一種從澤瀉中提取24-乙酰澤瀉醇a的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供一種從澤瀉中提取24-乙酰澤瀉醇A的方法，主要解決了現(xiàn)有技術(shù)中操作復(fù)雜，回收率低，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。該從澤瀉中提取24-乙酰澤瀉醇A的方法包括以下步驟：1]提??；2]除雜；3]沉淀溶解及萃??；4]調(diào)堿、脫色；5]重結(jié)晶。該從澤瀉中提取24-乙酰澤瀉醇A的方法操作簡(jiǎn)單，產(chǎn)品含量高，回收率高，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種從澤瀉中提取24-乙酰澤瀉醇A的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于澤瀉提取分離領(lǐng)域，涉及一種提取三萜類(lèi)化合物的方法，具體涉及一 種從澤瀉中提取24-乙酰澤瀉醇A的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 澤瀉來(lái)源于澤瀉科植物澤瀉的干燥塊莖，具有清熱、利尿的功效。用于小便不利、 水腫脹滿(mǎn)、泄瀉尿少、痰飲眩暈、熱淋澀痛、高血脂癥，是一種臨床應(yīng)用非常廣泛的中藥。澤 瀉的化學(xué)成分以三萜類(lèi)成分為主，其中萜醇類(lèi)化合物具有降血脂和保肝的作用，24-乙酰澤 瀉醇A作為主要的活性成分之一，經(jīng)分子藥理學(xué)的研宄表明，其具有很強(qiáng)的免疫調(diào)劑作用， 研宄其具有非常重要的意義。
[0003] 目前對(duì)于24-乙酰澤瀉醇A的研宄報(bào)道比較少，邱麗莉提供了一種大孔樹(shù)脂分 離純化澤瀉中4中三萜類(lèi)化合物的工藝研宄，利用大孔樹(shù)脂吸附，不同濃度的醇洗脫，得 到了 4種三萜類(lèi)化合物，其中包括24-乙酰澤瀉醇A，所得產(chǎn)品中4種成分之和的含量為 18. 68%〇
[0004] YEP等將澤瀉95%乙醇提取，減壓蒸干，得到的固體用石油醚和氯仿溶解，殘?jiān)?硅膠柱層析，石油醚-乙酸乙酯洗脫，再次硅膠柱分離，氯仿-丙酮洗脫，甲醇重結(jié)晶得到樣 品。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 為了解決【背景技術(shù)】中所存在的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供一種從澤瀉中提取24-乙酰 澤瀉醇A的方法，該從澤瀉中提取24-乙酰澤瀉醇A的方法操作簡(jiǎn)單，產(chǎn)品含量高，回收率 高，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。
[0006] 本發(fā)明的技術(shù)方案：
[0007] -種從澤瀉中提取24-乙酰澤瀉醇A的方法，包括以下步驟：
[0008] 1]提取
[0009] 將澤瀉粉碎，用濃度為0. 1% -10%的堿水潤(rùn)濕4h，采用水或有機(jī)溶劑提取2-3次， 將提取液濃縮后加入麥芽糊精或倍他環(huán)糊精，然后噴霧干燥；
[0010] 所述堿水為氫氧化鉀溶液、氫氧化鈉溶液、石灰水或氨水；所述有機(jī)溶劑為乙酸乙 酯、氯仿、甲醇、乙醇中的一種或幾種混合；所述麥芽糊精或倍他環(huán)糊精的用量為澤瀉質(zhì)量 的 3% -5% ;
[0011] 2]除雜
