專利名稱：抑制腎素的肽類、它們的制備方法以及它們在醫藥方面的應用的制作方法
技術領域：
本發明是關于新的抑制腎素的肽類、它們的制備方法以及在醫藥(尤其在影響循環的醫藥)方面的應用。
腎素主要是由腎臟產生并且分泌到血漿中的蛋白水解酶。已知在體內腎素可以使血管緊張肽原排出十肽血管緊張素Ⅰ。血管緊張素Ⅰ本身又可在肺、腎或其他組織中降解，得到八肽血管緊張素Ⅱ，血管緊張素Ⅱ對血壓具有影響。血管緊張素Ⅱ具有不同的作用，如血管收縮、Na+滯留在腎臟、腎上腺釋放醛甾酮以及增加交感神經的緊張，這些作用對升高血壓起協同作用。
在藥理學上，腎素-血管緊張素系統的作用可以通過抑制腎素或者血管緊張素轉化酶(ACE)和阻斷血管緊張素Ⅱ受體進行控制。因此，口服的ACE抑制劑的發展導致發現了新的抗高血壓藥物(參見西德專利3，628，650，Am.J.Med.77，690，1984)。
較新的途徑是在早期干預腎素-血管緊張素的級聯過程，即抑制非常特定的肽酶-腎素。
迄今已經發展出了不同類型的腎素抑制劑特定的腎素抗體、磷脂類、N-末端為蛋白質的肽類、合成的肽類作為作用物類似物以及改變的肽類。
在EP-A20，273，696、EP-A20，278，158和PCT WO86/04901中敘述了抑制腎素的肽類，其中R2定義的范圍(見本發明化合物)還包括雜環基團，但是上述專利沒有指出R2代表具體的1，3-二硫戊環或1，3-二噻烷或特定的該類物質的實際典型實例。現已發現，肽類中通常的氨基酸基團-His(組氨酸)用1，3-二硫戊環或1，3-二噻烷基團取代，那么它具有非常好的抑制腎素的作用。
本發明涉及具有通式Ⅰ的肽類及其生理上適用的鹽，
式中R1代表氫、有多至8個碳原子的烷氧基羰基、芐氧基羰基，或式R3-CO-基團，其中R3代表嗎啉代或
或者R3代表式-NR4R5基團，其中R4和R5可以相同或不同，它們可以代表氫、有多至8個碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基，或者R3代表基團
其中L代表數字零、1或2，B代表直接鍵或具有下式的氨基酸基團，
其中R6代表有多至8個碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基可以被羥基、羧基、有多至6個碳原子的烷氧基羰基或烷氧基、芐氧基有選擇地取代，或者B代表L-型、D-型脯氨酸，或者為D，L-異構體混合物，R2代表有6～10個碳原子的芳基，該芳基可以由選自以下相同或不同的取代基或由式O-CO-R7的基團有選擇地單取代至三取代，所述取代基包括鹵素、硝基、氰基、羥基、有多至8個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基、乙酰氧基或芐氧基，其中R7代表有多至8個碳原子的直鏈或支鏈烷基，W代表數字零或1，A代表-CH2-或-CH2-CH2-基團，D和E可以相同或不同，代表直接鍵或式
的氨基酸，其中R6′具有上述R6的定義，并且與R6可以是相同或不同，R6′可以是L-型、D-型或D，L-異構體混合物，X代表羥基，芐氧基或有多至8個碳原子的烷氧基或嗎啉代，或者為式-NHR8基團，
其中R8代表氫、有多至10個碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基可以有選擇地被羥基、苯基、吡啶基或式
基團取代，或者X代表下式基團，
本發明通式(Ⅰ)化合物具有幾個不對稱的碳原子。因此它們可以相互獨立地以D-或L-型存在。本發明包括旋光對映體以及異構體混合物或外消旋物。氨基酸基團最好以光學純的形式相互獨立存在，最好為L-型。
本發明通式(Ⅰ)化合物可以以其鹽的形式存在。它們可以是本發明化合物與無機酸、有機酸或堿生成的鹽。酸加成鹽最好是與鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸生成的鹽，或者是與下述羧酸生成的鹽，例如乙酸、丙酸、草酸、羥基乙酸、琥珀酸、馬來酸、羥基馬來酸、甲基馬來酸、富馬酸、己二酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、乳酸、抗壞血酸、水楊酸、2-乙酰氧基苯甲酸、煙酸、異煙酸或磺酸(如甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、萘-2-磺酸或萘-二磺酸)。
較好的通式(Ⅰ)化合物是下述化合物及其生理上適用的鹽，其中R1代表氫、有多至6個碳原子的烷氧基羰基或芐氧基羰基，或者R1代表式R3-CO-基團，
其中R3代表嗎啉代或下式基團，
或者R3代表式-NR4R5基團，其中R4和R5可以相同或不同，它們代表氫、有多至6個碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基，或者R3代表基團
其中L代表數字零、1或2，B代表直接鍵、式
的氨基酸基團，其中R6代表具有多至6個碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基可以由羥基、有多至4個碳原子的烷氧基或芐氧基取代，或者B代表L-型、D-型的脯氨酸，或者為D，L-異構體混合物，R2代表可由選自以下相同或不同的取代基有選擇地單取代至三取代的苯基或萘基，所述取代基包括氟、氯、溴、磺、羥基、硝基、氰基、有多至6個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基、乙酰氧基或芐氧基，W代表數字零或1，
A代表-CH2-或-CH2-CH2-基團，D和E可以相同或不同，它們代表直接鍵或具有下式的氨基酸基團，
其中R6′具有上述R6的定義，并且與R6可以相同或不同，可以是L-型、D-型或D，L-異構體混合物，X代表羥基、芐氧基、有多至6個碳原子的烷氧基，嗎啉代或式-NHR8基團，其中R8代表氫、有多至8個碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基可以被羥基、苯基、吡啶基或下式基團有選擇地取代，
或者X代表下式基團，
特別好的通式(Ⅰ)化合物是下述化合物及其生理上適用的鹽，其中R1代表氫，有多至4個碳原子的烷氧基羰基或芐氧基羰基、式R8-CO-基團，其中R8代表嗎啉代或下式基團，
或式-NR4R5基團，其中R4和R5可以相同或不同，它們代表氫、有多至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基、苯基或下式基團，
其中L代表數字零、1或2，B代表直接鍵、具有下式的氨基酸基團，
其中R6代表由羥基有選擇取代的有多至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基，或者R6代表L-型、D-型脯氨酸，或者為D，L-異構體混合物，R2代表可由氟、氯、磺、羥基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、叔丁氧基、芐氧基或乙酰氧基有選擇地單取代至三取代的苯基或萘基，W代表數字零或1，A代表-CH2-或-CH2-CH2-基團，D和E可以相同或不同，它們代表直接鍵、具有下式的氨基酸基團，
其中R6′具有上述R6的定義，并且與R6可以相同或不同，可以為L-型、D-型，或者為D，L-異構體混合物，X代表羥基、芐氧基、有多至4個碳原子的烷氧基、嗎啉代、或式-NHR8基團，其中R8代表氫，或者R8代表由羥基、苯基、吡啶基或式
基團有選擇取代的、有多至6個碳原子的直鏈或支鏈烷基，或者X代表下式基團，
具有成鹽基團的本發明化合物的鹽可以按本身已知的方法進行制備，例如可使含有酸性基團的本發明化合物與適當的堿進行反應，或者使含有堿性基團的本發明化合物與適當的酸進行反應，在用堿或酸進行反應的情況下，最好用上述的堿或酸。
按照本身已知的方法，例如通過分級重結晶或層析法，可以使立體異構體混合物，尤其是非對映體混合物分離成各個異構體。
按本身已知的方法，例如通過使光學對映體轉變成非對映體，可以將外消旋體進行拆解。
下式基團有3個不對稱的碳原子，因此能夠R-或S-構型相互獨立地存在，
上述基團最好以5R，3S，4S-構型、5R，3R，4S-構型，5S，3S，4S-構型或5S，3R，4S-構型存在，以5R，3S，4S-或5S，3S，4S-構型存在尤其好，也可采用異構體混合物。
本發明的通式(Ⅰ)化合物
(其中B、D、E、A、R1、R2、W和X具有上述的定義)可以按下述方法得到，〔A〕按通常的方法，使通式(Ⅱ)化合物脫去基團Z，首先將其轉變成胺，然后使該胺與通式(Ⅲ)化合物反應，或者按通常的方法在惰性溶劑中與活化的羧酸反應，得到通式(Ⅰa)化合物，
式(Ⅱ)中，D、E和X具有上述的定義，并且Z代表氨基保護基，
式(Ⅲ)中，A有上述的定義，Z′具有上述Z的定義，并且Z′可以與Z相同或不同，
式(Ⅰa)中，Z′，A、D、E和X有上述的定義，可以按通常的方法脫去保護基Z′，然后再使化合物與通式(Ⅳ)化合物縮合，如果合適，可以與活化的羧酸縮合，
式(Ⅳ)中，R1、B、W和R2有上述的定義，如果合適，再按通常的方法使相應的酯水解，或者按上述方法首先使通式(Ⅲ)化合物與通式(Ⅳ)化合物反應，然后再用通式(Ⅱ)化合物將肽鍵連上，或者〔B〕按通常的方法，首先使通式(Ⅰb)化合物水解成相應的酸，然后在輔助劑存在下與胺(式Ⅴ)縮合，或者與嗎啉(式Ⅵ)、N-芐基哌嗪(式Ⅶ)縮合，
式(Ⅰb)中，A、B、R1、R2、W、D和E有上述的定義，并且G代表有多至8個碳原子的烷氧基羰基，
其中R8有上述的定義，或者〔C〕按通常的方法，將通式(Ⅰc)化合物或者通式(Ⅰd)化合物首先水解成相應的酸，然后在惰性溶劑中，如果合適，可以在輔助劑存在下再與通式(Ⅷ)的片段進行反應，
式(Ⅰc)中，A、B、R1、W和R2有上述的定義，并且X′代表有多至6個碳原子的烷氧基或芐氧基，
式(Ⅰd)中，Z′、A和X′有上述的定義，
式(Ⅷ)中，D、E和X有上述的定義，如果是通式(Ⅰd)的化合物，則下一步是采用方法(A)中所述的步驟使其與通式(Ⅳ)或(Ⅳa)的化合物進行反應，并脫去相應的保護基Z′，
其中R1、B、W和R2有上述的定義。
按下述反應路線，通過實例詳細敘述合成方法
技術領域：
