4.22(m，3);4.00(m，2);3.25(m，1);
2.70-2.94(m，4);1.05-1.73(m，12);
0.90(m，6).
MSm/e 780(M++2).
實施例261，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(喹啉-2-基羰基)氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，用223mg(0.818mmol)2(S)-N(喹啉-2-基羰基)氨基-3-甲基丁酸，11.1mg(0.0818mmol)HOBT·H2O，0.090ml(0.82mmol)NMM和362mg(0.818mmol)BOP，73μl(0.31mmol)二異丙基乙基胺和125mg(0.200mmol)制備例1G標題化合物的二對甲苯磺酸鹽制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的45%乙腈/35%甲醇/20%水)得到10mg含84%所需標題產物的物質。
NMR(CD3OD)δ8.15(m，2);7.70(m，6);7.0(m，10);
4.45(m，1);4.25(m，2);4.05(m，1);
3.2(dd，1);2.8(m，5);2.15(m，1);
2.05(m，1);0.9(m，12).
MSm/e 791(M++1).
實施例271，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3-氰基丙酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述的方法，使用165mg(0.528mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3-氰基丁酸，10mg(0.053mmol)HOBT·H2O，0.060ml(0.53mmol)NMM和234mg(0.528mmol)BOP，73μl(0.37mmol)N，N-二環己胺和65mg(0.18mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到49mg含84%所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ8.28(d，2);8.0(d，2);7.88(t，2);
7.72(t，2);7.57(m，2);7.43(t，2);
7.18(m，10);4.70(m，5);4.20(m，3);
3.10(d，2);3.00(s，3);2.97(s，3);
2.85(m，8).
MSm/e 872(M++2).
實施例281，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，使用145.8mg(0.580mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，176.0mg(0.126mmol)HOBT·H2O，73.0μl(0.664mmol)NMM和281.4mg(0.636mmol)BOP，0.060ml(0.30mmol)N，N-二環己胺和99.7mg(0.281mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的35%乙腈/20%甲醇/45%水)得到6mg白色固體狀所需標題產物。
NMR(CDCl3)δ8.50(d，2);7.67(m，2);
7.02-7.31(m，15);6.78(d，1);
6.03(m，1);5.98(m，1);
4.34-4.60(m，4);4.24(t，1);
3.95-4.19(m，3);3.74(s，1);
3.27(s，1);2.73-3.05(m，10);
1.83(m，2);1.67(m，2);0.89(t，6).
MSm/e 749(M++1).
實施例291，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(6-甲基吡啶-2-基甲氧羰基)氨基-3-甲氧基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，使用126.2mg(0.474mmol)2(S)-N-(6-甲基吡啶-2-基甲氧羰基]氨基-3-甲基丁酸，5.4mg(0.040mmol)HOBT·H2O，0.060ml(0.55mmol)NMM和229.6mg(0.519mmol)BOP，95μl(0.48mmol)N，N-二環己胺和73.2mg(0.206mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的35%乙腈/20%甲醇/45%水)得到36mg白色固體狀所需標題產物。
NMR(CDCl3)δ7.66(t，2);7.03-7.51(m，14);
5.12(m，4);3.86-4.21(m，5);
3.26(m，1);2.64-2.95(m，4);
2.50(s，6);2.00(m，2);
0.82(m，12).
MSm/e 780(M++2).
實施例301，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3，3-二甲基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，使用138.9mg(0.439mmol)2(S)-N-(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基]-3，3-二甲基丁酸，4.8mg(0.036mmol)HOBT·H2O，54.5μl(0.496mmol)NMM和212.0mg(0.479mmol)BOP，86μl(0.43mmol)N，N-二環己胺和71.1mg(0.200mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到50mg所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ8.28(d，2);7.98(d，2);7.89(d，2);
7.73(t，2);7.55(m，4);
6.97-7.27(m，10);5.32(m，4);
4.29(m，2);4.18(s，1);4.03(m，1);
3.91(s，1);3.29(m，1);
2.66-2.97(m，4);0.97(s，9);
0.94(s，9).
MSm/e 879(M++1).
元素分析 C52H58N6O7計算值C，71.04;H，6.65;N，9.56;
實測值C，70.84;H，6.57;N，9.39.