[0012] 在10°C -60°C條件下，向步驟1所得產(chǎn)物中加入0. 5-10倍量的溶劑或溶液進(jìn)行溶 解，過(guò)濾，得沉淀物質(zhì)；
[0013] 所述溶劑或溶液為水、甲醇溶液或乙醇溶液；
[0014] 3]沉淀溶解及萃取
[0015] 向步驟2所得的沉淀物質(zhì)中加入2-20倍量的PH為1-4的鹽酸溶液加熱溶解，待 溶解完全后過(guò)濾，然后用有機(jī)溶劑萃取1-3次，之后濃縮至原料澤瀉量的1/100-1/10 ;
[0016] 所述的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、甲醇、乙醇中的一種或幾種的混 合；
[0017] 4]調(diào)堿、脫色
[0018] 將步驟3所得的濃縮液調(diào)節(jié)PH至8,得沉淀，然后用3-10倍量濃度為50% -80% 乙醇溶解，再加入沉淀質(zhì)量的1% -20%輔料脫色0. 5h-3h，過(guò)濾濃縮，放置結(jié)晶；
[0019] 所述的輔料為活性炭、硅膠、氧化鋁中的一種或幾種的混合；
[0020] 5]重結(jié)晶
[0021] 向步驟4所得的結(jié)晶中加入0. 1-2倍量的四氫呋喃溶解，待溶解完全后，加入 0. 3-0. 8倍量的乙酸乙酯或丙酮，放置結(jié)晶，所得結(jié)晶干燥，既24-乙酰澤瀉醇A。
[0022] 上述步驟1中，將澤瀉粉碎，用濃度為0. 5%的石灰水潤(rùn)濕4h，采用乙酸乙酯提取 2-3次，將提取液濃縮后加入麥芽糊精或倍他環(huán)糊精，噴霧干燥。
[0023] 上述步驟2中，在溫度為10°C條件下，向步驟1所得產(chǎn)物中加入8倍量的濃度為 45 %的乙醇水溶液進(jìn)行溶解，過(guò)濾，得沉淀物質(zhì)。
[0024] 上述步驟3中，向步驟2所得的沉淀物質(zhì)中加入6倍量的PH為3. 5的鹽酸溶液加 熱溶解，待溶解完全后過(guò)濾，然后用體積比為9:1二氯甲烷和乙醇的混合溶劑萃取1-3次， 之后濃縮至原料澤瀉量的1/100-1/10。
[0025] 上述步驟4中，將步驟3所得的濃縮液調(diào)節(jié)PH至8,得沉淀，然后用8倍量濃度為 65%乙醇溶解，再加入沉淀的0. 5倍量的質(zhì)量比為3:5的活性炭和氧化鋁的混合輔料脫色 Ih，過(guò)濾濃縮，放置結(jié)晶。
[0026] 上述步驟5中，向步驟4所得的結(jié)晶中加入1. 6倍量的四氫呋喃溶解，待溶解完全 后，加入0. 6倍量的乙酸乙酯，放置結(jié)晶，所得結(jié)晶干燥，既24-乙酰澤瀉醇A。
[0027] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)如下：
[0028] 1、采用堿水潤(rùn)濕提取，將大部分大極性雜質(zhì)殘留在提取渣中；
[0029] 2、取液噴霧干燥后，進(jìn)一步用溶劑除雜，大大減少了雜質(zhì)量，使最終產(chǎn)物的含量大 大提高，為后續(xù)結(jié)晶除雜作了鋪墊；
[0030] 3、用酸堿除雜，活性炭和氧化鋁脫色吸附雜質(zhì)，達(dá)到替代硅膠柱或高速逆流分離， 大大降低生產(chǎn)成本；
[0031] 4、工藝簡(jiǎn)單，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0032] 實(shí)施例一
[0033] 1、提取：
[0034] IOOkg原料粉碎至40目，用200kg 0. 1 %的氫氧化鉀溶液潤(rùn)濕4h，采用濃度為 80%乙醇提取3次，每次提取2h，提取液濃縮至比重為1. 08,加入3kg麥芽糊精，噴霧干燥， 噴霧時(shí)進(jìn)風(fēng)溫度為180°C，出風(fēng)溫度為82°C，噴粉后的產(chǎn)品備用。