本發明化合物的制備方法還可以按其他通常所述的方法進行，例如可參見Houben-Weyls“MethodenderOrganischenChemie”(有機化學的方法)，XV/1和2;M.Bodanszky，A.Bodanszky“ThePracticeofPeptideSynthesis”，SpringerVerlag，柏林，1984;GeorgeR.Pettit“SyntheticPeptides”4卷，ElsevierScientificPublishingCompany，阿姆斯特丹-牛津-紐約，1976;E.Gross和J.Meienhofer(編輯)“ThePeptides”，1-3卷，AcademicPress，紐約-倫敦-多倫多-悉尼-舊金山，1981;M.Bodanszky“PrinciplesofPeptideSynthesis”，SpringerVerlag，柏林-海德堡-紐約-東京，1984;R.Uhmann和K.Radscheit，Offenlegangsschrift，DE3，411，244A1)，也可以參見M.Bodanszky，A.Bodanszky“ThePracticeofPeptideSynthesis”，SpringerVerlag，柏林，1984中的“SolidPhaseMethod”;G.Barany，R.B.Merrifield“SolidPhasePeptideSynthesis”(取自“ThePeptides”，2卷，P.3-254，由E.Gross，J.Meienhofer編輯，AcademicPress，紐約-倫敦-多倫多-悉尼-舊金山(1980))。
在方法〔A〕、〔B〕和〔C〕中合適的溶劑是在所選用的各種反應條件下不起變化的常用惰性溶劑。它們包括水或有溶劑，如乙醚、乙二醇-甲醚或乙二醇二甲醚、二噁烷或四氫呋喃、烴類(如苯、甲苯、二甲苯、環己烷、礦物油分餾物)、鹵代烴類(如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳)、丙酮、二甲亞砜、二甲基甲酰胺、六甲基磷酰胺、乙酸乙酯、吡啶、三乙胺或甲基吡啶。
還可以應用上述溶劑的混合物。
四氫呋喃、二氯甲烷、二甲基甲酰胺和乙酸乙酯是較好的。
方法〔A〕、〔B〕和〔C〕通常在合適的溶劑或稀釋劑的存在下進行，如果合適，可以在輔助劑或催化劑存在下，于-80℃～300℃(最好在-30℃～30℃)，在常壓下進行。也可以在加壓或減壓下進行。
在方法〔A〕、〔B〕和〔C〕中合適的被活化羧基是例如羧酸疊氮類化合物〔例如可以通過受保護的或未被保護的羧酸酰肼與亞硝酸、亞硝酸鹽或亞硝酸烷基酯(例如異戊基亞硝酸酯)反應制得〕;不飽和的酯，尤其是乙烯基酯(例如可以通過相應的酯與乙酸乙烯酯反應制得);氨基甲酰基乙烯基酯(例如通過相應的酸與異噁唑鎓試劑反應制得);烷氧基乙烯基酯〔例如可以通過相應的酸與烷氧基乙炔(最好是乙氧基乙炔)制得〕;脒基酯，例如N，N′-或N，N-二取代脒基酯〔例如可以通過相應的酸與N，N′-二取代碳二亞胺(最好是二環己基碳二亞胺、二異丙基碳二亞胺或N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽)，或與N，N-二取代氨基腈反應制得〕;芳基酯，尤其是由吸電子取代基(如4-硝基苯基、4-甲基磺酰基苯基、2，4，5-三氯苯基、2，3，4，5，6-五氯苯基)取代的苯基酯或4-苯基重氮苯基酯〔例如可以通過相應的酸與合適取代的酚反應制得，如果合適，可以在縮合劑存在下進行，縮合劑有例如N，N′-二環己基碳二亞胺、二異丙基碳二亞胺、N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、異丁基氯代甲酸酯、丙烷膦酸酐或苯并三唑基氧-三(二甲氨基)鏻六氟磷酸鹽〕;氰甲基酯(例如可以在堿存在下使相應的酸與氯乙腈反應制得);硫酯，尤其是硝基苯基硫酯〔例如可以通過相應的酸與硝基苯硫酚反應制得，如果合適，可以在縮合劑存在下進行，縮合劑有例如N，N′-二環己基碳二亞胺、二異丙基碳二亞胺、N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、氯代甲酸異丁酯、丙烷膦酸酐或苯并三唑基氧-三(二甲氨基)鏻六氟磷酸鹽〕;氨基或酰氨基酯〔例如可以通過相應的酸與N-羥基氨基或N-羥基酰氨基化合物(尤其是N-羥基琥珀酰亞胺、N-羥基哌啶、N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亞胺或1-羥基苯并三唑)反應制得，如果合適，可以在縮合劑存在下進行，縮合劑有例如N，N′-二環己基碳二亞胺、二異丙基碳二亞胺或N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、氯代甲酸異丁酯或正丙烷膦酸酐〕;酸酐，優選相應酸的對稱或不對稱的酸酐，尤其是與無機酸衍生物反應生成的酸酐(例如可以通過相應的酸與亞硫酰氯、五氧化二磷或草酰氯反應制得);或與碳酸半衍生物(例如碳酸低級烷基半酯)反應生成的酸酐〔例如可以通過相應的酸與鹵代甲酸低級烷基酯(如氯代甲酸甲酯、氯代甲酸乙酯、氯代甲酸丙酯、氯代甲酸異丙酯、氯代甲酸丁酯或氯代甲酸異丁酯)，或與1-低級烷氧基羰基-2-低級烷氧基-1，2-二氫醌(例如1-甲氧基羰基-2-乙氧基-1，2-二氫醌)反應制得〕;與二鹵代磷酸反應生成的酸酐(例如可以通過相應的酸與磷酰氯反應制得);與磷酸衍生物或亞磷酸衍生物反應生成的酸酐(例如丙烷膦酸酐)(H.Wissmann和H.J.Kleiner，Angew.Chem.Int.Ed.19，33(1980));與有機羧酸衍生物反應生成的酸酐(例如可以通過相應的酸與有選擇取代的低級烴或苯基烷烴酰鹵，尤其是苯基乙酰氯、新戊酰氯或三氟乙酰氯反應制得);與有機磺酸衍生物反應生成的酸酐(例如可以通過相應酸的堿金屬鹽與磺酰鹵，尤其是與甲磺酰氯、乙磺酰氯、苯磺酰氯或甲苯磺酰氯反應制得);對稱的酸酐〔例如可以通過縮合相應的酸制得，如果合適，可以在縮合劑(如N，N′-二環己基碳二亞胺、二異丙基碳二亞胺、N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽、氯代甲酸異丁酯、丙烷膦酸酐或苯并三唑基氧-三-(二甲氨基)鏻六氟磷酸鹽)存在下進行〕。
具體地說，活性的環酰胺為帶有2個氮原子的并且具有選擇性芳香族特征的五元雜環酰胺，最好是帶有咪唑類或吡唑類的酰胺〔例如可以通過合適的酸與N，N′-羰基二咪唑、3，5-二甲基吡唑、1，2，4-三唑或四唑反應制得，如果合適，可以在縮合劑，如N，N′-二環己基碳二亞胺、N，N′-二異丙基碳二亞胺，N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基羰二亞胺鹽酸鹽、氯代甲酸異丁酯、丙烷膦酸酐、苯并三唑基氧-三(二甲氨基)鏻六氟磷酸鹽存在下進行〕。
合適的氨基保護基是在肽化學中常用的氨基保護基。
較好的氨基保護基有芐氧基羰基、4-溴芐氧基羰基、2-氯芐氧基羰基、3-氯芐氧基羰基、二氯芐氧基羰基、3，4-二甲氧基芐氧基羰基、3，5-二甲氧基芐氧基羰基、2，4-二甲氧基芐氧基羰基、4-甲氧基芐氧基羰基、4-硝基芐氧基羰基、2-硝基芐氧基羰基、2-硝基-4，5-二甲氧基芐氧基羰基、3，4，5-三甲氧基芐氧基羰基、甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、異丙氧基羰基、丁氧基羰基、異丁氧基羰基、叔丁氧基羰基、戊氧基羰基、異戊氧基羰基、己氧基羰基、環己氧基羰基、辛氧基羰基、2-乙基己氧基羰基、2-碘己氧基羰基、2-溴乙氧基羰基、2-氯乙氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基、2，2，2-三氯-叔丁氧基羰基、二苯甲氧基羰基、二-(4-甲氧基苯基)甲氧基羰基、苯甲酰甲氧基羰基、2-三甲基甲硅烷基乙氧基羰基、2-(二-正丁基-甲基甲硅烷基)乙氧基羰基、2-三苯基甲硅烷基乙氧基羰基、2-(二甲基-叔丁基甲硅烷基)乙氧基羰基、
氧基羰基、乙烯氧基羰基、烯丙氧基羰基、苯氧基羰基、甲苯氧基羰基、2，4-二硝基苯氧基羰基、4-硝基苯氧基羰基、2，4，5-三氯苯氧基羰基、萘氧基羰基、芴基-9-甲氧基羰基、乙硫基羰基、甲硫基羰基、丁硫基羰基、叔丁硫基羰基、苯硫基羰基、芐硫基羰基、甲氨基羰基、乙氨基羰基、丙氨基羰基、異丙氨基羰基、甲酰基、乙酰基、丙酰基、新戊酰基、2-氯乙酰基、2-溴乙酰基、2-碘乙酰基、2，2，2-三氟乙酰基、2，2，2-三氯乙酰基、苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-甲氧基苯甲酰基、4-硝基芐基、4-硝基苯甲酰基、萘基羰基、苯氧基乙酰基、金剛烷基羰基、二環己基磷酰基、二苯基磷酰基、二芐基磷酰基、二-(4-硝基芐基)磷酰基、苯氧基苯基磷酰基、二乙基氧膦基、二苯基氧膦基、鄰苯二甲酰基或鄰苯二甲酰亞氨基。
特別好的氨基保護基是芐氧基羰基、3，4-二甲氧基芐氧基羰基、3，5-二甲氧基芐氧基羰基、4-甲氧基芐氧基羰基、4-硝基芐氧基羰基、2-硝基芐氧基羰基、3，4，5-三甲氧基芐氧基羰基、甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、異丙氧基羰基、丁氧基羰基、異丁氧基羰基、叔丁氧基羰基、環己氧基羰基、己氧基羰基、辛氧基羰基、2-溴乙氧基羰基、2-氯乙氧基羰基、苯氧基乙酰基、萘基羰基、金剛烷基羰基、鄰苯二甲酰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基、2，2，2-三氯叔丁氧基羰基、 氧基羰基、乙烯氧基羰基、烯丙氧基羰基、苯氧基羰基、4-硝基苯氧基羰基、芴基-9-甲氧基羰基、甲酰基、乙酰基、丙酰基、新戊酰基、2-氯乙酰基、2-溴乙酰基、2，2，2-三氟乙酰基、2，2，2-三氯乙酰基、苯甲酰基、4-氯苯甲酰基、4-溴苯甲酰基、4-硝基苯甲酰基、鄰苯二甲酰亞氨基或異戊酰基(參見Th.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley and Sons，紐約，1981)。
應用的較好的輔助劑有縮合劑，特別是如果將羧基活化為酸酐時，縮合劑可以是堿。可以優選的常用的縮合劑有例如碳二亞胺，如N，N′-二乙基、N，N′-二丙基、N，N′-二異丙基或N，N′-二環己基碳二亞胺，N-(3-二甲氨基異丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽;羰基化合物，如羰基二咪唑;1，2-噁唑鎓鹽類化合物，如2-乙基-5-苯基-1，2-噁唑鎓-3-硫酸鹽或2-叔丁基-5-甲基-噁唑鎓高氯酸鹽;酰氨基化合物，如2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2-二氫喹啉;丙烷膦酸酐;氯代甲酸異丁酯;苯并三唑基氧-三(二甲氨基)鏻六氟磷酸鹽;堿，如堿金屬碳酸鹽，例如碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉或碳酸氫鉀;有機堿，如三烷基胺，例如三乙胺、N-乙基嗎啉，N-甲基哌啶或二異丙基乙基胺。
