旋光活性4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰基苯基)吡唑并[1，5-α]-1，3，5-三嗪鹽及...的制作方法

專利名稱：旋光活性4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰基苯基)吡唑并[1，5-α]-1，3，5-三嗪鹽及 ...的制作方法
技術領域：
本發明涉及旋光活性4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的堿土金屬鹽，以及制備該旋光活性化合物及其鹽的方法。
眾所周知，4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪是有用的藥物化合物。有人推薦了將這些化合物進行旋光拆分的方法，即采用旋光活性柱的色譜技術。這一方法中，為了淋洗出1克所需化合物，需要大量體積即約1，300至1，600升的溶劑。因此，要以生產規模將該化合物的旋光活性形式進行餾分分離，涉及許多技術困難，所以，需要大量時間和成本。據本發明人所知，除了上面提到的色譜技術以外，沒有其它有關旋光拆分方法的報導。
已經知道，對于幾乎不溶解的化合物，可以通過將其轉變為一種堿金屬鹽或其它鹽便可增加其溶解度，但對上述三嗪化合物的外消旋體，幾乎不能通過將其轉變為堿金屬或堿土金屬鹽來使其溶解。換句話說，很難將此化合物加工成為(例如)可注射用溶液，這樣就嚴重地限制了它在藥物方面的應用。
本發明的一個目的是提供一種以低成本和短時間來生產和分離一種旋光活性三嗪化合物的新方法，具體地說，就是用不對稱合成法制備該化合物。
本發明的另一個目的是提供上述旋光活性三嗪化合物的鹽，它克服了上述加工成藥物產品時的困難。
由于本申請人在這一技術領域進行刻苦勤奮的研究，結果他們成功地完成了后面所述的不對稱合成方法，并且發現所得旋光活性化合物的某些鹽類表現良好的溶解性能，從關于通常外消旋化合物的鹽的知識，是無法預料到這種溶解性能的。
因此，按照本發明，提供了下式所示的旋光活性的4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪化合物的堿金屬鹽或堿土金屬鹽，
式中R為低級烷氧基。
根據本發明，進一步提供了生產上式(1)所示旋光活性形式的三嗪化合物或上述旋光活性化合物的堿金屬鹽或堿土金屬鹽的方法，該方法包括在一種下式(3)所示的旋光活性的環狀化合物存在下，使式(2)所示4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基硫代苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪與一種含鹵氧化劑反應，并且或者將反應物用水或金屬氫氧化物處理，或者將反應物加熱處理，如果需要的話，接著使反應產物與堿金屬氫氧化物或堿土金屬氫氧化物反應而生成鹽。
式中R為低級烷氧基，
式中R′為低級烷基，苯基或苯基低級烷基。
本發明進一步涉及生產旋光活性的4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪化合物或該化合物的堿金屬鹽或堿土金屬鹽的方法，該方法包括用只由一種旋光活性形式的上述三嗪化物組成的成晶種接種到三嗪化合物(1)的外消旋混合物的溶液中，以引起相應旋光形式結晶，并分離所得晶體，如果需要，接著用堿金屬氫氧化物或堿土金屬氫氧化物處理分離出的晶體，得到鹽。