[0035] 2、除雜：
[0036] 將上述噴霧干燥的粉，用1倍干燥粉質(zhì)量的水提1次，提取溫度為KKTC，共煮lh， 沉淀備用，上液棄，經(jīng)測(cè)定上液的含量為0. 02 %。
[0037] 3、沉淀溶解，萃取
[0038] 將上述沉淀采用2倍沉淀質(zhì)量的pH = 1的鹽酸溶液在60°C的條件下溶解，溶解完 全后，過(guò)濾，用等倍量的乙酸乙酯萃取2次，濃縮至無(wú)乙酸乙酯備用。
[0039] 4、調(diào)堿，脫色
[0040] 將上述濃縮液，調(diào)PH = 8. 0,所得沉淀，用3倍沉淀質(zhì)量的80 %乙醇溶解，加入沉 淀質(zhì)量1%的活性炭脫色lh，濃縮至原料質(zhì)量的1/10,放置結(jié)晶。
[0041] 5、重結(jié)晶
[0042] 將上述結(jié)晶，采用0. 2倍結(jié)晶質(zhì)量的四氫呋喃溶解，待溶解完全后，加入0. 4倍結(jié) 晶質(zhì)量的丙酮，放置結(jié)晶，所得結(jié)晶干燥后，得到119g，產(chǎn)品含量為98. 9%。
[0043] 實(shí)施例二
[0044] 1、提取
[0045] IOOkg原料粉碎至20目，用300kg 1. 2%的氫氧化鈉溶液潤(rùn)濕4h，采用乙酸乙酯提 取3次，每次提取2h，提取液濃縮至比重為1. 05,加入5kg倍他環(huán)糊精，噴霧干燥，噴霧時(shí)進(jìn) 風(fēng)溫度為170 °C，出風(fēng)溫度為85 °C，噴粉后的產(chǎn)品備用。
[0046] 2、除雜
[0047] 將上述噴霧干燥的粉，用8倍干燥粉質(zhì)量的45%乙醇在KTC的條件下，溶解2次， 每次I. 5h，沉淀備用，上液棄，經(jīng)測(cè)定上液的含量為0. 001 %。
[0048] 3、沉淀溶解，萃?。?br>
[0049] 將上述沉淀采用4倍沉淀質(zhì)量的pH = 3的鹽酸溶液在60°C的條件下溶解，溶解完 全后，過(guò)濾，用等倍量的氯仿萃取2次，濃縮至無(wú)氯仿備用。
[0050] 4、調(diào)堿，脫色
[0051] 將上述濃縮液，調(diào)PH = 8. 0,所得沉淀，用4倍沉淀質(zhì)量的75 %乙醇溶解，加入沉 淀質(zhì)量20%的硅膠脫色I(xiàn). 5h，濃縮至原料質(zhì)量的1/30,放置結(jié)晶。
[0052] 5、重結(jié)晶
[0053] 將上述結(jié)晶，采用2倍結(jié)晶質(zhì)量的四氫呋喃溶解，待溶解完全后，加入0. 8倍結(jié)晶 質(zhì)量的乙酸乙酯，放置結(jié)晶，所得結(jié)晶干燥后，得到120g，產(chǎn)品含量為98. 0%。
[0054] 實(shí)施例三
[0055] 1、提取
[0056] IOOkg原料粉碎至30目，用150kg 5%的石灰溶液潤(rùn)濕4h，采用濃度為80%甲醇 提取2次，每次提取I. 5h，提取液濃縮至比重為1. 07,加入5kg麥芽糊精，噴霧干燥，噴霧時(shí) 進(jìn)風(fēng)溫度為190°C，出風(fēng)溫度為95°C，噴粉后的產(chǎn)品備用。
[0057] 2、除雜
[0058] 將上述噴霧干燥的粉，用4倍干燥粉質(zhì)量的80%乙醇在50°C的條件下，溶解2次， 每次2h，沉淀備用，上液棄，經(jīng)測(cè)定上液的含量為0. 01 %。
[0059] 3、沉淀溶解，萃?。?br>