按本身已知的方法，在酸性或堿性條件下脫去氨基保護基，或者在有機溶劑(例如醚類，如四氫呋喃或二噁烷，或醇類，如乙醇或異丙醇)中，用鈀/碳為催化劑，經催化氫化進行還原，以便脫去氨基保護基。
在上述一種溶劑中，采用常規方法用常用的堿與酯反應，進行羧酸酯的水解，用酸處理可以使開始生成的鹽轉變為游離的羧酸。
進行水解合適的堿為常用的無機堿。較好的堿是堿金屬氫氧化物或堿土金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉，氫氧化鉀或氫氧化鋇;堿金屬碳酸鹽，例如碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉;堿金屬醇鹽，例如乙醇鈉、甲醇鈉、乙醇鉀、甲醇鉀或叔丁醇鉀。應用氫氧化鈉和氫氧化鉀是特別好的。
水解一般在0℃～+100℃范圍內進行，最好為+20℃～+80℃。
一般來講，水解在常壓下進行。但是水解也可以在減壓或增壓(例如從0.5～5巴)下進行。
進行水解時，相對于1mole酯通常應用的堿量為1～3moles，最好為1～1.5moles。特別優先選用等摩爾量的反應物。
在叔丁基酯的情況下，應用酸，例如鹽酸或三氟乙酸，按常用的方法可以脫去酯，或者在芐基酯的情況下，通過氫解，同樣可以脫去酯。
通式(Ⅱ)，(Ⅳ)、(Ⅳa)和(Ⅷ)化合物本身是已知的，或者可以按肽化學常用的方法合成，其方法是使含有游離羧基的、由1個或多個氨基酸組成的片段(如果合適，以其活性的形式)與含有氨基的、由1個或多個氨基酸組成的互補的片段(如果合適，以其活性的形式)進行反應，并且用合適片段重復上述過程，直至制得所需要的通式(Ⅱ)、(Ⅳ)和(Ⅳa)的肽，然后有選擇地脫去保護基，或者用其他保護基進行取代。
在這方面，在片段的支鏈中附加的活性基團(例如氨基或羥基)可以用常用的保護基有選擇地進行保護(參見Houben-Weyl，EugenMüller，MethodenderOrganischenChemie(有機化學的方法);XV/1卷和XV/2卷，GeorgthiemeVerlag，Stuttgart，1974)。
與嗎啉(式Ⅵ)和N-芐基哌嗪(或Ⅶ)的反應，或者與胺(式Ⅴ)的反應，通常可以在上述1種惰性溶劑(最好是二氯甲烷)中，于上述1種堿(最好是三乙胺)存在下，在-40℃～0℃(最好在-20℃)，于常壓下進行。
一般來說，相對于1mole反應物可以應用1～5mole，最好為1.5～1mole的胺。
通式(Ⅲ)化合物是新化合物，
式中A和Z′具有上述的定義，并且可以按下法制得按上述方法〔A〕，在惰性溶劑中，在堿存在下(最好用氫氧化鈉的二噁烷/水的混合物，或用三乙胺的二噁烷溶液)，于0℃～+50℃(最好在室溫)，并在常壓下使通式(Ⅸ)化合物與試劑(例如(Z′-O-CO)2O、Z′-O-CO-Cl或(Z′-O-CO)-O-N-琥珀酰亞胺)反應，引入氨基保護基Z′，
式中A具有上述的定義。
通式(Ⅰa)和(Ⅰb)化合物是新化合物，可以按方法〔A〕和〔B〕所述制備。
通式(Ⅰd)化合物也是新化合物，可以按下法進行制備。使通式(Ⅲ)化合物與通式(Ⅹ)化合物進行反應，并脫去保護基Z，
式中Z′和A具有上述的定義，
式中Z和X′具有上述的定義。
通式(Ⅹ)化合物是已知化合物(參見Boger等J.Med.Chem，28，1779-1790，(1985))。
通式(Ⅸ)化合物是已知化合物，可以按已知方法(M.P.Mertes，A.A.RamseyJ.Med.Chem.12，342(1969))制備。
通式(Ⅰc)化合物也是新化合物，可以按照方法〔A〕所述，使式(Ⅲ)、(Ⅳ)和(Ⅹ)化合物按通常的肽偶合的方法進行制備。
通式(Ⅴ)、(Ⅷ)和(Ⅸ)的胺是已知的(參見G.C.Barrett，ChemistryoftheAminoAcids，Chapman和Hall，紐約，倫敦，1988，以及EP-A2，0，278，158)。
嗎啉和N-芐基哌嗪是已知的。
本發明化合物具有影響循環的作用，因此可以用于治療血壓病和心肌供血不足。
體外試驗用體外試驗測定本發明的肽類對于人血漿中內原性腎素的抑制效果，加入乙二胺四乙酸(EDTA)作為抗凝血劑制備人混合血漿，并于-20℃貯存。在37℃保溫時以內原性血管緊張肽原和腎素中形成的血管緊張素Ⅰ的比例確定血漿腎素活性(PRA)。反應溶液中含有150μl血漿、3μl6.6%8-羥基喹啉硫酸鹽溶液、3μl 10%二巰基丙醇溶液和144μl磷酸鈉緩沖液(0.2M;0.1% EDTA;PH5.6)，以及不同濃度的本發明的物質，或者不含有本發明的物質。用放射免疫測試儀(Sorin Biomedica，意大利)測量單位時間形成的血管緊張素Ⅰ。通過與本發明物質比較，計算出血漿腎素活性抑制百分比。本發明物質抑制50%血漿腎素活性的濃度范圍是10-7～10-8M。
實例號 IC50[M]Ⅳ 1.1·10-7Ⅴ 7.0·10-10Ⅻ 7.4·10-8ⅩⅢ 1.4·10-10ⅩⅥ 2.4·10-8ⅩⅦ 1.9·10-10ⅩⅩⅫ 1.5·10-8ⅩⅩⅩⅢ 2.2·10-10
按通常的方式，應用惰性的、無毒的、藥學上適用的賦形劑或溶劑，可以將本發明新的有效化合物配制成常用的劑型，如片劑、包衣片劑、小丸劑、顆粒劑、氣溶膠、糖漿劑、乳劑、懸浮劑和溶液劑。在這方面，在上述各劑型中，藥學上有效化合物的濃度應該占整個混合物重量的0.5～90%，即藥學上有效化合物的量應足以便達到所示的劑量范圍。
可按各種方式配制各種劑型，例如將有效化合物與溶劑和/或賦形劑混合，在例如用水作為稀釋劑的情況下，可以有選擇地應用乳化劑和/或分散劑，如果合適，還可以應用有機溶劑作為輔助溶劑。
提到的輔助溶劑的實例有水，無毒的有機溶劑，例如鏈烷烴(如礦礦物油餾分)，植物油(如花生油、芝麻油)，醇類(如乙醇、丙三醇);賦形劑有例如研細的天然礦物(如高嶺土、礬土、滑石、白堊)，研細的合成礦物(如高度分散的二氧化硅，硅酸鹽);糖類(如蔗糖、乳糖和葡萄糖);乳化劑，例如聚氧乙烯脂肪酸酯，聚氧乙烯脂肪醇醚(如木素亞硫酸鹽廢液、甲基纖維素、淀粉和聚乙烯吡咯烷酮);潤滑劑(例如硬脂酸鎂、滑石、硬脂酸和硫酸鈉)。
按通常的方式給藥，口服或非經胃腸道給藥較好，特別好的是經舌或靜脈給藥。在口服的情況下，除了應用上述的賦形劑之外，片劑還可以含有摻和劑，例如檸檬酸鈉、碳酸鈣和磷酸氫二鈣，以及其他各種添加劑，如淀粉(最好是馬鈴薯淀粉)、明膠等。此外，壓片中另外還需應用滑潤劑，例如硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉和滑石。在水懸浮劑的情況下，除了上述輔助劑之外還可以將各種矯味劑和著色劑加到有效化合物中。
在非經胃腸道給藥的情況下，有效化合物可以應用合適的液體賦形劑配成溶液劑。
一般說來，為了得到有效的結果，靜脈給藥時給服用者的劑量為0.001～1mg/kg體重是有益的，最好為0.01～0.5mg/kg體重，口服給藥時劑量為0.01～30mg/kg體重是有益的，最好為0.1～10mg/kg體重。
雖然上面敘述了常用的劑量，但是應用中往往必須改變上述劑量，應用的劑量主要取決于試驗動物的體重、給藥的途徑、以及動物的種類、個體對藥物的反應、制劑的特點以及給藥間隔的時間。因此，在某些情況下應用少于上述的最小劑量已是足夠的了，而在另一些情況下必須要超出上述的上限劑量。在給藥量較大的情況下，在服藥的當天將它們分成多個單次劑量服用是合適的。對于人體服用，可以考慮應用相同的劑量范圍。因此，在人體應用的情況下，也可以按以上所述的情況應用。
起始化合物實例1(式Ⅷ，用保護基BOC保護氨基官能團)N-叔丁氧基羰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺
在0℃向100g(0.432mol)N-叔丁氧基羰基-L-異亮氨酸和46.72g(0.432mol)2-吡啶甲基胺在1升二氯甲烷的溶液中加入419.13ml(3.024mol)三乙胺。將混合物攪拌10分鐘并冷卻至-20℃(干冰/丙酮)，在該溫度下加入365ml(0.561mol)50%丙烷膦酸酐的二氯甲烷(HoechstAG)溶液。混合物于-20℃再攪拌1小時，并使其在室溫下過夜。反應混合物依次用5%碳酸氫鈉溶液振搖萃取3次，每次300ml，用pH4的緩沖溶液(Merck，Art.NO.9435)再萃取3次，每次300ml，最后用飽和氯化鈉溶液萃取2次，每次300ml，最后用飽和氯化鈉溶液萃取2次，每次300ml。有機相經硫酸鈉干燥，并在真空下濃縮。粗產品用乙醚經攪拌而結晶，用抽吸法濾出，然后用二異丙醚/正己烷重結晶。
產量85.9g(理論值的61.8%)TLC ⅡRf＝0.35TLC ⅢRf＝0.49TLC ⅣRf＝0.57實例2(式Ⅷ)L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺二鹽酸鹽
向40g(0.124mol)實例1化合物中加入250ml4N氯化氫(氣體)的二噁烷溶液，在冰冷卻下將混合物攪拌。加入10ml甲醇使懸浮物溶解。待反應完成后(TLC法檢驗)，混合物置于旋轉蒸發器上濃縮。用乙醚重復共蒸后，將粗產品與乙醚一起攪拌，用抽吸法濾出，在干燥器中經氫氧化鉀干燥。
產量37.2g(理論值的100%)TLCRf＝0.30實例3(式Ⅱ)N-叔丁氧基羰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺
向13.2g(41.8mmol)N-叔丁氧基羰基-4S-氨基-3S-羥基-環己基-戊酸〔J.Boger等，J.Med.Chem.28，1779(1985)〕和13.5g(46mmol)實例2化合物中加入420ml二氯甲烷。加入31ml(230mmol)三乙胺使懸浮物溶解，并將其冷卻至-20℃(丙酮/干冰)。在該溫度和攪拌下向其中滴加39ml50%丙烷膦酸酐的二氯甲烷溶液，將混合物置于室溫下過夜。在旋轉蒸發器上除去二氯甲烷，殘余物溶于400ml乙酸乙酯中。有機相依次用200ml飽和碳酸氫鈉溶液洗滌1次，用pH7緩沖溶液(Merck，Art.NO.9439)洗滌2次，每次200ml，再用軟化水洗滌4次，每次200ml。緩沖溶液每次用100ml乙酸乙酯進行反萃取。合并的有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌2次，每次500ml，經硫酸鈉干燥，置于旋轉蒸發器上濃縮至體積約125ml。向溶液中加入125ml正己烷，并置于冰箱中(5℃)過夜。用抽吸法濾出結晶，用少許冷的乙酸乙酯/正己烷(1∶1)洗滌，在真空下干燥。
產量17.2g(理論值的79%)MS-DCIm/e519(M+H)TLC ⅢRf＝0.48TLC ⅣRf＝0.63TLC ⅤRf＝0.48HPLC ⅡRt＝6.02分鐘實例4(式Ⅱ)4S-氨基-3S-羥基-5-環己基-戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺二鹽酸鹽