在上述各結構式中，R′表示的低級烷基包括甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，叔丁基，戊基，異戊基，2，2-二甲基丙基，1-甲基丁基，己基，4-甲基戊基，3-甲基戊基，2-甲基戊基，1-甲基戊基，3，3-二甲基丁基，2，2-二甲基丁基和1，3-二甲基丁基等。苯基-低級烷基包括芐基，α-苯乙基，β-苯乙基，1-苯基丙基，2-苯基丙基，3-苯基丙基，1-甲基-1-苯基乙基，1-甲基-2-苯基乙基，1-苯基丁基，2-苯基丁基，3-苯基丁基，4-苯基丁基，1-甲基-1-苯基丙基，1-甲基-2-苯基丙基，2-甲基-2-苯基丙基，1-甲基-3-苯基丙基，1-苯基戊基，2-苯基戊基，3-苯基戊基，4-苯基戊基，5-苯基戊基，1-甲基-1-苯基丁基，1，2-二甲基-1-苯基丙基，1-甲基-2-苯基丁基，1，2-二甲基-1-苯基丙基，1-甲基-2-苯基丁基，1-甲基-3-苯基丁基，1-甲基-4-苯基丁基，2-甲基-2-苯基丁基，2-甲基-3-苯基丁基，2-甲基-4-苯基丁基，3-甲基-3-苯基丁基，1-苯基己基，2-苯基己基，3-苯基己基，4-苯基己基，5-苯基己基，6-苯基己基，1-甲基-1-苯基戊基，1-乙基-1-苯基丁基，1-甲基-2-苯基戊基，1-甲基-3-苯基戊基，1-甲基-4-苯基戊基，1-甲基-5-苯基戊基，2-甲基-2-苯基戊基，3-甲基-2-苯基戊基，3-乙基-2-苯基戊基，和4-甲基-4-苯基戊基等。
R表示的低級烷氧基包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，異丙氧基，丁氧基，叔丁氧基，戊氧基，異戊氧基，2，2-二甲基丙氧基，1-甲基丁氧基，己氧基，4-甲基戊氧基，3-甲基戊氧基，2-甲基戊氧基，1-甲基戊氧基，3，3-二甲基丁氧基，2，2-二甲基丁氧基，和1，3-二甲基丁氧基等。
根據本發明生產一種旋光活性三嗪化合物(1)的方法(不對稱合成法)可用下面給出的反應式表示。它有兩個反應階段組成第一階段包括在一種通式(3)所示的旋光活性環狀化合物存在下使4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基硫代苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪[化合物(2)]與含鹵氧化劑反應;第二階段包括或者使第一反應階段得到的反應混合物與水或一種金屬氫氧化物反應，或者將該混合物加熱處理。
反應式
式中R和R′分別如前面所限定。
上述反應式所示的第一反應階段使用的環狀化合物(3)是一種醇衍生物，并且該醇衍生物是一種旋光活性的二級醇。該醇衍生物上的取代基R′應在醇羥基(OH)的α-位上，它可以選自前面提到的特定基團。但是，取代基緊密度越高，不對稱產率改進也越大。因此，例如，當把上述取代基R′選擇為一個低級烷基時，則支鏈基團就優于直鏈基團。上述醇衍生物的環狀核是4-至8-員環，最好是5-至6-員環，并且可以是雙環結構或稠環結構。這一環狀核可以是飽和的或不飽和的，只含有碳原子或甚至是符合上面定義的含雜原子的環。所述醇衍生物的具體實例有(-)-薄荷醇，(+)-薄荷醇，(-)-8-苯基薄荷醇，(+)-8-苯基薄荷醇，(+)-2，3-二氫-2-叔丁基-1-茚醇，(-)-冰片，[(1S)-內向]-(-)-冰片，(1S，2S)-(+)-1-羥基-2-甲基-3-環戊烯，(1S，2S)-(+)-1-羥基-2-甲基環己烷，(1S，2R)-(+)-1-羥基-2-苯基環己烷，(1S，2R)-(+)-1-羥基-2-苯基環戊烷和(1S，2R)-(+)-3-羥基-2-苯基四氫呋喃。在這些醇衍生物當中，旋光活性薄荷醇從成本角度考慮是比較好的。
在上述化合物(2)和(3)之間的反應可如下進行，將上述兩種化合物和一個有機堿溶解在適當溶劑中，將溶液冷卻，加入一種含鹵氧化劑，如次氯酸叔丁酯，1-氯苯并三唑，N-氯琥珀酰亞胺等，使其和溶液起反應。
普通惰性溶劑，例如通常的N，N-二甲基甲酰胺，乙腈，二氯甲烷等，可以單獨地或結合起來使用。有機堿例如通常可以是吡啶或三乙胺。雖然上述化合物的比率不是很嚴格的，但相對于化合物(2)來說，化合物(3)的比率可以是約20-0.8摩爾當量。較好是約10-1摩爾當量，而有機堿的比率可以是約1-3摩爾當量，較好是約1-1.5摩爾當量。順便提及，上述有機堿用來防止反應體系的pH朝酸性方向變化，并且加入有機堿可防止生成最終產物的外消旋體，即是說防止不對稱合成產率降低。
上述化合物(2)、化合物(3)和有機堿的溶液通常冷卻到約-40℃至-10℃，較好是約-30℃至-20℃。如果溶液度太高，最終產物的不對稱產率會降低，這是不希望的。