實施例311，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酰基]氨基]-3，4-順環氧己烷基本上按實施例1所述方法，使用112.3mg(0.423mmol)2(S)-N-[[N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3，3-二甲基戊酸，6.5mg(0.048mmol)HOBT·H2O，0.060ml(0.55mmol)NMM和212.8mg(0.481mmol)BOP，85μl(0.43mmol)N，N-二環己胺和67.2mg(0.189mmol)制備例1G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用二乙醚重結晶得到69mg所需標題產物。
NMR(d6-DMSO)δ8.43(s，2);8.25(d，1);8.03(d，1);
7.72(t，2);6.94-7.31(m，14);
6.70(m，2);6.30(m，1);6.14(d，1);
4.32(m，3);3.87-4.09(m，4);
2.61-3.05(m，6);1.57(m，2);
1.21(m，2);0.91(m，2);
0.58-0.79(m，12).
MSm/e 777(M++1).
實施例321，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，使用129.7mg(0.430mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，5.1mg(0.038mmol)HOBT·H2O，51μl(0.47mmol)NMM和199.9mg(0.452mmol)BOP，52.0μl(0.261mmol)N，N-二環己胺和54.8mg(0.120mmol)制備例2G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到16mg所需標題產物。
NMR(CDCl3)δ8.67(m，3);6.70-7.81(m，25);
6.33(m，2);4.03-4.70(m，8);
3.67(m，1);3.29(m，1);
2.72-3.08(m，10);1.43-1.87(m，4);
0.82(m，6).
MSm/e 948(M+).
元素分析 C58H60N8O5計算值C，73.39;H，6.37;N，11.80;
實測值C，73.15;H，6.43;N，11.60.
實施例331，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二[N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3(S)-甲基戊酰基]氨基-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，使用136.8mg(0.490mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基-3-甲基戊酸，5.6mg(0.041mmol)HOBT·H2O，55μl(0.50mmol)NMM和237.1mg(0.536mmol)BOP，55.0μl(0.276mmol)N，N-二環己胺和57.4mg(0.126mmol)制備例2G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到40mg白色固體狀所需標題產物。
NMR(CDCl3)δ8.46(d，2);7.10-7.87(m，21);
6.62(d，1);6.08(m，2);
4.28-4.63(m，7);4.16(s，2);
3.34(s，1);2.97(m，10);1.86(m，2);
1.39(m，2);1.10(m，2);0.85(m，12).
MSm/e 904(M+).
元素分析 C54H64N8O5計算值C，71.66;H，7.13;N，12.38;
實測值C，71.48;H，7.12;N，12.08.
實施例341，6-二萘-2-基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，使用77.9mg(0.310mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，5.2mg(0.038mmol)HOBT·H2O，40μl(0.37mmol)NMM和152.0mg(0.344mmol)BOP，55.0μl(0.276mmol)N，N-二環己胺和57.2mg(0.126mmol)制備例2G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的35%乙腈/20%甲醇/45%水)得到13mg白色固體狀所需標題產物。
NMR(CDCl3)δ8.49(m，2);7.01-7.79(m，20);
6.85(d，1);6.56(d，1);5.96(m，2);
3.78-4.64(m，8);3.58(s，1);
3.37(s，1);2.71-3.12(m，10);
1.43-1.89(m，4);0.84(m，6).
MSm/e 850(M++2).
實施例351，6-二萘-2-基硫-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷基本上按實施例1所述方法，使用58.4mg(0.232mmol)2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，4.5mg(0.033mmol)HOBT·H2O，30μl(0.27mmol)NMM和111.2mg(0.251mmol)BOP，38.0μl(0.191mmol)N，N-二環己胺和49.1mg(0.0866mmol)制備例3G標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的35%乙腈/20%甲醇/45%水)得到52.4mg白色固體狀所需標題產物。
NMR(CDCl3)δ8.48(m，2);8.13(s，1);7.96(s，1);
6.55-7.83(m，20);6.28(m，1);
6.14(m，1);4.36-4.69(m，4);4.25(m，2);
3.75(m，1);3.52(m，3);3.18(m，2);
3.07(dd，1);2.98(m，7);1.87(m，2);
1.69(m，2);0.93(t，6).
MSm/e 912(M++1).