[0060] 將上述沉淀采用20倍沉淀質(zhì)量的pH = 4的鹽酸溶液在60°C的條件下溶解，溶解 完全后，過(guò)濾，用等倍量的二氯甲烷萃取2次，濃縮至無(wú)二氯甲烷備用。
[0061] 4、調(diào)堿，脫色
[0062] 將上述濃縮液，調(diào)PH = 8. 0,所得沉淀，用5倍沉淀質(zhì)量的60 %乙醇溶解，加入沉 淀質(zhì)量5%的活性炭和氧化鋁質(zhì)量比3:5,脫色lh，濃縮至原料質(zhì)量的1/50,放置結(jié)晶。
[0063] 5、重結(jié)晶
[0064] 將上述結(jié)晶，采用0. 5倍結(jié)晶質(zhì)量的四氫呋喃溶解，待溶解完全后，加入0. 3倍結(jié) 晶質(zhì)量的丙酮，放置結(jié)晶，所得結(jié)晶干燥后，得到130g，產(chǎn)品含量為98. 1%。
[0065] 實(shí)施例四
[0066] 1、提取
[0067] IOOkg原料粉碎至60目，用180kg 0. 5%的石灰溶液潤(rùn)濕4h，采用濃度為乙酸乙醋 提取2次，每次提取I. 5h，提取液濃縮至比重為1. 07,加入4. 5kg倍他環(huán)糊精，噴霧干燥，噴 霧時(shí)進(jìn)風(fēng)溫度為170°C，出風(fēng)溫度為80°C，噴粉后的產(chǎn)品備用。
[0068] 2、除雜
[0069] 將上述噴霧干燥的粉，用0. 5倍干燥粉質(zhì)量的60%甲醇在30°C的條件下，溶解3 次，每次lh，沉淀備用，上液棄，經(jīng)測(cè)定上液的含量為0. 008%。
[0070] 3、沉淀溶解，萃取：
[0071] 將上述沉淀采用10倍沉淀質(zhì)量的pH = 2. 5的鹽酸溶液在60°C的條件下溶解，溶 解完全后，過(guò)濾，用等倍量的二氯甲烷和乙醇比例為9:1混合溶劑，萃取2次，濃縮至無(wú)乙醇 備用。
[0072] 4、調(diào)堿，脫色
[0073] 將上述濃縮液，調(diào)PH = 8. 0,所得沉淀，用10倍沉淀質(zhì)量的50%乙醇溶解，加入沉 淀質(zhì)量8%的活性炭和氧化鋁質(zhì)量比1:10,脫色3h，濃縮至原料質(zhì)量的1/100,放置結(jié)晶。
[0074] 5、重結(jié)晶
[0075] 將上述結(jié)晶，采用1倍結(jié)晶質(zhì)量的四氫呋喃溶解，待溶解完全后，加入0. 5倍結(jié)晶 質(zhì)量的乙酸乙酯，放置結(jié)晶，所得結(jié)晶干燥后，得到123g，產(chǎn)品含量為98. 7%。
[0076] 實(shí)施例五
[0077] 1、提取
[0078] IOOkg原料粉碎至50目，用150kg 10%的氫氨水溶液潤(rùn)濕4h，采用氯仿提取3次， 每次提取3h，提取液濃縮至比重為1. 06,噴霧干燥，加入3kg倍他環(huán)糊精，噴霧時(shí)進(jìn)風(fēng)溫度 為173 °C，出風(fēng)溫度為75 °C，噴粉后的產(chǎn)品備用。
[0079] 2、除雜
[0080] 將上述噴霧干燥的粉，用10倍干燥粉質(zhì)量的30%乙醇在40°C的條件下，溶解1 次，每次2. 5h，沉淀備用，上液棄，經(jīng)測(cè)定上液的含量為0. 003%。
[0081] 3、沉淀溶解，萃取：
[0082] 將上述沉淀采用6倍沉淀質(zhì)量的pH = 3. 0的鹽酸溶液在60°C的條件下溶解，溶解 完全后，過(guò)濾，用等倍量的二氯甲烷和乙醇比例為1: 1，萃取2次，濃縮至無(wú)乙醇備用。
[0083] 4、調(diào)堿，脫色
[0084] 將上述濃縮液，調(diào)PH = 8. 0,所得沉淀，用8倍沉淀質(zhì)量的65 %乙醇溶解，加入沉 淀質(zhì)量20 %的活性炭和氧化鋁的混合料，其質(zhì)量比3:7,脫色lh，濃縮至原料質(zhì)量的1/60， 放置結(jié)晶。