如次氯酸叔丁酯等試劑的加入，其目的是為了將化合物(2)轉變為锍鹽，而它與化合物(2)的比例通常是約1-2摩爾當量，較好是1-1.3摩爾當量。
至于接在上述第一階段反應之后的第二階段反應，可以采用下述兩種方法A和B中的任一種。
在這兩種方法之一(方法A)中，將第一階段得到的反應混合物在不超過0℃的溫度下，最好在約-30℃～-25℃之間，邊冷卻邊攪拌約30分鐘至3小時，然后，加入水或金屬氫氧化物水溶液。用有機酸將水層調至弱酸性，得到所需化合物。作為在這一方法中使用的金屬氫氧化物的實例，可以提及的有堿金屬氫氧化物，如氫氧化鈉，氫氧化鉀等，和堿土金屬氫氧化物，如氫氧化鈣，氫氧化鎂等。上述金屬氫氧化物在使用時其濃度通常為約5～30重量百分，較好是繃8-25重量百分。反應溫度可以為約-40℃至+20℃，較好是約-30℃至0℃。
反應完成后，往反應混合物中加入水，使產物化合物轉移到水層，然后加入有機酸，如乙酸，檸檬酸，酒石酸等，得到所希望的旋光活性的4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪。
實施第二階段反應的另一方法(方法B)包括將第一階段得到的反應混合物在約50℃加熱約2小時，然后加8-25重量百分的堿水溶液，使產品化合物轉移到水層，再加有機酸于該水層中，使之變成弱酸性，從而得到所需化合物。
至于在此方法中所用的有機酸的實例，可以參照前面所述的酸。具體地說，本方法得到的是與上述方法A可得到的化合物相對的另一個對映體。
本發明的發明人發現，4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的兩種對映體的50∶50混合物形成一種外消旋混合物，并且還發現，當將只有該旋光活性化合物(對映體)中的一種組成的籽晶加到這一混合物中進行重結晶時，只有對應于構成籽晶的那種對映體的旋光活性化合物選擇性地結晶出來，這樣就允許用非常方便地方式、并且以高純度和高產率，選擇性地回收特定的旋光活性化合物。因此，本發明也提供了這樣一個分離旋光活性化合物的新方法。
至于本發明中選擇性回收旋光活性化合物方法的起始原料，可以采用該外消旋的4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡啶并[1，5-a-]-1，3，5-三嗪在適當溶劑中的溶液。雖然氯仿-甲醇可以作為上述溶劑的典型實例，但也可使用各種其它重結晶溶劑，如二氯乙烷-甲醇，二氯乙烷-乙醇，N，N-二甲基甲酰胺-水，乙酸乙酯-甲醇，等等。至于用來接種上述溶液的籽晶，按照本發明的不對稱合成所已得到的任何旋光活性化合物的晶體都可以便利地使用，但也不是唯一的選擇。因此，用常規柱色譜方法分離的旋光活性化合物晶體也可以使用。這種接種用的籽晶的量可以為外消旋混合物量的約1/2000至1/100，所生成合適的晶體量通常至多約為外消旋混合物總量的30%。
用這種方式，可以選擇性結晶出所需旋光活性化合物。
由上述方法生產的旋光活性化合物可通過常規方法進一步純化。
由此得到的4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪可通過與適當的堿進一步反應而轉變為可藥用鹽。上述鹽包括堿金屬鹽，如鋰鹽，鈉鹽，鉀鹽等，和堿土金屬鹽，如鈹鹽，鎂鹽，鈣鹽等。
與相應的外消旋化合物的鹽不同，旋光活性化合物的鹽表現出明顯更高的溶解度，這種溶解度遠遠超出根據關于外消旋化合物的知識所能想象得到的。因此，發明人進行的實驗揭示出，例如，上述外消旋化合物的鈉鹽在水中的溶解度只不過是約0.2%重量，而旋光活性化合物的鈉鹽的溶解度高達50%重量或更高。至于在生理鹽水中的溶解度，外消旋化合物的鈉鹽的溶解度只不過是約0.08%重量，而旋光活性化合物鈉鹽的溶解度高達50%重量或更高。因此，根據本發明，可以提供溶解度非常高的旋光活性化合物的鈉鹽。