元素分析 C50H56N8O5S2計算值C，65.77;H，6.18;N，12.27;
實測值C，65.75;H，6.17;N，12.03.
實施例361，8-二苯基-3(S)，6(S)-二[N-[2(S)-N-(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基]-3-甲基丁酰基]氨基]-4，5-順-環氧辛烷基本上按實施例1所述方法，使用262mg(1.04mmol)2(S)-N-[(吡啶-2-基甲氧羰基)氨基]-3-甲基丁酸，14mg(0.10mmol)HOBT·H2O，115μl(1.04mmol)NMM和462mg(1.04mmol)BOP，103μl(0.522mmol)N，N-二環己胺和100mg(0.261mmol)制備例4標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的55%乙腈/25%甲醇/20%水)得到101mg所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ8.4(s，2);7.7(t，4);7.40(m，2);
7.10(m，10);5.18(m，4);3.90(m，4);
2.95(m，2);2.60(m，4);2.05(m，4);
1.75(m，2);0.95(m，12).
MSm/e 778(M+).
元素分析 C44H54N6O7計算值C，67.85;H，6.99;N，10.79;
實測值C，68.07;H，7.05;N，10.65.
實施例371，10-二苯基-4(S)，7(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-5，6-順-環氧癸烷基本上按實施例1所述方法，使用128mg(0.508mmol)2(S)-N-[[N-(甲基)-N(吡啶-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，7mg(0.05mmol)HOBT·H2O，60μl(0.53mmol)NMM和225mg(0.508mmol)BOP，92μl(0.46mmol)N，N-二環己胺和95mg(0.23mmol)制備例5標題中間體制備了標題化合物。將所得物用反相HPLC純化(用含0.5%乙酸銨的50%乙腈/20%甲醇/30%水)得到110mg所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ8.45(br.s，2);7.75(t，2);
7.25(m，4);7.13(m，10);4.55(AB，4);
4.35(m，1);4.15(m，2);3.98(m，1);
3.85(m，1);3.35(m，1);2.95(s，6);
2.55(m，4);1.80(m，4);1.60(m，8);
0.96(m，6).
MSm/e 806(M++2).
實施例381，10-二苯基-4(S)，7(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-5，6-順-環氧癸烷基本上按實施例1所述方法，使用145mg(0.480mmol)2(S)-N-[[N-(甲基)-N-(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酸，6.5mg(0.048mmol)HOBT·H2O，53μl(0.48mmol)NMM和212mg(0.480mmol)BOP，87μl(0.44mmol)N，N-二環己胺和95mg(0.23mmol)制備例5的標題中間體制備了標題化合物。將所得物用柱色譜法純化(用乙酸乙酯作洗脫劑)得到125mg所需標題產物。
NMR(CD3OD)δ8.2(m，2);7.95(m，2);7.83(m，2);
7.72(t，2);7.55(t，2);7.40(d，2);
7.10(m，10);4.70(m，4);4.40(t，1);
4.15(m，2);3.98(m，1);3.85(m，1);
3.38(m，1);3.02(s，3);2.97(s，3);
2.55(m，4);1.80(m，4);1.58(m，8);
0.97(t，6).