在冰冷卻下向16g(30.8mmol)實例3化合物中加入160ml4N氯化氫(氣體)的二噁烷溶液，加入5ml甲醇使懸浮物溶解。待反應完成后(TLC法檢驗)，混合物置于旋轉蒸發器上濃縮。用乙醚重復共蒸后，將粗產品和乙醚一起攪拌，用抽吸法濾出，在干燥器中經氫氧化鈉干燥。
產量16.56g(理論值的95%)MS-DCIm/e419(M+H)TLC ⅢRf＝0.35
實例5(式Ⅲ)N-叔丁氧基羰基-2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕乙酸
將19.9g(0.11mol)2-氨基-2-R，S-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕乙酸〔M.P.Mertes，A.A.Ramsey，J.Med.Chem.12，342(1969)〕溶于100ml二噁烷中，加入6.6g(0.16mol)氫氧化鈉和29g(0.13mol)碳酸二叔丁酯。混合物于室溫下攪拌過夜，并置于旋轉蒸發器上除去二噁烷。混合物和200ml水一起混合，并用乙醚萃取數次。堿性水相用鹽酸調節至pH3，并用二氯甲烷萃取數次。合并的有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌，經硫酸鈉干燥并濃縮。
產量18.1g(理論值的60.6%)MS-DCIm/e280(M+H);m/e297(M+NH4)TLC ⅣRf＝0.55實例6(式Ⅱ)N-叔丁氧基羰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基-戊酰基-L-亮氨酸乙酯
按類似實例3的方法，用丙烷膦酸酐使4.8g(15.2mmol)N-叔丁氧基羰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸〔J.Boger等，J.Med.Chem.28，1779(1985)〕和3.3g(16.7mmol)L-亮氨酸乙酯鹽酸鹽偶合，制得標題化合物。
產量6.4g(理論值的92%)TLC ⅥRf＝0.85TLC ⅦRf＝0.13TLC ⅧRf＝0.55TLC ⅨRf＝0.24實例7(式Ⅱ)4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-亮氨酸乙酯鹽酸鹽
按類似實例4的方法，使6.1g(13.3mmol)實例6化合物脫去N-叔丁氧基羰基保護基，制得標題化合物。
產量5.1g(理論值的98%)(+)FAB-MSm/e357(M+H);m/e379(M+Na)TLC ⅢRf＝0.37TLC ⅣRf＝0.29TLC ⅥRf＝0.85TLC ⅦRf＝0.13TLC ⅧRf＝0.55TLC ⅨRf＝0.24實例8N-叔丁氧基羰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基-戊酰基-(2S-甲基)丁酰胺
按類似實例3的方法，用丙烷膦酸酐使4.8g(15.2mmol)N-叔丁氧基羰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸〔J.Boger等，J.Med.Chem.28，1779(1985)〕和1.9ml(16.7mmol)(2-S-甲基)丁胺偶合，制得標題化合物。
產量5.4g(理論值的92.4%)TLC ⅣRf＝0.72HPLC ⅡRt＝13.51分鐘
(+)FAB-MSm/e385(M+H);m/e391(M+Li)實例94S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(2S-甲基)-丁酰胺鹽酸鹽
按類似實例4的方法，使5.4g(14mmol)實例8化合物脫去Boc保護基，制得標題化合物。
產量5g(大于理論值的100%，含鹽酸鹽)TLC ⅢRf＝0.26(+)FAB-MSm/e285(M+H)實例10N-鄰苯二甲酰基-2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二噻烷)〕乙酸乙酯
按相應的二硫戊環化合物文獻所述方法〔M.P.Mertes，A.A.Ramsey，J.Med.Chem.12，342(1969)〕，用77.8g(0.3mol)α-鄰苯二甲酰亞氨基丙醛酸乙酯和90ml(0.9mol)1，3-二巰基丙烷為起始原料，制得標題化合物。粗產品經硅膠色譜法純化，用二氯甲烷作洗脫劑。
產量74g(理論值的70%)TLC ⅡRf＝0.89TLC ⅪRf＝0.44HPLC ⅡRt＝6.63分鐘MSm/e352(M+H);m/e204;m/e1191H-NMR(250MHz，DMSO)δ7.92(m，4H);5.25(d，1H);
4.62(d，1H);4.15(q，2H);
3.03(m，1H);2.72(m，2H);
2.57(m，1H);1.95(m，1H);
1.78(m，1H);1.14(t，3H);
實例112-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二噻烷)〕乙酸乙酯
按相應的二硫戊環化合物文獻所述方法〔M.P.Mertes，A.A.Ramsey，J.Med.Chem.12.342(1969)〕，用74g(0.21mol)實例10化合物和17ml(0.35mol)水合肼為起始原料，制得標題化合物。產量產量30g(理論值的64%)TLC ⅡRf＝0.80(+)FAB-MSm/e222(M+H);m/e228(M+Li);
m/e244(M+Na)。
1H-NMR(250MHz，DMSO)δ4.10(m，3H);3.65(d，1H);
2.80(m，4H);1.92(m，3H);
1.78(m，1H);1.18(t，3H).
實例122-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二噻烷)〕乙酸
按相應的二硫戊環化合物文獻所述方法〔M.P.Mertes，A.A.Ramsey，J.Med.Chem，12，342(1969)〕，將實例11化合物置于乙醇/KOH中煮沸，制得標題化合物。
TLC ⅢRf＝0.05TLC ⅤRf＝0.35
實例13N-叔丁氧基羰基-2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二噻烷)〕乙酸
按類似實例5的方法，將實例12化合物和碳酸二叔丁酯反應，制得標題化合物。
TLC ⅠRf＝0.19TLC ⅡRf＝0.12TLC ⅣRf＝0.55TLC ⅤRf＝0.86MS-DCIm/e294(M+H);m/e311(M+NH4);
m/e2151H-NMR(250MHz，DMSO)δ12.88(寬峰，1H);
7.0(d，1H);4.44(m，1H);
4.11(d，1H);2.90(m，2H);
2.70(m，2H);1.86(m，2H);
1.38(s，9H).
實例14N-乙酰基-2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二噻烷)〕乙酸乙酯
將20g(90.5mmol)實例11化合物溶于400ml二噁烷，加入10ml(69mmol)三乙胺，最后加入7.7ml(81.3mmol)乙酐。混合物于室溫下攪拌過夜，除去二噁烷，將殘余物和乙醚/碳酸氫鹽溶液一起研磨。分離殘余物，再次與乙醚研磨，用抽吸法濾出并干燥。
產量20.9g(理論值的87.8%)TLC ⅣRf＝0.76TLC ⅤRf＝0.89HPLC ⅡRt＝1.78分鐘MS-DCIm/e264(M+H)實例15N-乙酰基-2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕乙酸乙酯
按類似實例14的方法，用2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕乙酸乙酯〔M.P.Mertes，A.A.Ramsey，J.Med.Chem.12，342(1969)〕為起始原料，制得標題化合物。
TLC ⅠRf＝0.75TLC ⅡRf＝0.67HPLC ⅡRt＝1.73分鐘MS-DCIm/e250(M+H)實例16N-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二噻烷)〕｝乙酸乙酯
按類似實例1的方法，用丙烷膦酸酐使3g(13mmol)實例11化合物和N-乙氧基羰基-L-苯基丙氨酸偶合，制得標題化合物。
產量5g(理論值的87.4%)TLC ⅠRf＝0.87二個立體異構體HPLC ⅡRt＝4.58分鐘(+)FAB-MSm/e441(M+H);m/e463(M+Na)實例17N-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二噻烷)〕｝乙酸
按類似實例Ⅹ或實例Ⅺ的方法，將4g(9.1mmol)實例16化合物用堿水解并進行處理，制得標題化合物。
產量3.7g(理論值的97%)TLC ⅣRf＝0.63(異構體A)Rf＝0.54(異構體B)(+)FAB-MSm/e413(M+H);m/e419(M+Li)制備實例(通式Ⅰ，Ⅰa，Ⅰb，Ⅰc和Ⅰd)實例18N-叔丁氧基羰基-L-(3，5-二碘-4-甲氧基)苯基丙氨酸甲酯
將1.0g(1.87mmol)Boc-L-3，5-二碘-酪氨酸(BissendorfBiochemicals)和352μl(5.61mmol)甲基碘、0.78g(5.61mmol)碳酸鉀以及10ml二甲基甲酰胺(DMF)一起攪拌3天，同時應用干燥管以避免濕氣。蒸發后反應混合物用150ml水稀釋，用乙醚萃取3次，每次50ml。合并的有機相經硫酸鈉干燥并蒸發。
產量1.12g(大于理論值的100%，含DMF)TLC ⅣRf＝0.891H-NMR(250MHz，DMSO)δ＝7，7(s，2H);7，28(d，1H);
4，15(m，1H);3，71(s，3H);
3，62(s，3H);2，95(dd，1H);
2，74(dd，1H);1，33(s，9H).
實例19N-叔丁氧基羰基-L-(3，5-二碘-4-甲氧基)苯基丙氨酸
按類似實例Ⅹ或實例Ⅺ的方法，將0.45g(0.80mmol)實例18化合物用堿水解并進行處理，制得標題化合物。
產量0.33g(理論值的75%)TLC ⅣRf＝0.56
1H-NMR(250MHz，DMSO)δ＝12，65(寬峰，1H);7，71(s，2H);7，09(d，1H);4，08(m，1H);3，70(s，3H);2，96(dd，1H);2，69(dd，1H);
1，32(s，9H).