上述鹽均可以通過使上面得到的旋光活性化合物與適當的堿反應來制得。作為成鹽試劑，所用的堿最好是金屬氫氧化物，例如堿金屬或堿土金屬氫氧化物，當然同樣也可使用上述金屬的碳酸鹽，碳酸氫鹽或醇鹽。成鹽反應可通過常規方式進行，所生成的鹽可以通過類似于游離化合物的分離、純化方法來進行分離和純化。
旋光活性的4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪及通過本發明方法可得到的鹽都具有黃嘌呤氧化酶抑制活性，并且是有價值的藥物試劑，例如治痛風的(gout suppression)和其它藥物。在藥物應用中，上述旋光活性化合物的鹽可以比相應的游離化合物更容易、更有利地加工成各種劑量形式，例如濃的注射液，特別是因為鹽的溶解度較高。
本發明進一步涉及一種藥物組合物，其中含有至少一種上述旋光活性4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a-]-1，3，5-三嗪或其鹽作為活性成分，該活性成分與對人類和其它動物來說無毒的藥用載體相混合。
所述載體的實例是通常的稀釋劑和賦形劑，例如填料，擴充劑，粘合劑，潤濕劑，崩解劑，表面活性劑和潤滑劑。根據所要制備的單位劑量形式來選擇載體。
根據治療目的選擇劑量形式。這類劑量形式的典型實例有片劑，丸劑，粉劑，溶液，懸浮液，乳液，粒劑，膠囊，栓劑，注射(溶液，懸浮液等)及類似劑型。用以使藥物制劑成型為片劑的載體是乳糖，精制糖，氯化鈉，葡萄糖，尿素，淀粉，碳酸鈣，高嶺土，結晶纖維素，硅酸，磷酸鉀等賦形劑;水，乙醇，丙醇，單糖漿，葡萄糖溶液，淀粉溶液，明膠溶液，羧甲基纖維素，羥丙基纖維素，甲基纖維素，聚乙烯吡咯烷酮等粘合劑;羧甲基纖維素鈉，羧甲基纖維素鈣，低取代羥丙基纖維素，干淀粉，藻酸鈉，瓊脂粉，Laminaran粉，碳酸氫鈉，碳酸鈣等崩解劑;聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯，月桂基硫酸鈉，單硬脂酸甘油酯等類似表面活性劑;精制糖，硬脂精，可可脂，氫化油等崩解抑制劑;季銨堿，月桂基硫酸鈉等吸收促進劑;甘油，淀粉及類似潤濕劑;淀粉，乳糖，高嶺，膨潤土，膠態氧化硅及類似吸收劑;精制滑石，硬脂酸鹽，硼酸粉，聚(乙二醇)等潤滑劑，等等。如果需要，這類片劑可進一步用通常的包衣組合物進行包衣，得到包衣片劑，例如糖包衣片劑，明膠包衣片，腸溶片劑，薄膜包衣片劑，或雙層片劑，多層片劑等。用于將組合物加工成丸劑的載體有葡萄糖，乳糖，淀粉，可可脂，氫化植物油，高嶺土，滑石等類似賦形劑;阿拉伯膠粉，tragacanth膠粉，明膠，乙醇和類似粘合劑;Laminaran，瓊脂粉和類似崩解劑等等。
將組合物加工成栓劑的載體有聚乙二醇，可可脂，高級醇，高級醇的酯，明膠，半合成甘油酯等。膠囊通常是由常規方法制成的，例如通過將本發明化合物作為活性成分與上面舉例說明的載體相混合，并將此混合物封在硬明膠膠囊、軟明膠膠囊或類似物中。在加工注射溶液、懸浮液和乳液時，要將其消毒，并且最好使其與血液等滲。用作此目的的稀釋劑例如是水，乙醇，聚乙二醇，丙二醇，乙氧基化的異硬脂基醇，聚氧乙烯化異硬脂基醇，聚氧乙烯化脫水山梨醇脂肪酸酯及其類似物。在制備等滲溶液中，氯化鈉，葡萄糖或甘油可按所需量加入，以使該溶液等滲。本發明藥物組合物可以含有通常的增溶劑，緩沖劑，增滑劑和其它添加劑。需要時，本發明制劑可進一步含有調色劑，防腐劑，調味劑，增甜劑和其它藥物。在模制法制軟膏時，包括糊劑，乳劑，膠狀制劑等，所用稀釋劑是白丸士林，石蠟油，甘油，纖維素衍生物，聚乙二醇，硅油，膨潤土，等等。
活性化合物在這些藥物組合物中的比例是不嚴格的，可選自很寬的范圍，但通常推薦在藥物組合物中加入5-300毫克。特別是因為本發明的旋光活性化合物的鹽很易溶解，可以容易地將其制成均勻溶液，例如注射液，其中可含有該活性成分的濃度為約0.1-10%。
對于上述藥物組合物的給藥方法，實際上沒有什么限制，可以根據劑量形式，病人年齡，性別和其它特征，病情等情況來選擇合適的治療方案。例如，片劑，丸劑，溶液，懸浮液，乳液，粒劑和膠囊經口服給藥，注射溶液可通過靜脈與普通替代流體或輸送液如葡萄糖，氨基酸和其它輸送液混合給藥。如果需要，注射液可經肌肉內，經真皮內，經皮下或經腹膜內給藥，栓劑可經直腸內給藥。