如上所述，本發明化合物可用于抑制HIV蛋白酶，這種蛋白酶是一種與病毒組分的產生和組合有關的酶。本發明一個實例是提供了一種治療或抑制HIV感染的方法，該方法包括給予所需的靈長類動物有效劑量的式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽。本發明的另一實施例是提供一種治療或預防愛滋病的方法，它包括給需要的靈長類動物有效量的式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽。本發明再一實例是一種抑制HIV復制的方法，它包括將式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽給予HIV感染細胞或對HIV感染敏感的細胞。
這里所用術語“有效量”，指能抑制介入病毒成分的產生和組合的HIV蛋白酶的本發明化合物的量。在適當情況下，本方法預期的HIV蛋白酶的抑制作用包括治療性或預防性處理。當然，為獲得治療性或預防性處理效果，按本發明所給化合物的具體劑量是由病例所處的具體環境決定的。例如包括所給的化合物、給藥途徑、治療條件和被治療個體。典型的日劑量為每千克體重0.01mg至50mg本發明活性化合物。通常優選的日劑量為0.05mg/kg至20mg/kg，理想的劑量為0.1mg/kg至10mg/kg。
本發明化合物可通過包括口服、直腸、皮膚、皮下、靜脈、肌肉和鼻內等不同途徑給藥。本發明化合物在給藥前最好配成制劑。因此，本發明的另一實例是提供一種藥物制劑，它包括有效量的式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽，以及藥物上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
這種制劑中的活性成分為制劑重量的0.1%至99.9%。“藥學上可接受的”載體、稀釋劑或賦形劑應與制劑的其它組分相容，并對其接受者無害。
本發明的藥物制劑可通過已知的方法用已知的和容易得到的組分制備。在制備本發明組合物時，活性成分通常與載體混合，或被載體稀釋，或包含在膠囊、扁囊、紙或其它容器等形式的載體中。當載體用作稀釋劑時，它可以是固體、半固體或液體物質，這些物質用作活性成分的載體、賦形劑或介質。于是組合物可以是片劑丸劑、粉劑、錠劑、小藥囊劑、扁囊劑、酏劑、懸浮液、乳濁液、溶液、糖漿、氣溶膠(作為固體或在液體介質中)、含例如重量不超過10%活性成分的軟膏劑、軟和硬的明膠囊、栓劑、滅菌注射液、滅菌包裝的粉劑等等。
以下制劑實施例僅用于說明本發明，并不是對本發明的范圍作任何限制。術語“活性成分”指式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽。
制劑1硬明膠膠囊用以下成分制備量(mg/膠囊)活性成分250干淀粉200硬脂酸鎂10總量460mg制劑2由以下成分制備片劑量(mg/膠囊)活性成分250微晶纖維素400
二氧化硅微粒10硬脂酸5總量665mg將以上成分混合后壓制成每片重665mg的片劑。
制劑3氣溶膠溶液由以下成分制備重量活性成分0.25甲醇25.75推進劑22(氯二氟甲烷)70.00總量100.00活性化合物與乙醇混合，將混合物加入一部分推進劑22，冷至-30℃，移到一種充填裝置內，將所需量裝入一不銹鋼容器，用剩余推進劑稀釋。隨后裝上容器的閥裝置。
制劑4含60mg活性成分的片劑制備如下活性成分60mg淀粉45mg微晶纖維素35mg聚乙烯吡咯烷酮(10%水溶液)4mg羧甲基淀粉鈉4.5mg硬脂酸鎂0.5mg
滑石1mg總量150mg將活性成分、淀粉及纖維素通過45目U.S.篩并充分混合。將含聚乙烯吡咯烷酮的水溶液與粉狀所得物混合后，再將混合物通過14目U.S.篩。將產生的顆粒在50℃下干燥并通過18目U.S.篩。將事先通過60目U.S.篩的羧甲基淀粉鈉、硬脂酸鎂和滑石加到顆粒中，混合后由制片機壓制成每片重150mg的片劑。
制劑5各含80mg活性成分的膠囊制備如下活性成分80mg淀粉59mg微晶纖維素59mg硬脂酸鎂2mg總量200mg將活性成分、纖維素、淀粉和硬脂酸鎂混合通過45目U.S.篩，以200mg量填入硬明膠膠囊中。
制劑6各含活性成分225mg的栓劑制備如下活性成分225mg飽和脂肪酸甘油酯2，000mg總量2，225mg將活性成分通過60目U.S.篩，并懸浮在事先用所需要最少熱量熔化的飽和脂肪酸甘油脂中。然后將混合物傾入標稱為2g量的栓劑模具中，使之冷卻。
制劑7每5ml劑量含50mg活性成分的懸浮液，其制備如下活性成分50mg羧甲基纖維素鈉50mg糖漿1.25ml苯甲酸溶液0.10ml調味劑q.v.
著色劑q.v.