實例ⅠN-叔丁氧基羰基-2-R，S-氨基-2-〔2(1，3-二硫戊環)〕-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基-戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺
向4.4g(15.7mmol)實例5化合物和7.3g(15mmol)實例4化合物中加入20ml二氯甲烷和18.3ml(105mmol)二異丙基乙胺。將溶液攪拌并冷卻至-20℃(干冰/丙酮)。在該溫度下滴加11.7ml50%丙烷膦酸酐的二氯甲烷(HoechstAG)溶液，混合物在室溫下過夜。在旋轉蒸發器上除去二氯甲烷，將殘余物溶于乙酸乙酯中。有機相分別用飽和碳酸氫鈉溶液、pH4緩沖溶液(Merck，ArticleNO.9435)和飽和氯化鈉溶液振搖萃取3次，經硫酸鈉干燥、濃縮，并經高真空干燥。
產量9g(理論值的79.8%)
(+)FAB-MSm/e680(M+H);m/e686(M+Li)TLC ⅢRf＝0.59TLC ⅣRf＝0.67HPLC ⅡRt＝6.16分鐘實例Ⅱ2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基-戊酰基-L-異亮氨酸-2-(2-吡啶甲基)酰胺二鹽酸鹽
在冰冷卻下，向9g(13.24mmol)實例Ⅰ化合物中加入150ml4N鹽酸的二噁烷溶液，將混合物攪拌4小時。用旋轉蒸發器蒸餾除去二噁烷/鹽酸混合物。與乙醚一起重復共沸而得到的產品用抽吸法濾出，用乙醚洗滌，置于干燥器中經氫氧化鉀干燥。
產量8.6g(理論值的100%)(+)FAB-MSm/e580(M+H);m/e602(M+Na)TLC ⅢRf＝0.38(異構體A)Rf＝0.33(異構體B)TLC ⅣRf＝0.21實例ⅢN-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺
向5.7g(9mmol)實例Ⅱ化合物和3.1g(11.7mmol)N-叔丁基羰基-L-苯基丙氨酸中加入50ml二氯甲烷和11ml(63mmol)二異丙基乙胺。將溶液攪拌并冷卻至-20℃(干冰/丙酮)。在該溫度下滴加8.2ml(12.6mmol)50%丙烷膦酸酐的二氯甲烷(HoechstAG)溶液，混合物在室溫下放置過夜。加入100ml二氯甲烷，混合物用飽和碳酸氫鈉溶液振搖萃取3次，用pH7的緩沖溶液(Merck，ArticleNO.9439)萃取3次，用半飽和的氯化鈉溶液萃取1次。有機相經硫酸鈉干燥，濃縮，并在高真空下干燥。
產量7.2g(理論值的96%)(+)FAB-MSm/e827(M+H)TLC ⅠRf＝0.42(異構體A)Rf＝0.38(異構體B)TLC ⅢRf＝0.60(異構體A)Rf＝0.56(異構體B)HPLC ⅡRt＝14.34分鐘(異構體A)Rt＝12.59分鐘(異構體B)
實例Ⅳ和實例ⅤN-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺(實例Ⅳ)N-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺(實例Ⅴ)
＊S＝實例9(異構體A)＊R＝實例10(異構體B)將7.2g實例Ⅲ化合物經硅膠60(Merck，Art.NO.9385，0.040～0.063mm(230～400目))層析分離，用二氯甲烷/甲醇(100/0;99/1;98/2;97/3;95/5;9/1)進行分步梯度洗脫。在214nm處進行檢測，經薄層和高壓液相色譜檢查餾分。合并后在旋轉蒸發器上除去溶劑，得到3.1g實例Ⅳ化合物(異構體A＝S)，0.6g實例Ⅳ和實例Ⅴ化合物(A和B的混合餾分)，2.91g實例Ⅴ化合物(異構體B＝R)異構體A(實例Ⅳ)的分析數據TLC ⅢRf＝0.60
HPLC ⅡRt＝14.34分鐘(+)FAB-MSm/e827(M+H)異構體B(實例Ⅴ)的分析數據TLC ⅢRf＝0.56HPLC ⅡRt＝12.59分鐘(+)FAB-MSm/e827(M+H)實例ⅥN-叔丁氧基羰基-2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-亮氨酸乙酯
按類似實例Ⅰ的方法，用丙烷膦酸酐使4g(14.3mmol)實例5化合物和4.6g(13mmol)實例7化合物偶合，制得標題化合物。8.6g粗產品經400g硅膠60(Merck，ArticleNO.9385;0.040～0.063mm)分離，用二氯甲烷/甲醇(100/0;98/2;95/5)進行分步梯度洗脫。將含產品的餾分合并，濃縮。
產量5.7g(理論值的66%)TLC ⅣRf＝0.85HPLC ⅡRt＝17.91分鐘(+)FAB-MSm/e618(M+H);m/e640(M+Na)
實例Ⅶ2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-亮氨酸乙酯鹽酸鹽
按類似實例Ⅱ的方法，將5.3g(8.6mmol)實例Ⅵ化合物脫去N-叔丁氧基羰基保護基，制得標題化合物。
產量4.7g(理論值的85%)TLC ⅢRf＝0.71(異構體A)Rf＝0.64(異構體B)(+)FAB-MSm/e518(M+H);m/e540(M+Na)實例ⅧN-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-亮氨酸乙酯
用類似實例Ⅲ的方法，用丙烷膦酸酐使1.7g(6.6mmol)N-叔丁氧基羰基-L-苯基丙氨酸和2.8g(5mmol)實例Ⅶ化合物偶合，制得標題化合物。
產量3g(理論值的78%)TLC ⅠRf＝0.65(異構體A)Rf＝0.57(異構體B)HPLC ⅡRt＝35.58分鐘(異構體A)Rt＝31.64分鐘(異構體B)(+)FAB-MSm/e765(M+H);m/e787(M+Na)實例ⅨN-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-亮氨酸乙酯
按類似實例Ⅲ的方法，從1.6g(6.6mmol)N-乙氧基羰基-L-苯基丙氨酸和2.8g(5mmol)實例Ⅶ化合物制得標題化合物。
產量2.3g(理論值的62%)TLC ⅠRf＝0.60(二個異構體，A+B)HPLC ⅡRt＝18.66分鐘(異構體A)Rt＝15.31分鐘(異構體B)
(+)FAB-MSm/e737(M+H);m/e759(M+Na)實例ⅩN-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-亮氨酸
在室溫下向3g(3.9mmol)實例Ⅷ化合物的30ml二噁烷溶液中加入4.3ml1N氫氧化鈉水溶液。混合物在室溫下攪拌2天，然后用1N鹽酸水溶液調節至酸性。在旋轉蒸發器上除去有機溶劑，濾出殘余物并再懸浮在水/乙腈(95/5)中，將懸浮液進行冷凍和冷凍干燥。
產量2.9g(理論值的90%)(+)FAB-MSm/e803(M+2Na-H);
m/e819(M+Na+K-H)實例ⅪN-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-亮氨酸
按類似實例Ⅹ的方法，將2.3g(3.1mmol)實例Ⅸ化合物用堿進行水解，制得標題化合物。
產量2.5g(理論值的87%)(+)FAB-MSm/e775(M+3Na-2H);
m/e791(M+2Na+K-2H)實例Ⅻ和實例ⅩⅢN-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺(實例Ⅻ)N-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺(實例ⅩⅢ)
＊S＝實例Ⅻ(異構體A)＊R＝實例ⅩⅢ(異構體B)
由N-乙氧基羰基-L-苯基丙氨酸和實例Ⅱ化合物按類似實例Ⅲ方法合成的異構體混合物用類似于實例Ⅳ和實例Ⅴ的方法進行色譜分離，制得標題化合物。實例Ⅻ化合物首先被洗脫下來(異構體A，S-異構體)，然后實例ⅩⅢ化合物(異構體B，R-異構體)被洗脫下來。
實例Ⅻ(異構體A)的分析數據TLC ⅢRf＝0.51HPLC ⅡRt＝7.35分鐘(+)FAB-MSm/e799(M+H);m/e821(M+Na)實例ⅩⅢ(異構體B)的分析數據TLC ⅢRf＝0.47HPLC ⅡRt＝5.81分鐘(+)FAB-MSm/e799(M+H);m/e821(M+Na)實例ⅩⅣ和實例ⅩⅤN-叔丁氧基羰基-L-(1-萘基)丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺(實例ⅩⅣ)N-叔丁氧基羰基-L-(1-萘基)丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺(實例ⅩⅤ)
＊S＝實例ⅩⅣ(異構體A)＊R＝實例ⅩⅤ(異構體B)由N-叔丁氧基羰基-L-(1-萘基)丙氨酸和實例Ⅱ化合物類似按實例Ⅲ的方法合成的異構體混合物用類似于實例Ⅳ和實例Ⅴ的方法進行色譜分離，制得標題化合物。實例ⅩⅣ化合物(異構體A，S-異構體)首先被洗脫下來，然后實例ⅩⅤ化合物(異構體B，R-異構體)被洗脫下來。
實例ⅩⅣ(異構體A)的分析數據TLC ⅠRf＝0.59HPLC ⅡRt＝24.34分鐘(+)FAB-MSm/e877(M+H);m/e899(M+Na)實例ⅩⅤ(異構體B)的分析數據TLC ⅠRf＝0.55HPLC ⅡRt＝20.49分鐘(+)FAB-MSm/e877(M+N);m/e899(M+Na)實例ⅩⅥ和實例ⅩⅦN-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺(實例ⅩⅥ)N-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺(實例ⅩⅦ)
＊S＝實例ⅩⅥ(異構體A)＊R＝實例ⅩⅦ(異構體B)由N-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯基丙氨酸和實例Ⅱ化合物按類似實例Ⅲ的方法合成的異構體混合物用類似于實例Ⅳ和實例Ⅴ的方法進行色譜分離，制得標題化合物。實例ⅩⅥ化合物(異構體A，S-異構體)首先被洗脫下來，然后實例ⅩⅦ化合物(異構體B，R-異構體)被洗脫下來。
實例ⅩⅥ(異構體A)的分析數據TLC ⅠRf＝0.59HPLC ⅡRt＝11.77分鐘(+)FAB-MSm/e857(M+H);m/e879(M+Na)實例ⅩⅦ(異構體B)的分析數據TLC ⅠRf＝0.56HPLC ⅡRt＝10.49分鐘(+)FAB-MSm/e857(M+H);m/e879(M+Na)實例ⅩⅧN-叔丁氧基羰基-2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸甲酯
按類似實例Ⅰ的方法，用丙烷膦酸酐使2.2g(7.8mmol)實例5化合物和2.4g(6.5mmol)4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸甲酯鹽酸鹽〔可以通過4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸(J.Boger等，J.Med.Chem.28，1779(1985)或P.F.Schuda等，J.Org.Chem.1988，53，873～875)用重氮甲烷進行酯化而得到，并且以鹽酸鹽析出〕進行偶合，隨后經硅膠色譜純化，制得純的標題化合物。
產量3.6g(理論值的88%)
(+)FAB-MSm/e497(M+Li);m/e441;m/e397實例ⅩⅨ2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸甲酯鹽酸鹽
按類似實例Ⅱ的方法，由3.5g(7.1mmol)實例ⅩⅧ化合物脫去Boc保護基，制得標題化合物。
產量3.0g(理論值的100%)TLC ⅢRf＝0.40(異構體A)＝0.34(異構體B)(+)FAB-MSm/e391(M+H);m/e397(M+Li)實例ⅩⅩ和實例ⅩⅪN-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸甲酯(實例ⅩⅩ)N-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸甲酯(實例ⅩⅪ)
＊S＝實例ⅩⅩ(異構體A)＊R＝實例ⅩⅪ(異構體B)由1.3g(5.5mmol)N-乙氧基羰基-L-苯基丙氨酸和1.8g(4.6mmol)實例ⅩⅨ化合物按類似實例Ⅲ的方法制得的異構體混合物用類似于實例Ⅳ和實例Ⅴ的方法進行色譜分離，制得標題化合物。實例ⅩⅩ化合物(異構體A，S-異構體)首先被洗脫下來，然后實例ⅩⅪ化合物(異構體B，R-異構體)被洗脫下來。