劑量隨著給藥途徑，病人年齡、性別和其它特征，病情嚴重程度和其它情況變化。然而，通常本發明活性化合物的劑量可在約0.5-20毫克/千克體重/天范圍內變化，并且可按每天1-4個分劑量給藥。
生產本發明旋光活性化合物和鹽的下述實施例以及下述工作實施例是要用來更詳細地說明本發明。
實施例1在600毫升N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中溶解60克4-羥基-8-(3-甲氧基-4-苯基硫代苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪，110克1-(-)-薄荷醇和17.2毫升吡啶，將混合物冷卻至-25℃～-30℃。然后，滴入21.2克次氯酸叔丁酯并將混合物在-25℃～-30℃攪拌1小時。接著750毫升20%氫氧化鈉水溶液在-30℃～-10℃下加入，再加入2升水。將反應混合物用乙酸乙酯洗滌，水層用500克檸檬酸調至弱酸性，使發生結晶。過濾收集晶體，用水漂洗，再用乙醇洗滌，空氣干燥。得到57克4-羥基-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪結晶粗品。該產品的旋光度是[α]20D＝-75°(C＝0.5，DMF)。
將上述晶體用氯仿-甲醇(1∶1)重結晶三次，然后與乙酸乙酯一起加熱回流30分鐘。冷卻后，過濾收集分離出的結晶。得到16克(-)-4-羥基-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪(產率25.5%，光學純度≥99%)。
該產品旋光度是[α]20D＝-174°(c＝0.5，DMF)。
熔點為265-268℃(分解)，元素分析(C18H14O3N4S，摩爾重366.40)如下計算值C，59.00;H，3.85;N，15.29測定值C，58.74;H，3.55;N，14.99按上述同樣方法，但是用d-(+)-薄荷醇代替1-(-)-薄荷醇，得15克(+)-4-羥基-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪(產率24%，光學純度≥99%)。
旋光度，[α]20D＝+174°(C＝0.5，DMF)熔點265-268℃(分解)元素分析(C18H14O3N4S1，摩爾重366.40)計算值C，59.00;H，3.85;N，15.29測定值C，58.74;H，3.64;N，14.93實施例2在由50毫升乙醇、10毫升水和145毫克氫氧化鈉制得的混合溶液中在攪拌下溶解1.3克(-)-4-羥基-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪，然后減壓蒸出溶劑。加入100毫升乙酸乙酯后，將混合物回流30分鐘。冷卻后，將晶體過濾回收并干燥，得(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽二水合物。
旋光度，[α]20D＝-245°(C＝0.5，DMF)熔點228-235℃(分解)按照上述同樣方法，用(+)-4-羥基-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪，得到(+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽二水化物。
旋光度，[α]20D＝+242°(C＝0.5，DMF)熔點228-235℃(分解)實施例3按照實施例2的同樣方法，但是用氫氧化鋰、氫氧化鉀和氫氧化鈣水溶液分別代替氫氧化鈉水溶液，得到(-)和(+)形式的4-羥基-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的鋰、鉀和鈣鹽。
所有這些鹽在220℃或更高溫度下都分解。