純水加至總量5ml將活性成分通過45目U.S.篩與羧甲基纖維素鈉及糖漿混合成均勻糊狀。將苯甲酸溶液，調味劑和著色劑用部分水稀釋，攪拌。隨后加入足量水以達到所需體積。
制劑8靜脈內制劑制備如下活性成分100mg等滲鹽水1000ml以上成分的溶液通常以每分鐘1ml的速度靜脈注射。
進行以下實驗(HIV-1蛋白酶抑制劑熒光檢測)以證明本發明化合物抑制HIV蛋白酶的能力。
本文使用的縮寫定義如下BSA-牛血清清蛋白BOC-叔丁氧羰基BrZ-2-溴芐氧羰基2-ClZ-2-氯芐氧羰基
OCC-二環己基碳化二亞胺DIEA-二異丙基乙基胺DTT-二硫蘇糖醇EDTA-亞乙基二胺四乙酸FITC-異硫氨基甲酰基熒光素HEPES-4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸MES-4嗎啉乙磺酸PAM-苯基乙酰亞胺甲基TAPS-3-[三(羥甲基)甲基]氨基-1-磺酸TRIS-三(羥甲基)氨基甲烷TOS-對甲苯磺酰基(tosyl)Ⅰ.蛋白酶和Gag部分的制備A.大腸桿菌K12L507/PHP10D的培養大腸桿菌K12L507/PHP10D的親液膠體從NorthernRegional研究室，Peoria.Illinois61604獲得，入藏登記號為NRRLB-18560(1989年11月14日存入)。將親液膠體傾入含10mlLB介質(每升含10gBacto-胰蛋白胨，5gBacto-酵母提取物及10gNaCl;pH調至7.5，在32℃時培養過夜)的試管中。
將少部分過夜培養物置于含12.5μg/ml四環素的LB-瓊脂(含15g/lBacto-瓊脂的LB培養基上)板上，以得到大腸桿菌K12L507/PHP10D的單克隆分離物。將得到的單克隆接種在含四環素12.5μg/ml的10mlLB介質中，并在32℃劇烈振蕩條件下培養至培養物達到中等對數(mid-log)相。
B.大腸桿菌K12L507/PHPGAG的培養大腸桿菌K12L507/PHPGAG的親液膠體從NRRL得到，入藏登記號為NRRLB-18561(1989年11月14日存入)。基本按以上步驟A中大腸桿菌K12L507/PHP10D的方法分離出純化的大腸桿菌K12L507/PHPGAG克隆，用作培養基的接種物使該培養物增至中等對數相。
C.蛋白酶成分的制備大腸桿菌K12L507/PHP10D培養物在含四環素12.5μg/l的LB介質中在32℃下增至中等對數相。迅速將培養溫度升至40℃以誘導基因表達，允許細胞在此溫度下生長2.5小時，然后迅速將培養在冰上冷卻，將細胞離心，使細胞粒再懸浮于20ml(50mmol，其中含1mmolEDTA，1mmolDTT、1mmolPMSF和10%甘油醇)的MES緩沖液(pH6.0)(“緩沖液A”)中。應用FischerModel300Dismembrator和微探針通過聲處理將細胞溶解。然后在27，000×9下離心，將上清液用緩沖液A稀釋至總量60ml，將其裝入已用緩沖液A平衡的2.0×19cm的QAE-瓊脂糖柱(1ml/min，4℃)中。柱被同溶劑洗滌180分鐘后，在緩沖液A中用0-1.0MNaCl梯度洗脫液洗脫120分鐘。使用Margolinetal.，Biochem.Biophys.Res.Commun.，167，554-560(1990)中描述的合成肽SQNYPIV通過HPLC來測定酶的活性;同時測定P1肽(SQNY)的產生。
將活性成分合并制成1.2M硫酸銨溶液，并加入用含1.2M硫酸銨的緩沖液A平衡的2.0×18cm己基瓊脂糖柱中，將樣品在4℃下以1ml/min流速加入，用平衡緩沖液洗滌240分鐘(1ml/min)，然后以同樣流速用含1.2-0M硫酸銨的緩沖液A的反線性梯度洗脫120分鐘。然后在緩沖液A中同溶劑洗滌柱120分鐘。