[0085] 5、重結(jié)晶
[0086] 將上述結(jié)晶，采用1. 5倍結(jié)晶質(zhì)量的四氫呋喃溶解，待溶解完全后，加入0. 8倍結(jié) 晶質(zhì)量的乙酸乙酯，放置結(jié)晶，所得結(jié)晶干燥后，得到112g，產(chǎn)品含量為98. 3%。
[0087] 實(shí)施例六
[0088] 1、提取
[0089] IOOkg原料粉碎至50目，用180kg 0. 5%的石灰水溶液潤(rùn)濕4h，采用乙酸乙酯提取 3次，每次提取2h，提取液濃縮至比重為1. 08,噴霧干燥，加入3. 5kg倍他環(huán)糊精，噴霧時(shí)進(jìn) 風(fēng)溫度為173 °C，出風(fēng)溫度為75 °C，噴粉后的產(chǎn)品備用。
[0090] 2、除雜
[0091] 將上述噴霧干燥的粉，用8倍干燥粉質(zhì)量的45%乙醇在KTC的條件下，溶解1次， 每次2h，沉淀備用，上液棄，經(jīng)測(cè)定上液的含量為0. 001 %。
[0092] 3、沉淀溶解，萃?。?br>
[0093] 將上述沉淀采用6倍沉淀質(zhì)量的pH = 3. 5的鹽酸溶液在60°C的條件下溶解，溶解 完全后，過(guò)濾，用等倍量的二氯甲烷和乙醇比例為9: 1，萃取2次，濃縮至無(wú)乙醇備用。
[0094] 4、調(diào)堿，脫色
[0095] 將上述濃縮液，調(diào)PH = 8. 0,所得沉淀，用8倍沉淀質(zhì)量的65 %乙醇溶解，加入沉 淀質(zhì)量5%的活性炭和氧化鋁的混合料，其質(zhì)量比3:5,脫色lh，濃縮至原料質(zhì)量的1/60,放 置結(jié)晶。
[0096] 5、重結(jié)晶
[0097] 將上述結(jié)晶，采用1. 6倍結(jié)晶質(zhì)量的四氫呋喃和乙酸乙酯混合溶劑溶解，其質(zhì)量 比為2:1，待溶解完全后，加入0.6倍結(jié)晶質(zhì)量的乙酸乙酯，放置結(jié)晶，所得結(jié)晶干燥后，得 到138g，產(chǎn)品含量為99. 3%。
[0098] 經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得出，該從澤瀉中提取分離24-乙酰澤瀉醇A的方法所得 產(chǎn)品的收率大于等于〇. 11%，產(chǎn)品中24-乙酰澤瀉醇A含量大于等于98.0%;因此，該方法 產(chǎn)品含量高，回收率高，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。
[0099] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)比，并得出如下結(jié)果：
[0100]
【權(quán)利要求】
1. 一種從澤瀉中提取24-乙酰澤瀉醇A的方法，其特征在于，包括以下步驟： 1] 提取 將澤瀉粉碎，用濃度為〇. 1 % -10 %的堿水潤(rùn)濕4h，采用水或有機(jī)溶劑提取2-3次，將提 取液濃縮后加入麥芽糊精或倍他環(huán)糊精，然后噴霧干燥； 所述堿水為氫氧化鉀溶液、氫氧化鈉溶液、石灰水或氨水；所述有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、 氯仿、甲醇、乙醇中的一種或幾種混合；所述麥芽糊精或倍他環(huán)糊精的用量為澤瀉質(zhì)量的 3% -5% ； 2] 除雜 在10°C -60°C條件下，向步驟1所得產(chǎn)物中加入0. 