異構體A(實例ⅩⅩ)的分析數據TLC ⅠRf＝0.90HPLC ⅡRt＝7.64分鐘(+)FAB-MSm/e616(M+Li);m/e632(M+Na)異構體B(實例ⅩⅪ)的分析數據TLC ⅠRf＝0.86HPLC ⅡRt＝6.63分鐘(+)FAB-MSm/e616(M+Li);m/e632(M+Na)實例ⅩⅫ和實例ⅩⅩⅢN-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸甲酯(實例ⅩⅫ)N-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸甲酯(實例ⅩⅫ)
＊S＝實例ⅩⅫ(異構體A)＊R＝實例ⅩⅩⅢ(異構體B)
用1.9g(6.3mmol)N-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯基丙氨酸和2.4g(5.7mmol)實例ⅩⅨ化合物作為起始原料，按實例ⅩⅩ和實例ⅩⅪ類似的方法制得標題化合物。
異構體A(實例ⅩⅫ)的分析數據TLC ⅡRf＝0.58HPLC ⅡRt＝12.33分鐘(+)FAB-MSm/e668(M+H)異構體B(實例ⅩⅩⅢ)的分析數據TLC ⅡRf＝0.56HPLC ⅡRt＝11.25分鐘(+)FAB-MSm/e668(M+H)實例ⅩⅩⅣN-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸
將460mg(0.754mmol)實例ⅩⅩ和實例ⅩⅪ化合物的混合物溶于20ml二噁烷/水(1∶1)中，加入180μl(1.4相當量)6NNaoH，混合物在室溫下攪拌過夜。用1NHCl將混合物的pH調節至3，于旋轉蒸發器上除去二噁烷。用抽吸法濾出沉淀，用少量水洗滌，置于干燥器中經KOH干燥。
產量330mg(理論值的73.5%)TLC ⅠRf＝0.34TLC ⅣRf＝0.74(+)FAB-MSm/e634(M+K);m/e672(M+2K-H)實例ⅩⅩⅤN-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸
按類似實例ⅩⅩⅣ的方法，由790mg(1.18mmol)實例ⅩⅫ和實例ⅩⅩⅢ化合物的混合物制得標題化合物。
產量560mg(理論值的73%)TLC ⅠRf＝0.18TLC ⅢRf＝0.05TLC ⅣRf＝0.82(+)FAB-MSm/e660(M+Li);m/e676(M+Na)實例ⅩⅩⅥN-叔丁氧基羰基-2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(2S-甲基)丁酰胺
按類似實例Ⅰ的方法，用丙烷膦酸酐使3.8g(12mmol)實例9化合物和4g(14.4mmol)實例5化合物偶合，制得標題化合物。
產量5.5g(理論值的82.5%)
(+)FAB-MSm/e545(M+H);m/e552(M+Li);
m/e564(M+Na)實例ⅩⅩⅦ2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(2S-甲基)-丁酰胺鹽酸鹽
按類似實例Ⅱ的方法，由5.4g(9.9mmol)實例ⅩⅩⅥ化合物脫去保護基，制得標題化合物。
產量4.2g(理論值的95%)TLC ⅢRf＝0.41(異構體A)
Rf＝0.35(異構體B)實例ⅩⅩⅧ和實例ⅩⅩⅣN-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(2S-甲基)-丁酰胺(實例ⅩⅩⅤⅢ)N-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(2S-甲基)-丁酰胺(實例ⅩⅩⅨ)
＊S＝實例ⅩⅩⅧ(異構體A)＊R＝實例ⅩⅩⅨ(異構體B)由2.1g(4.7mmol)實例ⅩⅩⅦ化合物和1.3g(5.5mmol)N-乙氧基羰基-L-苯基丙氨酸按類似實例Ⅲ的方法制備的異構體混合物用類似于實例Ⅳ和實例Ⅴ的方法進行色譜分離，制得標題化合物。實例ⅩⅩⅧ化合物(異構體A，S-異構體)首先被洗脫下來，然后實例ⅩⅩⅨ化合物(異構體B，R-異構體)被洗脫下來。另外得到實例ⅩⅩⅧ和實例ⅩⅩⅨ的混合餾分。
異構體A(實例ⅩⅩⅧ)的分析數據TLC ⅠRf＝0.68HPLC ⅡRt＝13.27分鐘
(+)FAB-MSm/e671(M+Li);m/e687(M+Na)異構體B(實例ⅩⅩⅨ)的分析數據TLC ⅠRf＝0.65HPLC ⅡRt＝11.61分鐘(+)FAB-MSm/e671(M+Li);m/e687(M+Na)實例ⅩⅩⅩ和實例ⅩⅩⅪN-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(2S-甲基)丁酰胺(實例ⅩⅩⅩ)N-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(2S-甲基)丁酰胺(實例ⅩⅩⅪ)
＊S＝實例ⅩⅩⅩ(異構體A)＊R＝實例ⅩⅩⅪ(異構體B)按類似實例ⅩⅩⅧ和實例ⅩⅩⅨ的方法，用實例ⅩⅩⅦ化合物和N-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯基丙氨酸為起始原料，制得標題化合物。也得到大量的混合餾分。
實例ⅩⅩⅩ的分析數據TLC ⅡRf＝0.38
HPLC ⅡRt＝22.80分鐘(+)FAB-MSm/e729(M+Li)實例ⅩⅩⅪ的分析數據TLC ⅡRf＝0.34HPLC ⅡRt＝22.80分鐘(+)FAB-MSm/e729(M+Li)實例ⅩⅩⅫ和實例ⅩⅩⅩⅢN-乙氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺(實例ⅩⅩⅫ)N-乙氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺(實例ⅩⅩⅩⅢ)
＊S＝實例ⅩⅩⅫ(異構體A)＊R＝實例ⅩⅩⅩⅢ(異構體B)由N-乙氧基羰基-L-(4-甲氧基)-苯基丙氨酸和實例Ⅱ化合物按類似實例Ⅲ的方法合成的異構體混合物用類似于實例Ⅳ和實例Ⅴ的方法進行色譜分離，制得標題化合物。實例ⅩⅩⅫ化合物(異構體A，S-異構體)首先被洗脫下來，然后實例ⅩⅩⅩⅢ化合物(異構體B，R-異構體)被洗脫下來。
異構體A(實例ⅩⅩⅫ)的分析數據TLC ⅢRf＝0.27TLC ⅣRf＝0.79HPLC ⅡRt＝7.62分鐘(
)FAB-MSm/e829(M+H);m/e851(M+Na)異構體B(實例ⅩⅩⅩⅢ)的分析數據TLC ⅢRf＝0.69TLC ⅣRf＝0.73HPLC ⅡRt＝6.10分鐘(+)FAB-MSm/e829(M+H);m/e851(M+Na)實例ⅩⅩⅩⅣL-苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺二鹽酸鹽
按類似實例Ⅱ的方法，由實例Ⅲ化合物或實例Ⅳ和實例Ⅴ的化合物的混合物脫去Boc保護基，制得標題化合物。
分析數據TLC ⅣRf＝0.43(異構體A，S-異構體)
Rf＝0.40(異構體B，R-異構體)實例ⅩⅩⅩⅤN-叔丁氧基羰基-L-絲氨酰-L-苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺
由N-叔丁氧基羰基-L-絲氨酸和實例ⅩⅩⅩⅣ化合物按類似實例Ⅲ的方法制得標題化合物。
分析數據TLC ⅡRf＝0.16(異構體A)Rf＝0.14(異構體B)HPLC ⅡRt＝5.04分鐘(異構體B)Rt＝5.70分鐘(異構體A)(+)FAB-MSm/e914(M+H);m/e936(M+Na)實例ⅩⅩⅩⅥN-〔3-(3-吡啶基)丙酰基〕-L-苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺
按類似于實例ⅩⅩⅩⅤ的方法，用丙烷膦酸酐使3-(3-吡啶基)丙酸和由實例Ⅴ的R-化合物用類似實例ⅩⅩⅩⅣ的方法脫去Boc保護基而得到的二鹽酸鹽偶合，制得標題化合物。
分析數據TLC ⅢRf＝0.47HPLC ⅡRt＝6.36分鐘(+)FAB-MSm/e8.60(M+H);m/e882(M+Na)實例ⅩⅩⅩⅦN-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-亮氨酸甲酯
用L-亮氨酸甲酯代替L-亮氨酸乙酯，合成實例6，7，Ⅵ和Ⅶ相應的化合物，并按類似實例Ⅷ的方法制得標題化合物。
分析數據
TLC ⅠRf＝0.85(異構體A，S-異構體)Rf＝0.78(異構體B，R-異構體)(+)FAB-MSm/e751(M+H);m/e773(M+Na);
m/e651實例ⅩⅩⅩⅧN-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-亮氨酸甲酯
用L-亮氨酸甲酯代替L-亮氨酸乙酯，合成實例6，7，Ⅵ和Ⅶ相應的起始化合物，并按類似實例ⅩⅩⅪ的方法制得標題化合物。
分析數據TLC ⅠRf＝0.81(異構體A，S-異構體)Rf＝0.73(異構體B，R-異構體)HPLC ⅡRt＝11.66分鐘(異構體B)Rt＝14.08分鐘(異構體A)(+)FAB-MSm/e723(M+H);m/e745(M+Na)實例ⅩⅩⅩⅨ和實例ⅩLN-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-亮氨酸-(3-氨甲基)芐基酰胺(實例ⅩⅩⅩⅨ)N-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-亮氨酸-(3-氨甲基)芐基酰胺(實例ⅩL)
＊S＝實例ⅩⅩⅩⅨ(異構體A)＊R＝實例ⅩL(異構體B)將0.95g(1.29mmol)實例Ⅹ化合物和2.50ml(19.35mmol)1，3-二氨甲基苯溶于30ml二氯甲烷中。混合物冷卻至-20℃，加入1.1ml50%正丙基膦酸酐的二氯甲烷(HoechstAG)溶液。混合物在室溫下攪拌過夜，加入300ml乙醚，用抽吸法濾出沉淀。殘余物再和300ml乙醚一起攪拌，并用抽吸法濾出沉淀，干燥。粗產品(1.86g)經300g硅膠60(Merck，Art.NO.9385;0.040～0.063mm(230～400目))分離，用二氯甲烷/甲醇/氨的水溶液(25%)100/0/0;99/1/0.2;98/2/0.2;97/3/0.2和95/5/0.2進行分步梯度洗脫(每次0.5L)。
實例ⅩⅩⅩⅨ化合物(異構體A，S-異構體)首先被洗脫下來，然后實例ⅩL化合物(異構體B，R-異構體)被洗脫下來。
異構體A(實例ⅩⅩⅩⅨ)的分析數據
TLC ⅢRf＝0.32(+)FAB-MSm/e855(M+H);m/e755HPLCⅡ未洗脫下來或是很寬的峰異構體B(實例ⅩL)的分析數據TLC ⅢRf＝0.29(+)FAB-MSm/e855(M+H);m/e755HPLCⅡ未洗脫下來或是很寬的峰實例ⅩLⅠ和實例ⅩLⅡN-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-亮氨酸-(3-氨甲基)-芐基酰胺(實例ⅩLⅠ)N-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-亮氨酸-(3-氨甲基)-芐基酰胺(實例ⅩLⅡ)
＊S＝實例ⅩLⅠ(異構體A)＊R＝實例ⅩLⅡ(異構體B)用實例Ⅺ化合物作為起始原料，按類似實例ⅩⅩⅩⅨ和實例ⅩL的方法制得標題化合物。
異構體A(實例ⅩLⅠ)的分析數據TLC ⅢRf＝0.26HPLC ⅡRt＝126分鐘(+)FAB-MSm/e827(M+H);m/e849(M+Na)異構體B(實例ⅩLⅡ)的分析數據TLC ⅢRf＝0.23HPLC ⅡRt＝106分鐘(+)FAB-MSm/e827(M+H);m/e849(M+Na)實例ⅩLⅢ和實例ⅩLⅣN-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨醇(實例ⅩLⅢ)N-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨醇(實例ⅩLⅣ)
＊S＝異構體A(實例ⅩLⅢ)＊R＝異構體B(實例ⅩLⅣ)按類似實例3或實例Ⅰ的方法，用正丙烷膦酸酐使實例ⅩⅩⅣ化合物和作為胺成分的L-異亮氨醇鹽酸鹽進行偶合，制得標題化合物。經硅膠色譜法(按類似實例Ⅳ和實例Ⅴ的方法)或也可經C8反相HPLC(柱，例如Merck Hibar，Cat.No.51441，Lichrosorb，RP-8(7μm)，大小，250～25)，用乙腈/水混合液作為洗脫劑，制備純的立體異構體。將經硅膠色譜法提純后含產品的餾分合并，于旋轉蒸發器上濃縮，或經反相色譜法后于旋轉蒸發器上除去乙腈，并將產品冷凍干燥。