將活性成分合并，并使用攪拌細胞的Amicon和YM-10膜濃縮至10ml，然后用于已在緩沖液A中平衡的Monos陽離子交換柱(1.0×10cm)。將樣品在25℃時以1ml/min流速裝入。同溶劑洗滌30分鐘后，用在緩沖液A中的0-0.45MNaCl線性梯度洗脫蛋白酶40分鐘以上，用含0.45MNaCl的緩沖液A同溶劑洗滌柱30分鐘。
將活性成分合并，并使用攪拌細胞的Amicon和YM-10膜濃縮至200μl，然后將蛋白酶引入用含0.1MNaCl緩沖液A平衡過的SuperoseG號排阻柱。用此緩沖液以0.5ml/min流速同溶劑洗滌柱，隨后將HIV蛋白酶以單峰洗脫出來。
QAE-瓊脂糖和己基瓊脂糖從Sigma化學公司購得，Superose6和Monos從Pharmacia購得，緩沖劑和試劑從Sigma得到。
D.Gag成分的制備以類似的方式，將大腸桿菌K 12 L 507/PHP GAG在32℃培養生長至中等對數相，然后升至40℃約4-5小時。將培養物在冰上冷卻、離心，然后將細胞粒再懸浮于含5mg/ml溶解酶的8ml溶解緩沖液中。溶解緩沖液由50mM Tris-HCl(pH7.8)、5mM EDTA、1 mM DTT、100 mM NaCl、1μg/ml E 64和2μg/ml質子惰性溶劑組成。將培養物在4℃培養約30-60分鐘后，在Branson 細胞破裂器中以60%功率進行簡單的處理，進行三次20秒的破裂并在間歇時冷卻，然后培養物以15，000×g離心。將含有未加工的Gag蛋白質的上清液在葡聚糖G-50柱上通過顆粒排阻色譜法部分純化，并在-20℃儲存在50%甘油醇和溶解緩沖液中。
Ⅱ.底物的制備Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(Na-FITC)-OH
A.Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH的制備被保護的肽樹脂Na-Boc-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr(BrZ)-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(2-Clz)-OCH2-PAM-樹脂在Advanced Chemtech Model 200型肽合成器中從1.5mmol規模應用標準雙偶合原膠合成。用50%三氟乙酸的二氯甲烷去掉氨基端的Boc基團、用5%的二(異丙基)乙胺(DIEA)的二氯甲烷中和得到的樹脂，然后將在20ml二甲亞砜中的1.1g(4.5mmol)生物素加入肽樹脂中，隨后加入4.5mmol二環己基碳化二亞胺(DCC)的9ml二氯甲烷溶液。用11ml二氯甲烷將所得反應混合物稀釋至總體積40ml，令其反應約5小時，濃縮反應溶液，依次用二甲基亞砜，二甲基甲酰胺和二氯甲烷洗滌樹脂并用5% DIEA的二氯甲烷溶液中和。重復此反應兩次，每次反應時間持續12小時。樹脂的茚三酮分析表明生物素與甘氨酸氨基充分反應。用二甲基甲酰胺和二氯甲烷充分洗滌最后的肽樹脂并干燥得到4.3g(98%)。
B.去保護使用50ml氫氟酸/間甲苯酚溶液在0℃下反應1小時使肽去保護并與樹脂分離，用真空蒸餾去除氫氟酸后，用100ml二乙醚將間甲苯酚從反應混合物中萃取出。再將肽溶解在50%乙酸水溶液中，冷凍并冷凍干燥得到2.14g。
C.純化將Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH粗品溶于含1%三氟乙酸的5%乙腈(水)溶液200ml中，再通過0.22微米過濾器過濾。所得溶液用于以相同緩沖液平衡的2.2×25Cm十八烷基硅膠(VydacC-18)反相柱上。用7.5-25%乙腈的855等分線性梯度以2ml/分的速度洗脫肽并收集組分。使用分析性HPLC來分析這些組分，該分析是在4.6×250mmVydacC-18柱上用相似的緩沖條件進行。將含有所需物質的組分合并、冷凍，并冷凍干燥得到1.206g產物(62%)。