5-10倍量的溶劑或溶液進(jìn)行溶解， 過(guò)濾，得沉淀物質(zhì)； 所述溶劑或溶液為水、甲醇溶液或乙醇溶液； 3] 沉淀溶解及萃取 向步驟2所得的沉淀物質(zhì)中加入2-20倍量的PH為1-4的鹽酸溶液加熱溶解，待溶解 完全后過(guò)濾，然后用有機(jī)溶劑萃取1-3次，之后濃縮至原料澤瀉量的1/100-1/10 ; 所述的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、甲醇、乙醇中的一種或幾種的混合； 4] 調(diào)堿、脫色 將步驟3所得的濃縮液調(diào)節(jié)PH至8,得沉淀，然后用3-10倍量濃度為50% -80%乙醇 溶解，再加入沉淀質(zhì)量的1% -20%輔料脫色0. 5h-3h，過(guò)濾濃縮，放置結(jié)晶； 所述的輔料為活性炭、硅膠、氧化鋁中的一種或幾種的混合； 5] 重結(jié)晶 向步驟4所得的結(jié)晶中加入0. 1-2倍量的四氫呋喃溶解，待溶解完全后，加入0. 3-0. 8 倍量的乙酸乙酯或丙酮，放置結(jié)晶，所得結(jié)晶干燥，既24-乙酰澤瀉醇A。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的從澤瀉中提取24-乙酰澤瀉醇A的方法，其特征在于：所述 步驟1中，將澤瀉粉碎，用濃度為0. 5 %的石灰水潤(rùn)濕4h，采用乙酸乙酯提取2-3次，將提取 液濃縮后加入麥芽糊精或倍他環(huán)糊精，噴霧干燥。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的從澤瀉中提取24-乙酰澤瀉醇A的方法，其特征在于：所述 步驟2中，在溫度為10°C條件下，向步驟1所得產(chǎn)物中加入8倍量的濃度為45%的乙醇水 溶液進(jìn)行溶解，過(guò)濾，得沉淀物質(zhì)。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的從澤瀉中提取24-乙酰澤瀉醇A的方法，其特征在于：所述 步驟3中，向步驟2所得的沉淀物質(zhì)中加入6倍量的PH為3. 5的鹽酸溶液加熱溶解，待溶 解完全后過(guò)濾，然后用體積比為9:1二氯甲烷和乙醇的混合溶劑萃取1-3次，之后濃縮至原 料澤瀉量的1/100-1/10。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的從澤瀉中提取24-乙酰澤瀉醇A的方法，其特征在于：所述步 驟4中，將步驟3所得的濃縮液調(diào)節(jié)PH至8,得沉淀，然后用8倍量濃度為65 %乙醇溶解， 再加入沉淀的0. 5倍量的質(zhì)量比為3:5的活性炭和氧化鋁的混合輔料脫色lh，過(guò)濾濃縮，放 置結(jié)晶。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的從澤瀉中提取24-乙酰澤瀉醇A的方法，其特征在于：所述步 驟5中，向步驟4所得的結(jié)晶中加入1. 6倍量的四氫呋喃溶解，待溶解完全后，加入0. 6倍 量的乙酸乙酯，放置結(jié)晶，所得結(jié)晶干燥，既24-乙酰澤瀉醇A。
【文檔編號(hào)】C07J13/00GK104497091SQ201410816727
【公開(kāi)日】2015年4月8日 申請(qǐng)日期:2014年12月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月24日
【發(fā)明者】肖紅, 張瑜, 王曉瑩, 郭偉妮, 張利娜 申請(qǐng)人:陜西嘉禾植物化工有限責(zé)任公司