實施例4在氯仿和甲醇的40毫升1∶1混合物中，于回流下溶入1克(±)-4-羥基-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪并加入5毫克實施例1得到的旋光純的(-)-4-羥基-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪作為籽晶。使體系在室溫下冷卻5小時，過濾收集所產生的晶體(220毫克)。
旋光度，[α]20D＝-45°(C＝0.5，DMF)將上述晶體用氯仿-甲醇(1∶1)重結晶4次，得到44毫克(-)-4-羥基-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪，其旋光度為[α]20D＝-174°(C＝0.5，DMF)對本發明的旋光活性三嗪的鹽進行了下述試驗。
試驗實施例1溶解度試驗用下面所列化合物(在實施例2和3中得到的旋光活性化合物的鹽和作為對照物用的相應的外消旋化合物的鹽)作為試驗樣品。
樣品Ⅰ(外消旋體)(±)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽-水合物。
樣品Ⅱ[(-)-形式](-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽二水合物樣品Ⅲ[(+)-形式](+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽二水合物樣品Ⅳ[(-)-形式]雙[(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥根(olste)]鈣鹽二水合物樣品Ⅴ[(+)-形式]雙[(+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a1，3，5-三嗪-4-羥根]鈣鹽二水合物按下述方法用水(注射用蒸餾水)和生理鹽水作溶劑對上述樣品分別做溶解度試驗。
將各樣品0.1克放入10毫升試管中，然后加入適量的溶劑(水或生理鹽水，對于外消旋化合物加0.5毫升，對旋光活性化合物加0.1毫升)。用培養器(Taiyo Kagaku Kogyo，M-100)，將試管在25℃搖動。4小時后，將內容物用0.45μM過濾器過濾，濾液用流動相稀釋100倍，制備試驗溶液。分別地，精確稱出40.0毫克樣品Ⅰ(外消旋體)，加水補足為準確的200毫升。然后，準確地取出1毫升該溶液，并用流動相稀釋到準確的20毫升(10μg/毫升)，作為標準溶液。用上述試驗溶液和核標準溶液，分別測定這些樣品的溶解度。
裝置[HPLC(系統A)]泵510(Waters)檢測器UVIDEC-100-V(日本Bunko)
數據處理器Data Module 741(Waters)自動取樣器As-8000(Tohso)條件柱TSKgel ODS-120T(4.6毫米直徑×150毫米)流動相乙腈-磷酸鹽緩沖液(35∶65)流速1.0毫升/分波長323毫微米注入量20微升結果示于下面表1表1試驗樣品 水 生理鹽水樣品Ⅰ 0.221%重量 0.0083%重量樣品Ⅱ ≥50%重量 ≥50%重量樣品Ⅲ ≥50%重量 ≥50%重量樣品Ⅳ ≥50%重量 ≥50%重量樣品Ⅴ ≥50%重量 ≥50%重量對于樣品Ⅱ至Ⅴ，0.1克的物質完全溶解在0.1毫升溶劑中。因此，將結果表達為≥50%重量。
從表1中可清楚地看出，兩種異構體的鹽在水和生理鹽水中遠比相應的外消旋化合物的鹽容易溶解。
試驗實施例2黃嘌呤脫氫酶抑制活性試驗該試驗是用雄性ICR大鼠(6周齡，體重28.0-40.6克)進行的。將實施例2中得到的本發明化合物分別懸浮在0.5%羧甲基纖維素(CMC)溶液中，將懸浮液按10毫升/千克(試驗組1和試驗組2)量口服給藥。在各試驗組中使用的本發明化合物和其劑量表示如下。
試驗組1實施例2中得到的旋光活性三嗪化合物[(-)-形式]的鈉鹽，5毫克/千克試驗組2實施例2中得到的旋光活性三嗪化合物[(+)-形式]的鈉鹽，5毫克/千克。
還準備了一個對照組，僅用0.5%CMC溶液處理(對照組)。
在給藥后4和8小時后，將各組的動物殺死，切除肝臟，用下述通用方法試驗黃嘌呤脫氫酶在肝臟中的活性。