分離出的Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH的氨基酸分析得出以下比率Asn 1.1;Ser 0.96;Gln 1.1;Por 1.1;Gly 2.1;Val 0.80;Ile 0.78;Tyr 1.1;Lys 1.1;與理論相符。快速原子轟擊質譜得出分子離子質量峰1288，與理論相符。
D.標記應用Pandex分析將純化肽的C-末端用熒光發光劑標記，將Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys-OH(1.206g，0.936mmol)溶解在100ml 0.1 M硼酸鈉中，pH9.5。然后將3g(7.7mmol)異硫氰酸熒光素的15ml二甲基亞砜溶液在兩小時內以10等分加入反應混合物中。令所得混合物在最后添加完后反應1小時。用5 N HCl將溶液調至pH3，形成沉淀物并將其離心除去。
然后使用5N氫氧化鈉將肽溶液調至pH7.8，再加入0.1M乙酸銨，pH7.5，稀釋到總體積200ml。所得物溶液再通過0.22微米過濾器過濾，并加到已用5%乙腈的0.1M乙酸銨(pH7.5)平衡過的2.2×25cmVydacC-18柱中，用5-25%乙腈的855等分線性梯度以2ml/分的速度將肽從柱中洗脫出來并收集組分。用分析性HPLC分析組分。將含所需產品的組分合并，冷凍并冷凍干燥得到190.2mg產物(12%)。
純化肽的氨基酸分析得出以下比率Asn1.1;Ser1.0;Gln1.1;Por1.1;Gly2.1;Val0.8;Ile0.8;Tyr1.1;Lys1.0與理論相符。快速原子轟擊質譜給出分子離子質量峰1678，與理論相符。
E.熒光HIV-1蛋白酶抑制劑的檢測應用以下緩沖液和溶液進行熒光HIV-1蛋白酶抑制劑的檢測MES-ALB緩沖液0.05M4-嗎啉乙烷磺酸，pH5.50.02MMaCl0.002MEDTA0.001MDTT1.0mg/mlBSATBSA緩沖液0.02MTRIS0.15MNaCl1.0mg/mlBSA抗生物素蛋白涂珠的溶液0.1%熒光抗生物素蛋白顆粒的(抗生物素蛋白附于0.6-0.8微米直徑的聚苯乙烯顆粒上)TBSA緩沖液溶液。
酶溶液27IU/ml純化HIV-1蛋白酶溶于MES-ALB緩沖液中(1IU等于37℃每分鐘水解1μmmol底物所需酶的量)。
向有96個圓底井板的每一井中加入20μl酶溶液，再加入10μl待測化合物的20%含水二甲亞砜溶液。按上述方法得到純化HIV-1蛋白酶。所得溶液在室溫下培養1小時后，向每井中加入20μl含底物，Na-生物素-Gly-Ser-Gln-Asn-Tyr-Pro-Ile-Val-Gly-Lys(Na-FITC)-OH和MES-ALB緩沖液的溶液(1.5μl/ml)。該溶液在室溫下培養16小時后，每井用150μl MES-ALB緩沖液稀釋。
向第二個96圓底井Pandex板的每一井中，加入25μl抗生物素蛋白涂珠溶液，然后向每井中加入前面制備的稀釋培養液25μl，溶液完全混合后，將該板裝入Pandex
儀中，洗滌，抽空并讀數。通過在485nm波長處激發而檢測樣品，讀出在535nm波長處所得的表熒光結果。
在熒光分析中得到的本發明化合物的IC50結果在下表1中列出所有值用一陽性對照標化，它是[1S-(1R＊，4R＊，5S＊)]-N-(1-(2-氨基-2-氧代乙基)-2-氧代-3-氮雜-4-苯甲基-5-羥基-6-(2-(1-叔丁氨基-1-氧代甲基)苯基)己基)-2-喹啉基甲酰胺。
表1式Ⅰ化合物的抑制活性熒光檢測IC50實施例號ng/ml對照1.01 159*210.4342004 51*5n.t.