異構體A(S-異構體，實例ⅩLⅢ)的分析數據TLC ⅠRf＝0.54TLC ⅡRf＝0.44TLC ⅣRf＝0.64HPLC ⅡRt＝7.10分鐘(+)FAB-MSm/e695(M+H);m/e717(M+Na)異構體B(R-異構體，實例ⅩLⅣ)的分析數據TLC ⅠRf＝0.54TLC ⅡRf＝0.42TLC ⅣRf＝0.64HPLC ⅡRt＝5.71分鐘(+)FAB-MSm/e695(M+H);m/e717(M+Na)實例ⅩLⅤ和實例ⅩLⅥN-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸異丙基酯(實例ⅩLⅤ)
N-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸異丙基酯(實例ⅩLⅥ)
＊S＝異構體A(實例ⅩLⅤ)＊R＝異構體B(實例ⅩLⅥ)按類似實例3或實例Ⅰ的方法，用正丙烷膦酸酐使實例ⅩⅩⅣ化合物和作為胺成分的L-異亮氨酸異丙基酯鹽酸鹽進行偶合，制得標題化合物。經色譜法(按實例ⅩLⅢ和實例ⅩLⅣ所述方法)制備純的立體異構體。
異構體A(S-異構體，實例ⅩLⅤ)的分析數據TLC ⅠRf＝0.68TLC ⅡRf＝0.57HPLC ⅡRt＝27.61分鐘(+)FAB-MSm/e751(M+H);m/e773(M+Na)異構體B(R-異構體，實例ⅩLⅥ)的分析數據TLC ⅠRf＝0.68TLC ⅡRf＝0.57HPLC ⅡRt＝22.51分鐘(+)FAB-MSm/e751(M+H);m/e773(M+Na)
實例ⅩLⅦ和實例ⅩLⅧN-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-L-纈氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺(實例ⅩLⅦ)N-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-L-纈氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺(實例ⅩLⅧ)
＊S＝異構體A(實例ⅩLⅦ)＊R＝異構體B(實例ⅩLⅧ)按類似實例3或實例Ⅰ的方法，用正丙烷膦酸酐使實例ⅩⅩⅣ化合物和作為胺成分的L-異亮氨酰-L-纈氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺二鹽酸鹽進行偶合，制得標題化合物。經色譜分離(按實例ⅩLⅢ和實例ⅩLⅣ所述方法)制備純的立體異構體。
異構體A(S-異構體，實例ⅩLⅦ)的分析數據TLC ⅠRf＝0.52TLC ⅡRf＝0.40HPLC ⅡRt＝9.48分鐘(+)FAB-MSm/e898(M+H)異構體B(R-異構體，實例ⅩLⅧ)的分析數據
TLC ⅠRf＝0.52TLC ⅡRf＝0.40HPLC ⅡRt＝8.05分鐘(+)FAB-MSm/e898(M+H)實例ⅩLⅨ和實例LN-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛S-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(2-甲基)丙酰胺(實例ⅩLⅨ)N-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(2-甲基)丙酰胺(實例L)
＊S＝異構體A(實例ⅩLⅨ)＊R＝異體B(實例L)按類似實例3或實例Ⅰ的方法，用正丙烷膦酸酐使實例ⅩⅩⅣ化合物和作為胺成分的(2-甲基)-丙胺進行偶合，制得標題化合物。經色譜分離(按實例ⅩLⅢ和實例ⅩLⅣ所述方法)制備純的立體異構體。
異構體A(S-異構體，實例ⅩLⅨ)的分析數據
TLC ⅠRf＝0.66HPLC ⅡRt＝8.84分鐘(+)FAB-MSm/e657(M+Li)異構體B(R-異構體，實例L)的分析數據TLC ⅠRf＝0.66HPLC ⅡRt＝7.74分鐘(+)FAB-MSm/e657(M+Li)實例LⅠN-乙氧基羰基-L-苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺
按類似實例3或實例Ⅰ的方法，用正丙烷膦酸酐使實例17化合物和作為胺成分的實例3化合物進行偶合，制得標題化合物。
分析數據
(+)FAB-MSm/e813(M+H);m/e835(M+Na)
實例LⅡ和實例LⅢN-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)-苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(嗎啉)酰胺(實例LⅡ)N-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(嗎啉)酰胺(實例LⅢ)
＊S＝異構體A(實例LⅡ)＊R＝異構體B(實例LⅢ)按類似實例3或實例Ⅰ的方法，用正丙烷膦酸酐使實例ⅩⅩⅤ化合物和作為胺成分的嗎啉進行偶合，制得標題化合物。經色譜分離(按實例ⅩLⅢ和實例ⅩLⅣ所述方法)制備純的立體異構體。
異構體A(S-異構體，實例LⅡ)的分析數據TLC ⅡRf＝0.39HPLC ⅡRt＝7.78分鐘(+)FAB-MSm/e723(M+H);m/e729(M+Li)m/e745(M+Na)異構體B(R-異構體，實例LⅢ)的分析數據TLC ⅡRf＝0.36
HPLC ⅡRt＝7.07分鐘(+)FAB-MSm/e723(M+H);m/e729(M+Li)m/e745(M+Na)實例LⅣ和實例LⅤN-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(4-甲基)丁酰胺(實例LⅣ)N-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(4-甲基)丁酰胺(實例LⅤ)
＊S＝異構體A(實例LⅣ)＊R＝異構體B(實例LⅤ)按類似實例3或實例Ⅰ的方法，用正丙烷膦酸酐使實例ⅩⅩⅤ化合物和作為胺成分的3-甲基丁胺進行偶合，制得標題化合物。經色譜分離(按實例ⅩLⅢ和實例ⅩLⅣ所述方法)制備純的立體異構體。
異構體A(S-異構體，實例LⅣ)的分析數據TLC ⅡRf＝0.38HPLC ⅡRt＝21.14分鐘(+)FAB-MSm/e729(M+Li)
異構體B(R-異構體，實例LⅤ)的分析數據TLC ⅡRf＝0.35HPLC ⅡRt＝21.14分鐘(+)FAB-MNm/e729(M+Li)實例LⅥ和實例LⅦN-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-正己酰胺(實例LⅥ)N-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-正己酰胺(實例LⅦ)
＊S＝異構體A(實例LⅥ)＊R＝異構體B(實例LⅦ)按類似實例3或實例Ⅰ的方法，用正丙烷膦酸酐使實例ⅩⅩⅤ化合物和作為胺成分的正己胺鹽酸鹽進行偶合，制得標題化合物。經色譜分離(按實例ⅩLⅢ和實例ⅩLⅣ所述方法)制備純的立體異構體。
異構體A(S-異構體，實例LⅥ)的分析數據TLC ⅡRf＝0.45
HPLC ⅡRt＝34.11分鐘(+)FAB-MSm/e737(M+H);m/e743(M+Li)m/e759(M+Na)異構體B(R-異構體，實例LⅦ)的分析數據TLC ⅡRf＝0.41HPLC ⅡRt＝34.11分鐘(+)FAB-MSm/e737(M+H);m/e743(M+Li)m/e759(M+Na)實例LⅧ和實例LⅨN-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-S-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(N-芐基哌嗪)酰胺(實例LⅧ)N-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-(N-芐基哌嗪)酰胺(實例LⅨ)
＊S＝異構體A(實例LⅧ)＊R＝異構體B(實例LⅨ)按類似實例3或實例Ⅰ的方法，用正丙烷膦酸酐使實例ⅩⅩⅤ化合物和作為胺成分的N-芐基哌嗪進行偶合，制得標題化合物。經色譜分離(按實例ⅩLⅢ和實例ⅩLⅣ所述方法)制備純的立體異構體。
異構體A(S-異構體，實例LⅧ)的分析數據TLC ⅡRf＝0.44HPLC ⅡRt＝31.46分鐘(+)FAB-MSm/e818(M+Li)異構體B(R-異構體，實例LⅨ)的分析數據TLC ⅡRf＝0.44HPLC ⅡRt＝29.97分鐘(+)FAB-MSm/e818(M+Li)實例LⅩ2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸甲酯
由實例ⅩⅨ得到的異構體混合物(游離堿)按實例ⅩⅩⅩⅨ和實例ⅩL所述方法經硅膠色譜分離，用二氯甲烷/甲醇/氨水溶液(25%)進行分步梯度洗脫，可分離得到標題化合物。S-異構體首先被洗脫下來，然后實例LⅩ化合物(R-異構體)被洗脫下來。
分析數據
TLC ⅢRf＝0.34(+)FAB-MSm/e391(M+H);m/e397(M+Li)實例LⅪN-叔丁氧基羰基-2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸甲酯
以三乙胺為堿，二噁烷為溶劑(類似于實例14)，按類似實例5的方法將實例LⅩ化合物與碳酸二叔丁酯反應，制得標題化合物。反應混合物用水和1N鹽酸稀釋，并用二氯甲烷萃取。分離有機相，經硫酸鈉干燥并濃縮。所得的粗產品經快速色譜進行純化(硅膠/二氯甲烷)。
分析數據TLC ⅣRf＝0.88HPLC ⅡRt＝7.06分鐘(+)FAB-MSm/e497(M+Li)實例LⅫN-叔丁氧基羰基-2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸
按類似實例Ⅹ或實例Ⅺ的方法，將2.1g(4.28mmol)實例LⅪ化合物進行堿性水解和一般處理，制得標題化合物。
產量1.95g(理論值的95.6%)TLC ⅣRf＝0.57(+)FAB-MSm/e477(M+H);m/e421;m/e377實例LⅩⅢN-叔丁氧基羰基-2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酸酯
按類似實例3或實例9的方法，用正丙烷膦酸酐使實例LⅫ化合物和作為胺成分的L-亮氨醇鹽酸鹽進行偶合，制得標題化合物。粗產品經色譜法(類似于實例Ⅳ和實例Ⅴ的方法)進行純化。
分析數據
TLC ⅢRf＝0.65HPLC ⅡRt＝6.58分鐘(+)FAB-MSm/e582(M+Li)實例LⅩⅣN-叔丁氧基羰基-L-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-亮氨醇
以實例LⅩⅢ化合物為起始原料，通過a)按類似實例4的方法脫去Boc保護基，和b)按類似實例ⅩⅥ和實例ⅩⅦ的方法，將得到的鹽酸鹽與Boc-L-(4-甲氧基)苯基丙氨酸反應，制得標題化合物。粗產品經色譜法進行純化。
分析數據TLC ⅣRf＝0.59HPLC ⅡRt＝12.85分鐘(+)FAB-MSm/e759(M+Li)實例LⅩⅤ
〔2-R-氨基-2-(1，3-二硫戊環)〕-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺
按類似實例LⅩ的方法，以實例Ⅱ化合物的R，S-混合物為起始原料，經色譜分離制得標題化合物。實例LⅩⅤ化合物的S-異構體首先被洗脫下來，然后實例LⅩⅤ化合物的R-異構體被洗脫下來。
分析數據TLC ⅢRf＝0.33(+)FAB-MSm/e580(M+H);m/e602(M+Na)實例LⅩⅥL-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-R-氨基-2-〔2-(1，3-二硫戊環)〕｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺二鹽酸鹽
按類似實例ⅩⅩⅩⅣ的方法，由實例ⅩⅦ化合物脫去Boc保護基，制得標題化合物。
分析數據TLCⅢRf＝0.38實例LⅩⅦL-(4-甲氧基)苯丙氨酰基-｛2-R，S-氨基-2-[2-(1，3-二硫戊環)]｝-乙酰基-4S-氨基-3S-羥基-5-環己基戊酰基-L-異亮氨酸-(2-吡啶甲基)酰胺二鹽酸鹽