肝勻漿用100 mM Tris-HCl緩沖液(以后只稱為緩沖液)稀釋5倍。將50微升該稀釋液、25微升NAD+緩沖稀釋液(20mM)和25微升1，4，5，6-四氫-4，6-二氧-1，3，5-三嗪-2-羧酸鉀緩沖溶液加到300微升緩沖液中(在總的溶液中NAD+和1，4，5，6-四氫-4，6-二氧-1，3，5-三嗪-2-羧酸鉀的濃度各為1mM)，將混合物在25℃培養5分鐘。將培養液離心分離，將上清液中的尿酸用高效液相色譜法評估。這一數值作為處理前基線。
另一方面，往用上述同樣方法得到的預培養液中加入100微升黃呤的緩沖溶液(1mM)，將混合物在25℃培養5分鐘。用50微升6M高氯酸使反應停止，將反應混合物按上述同樣方法離心分離。用磷酸二氫鈉水溶液中和上清液，通過HPLC分析生成的尿酸。這一數值作為處理后的值。
從尿酸的上述處理后數值和處理前基線之間的差別可以測定出黃嘌呤脫氫酶的活性。
結果列于表2。
表2組別 4小時后分離的肝臟 8小時后分離的肝臟中的酶活性(mU/g) 中的酶活性(mU/g)
試驗組1 7±4＊＊(n＝7) 17±7＊＊(n＝7)試驗組2 33±16＊＊(n＝7) 22±10＊＊(n＝7)對照組 152±21(n＝8) 137±31(n＝8)表中，符號＊＊表示與對照組相比P＜0.01。
下面的制劑實施例說明用本發明化合物制備某些藥物組合物的方法。
制劑實施例1(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰 100克苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽二水合物Avicel[商標，Asahi化學工業公司制造 40克玉米淀粉 30克硬脂酸鎂 2克TC-5[商標，Shin-Etsu化學公司 10克制造，羥丙基甲基纖維素]聚乙二醇-6000 3克蓖麻油 40克乙醇 40克將(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽二水合物，Avicel，玉米淀粉和硬脂酸鎂一起研磨并用R 10毫米藥丸沖床壓模。得到的藥片用TC-5、聚乙二醇6000，蓖麻油和乙醇組成的薄膜包衣組合物包衣，得到具有上述組成的薄膜包衣藥片。
制劑實施例2和3采用制劑實施例1中的同樣步驟，但是分別用(+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽二水合物和雙[(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥根]鈣鹽二水合物代替(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽二水合物，得到薄膜包衣的片劑。
制劑實施例4(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽二水合物 100克結晶纖維素[J.P.] 104克玉米淀粉[J.P.] 92克滑石[J.P.] 2克硬脂酸鎂[J.P] 2克按照上面的配方，制得各含100克(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽作為活性成分的硬明膠膠囊。
將各成分磨細，各種粉末均勻混合在一起，裝在口服用的明膠膠囊中。
制劑實施例5(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰 350毫克苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽二水合物0.1當量氫氧化鈉 調節pH至11.5注射用蒸餾水 使總量達25毫升往含23毫升注射用蒸餾水的氫氧化鈉溶液中加入(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽二水合物，并用0.1當量氫氧化鈉水溶液調至pH11.5。該溶液用注射用蒸餾水稀釋到25毫升，用濾菌器過濾并凍干。將凍干物無菌密封于小瓶中，提供一種干粉制劑，以便臨時配制使用。