6654768108 262*969.5101.811 195*12139313224514183152416 IC32(1000)17 20.5*18 7.1*19 150*205562158223962349724131
25 IC40(1000)26 IC23(1000)2726.7288172930.5303363125.232 172*33 IC25(1000)34 IC34(1000)35 IC23(1000)36 IC26(1000)371663821.5注＊表示平均IC50n.t.表示未測定
權利要求
1.式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽
其中R是C1-C6烷基，環烷基，雜環基，不飽和雜環基，芳基，環烷基(C1-C4)烷基，雜環基(C1-C4)烷基，不飽和雜環基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的結構，其中A是-O-，-NH-或-S-；q是0，1，2或3；R0是環烷基，芳基，雜環基或不飽和雜環基；X是
其中R1是芳基，環烷基，雜環基或不飽和雜環基；R2是氫或C1-C4烷基；R3是氨基酸側鏈，-CH2CH3，-CH2CH2CH3，-CH2(CH2)2CH3，-C(CH3)3，氰基(C1-C4)烷基，不飽和雜環(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-(CH2)s-A°-(CH2)r-R4或-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的結構，其中s是1，2，3或4；r是0，1，2或3；A°是-O-，-NH-或-S-；R4是C1-C6烷基，環烷基，芳基，雜環基，或不飽和雜環基；R5是環烷基，芳基，雜環基或不飽和雜環基；j是0，1，2，3或4；k是0或1；且Y是-O-，-N(R2)-或-S-。
2.按照權利要求1的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中X是
R是芳基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的結構，其中A是-S-;q是0;R0是芳基;R1是芳基或不飽和雜環;j是0，1或2;Y是-O-或-N(R2)-;k是1;R2是氫或甲基;R3是氨基酸側鏈，-CH2CH3，-CH2CH2CH3，-CH2(CH2)2CH3，-C(CH3)3或具有式-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的結構，其中r是0，1，2或3;且R5是環烷基，芳基，雜環基或不飽和雜環基。
3.按照權利要求2的化合物或其藥學上可接受的鹽，其中R是苯基，苯硫基，萘基，萘硫基，苯乙基或萘乙基;R1是苯基，萘基或喹啉基;j是1;R2是氫;R3是氨基酸側鏈，-CH2CH3或具有式-CH2-C(O)-NR2-(CH2)r-R5的結構，其中r是0，1，2或3;R5是芳基或不飽和雜環基。
4.1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷;1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-[2(S)-N-[(N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷;1，6-二苯基-2(S)，5(S)-二[N-2(S)-N[(8-氟喹啉-2-基甲氧基)羰基]氨基-3-甲基丁酰基]氨基]-3，4-順-環氧己烷;1，10-二苯基-4(S)，7(S)-二[N-[2(S)-N-[[N(甲基)-N(喹啉-2-基甲基)氨基]羰基]氨基丁酰基]氨基]-5，6-順-環氧癸烷;或它們藥學上可接受的鹽。
5.一種藥物制劑，它包括如權利要求1至4中任一項所要求授權的式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽，以及一種或多種藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。
6.權利要求1至4中任一項所要求授權的化合物，用作抗病毒劑。
7.權利要求1至中任一項所要求授權的化合物用于抑制人類免疫缺陷病毒的復制。
8.權利要求1至中任一項所要求授權的化合物用作人類免疫缺陷病毒蛋白酶抑制劑。
9.式Ⅰa化合物
其中R是C1-C6烷基，環烷基，雜環基，不飽和雜環基，芳基，環烷基(C1-C4)烷基，雜環基(C1-C4)烷基，不飽和雜環基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的結構，其中A是-O-，-NH-或-S-;q是0，1，2或3;R0是環烷基，芳基，雜環基或不飽和雜環基;并且J是鹵素，甲磺酸基，苯磺酸基，甲苯磺酸基或乙酰氧基。
10.式Ⅰb化合物
其中R是C1-C6烷基，環烷基，雜環基，不飽和雜環基，芳基，環烷基(C1-C4)烷基，雜環基(C1-C4)烷基，不飽和雜環基(C1-C4)烷基，芳基(C1-C4)烷基或具有式-A-(CH2)q-R0的結構，其中A是-O-，-NH-或-S-;q是0，1，2或3;并且R0是環烷基，芳基，雜環基或不飽和雜環基。
11.一種制備權利要求1至4中任一項所要求授權的式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽的方法，它包括(a)將下列的式Ⅰa化合物或式Ⅰb化合物或其藥學上可接受的鹽
(其中R和J如上定義)，在偶合劑的存在下與下式的羧酸化合物反應
(其中R1，j，k，R2和R3如上定義);和(b)任意地將所得到的產物轉化為其藥學上可接受的鹽。
全文摘要
本發明提供了新的HIV蛋白酶抑制劑、含有這些化合物的藥物制劑及它們的使用方法。
文檔編號C07D405/14GK1082035SQ9310742
公開日1994年2月16日 申請日期1993年6月19日 優先權日1992年6月19日
發明者J·E·門羅, W·J·霍恩貝克 申請人:伊萊利利公司