按類似實例ⅩⅩⅩⅣ的方法，由實例ⅩⅥ和實例ⅩⅦ化合物的混合物脫去Boc保護基，制得標題化合物。
分析數據TLCⅢRf＝0.42Rf＝0.38實例LⅩⅧ～實例LⅩⅩⅥ(表1)按類似實例3或實例Ⅰ的方法，用正丙烷膦酸酐使實例ⅩⅩⅤ化合物與相應的胺化合物(類似實例LⅡ～實例LⅨ)進行偶合，制得表1的實例化合物。將立體異構體按實例ⅩLⅢ和實例ⅩLⅣ所述方法進行色譜純化和/或分離。
實例LⅩⅩⅦ～實例LⅩⅩⅪ(表2)按類似實例ⅩⅩⅩⅥ的方法，用正丙烷膦酸酐作為偶合劑，使實例LⅩⅥ和/或實例LⅩⅦ的二鹽酸鹽和相應的酸反應，制得表2的實例化合物，經色譜法達到純化。
實例LⅩⅩⅫ～實例LⅩⅩⅩⅥ(表3)按類似實例ⅩⅥ和實例ⅩⅦ的方法，用正丙烷膦酸酐使相應的Boc保護的氨基酸(BISSENDORFBIOCHEMICALSGmbH和實例LⅩⅤ化合物進行偶合，制得表3的實例化合物，并經色譜純化。
實例LⅩⅩⅩⅦ～實例ⅩC(表4)或者用正丙烷膦酸酐使相應的酸(實例LⅩⅩⅩⅥ～實例ⅨC)和實例LⅩⅤ化合物進行偶合，或者在三乙胺存在下將實例LⅩⅤ化合物與｀Z-OSu′反應(實例ⅩC)，制得表4的實例化合物。按一般處理后，所有化合物經色譜純化。
按已知的合成方法制備上述酸。制備實例LⅩⅩⅩⅦ化合物所用酸的合成已在實例19中敘述。制備實例LⅩⅩⅩⅧ和實例ⅨC化合物所用酸的合成已在另一處雜志中發表(LⅩⅩⅩⅧJ.J.Plattner等，J.Med.Chem.1988，31，2277-2288;ⅨCP.Buelmayer等，J.Med.Chem.1988，31，1839-1846)，Z-SOS′為[N-(芐氧基羰氧基)-琥珀酰亞胺]，市場上可以購到(AldrichChemicals)。
實驗部分的說明TLC系統固定相Merck廠生產的硅膠60F-254薄層板，5×10cm，薄層厚度為0.25mm，Art.No.5719。
流動相(試驗中以“TLC”表示)ⅠCH2CL2/MeOH 9∶1ⅡCH2CL2/MeOH 95∶5ⅢNH3/CH2CL2/MeOH 0.2∶9∶1ⅣHOAc/CHCL/MeOH0.2∶9∶1Ⅴ冰乙酸/正丁醇/水1∶3∶1ⅥEtOAc/正己烷2∶1ⅦEtOAc/正己烷1∶3ⅧEtOAc/正己烷1∶1ⅨCH2CL2/MeOH 98∶2ⅩCH2CL2/MeOH 7∶3ⅪCH2CL2HPLC系統HPLC Ⅰ柱Merck廠生產的Lichrosorb
RP-8，250-4，10μm，Cat.No.50318HPLC Ⅱ柱Merck廠生產的Lichrosorb
RP-18，250-4，10μm，Cat.No.50334Ⅰ和Ⅱ的洗脫劑APH7.00磷酸鹽緩沖液，Merck廠生產，Art.No.9439/水1∶50
B乙腈A/B為1/1，流速2ml/分鐘，恒溶劑成分色譜，檢測254um所用縮寫的索引1.一般分析方法TLC薄層色譜法PTLC制備薄層色譜法GC氣相色譜法HPLC高壓液相色譜法CC柱色譜法NMR核磁共振譜(質子)MS質譜法(電子碰撞電離)(+)FAB-MS快速原子轟擊質譜法，陽離子，基質間硝基芐醇MS-DCI質譜法，化學電離2.保護基Boc叔-丁氧基羰基Z芐氧基羰基DNP二硝基苯基Fmoc9-芴基甲氧基羰基OEt乙基酯OMe甲基酯EtOC乙氧基羰基應該懂得，本申請說明書和實例進行了詳細的敘述，但它們不是對本發明的限制，在本發明和精神和范圍內，熟悉本技術領域的專業人員可以提出修改。
權利要求
1.通式Ⅰ的肽類及其生理上適用的鹽，
式中R1代表氫、有多至8個碳原子的烷氧基羰基、芐氧基羰基，或式R3-CO-基團，其中R3代表嗎啉代或
或者R3代表式-NR4R5基團，其中R4和R5可以相同或不同，它們可以代表氫、有多至8個碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基，或者R3代表基團
其中L代表數字零、1或2，B代表直接鍵或具有下式的氨基酸基團，
其中R6代表有多至8個碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基可以被羥基、羧基、有多至6個碳原子的烷氧基羰基或烷氧基、芐氧基有選擇地取代，或者B代表L-型、D-型脯氨酸，或者為D，L-異構體混合物，R2代表有6-10個碳原子的芳基，該芳基可以由選自以下相同或不同的取代基或由式O-CO-R7的基團有選擇地單取代至三取代，所述取代基包括鹵素、硝基、氰基、羥基、有多至8個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基、乙酰氧基或芐氧基，其中R代表有多至8個碳原子的直鏈或支鏈烷基，W代表數字零或1，A代表-CH2-或-CH2-CH2-基團，D和E可以相同或不同，代表直接鍵或式
的氨基酸，其中R6具有上述R6的定義，并且與R6可以是相同或不同，R6可以是L-型、D-型或D，L-異構體混合物，X代表羥基，芐氧基或有多至8個碳原子的烷氧基或嗎啉代，或者為式-NHR8基團，其中R8代表氫、有多至10個碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基可以有選擇地被羥基、苯基、吡啶基或式
基團取代，或者X代表下式基團，
2.按照權利要求1所述的通式(Ⅰ)化合物及其生理上適用的鹽，其中R1代表氫、有多至8個碳原子的烷氧基羰基、芐氧基羰基，或式R3-CO-基團，其中R3代表嗎啉代或
或者R3代表式-NR4R5基團，其中R4和R5可以相同或不同，它們可以代表氫、有多至6個碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基，或者R3代表基團
式中L代表數字零、1或2，B代表直接鍵或具有下式的氨基酸基團，
式中R6代表有多至6個碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基可以被羥基、有多至4個碳原子的烷氧基、芐氧基有選擇地取代，或者B代表L-型、D-型脯氨酸，或者為D，L-異構體混合物，R2代表由選自以下相同或不同的取代基單取代至三取代的苯基或萘基，所述取代基包括氟、氯、溴、碘、羥基、硝基、氰基、有多至6個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基、乙酰氧基或芐氧基，W代表數字零或1，A代表-CH2-或-CH2-CH2-基團，D和E可以相同或不同，代表直接鍵或式
的氨基酸，其中R6′具有上述R6的定義，并且與R6可以是相同或不同，R6′可以是L-型、D-型或D，L-異構體混合物，X代表羥基，芐氧基或有多至6個碳原子的烷氧基或嗎啉代，或者為式-NHR8基團，其中R8代表氫、有多至8個碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基可以有選擇地被羥基、苯基、吡啶基或式
基團取代，或者X代表下式基團，
3.按照權利要求1所述的通式(Ⅰ)化合物及其生理上適用的鹽，式中R1代表氫、有多至4個碳原子的烷氧基羰基、芐氧基羰基，或式R3-CO-基團，其中R3代表嗎啉代或
或者R3代表式-NR4R5基團，其中R4和R5可以相同或不同，它們可以代表氫、有多至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基，或者R3代表基團
其中L代表數字零、1或2，B代表直接鍵或具有下式的氨基酸基團，
其中R6代表被羥基有選擇地取代的有多至4個碳原子的直鏈或支鏈烷基，B代表L-型、D-型脯氨酸，或者為D，L-異構體混合物，R2代表被氟、氯、磺、羥基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、叔丁氧基、芐氧基或乙酰氧基有選擇單取代至三取代的苯基或萘基，W代表數字零或1，A代表-CH2-或-CH2-CH2-基團，D和E可以相同或不同，代表直接鍵或式
的氨基酸，其中R6′具有上述R6的定義，并且與R6可以是相同或不同，R6′可以是L-型、D-型或D，L-異構體混合物，X代表羥基，有多至4個碳原子的烷氧基或嗎啉代，或者為式-NHR8基團，其中R8代表氫、被羥基、苯基、吡啶基或式
有選擇取代的有多至6個碳原子的直鏈或支鏈烷基，X代表下式基團，
4.制備通式(Ⅰ)的肽及其生理上適用鹽的方法，其中R1代表氫、有多至8個碳原子的烷氧基羰基、芐氧基羰基，或式R3-CO-基團，其中R3代表嗎啉代或
或者R3代表式-NR4R5基團，其中R4和R5可以相同或不同，它們可以代表氫、有多至8個碳原子的直鏈或支鏈烷基或苯基，或者R3代表基團
其中L代表數字零、1或2，B代表直接鍵或具有下式的氨基酸基團，
其中R6代表有多至8個碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基可以被羥基、羧基、有多至6個碳原子的烷氧基羰基或烷氧基、芐氧基有選擇地取代，或者B代表L-型、D-型脯氨酸，或者為D，L-異構體混合物，R2代表有6-10個碳原子的芳基，該芳基可以由選自以下相同或不同的取代基或由式O-CO-R7的基團有選擇地單取代至三取代，所述取代基包括鹵素、硝基、氰基、羥基、有多至8個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基、乙酰氧基或芐氧基，其中R7代表有多至8個碳原子的直鏈或支鏈烷基，W代表數字零或1，A代表-CH2-或-CH2-CH2-基團，D和E可以相同或不同，代表直接鍵或式
的氨基酸，其中R6′具有上述R6的定義，并且與R6可以是相同或不同，R6′可以是L-型、D-型或D，L-異構體混合物，X代表羥基，芐氧基或有多至8個碳原子的烷氧基或嗎啉代，或者為式-NHR8基團，其中R8代表氫、有多至10個碳原子的直鏈或支鏈烷基，該烷基可以有選擇地被羥基、苯基、吡啶基或式
基團取代，或者X代表下式基團，
其特征在于[A]按通常的方法，使通式(Ⅱ)化合物脫去基團Z，首先將其轉變成胺，然后使該胺與通式(Ⅲ)化合物反應，或者按通常的方法在惰性溶劑中與活化的羧酸反應，得到通式(Ⅰa)化合物，
式(Ⅱ)中，D、E和X具有上述的定義，并且Z代表氨基保護基，
式(Ⅲ)中，A有上述的定義，Z′具有上述Z的定義，并且Z′可以與Z相同或不同，
式(Ⅰa)中，Z′，A、D、E和X有上述的定義，可以按通常的方法脫去保護基Z′，然后再使化合物與通式(Ⅳ)化合物縮合，如果合適，可以與活化的羧酸縮合，
式(Ⅳ)中，R1、B、W和R2有上述的定義，如果合適，再按通常的方法使相應的酯水解，或者按上述方法首先使通式(Ⅲ)化合物與通式(Ⅳ)化合物反應，然后再用通式(Ⅱ)化合物將肽鍵連上，或者[B]按通常的方法，首先使通式(Ⅰb)化合物水解成相應的酸，然后在輔助劑存在下與胺(式Ⅴ)縮合，或者與嗎啉(式Ⅵ)、N-芐基哌嗪(式Ⅶ)縮合，
式(Ⅰb)中，A、B、R1、R2、W、D和E有上述的定義，并且G代表有多至8個碳原子的烷氧基羰基，
其中R8有上述的定義，或者[C]按通常的方法，將通式(Ⅰc)化合物或者通式(Ⅰd)化合物首先水解成相應的酸，然后在惰性溶劑中，如果合適，可以在輔助劑存在下再與通式(Ⅷ)的片段進行反應，
式(Ⅰc)中，A、B、R1、W和R2有上述的定義，并且X′代表有多至6個碳原子的烷氧基或芐氧基，
式(Ⅰd)中，Z′、A和X′有上述的定義，式(Ⅷ)中，D、E和X有上述的定義，如果是通式(Ⅰd)的化合物，剛下一步是采用方法(A)中所述步驟使通式(Ⅰd)化合物與通式(Ⅳ)或通式(Ⅳa)化合物反應，脫去相應的保護基Z′，
其中R1、B、W和R2有上述的定義。
5.按照權利要求1所述的用于治療疾病的通式(Ⅰ)化合物。
6.至少含有1個權利要求1所述通式(Ⅰ)化合物的藥劑。
7.制備藥劑的方法，其特征在于，將權利要求1所述的通式(Ⅰ)化合物轉變成合適的給藥劑型，如果合適，可以應用常用的輔助劑和賦形劑。
8.用于制備作用于循環系統藥劑的權利要求1所述的通式(Ⅰ)化合物。
9.通式(Ⅲ)化合物，
其中A代表-CH2-或-CH2-CH2-基團，Z′代表氨基保護基。
10.制備權利要求9所述的通式(Ⅲ)化合物的方法，其特征在于，按通常的方法，在惰性溶劑中，于堿存在下，在0℃-50℃使通式(Ⅸ)化合物與試劑反應，導入氨基保護基。
全文摘要
具有抑制腎素作用的下式肽及其生理上適用的鹽，其中R
文檔編號C07D409/06GK1047870SQ90104229
公開日1990年12月19日 申請日期1990年6月9日 優先權日1989年6月9日
發明者沃爾夫岡·賓達, 岡特·施密特, 安德烈斯·諾爾, 約翰內斯-彼得·施塔什 申請人:拜爾公司