該制劑在臨給病人用藥以前溶解在注射用蒸餾水中。
制劑實施例6-10按照制劑實施例5的同樣步驟，但用(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鉀鹽二水合物(制劑實施例6)，雙[(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5，-a]-1，3，5-三嗪-4-羥根]鈣鹽二水合物(制劑實施例7)，雙[(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5，-a]-1，3，5-三嗪-4-羥根]鎂鹽二水合物(制劑實施例8)，(+)8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽二水合物(制劑實施例9)，和雙[(+)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5，-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈣鹽二水合物(制劑實施例10)分別代替(-)-8-(3-甲氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5，-a]-1，3，5-三嗪-4-羥基鈉鹽二水合物，制得臨時配制用的凍干粉末。
權利要求
1.選自下式所示的旋光活性化合物4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的堿金屬鹽或堿土金屬鹽的一種鹽，
式中R是低級烷氧基。
2.下式所示的旋光活性化合物4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪或者其堿金屬鹽或堿土金屬鹽的制備方法，
式中R是低級烷氧基，該方法包括使下式所示的4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基硫代苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪
式中R是低級烷氧基，與含鹵氧化劑在旋光活性環狀化合物(用下面通式表示)存在下反應，
其中R′是低級烷基，苯基或苯基-低級烷基;并且，或者用水或金屬氫氧化物處理反應產物，或者將反應產物進行加熱處理;如果需要，再使該產物與一種堿金屬氫氧化物或堿土金屬氫氧化物反應，以制得一種鹽。
3.4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪旋光活性體或其堿金屬鹽或堿土金屬鹽的制備方法，該方法包括用只有上述三嗪化合物的一種旋光活性體組成的籽晶接種到4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并[1，5-a]-1，3，5-三嗪的外消旋混合物的溶液中，使得相對應的旋光活性體結晶出來，并且分離所生成的晶體，如果需要，再用堿金屬氫氧化物或堿土金屬氫氧化物處理上述晶體，得到一種鹽。
4.具有黃嘌呤氧化酶抑制活性的藥物組合物，包括有效量的權利要求1所述的鹽和藥物上可接受的無毒載體。
5.權利要求4所述的藥物組合物，是一種治痛風劑。
6.權利要求4或5所述的藥物組合物，是一種注射溶液。
7.治療痛風病的方法，包括給患者使用有效量的權利要求1所述的鹽。
全文摘要
本發明涉及4-羥基-8-(3-低烷氧基-4-苯基亞磺酰苯基)吡唑并(1，5-a)-1，3，5-三嗪旋光活性體的堿金屬鹽或堿土金屬鹽，生產上述旋光活性化合物或其鹽的方法，以及一種藥物組合物，如治痛風劑，其中包括有效量的上述鹽和藥物上可接受的無毒載體。
文檔編號C07D487/04GK1049664SQ90107308
公開日1991年3月6日 申請日期1990年8月24日 優先權日1989年8月25日
發明者橋本謹治, 稻井正敏 申請人:株式會社大制藥工場